The Journal of Visualized Experiments (JoVE) is a peer reviewed, PubMed-indexed video journal. Our mission is to increase the productivity of scientific research.

Recommend to Librarian

In JoVE (1)

Other Publications (99)

Automatic Translation

This translation into Korean was automatically generated.
English Version | Other Languages

Articles by Lonnie D. Shea in JoVE

 JoVE Bioengineering

Proteolytically 분해 3 차원 시스템에서 난소 대과의 캡슐화 및 문화에 대한 방법


JoVE 2695 3/15/2011

1Institute for BioNanotechnology in Advanced Medicine, Northwestern University, 2Department of Obstetrics and Gynecology, Northwestern University, Feinberg School of Medicine, 3Center for Reproductive Research, Northwestern University, 4The Robert H. Lurie Comprehensive Cancer Center, Northwestern University, 5Department of Chemical and Biological Engineering, Northwestern University

3D 섬유소 - 알지네이트요 interpenetrating 네트워크에 난소 대과의 캡슐에 대한 새로운 방법을 설명합니다. 이 시스템은 성숙 oocytes을 만들어 미숙 모공의 개발을 지원하기 위해 proteolytic 저하로 구조적 지원을 결합한 제품입니다. 이 방법은 확장을 제한하지 않고 세포 세포 접촉을 유지하기 위해 문화 셀 집계에 적용될 수 있습니다.

Other articles by Lonnie D. Shea on PubMed

건설 기계 약물 방출 임대 Microspheres 마약 로드에서 조작

생 분해성 건설 기계 임대 엔지니어링 조직 교체를 위한 많은 전략 또는 유도 조직 재생에 중심 역할을 제공합니다. 일반적으로, 이러한 건설 기계 임대 함수 만들고 공간을 유지 하 고 세포 접착에 대 한 지원. 그러나, 이러한 건설 기계이 임대 수 역할도 생리 활성 요인 (예를 들어, 단백질 또는 DNA)의 배달에 대 한 차량 비 계 microenvironment 내 세포질 프로세스를 조작 하려면. 이 연구 조직 공학 건설 기계 임대 지속적인된 약물 전달 제어 다공성 마약 로드 microspheres 구조로 조작 되는 그것에 의하여 능력을 조작 하는 새로운 접근 방식을 제공 합니다. 더블 유제 프로세스 microspheres의 무결성을 유지 하 고 24 시간 이내 microspheres에서 풀 려 났는 캡슐화 된 dna를 조작 하는 사용 되었다. 이러한 DNA 로드 microspheres 이후에 nonporous 디스크 또는 상호 연결 된 오픈 기 공 비 계에 형성 되었다 (> 94% 다공성) 가스 거품 과정을 통해. 디스크 및 건설 기계 임대 적어도 21 일 동안 지속적인된 플라스 미드 자료를 전시 하 고 출시의 초기 단계 최소한의 버스트를 했다. 다공성 및 nonporous 구조로 어셈블 마약 로드 microspheres이 이렇게 합성 매트릭스의 제조에 직접 조직 형성 그 위대한 유틸리티 찾을 수 있습니다.

향상 된 유전자 배달에 대 한 DNA 단지의 표면 닿는

효율적인 유전자 이동 장벽을 극복 하 고 생명 공학의 기본 목표 이다. Nonviral DNA 전달 향상 시키기 위해 다양 한 방법에서는 효과적인 유전자 이동에 장벽을 극복 하기 위해 설계 된 수 있는 양이온 폴리머와 complexation. 더 최근에, DNA 폴리머 기판에서 분리 또는 비 계 유전자 이동, 셀 microenvironment에서 DNA 농도 증가 하 여 가능성을 향상을 보여줘 왔다. 양이온 폴리머/DNA 단지 세포 접착 지 원하는 기판에 닿는 곳은이 두 가지 전략을 결합 하는 새로운 접근 방식을 제안 한다. 양이온 고분자 패키지 효율적인 국제화에 대 한 DNA 고 밧줄로 매는 셀의 셀 microenvironment에 높은 농도 유지 하기 위해 기능 표면 기판. 양이온 폴리머 polylysine (중 합 19 또는 150도) 바뀌었습니다 biotin 그룹과 질량 분석 및 생 화 확 적인 분석에 의해 확인 되었다. Biotinylated-polylysine와 DNA의 복잡 한 형성 또는 biotinylated 및 nonbiotinylated polylysines의 혼합물 젤 전기 이동 법에 의해 확인 되었다. 플라스 미드 DNA 인코딩 기자 진 베타-galactosidase complexed biotinylated 및 nonbiotinylated polylysine의 다른 혼합물으로는 neutravidin (nonglycosylated avidin)에 인 큐베이 팅에 대 한-표면 코팅. DNA 표면 밀도 4.3 microg/cm2 0.1에서 배열 관찰 되었고 biotin 그룹 수, DNA의 양과 polylysine의 분자량의 함수 발견. HEK293T 또는 NIH/3T3 세포 DNA 수정 표면에 시드 다음 했다 그리고 48 transfection는 계량 및 96 h. Transfection DNA 표면에 의해 모두 셀 라인으로 관찰 되었다 및 식 수준 최대 100 배 이상의 대량 납품 단지 얻은. Transfection 표면 DNA 수량 및 복잡 한에 밧줄 수 함수 발견 되었다. Transfected 세포는 DNA에 단지 했다 닿는, transfected 세포의 위치가 구체적으로 제어할 수 있습니다 제안 하는 지역에서 서만 관찰 했다. DNA의 표면 tethering 유전자 전송을 강화 하 고 공간적으로 다양 한 조직 공학에서 기능 유전체학에 배열 하는 분야에 응용 할 수 있는 유전자 전달 제어에 유망한 접근 방식을 나타냅니다.

비 바이러스 성 DNA의 다공성 건설 기계 임대에서 제어할 수 있는 배달

조직 공학에 대 한 귀납적 접근 기능 조직으로 조상 세포의 행동을 직접 약물 전달 3 차원 다공성 건설 기계 임대 결합 되어있습니다. 건설 기계 임대 어셈블리 및 후속 마약 로드 microspheres 미는 가스 거품/립 leaching 프로세스를 사용 하 여 융합 하 여 제어, 지속적인 배달의 수를 조작 하는 방법을 소개 합니다. DNA 로드 microspheres lactide 및 극저온 더블 유제 프로세스를 사용 하 여 glycolide (PLG)의 공중 합체에서 조작 했다. Microspheres 12.3 microm에서 92.5 microm에 이르기까지 평균 직경을 가진 4 개의 인구 조작 했다. 건설 기계 임대 했다 상호 연결 된 열린 기 공 구조를 DNA 무결성을 유지 하 고 21 일에 대 한 지속적인된 출시 전시 이러한 microspheres의 융합에 의해 조작. 릴리스를 통해 제어 조작 폴리머, microspheres, 발포 하는 프로세스의 속성을 통해 얻은. 감소 하는 microsphere 지름 또는 microsphere의 제조에 사용 되는 고분자의 분자량 증가 속도 자료 다공성 비 계에서의 이끌어 냈다. 또한, CO(2)의 압력을 증가 DNA 출시 속도를 증가 했다. 다공성 고분자 건설 기계 임대 제어 릴리스 요금 수 만들 수 있는 능력 강화 및 조직 공학에 그들의 유틸리티 증가 개발 조직 내에서 유전자 전송을 규제 하는 수단을 제공할 수 있습니다.

