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Articles by Jason Letourneau in JoVE

 JoVE Immunology and Infection

In-vitro-Assay der bakteriellen Adhäsion auf Mammalian Epithelzellen


JoVE 2783 5/16/2011

Universite de Montreal, Groupe de Recherche sur les Maladies Infectieuses du Porc GREMIP, Faculte de medecine veterinaire

Dieses Protokoll ist eine einfache bakterielle Adhäsion Assay aus der Zählung die Zahl der bakteriellen Kolonie bildende Einheiten, die auf kultivierten Zellen eingehalten werden. Der Test ist robust, studierte unabhängig von der Adhäsin und zahlreiche Variationen sind in den meisten Labors arbeiten bakterielle Pathogenese.

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Phänotypische Charakterisierung Und Funktionelle Analyse Der Menschlichen Tumor Immun Infiltration Nach Mechanische Und Enzymatische Aufschlüsselung

Multiparameter-Flow Cytometry-Analyse ist eine zuverlässige Methode für die phänotypische und Funktionelle Charakterisierung des Tumors infiltrierende Immunzellen (TIIC). Die Isolation der Leukozyten von soliden Tumoren infiltrieren kann durch verschiedene Methoden erreicht werden, die sowohl mechanische als auch enzymatische sein kann; Allerdings, können diese Methoden Zellbiologie ändern. Das Ziel dieser Studie war es, die Auswirkungen der drei Gewebe Entzweiung Techniken auf TIIC Biologie in Brust, Niere und Lunge Tumor Proben zu vergleichen. Wir haben daher zwei enzymatische Behandlungen, die mit entweder Collagenase Typ IA allein oder in Kombination mit Collagenase Typ IV und DNase ich Typ II und einem mechanischen System (Medimachine ™) verglichen. Wir evaluieren die Wirkung der Behandlungen auf Zellviabilität, Oberfläche Markierung Integrität und proliferative Kapazität. Wir zeigen, dass die Zellviabilität durch Behandlungen nicht wesentlich verändert wurde. Jedoch sank die enzymatische Behandlungen Zellvermehrung; speziell Kolagenasen und DNase provozierte einen beträchtlicher Rückgang der Erkennung der Oberfläche Marker wie CD4, CD8, CD45RA und Verwendung CD14, darauf hinweist, dass die phänotypische Studien beschäftigt diese Techniken betroffen sein könnten. Abschließend erscheint mechanische Gewebe Untergliederung von Medimachine ™ optimal, phänotypische und funktionelle TIIC Funktionen aufrechtzuerhalten.

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