Cellule Intere Registrazioni E Fotolisi Di Composti in Gabbia in Neuroni Sensoriali Olfattivi Isolati Dal Mouse

Chemical Senses. Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14627539

Manipolazione genica e tecniche biologiche molecolari per lo studio dell'olfatto sono ben sviluppate nei topi, mentre la proprietà elettrofisiologiche dei neuroni sensoriali olfattivi del mouse sono stati meno ampiamente indagati. Abbiamo utilizzato la tecnica del morsetto tensione a cellule intere in mouse isolato i neuroni sensoriali olfattivi per indagare sia la tensione-gated e correnti di trasduzione. Correnti tensione-gated erano composti da correnti inward transitorie seguite da correnti verso l'esterno con componenti transitori e sostenuti. Dei neuroni sensoriali olfattivi testati, 12% ha risposto al cineolo odorant con una corrente verso l'interno. Composti in gabbia sono state introdotte nel citoplasma attraverso la pipetta di patch e flash fotolisi di nucleotidi ciclici in gabbia attivato un perfezionamento attivo corrente nel 94% delle cellule. Quando il flash è stato localizzato presso le ciglia, la latenza di risposta, il tempo di risalita e la durata sono stati più brevi rispetto a quando il flash illumina il soma. L'ampiezza della risposta fotolisi dipendeva dall'intensità della luce e il rapporto è stato montato dall'equazione di Hill, con un coefficiente di Hill di 3.2. Questi risultati dimostrano che è possibile ottenere registrazioni nella configurazione di cellule intere da neuroni sensoriali olfattivi isolati dal mouse e che le correnti tensione-gated e trasduzione proprietà sono in gran parte simili a quelli degli anfibi.

Olfatto: Dalle Molecole Odorant Alla Corteccia Olfattiva

News in Physiological Sciences : an International Journal of Physiology Produced Jointly by the International Union of Physiological Sciences and the American Physiological Society. Jun, 2004  |  Pubmed ID: 15143202

Come odore? Nostra conoscenza di come sono percepiti informazioni odore dall'ambiente ha avanzato notevolmente dalla scoperta di circa 1.000 geni per recettori odorant nel genoma dei mammiferi. Dalla combinazione di genetico-molecolare, una migliore comprensione di come noi odore sta emergendo elettrofisiologica e studi di imaging ottico.

Proprietà Elettrofisiologiche E Modellazione Dei Neuroni Sensoriali Vomeronasal Murino in Preparazioni Fetta Acuta

Chemical Senses. Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16547196

Il sistema vomeronasale è coinvolto nella rilevazione di feromoni in molti mammiferi. I neuroni sensoriali vomeronasal codificano l'informazione comportamentale pertinenti in potenziali d'azione che vengono trasmessi direttamente al bulbo olfattivo accessorio. Abbiamo sviluppato un modello di attività elettrica dei neuroni sensoriali vomeronasal basale di mouse, che imita le proprietà correnti tensione-gated sia il comportamento di cottura di questi neuroni nel loro stato nativo vicino, utilizzando un numero minimo di parametri. Dati sono stati ottenuti da registrazioni con il morsetto tensione a cellule intere o tecniche di corrente-clamp da mouse vomeronasal basale sensoriale neuroni in fetta acuta preparati. Il potenziale di riposo variavano da -50 a-70 mV e corrente iniezioni di meno di 2-10 pA indotta da infornamento tonico nella maggior parte dei neuroni. La frequenza di infornamento sperimentalmente determinato come una funzione di iniettata corrente è stato ben descritto da un'equazione di Michaelis-Menten ed è stata riprodotta esattamente dal modello, che potrebbe essere utilizzato in combinazione con i modelli futuri che includerà dettagli della cascata di trasduzione del mouse vomeronasal.

Canali Cyclic Nucleotide-gated Dello Ione Nella Trasduzione Sensoriale

FEBS Letters. May, 2006  |  Pubmed ID: 16631748

Cyclic nucleotide-gated (CNG) canali attivati direttamente dall'associazione dei nucleotidi ciclici, sono stati scoperti in coni retinici della retina, coni e neuroni sensoriali olfattivi. Nei sistemi visivi e olfattivi, canali CNG mediano trasduzione sensoriale conducendo correnti cationiche trasportate principalmente dagli ioni sodio e calcio. Nella trasduzione olfattiva, calcio in combinazione con calmodulina esercita un feedback negativo su canali CNG che è il principale meccanismo molecolare responsabile dell'adattamento veloce nei neuroni sensoriali olfattivi. Sei mammiferi geni canali CNG sono noti e alcuni disturbi visivi umane sono causate da mutazioni nei geni CNG asta o cono della retina.

