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Articles by Anna Menini in JoVE
嗅神経細胞の繊毛のケージド化合物のフラッシュフォトリシス
Anna Boccaccio1,2, Claudia Sagheddu1, Anna Menini1,3
1SISSA, International School for Advanced Studies, 2Istituto di Biofisica, Consiglio Nazionale delle Ricerche, 3SISSA Unit, Italian Institute of Technology
ケージド化合物の光分解は、様々な生理活性化合物の濃度の急激かつローカライズされた増加の生産を可能にする。ここでは、解離マウス嗅神経細胞における嗅覚情報伝達の研究のためのケージドcAMPまたはケージのCaの光分解を組み合わせたパッチクランプ記録を取得する方法を示します。
Other articles by Anna Menini on PubMed
細胞全体の録音およびマウスから単離された嗅細胞のケージド化合物の光分解
Chemical Senses. Oct, 2003 | Pubmed ID: 14627539
マウス嗅細胞の電気生理学的特性は以下の広範囲に研究されている間、嗅覚の研究のための遺伝子操作と分子生物学的技術は、マウスで開発されています。我々は、マウスで全細胞電圧クランプ法を用いた電位依存性および伝達の両方の電流を調査する嗅細胞を単離した。電位依存性電流が過渡的かつ持続的なコンポーネントと外向き電流に続いて一時的な内向き電流で構成されていた。テスト嗅細胞のうち、12%が内向き電流と嗅覚シネオールに反応した。ケージド化合物は、細胞の94%で内向き電流をアクティブにケージの環状ヌクレオチドのパッチピペットとフラッシュ光分解によって細胞質に導入した。フラッシュは繊毛、応答遅延、立ち上がり時間および持続時間に局在したときは、フラッシュがソーマを照射したときよりも短かった。光分解反応の振幅は光強度に依存していたとの関係は3.2のヒル係数、ヒル方程式でフィッティングされました。これらの結果は、マウスとその電位依存性電流と伝達特性が両生類のものとほとんど同様ですから分離された嗅覚ニューロンからホールセル構成での録音を得ることが可能であることを示している。
嗅覚:匂い分子から嗅覚皮質へ
News in Physiological Sciences : an International Journal of Physiology Produced Jointly by the International Union of Physiological Sciences and the American Physiological Society. Jun, 2004 | Pubmed ID: 15143202
我々はどのように臭いのですか?環境からの匂い情報が知覚される方法の知識が大幅に哺乳動物のゲノム内の嗅覚受容体のために約1,000の遺伝子の発見以来発展してきた。分子遺伝学的、電気生理学的、および光学イメージング研究の組み合わせから我々は匂い方法の理解が浮上している。
電気生理学的特性と急性スライス標本におけるマウス鋤鼻感覚ニューロンのモデル化
Chemical Senses. Jun, 2006 | Pubmed ID: 16547196
鋤鼻系は多くの哺乳動物におけるフェロモンの検出に関与している。鋤鼻感覚ニューロンは、直接副嗅球に伝達される活動電位に行動的に関連する情報をエンコードします。我々は、パラメータの最小数を使用して、電位依存性電流特性とそのネイティブに近い状態でこれらのニューロンの発火動作の両方を模倣したマウスの基礎鋤鼻感覚ニューロンの電気的活動のモデルを開発しました。データは、急性スライス標本におけるマウス基底鋤鼻感覚ニューロンからホールセル電圧クランプや電流クランプ法で記録することによって得られた。静止電位は-50から-70 mVの、ほとんどのニューロンに発火未満の2から10 pAの誘導トニックの電流注入であった。注入電流の関数として実験的に決定発火頻度はよくミカエリス - メンテンの式によって記述されていたと正確にマウス鋤鼻伝達カスケードの詳細が含まれています将来のモデルと組み合わせて使用することができるモデルで再現されました。