Murine Granulosa 세포 형태학 및 함수 합성 Arg Gly Asp 매트릭스에 의해 통제 된다

세포 외 기질 (ECM) 단백질은 granulosa 세포 생존, 형태학, 차별화의 설립된 레 귤 레이 터. 이 연구 murine granulosa 세포 접착에 ECM 접착 펩 티 드 농도의 역할에서는 형태, 그리고 스테로이드 분 비가 합성 매트릭스를 사용 하 여을 조사 했다. 합성 매트릭스 세포 접착을 기본적으로 지원 하지 않습니다 하지만 접착 펩 티 드 (2 x 10(-1) ng/cm(2)) 10(-4)의 제어 밀도와 수정할 수 있는 다 당 류 alginate에서 조립 되었다. GRM02, murine granulosa 셀 라인 및 기본 murine granulosa 셀 alginate 매트릭스 ECM 단백질에 공통적인 Arg Gly Asp 모티브를 포함 하는 합성 펩타이드 시퀀스의 결합에 의해 수정에 경작 했다. 이러한 펩 티 드 수정 표면에 경작 하는 세포 (0.02, 0.2 ng/cm(2)) 연결 및 확산, 문법과 펩 티 드 신분과 밀도 관련. 또한, estradiol 및 황 체 호르몬 분 비와 삼 배 증가 컨트롤에 비해 최대 펩 티 드 밀도 함수를 했다. 이러한 결과 밀도 접착 펩 티 드의 정체성 granulosa 세포 기능 조절 나타냅니다. 이 시스템 여 포 성숙 하는 동안 발생 하는 granulosa 세포-ECM 상호 작용을 검사 하는 메커니즘을 제공 합니다.

DNA 배달 기판 중재: 양이온 폴리머 구조와 수정의 역할

DNA 세포 접착 지 원하는 기판에 복잡 한 immobilization 셀룰러 환경에서 복잡 한 집계 하면서 DNA를 유지 하 여 유전자 전송을 향상 시킬 수 있습니다. 이 보고서 밧줄 디자인 (기능화 예: 범위) 기판 및 세포 transfection에 복잡 한 바인딩에 미치는 영향에 대 한 양이온 폴리머 구조를 검사합니다. DNA는 neutravidin (NA) 기판에 대 한 바인딩에 biotin과 functionalized을 양이온 폴리머 (polylysine, PL, polyethylenimine, PEI)와 complexed. 표면 밀도 0.4에서 2.6 microg Dna/cm(2)에 이르는 페이 대 한 PL, 및 0.7 1.0 microg DNA/cm(2) 하에서 가져온. Biotin PL/DNA 단지에 대 한 그룹의 분포 세포 transfection에 듀얼 영향을 미쳤다. Biotin 잔류물과 PL의 분수를 증가 감소 루시페라아제 활동; 그러나 루시페라아제 활동 증가 PL 당 biotin 잔류물의 수를 증가. 페이, 복잡 한에 biotin 그룹 수에는 transgene 식 영향을 주지 않았다. 릴리스 연구 시연 움직이지 DNA의 20-30% 이상 8 일 발표 했다, 첫 24 h. Enzymatic 동안 발표 하는 8-20%와 양이온 폴리머의 저하 transfection에 대 한 필요 하지 않습니다. 또한, transgene 식 기간 bolus 배달 상대적인 표면 중재 배달 확장 되었다.

Granulosa 셀 Oocyte 단지의 3 차원 문화에 대 한 새로운 접근 방식

미 성숙한 난소 낭의 체 외 문화 여 포 개발을 규제 하 고 궁극적으로 생식 불 임에 대 한 옵션을 제공할 수 있는 요소를 검사 하는 데 사용 됩니다. 이 연구의 목적은 개별 granulosa 셀 oocyte 단지의 개발과 성장에 대 한 3 차원 체 외 문화 시스템을 개발 했다. Alginate hydrogel 했다 이후 생체 외에서 혈 청 무료 문화에서 유지 관리 하는 미 숙 마우스 granulosa 셀 oocyte 복합물 (GOCs) 캡슐화 사용 되었다. 50%의 전체 관 효율을 달성 했다. 복합물은 체 외 성장 하는 동안 대권의 변화에 대 한 전송 전자 현미경 검사 법에 의해 평가 됐다. Follicular 복합물의 건축 이후 문화와 캡슐화 하는 동안 유지 했다. Granulosa 셀 확산, 고 된 oocytes 또한 볼륨에 성장 하 고 성숙한 oocytes 세포질에서 대뇌 피 질과 립 형성, 잘 발달 된 zona pellucida microvilli, 정상적인 미토 콘 드리 아와 격자 모양의 구조를 포함 한 구조적 특성을 얻은. 검색 및 성숙 oocytes meiosis, 적절 한 개발을 위해 필요한 단계를 다시 시작할 수 있었다. 따라서,이 시스템은 개별 granulosa 셀 oocyte 단지의 성장 위한 새로운 생체 외에서 방법론을 나타냅니다.

DNA 배달에 대 한 릴리스 시스템을 제어합니다

DNA 배달을 제어 릴리스 기술의 적응 유전자 치료를 제한 하는 세포 외 장벽을 극복 하기 위해 잠재력이 있다. 제어 방출 시스템 강화 유전자 전달 하 고 범위와 전통적인 배달 방법 (예를 들어, 사출) 상대적인 transgene 식의 기간을 증가 수 있습니다. 이러한 시스템은 일반적으로 로컬, 먼 조직에 대 한 배포 방지 nontarget 세포에 독성을 감소 하 고 벡터에 면역 반응을 줄일 수 있는 벡터를 제공 합니다. 배달 차량 제어 릴리스에 대 한 로컬 조직 환경에 벡터를 방출 하거나 고분자 표면에 벡터를 유지 하 여 작동 하는 천연 및 합성 폴리머에서 조작 됩니다. 벡터 자료 또는 바인딩 분자 상호 작용의 강도 따라 달라 집니다 폴리머에 대 한 벡터의 효과적인 선호도 의해 규제 됩니다. 이러한 상호 작용을 기반 벡터와 폴리머 성분으로 일반 바인딩을 통해 또는 보완 바인딩 사이트 (예를 들어, biotin avidin)의 결합을 통해 발생 합니다. 이 검토는 천연 및 합성 폴리머에서 nonviral 및 바이러스 성 벡터의 배달 검사 하 고 그들의 적용 가능성을 높이기 위해 지속적인 개발을 위한 기회를 선물 한다.