Veloce Adattamento Nei Neuroni Sensoriali Olfattivi Del Mouse Non Richiede L'attività Della Fosfodiesterasi

The Journal of General Physiology. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16880265

Vertebrati neuroni sensoriali olfattivi adattano rapidamente a stimoli ripetitivi odorant. Studi precedenti hanno mostrato che i principali meccanismi molecolari per adattamento odorant avvengono dopo la produzione odorant-indotta dell'accampamento, e che un meccanismo importante è la modulazione di feedback negativo di Ca2 +-calmodulina (Ca2 +-CaM) del canale di cyclic nucleotide-gated (CNG). Tuttavia, il ruolo fisiologico di Ca2 +-dipendente da attività della fosfodiesterasi (PDE) nell'adattamento non è stato ancora studiato. Abbiamo utilizzato la tecnica di cellule intere tensione-morsetto a registrare correnti in olfattive neuroni sensoriali del mouse provocati dal photorelease di 8-Br-cAMP, un analogo dell'accampamento comunemente usato come un composto resistente all'idrolisi e noto per essere un potente agonista del canale CNG olfattivo. Abbiamo misurato le correnti in risposta a photoreleases ripetitive di campo o di 8-Br-cAMP e abbiamo osservato simile adattamento in risposta allo stimolo secondo. In presenza dell'inibitore PDE IBMX, confermando che un aumento dell'attività PDE non era coinvolto nella diminuzione risposta sono stati condotti esperimenti di controllo. Poiché la corrente totale attivata da 8-Br-cAMP, come pure che fisiologicamente indotta da odorifere, è composta non solo della corrente trasportata da Na + e Ca2 + attraverso i canali CNG, ma anche da un Ca2 +-attivato Cl-corrente, abbiamo eseguito esperimenti di controllo in cui è stato impostato il potenziale di inversione di Cl-, dalla sostituzione di ioni, presso lo stesso valore del potenziale azienda-50 mV. Adattamento è stata misurata anche in queste condizioni di diminuita Ca2 +-attivato Cl-corrente. Inoltre, producendo aumenti ripetitivi del ciliare di Ca2 + con flash fotolisi di Ca2 + in gabbia, abbiamo mostrato che Ca2 +-Cl-canali attivati non adattarsi e che non non c'è nessun Cl-deplezione di ciglia. Tutti insieme, questi risultati indicano che l'attività di PDE ciliare non è richiesto per veloce adattamento agli stimoli ripetitivi nei neuroni sensoriali olfattivi del mouse.

Bestrophin-2 è Un Canale Del Cloro Attivati Dal Calcio Candidato Coinvolto Nella Trasduzione Olfattiva

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16912113

CA-attivato canali Cl sono una componente importante della trasduzione olfattiva. Associazione odore ai recettori olfattivi nelle ciglia dei neuroni sensoriali olfattivi (OSNs) porta ad un aumento della concentrazione di Ca intraciliary dalla voce Ca attraverso canali di (CNG) nucleotide-gated cicliche. CA attiva un canale del Cl che conduce ad un efflusso di Cl dalle ciglia, che contribuiscono per l'amplificazione della depolarizzazione dell'OSN. L'identità molecolare di questo canale Cl resta sfuggente. Prova recente ha indicato che bestrophins sono in grado di formare canali attivati dal Ca Cl in sistemi eterologo. Qui abbiamo analizzato l'espressione di bestrophins nell'epitelio olfattivo del mouse e ha dimostrato che solo mouse bestrophin-2 (mBest2) è stato espresso. Cella singola RT-PCR ha mostrato che mBest2 è stato espresso in OSNs, ma non in cellule di supporto. Immunohistochemistry ha rivelato che mBest2 era espresso sulle ciglia di OSNs, il sito di trasduzione olfattiva e colocalized con la subunità di canale CNGA2 principale. Proprietà elettrofisiologiche delle correnti Cl Ca-attivato da canali nativi in dendritiche manopola/ciglia del mouse OSNs sono stati confrontati con quelli indotti dall'espressione di mBest2 in cellule HEK-293. Abbiamo trovato la stessa sequenza di permeabilità anione, stimato monocanale piccolo conductances, una differenza di sensibilità Ca di un ordine di grandezza e il blocco stesso lato specifiche dei bloccanti dei canali del Cl due comunemente utilizzati per inibire l'odorant-indotta Ca-attivato Cl corrente in OSNs, niflumic acid e 4-acetamido-4'-isothiocyanato-stilben-2,2'-disulfonate (si siede). Pertanto, i nostri dati suggeriscono che mBest2 è un buon candidato per essere una componente molecolare del canale olfattivo Cl Ca-attivato.