感覚伝達における環状ヌクレオチド依存性イオンチャネル
FEBS Letters. May, 2006 | Pubmed ID: 16631748
直接環状ヌクレオチドの結合によって活性化環状ヌクレオチド依存性(CNG)チャネルは、最初の網膜の棒、錐体と嗅神経細胞で発見された。視覚と嗅覚システムでは、CNGチャネルは主にナトリウムとカルシウムイオンによって運ばれるカチオン電流を行うことにより、感覚の伝達を媒介する。嗅覚情報伝達では、カルモジュリンとの組み合わせでカルシウムは嗅細胞の速い適応に関与する主要分子機構であるCNGチャネルの負帰還を発揮する。六哺乳類CNGチャネルの遺伝子が知られており、いくつかの人間の視覚障害は、網膜ロッドやコーンCNG遺伝子の突然変異によって引き起こされます。
マウス嗅細胞における高速適応は、ホスホジエステラーゼの活性を必要としない
The Journal of General Physiology. Aug, 2006 | Pubmed ID: 16880265
急速に反復嗅覚刺激に適応する嗅細胞を脊椎動物。以前の研究では、嗅覚順応のための主要な分子メカニズムは、cAMPの匂いに誘発される生産後に行われることが示され、一つの重要なメカニズムは、環状ヌクレオチド依存性(CNGの+ - カルモジュリン(Ca2 +の-CAM)カルシウムによる負帰還変調であることをしている)チャネル。しかし、適応のホスホジエステラーゼのCa2 +依存性活性(PDE)の生理的役割はまだ検討されていない。我々はマウス嗅細胞内の電流を記録するために全セル電圧クランプ法を用いたcAMPのアナログ一般的に加水分解性化合物として使用され、嗅覚の強力なアゴニストであることが知られている8-BR-cAMPのphotoreleaseによって誘発されるCNGチャネル。我々は、cAMPのまたは8-BR-cAMPの反復photoreleasesに応答して電流を測定し、我々は第二刺激に応答して同様の適応を観察した。制御実験は、PDE活性の増加は、応答の減少に関与していないことを確認し、PDE阻害剤IBMXの存在下で行われた。電流の合計は8-BR-cAMPのによって活性化だけでなく、生理的に匂い物質により誘導されるように、Na +とCa2 +のCNGチャネルを介してだけでなく、カルシウムによって+活性化Clの電流によって運ばれ、現在だけでなく構成され、我々は、制御を行ったので、の逆転電位Clを、されて保持電位と同じ値、-50 mVで、イオンの置換によって、設定されている実験を行った。適応は減少したのCa2 +活性化Clの電流のこれらの条件でも測定した。また、ケージのCa2 +のフラッシュ光分解と毛様体のCa2 +の反復的な増加を生成することによって、我々は、Ca2 +活性化のCl-チャネルが適応しないのCl-枯渇が繊毛に存在しないことないことを示した。すべて一緒に、これらの結果は、繊毛のPDEの活性はマウス嗅細胞で反復刺激に対する高速適応するために必要されていないことを示しています。
Bestrophin-2は嗅覚伝達に関与する候補カルシウム活性化クロライドチャネルである
Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Aug, 2006 | Pubmed ID: 16912113
