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Articles by Chiara Cianciolo Cosentino in JoVE
JoVE General
Microiniezioni endovenosa di larve Zebrafish allo Studio danno renale acuto
1Department of Developmental Biology, University of Pittsburgh, 2Department of Biological Sciences, University of Pittsburgh, 3Department of Medicine and Genetics, Harvard Medical School
Descriviamo una tecnica di microinjecting l'aminoglicoside, gentamicina, in 2 giorni dopo fetilization (DPF) larve di zebrafish per indurre danno renale acuto (AKI). Abbiamo anche descritto un metodo per intero immunoistochimica montaggio, plastica embedding e sezionamento delle larve di zebrafish per visualizzare il danno mediato AKI.
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Inibizione Di Deacetylase Dell'istone Si Espande La Popolazione Di Cellule Progenitrici Renali
Uno dei primi tratti distintivi di rigenerazione del rene è la riattivazione di geni normalmente richiesto durante l'organogenesi. Identificazione delle sostanze chimiche con il potenziale per migliorare questa riattivazione terapeuticamente potrebbe promuovere la rigenerazione del rene. Qui, abbiamo scoperto che 4-(phenylthio) Acidi butanoici (PTBA) espanse i domini di espressione di marcatori molecolari di organogenesi renale nello zebrafish. PTBA esibisce somiglianza strutturale e funzionale per l'istone deacetylase (HDAC) inibitori 4-phenylbutanoic acido e trichostatin A; il trattamento con tali inibitori HDAC ampliato anche la popolazione di cellule progenitrici renali. Analisi in vitro e in vivo hanno confermato che PTBA funzioni come un inibitore dell'attività HDAC. Inoltre, espansione di cellule progenitrici renali PTBA-mediata necessaria segnalazione acido retinoico. In sintesi, questi risultati supportano un link meccanicistico tra cellule progenitrici renali, HDAC e il percorso di retinoidi. Se detiene PTBA promessa come un agente terapeutico per promuovere la rigenerazione renale richiede ulteriore studio.
Lhx1 è Necessaria Per La Specifica Del Campo Delle Cellule Progenitrici Renali
Nell'embrione di vertebrati, il rene è derivato dal mesoderma intermedio. Il LIM-classe homeobox transcription factor lhx1 è espresso all'inizio del mesoderma intermedio ed è uno dei geni primi di essere espressi nel mesenchima nephric. In questo studio, abbiamo studiato il ruolo di Lhx1 nella specifica del campo rene con sovraesprimono relativa o lesive lhx1 in embrioni di Xenopus o che riducono lo strato di lhx1 in un sistema di coltura explant. Con sovraesprimono relativa forma costitutivamente attivo di Lhx1, abbiamo stabilito la capacità di espandere il campo rene durante la fase di specificazione dell'organogenesi renale. Inoltre, la capacità di Lhx1 di espandere il campo rene diminuisce come transizioni organogenesi renale per la fase di morfogenesi. In un set di esperimenti, abbiamo determinato che gli embrioni impoveriti di lhx1, mostrano una perdita quasi completa del campo renale. Utilizzando un sistema di coltura explant per indurre il tessuto renale, abbiamo confermato che espressione di geni da entrambe le strutture renali prossimali e distali è influenzato dall'assenza di lhx1. Presi nel loro insieme i nostri risultati dimostrano un ruolo essenziale per Lhx1 nella Guida specifica del campo intero Rene dal mesoderma intermedio.
Lo Sviluppo Del Rene Zebrafish: Scienza Di Base Alla Ricerca Traslazionale
Il Danio rerio è diventato un sistema significativo modello per studiare l'organogenesi renale e malattia, così come per la ricerca di nuove terapie, a causa della semplicità strutturale e funzionale del rene embrionale. Incursioni negli Stati natura e malattia di rene-correlati ciliopatie e danno renale acuto (AKI) sono state avanzate dagli studi di zebrafish. Questo organismo modello è stato determinante nell'analisi della funzione del gene mutante per malattia umana rispetto ciliopatie. Inoltre, nel campo AKI, recenti lavori in the zebrafish ha individuato una cellula renali progenitrici (staminali) bona fide zebrafish adulto che è richiesta per neo-nephrogenesis, durante il normale ciclo di vita e in risposta al danno renale. Presi insieme, questi studi solidificano il zebrafish come sistema di modello di successo per studiare l'ampio spettro di ciliopatie e AKI che colpiscono milioni di esseri umani in tutto il mondo e puntare a un futuro molto promettente di zebrafish drug discovery. L'enfasi di questa recensione sarà il ruolo di the zebrafish come modello per ciliopatie correlati a rene umano e AKI, e come la comprensione di queste patologie complesse è essere promosso da questo minuscolo teleostei.
