JoVE General
Sean R. Porazinski, Huijia Wang, Makoto Furutani-Seiki
Centre for Regenerative Medicine, Department of Biology and Biochemistry, University of Bath
鳉和斑马鱼是脊椎动物的基因组功能基因夹层互补。该协议凸显成功鳉胚胎微量注射,在实验室中使用的青鳉和斑马鱼的胚胎和遗传分析的重要技术关键点。
JoVE General
Sean R. Porazinski, Huijia Wang, Makoto Furutani-Seiki
Centre for Regenerative Medicine, Department of Biology and Biochemistry, University of Bath
由于硬的蛋壳和软的胚胎,操纵鳉胚胎是比在斑马鱼中更多地参与。该视频显示一步一步的程序,包括dechorionation如何操作鳉胚胎,在琼脂糖凝胶成像和细胞移植嵌合体的生产安装。这些程序是必不可少的,在实验室中使用鳉和斑马鱼为脊椎动物的基因组功能基因清扫充分利用其互补性的特点。
Human Molecular Genetics. May, 2011 | Pubmed ID: 21389084
芽豪放的有关苯并咪唑 1 (BUBR1) 是一个中央主轴大会检查点的分子。豪放的咪 1 同系物 beta 基因 BUBR1 萌芽胚系突变导致过早的染色单体分离 (杂色马赛克非整倍体) [PC (MVA)] 综合征,其特点是宪制非整倍体和童年癌症高风险。综合征患者常常形成饰面沃克复杂和多囊肾脏 ;这意味着 BUBR1 的形态发生中的关键作用。但是,了解甚少 BUBR1 以外有丝分裂控制的功能。在这里,我们报告 BUBR1 是原发性纤毛形成的必要条件和 PC (MVA) 综合征因此是一种新型的 ciliopathy。Morpholino 组合式的 bubr1 次鱼类也造成睫功能障碍特点是小脑发展和胚胎的摄动的左右不对称的缺陷。生化分析表明 BUBR1 是 G0 期细胞分裂周期蛋白 20 介导泛素蛋白酶体降解的必要条件,并保持后期促进规范的原煤 ciliogenesis 为理想水平的复杂/cyclosome-CDC20 同源 1 活动。
Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2011 | Pubmed ID: 21805266
次,对镧,小蛋淡水鱼,是三个的脊椎动物模式生物的全基因组表型驱动突变屏幕进行了之一。尽管大型屏幕斑马鱼的数量,在次类似大型屏幕中确定了一大批新的不同表型突变体。这观察表型的差异是由于具有独特的遗传、 进化的生物属性的两个物种。两个遗传模型共享整个基因组重复事件,tetrapods ;但是,每个已独立专门或失去功能的两个 paralogues 之一。这两种鱼类作为简单的比较表型的遗传系统相互补充、 便于使用的相同的技术和简单和廉价畜牧业的突变体的肩并肩分析使这些小的硬骨鱼类中组合功能相当强大。此外,两地有草案基因组序列和生物信息学工具可用,进一步促进包括途径全基因组的遗传剖析。基因驱动的方法来生成基因敲除突变体的鱼模型,与两条鱼模型补充鼠标在基因夹层脊椎动物基因组的功能。外部胚胎发生和透明的鱼胚胎允许系统隔离的胚胎致死突变,突变体哺乳动物屏幕中最容易实现的目标。这一章将描述如何使用次和斑马鱼几乎作为一个物种在实验室中,重点放在次和突出次和斑马鱼制度之间的差异。