Specificità Di Ligando Dei Recettori Odorant

Journal of Molecular Modeling. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17120078

Odorant recettori appartengono alla classe dei recettori accoppiati a proteine G (GPCR) e rilevare un gran numero di molecole strutturalmente diverse odorant. Una recente analisi bioinformatica strutturale suggeriscono che le caratteristiche strutturali sono conservate in classe A di GPCR, nonostante la loro identità di sequenza bassa. Sulla base di questo lavoro, noi abbiamo allineato le sequenze di 29 ORs per quale ligando associazione di dati è disponibili. Recenti esperimenti di mutagenesi luogo-diretta su una tale recettore (MOR174-9) forniscono informazioni che hanno contribuito a identificare nove amminoacido residui coinvolti nel legame del ligando. Nostra modellazione fornisce una spiegazione logica per gli amminoacidi in posizioni equivalenti nella maggior parte dei recettori odorant considerato e aiuta a identificare altri aminoacidi che potrebbe essere importante per l'associazione del ligando. I nostri risultati sono coerenti con la maggior parte dei modelli precedenti e permettono le previsioni per gli esperimenti di mutagenesi sito-diretta, che potrebbero anche convalidare il nostro modello.

Sviluppo Temporale Del Cyclic Nucleotide-gated E Ca2 +-attivato Cl-correnti Nei Neuroni Sensoriali Olfattivi Isolato Del Mouse

Journal of Neurophysiology. Jul, 2007  |  Pubmed ID: 17460108

Un Cl(-) Ca(2+)-attivato attuale costituisce una grande parte della trasduzione corrente nei neuroni sensoriali olfattivi. L'associazione di odorizzazione ai recettori olfattivi in ciglia produce un aumento della concentrazione di cAMP; CA(2+) entra in ciglia attraverso canali CNG e attiva una corrente Cl(-). Nei neuroni sensoriali olfattivi intatto del mouse poco si sa circa la cinetica del Cl(-) attivato Ca(2+) corrente. Qui, abbiamo attivato direttamente canali CNG da flash fotolisi dell'accampamento in gabbia o 8-Br-cAMP e misurata la risposta corrente con la tecnica del morsetto tensione intera cellula nei neuroni del mouse. Abbiamo misurato multiphasic correnti in fase di aumento della risposta a -50 mV. L'attuale fase di lievitazione è diventato monofasica in assenza di Ca(2+) extracellulare, al + 50 mV, o quando la maggior parte del Cl(-) intracellulare è stato sostituito da gluconato di spostare il potenziale di equilibrio per Cl(-) di -50 mV. Questi risultati mostrano che la seconda fase della corrente in neuroni intatto del mouse è attribuita a un Cl(-) corrente attivato da Ca(2+), analogamente ai precedenti risultati su ciglia rana isolato. La percentuale del totale saturando la corrente trasportata da Cl(-) è stata stimata in due modi: 1) per misurare la massima corrente secondaria e 2) per bloccare il canale di Cl(-) con acido di niflumic. Abbiamo stimato che, in presenza di 1 Ca(2+) mM extracellulare e simmetrica Cl(-) concentrazioni il Cl(-) componente può costituire fino al 90% della risposta corrente totale. Questi dati mostrano come dipanare la componente CNG e attivato Ca(2+) Cl(-) dell'attuale fase nascente.

Zaffate Di Nuovi Su Chemesthesis. Concentrarsi Sul "TRPM5-esprimendo Solitarie Chemosensory Cellule Rispondono Alle Sostanze Odorosi Irritanti"

Journal of Neurophysiology. Mar, 2008  |  Pubmed ID: 18199823

Electroolfactogram Risposte Da Colture Organotypic Dell'epitelio Olfattivo Da Topi Postnatali

