Intervju: HIV-1 proviral DNA Excision Använda en Evolved Recombinase

Biology

Your institution must subscribe to JoVE's Biology section to access this content.

Fill out the form below to receive a free trial or learn more about access:

Welcome!

Enter your email below to get your free 10 minute trial to JoVE!





We use/store this info to ensure you have proper access and that your account is secure. We may use this info to send you notifications about your account, your institutional access, and/or other related products. To learn more about our GDPR policies click here.

If you want more info regarding data storage, please contact gdpr@jove.com.

 

Summary

Aktuella HIV-1-strategier agera för att dämpa virusets livscykel, men inte på ett effektivt utrota smittan. Här visar vi att en konstruerad recombinase kan effektivt punktskatter integrerat HIV-1 proviral DNA från genomet av infekterade celler.

Cite this Article

Copy Citation | Download Citations

Hauber, J. Interview: HIV-1 Proviral DNA Excision Using an Evolved Recombinase. J. Vis. Exp. (16), e793, doi:10.3791/793 (2008).

Please note that all translations are automatically generated.

Click here for the english version. For other languages click here.

Abstract

HIV-1 integreras i den mottagande kromosom av infekterade celler och kvarstår som en provirussekvenser flankeras av lång terminal upprepas. Aktuella behandlingsstrategier riktar främst virus enzymer eller virus-cellfusion, undertrycka virusets livscykel utan att utrota smittan. Eftersom den integrerade provirussekvenser inte är måltavla för dessa metoder, nya resistenta stammar av HIV-1 kan uppkomma. Här rapporterar vi att de tekniska recombinase Tre (se Molekylär evolution av Tre recombinase, Buchholz, F., Max Planck-institutet för cellbiologi och genetik, Dresden) effektivt punktskatter integrerat HIV-1 proviral DNA från genomet av infekterade celler. Vi producerade loxLTR innehåller virus pseudotypes och infekterade celler HeLa att undersöka om Tre recombinase kan punktskatt på provirussekvenser från genomet hos HIV-1 infekterade mänskliga celler. Ett virus partikel-releasing cellinje var klonade och transfererats med en plasmid som uttrycker Tre eller med en föräldrakontroll vektor. Recombinase aktivitet och virus produktionen övervakades. Alla analyser har visat en effektiv strykning av provirussekvenser från infekterade celler utan synliga cytotoxiska effekter. Dessa resultat utgör ett bevis på principen att det är möjligt att utveckla en recombinase att särskilt inrikta en HIV-1 LTR och att denna recombinase kan excising HIV-1 provirussekvenser från genomet av HIV-1-infekterade mänskliga celler.

Innan en konstruerad recombinase kunde komma in i terapeutiska arenan dock betydande hinder måste övervinnas. Bland de mest kritiska frågorna, att vi står inför, är en effektiv och säker leverans till riktade celler och frånvaro av biverkningar.

Protocol

Vänligen se liknande videoklipp med rubriken Principer för platsspecifika Recombinase (SSR) Teknik och Molekylär evolution av Tre Recombinase för mer information om platsspecifik rekombination och teknik platsen-specificitet recombinase enzymer.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Comments

10 Comments

  1. Please this must be in clinical trials asap..  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 24, 2008 - 7:26 PM
  2. Moving faster with recombinase. To tell the truth i don' t trust completely in the results of the research, any kind of research, humans trial included. Kp-1461 has been halted almost at the end of phase ² humans trial.. and now seems that kp-1461 can not work in vitro too.. The koronispharma managers have to pay for this.. A LOT OF MONEY.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2008 - 8:56 AM
  3. how can I download a video protocol in my flash disc?  

    Reply
    Posted by: Anonymous
    September 20, 2008 - 4:36 PM
  4. Dear Anonymous, please feel free to contact us at support@jove.com and we could discuss your problem.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 6, 2008 - 6:34 PM
  5. How can I get in touch with doctor Joachim Hauber? I am HIV positive, there isn´t a single day ever since I was diagnosed this disease that I don´t feel like my life just ended. I would do anything to get cured.

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 20, 2008 - 1:37 PM
  6. Reply
    Posted by: Anonymous
    November 3, 2008 - 8:41 AM
  7. Interesting presentation on remarkable research. Worthy of further discussion

    Reply
    Posted by: Anonymous
    February 23, 2009 - 1:48 PM
  8. Have you sequenced the host cell genome in the wild type control vs. the HIV-1 infected vs Tre recombinase cells to
    definitively show where the HIV-1 genome is inserting, and that it is removed?

    Reply
    Posted by: Douglas C.
    October 21, 2009 - 9:41 AM
  9. why can't i get an update on this work?? i have looked everywhere. it has gotten so little publicity..i dont get it

    Reply
    Posted by: Anonymous
    June 25, 2010 - 1:04 AM
  10. hi
    i need full text this article
    plz
    tanx

    Reply
    Posted by: Anonymous
    October 10, 2010 - 4:23 PM

Post a Question / Comment / Request

You must be signed in to post a comment. Please or create an account.

Usage Statistics