생리 활성 구성 요소와 비 바이러스 성 벡터의 모듈형 디자인

비효율적인 유전자 전달 유전자 치료 응용 프로그램을 기본 및 응용 과학을 제한 하 고 있습니다. 엔지니어링 벡터에 대 한 접근은 점점 더 세포 수용 체 세포 막, 중단을 바인딩하거나 강화 핵 전송 하는 생리 활성 구성 요소를 포함. 최근, 새로운 양이온 지질 glucocorticoid dexamethasone을 수정 하 여 개발 되었다. 이 양이온 코르 티 코 스테로이드 또한 염증을 변조 하면서 플라스 미드 유전자 배달에 대 한 응축. 모듈러 벡터 다양 한 세포질 프로세스를 대상으로 하는 생리 활성 구성 요소가 포함 된 유전자 전송을 제한 하는 장벽을 극복할 수 있습니다.

작은 분자 약물, 단백질과 DNA에 대 한 전달 시스템: 신경 과학/biomaterial 인터페이스

마약, 단백질 또는 DNA의 전달에 의해 vivo에서 셀룰러 공정의 조작 신경 과학 연구에 최고 중요성 이다. 이러한 분자의 프레 젠 테이 션에 대 한 방법을 직접 분사 (체계 또는 정위 적), 삼 투 펌프 중재 만성 배달 또는 무기한 관심의 분 비를 설계 하는 셀의 심지어 주입을 포함 하 여 광범위 하 게 다릅니다. 배달 시스템 biomaterial 기반 증가 효능의 가능성과 함께 더 전통적인 접근법 대신을 나타냅니다. 생체 약물 방출 주사 microspheres 또는 3 차원 임 플 란 트로 제공할 수 있는 관심 (를 포함 하 여 작은 분자 약물, 생리 활성 단백질 또는 DNA) 분자 보다 더 장시간된 기간 동안 반복 된 관리에 대 한 필요성을 피하고 표준 bolus 주사로. 또한, 지속적인 릴리스 시스템 독성에 대 한 기회가 감소 하는 대상 사이트에서 치료 농도 유지할 수 있습니다. 이 검토의 작은 분자 약물, 단백질과 DNA 신경 과학 연구와 구체적으로 관련이 폴리머 기반 배달의 요약 되어 있습니다. 우리가 고분자 시스템 및 다양 한 실험 모델에 그들의 유틸리티에 대 한 제조 절차를 자세히 설명합니다. Biomaterial 필드 연구 및 신경학 적 질환의 치료에 대 한 다운스트림 임상 응용 프로그램 함께 독특한 실험 도구를 제공합니다.

조직 공학에 대 한 폴리머 건설 기계 임대에서 유전자 전달입니다

유전자 치료와 조직 공학의 조합 직접 조상 세포 증식 및 기능적 조직 교체로 차별화를 잠재력을 제공 합니다. 엔지니어링 조직 교체 많은 접근 기능을 생성 하 고 공간을 유지, 세포 접착 지원 및 조직 형성 구성 비 폴리머 계. 폴리머 투어, 천연, 합성, 또는 둘의 조합, 조직 유도 요인의 표현을 유도 수 있습니다 바이러스 성 및 nonviral 벡터에 대 한 배달 차량으로 적응도 있다. 유전자 납품은 조직 유도 요소의 지역화 식을 통해 모든 세포질 프로세스를 대상으로 수 다재 다능 한 접근 이다. 디자인 및 지역화 된 유전자 이동에 대 한 조직 공학 장비의 응용 프로그램 검토를 거치게 됩니다. 건설 기계 임대는 로컬 조직 환경에 벡터를 릴리스 또는 폴리머에 대 한 벡터의 효과적인 선호도 의해 규제 됩니다 폴리머 표면에 벡터를 유지 하려면 설계 되었습니다. 고분자 배달 수 유전자 이동 로컬 향상, 홍보 및 transgene 표현을 확장, 먼 조직에 대 한 벡터 배포 방지와 벡터 면역 응답을 감소. 제어 DNA 배달의 건설 기계 임대 감독 조직의 수많은 종류의 공학 응용 프로그램은 조상 세포 기능에 대 한 근본적인 도구를 제공할 수 있습니다. 이 방식의 유틸리티는 조직 형성의 생물학에 디자인 매개 변수 릴리스 transgene 식의 상관 관계를 개발 하 고 지속적인된 연구와 함께 증가 합니다.

테크놀로지 Monolayers에서 배달 기판 중재: 표면 이온화, 화란, 패터 닝의 효과

유전자 이동은 기초 및 응용 과학에 많은 잠재적인 응용 프로그램이. 시험관에서 DNA 배달 DNA의 세포 접착 지 원하는 기판에 immobilization 통해 셀룰러 microenvironment에서 DNA의 농도 증가 의해 향상 될 수 있습니다. 기판 중재 배달 DNA, 지질 양이온 또는 biomaterial 또는 기판에 고분자 complexed immobilization에 설명합니다. 표면 특성은 표면 배달 방식의 효율성에 중요 한, 조립된 monolayers (SAMs) 골드 alkanethiols의 바인딩, 릴리스 및 비 특별히 움직이지 단지의 transfection을 기판의 표면 화학을 상관 관계를 사용 되었다. 표면 hydrophobicity 및 이온화 DNA 복잡 한 immobilization와 transfection, 중재를 발견 하지만 했다 복잡 한 버전에는 영향을 주지 않습니다. 또한, SAMs transfection 효율 40%에 근접 하는 패턴에서으로 패턴화 된 DNA 복잡 한 증 착과 transfection, 결과로 특정 패턴 된 기판 인쇄물을 소프트 리소 기법과 함께에서 쓰였다. 패턴화 된 배달에 대 한 잠재력을 가진 단지와 기판, 간의 상호 작용을 제어 로컬 향상 또는 조직 엔지니어링 건설 기계 임대 및 transfected 세포 배열에 대 한 응용 프로그램으로 유전자 전송을 규제 하 사용할 수 있습니다.