カルシウム活性化Clのチャネルは、嗅覚情報伝達の重要なコンポーネントです。嗅細胞の繊毛の嗅覚受容体に結合する臭気は、(OSNs)環状ヌクレオチド依存性(CNG)チャネルを介してCaのエントリによってintraciliary Ca濃度の増加につながります。 CAは、OSNの脱分極の増幅に貢献する、繊毛からClの流出につながるのClチャネルを活性化する。このCLチャネルの分子的アイデンティティはとらえどころのないままになります。最近の証拠はbestrophinsは、異種システムにおけるCa活性化Clのチャネルを形成することができることが示されている。ここでは、マウスの嗅上皮におけるbestrophinsの発現を解析し、マウスだけbestrophin-2(mBest2)が発現していることが実証されている。単一細胞RT-PCRはmBest2がOSNsではなく、支持細胞で発現させたことを示した。免疫組織化学では、mBest2がOSNsの繊毛、嗅覚情報伝達のサイト上に発現し、メインCNGA2チャネルサブユニットと共局在することを明らかにした。樹状ノブ/マウスOSNsの繊毛のネイティブチャネルからのCa活性化のCl電流の電気生理学的特性は、HEK-293細胞におけるmBest2の発現により誘導されるものと比較した。我々は同じ陰イオン透過性配列は、小さな推定シングルチャネルコンダクタンス、一桁のCa感受性の差は、一般に嗅覚誘発Ca活性化Clを抑制するために使用される2つのClチャネルブロッカーの同じ側に特有の閉塞を発見したOSNs、ニフルム酸、4 - アセトアミド-4'-イソチオシアナト-stilben-2、2'-スルホン(座る)の現在。したがって、我々のデータはmBest2は、嗅覚のCa活性化Clのチャネルの分子成分であるための良い候補であることを示唆している。
嗅覚受容体のリガンド特異性
Journal of Molecular Modeling. Mar, 2007 | Pubmed ID: 17120078
嗅覚受容体は、クラスGタンパク質共役型受容体(GPCR)のに属しており、構造的に多様な匂い分子の多数を検出します。最近の構造バイオインフォマティクス解析は、構造的な特徴は、その低い配列同一性にもかかわらず、GPCRのクラスを越えて保存されていることを示唆している。この作業に基づいて、我々はリガンド結合データが入手できる29のORの配列を整列しています。そのような受容体(MOR174-9)最近の部位特異的突然変異誘発実験では、リガンド結合に関与する9アミノ酸残基を同定する助け情報を提供します。我々のモデリングを考慮嗅覚受容体のほとんどの相当する位置のアミノ酸のための理論的根拠を提供し、リガンド結合に重要であることが他のアミノ酸を識別するのに役立ちます。我々の調査結果は、以前のモデルの中で最も一致しており、また我々のモデルを検証することができる部位特異的突然変異誘発実験の予測を可能にします。
隔離されたマウス嗅細胞における環状ヌクレオチドゲートとCa2 +活性化のCl-電流の時間発展
Journal of Neurophysiology. Jul, 2007 | Pubmed ID: 17460108
のCa(2 +)活性化のCl( - )現在は、嗅細胞内の現在の情報伝達の大部分を構成します。繊毛の嗅覚受容体への付臭剤の結合は、cAMP濃度の増加を生成します。のCa(2 +)は、CNGチャネルを介して繊毛に入るとClを活性化する - 電流(A)。現在の( - )そのままマウス嗅細胞ではほとんどは、Caの動態(2 +)活性化塩素について知られている。ここでは、直接フラッシュケージドcAMPの分解または8-BR-cAMPのでCNGチャネルを活性化し、マウスの神経細胞における全細胞電圧クランプ法を用いた電流応答を測定した。我々は、-50 mVで応答の立ち上がり段階で多面電流を測定した。電流の立ち上がり相は50 mVで、細胞外Caの有無(2 +)で単相になったとき、またはほとんどの細胞内のCl( - )Clの平衡電位をシフトするグルコン酸塩に置き換えられました - -50 mVに() 。 ( - )現在のCa(2 +)によって活性化され、同様に隔離されたカエルの繊毛上の前回の結果にこれらの結果は、マウスをそのままニューロンにおける現在の第二段階をClに起因していることを示している。 ( - )塩素によって運ばれる電流の合計が飽和状態の割合は、二つの方法で推定された:Clを(ブロックすることにより)最大の二次電流および2を測定することにより、1) - )ニフルム酸を持つチャネル。 ( - )の濃度Clが( - )成分の合計電流応答の90%までを構成することができる我々は1 mMの細胞外Ca(2 +)の存在下で、対称的なClのと推定している。 ( - )電流の立ち上がり相のコンポーネントこれらのデータは、CNGとCa(2 +)活性化Clを解明する方法を示しています。
