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Articles by Avijit Ray in JoVE
JoVE Immunology and Infection
마우스 복막 구멍 세포의 분리
BloodCenter of Wisconsin, Blood Research Institute
포유류의 복막 캐비티는 타고난 면역 반응에 중요한 다른 면역 세포 인구가 포함되어 있습니다. 효율적인 분리 방법은 이러한 세포의 생화 학적 및 기능적 분석이 필요합니다. 여기서 우리는 마우스의 복막 공동 세포의 격리를위한 포괄적인 방법을 제공합니다.
JoVE Immunology and Infection
형광 활성 세포 정렬 (외과)에 의해 특정 세포 인구의 정제
Blood Research Institute, BloodCenter of Wisconsin
세포 집단의 생물 학적 및 화학적 분석을 필요로하는 많은 과학적인 연구를 위해 세포는 순도 높은 상태에 있어야합니다. 형광 활성 세포 정렬 (외과)는 순수한 세포 인구를 얻을 수있는 우수한 방법입니다.
Other articles by Avijit Ray on PubMed
Macrophage는 CD80 Cd86의 시간 종속 및 선택적 식으로 단백질을 구분 하지 않는 Oligomer는에서 비 브리 오의 Cholerae Hemolysin 구별
Monomeric 및 oligomeric 형태의 브리 cholerae hemolysin (HlyA), 대상 진 핵 막에서 막 횡단 pentameric 보급 채널을 형성 하는 독 소의 손상을 막 oligomerization 동안 민감한 펩 티 드 채권의 마스킹 때문에 아마도 protease 민감성에 뚜렷한 차이 보여 줍니다. 이 작품에서 우리는 단백질을 단백질의 저항에 영향을 costimulatory, 분자 cd80과 CD86, 대 식 세포는 동일한 항 원에 노출에 식을 검사. Murine 복 강 대 식 세포 24h HlyA 모노 머와 부 화 후 cd80과 CD86 표현 했지만 HlyA 올리고로 치료 하면 costimulatory 분자를 표현 하는 실패 했습니다. HlyA 올리고 24 시간 후 costimulatory 분자를 표현 하는 실패 하 여 48 h 후 CD80 분자 macrophage에의 식을 나타냅니다 단백질 처리 cd80과 CD86 세포 표면에 표현에 결정적인 역할을 한다.
Shigella Dysenteriae의 Porin 수용 체 통행세 같이 2 및 MyD88 MRNA 수준 향상, 최대 조절 CD80 Murine Macrophage의 및 인터 루 킨-12의 출시를 유도 한다
Shigellosis에서 convalescing 환자의 세라 강력 하 게 반응 하 고 Shigella dysenteriae의 porin의 38000 다 단위체와 함께 구체적으로 1을 입력 합니다. 이후 인간, S. dysenteriae 유형 1의 유일한 자연 호스트 체액 성 면역 반응을 통해 단백질을 인식, 연구를 보조로 외부 멤브레인 표면에 노출 된 항 원에 큰 의미입니다. CD11b + 복 막 구멍의 치료 porin BALB/c 마우스의 (PerC) MPhi 세포 표면에 CD80 업으로 규제를 발견 하 고 CD86 식에 영향을 주지 않습니다 했다. CD80 표면 표현 하면 증가 있어 감마 인터페론 (IFN-감마) B7 패밀리의 B7-1 (CD80) 멤버의 선택적 규제를 지 원하는 존재. MPhi 인터 루 킨-12 (IL-12) porin 존재의 7.25 pg 발표. IFN-감마와 함께에서 단백질 증강 뿌리깊은 2.6-fold에 의해 IL-12의 출시. IL-12 릴리스 porin 중재 유도 Th1 유형 응답, 우선적으로 업 레 귤 레이 션 CD80 식의 인해 촉발 될 것으로 알려진에 따라서 영향을 미치는 것. 단백질에 의해 PerC Mphi의 치료 것 두 수용 체 통행세 같이 (TLR) 2, 골수성 차별화 요소에 대 한 88 (MyD88)에 의해 2-고 2.3 배 Mrna의 증가 각각 그 TLR2 강조 S. dysenteriae 유형 1 porin의 인식에 대 한 필수적 이다. S. dysenteriae 타입-1의 porin의 adjuvanticity의 메커니즘 이해 shigellosis에 대 한 더 나은 보조 제 개발 쪽으로 필요한 단계입니다.