히 알루 론 산 콜라겐 Hydrogels 기판 중재 접근 방식을 통해에서 DNA 배달

생 분해성 소재로 효율적이 고 제어 유전자 전달 조직 재생으로 이어질 세포질 프로세스 자극 고용 수 있습니다. 이 보고서에서 기판 중재 접근 히 알루 론 산 콜라겐 hydrogels에서 DNA를 전달 하기 위해 개발 되었다. Hydrogels poly(ethylene glycol) diglycidyl 에테르로 가교 하 여 형성 되었다. Poly(ethylene imine) (페이) / DNA 단지 biotin/neutravidin 또는 일반적인 흡착을 사용 하 여 기판에 움직일 수 있었다. 단지 복잡 한 크기를 조절 하는 소금의 존재 유무에 형성 되었고 귀착되 었 다 단지 z 평균 직경 152.3와 1.3 ± 139.4 + 1221.7 nm, 각각. PBS 또는 hyaluronidase 48 h 인큐베이션 기간 동안 DNA에서에서 릴리스 되었습니다 천천히 hydrogel 기판 (< 움직이지 DNA의 30%)는 바른된 미디어 (움직이지 DNA의 약 50%)과 부 화에 의해 향상 되었습니다. Transgene 식 움직이지, 큰 직경 단지 중재 3 7-fold 직경이 작은 단지에 대 한 보다 큰 했다. 그러나, 셀을 표현 하는 transgene의 백분율 직경이 작은 단지 (48.7%) 보다 큰 직경 단지 (22.3%)에 대 한에 대 한 큰 했다. 세 패턴 세포 접착에 hydrogel을 패턴화 하 여 공간적 제어 유전자 전송을 달성 했다. Biomaterial 기반 유전자 전달 조직 형성을 검사 하는 도구 또는 엔지니어링 응용 프로그램, 수많은 조직에 적용할 수 있습니다.

셀 문화 기질을 통해 유전자 배달 Adsorbed DNA 단지

효율적인 유전자 전달 생명 공학의 근본적인 목표 이며 기초 및 응용 과학에서 다양 한 응용 프로그램을 했다. 기판 중재 배달 및 역방향 transfection immobilizing 셀 뿌리기 전에 셀 문화 기판에 플라스 미드를 통해 휴대 전화 microenvironment에 DNA의 농도 증가 시켜 유전자 전송을 향상. 이 보고서에서 우리는 complexed 양이온 폴리머 (polyplexes) 또는 지질 (lipoplexes) 되었고, 이후 셀 문화 또는 biomaterial 기판에 흡착 하 여 움직일 수 있는 플라스 미드의 유전자 전달 검사. Polyplexes 및 lipoplexes 조직 문화 폴리스 티 렌 또는 혈 청 adsorbed 조직 문화 폴리스 티 렌 adsorbed 했다. 노출의 시간을 함께 움직일 수 DNA의 수량이 증가 하 고 증 착 속도 및 최종 금액 입금 및 복잡 한 기판의 속성에 의존. Polyplexes, 혈 청 수정 수정 되지 않은 기판 기준으로 최대 1500-fold 리포터 유전자 발현을 강화 하 고 나왔고 bolus 배달에 비해 동등 하거나 더 큰 식. Lipoplexes, 혈 청 수정 크게 수정 되지 않은 기판에 상대적인 transfected 세포 수를 증가 아직 제공 하는 식의. 움직이지 단지 bolus 배달에 상대적으로 향상 된 세포 생존 능력으로 1 차 셀을 transfect. 마지막으로,이 기판 중재 배달 방법을 널리 biomaterial 확장 했다 poly(lactide-co-glycolide). Immobilization 조직 문화 폴리스 티 렌 기판에 단지 DNA의 생체 외에서 연구를 위한 유전자 전달 향상을 위한 유용한 도구가 될 수 있습니다. 또한, 생체에이 시스템에 적응 조직 공학 분야에 응용을 촉진 수 있습니다.

Neurotrophin 단일 및 다중 루멘 신경 도관을 발표입니다

신경 수리를 위한 조직 공학 전략 고용 폴리머 도관 되 나 지도 채널과 각각 주변 신경 손상 및 척수 부상에 대 한 재생을 촉진 하는 다리. 단일 및 다중 루멘 neurotrophic 요인의 제어 릴리스 수와 신경 도관의 제조에 대 한 접근은 개발 되었다. 이 도관 poly(lactide-co-glycolide) (PLG) microspheres와 porogen (NaCl)는 금형에 로드 하 고 처리 하는 혼합물에서 가스 거품에 의해 조작 했다. 다공성 및 기계적 특성의 구문이 폴리머 microsphere 하 porogen의 비율에 의해 규제 했다. Neurotrophin, 신경 성장 인자 (NGF)는 microspheres 단백질 혼합 또는 이전에 가스 거품 microspheres 내 단백질을 캡슐화 하 여 도관에 통합 되었다. 지속적인된 출시 및 고분자 분자량 메서드에서 제어 릴리스 속도와 적어도 42 일 동안 관찰 했다. 출시 NGF 주 느 루트 신경 절 (DRG)에서 neurite 파생물을 자극 하는 기능을 자사의 bioactivity를 유지. Vivo에서 결과 도관 그들의 원래 구조를 유지 하 고 채널에 세포 침투에 대 한 허용을 나타냅니다. 제어할 수 있는 루멘 직경 및 단백질 분리와 고분자 도관 및 neurite 파생물을 자극 하 여 신경 재생을 향상 시킬 수 있습니다.

다공성 조직 공학 건설 기계 임대에서 Vivo에서 플라스 미드 배달: Transgene 표현과 세포 Transfection

건설 기계 임대 지속적인된 플라스 미드 분리 수 있는 엔지니어링 조직을 유전자 이동 로컬 홍보 하 고 새로운 조직 형성을 자극 수 있습니다. 우리 조사 비 계 디자인 매개 변수를 영향 범위와 기간 transgene 식의 transfected 세포의 분포 특징 있다. 캡슐화 된 플라스 미드와 건설 기계는 다공성 임대 가스 발포 절차와 poly(lactide-co-glycolide)에서 homogeneously 거품 이전 구성 요소를 혼합 하는 고용 젖은 알갱이 만듦으로 조작 했다. 젖은 립 플라스 미드 법인 표준 절차를 기준으로 강화 하 고 또한 in vivo transgene 식 증가 로드 및 비 계 기 공 구조의 유지 보수를 통해 가능성을 강화. 로드 플라스 미드 수량과 기간 105 일 최고 복용량을 달성에 대 한 식 함께 transgene 식의 규제. 식 지역화는 이식 사이트로 비록 transfected 세포의 분포 변화 시간. Transfected 세포 처음 비 계 주변 (3 일)에 그 모 공 내에서 관찰 되었고 인접 한 폴리머 (17 일), 그리고 마지막으로 (126 일) 비 계 내부를 통해. VEGF 인코딩 플라스 미드의 전달 컨트롤에 상대적인 혈관 밀도 증가. 플라스 미드를 발표의 응용을 촉진 한다 유전자 전송 효율성과 조직의 형성으로 비 계 디자인을 상호 연결 여러 조직에 건설 기계 임대.

