JoVE Bioengineering
Robert DeRose1, Christopher Pohlmeyer1, Nobuhiro Umeda1,2, Tasuku Ueno1,2, Tetsuo Nagano2, Scot Kuo1,3, Takanari Inoue1
1Department of Cell Biology, Center for Cell Dynamics, Johns Hopkins University, 2Graduate School of Pharmaceutical Sciences, University of Tokyo, 3Biomedical Engineering, Johns Hopkins University
被描述为轻小GTPase活性的时空控制的方法。这种方法是基于FKBP-FRB雷帕霉素诱导的异二聚体和照片囚禁系统。优化的光照射,使时空,时间控制在亚细胞水平的小GTP酶激活。
Journal of the American Chemical Society. Jan, 2011 | Pubmed ID: 21142151
我们开发了一种新的方法 spatiotemporally 控制信号分子的活动。一种新合成的 photocaged 雷帕霉素衍生物诱导经紫外线照射 FKBP (FK 506 结合蛋白) 和联邦储备委员会 (FKBP-雷帕霉素结合蛋白) 的二聚反应迅速。此系统与空间密闭的紫外线照射,我们实现了 subcellularly 本地化的激活的 Rac,小蛋白的成员。我们的技术提供了强大动态胞内信号事件的研究方法。
Science Signaling. 2011 | Pubmed ID: 22169478
一组有限的磷脂酰肌醇膜脂调节多种细胞功能包括增殖、 分化和迁移。我们开发了基于雷帕霉素诱导蛋白二聚反应迅速改变细胞膜磷脂酰肌醇 4,5-二磷酸 [PI(4,5)P(2)] 的浓度的两种技术。首先,我们使用一种膜 recruitable PI (4) P 5-激酶的形式,增加 PI(4,5)P(2) 合成磷脂酰肌醇 4-磷酸 [PI (4) P] 从和发现 COS 7、 HeLa、 人胚肾 293 细胞形成的称为肌动蛋白彗星的能动性的肌动蛋白丝束。相比之下,第二种方法,而无需占用 (4) P PI 增加 PI(4,5)P(2) 的浓度诱导膜褶边。这些不同的表型被介导 dynamin 介导的水疱贩运和小型鸟苷 triphosphatases Rac 和 RhoA 之间的相互抑制串扰。我们的研究结果表明对肌动蛋白重组 PI(4,5)P(2) 的影响取决于大量的其他肌醇 PI (4) 体育等因此,组合调控的磷脂酰肌醇浓度可能有助于磷脂酰肌醇功能的多样性。