Analyse Verschiedener Promotor Zur Effizienten Expression Des Transgens in Embryonalen Stammzellen Der Maus-Zelllinien

Stem Cells (Dayton, Ohio). 2002  |  Pubmed ID: 11897870

Gentechnische Veränderung Von Embryonalen Stammzellen Der Maus Durch Nurr1 Verbessert Die Differenzierung Und Reifung in Dopaminergen Neuronen

The European Journal of Neuroscience. Nov, 2002  |  Pubmed ID: 12453046

Spezifischen MicroRNAs Modulieren Embryonale Stammzellen Cell-derived Neurogenese

Stem Cells (Dayton, Ohio). Apr, 2006  |  Pubmed ID: 16357340

MicroRNAs (MiRNAs) sind vor kurzem entdeckten kleinen nicht-kodierenden Transkripte mit einem breiten Spektrum von Funktionen, die vor allem bei Wirbellosen beschrieben. Als Posttranskriptionale Regulatoren der Genexpression trigger MiRNAs Ziel mRNA Abbau oder translatorische Repression. Obwohl Hunderte von MiRNAs worden, aus einer Vielzahl von Säugetier-Gewebe geklont haben und Zellen und mehrere mRNA-Ziele vorausgesagt, wenig wurden bekannt über ihre Funktionen. Bisher wurde eine Rolle von MiRNA nur bei beschrieben hämatopoetischen, adipocytic, und Muskel Differenzierung; Regelung der Insulin-Sekretion; und potenziell Regulierung von Krebswachstum. Hier beschreiben wir, MiRNA Expression profiling in der Maus embryonalen Stammzellen (ES) Zelle-abgeleitete Neurogenese in-vitro- und zeigen, dass eine Reihe von MiRNAs während der Differenzierung der neuronalen Vorläuferzellen zu Neuronen und Astrozyten gleichzeitig co-induced sind. Es gab eine klare Korrelation zwischen MiRNA Ausdruck Profilen in ES Cell-derived Neurogenese in-vitro- und in-vivo embryonal Neurogenese. Mit Gain of Function und Verlust der Funktion Ansätze, zeigen wir, dass Gehirn-spezifische MiR-124a und MiR-9 Moleküle neuronale Übertragungslinie Differenzierung in den ES Zellen abgeleiteten Kulturen beeinflussen. Darüber hinaus wir nachweisen, dass Signal-Wandler und Aktivator der Transkription (STAT) 3, Mitglied der STAT Familie Weg, ist die Funktion dieser MiRNAs beteiligt. Wir schließen, dass unterschiedliche MiRNAs bei der Ermittlung des neuronalen Schicksale in ES Zelldifferenzierung eine funktionale Rolle spielen.

Transient D1 Dopamin-Rezeptor Ausdruck Am Präfrontalen Kortex-Projektion Neuronen: Beziehung Zu Verstärkte Motivational Hervortreten Des Drogenkonsums Hinweise in Der Adoleszenz

The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Mar, 2008  |  Pubmed ID: 18322084

Die Pubertät ist eine Übergangszeit während der Entwicklung, die eine größere Wahrscheinlichkeit der sucht nach Drogen als jedem anderen Alter zugeordnet ist. Im präfrontalen Kortex (PFC) vermitteln D(1) Dopamin-Rezeptoren motivational hervortreten Namensnennung, die sucht eine Rolle spielt. Hier untersuchten wir die Beziehung der altersbedingten D(1) Dopamin-Rezeptor-Ausdruck in der PFC mit der Reifung von Kokain Konditionierung zu platzieren. Konfokale Mikroskopie ergab, dass retrogradely protokollierte kortikale Ausgabeneuronen des Nucleus Accumbens höhere D(1) Rezeptoren während der Adoleszenz im Vergleich mit jüngeren und älteren Altersgruppen schnelles. D(1) Ausdruck ändert sich nicht auf GABAergic Interneuronen über Alter. Jugendlichen Unterschiede in D(1) Ausdruck treten unabhängig von kortikalen Accumbens-Konnektivität, die durch Erwachsensein wuchert. Verhalten, sind die Heranwachsende Ratten empfindlicher auf Kokain-Platz, die Klimaanlage als jüngere und ältere Ratten. Microinjections des D(1) Antagonisten SCH23390 in der PFC blockierte jedoch Jugendlichen statt "Einstellungen", während Microinjections von D(1) Agonisten Dosis-abhängige Einstellungen für Kokain-assoziierte-Umgebungen, die bisher nicht von den Jungtieren bevorzugt gestiegen. Diese Ergebnisse legen nahe, dass der erhöhte Ausdruck D(1) Rezeptoren auf kortikale Accumbens Projektionen helfen kann erhöhten Empfindlichkeit, umweltrelevante und Suchtverhalten in der Pubertät, zu erklären, während der Mangel an D 1-Ausdrücken Projektionen Risiko in Jungfische reduzieren kann.