3 차원 체 외 문화 시스템에 여 포-자극 호르몬에 의해 마우스 여 포 개발의 규제 여 포 무대와 복용량에 따라 달라 집니다

난소 난 포의 발달 요구 사항은; 여 포의 성숙 단계에 따라 다릅니다. 특히, 유전자 모델 우아한 연구 FSH가 필요 하지만 하지 preantral, antral, 표시는 여 포의 성장과 성숙. FSH 및 preantral 여 포 개발에 다른 규제 분자의 역할을 더욱 명료, 하 체 외 문화 시스템 필요 합니다. 우리 뿌리 문화, 모 낭 뿌리의 특정 발달 요구에 맞게 조정 된 행렬 내에서 캡슐화 된 생체 기반 접근 방식을 채택. 이 3 차원 시스템 보조 2 층 (100-130 microm;는 oocyte 주변 granulosa 세포의 2 개의 층) 및 다중된 보조 (150-180 microm, 여러 계층에서 oocyte 주변 granulosa 세포의) 여 포 개발에 FSH의 복용량을 증가의 영향을 검토 하는 데 사용한 쥐에서 분리 된 모 낭. 2 층 보조 낭 FSH 반응이 나 행렬 alginate 콜라겐에서 교양 때 여 포 성장 및 젖 산 생산 스테로이드 분 비에서 FSH 복용량 의존 증가 전시 했다. 다중된 보조 낭 FSH 뿌리 생존, 성장, 스테로이드 분 비, 신진 대사, oocyte 성숙 FSH에 의해 모든 규제와 의존 했다. 그러나 FSH의 25 mIU/ml 보다 큰 복용량 부정적인 다중된 보조 여 포 개발 (감소 여 포 생존)에 영향을. 현재의 결과 호르몬, 환경적 필요 follicular 복잡 한 변경 성숙 과정 동안 나타냅니다. 문화 시스템은 더 이상 개발 기간을가지고 인간의 모 낭에 번역에 대 한 특히 중요 한 것입니다 개발의 각 단계에 적용할 수 있습니다.

Crosslinked 히 알루 론 산 Hydrogels: Functionalize 및 패턴 전략

고분자 히 알루 론 산 (HA) 및 올리고 생리 활동 다양 한 응용 프로그램에 대 한 유망 소재 네요. 저하 및 생 화 확 적인 기능에 대 한 향상 된 기계적 안정성과 하 hydrogel 장비의 개발 조직 공학에의 응용 프로그램을 향상 시킬 수 있습니다. 이 보고서에서 poly(ethylene glycol) diepoxide crosslinker 통해 알코올 그룹을 대상으로 가교 전략은 분해성 하 hydrogels 세대에 대 한 조사. 체 외 세포 접착에 대 한 지원을 제공 하려면 콜라겐 가교 과정 전에 HA 솔루션에 통합 되었다. Hydrogels 연속 외관과 다공성 인테리어, 기 공 직경 9 microm 6에서 배열 있다. 하 하-콜라겐 hydrogels hyaluronidase와 콜라 효소, 화학 수정 biodegradation 막지 않습니다 나타내는 존재 저하. Hydrogels의 완전 한 저하 hyaluronidase (100 U/ml)에서 14 일와 콜라 (66 U/ml)에서 3 일 이내에 발생. 패턴 전송 소개는 hydrogel에 표면 지형 이었던 세포 성장 방향을 수 고용 했다. 또한,는 hydrogels HA 등뼈를 따라 biotin의 설립에 의해 biomolecule neutravidin와 functionalized 수 수 있습니다. Biotinylation 이렇게 avidin에 활용 하는 생리 활성 분자의 첨부 파일을 허용할 수 있습니다.

세포 접착 기판에 Immobilization 유전자 전달

생체에 기초 과학 및 임상 응용 프로그램에 대 한 바이러스 및 nonviral 벡터의 배달 잠재적으로 향상 시킬 수 있습니다. 벡터는 일반적으로 단백질, 지질, 또는 양이온 폴리머 셀룰러 국제화와 인신 매매를 용이 하 게 포장 된 핵 산 (DNA, RNA)으로 구성 됩니다. 이러한 벡터 생체 세포 접착, 우리 용어 기판 중재 배달 프로세스를 지 원하는 연결할 수 있습니다. 기판 immobilization localizes DNA와 세포 microenvironment 배달 벡터. Immobilization, 중재 아직 셀룰러 국제화에 대 한 허용 벡터와 기판 사이의 상호 작용을 적절 하 게 균형 해야 합니다. 균형 있는 biomaterial와 벡터 간의 바인딩을 표면 화학 소재와 관련 (biotin avidin, 단백질과 리간드 사이의 강한 알려진된 noncovalent 상호 작용) 및 특이 현상 (예를 들어, 반 데르 Waals) 상호 작용을 제공 하도록 설계 되었습니다 수 있습니다 벡터의 따라 달라 집니다. 이 검토에서 바인딩 및 유전자 전송을 중재 biomaterial 및 벡터 속성 설명 잠재적인 응용 프로그램 및 추가 개발에 대 한 현재의 기회를 식별 합니다.

Alginate 기질 젤을 사용 하 여 난소 여 포 개발의 체 외 규제

기질 (ECM)를 촉진 하 고 세포 접착을 조절 및 조직 개발으로 이어지는 세포 프로세스 직접 신호를 제공 합니다 3 차원 구조를 제공 합니다. 이 보고서에 정의 된 ECM 구성 요소를 제공 하는 합성 행렬 이러한 신호 난소 여 포 성숙 모델 시스템으로 사용 하 여 조직 형성에 미치는 영향을 조사 하기 위해 고용 했다. 뿌리 문화에 대 한 체 외 시스템 여성, 다 산을 유지 하기 위해 개발 되고있다 그리고 문화 ECM 조절 ECM 정체성과 뿌리 발달의 단계에 의존 하는 방식으로 여 포 성숙 가설 테스트를 수행 했다. 미 숙 마우스 난 포는 특정 ECM 구성 요소 (예: laminin) 또는 RGD 펩 티 드와 함께 수정 된 alginate 기반 매트릭스 내에서 경작 했다. 행렬 in vivo는 여 포의 형태 처럼 유지 하 고 여 포 개발을 지 원하는 환경을 제공 합니다. ECM 컴포넌트와 신호에 영향을 미치는 그들의 성장과 분화, 뿌리의 체세포 예기치 않게 된 oocyte meiotic 능력 또한 영향을. 이러한 효과 ECM 구성 요소 id 및 ECM은 여 포 개발의 동적 레 귤 레이 터를 나타내는 여 포의 초기 단계에 따라 달라 집니다. Meiotically 유능한 oocytes를 생산 하 여 포 성숙 촉진 합성 매트릭스의 개발 다 산, 유지 하는 메커니즘을 제공할 수 있습니다 또는 더 일반적으로, 조직 공학 비 계 기반 접근 방법에 대 한 디자인 원칙을 제공 합니다.

