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Articles by Andreas Rettich in JoVE
JoVE Clinical and Translational Medicine
Die Implantation von Radiotelemetrie Sender Nachgeben Daten über EKG, Herzfrequenz, Körpertemperatur und Aktivität in frei bewegliche Labormäusen
1Division of Surgical Research, University Hospital Zurich, 2Institute of Laboratory Animal Science, University of Zurich
Eine chirurgische Technik zur Implantation von kommerziell erhältlichen Telemetriesender zur kontinuierlichen Messung des biopotential verwendet (one-Kanal-EKG), Herzfrequenz, Körpertemperatur und Bewegungsaktivität in sich frei bewegenden Mäusen gezeigt. Empfehlungen und Protokolle für die post-operative Betreuung und Schmerzlinderung, Verbesserung der Einziehung, Wohlbefinden und Überlebensrate werden ebenfalls vorgestellt.
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Die Physiologischen Und Verhaltensbezogenen Auswirkungen Der Sensorischen Kontakt Zwischen Unbekannten Erwachsenen Mäusen Im Labor
Gehäuse Mäuse im Labor in Gruppen ermöglicht die sozialen Interaktion und ist der Weg den ein Labor Hausmäuse sollte. Jedoch ausgewachsene Männchen zeigen gegenseitige Aggression und sind daher häufig einzeln untergebracht. Alternativ kann ein Trenngitter, die dadurch sensorischen Kontakt durch Anblick und Geruch, sondern kämpfen und Verletzungen verhindert, Mäuse innerhalb 1 Käfig trennen. Diese Studie untersucht den Einfluss dieser Gehäuse-Methode auf verschiedene physiologische und verhaltensbezogenen Parameter. Erwachsene männliche Mäuse für 10 Tage mit sensorischen Kontakt zu einer fremden Männchen untergebracht werden deutliche Steigerungen in Herzfrequenz (HF), Körper-Kerntemperatur (BT) und Motorik (ACT) angezeigt. Darüber hinaus die Mäuse litten Nest-Gebäude Verhalten beeinträchtigt und deutlich reduzierte Körpergewicht. Im Gegensatz dazu zeigte Männer untergebracht, die in ähnlicher Weise mit weiblicher Begleitung nur eine vorübergehende Erhöhung von ACT, BT und HR. Obwohl keine klare positive Auswirkung der Gehäuse-Männer mit sensorischen Kontakt zu Frauen offensichtlich war, konnte Sie diese Studie nicht ausschließen. Auf der anderen Seite führt die Gehäuse der Reife Männer auf diese Weise zu nachhaltig nachteilige Veränderungen der Physiologie und Verhalten, so schwere Beeinträchtigung der tierische Wohlergehen impliziert.
Labormäusen Für Schwanz Biopsie Betäubt Werden Sollte?
Schwanz Biopsien werden routinemäßig, Genotyp, die genetisch veränderten Mäusen getragen. Jedoch ist die Wirkung dieses Verfahrens auf das Wohlbefinden der Tiere nur selten untersucht worden. So hat nicht noch eindeutig nachgewiesen worden, inwieweit die Mäuse von Schwanz Biopsie (TB) und für wie lange leiden. Ziel unserer Studie war, die Bewertung der Auswirkungen eines einzigen TB auf die physiologischen und Verhaltensstörungen Parameter der Erwachsenen Mäusen und zu untersuchen, ob Anästhesie kann vorteilhaft sein. Körper-Gewicht (BW)-Kurven, täglich essen/Wasserverbrauch und telemetrische Messungen der Herzfrequenz, Körper-Kerntemperatur und lokomotorische Aktivität wurden drei Tage nach TB, sowohl mit als auch ohne Narkose mit Methoxyfluran (MOF) oder Diethylether (Ether) aufgezeichnet. Darüber hinaus zeichnete sich die Auswirkungen der Narkose allein. TB ohne Anästhesie induzierte einen Anstieg der Herzfrequenz und lokomotorische Aktivität für 1 h. Kern Körpertemperatur wurde für 2 h erhöht. Im Gegensatz dazu erhöhte Herzfrequenz für bis zu 4 h nach Anästhesie. Körper-Kerntemperatur blieb veränderte für bis zu 20 h nach Exposition mit Äther und 44 h nach Exposition mit MOF. BW wurde nach MOF leicht verringert. Fälle Tod traten ausschließlich unter Äther mit einer Rate von 7 %. Unsere Ergebnisse zeigen eine kurzlebige Auswirkung einer TB, während Anästhesie mit MOF oder Äther bemerkenswerte Änderungen in den Parametern analysiert induzierte. Zusammenfassend diese Art der Anästhesie Maus Wohlbefinden nach Schwanz Biopsie nicht verbessern.