Juvenile Methylphenidat Moduliert Belohnung-bezogene Verhaltensweisen Und Hirndurchblutung Durch Eine Verringerung Der Kortikale D3-Rezeptoren

The European Journal of Neuroscience. Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18588536

Aufmerksamkeits-Defizit-Hyperaktivität-Störung wird mit reduzierten kortikale Durchblutung, die mit der Gefährdung der Psychostimulans Methylphenidat (MPH) reversibel ist. D3-Dopamin-Rezeptoren modulieren Stimulans-induzierte Veränderungen im Blutfluss und stehen im Zusammenhang mit der Belohnung, die Verarbeitung im jungen Erwachsenenalter, aber ihre Rolle in der dauerhaften Effekte von MPH während der Entwicklung ist nicht bekannt. Ratten erhielten Fahrzeug (VEH) oder MPH (2 mg/kg zwischen postnatalen Tagen 20-35) und nach MPH Herausforderung und mRNA Ausdruck Niveaus von Dopamin-Rezeptoren im jungen Erwachsenenalter für regionale zerebrale Blutvolumen (rCBV) bewertet. Um die Beteiligung der D3-Rezeptor-Sonde juvenile Themen waren ausgesetzt VEH, MPH, die D3-lieber Agonist +/-7-OHDPAT (0,3 mg/kg), die D3-Antagonist-Nafadotride (Naf; 0,05 oder 0,5-5,0 mg/kg) oder einer Naf (0,05 mg/kg) / MPH-Kombination, biochemisch und behaviorally und bewertet. Juvenile MPH Exposition erhöht MPH-induzierte rCBV im Cingulum und medialen präfrontalen Kortex und Thalamus im Erwachsenenalter. Verhalten, juvenile MPH - oder +/-7-OHDPAT-gemachten Themen demonstriert eine Abneigung gegen Kokain-assoziierte Umgebungen, die durch juvenile Co-treatment MPH und Naf oder mit Erwachsenen kortikale Microinjections von +/-7-OHDPAT verhindert worden sei. Kortikale D3 mRNA-Stufen deutlich verringerten sich um 23,8 +/-6,7 % in MPH-behandelten Themen und normalisiert mit Naf/MPH-Kombinationsbehandlung, ohne Änderung in den anderen Dopamin-Rezeptoren. Erweiterte kortikale Reaktion auf Psychostimulanzien auftreten durch eine geringere D3-Rezeptoren, die Droge-suchenden Verhalten wiederum reduziert. Diese Daten belegen lang postnatale sensibler als juvenile MPH Exposition kortikalen Entwicklung ändern kann.

Parthenogenetic Dopamin-Neuronen Aus Embryonalen Stammzellen Primas Wiederherstellen Funktion Bei Experimentellen Parkinson-Krankheit

Brain : a Journal of Neurology. Aug, 2008  |  Pubmed ID: 18669499

Die Identität und die funktionale Potential der Dopamin-Neuronen abgeleitet in Vitro aus embryonalen Stammzellen sind entscheidend für die Entwicklung einer Stammzell-basierten-Ersatz-Therapie für Morbus Parkinson. Eine parthenogenetic Primas embryonalen Stammzellen Zeile verwenden, haben wir Dopamin-Neuronen generiert, die persistente Ausdruck des Mittelhirn regionaler und zellspezifische Transkriptionsfaktoren, anzuzeigen, die ihre richtige Identität schaffen und für ihr Überleben ermöglichen. Wir zeigen hier, dass die Transplantation von parthenogenetic Dopamin-Neuronen Motorik in Hemi-Parkinson, 6-hydroxy-Dopamin-lesioned Ratten wiederherstellt. Exposition gegenüber Wnt5a und Fibroblasten-Wachstumsfaktoren (FGF) 20 und 2 in der Endphase der in-vitro-Differenzierung verbessert das Überleben von Dopamin-Neuronen und dementsprechend das Ausmaß der motorischen Wiederherstellung der transplantierten Tiere. Wichtig ist für die zukünftige Entwicklung der klinischen Anwendungen Dopamin-Neuronen waren zum Zeitpunkt der Transplantation post-mitotic, und es gab keine Tumorbildung. Diese Daten liefern Beweis für das Konzept, dass parthenogenetic Stammzellen eine funktionale Neuronen für therapeutische Anwendungen geeignet sind.

