Translate this page to:
Italian
In JoVE (1)
Other Publications (2)
Automatic Translation
This translation into Italian was automatically generated.
English Version | Other Languages
Articles by Cynthia L. Montana in JoVE
JoVE Neuroscience
Quantificare le attività di Cis-Regolamentazione Elementi nella retina di topo Elettroporazione Espianto
Department of Pathology and Immunology, Washington University School of Medicine
Questo protocollo descrive un modo semplice ed economico per quantificare l'attività del cis-elementi normativi (ad esempio, enhancer / promoter), nel vivere retine del mouse tramite elettroporazione espianto. Preparazione di analisi del DNA, la dissezione della retina, elettroporazione, cultura espianto della retina, e post-fissazione e la quantificazione sono descritti.
Other articles by Cynthia L. Montana on PubMed
Malattie Ereditarie Dei Fotorecettori E Prospettive Per La Terapia Genica
Le cellule fotorecettrici della retina sono soggette a una vasta gamma di malattie genetiche. Questa recensione riassume conoscenze attuali per quanto riguarda un importante gruppo di malattie della retina, causata da mutazioni in geni arricchita di fotorecettori. Inoltre, è descritto il progresso verso il trattamento di una varietà di queste malattie nei modelli animali tramite terapia genica virus adeno-associati. Anche se nessuna sperimentazione umana sono state avviate ancora per trattare le malattie causate da mutazioni in geni arricchita di fotorecettori, c'è una grande quantità di ottimismo per quanto riguarda le prospettive di trattamento di queste malattie mediante terapia genica virus adeno-associati.
Regolazione Trascrizionale Di Retina Neurale Leucine Zipper (Nrl), Un Determinante Di Destino Delle Cellule Fotorecettrici
La trascrizione fattore retina neurale leucine zipper (Nrl) è un critico determinante del destino di cellule fotorecettrici rod e un regolatore chiave di differenziazione di asta. Precursori di rod NRL(-/-) non riescono a girare su geni rod e invece differenziare come coni. Inoltre, mutazioni NRL negli esseri umani causano la retinite pigmentosa. Nonostante l'importanza clinica e dello sviluppo di questo gene, poco si sa circa la regolazione trascrizionale di Nrl stessa. In questo studio, abbiamo cercato di definire i fattori di cis - e trans-acting responsabili dell'iniziazione e la manutenzione di Nrl trascrizione nella retina del mouse. Utilizzando un quantitativo della retina espianto elettroporazione topo, abbiamo scoperto una regione coppia filogeneticamente conservate, 30-base immediatamente a monte del sito di inizio trascrizione che è necessario per l'attività di promotore Nrl. Questa regione contiene siti di legame per i fattori di trascrizione retinica CRX, OTX2 e RORβ, e mutazioni puntiformi in questi siti abolire completamente attività di promotore in retine vivente. Gel-shift esperimenti mostrano che CRX, OTX2 e RORβ possibile associare alla regione critica in vitro, mentre gli esperimenti ChIP dimostrano associazione di CRX e OTX2 nella regione critica in vivo. Così, i nostri risultati indicano che, CRX, OTX2 e RORβ direttamente regolano Nrl trascrizione legandosi ai siti critici all'interno del promotore Nrl. Vi proponiamo un modello in cui espressione Nrl è iniziata principalmente da OTX2 e RORβ e successivamente mantenuto a livelli elevati di CRX e RORβ.