Vergleichende Analyse Und Physiologischen Auswirkungen Der Verschiedenen Gewebe Biopsie-Methoden Für Die Genotypisierung Von Labormäusen Verwendet
Genotypisierung von genetisch veränderten Mäusen und Kontrolle der Authentizität des genetischen Hintergrundes von Congenic oder Coisogenic-Stämmen durch Polymerase-Kettenreaktion (PCR) ist eine Routine, die mit verschiedenen Gewebe-Biopsien verursachen Variable Qualitäten von Trauma durchgeführt werden können. In dieser Studie wurden einige invasive und nichtinvasive Probenahmeverfahren verglichen, mit dem Schwerpunkt auf die Auswirkungen auf die Tierphysiologie. Wir verglichen Ohr Locher, Schwanz-Biopsie, Haar einstecken, Mund und Rektum Tupfer und einfachen Ruhigstellung der Tiere, scoring für die Auswirkungen auf die Herzfrequenz (HF), die Körperkerntemperatur (BT) und die motorische Aktivität von Telemetrie, während der Biopsie und für die folgenden 6 h. Darüber hinaus um die physiologische Auswirkungen mit der Praktikabilität und der Zuverlässigkeit der Genotypisierung Ergebnisse korrelieren, führten wir eine PCR-Analyse der Biopsie Proben ermittelt mithilfe der gleichen Sammlung-Verfahren von Telemetrie analysiert. Alle Methoden zur Probenahme und Zurückhaltung induziert deutliche HR und BT und einem leichten Anstieg der motorischen Aktivität 1 h, unabhängig von der Invasivität der verwendeten Methode. Genotypisierung von alle Biopsien erlaubt die korrekte Kennzeichnung der transgene Tiere, Schwanz Biopsien, Ohr-Schläge und Haarfollikel geben eindeutige Signale, die letzte Methode ist schnell, aber auch anfällig für Kontaminationen während der Probenahme von einer großen Anzahl von Tieren zu überqueren. Zurückhaltung und alle Biopsie-Methoden provozierte ähnliche physiologische Veränderungen, die angibt, dass der Umgang der Tiere von großer Bedeutung ist und dass das Stichprobenverfahren die physiologischen Parameter nicht stark beeinflußt.
Bewertung Der Post-laparotomy Schmerz in Labormäusen Durch Telemetrische Aufzeichnung Von Herzfrequenz Und Herzfrequenz-Variabilität
Schmerzen von leichter bis mittelschwerer Grad ist schwierig, in Labormäusen zu erkennen, weil Mäuse Beutetiere, die versuchen sind, die Raubtiere oder Man durch Ausblenden von Anzeichen von Schwäche, Verletzungen oder Schmerzen zu entgehen. In dieser Studie untersuchten wir den Einsatz von Telemetrie Indikatoren für leichte bis mittelschwere post-laparotomy Schmerzen zu identifizieren.
Optimierte Operationstechniken Und Postoperative Pflege Verbessern Überlebensraten Und Genaue Telemetrische Aufzeichnung Bei Der Ausübung Von Mäusen Zu Ermöglichen
Die Labor-Maus wird üblicherweise als anspruchsvolle Modell in der biomedizinischen Forschung. Jedoch Experimente erfordern größere Operation häufig zu schweren postoperativen Komplikationen und Tod führen, insbesondere, wenn gentechnisch veränderte Mäuse mit anatomische und physiologische Anomalien umfangreiche Interventionen wie Sender-Implantation unterziehen. Telemetrische Sendern werden verwendet, um kardiovaskuläre Physiologie und Krankheiten zu studieren. Telemetrie liefert zuverlässige und genaue Messung des Blutdrucks in der free-roaming, unanaesthetized und unbetontes Maus, aber Datenaufzeichnung wird wesentlich erschwert, wenn Messungen in einer Aufspannung Maus vorgenommen werden. Wir sollen so optimieren Sender Einnistung zur Verbesserung der telemetrischen Signal Aufnahme bei der Ausübung von Mäusen als auch über eine postoperative Pflege-Regime zu etablieren, die Genesung und das Überleben der Mäuse nach großen Operationen im allgemeinen fördert.