Chemesthesisについて新しいWhiffs。 "孤独な化学感覚細胞が臭気刺激に応答しTRPM5発現"に焦点を当て
Journal of Neurophysiology. Mar, 2008 | Pubmed ID: 18199823
生後マウスの嗅上皮の器官培養からElectroolfactogram応答
Chemical Senses. Apr, 2008 | Pubmed ID: 18303030
嗅球に接続されたマウス嗅上皮の器官培養は、13と66日歳生後マウスからローラチューブ法で得られた。文化の機能をテストするために、我々は最大7 DIVに、in vitroでの別の日(DIV)でelectroolfactograms(EOGs)を測定し、我々は同一の急性の準備(0 DIV)からEOGsと比較した。 1 mMまたは100マイクロモルの濃度で様々な匂い物質の混合物2への対応をEOGの振幅の平均値は、0 DIVと比べて2〜5 DIVの間に文化の中で減少した。応答文化の割合は57%であった。また、嗅覚受容体の活性化をバイパスする嗅覚伝達カスケードをトリガするために3 - イソブチル-1 - メチルキサンチン(IBMX)ホスホジエステラーゼ阻害剤を使用していました。 500マイクロモルIBMXへの対応をEOGの平均振幅は、最大6つのDIVまたは0 DIVの文化では有意差は認められなかった、2と5 DIVの間に応答の文化の平均割合は72%であった。 7 DIVに文化の中でまで測定IBMXの用量 - 反応曲線は、0 DIVでのそれと類似していた。また、ニフルム酸、カルシウム活性化ClのチャネルのブロッカーによってブロックされIBMX、への応答をEOGのの割合は培養または急性の製剤で有意差は認められなかった。
マウスの鋤鼻感覚ニューロンにおける過分極活性化環状ヌクレオチド依存性チャネル
Journal of Neurophysiology. Aug, 2008 | Pubmed ID: 18509074
過分極活性化電流(IH)は、中枢および末梢神経系のいくつかのニューロンに存在しています。しかし、鋤鼻器官(VNO)のニューロンのIhがよく特徴付けされていません。我々はマウス鋤鼻器の急性スライスから感覚ニューロンでIhの特性を調べた。電圧クランプ研究では、IHは、アクティベーション、電圧依存、及びCs +またはZD-7288、IHの2ブロッカーによる閉塞の特性動力学によって同定した。フォルスコリン、アデニリルシクラーゼの活性化は、以下の負の電位にIhが活性化曲線をシフトされます。異種発現過分極活性化環状ヌクレオチド依存性(HCN)チャネルのものとVNOニューロンのIhが特性の比較は、一緒にVNOでRT-PCR実験では、そのIhががHCN2および/またはHCN4サブユニットによって引き起こされることを示します。 ZD-7288とIHを遮断する電流クランプ記録、5.1 mVの過分極、入力抵抗の増加は、小電流の注入に応答して活動電位を誘発する感度の低下が誘導され、活動電位の頻度を変更しなかった大電流注入によって誘発される。これは、VNOニューロンにいくつかのフェロモンにcAMP濃度の低下を誘導することを示したが、cAMPの生理的役割は不明であるされています。アデニリルシクラーゼの遮断の適用後、我々は、cAMPの基底レベルが静止電位を調節することができることを示唆し、14ニューロンの11で5.1 mVの過分極を測定した。結論として、これらの結果は、マウスVNOニューロン急行HCN2および/またはHCN4サブユニットとそのIHが静止膜電位を設定することに寄与し、刺激閾値での興奮性を増加させることを示している。
のCa2 +によってBestrophinsの調節:その理論と実験的研究
PloS One. 2009 | Pubmed ID: 19262692