Gene Expression Profiling Der Substantia Nigra Dopamin-Neuronen: Weitere Einblicke in Die Parkinson-Krankheit Pathologie

Brain : a Journal of Neurology. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19052140

Morbus Parkinson wird durch einen progressiven Verlust der Mittelhirn Dopamin (DA) Neuronen in der Substantia Nigra Pars Compacta verursacht. Obwohl die Hauptursache der Parkinson-Krankheit unbekannt bleibt, gibt es zunehmend Hinweise, dass es eine komplexe Erkrankung ist, die durch genetische und umweltbedingte Faktoren, die wichtige Signalwege in Neuronen der Substantia Nigra DA beeinflussen. Einblicke in die Pathogenese der Parkinson-Krankheit stammen von in-vitro- und in-vivo-Modelle und von Post-mortem-Analyse. Jüngste technologische Entwicklungen haben diese Forschung durch die Bestimmung von Gen-Ausdruck-Profilen mit hohem Durchsatz Microarray Proben eine neue Dimension hinzugefügt. Jedoch wurden viele der Studien berichtet, dass Datum basiert auf ganze Mittelhirn sezieren, die Zellen als DA Neuronen enthalten. Hier haben wir Laser Microdissection verwendet, um einzelne DA Neuronen aus der Substantia Nigra Pars Compacta von Steuerelementen und Themen mit idiopathischer Parkinson-Krankheit für Alter abgestimmt und Post-mortem-Intervall gefolgt von Microarrays, Gene Expression profiling analysieren zu isolieren. Unsere Daten bestätigen eine Dysregulation von mehreren funktionellen Gruppen von Genen, die in der Pathogenese des Morbus Parkinson. Insbesondere fanden wir prominente Herunterregulation der PARK gen Familienangehörigen und Dysregulation von mehreren Genen programmierter Zellentod und Überleben zugeordnet. Darüber hinaus wurden Gene für Neurotransmitter und Ionen-Kanal-Rezeptoren auch dereguliert, unterstützen die Ansicht, dass Veränderungen in der elektrischen Aktivität DA Neuron Funktion beeinflussen könnten. Unsere Daten liefern eine "molekularen Fingerabdruck-Identität" des Spätstadiums der Parkinson-Krankheit DA Neuronen, die unser Verständnis der molekularen Pathologie dieser Krankheit voranbringen wird.

Beweise Für Geschlechtsspezifische Transkriptionelle Profile Der Nigral Dopamin-Neuronen in Der Parkinson-Krankheit

PloS One. 2010  |  Pubmed ID: 20111594

Epidemiologische Daten zeigen, dass das männliche Geschlecht einer der Faktoren, Risiken für die Entwicklung von Parkinson Krankheit (PD ist). Auch wurden Unterschiede in der klinischen Manifestation und den Verlauf der PD zwischen Männchen und Weibchen beobachtet. Jedoch ist wenig bekannt über die molekulare Aspekte zugrunde liegenden Geschlecht-Spezifität in PD. Um dieses Problem zu beheben, haben wir die Gen-Ausdruck-Profile von männlichen und weiblichen Dopamin (DA) Neuronen in sporadische PD festgestellt.

Einen Roman, Mehrere Symptom-Modell Von Obsessive Zwanghaften-ähnliche Verhaltensweisen Bei Tieren

Biological Psychiatry. Oct, 2010  |  Pubmed ID: 20619828

Aktuelle Tiermodellen für Zwangsstörungen (OCD) beinhalten normalerweise akute, Arzneimittel-induzierter Symptom Provokation oder eine genetische Assoziation mit Stereotypies oder Angst. Keiner dieser aktuellen Modelle zeigen mehrere OCD-ähnliche Verhaltensweisen.