모듈형 비 바이러스 성 유전자 치료 벡터의 디자인

유전자 배달 임상 및 기초 과학 연구에 대 한 다양 한 잠재적인 응용 프로그램에 있습니다. 유전자 치료의 장기적인 미래를 대표 하는 비 바이러스 성 벡터와 생체 재료는 효율적인 전달 시스템의 개발을 위한 중요 한 구성 요소. Biomaterial 개발 바이러스 함수의 기본적인 연구 및 세포 프로세스 모듈러 벡터의 분자 수준의 디자인을 수 있게 된다. 벡터 양이온 폴리머 또는 특정 세포 프로세스와 적절 한 상호 작용 세포 외 환경 또는 인터페이스를 중재 기능 그룹을 포함 하는 지질에 따라 개발 되 고 있다. 이 검토 비 바이러스 성 벡터에 대 한 생체 재료의 개발에 최근 진행 상황을 설명 하 고 미래 발전을 위한 기회를 강조. 궁극적으로, 효율적인 벡터 유전자 치료 병원 내에서 일반적인 응용 프로그램을 확장 하 고 진단, 생명 공학, 기초 과학 연구 내의 다른 수많은 기회가 될 수 있습니다.

세포 외 기질 단백질의 분포 나 콜라겐, 타입 IV 콜라겐, Fibronectin, 그리고 Laminin에에서 입력 마우스 Folliculogenesis

기질 (ECM) 등 셀 마이그레이션과 확산, 성장, 개발 프로세스에 참여 하 여 난소 기능에 있는 저명한 역할을 한다. 프로세스 신호 이들 중 일부는 마우스에 특징 되었습니다 비록 상대 수량 및 ECM 단백질 개발 난소의 난 포 내에서 배포는 하지 되었습니다 특징입니다. 이 연구를 사용 하 여 기술 고 ECM 구성의 특성을 실시간 PCR 나 콜라겐, 유형 IV 콜라겐, fibronectin, 및 입력 laminin 모 근 무대 및 셀룰러 구획에 따라 마우스 난소에서. 콜라겐 나 follicular 구획과 난소 표면 상피의 높은 농도와 난소에 걸쳐 존재 했다. 콜라겐 IV는 기질 및 granulosa 셀의 하위 수준 식 theca 셀 칸에 풍부한. 콜라겐의 분포는 여 포 성숙에 걸쳐 일관성. Fibronectin 기질 및 theca 셀 구획에 얼룩이 감소 granulosa 셀 칸에 착 색 하는 동안 여 포 개발에 걸쳐 증가 했다. 무거운 얼룩 또한 antral 모 낭의 follicular 액체에서 관찰 되었다. Laminin theca 셀 구획 지하실 막 마킹 follicular granulosa 셀의 외부에 정의 된 반지를 주로 지역화 되었습니다. Laminin의 기질 및 granulosa 셀 구획에 분명 했다. 함께 찍은, 마우스 난소의 ECM 콘텐츠 follicular 개발 하는 동안 변경 하 고 별개의 공간 및 시간 패턴을 보여준다. ECM 구성과 배포의이 이해와 여 포 개발 하는 동안 ECM 기능의 기본 연구에 사용할 수는 여 포 성장에 대 한 체 외 시스템의 개발에 도움.

단백질 및 DNA 공개 건설 기계 임대 유도 조직 공학

세포 분화, 증식 조직과 apoptosis 내장 유전 프로그램, 매트릭스/기판 상호 작용 및 세포 외 신호 지역 microenvironment에서 받은의 조합에 의해 결정 됩니다. 용 해의 형태로 서 이러한 분자 신호 (예: cytokines)과 불용 성 (예를 들면 ECM 단백질) 요인 뿐만 아니라 주위 조직 형성 또는 재생으로 이어지는 특정 세포 프로세스를 홍보할 수 있는 세포에서 신호. 조직 공학의 분야에서 최근 개발 조직 개발에 관련 된 세포 프로세스를 조사 하거나 세포 교체 또는 조직 재생에 따라 치료 전략을 고안 하는 강력한 도구를 제공 하는 이러한 단서를 제시 하는 생체를 고용 했다. 이러한 귀납적 건설 기계 임대 활용 3 차원 구조로 조작 하는 천연 또는 합성 생체 재료. 이 검토는 세포 성장 및 조직 유도 요인의 제어 출시 차량 또는 DNA 이러한 요소에 대 한 인코딩을 위한 구조적 지원의 이중 역할에 장비의 사용을 요약 합니다. 합류 분자 세포 생물학, 재료 과학 및 공학 자연 발달 과정과 실험 및 치료 적 응용 프로그램에 대 한 직접 조직 형성을 모방 하는 제어할 수 있는 microenvironments를 만드는 도구를 제공 합니다.

초기 뿌리 풀의 운명: 경험적 및 수학적 증거의 자족 성인 불 임에 대 한 지원

불 임 여성 성인 포유류에서에서 초기 뿌리 풀의 중요성 최근 논의 되었습니다. 여 포 진행 (보조 기본 원시)의 역학의 수학적 모델을 활용 하 여, 우리 초기 뿌리 풀 CD1 마우스 생식 노화를 통해 성인 불 임에 대 한 충분 한 인지 검사 합니다. 각 단계에서 모 낭은 생 후 12 개월을 통해 6 일에서 계산 했다와 데이터는 두 가지 메커니즘을 나타내는 1 차 미분 방정식의 시리즈에 맞게 됐다: 유일한 여 포 소스 (고정된 풀 모델)와 원시 난 포의 초기 풀 또는 초기 원시 여 포 풀 번째 줄기 세포 (줄기 세포 모델)에 의해 보완. 고정된 풀 모델 실험 데이터에 적합, 최대 관찰 된 기본 뿌리 번호를 정확 하 게 나타내는 나이의 4-6 개월에 도달. 아니 번째 줄기 세포 SSEA-1 immunostaining으로 식별 될 수 있습니다, 있지만 줄기 세포 모델 드 노 보 원시 여 포 생산 속도의 범위를 사용 하 여 테스트를 했다. 관찰을 설명 하는 데 실패 줄기 세포 모델에서 모 낭은 시간이 지나면서 감소 및 축적과 마우스의 초기 비옥한 수명 동안에 기본 모 공 이후 감소 평행 하지 않았다. 우리의 결과 난소 낭의 초기 기부금의 줄기 세포; 감지할 수에 의해 보완 되지 설립된 교 동의 오히려, 성인 마우스의 다 산 요구를 보장 하기 위해 충분 하다.