( - )は構造情報が利用できないとなるチャネル、BestrophinsはClの最近発見されたファミリーである。いくつかの家族が増加した細胞内Ca2 +濃度によって活性化される。と電位依存性K +チャネル(BK(カリフォルニア州) - Bestrophinsは、人間のthrombospondinsで、人間の大きなコンダクタンスのCa2 +のCa2 +結合モチーフと相同である彼らのCOOH末端(ASPリッチドメイン)でよく保存されたAsp-リッチ路を備えています。)したがって、ASP-リッチドメインはまた、カルシウムの候補+ bestrophinsのバインディングです。これらの考慮事項に基づいて、我々は、ヒトトロンボスポンジン-1のテンプレートとしてのX線構造を用いてbestrophin-1ヒト(Best1)のAsp-リッチドメインのホモロジーモデルを構築した。分子動力学シミュレーションは、カルシウム結合AspおよびGlu残基を同定する+およびアラニンにそれらの変異の影響を予測するために使用されました。次に、相同性の高いマウスbestrophin-2のAsp-リッチドメインで選択された変異をテストするために進んだ。 HEK-293細胞で発現変異体は、全セルの電圧クランプ法を用いた電気生理学実験により調べた。私たちの分子モデリングの結果に基づいて、我々はそのASPの豊富なドメインは、2つ定義された結合部位を持ち、D301AとD304A変異は金属イオンの結合に影響を与える可能性があると予測している。 ( - )現在、我々の予測と完全に一貫性のある実験では、これらの変異は、実際のCa2 +活性化Clとの大きな低下を引き起こすタンパク質の機能に影響を与えないことを確認した。 ( - )に加えて、他の研究突然変異(E306A、D312A)は、Ca2 +の活性塩素を減少させなかった、現在のモデリングの結果と一致している。
NOD-SCIDマウスに移植ヒト臍帯血CD133 +幹細胞は、ジクロベニルによって誘起された永久的な損傷後に嗅上皮の再生のための条件を提供
Stem Cells (Dayton, Ohio). Apr, 2009 | Pubmed ID: 19350683
除草剤ジクロベニルを選択、基礎となる粘膜への永久的な損傷と嗅上皮(NE)の背内側部の壊死を引き起こす嗅神経領域の外側の部分と鼻呼吸のに対し、粘膜は無傷のままです。我々は、ヒト臍帯血CD133(+)幹細胞(HSC)は、ジクロベニルは嗅粘膜を生着、破損したNEの再生に貢献するかもしれないで前処理したNOD-SCIDマウスに静脈注射するかどうかをここで検討した。我々は7と31日間で嗅粘膜や電球などのホストの様々な組織におけるキメリズムのポリメラーゼ連鎖反応の証拠を見つけ、移植細胞の指標としてHLA-DQalpha1 DNAと3種類のヒトマイクロサテライト(複合DNAインデックスシステム)、HSCは、次のテストを移植。組織学、免疫組織化学、レクチン染色では、これらをコントロールnontransplantedマウスで破損したままと同様に負傷した分野での再生の欠如と対照的な、HSC受信ジクロベニル処置マウスにおけるNEの背内側領域の形態学的回復を明らかにした。 FISH解析では、異なる染色体から人間のゲノム配列を検出するために、キメラ細胞と再生嗅覚領域の永続的な生着が確認された。嗅覚NEの機能をテストする匂い物質に応答して電気olfactogramsは、ジクロベニル処置マウスの背内側領域と移植マウス内の同じ領域の機能回復の機能の損傷を確認した。これらの知見は、損傷した嗅覚野への移行、移植HSCは、嗅覚受容細胞の損失からの回復を促進する条件を提供している概念をサポートしています。
TMEM16Bは、哺乳動物細胞でカルシウムによって活性化塩化電流を誘導
Pflügers Archiv : European Journal of Physiology. Oct, 2009 | Pubmed ID: 19475416
