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Articles by Kristen Browne in JoVE

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ショウジョウバエの眼成虫ディスクに付属してグリア細胞の移行のイメージングを生きる


JoVE 1155 7/09/2009

Department of Zoology, University of British Columbia - UBC

ここでは、GFPタグ付きのグリア細胞とペアライブ顕微鏡分析を使用して開発をショウジョウバエの眼にグリア細胞の遊走を調べるためのプロトコルについて説明します。

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SNASP、クロマチン アセンブリを容易にするヒストン H1 固有真核生物のシャペロン ダイマー。

NASP は、ヒストン H1 シャペロン哺乳類として記載されています。しかし、関与する分子メカニズムをまだ特徴づけられているはありません。ここでは、このタンパク質がのみ哺乳類にはないが、核の体細胞と精巣の形態を通じて広く分布していることを示します。人間の体細胞のバージョンの二次構造は、主に α へリックスのクラスターで構成されています、ソリューションでホモ二量体として存在します。タンパク質特異的コア ヒストン H2A H2B ダイマー、H3 H4 テトラマーがのみ特定錯体ヒストン H1 を形成バインドします。NASP H1 錯体の形成はヒストン H1 の N 末端と C 末端ドメインによって仲介され、リンカー ヒストンの特徴である翼のあるらせんドメインを必要としません。In vitro でのクロマチン再構成実験はこの蛋白質リンカー ヒストン ヌクレオソームのアレイ上に定款を容易にそれ故に善意リンカー ヒストン シャペロンであることを示します。

Gliotactinローカライゼーションとチロシンリン酸化とエンドサイトーシスによってレベルの制御は偏上皮の生存に必要です。

三細胞の接合部(TCJ)は、偏光上皮内の隣り合う3つの細胞からの二つの細胞から成る接合部の収束に形成し、上皮障壁を維持するために必要である。ショウジョウバエショウジョウバエでは、TCJは、二つの細胞から成る隔壁接合のミーティングポイントで生成されます。 GliotactinはTCJの最初の識別コンポーネントであり、TCJと隔壁の接合部の開発が必要である。 Gliotactinはニューロリギンファミリーと大PDZ蛋白質ディスクに関連付けるのメンバーです。この相互作用以外にも、少しはTCJでGliotactin局在と機能のメカニズムについて知られている。本研究では、Gliotactinが保存されたチロシン残基、エンドサイトーシスのために必要なプロセスでリン酸化され、後期エンドソームおよびリソソーム分解の対象にしていることを示している。リン酸化とエンドサイトーシスを介してGliotactinレベルの調節は、隔壁の接合ドメイン全体TCJからGliotactinの変位の過剰発現の結果として必要になります。偏上皮の過剰なGliotactinは、その後の移行、およびアポトーシスとペアになって、剥離につながる。アポトーシスとGliotactinの高いレベルから生じる結果の代償増殖は、ショウジョウバエのJNK経路によって媒介される。したがって、細胞膜内のGliotactinレベルが正しいタンパク質の局在と細胞の生存を確保するために規制されている。

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