고분자 합성 Microenvironments Extrahepatic 섬 이식으로 건설 기계 임대

간장 이식의 독도와 관련 된 문제 섬 이식의 광범위 한 적용을 배제 수 있습니다. 따라서, 우리 독도 합성 생 분해성 폴리머 비 계를 사용 하 여 extrahepatic 이식에 접근 방법을 개발 하고자 했다.

Activin에 의해 세균 세포의 산 후 레 귤 레이 션: 초기 뿌리 풀의 설립

포유류 암컷 follicular 저장을 통해 단일 일생 동안 배 란에 필요한 수를 초과 하는 사춘기를 입력 합니다. Follicular 고갈 생식 전 생애에 걸쳐 발생 하 고 여 포 풀이 모두 사용 하는 경우 폐, 또는 생식 노화에 끝납니다. 종의 초기 뿌리 풀의 생산을 규제 메커니즘을 잘 이해 하지. 그러나 follicular 예비 설립은 생식 cyclicity의 길이 정의 하는 데 중요 합니다. 여기 우리는 그 activin를 (rh 액-타), 여 포 형성 및 성장에 체 외의 알려진된 레 귤 레이 터 번째 낭종 고장 및 여 포 어셈블리 시간 동안 신생아 동물에 게 투여 하면 30% 산 후 마우스 원시 난 포의 수를 증가 보여줍니다. 초기 여 포 풀에서이 확장 생식 세포 및 granulosa 셀 확산에 상당한 증가 특징 이었다. 그러나, 초과 낭 형성 직후 출생 사춘기에 유지 되지 않았다 고 성인 rh-액 타 및 차량 처리 동물 모두 정상 불 임. 여 포 사이 키네틱 상수 (k(a))는 동물의 두 그룹에 대 한 모델 및 경험적 데이터를 k(a)와 일치에 대 한 rh 액 타 처리는 두 번 차량 취급 동물의. 여 포 형성, 모 근 손실 및 출생에서 출생 후 하루에 19의 여 포 확장 운동 상수 또한 차량과 rh-액 타 치료 조건에 대 한 파생 되었다. 중요 한 것은, exogenous rh 액 타 소개 사춘기에서 여 포의 수를 제어 하는 메커니즘을 감지 내장 난소 쿼럼 공개. 우리 oocytes 사춘기, 존재의 최적의 수 고 여 포 수를 초과 하는 경우 oocyte 품질 비용 발생 합니다 제안 합니다. 제안 된 메커니즘 난소 포함 된 oocytes 따라서 prepubertal 기간에 비정상적인 호르몬 자극의 얼굴에 다 산을 유지 사춘기 이전에 낮은 품질의 초과 낭을 제거 하는 수단을 제공 합니다.

여 포 성숙의 세포 외 기질 함수입니다

기질 (ECM)을 촉진 및 확산, 차별화, 그리고 여 포의 성장과 oocyte 성숙에 대 한 발생 해야 생존 하 되이 국한 되지 않습니다 포함 한 많은 세포 프로세스를 억제 한다. 난소 세포의 세포질 프로세스의 ECM 규제는 조류를 포함 한 많은 동물 모델에서 조사 되 고, 쥐, 소, 돼지, 토끼, 양, 인간, 그리고 마우스. Granulosa 셀 더 자주 고용 하는; 그러나, 그대로 여 포와 난소의 문화 개발 되었습니다 하 고 공부 하는 folliculogenesis에 ECM 기능을 활성화. 검사 된 ECM 구성 요소는 개별적으로 사용 (콜라겐, laminin, fibronectin) 또는 집합적으로 (Matrigel, 절연 기저 lamina 및 ECM 셀 라인에 의해 생산) 두 2 및 3 차원 모델 시스템에. Granulosa 셀 문화 ECM 영향 형태, 집계 및 통신, 생존, 확산, 그리고 steroidogenesis; 반면에 여 포와 난소 문화 folliculogenesis의 규칙을 보여 줍니다. 이 문서는 개발, 전체 난소 세포에 ECM 기능을 설명 하 고 여 포 성숙의 구조-기능 관계를 식별 하는 기술 개발의 잠재력을 강조.

여 포의 성장과 Oocyte 개발 단계 별 허용 체 외 문화 환경의 Id입니다

가능한 oocytes의 가용성 새로운 생식 기술의 개발에 제한 요소 이다. 미 숙 oocytes 최근 수십 년 동안 체 외 성장에 많은 시도 했다. 최근에, 수정된 alginate 기반 3 차원 문화 시스템은 다중 레이어 2 차 난 포의 성숙 및 성장 지원 하도록 설계 되었습니다. 이 시스템은 meiosis, 수정, 및 blastocyst 단계로 발전을 성공적으로 완료 된 oocytes를 생산할 수 있게 했다. 문화 2 층 보조 낭 이후에 하려고 원래 조건 하에서 실패 했다. 여기, 우리가 alginate 건설 기계 임대 다양 한 농도의 모 낭을 캡슐화 하 여 2 층이 된 여 포의 성장과 oocyte 발달 능력에 alginate 일관성의 효과 조사 했다. 생존 율에 큰 차이가 있었지만 0.25%와 0.5 %alginate 낭과 문화의 8 일 후 1.5%와 1.0 %alginate 비해 antrum 형성의 더 급속 한 성장을 지원 합니다. Alginate 비 계 농도 확산 및 체세포 (theca 및 granulosa 셀) 형태학 변화 측면에서 측정의 분화에도 영향을 스테로이드 프로필 (androstenedione, estradiol, 및 황 체 호르몬), 그리고 특정 분자 마커 (Fshr, Lhcgr, 및 Gja1). Theca 세포 증식 및 스테로이드 생산 낭 1.5 %alginate 교양에 방해 했다. 체 외 수정 및 배아 문화 oocytes 0.25 %alginate 얻은 가장 높은 개발 능력 유지를 공개 했다. 전반적으로, 현재의 연구 alginate 비 계 일관성 체 외 folliculogenesis 및 oocyte 개발에 영향을 미치는 고 alginate 문화 시스템 수 고 maximally 크기와 문화에 대 한 선택 하는 모 낭의 단계에 따라 여 포 성장 지원에 맞게 조정 해야 했다.