Chemical Senses. Apr, 2008  |  Pubmed ID: 18303030

Colture organotypic dell'epitelio olfattivo del mouse collegato al bulbo olfattivo sono stati ottenuti con la tecnica del tubo rullo da topi postnatali, di età compresa tra 13 e 66 giorni. Per verificare la funzionalità delle culture, abbiamo misurato electroolfactograms (EOGs) in giorni diversi in vitro (DIV), fino a 7 DIV, e li abbiamo confrontato con EOGs da preparazioni acute identici (0 DIV). Ampiezza media delle risposte EOG 2 miscele di vari odorizzazione a concentrazioni di 1 mM o 100 microM diminuito nelle culture tra 2 e 5 DIV rispetto con 0 DIV. La percentuale di reattive culture era 57%. Abbiamo anche usato la fosfodiesterasi inibitore della 3-isobutil-1-methylxanthine (IBMX) per innescare la cascata di trasduzione olfattiva bypassando odorant attivazione del recettore. Ampiezza media delle risposte EOG 500 microM IBMX non era significativamente differenti in culture fino a 6 DIV o 0 DIV, e la percentuale media di reattive culture tra 2 e 5 DIV era del 72%. La curva dose-risposta a IBMX misurata in culture fino a 7 DIV era simile a quella a 0 DIV. Inoltre, la percentuale di risposta EOG IBMX bloccato da acido di niflumic, un bloccante dei canali del Cl Ca-attivato, non era significativamente diversa nei preparativi colte o acute.

Hyperpolarization-attivato Cyclic Nucleotide-gated Canali Nei Neuroni Sensoriali Del Mouse Vomeronasal

Journal of Neurophysiology. Aug, 2008  |  Pubmed ID: 18509074

Correnti hyperpolarization-attivato (Ih) sono presenti in diversi neuroni del centrale e sistema nervoso periferico. Tuttavia, Ih nei neuroni dell'organo vomeronasale (VNO) non è ben caratterizzato. Abbiamo studiato le proprietà di Ih in neuroni sensoriali da fette acute del mouse VNO. Negli studi di tensione-clamp, Ih fu identificato dalla caratteristica cinetica di attivazione, dipendenza di tensione e bloccaggio di Cs + o ZD-7288, due bloccanti della Ih. La forskolina, un attivatore della adenil ciclasi, ha spostato la curva di attivazione per Ih a potenziali meno negativi. Confronto delle proprietà Ih in neuroni VNO con quelli di heterologously espresso hyperpolarization-attivato ciclici nucleotide-gated (HCN) canali, insieme con gli esperimenti di RT-PCR in VNO, indicano che Ih è causato da subunità HCN2 o HCN4. Nella corrente-morsetto registrazioni, bloccando Ih con ZD 7288 indotta a hyperpolarization di 5.1 mV, un aumento della resistenza d'ingresso, una diminuzione della sensibilità per sollecitare i potenziali d'azione in risposta alle piccole iniezioni di corrente e non ha fatto modificare la frequenza dei potenziali di azione ha suscitato da una grande iniezione di corrente. È stato dimostrato che nei neuroni VNO alcuni feromoni inducono una diminuzione della concentrazione di cAMP, ma il ruolo fisiologico dell'accampamento è sconosciuto. Dopo l'applicazione di bloccanti della adenil ciclasi, abbiamo misurato un hyperpolarization di 5.1 mV in 11 dei 14 neuroni, suggerendo che i livelli basali di cAMP potrebbero modulare il potenziale di riposo. In conclusione, questi risultati mostrano che i neuroni di topo VNO express subunità HCN2 o HCN4 e che Ih contribuisce all'impostazione di potenziale della membrana di riposa e di aumentare eccitabilità alla soglia di stimolo.