のCa(2 +)活性化塩素( - )チャネルは、様々な種類の細胞で重要な生理学的役割を果たしているが、その分子のアイデンティティーはまだ不明である。 ( - )チャネル最近では、貫通16(TMEM16)というタンパク質ファミリーのメンバーは、Ca(2 +)活性化塩素として機能するように提案されている。ここでは、全体のセル構成では、内側、切り出したパッチの両方で測定したヒト胎児腎臓(HEK)293T細胞において発現マウスTMEM16B(mTMEM16B)の機能的特性を報告します。セル全体では、mTMEM16Bによって誘導される電流はG-タンパク質共役型受容体の活性化を介して細胞内貯蔵から放出され、パッチピペットから拡散し、細胞内Ca(2 +)によって活性化や、内部ケージのCa(2 +)からphotoreleasedされましたセル。インサイドアウト膜パッチでは、電流が急激にmTMEM16Bは、Ca(2 +)から直接ゲートであることを示す、制御のCa(2 +)濃度の浴アプリケーションによって活性化させた。全細胞とインサイドアウト構成では、両方のCa(2 +)によって誘発される現在であった選択的なアニオンは、Clによってブロックされた( - )(2 +)チャネルブロッカーニフルム酸、およびCaを表示依存整流。ヒル係数は> 2であった一方、+50 mVで3.3マイクロモルを-50 mVで4.9マイクロモルから減少し、半最大電流活性化のためのインサイドアウトパッチは、Ca(2 +)濃度である。インサイドアウトパッチで、電流はそのいくつかの未知の変調器を示す定数高Ca(2 +)濃度と、さらに、細胞全体の記録には見られない不可逆的な要約、の存在下で-50 mVで可逆的な電流の減少を示したパッチの切除によって失われました。 ( - )HEK 293T細胞において発現チャネル我々の結果は、Ca(2 +)活性化のClなどmTMEM16B機能があることを示している。
フェロモンから行動へ
Physiological Reviews. Jul, 2009 | Pubmed ID: 19584317
近年では、かなりの進展が生殖生理学および行動上のフェロモンの深遠な影響の理解に達成されています。フェロモンは、個人と同じ種のメンバーの特定の行動の表現の引き出しの責任によって放出分子として分類されている。これらのシグナル分子は、しばしば化学的に無関係、尿、汗、専門外分泌腺と、性器の粘膜の分泌物などの体液に含まれています。従来の匂い分子と特異的にフェロモンの検出に専用の鋤鼻系を認識するための主嗅覚系:フェロモンセンシングの標準のビューは、ほとんどの哺乳類は、異なる機能的役割を持つ2つの区切りの嗅覚システムを持っていることを前提に基づいていた。しかし、最近の研究では主嗅覚と鼻の両方のシステムが積極的フェロモンコミュニケーションに関与していることを示しているこの伝統的な解釈を見直しています。哺乳類のフェロモン検出の行動、生理、および分子的側面に関する現在の知識はこのレビューで説明されています。
Bestrophin-2を欠損するマウスの嗅細胞内のカルシウム活性化塩化電流
The Journal of Physiology. Sep, 2009 | Pubmed ID: 19622610
嗅細胞は、匂い物質を検出するために塩化物ベースの信号増幅機構を使用しています。嗅細胞の繊毛の受容体への付臭剤の結合は、環状ヌクレオチド依存性チャネルと繊毛にCAのエントリ(2 +)の開口部を含む伝達カスケードを活性化する。 ( - )現在のClの流出を生成( - )イオンを脱分極を増幅するのCa(2 +)は、Clをアクティブにします。異種システムで発現したときのチャンネル( - )( - )のCa(2 +)活性化Clの分子のアイデンティティの一部bestrophinsがCa(2 +)活性化塩素として機能するように示されているが、チャネルは、依然としてとらえどころのないです。 ( - )チャネルの嗅上皮では、bestrophin-2(Best2)は、嗅覚のCa(2 +)活性化のClの分子成分であるための候補として示されている。本研究では、Best2を欠損したマウスを解析した。 ( - )Best2のために(KO)野生型(WT)およびノックアウトマウスの電流我々は、匂い刺激に対する嗅覚上皮の電気生理学的応答と同様に、CAのプロパティ(2 +)活性化Clを比較した。我々の結果はBest2は、嗅細胞の繊毛に発現していることを確認し、しばらく匂い応答とCa(2 +)活性化塩素( - )電流はWTとKOマウス間で有意差は認められなかった。したがって、Best2は、嗅覚路の主な分子成分であることが表示されません。さらなる研究が嗅細胞の繊毛のBest2の機能を決定する必要があります。
