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Articles by Finn Hung in JoVE
JoVE Clinical and Translational Medicine
Ein automatisiertes Hochdurchsatz-Plattform für die Entwicklung von Manufacturing Zelllinien für Protein Therapeutics
Merck Research Laboratory, Merck & Co., Inc
Ein High-Throughput-, automatisierten Plattform zur Herstellung von Zelllinien-Entwicklung für die Herstellung von Protein-Therapeutika wird beschrieben. Implementierung von BD FACS Aria Cell Sorter hat CloneSelect Imager und Tecan Freedom EVO Liquid-Handling-System deutlich erhöht Verarbeitungskapazität in Zelllinien-Entwicklung mit verbesserten Zell-Linie Qualität und hohe Reproduzierbarkeit nachgewiesen.
Other articles by Finn Hung on PubMed
Reinigung Von Antikörper-Heteropolymers Mit Hydrophobe Interaktion Chromatographie
Ein Heteropolymer (HP) ist eine einzigartige dual Antikörper konjugiert bestehend aus bestimmten, chemisch vernetzte monoklonale Antikörper (mAbs). In dieser Studie haben wir gezeigt, dass HPs mit hydrophobe Interaktion Chromatographie (HIC) gereinigt werden können. Zwei Propyl HIC Harze; [PolyPropyl A und EMD Fractogel Propyl (S)] wurden in dieser Studie evaluiert. Phosphat-Puffer, pH 6.5 mit Ammoniumsulfat oder Natriumsulfat dienten die HP an die Spalte zu binden. Eine absteigende Sulfat Farbverlauf oder einen Schritt Verlauf wurde verwendet, um die gebundenen HP-Arten aus der Spalte zu eluieren. Das Reaktionsgemisch HP enthält normalerweise mehrere konjugierte HP-Arten sowie Spurenverunreinigungen Monomer mAbs. Konjugierte HP-Produkt wurde erfolgreich von Spurenverunreinigungen Antikörper Monomere mit beiden Propyl-Harzen mit Puffer mit Ammonsulfat getrennt. Es gab keine Monomer-Trennung von HP mit Puffer mit Natriumsulfat. Die Reinigungsverfahren, die in dieser Studie vorgestellt ermöglicht die Kreuz-chromosomale Antikörper, ohne an das Harz gebunden wird, während die vernetzte Antikörper (das HP-Produkt) an die Spalte gebunden anschließend durch eine Verringerung der Ammonium-Sulfat-Konzentration im laufenden Puffer eluiert wurden durch die Spalte übergeben. HP Produkt wurde vom freien mAbs präparative und Analytische Waage Propyl HIC Harze mit effizient abgetrennt.
Stabilität Und Antikörper-Produktion Von MRNA in CHO-Zellen: Verbesserung Durch Gen-Optimierung
Die Produktivität der Stabil transfizierte Zellinien ist von entscheidender Bedeutung für die Herstellung von therapeutischen Proteinen. Verschiedene Methoden wurden erfolgreich umgesetzt, um die Produktionsleistung der Säugetier-Zellkulturen zu erhöhen. Zunehmender Beweis schlägt die Optimierung im Gen Sequenzen eines Ausdrucks Vektor kann bestimmte Zelle Zeile Ausbeute des rekombinanten Proteins zu verbessern. Hier zeigen wir, dass dieses Gen-Optimierung Antikörperproduktion in chinesischen Hamsterzellen Eierstock erheblich verbessert. Beim gen-Optimierung auf die schwere und leichte Kette Gene ein therapeutischer Antikörper angewendet wurde, beobachteten wir erhöhte Antikörper-Produktion in transiente Transfektion. Erhöhten schwere Kette mRNA-Ebene war verbunden mit der Zunahme der Produktion von Antikörpern. Weitere Analyse vorgeschlagen, dass der erhöhte Antikörper-Ausdruck auf erhöhte mRNA Stabilität aus gen Optimierung zurückzuführen ist. Gen Optimierung führte zu erhöhte Antikörper-Produktion in stabile Klone.