Optimale Hämatokrit Für Maximale Ausübung Leistung Bei Akuten Und Chronischen Erythropoetin-behandelten Mäusen
Erythropoetin (Epo) Behandlung erhöht Hämatokrit (Htc) und damit die arterielle O(2) Inhalt. Dies verbessert wiederum die Übung Leistung. Jedoch weil erhöhte Blutviskosität, verbunden mit vermehrter Htc kardiale Leistung einschränken kann, wurde vorgeschlagen, das höchste erreichbare Htc nicht unbedingt die höchste erreichbare Übung Kapazität zugeordnet werden kann. Zum Testen der vorgeschlagenen Hypothesis, dass eine optimale Htc bei akuten und chronischen Epo-behandelten Mäusen vorhanden--d.h. ist, Htc, die den größten O(2) Flux während maximal Übung--Htc Ebenen von Wildtyp Mäusen erleichtert wurden akut durch die Verabreichung von Roman Erythropoese-stimulierende Proteins (NESP; WtNESP) erhoben. Darüber hinaus wurde in der transgenen Maus Linie tg6, die Htc-Werte von bis zu 0,9 wegen konstitutive Überexpression von menschlichen Epo erreicht, das Htc allmählich durch Anwendung der Hämolyse-induzierende zusammengesetzte Phenylhydrazin (PHZ; tg6PHZ) verringert. Maximale Herz-Kreislauf-Leistung wurde gemessen, mit Telemetrie in alle Ausübung Mäuse. Höchste maximale O(2)-Aufnahme (VO(2max)) und maximale Dauer bis zur Erschöpfung bei submaximal Übung, die Intensitäten bzw. bei Htc-Werten von 0,58 und 0,57 für WtNESP, und 0,68 und 0,66 für tg6PHZ, erreicht wurden. Bewerten Sie Druck-Produkt und somit auch maximale Arbeitskapazität des Herzens, mit erhöhten Htc-Werte erhöht. Blutviskosität korreliert mit VO(2max). Neben der Bestätigung der Hypothese Htc schließen wir die tg6PHZ unterschiedlich Htc-Werte als WtNESP wegen der höheren optimale Htc von tg6PHZ gegenüber WtNESP besser angepasst. Beachten ist spielt die Blutviskosität eine entscheidende Rolle bei der Übung Kapazität Begrenzung.
Isofluran Und Sevofluran Bieten Ebenso Wirksame Anästhesie in Labormäusen
Isofluran ist derzeit die häufigste volatile Anästhetikum in Labor-Mäuse, verwendet, während in der Humanmedizin die moderneren Sevofluran oft für Einatmen Anästhesie verwendet wird. Ziel dieser Studie waren charakterisieren und die klinischen Eigenschaften der beiden Anästhetika für Einatmen Anästhesie bei Mäusen zu vergleichen. In einem Ansatz Spiegelung Routine Laborbedingungen (Spontane Atmung, Gasversorgung über Nase Maske, Verhinderung von Hypothermie durch eine wärmende Matte) wurde ein 50 min-Anästhesie durchgeführt. Anästhetika wurden in Sauerstoff als Trägergas bei standardisierten Dosierungen von 1,5 minimale alveoläre Konzentration verabreicht, die war 2,8 % für Isofluran und Sevofluran 4,9 %. Sowohl die Induktion als auch die Verwertung von Anästhesie verlief schnell, innerhalb von 1-2 min. Während der Anästhesie alle reflex Tests negativ war und keine ernsthafte Beeinträchtigung der lebenswichtigen Funktionen gefunden wurde; alle Tiere überlebten. Die bekannteste Nebenwirkung während der Anästhesie war Atemdepression mit Hyperkapnie, Azidose und eine deutliche Abnahme der Atmung-Tarif. In Narkose Herzfrequenz und Körperkerntemperatur blieb im normalen Bereich, aber stieg signifikant für 12 h nach Anästhesie. Lokomotorische Aktivität, tägliche Nahrung und Wasser-Verbrauch und Körper Gewicht Verlauf zeigte keine Auffälligkeiten nach Anästhesie. Kein signifikanter Unterschied ergab sich zwischen den beiden Anästhetika. Isofluran und Sevofluran bereitgestellten abschließend einen ebenso zuverlässigen Anästhesie in Labormäusen.
