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 JoVE General

Utilizando el sistema de fraccionamiento GELFREE 8100 de peso molecular basado en Fraccionamiento con la recuperación de la fase líquida


JoVE 1842 12/03/2009

Research and Development, Protein Discovery, Inc.

El video que acompaña describe el uso del sistema de fraccionamiento GELFREE 8100, las particiones que las muestras de proteínas complejas sobre la base del peso molecular y se recupera la fracción en fase líquida. El video describe cómo funciona la tecnología, cómo se utiliza, y proporciona los datos resultantes, con el análisis de electroforesis en gel de poliacrilamida de homogeneizado fraccionada hígado de bovino.

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Muestreo Directo Y Análisis De Tarjetas De Extracción En Fase Sólida Usando Una Extracción Automatizada De Líquido Superficial Nanoelectrospray Sistema De Análisis De Espectrometría De Masas

Superficie de extracción líquido directo basado en muestreo, una técnica demostrada previamente con flujo continuo y una superficie de microjunction líquido de pipeta autónoma muestreo sondas, recientemente se ha implementado como un modo de análisis de superficies (LESA) extracción de líquido en un sistema de infusión comercialmente disponibles basadas en el chip nanoelectrospray ionización (nanoESI). En el presente documento, el modo LESA fue aplicado al análisis de las tarjetas por encargo extracción en fase sólida (SPE) formato de 96 pocillos, con cada pozo que consiste en un 1 o un 2 mm diámetro monolítica hidrofóbica fase estacionaria. Estos pozos de sustrato fueron condicionados, cargados con uno o varios componentes de mezclas acuosas y leídos usando el sistema comercial nanoESI acoplado a un espectrómetro de masas de triple cuadrupolo/lineal trampa de iones de híbrido o un espectrómetro de masas de trampa de iones lineal. Las condiciones de extracción, incluyendo composición solvente de extracción/nanoESI, volumen y tiempos de parada, se optimizaron en el análisis de compuestos específicos. Límite de detección y cuantificación, así como figuras de reproducibilidad del análisis de mérito se midieron. Se obtuvieron datos de calibración para propranolol utilizando un patrón interno deuterado que demostró la linealidad y reproducibilidad. Se demostró un aumento de 10 x en señal y limpieza de micromolar angiotensina II de una solución salina concentrada. Además, una mezcla de herbicida multicomponente en concentraciones del ppb se analizó utilizando espectros MS(3) para la identificación de compuestos en presencia de interferencias isobáricos.

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