업-레 귤 레이 션 CD80 CD86 마우스 Shigella Dysenteriae의 Porin 여 복 B 1 셀에 Iga의 수신자 같은 수용 체 2와 6 종속 이다
Shigella dysenteriae의 porin 유형 1 증가 수용 체 통행세 같이 (TLR) 2에 대 한 mRNA 수준 및 tlr6에 의해 1.5-와 2.9 배 각각, 복 강의 B-1a 및 연루 tlr2와 tlr6는 coexpression B-1b 셀 B 1 셀에 의해 porin의 인식에 대 한 조합 레 퍼 토리로 서 필수적입니다. TLRs 두 키 가운데 tlr2와 TLR4, 주로 대부분 TLR2 및 하지 TLR4 세균성 제품의 인식에 대 한 책임은 porin 인식에 참여 합니다. TLR4 식 남아 영향을 받지 않는 반면 TLR2 있어 B 1 셀 인구에 증가 했다. TLRs MyD88에 대 한 mRNA 외 응답 TLR 중재와 관련 된 이펙터 분자는 향상 1.8-fold porin의 활동에의 참여의 제안. 모두 B 1 셀 인구 2.4-fold 보다 이전 찾기 tlr2와 TLR6, 그 coexpression에 맞는 치료 되지 않는 제어 시그널링을 위한 강력한 NF kappaB 활성화 귀착되는 NF-kappaB, porin, 존재에 대 한 Mrna를 강력 하 게 표명 했다. C57BL/6 마우스와 C3H/HeJ 마우스의 B 1 셀 인구의 porin 치료 특히, 선택적으로 최대 레 귤 레이트 된 costimulatory 분자의 표현. CD80 식 CD86 있어 전적으로 B-1b 셀에 표현 된 반면 B-1a 셀에 강화 있어. Porin 유발 셀 C57BL/6 마우스에서 B 1 셀 인구에 Igm과 Iga의 표면 표현. C3H/HeJ, lipopolysaccharide 비 응답자 마우스는 단백질에 대 한 응답에서의 B 1 셀과 IgA 생성 용량, 점 막 면역 반응의 각 인 확인 됐다. Iga의 porin 중재 유도 2.4-인터 루 킨-6 B-1a 및 1b B 세포에 의해 증강 및 2.6-fold, 각각. 문화의 72 h anti-porin 수 그것을 확인 porin의 38 kDa 단위체에 바인딩할 발견 된 후 B 1a 및 1b B 세포 표면에 표현 하는 IgA IgA 항 체.
Shigella Dysenteriae의 Porin 마우스 복 B-2 세포와 면역 글로불린 M, 면역 글로불린 G2a 면역 글로불린 A.의 식을 유도의 수신자 같은 수용 체를 2와 6을 향상 시킵니다
각각 Shigella dysenteriae 타입-1 1.8-fold에 의해 TLR2 및 TLR6, 수신자 같은 수용 체에 대 한 mRNA 수준 증가와 2 중, porin, 복 막 구멍에 있는 B 2 셀 C57BL/6 마우스에서 그 연루 TLR2 co-expression와 TLR6 조합 레 퍼 토리 porin에 대 한 응답으로 발생 합니다. 두 키 TLRs tlr2와 TLR4, 대부분 세균성 제품의 인식에 대 한 책임 있는 가운데 혼자 TLR2 porin 인식에 참가 합니다. TLR4 식 남아 영향을 받지 않는 반면 TLR2 식 B 2 셀에 증가 했다. TLRs 외 골수성 차별화 요인 88 (MyD88), TLR 중재 응답과 관련 된 이펙터 분자에 대 한 mRNA porin의 활동에 참여 하는 제안 두 가지에 의해 향상 되었습니다. B 2 셀 신호 분자 핵 인자-카파 B (NF kappaB), porin 존재의 mRNA 표현 1.8-fold 증가 보였다. B 2 셀의 porin 치료 선택적으로 최대 레 귤 레이트 된 costimulatory 분자, CD86, 표현으로 4.4-fold. Porin 면역 글로불린 (Ig) M, IgG 서브 클래스 중에서 우선적으로 IgG2a 및 B 2 셀에 Iga의 세포 표면 식 유도. 2.7-인터 루 킨-6 B 2 셀에 IgG2a Iga의 porin 중재 inductions 증강 했다 고 하면, 각각.