Regolamento Di Bestrophins Dal Ca2 +: Uno Studio Teorico E Sperimentale

PloS One. 2009  |  Pubmed ID: 19262692

Bestrophins sono una famiglia di recente scoperta di Cl(-) canali, per cui non strutturali sono disponibili informazioni. Alcuni membri della famiglia sono attivati da aumentata concentrazione intracellulare Ca2 +. Bestrophins presentano un tratto Asp-ricco ben conservato nel loro capolinea COOH (dominio-Asp-ricchi), che è omologo al Ca2 +-associazione motivi in thrombospondins umano e umano grande conduttanza Ca2 +- e tensione-gated di canali K + (BK(Ca)). Di conseguenza, il dominio Asp-ricco è inoltre un candidato per l'associazione Ca2 + in bestrophins. In base a queste considerazioni, abbiamo costruito modelli di omologia di umana bestrophin-1 (Best1) Asp-ricco dominio umano trombospondina-1 struttura di raggi x come un modello. Simulazioni dinamiche molecolari sono stati utilizzati per identificare residui Asp e Glu associazione Ca2 + e prevedere gli effetti delle loro mutazioni di alanina. Abbiamo poi proceduto alla prova selezionate mutazioni nel dominio Asp-ricco del mouse altamente omologhe bestrophin-2. I mutanti espressi in cellule HEK-293 sono stati studiati dagli esperimenti elettrofisiologici utilizzando la tecnica del morsetto tensione a cellule intere. Basato sui nostri risultati di modellazione molecolare, avevamo previsto che Asp-ricco dominio ha due siti di legame definito e che mutazioni D301A e D304A possono influenzare l'associazione degli ioni del metalli. Gli esperimenti hanno confermato che queste mutazioni realmente influenzare la funzione della proteina causando una grande diminuzione del Ca2 +-activated Cl(-) corrente, pienamente coerente con le nostre previsioni. Inoltre, altre mutazioni studiate (E306A, D312A) non ha fatto diminuire Ca2 +-attivato Cl(-) corrente in accordo con risultati di modellazione.

Cordone Umano CD133 + Cellule Staminali Trapiantate in Topi Nod-scid Forniscono Le Condizioni Per La Rigenerazione Di Neuroepithelium Olfattivo Dopo Danno Permanente Indotta Da Diclobenil

Stem Cells (Dayton, Ohio). Apr, 2009  |  Pubmed ID: 19350683

L'erbicida diclobenil selettivamente provoca necrosi della parte dorsomedial neuroepithelium olfattivo (NE) con danni permanenti alla mucosa sottostante, mentre la parte laterale della regione olfattiva e la mucosa respiratoria nasale rimane intatto. Abbiamo studiato qui se cordone ombelicale umano CD133(+) cellule staminali (HSC) iniettate per via endovenosa in topi nod-scid pretrattati con diclobenil può Raft la mucosa olfattiva e contribuire alla rigenerazione del danneggiato ne Abbiamo testato DNA HLA-DQalpha1 e tre microsatelliti umani (combinato DNA Index System) come indicatori di cellule engrafted, trovando la prova di reazione a catena della polimerasi di chimaerism nei vari tessuti dell'ospite, tra cui la mucosa olfattiva e bulbo, a 7 e 31 giorni dopo trapianto di HSC. Istologia, immunoistochimica e lectina colorazione ha rivelato il recupero morfologico della regione dorsomedial NE nei topi trattati con diclobenil che ricevuto HSC, in contrasto con la mancanza di rigenerazione nelle aree similmente feriti come questi è rimasto danneggiato in topi nontransplanted controllo. Analisi FISH, per rilevare le sequenze genomiche umane da cromosomi diversi, confermato attecchimento persistente della zona olfattiva rigenerante con cellule chimerica. Electro-olfactograms in risposta a odorizzazione, per verificare la funzionalità di NE olfattivo, ha confermato il danno funzionale della zona dorsomedial in topi trattati diclobenil e il recupero funzionale della stessa area in topi trapiantati. Questi risultati supporto al concetto che trapiantati HSC migrazione verso la zona danneggiata olfattiva offrono condizioni facilitando il recupero dalla perdita di cellule recettori olfattivi.

TMEM16B Induce Correnti Cloruro Attivate Dal Calcio in Cellule Di Mammifero

Pflügers Archiv : European Journal of Physiology. Oct, 2009  |  Pubmed ID: 19475416

Attivato CA(2+) Cl(-) canali giocano un ruolo fisiologico importante in vari tipi di cellule, ma la loro identità molecolare non è ancora chiaro. Recentemente, membri della famiglia di proteine transmembrana 16 (TMEM16) il nome sono stati suggeriti per funzionare come canali attivati dal Ca(2+) Cl(-). Riportiamo le proprietà funzionali del mouse TMEM16B (mTMEM16B) espressa in cellule 293T Rene embrionale umano (HEK), misurata sia nella configurazione di cellule intere e in inside out escisse patch. Nella cella intera, una corrente indotta da mTMEM16B è stata attivata da intracellulare Ca(2+) diffusione dalla pipetta patch, rilasciata dai depositi intracellulari attraverso l'attivazione di una G-protein-coupled receptor, o photoreleased dalla gabbia Ca(2+) all'interno della cellula. Nella patch di membrana inside-out, una corrente rapidamente è stata attivata dall'applicazione bagno controllato concentrazioni di Ca(2+), che indica che mTMEM16B è gestita direttamente da Ca(2+). Le cellule intere sia in configurazioni di dentro-fuori, la corrente indotta da Ca(2+) era anione selettivi, bloccati con l'acido di niflumic Cl(-) channel blocker e visualizzate una rettifica Ca(2+)-dipendente. Nella patch di dentro-fuori, Ca(2+) concentrazione per metà-massima corrente attivazione diminuito da 4,9 microM a -50 mV a 3,3 microM al + 50 mV, mentre il coefficiente di Hill era > 2. Nella patch di dentro-fuori, correnti ha mostrato una diminuzione di corrente reversibile a -50 mV in presenza di un'alta concentrazione di Ca(2+) costante e, inoltre, un rundown irreversibile, non osservato nelle cellule intere registrazioni, che indica che qualche sconosciuto modulatore è stata persa dopo l'escissione patch. I nostri risultati dimostrano che mTMEM16B funziona come un canale attivato Ca(2+) Cl(-) quando espressa nelle cellule HEK 293T.