Wühlen Verhalten, Als Indikator Für Post-laparotomy Schmerzen in Den Mäusen
Erkennung von dauerhafte Schmerzen leichter bis mittelschwerer Grad in Labormäusen ist schwierig, da Mäuse nicht eindeutige Symptome von Schmerzen oder leiden, mit standard-Methoden der kurzfristigen beobachtende oder klinische Überwachung zeigen. Diese Studie untersucht die mögliche Verwendung von grabende Leistung - eine spontane und hoch motivierte Verhalten - als Maß für die postoperative Schmerzen in Labormäusen. Der Einfluss der kleine Chirurgie auf grabende wurde bei Erwachsenen C57BL/6J Mäusen beiderlei Geschlechts in einem modifizierten Nagetier grabende Test (Verschiebung von Lebensmittel Pellets aus einem Pellet-gefüllten Rohr) innerhalb des Tieres Käfigs untersucht. Fast alle (98 %) gesunde Mäuse hinunterstürzt (mittlere Latenz 1.3H, SEM 0,5 h). Nach der Operation ohne Schmerzbehandlung, Wartezeit der grabende wurde erheblich verlängert (meine Δ Wartezeit 10 h). Schmerzstillende Behandlung mit dem Antirheumatikum Carprofen (5 mg/kg Körpergewicht) verringerte Latenz der grabende nach der Operation (mittlere Δ Latenz 5,5 h) auf die Ebene gefunden in Mäuse, die betäubt worden war (mittlere Δ Latenz 5.4 h) oder Anästhesie und Analgesie (mittlere Δ Latenz 4,6 h) erhalten hatte. Analgesie während der Operation war verbunden mit einer deutlich früheren Beginn der grabende verglichen mit Chirurgie ohne Schmerzbehandlung. Eine deutliche Abstufung in grabende Leistung wurde von der ungestörten präoperative Status bis hin zu der mittleren Ebene folgende Anästhesie/Analgesie und Chirurgie mit Analgesie, die ausgeprägte Verschleppung des Wartezeit zum Graben nach der Operation ohne Schmerzlinderung gefunden. Abschließend kann die postoperative Beeinträchtigung des Allgemeinzustandes, vermutlich überwiegend auf Schmerzen, bequem in Labormäusen auf der Grundlage der sich Test bewertet werden.
Multiparameter Telemetrie Als Ein Sensibler Screening-Verfahren, Impfstoff-Reactogenicity in Den Mäusen Zu Erkennen
Raffinierte Impfstoffe sind Adjuvantien dringend notwendig, Immunisierung gegen globale infektiöse Herausforderungen wie HIV, Hepatitis C, Tuberkulose und Malaria voranzutreiben. Großangelegte Screening Bemühungen laufen Hilfsstoffen mit verbesserter Wirksamkeit Profile zu identifizieren. Reactogenicity stellt oft eine große Hürde für die klinische Verwendung neuer Stoffe dar. Dennoch, ist unabhängig von seiner Bedeutung dieser Parameter schwierig, Bildschirm, aufgrund eines Mangels an sensiblen kleiner Tiermodelle mit einer Kapazität für hohen Durchsatz testen geblieben. Hier berichten wir, dass kontinuierliche telemetrischen Messung der Herzfrequenz, Herzfrequenz-Variabilität, Körper-Kerntemperatur und lokomotorische Aktivität in Labormäusen leicht systemische Nebenwirkungen der Impfung, entlarvt die unentdeckt von konventionellen beobachtende Beurteilung und klinische scoring ging. Schon geringfügige Abweichungen in Homöostase wurden bereitwillig erkannt, von der sympathische Aktivierung über vorübergehende pyrogene Effekte bis hin zu verminderte körperliche Aktivität und Apathie. Ergebnisse in Echtzeit kombiniert mit dem Potenzial der Skalierbarkeit und teilweise Automatisierung im industriellen Kontext vorschlagen multiparameter Telemetrie in Labormäusen als Erstlinien-Bildschirm für Impfstoff-Reactogenicity. Dies kann im allgemeinen Impfstoff Entdeckung beschleunigen und kann weiter den Erfolg der Impfstoffe gegen Infektionskrankheiten und Krebs.