규정 B 셀 실험적인 자기 면역 Encephalomyelitis 및 다 발성 경화 증 자기 면역 중재 염증의 심각도 제어에 대 한 케이스
다 발성 경화 증 (MS) T 셀 중재 면역 질환, 염증 성 병 변/플 라크 단 세포 침투, demyelination 및 중앙 신경 시스템 (CNS) 내의 axonal 피해와 관련 된 존재 결과 간주 됩니다. FDA 승인까지 MS에서 요법 면역 응답의 변조에 의해 기능을 주로 생각 된다. 이후 면역 응답 면역 시스템의 많은 무기 필요, MS 치료제의 행동의 직접적인 세포 메커니즘 확실히 알려져 있지 않습니다. Ms, 실험적인 자기 면역 encephalomyelitis (EAE) 마우스 모델 MS 약물의 행동의 메커니즘을 파악 하는 수단이 되었습니다. 또한, EAE는 CNS autoimmunity 면역 시스템의 개별 구성 요소의 기여를 널리 사용 되었습니다. 이와 관련, B 셀 EAE의 역할 유전자 제거 및 B 세포 타겟 단일 클론 체 (mAb) (안티-CD20)와 고갈에 따라 B 셀에 결핍 생쥐에서 공부 하고있다. 모두 전략 B 세포 조절 EAE 임상 질병의 범위와 그들의 부재에 질병 악화 표명 했다. 따라서 "규정 B 셀"의 새로운 인구 떠오르고 있다. 규제 B 세포의 기능에의 한 reoccurring 구성 요소는 IL-10, 강력한 항 염증 제 속성을 가진 다 면 발현 성 cytokine 생산. B 세포 소모 또한 특정 항 체 생산에서 B 세포 EAE 병원 성 역할 재생 표시 된. MAb CD20 사용 하 여 MS에 b 세포 고갈 (rituximab) 유망한 결과 보이고 있다. 이 검토에서 MS EAE 연구 및 치료제를 사용 하는 B 세포를 대상으로 하는 임상 시험에서 얻은 지식에서 그림에서 B 세포의 역할에 현재 생각을 하겠습니다.
Cannabinoid 수용 체 2 유도 및 한계 영역 B 혈통 세포의 보존 및 효율적 T 독립적인 면역 반응에 대 한 중요 하다
2 (CB2)와 그것의 원리 리간드 2-archidonoylglycerol 중요 한 역할 endocannabinoid 시스템 cannabinoid 수용 체와 면역 반응의 중요 한 레 귤 레이 터로 떠오르고 있다. CB2 B 세포 기능을 조절 하는 방법을 그들은 면역 세포 하위 집합 중에서 최고 수준의 CB2 익스프레스에 명확 하지 않습니다. 이 연구에서 우리는 CB2 불충분 한 쥐 한계 영역 (MZ) B 세포 및 그들의 즉각적인 전조 과도 2 MZ 전조의 절대 수에서 상당한 감소를가지고 보여줍니다. CB2(-/-) 쥐의 MZ 혈통 셀 손실 B 세포 골 수 키메라를 사용 하 여 기본 표시는 하 고 B 세포 표현 형, 확산, 그리고 Ig 생산에 의해 확인 된 개발 또는 기능적 결함 때문이 아니었다. 또한, CB2(-/-) B 세포 그들의 apoptosis, 세포 회전율 및 BCR 와일드 형식과 유사 했다 및 노치 2 신호. 우리는 다음 CB2(-/-) MZ 혈통 B 세포를 MZ에 유도에 비효율적 이었다고 하 고 후속 보존 cb2에 의해 규제 또한 되었다 시연 했다. CB2(-/-) 쥐 T-독립 Ags 접종 Ag 특정 IgM 훨씬 적은 생산. 이 연구 CB2 긍정적으로 지역화를 제어 하 고는 MZ MZ 혈통 셀 위치 T 독립적인 면역 반응을 조절 하는 방법을 보여 줍니다.