Da Feromoni Di Comportamento

Physiological Reviews. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19584317

Negli ultimi anni, sono stato raggiunto notevoli progressi nella comprensione degli effetti profondi di feromoni sul comportamento e fisiologia riproduttiva. I feromoni sono stati classificati come molecole rilasciate da parte di individui e responsabile per l'elicitazione delle espressioni comportamentali specifiche in membri della stessa specie. Queste molecole, spesso chimicamente estranei, di segnalazione sono contenute nei liquidi corporei come urina, sudore, ghiandole esocrine specializzati e secrezioni mucose dei genitali. La vista standard del feromone di rilevamento è stata basata sul presupposto che la maggior parte dei mammiferi hanno due separati sistemi olfattivi con diversi ruoli funzionali: il sistema olfattivo principale per riconoscere molecole odorant convenzionale e il sistema vomeronasale specificamente dedicato al rilevamento di feromoni. Tuttavia, recenti studi hanno riesaminato questa interpretazione tradizionale che dimostrano che sia la principale olfattive e vomeronasal sistemi sono attivamente coinvolti nella comunicazione pheromonal. Le attuali conoscenze sugli aspetti comportamentali, fisiologiche e molecolari di rilevazione feromone nei mammiferi sono discusso in questa recensione.

Correnti Di Cloruro Di Calcio-attivato Nei Neuroni Sensoriali Olfattivi Da Topi Privi Di Bestrophin-2

The Journal of Physiology. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19622610

I neuroni sensoriali olfattivi utilizzano un meccanismo di amplificazione del segnale basata su cloruro di rilevare odorifere. L'associazione di odorizzazione i recettori le ciglia dei neuroni sensoriali olfattivi attiva una cascata di trasduzione che prevede l'apertura di canali di nucleotide-gated cicliche e l'entrata di Ca(2+) le ciglia. CA(2+) attiva una corrente di Cl(-) che produce un efflusso di ioni Cl(-) e amplifica la depolarizzazione. L'identità molecolare dei canali attivati dal Ca(2+) Cl(-) è ancora sfuggente, anche se alcuni bestrophins hanno dimostrato di funzionare come canali Cl(-)-Ca(2+)-attivato quando espressi in sistemi eterologo. Nell'epitelio olfattivo, bestrophin-2 (Best2) è stato indicato come candidato per essere una componente molecolare del canale attivato Ca(2+) Cl(-) olfattivo. In questo studio, abbiamo analizzato i topi mancanti Best2. Abbiamo confrontato le risposte elettrofisiologiche dell'epitelio olfattivo alla stimolazione odorant, così come le proprietà delle correnti Cl(-) Ca(2+)-attivato nel wild-type (WT) e topi knockout (KO) per Best2. I nostri risultati confermano che Best2 è espresso nelle ciglia dei neuroni sensoriali olfattivi, mentre odorant risposte e attivato Ca(2+) Cl(-) correnti non erano significativamente differenti tra topi WT e KO. Così, Best2 non sembra essere il principale componente molecolare del canale olfattivo. Sono necessari ulteriori studi per determinare la funzione di Best2 nelle ciglia dei neuroni sensoriali olfattivi.