カルシウム濃度のジャンプは、マウス嗅細胞とTMEM16bトランスフェクションHEK 293T細胞内のカルシウム活性化塩化電流の動的なイオン選択性を明らかに
The Journal of Physiology. Nov, 2010 | Pubmed ID: 20837642
のCa(2 +)活性化塩素( - )チャネルは、嗅覚情報伝達を含むいくつかの生理学的プロセスに関連する役割を果たしているが、その分子のアイデンティティーはまだ不明である。最近の証拠は、貫通16(TMEM16、またanoctamin名前)家族形態のCa(2 +)活性化Clのメンバー( - )いくつかの細胞型のチャネル。 ( - )チャネルの脊椎動物の嗅覚の伝達に、TMEM16b/anoctamin2は、Ca(2 +)活性化Clの主要な分子成分として提案されている。ただし、ネイティブ、候補チャネル間の全細胞構成における機能特性の比較はまだ行われていない。そこで、本研究では、単離されたマウスのネイティブチャネル嗅覚ニューロンの機能特性を測定し、HEK 293T細胞において発現マウスTMEM16b/anoctamin2のものとそれらを比較するために全セル電圧クランプ技術を使用しています。我々は、迅速かつ再現性の細胞内Ca(2 +)濃度によって直接活性化されたチャネルは、ケージのCa(2 +)と決定し、細胞外遮断特性のphotoreleaseとチャネルのイオン選択性から得られたジャンプします。 ( - )チャネルブロッカーニフルム酸、5 - ニトロ-2 - (3 - phenylpropylamino)安息香酸(NPPB)と、膜の外側で適用DIDSつの電流の同様の阻害を引き起こした私たちは、Clがあることがわかった。陰イオン選択性は、外部イオン交換測定と電流の両方のタイプには、いくつかのアニオンの逆転電位は時間に依存していた、ことを明らかにした。さらに、我々はTMEM16b/anoctamin2は、主に嗅上皮の表面にアデニリルシクラーゼIIIと共局在している免疫組織化学によって確認した。現在の( - )したがって、我々は全体のセル構成で測定した電気生理学的特性は、主に似ており、さらにTMEM16b/anoctamin2は、ネイティブの嗅覚のCa(2 +)活性化Clの主要なサブユニットである可能性が高いことを示すと結論付けている。
Miniscrewsの安定性に影響を及ぼす要因。 300 Miniscrewsに関するretrospectiveな検討
European Journal of Orthodontics. Aug, 2011 | Pubmed ID: 20926556
本研究の目的は、V型チタンminiscrewの矯正負荷に対する反応、約3年間にわたり、調査した。このレトロスペクティブ研究では、プライベート·プラクティスで実施され、同じ外科医によって132の連続した患者(80人の女性、60.6パーセント)に挿入された300 miniscrewsの記録を評価した。患者の平均年齢は23.2歳であった。 miniscrewsの3つのタイプ(タイプ:直径1.5ミリメートル、長さ9ミリメートル、タイプB:直径1.5 mm、長さ11ミリメートル、およびタイプC:直径1.3ミリメートル、長さ11ミリメートル)を使用した。評価臨床的変数は、読み込み時間と歯肉と根との関係でminiscrewの場所が含まれています。別の変数と成功率は、カイ二乗またはフィッシャーの正確確率検定、適切なを使用して比較した。 81パーセント(243/300)の累積生存率が適用され、即時荷重で、付着歯肉に挿入さ1.3ミリメートル幅miniscrew最適な成功率は、Kaplan-Meier法解析を用いて発見されました。性別、ロード時間、歯肉や骨ローカリゼーション、およびminiscrewsの直径:Cox比例ハザード回帰は成功率とは、次のパラメータの間に有意差が認められた。臨床的に制御可能なパラメータを考慮し、この後ろ向き研究の範囲内で、1.3ミリメートルの直径miniscrewsは付着歯肉に挿入され、すぐにロードされ、最も予後良好であった。
若い患者における再生不良性下顎頭の矯正によって誘発される機能と固定成長:症例報告