Neuronale Typspezifische Gen Ausdruck Profilerstellung Und Laser-Capture Microdissection

Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2011  |  Pubmed ID: 21761317

Das menschliche Gehirn ist eine äußerst heterogene Struktur. Um Einblick in die neurobiologischen Grundlagen Neuronaler Schaltkreis Unruhen in verschiedene neurologische oder psychiatrische Erkrankungen, ist es oft wichtig, die molekularen Kaskaden zu definieren, die mit diesen Unruhen in neuronalen typspezifische Weise. Dies kann durch den Einsatz von Laser-Microdissection, in Kombination mit molekularen Techniken wie Gene Expression profiling erreicht werden. Um Neuronen im menschlichen Post mortem Hirngewebe zu identifizieren, können eine die inhärenten Eigenschaften des Neurons, wie Pigmentierung und Morphologie oder strukturelle Zusammensetzung durch Immunhistochemie (IHC) verwenden. Hier beschreiben wir die Isolation der homogenen Nervenzellen und qualitativ hochwertige RNS von Post-mortem Gehirn Material mit einer Kombination aus schnellen IHC, Nissl Färbung oder einfache Morphologie mit Laser-Capture Microdissection (LCM) oder Laser Microdissection (LMD).

Konvergierende MiRNA-Funktionen in Verschiedenen Gehirn-Erkrankungen: Ein Fall Für Die MiR-124 Und MiR-126

Experimental Neurology. Dec, 2011  |  Pubmed ID: 22178324

Eine wachsende Zahl von Informationen über die Biologie der MiRNAs hat neue Einblicke in ihre Rollen in der normalen Homöostase und Pathologie der Krankheit ergeben. MiRNAs kontrollieren alle Schritte der zellulären Ausdruck Maschine über einen "einzigen MiRNA oder mehrere Ziele" oder "mehrere MiRNAs/Single-Ziel" Mechanismus. Sie haben tief greifende Auswirkungen auf die Regulierung der Signalwege, die allgemeine und spezifische Funktionen in verschiedenen zellulären Phänotypen zu Regeln. Es gibt zunehmend Hinweise, dass verschiedene Erkrankungen ähnliche Störungen im Gen-Ausdruck-Netzwerke teilen. Da MiRNAs in verschiedenen zellulären Kontexten sowohl gemeinsame als auch unterschiedliche Wirkungen haben, können sie auch beeinflussen, überlappende Signalwege in verschiedene Organe und Krankheit Entitäten. Hier besprechen wir dieses Konzept für zwei sehr reichlich MiRNAs in das Gehirn, MiR-124 und MiR-126 und ihre mögliche Rolle bei Erkrankungen des Gehirns.

Nachweis Von Intranasally Gelieferte Knochenmark Gewonnenen Mesenchymal Stromal Zellen Im Gehirn Lesioned Maus: Einen Warnenden Bericht

Stem Cells International. 2011  |  Pubmed ID: 22190964

Knochenmark gewonnenen Mesenchymale Stromale Zellen (MSCs) halten versprechen für autologe Behandlung von Neuropathologies. Intranasale Lieferung ist relativ nichtinvasive und wurde vor kurzem berichtet, zum Transport von MSCs zum Gehirn führen. Jedoch ist die Fähigkeit der MSCs von nasalen Durchgänge auf Seiten der Neuropathologie migrieren und letztlich Überleben nicht vollständig untersucht worden. In diesem Papier wir geerntet MSCs aus transgenen Mäusen verbessertes grünes fluoreszierendes Protein (Zellen, die als MSC-EGFP genannt) zum Ausdruck zu bringen und ihnen intranasally an Wildtyp-Mäusen, die Erhaltung der mechanischer Läsionen im Striatum. Mit Leuchtstofflampe, Farbmetrik, und ultrastrukturelle Nachweismethoden, waren die GFP-Ausdruck Zellen im Gehirn ab 3 Stunden bis zu 2 Monate nach MSC Lieferung nicht nachweisbar. Jedoch wurde hell Autofluoreszenz, die Emission von GFP stark ähnelte im Riechkolben und Striatum lesioned Kontroll-und MSC-EGFP-behandelten Mäusen beobachtet. In einem Experiment Control wir direkt MSC-EGFPs in der Maus-Striatum implantiert und robuste GFP Ausdruck 1 und 7 Tage nach der Implantation erkannt. Diese Forschungsergebnisse legen nahe, dass-unter unseren Conditions-intranasally gelieferten MSC-EGFPs nicht überleben oder im Gehirn zu migrieren. Darüber hinaus unterstreichen unsere Beobachtungen die Notwendigkeit, einschließlich angemessene Kontrollen beim Arbeiten mit GFP als zellulärer Marker.