Maschere Acquaforte Per Preciso Legame Indiretto

Journal of Clinical Orthodontics : JCO. May, 2010  |  Pubmed ID: 20831102

Calcio Concentrazione Salti Rivelano Selettività Dinamica Dello Ione Di Correnti Di Cloruro Di Calcio-attivato in Neuroni Sensoriali Olfattivi Del Mouse E TMEM16b-transfected HEK 293T Cellule

The Journal of Physiology. Nov, 2010  |  Pubmed ID: 20837642

Attivato CA(2+) Cl(-) canali giocano un ruolo rilevante in diversi processi fisiologici, tra cui trasduzione olfattiva, ma la loro identità molecolare non è ancora chiaro. Recenti evidenze suggeriscono che membri dei canali attivati Ca(2+) Cl(-) forma familiare (TMEM16, anche denominato anoctamin) 16 transmembrana in diversi tipi di cella. In vertebrati trasduzione olfattiva, TMEM16b/anoctamin2 è stato proposto come l'importante componente molecolare dei canali attivati da Ca(2+) Cl(-). Tuttavia, un confronto tra le proprietà funzionali nella configurazione di cellule intere tra i nativi e il canale del candidato non è stato ancora eseguito. In questo studio, abbiamo utilizzato la tecnica di cellule intere tensione-pinza per misurare le proprietà funzionali del canale nativo nei neuroni sensoriali olfattivi del mouse isolato e confrontarle con quelle del mouse TMEM16b/anoctamin2 espresso nelle HEK 293T cellule. Abbiamo attivato direttamente canali di rapido e riproducibile Ca(2+) intracellulare concentrazione salti ottenuti da photorelease di Ca(2+) in gabbia e determinato extracellulare blocco proprietà e anione selettività dei canali. Abbiamo scoperto che l'acido di niflumic di bloccanti del canale Cl(-), 5-nitro - 2-(3-phenylpropylamino) benzoico acido (NPPB) e DIDS applicato al lato extracellulare della membrana ha causato un'inibizione simile delle due correnti. Selettività anionico misurato lo scambio di ioni esterni e ha rivelato che, in entrambi i tipi di correnti, l'inversione del potenziale per alcuni anioni era tempo dipendente. Inoltre, abbiamo confermato dall'immunoistochimica co-ha che TMEM16b/anoctamin2 in gran parte localizzato con adenil ciclasi III alla superficie dell'epitelio olfattivo. Pertanto, concludere che le proprietà elettrofisiologiche misurate nella configurazione di cellule intere sono in gran parte simili e ulteriormente indicano che TMEM16b/anoctamin2 è probabile che sia una subunità maggiore del nativo olfattive attivato Ca(2+) Cl(-) corrente.

Fattori Che Influenzano La Stabilità Delle Miniviti. Uno Studio Retrospettivo Su 300 Miniviti

European Journal of Orthodontics. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 20926556

Lo scopo di questo studio era di indagare, in un periodo di circa 3 anni, le reazioni a carico ortodontico di un miniviti di titanio di tipo V. In questo studio retrospettivo, condotto in una pratica privata, sono stati valutati i record delle 300 miniviti inseriti in 132 pazienti consecutivi (80 femmine, 60,6 per cento) dal chirurgo stesso. L'età media dei pazienti era 23,2 anni. Tre tipi di miniviti (tipo r: diametro 1,5 mm, lunghezza 9 mm; tipo b: diametro 1,5 mm, lunghezza mm 11; e tipo c: diametro 1,3 mm, lunghezza 11 mm) sono stati usati. Le variabili cliniche valutate includevano il tempo di caricamento e la posizione delle miniviti in relazione alla gengiva e la radice. I tassi di successo con diverse variabili sono stati confrontati con chi-quadro o test esatto di Fisher, ove opportuno. Un tasso di sopravvivenza cumulativa dell'81% (243/300) è stato trovato usando l'analisi di Kaplan-Meier, con un tasso di successo ottimale per le miniviti ampia 1,3 mm inserita nella gengiva allegata, con carico immediato applicato. Cox regressione proporzionale hazard ha mostrato differenze significative tra il tasso di successo e i parametri seguenti: genere, tempo, gengivale o localizzazione ossea e diametro delle miniviti di caricamento. Considerando i parametri clinicamente controllabili ed entro i limiti di questo studio retrospettivo, 1,3 mm diametro miniviti inserito nella gengiva allegata e caricato immediatamente avevano la prognosi più favorevole.