International Orthodontics / Collège Européen D'orthodontie. Mar, 2011 | Pubmed ID: 21269897
顎関節形成不全は、顆の完全な欠如を特徴とする症状である。それは最も頻繁にそのような片側顔面萎縮症、トリー·コリンズやゴールデンなどのより複雑な症候群に関連付けられている稀な疾患である。本稿では、再生不良性左顎を持つ若い女性の患者(4.3年)のケースを提示します。最初に、咬合関係を改善するために下顎頭の成長と、第二に、固定のマルチブラケット治療とクラスIIのゴムひもを刺激する機能のアプライアンス:彼女は初期の二相治療を受けた。機能的な治療は、非遵守のために何年も続いた。中間のX線のコントロールは、(8.6歳で、10.4歳で)再生不良性顎の成長の改善が認められなかった。成長プロセスは、(10.6歳から始まる)は、固定矯正治療中に開始。治療の終わりに、患者は14歳のとき、左の顎の大きさはcontrolateralのそれと類似していた。以下、我々は治療法を説明し、議論する。
細胞プリオンタンパク質は、成体マウスの嗅神経細胞に発現されていますが、嗅覚伝達経路の初期のイベントに影響しない
Chemical Senses. Nov, 2011 | Pubmed ID: 21680753
細胞プリオンタンパク質(PrP(C))のコンフォメーションの変換は現在のプリオン病として知られている致命的な神経変性疾患の原因となるイベントとして認識されています。長期的な努力にもかかわらず、しかし、PRP(C)の生理的役割は依然として不明である。それは、PrP(C)は嗅上皮が、その正確な嗅覚ニューロン(OSNs)のローカライズはまだ議論されているを含む嗅覚系の様々な分野で表現されていることが報告されています。ここでは、免疫組織化学ツールを使用して、我々は別のPrP(C)の量を表現する大人のコンジェニックマウスの嗅上皮でのPrPの発現と局在(C)を再調査している、すなわち、野生型、プリオンノックアウト、トランスジェニックのPrP(C )を過剰発現する動物。我々は、細胞体、樹状突起と根尖層の低レベルで検出されている、PRP(C)はOSNsで表される、しかし、それが偏在されたことがわかった、より豊富に軸索インチ我々はまた別の刺激プロトコルを受ける3マウスラインの電気olfactogramsを比較することにより、匂い物質への嗅上皮の応答でのPrP(C)の関与について検討した。我々は、嗅上皮の早期のシグナル伝達活性のPrP(C)の直接作用を除外する前のレポートをサポートし、3のPrP遺伝子型との間に有意差を認めなかった。
Anoctamin 2/TMEM16B:嗅覚情報伝達におけるカルシウム活性化クロライドチャネル
Experimental Physiology. Feb, 2012 | Pubmed ID: 21890523
脊椎動物の嗅覚の伝達には、Ca(2 +)依存性Cl( - )流出が大幅に匂い応答を増幅します。嗅細胞の繊毛の受容体への付臭剤の結合は、環状ヌクレオチド依存性チャネルと繊毛にCAのエントリ(2 +)の開口部を含む伝達カスケードを活性化する。のCa(2 +)は、塩素を活性化 - ( - )を維持上昇、細胞内Clの存在下で、その電流(A)( - )濃度は、Clの流出生成イオンを脱分極を増幅します。 ( - )嗅覚の伝達に関与するチャネルをこのレビューでは、我々はanoctamin 2/TMEM16Bだけで、おそらくメイン、または、Caの成分(2 +)活性化Clであるという仮説を支持する証拠を要約しています。確かに、いくつかの研究室からの研究では、嗅細胞とanoctamin 2/TMEM16BでトランスフェクトしたHEK 293細胞内の電流の間に著しい機能的類似性があることを、anoctamin 2/TMEM16Bは嗅上皮の毛様体層に発現していることが示され、そのしている( - )現在のanoctamin 2/TMEM16Bためのノックアウトマウスは、任意の検出可能なのCa(2 +)活性化Clを示さなかった。 ( - )鋤鼻感覚ニューロンの伝達プロセスのチャネルと嗅覚でこれらのチャネルの生理的役割最後に、我々は、Caの関与(2 +)活性化Clを説明します。