Crescita Indotta Da Ortodonzia Fissa E Funzionale Di Un Condilo Aplastica in Un Giovane Paziente: Un Rapporto Di Caso

International Orthodontics / Collège Européen D'orthodontie. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21269897

Aplasia condilare è una condizione caratterizzata dalla completa mancanza di un condilo. È una malattia rara, più spesso associata a sindromi più complesse come Hemifacial Microsomia, Treacher-Collins e Goldenhar. In questo articolo, vi presentiamo il caso di un giovane paziente femminile (4,3 anni) con un condilo sinistro aplastica. Ha ricevuto il trattamento precoce di due fasi: in primo luogo, un apparecchio funzionale per stimolare la crescita condilare e, secondo, fissa multibrackets terapia ed elastici di II classe per migliorare il rapporto occlusale. Terapia funzionale è durato molti anni a causa della non conformità. Intermedi radiografici controlli (a 8,6 anni a 10,4 anni) ha mostrati alcun miglioramento nella crescita del condilo aplastica. Il processo di crescita iniziato durante la terapia ortodontica fissa (inizio a 10,6 anni). Alla fine del trattamento, quando il paziente era 14, la dimensione del condilo sinistro era simile a quella della controlateral. Qui di seguito, noi descrivere e discutere il trattamento.

La Proteina Prionica Cellulare è Espresso Nei Neuroni Sensoriali Olfattivi Di Topi Adulti Ma Non Pregiudica I Primi Eventi Del Pathway Di Trasduzione Olfattiva

Chemical Senses. Nov, 2011  |  Pubmed ID: 21680753

Una conversione conformazionale della proteina prionica cellulare (PrP(C)) è ora riconosciuto come l'evento causale di patologie neurodegenerative fatali, noto come malattie da prioni. Nonostante gli sforzi di lunga durata, tuttavia, il ruolo fisiologico di PrP(C) rimane poco chiaro. È stato riportato che PrP(C) è espresso in varie zone del sistema olfattivo, tra cui l'epitelio olfattivo, ma la sua precisa localizzazione nei neuroni sensoriali olfattivi (OSNs) è ancora dibattuta. Nuovamente qui, utilizzando strumenti di immunoistochimica, noi abbiamo controllata l'espressione e la localizzazione di PrP(C) nell'epitelio olfattivo di topi congenici adulti esprimendo diverse quantità di PrP(C), che è, wild-type, PrP-knockout e transgenici con sovraesprimono relativa PrP C animali. Abbiamo trovato che PrP(C) è stato espresso in OSNs, in cui, tuttavia, esso è stato distribuito in maniera disomogenea, essendo rilevabili a livelli bassi nei corpi cellulari, dendriti e strato apicale e più abbondantemente in assoni. Abbiamo studiato anche il coinvolgimento dei PrP(C) nella risposta dell'epitelio olfattivo di odorizzazione, confrontando l'electro-olfactograms delle linee del 3 mouse sottoposte a protocolli di stimolazione differenti. Abbiamo non trovato alcuna differenza significativa tra i 3 genotipi PrP, sostenendo relazioni precedenti che escludono un'azione diretta di PrP(C) nell'attività di trasduzione di segnale precoce dell'epitelio olfattivo.

Anoctamin 2/TMEM16B: Un Canale Del Cloro Attivati Dal Calcio Nella Trasduzione Olfattiva

Experimental Physiology. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 21890523

In vertebrati trasduzione olfattiva, un efflusso Ca(2+)-dipendente Cl(-) amplifica notevolmente la risposta odorant. L'associazione di odorizzazione i recettori le ciglia dei neuroni sensoriali olfattivi attiva una cascata di trasduzione che prevede l'apertura di canali di nucleotide-gated cicliche e l'entrata di Ca(2+) le ciglia. Il Ca(2+) si attiva una corrente di Cl(-) che, in presenza di una manutenzione elevata concentrazione Cl(-) intracellulare, produce un efflusso di ioni Cl(-) e amplifica la depolarizzazione. In questa recensione, riassumiamo le prove a sostegno dell'ipotesi che anoctamin 2/TMEM16B è il principale, o forse l'unico, costituente dei canali attivati da Ca(2+) Cl(-) coinvolti nella trasduzione olfattiva. Infatti, studi da diversi laboratori hanno dimostrato che anoctamin 2/TMEM16B è espresso nel livello ciliare dell'epitelio olfattivo, che ci sono notevoli somiglianze funzionali tra le correnti nei neuroni sensoriali olfattivi e in cellule HEK 293 transfected con anoctamin 2/TMEM16B, e che i topi knockout per anoctamin 2/TMEM16B non hanno mostrato alcun rilevabile attivato Ca(2+) Cl(-) corrente. Infine, si discute il coinvolgimento dei canali attivati da Ca(2+) Cl(-) nel processo di trasduzione di vomeronasal neuroni sensoriali e il ruolo fisiologico di questi canali di olfatto.