줄기 세포 연구-치의 제 2 차 연례 회의의 과학 돌아가기

PLG 중재 Lipofection에 의해 신경 성장 인자 식

효율적인 유전자 전달의 생체 신경 재생 촉진 등 기초 및 응용 연구 모델에 대 한 기본적인 도구를 제공 합니다. 우리는 캡슐화 및 플라스 미드 DNA와 양이온 지질 complexed의 지속적인된 출시를 위한 시스템을 개발 하 고 neurite 파생물의 체 외 모델을 사용 하 여 그들의 효능을 조사. 지속적인된 lipoplex 릴리스 제조 조건에 의해 제어 속도와 최대 50 일 동안 얻은 했다. 출시 된 lipoplexes 그들의 활동을 유지, NIH3T3 transfecting 48.2+/-8.3% 세포 3.97x10의 루시페라아제 활동 (7) RLU / mg. 신경 성장 인자 (NGF) 식 neurite 파생물의 두 가지 모델에 근무 했다: PC12 및 기본 지 루트 중추 (DRG) co-culture. 폴리머 중재 lipofection pc12의 강력한 neurite 파생물을 도출 하는 생리 활성 NGF 생산. EGFP/NGF 듀얼 식 벡터 neurite 파생물 NGF의 분 비를 확인 하는 동안 transfected 세포 (GFP-긍정적인)를 식별 합니다. DRG neurite 파생물을 자극 하는 액세서리 셀 인구순 NGF 분 비의 기능을 검사 하는 co-culture 모델. NGF 인코딩 플라스 미드와 hek293t의 폴리머 중재 transfection DRG 뉴런으로 파생물을 유도. 이 시스템은 임 플 란 트 또는 신경 세포와 조직의 재생을 지원 하기 위해 안내 도관으로 조작 수 있습니다. 로컬로 neurotrophic 요인을 표현 하는 능력을 가진이 물리적 지원을 결합 신경 손상 및 질환 모델에서 약효 것입니다.

엔지니어링 건설 기계 임대 효율적인 유전자 전달에 대 한 조직 DNA의 표면 흡착

조직 공학 건설 기계 임대에서 유전자 전달 기능 조직 형성을 일으킬 수 있는 지역화 된 transgene 식 촉진을 가능성이 있다. 기판 중재 배달, 지속적인된 출시를 대체 배달 전략 immobilization 셀 기판에 교양으로 후속 배달의 고분자 표면에 DNA 단지를 기반으로 합니다. Polyethylenimine (페이) 조사 / DNA 복잡 한 immobilization와 조직에 후속 세포 transfection 엔지니어링 건설 기계 임대 poly(lactide-co-glycolide) (PLG)에서 조작. 기판 및 복잡 한 속성에 immobilization와 세포 transfection에 영향을 줍니다. PLG 촉진 N/P 비율 또는 DNA 복용량의 백분율 바운드 독립적으로 PEI/DNA 단지의 바인딩. Transgene 식 수준의 비슷하거나, 배나 bolus DNA 배달 덜 DNA 기반 제어 연구 보다 큰 있습니다. Immobilization homogeneously 또한 많은 transfected 세포에 그 결과 비 계를 통해 DNA 배포 (&gt; 60%)에서 낮은 표면 수량 (< 50 ng). 중요 한 것은,이 방법은 3 차원 비 계를 통해 셀 transfect 고용 수 있습니다. 건설 기계 조직 공학 임대는 자료의 범위에서 다양 한 모양으로 조립식 수 잠재적으로 다양 한 응용 프로그램에 대 한이 전략 사용 하 고.

DNA Microspheres 방출의 근육 전달: Microsphere 속성과 Transgene 식

플라스 미드 로드 microspheres 대상 조직에 지역화 된 하 고 지속적인 자료를 제공 하며 따라서 transgene 식 홍보에 벌 거 벗은 DNA의 효율성을 향상 시킬 가능성이 있다. 이 보고서에서 microsphere 설계 매개 변수는 범위 및 기간 intramuscularly 고분자 분자량 및 질량 전달 하는 DNA의 식 transgene의 연관 하 여 조사를. 플라스 미드 DNA 폴 리 (lactide-co-glycolide) microspheres 극저온 더블 유제 프로세스에 통합 되었다 그리고 microspheres intramuscularly 주입 했다. 벌 거 벗은 플라스 미드의 bolus 주사 전시 하 고 점차적으로 시간이 지남에 감소 transgene 식으로 근육 세포의 transfection 컨트롤 사용 되었다. 낮은 분자량 폴리머에서 조작 Microspheres 174 일을 통해 그 후 감소 하는 하루 92, 하루에 1 증가 식 수준을 했다. 감소 하는 microsphere 대량 전달 같은 기간 동안 꾸준한 식 결과. 그러나, 높은 분자량 폴리머와 조작 microspheres 14 일만에 대 한 식을 했다. 근육 주사는 이물질에 대 한 응답 microspheres, 결과 및 이러한 침투 셀 인접 한 페 주로 했다. Transgene 식을 결정 하는 microsphere 속성의이 이해 및 transfected 세포의 분포 조직 공학 또는 DNA 백신 분야에 자신의 응용 프로그램에 쉽게 수 있습니다.

암 생존자와 불 임: 새로운 문제와 새로운 답변의 검토

암 치료의 향상 암 본은 고 경험 방식을 변경 합니다. 그러나이 같은 치료 다 산의 감소를 포함 하 여 수많은 초기 및 런타임에 효과를 이끌어 냈다. 불 임은 남성 및 여성 생존자 들의 생물 학적 및 정신적인 건강을 좌우할 수 있다. 생식 과학은 이제이 문제를 해결 하 고 제거 하거나 완화 치료 관련 결과이 유망한 새로운 접근 방식을 제공 하는 메서드를 제공할 수 있습니다. 현재와 미래의 봉사 생존자의 요구 사항을 더 완벽 하 게, 건강 생식 옵션에 대 한 공급자 불 임 환자 해답 후에 그들의 역할의 복잡 한 요구를 이해 해야 합니다. 이 검토 알려진 원인과 불 임 암 생존자로 다 산 보존 가능한 형태 들의 경험에 대해 설명 합니다.

조직 설계 낭 라이브, 비옥한 자손을 생산

체 외 성장 oocytes 낮은 품질의 고 따라서 제한 능력을 저장 하거나 그들의 다 산을 유지 하고자 하는 여성의 ova 은행 몇 라이브 출생 항복. 우리 조직 유지 oocyte의 3-차원 (3D) alginate hydrogel 매트릭스를 설계 하 여 엔지니어링 원칙 미 숙 마우스 난 포의 문화에 적용 건축과 셀 상호 작용 체 외. 3D 문화 vivo에서 여 포 환경과 유사한 고 hydrogel 캡슐화 낭 oocytes의 성숙 vivo에서 그 비슷한 수정에 대 한 용량 내에서 성숙한 oocytes 개발. 교양된 oocytes에서 파생 된 배아 체 외 수정 된 pseudopregnant에 전송 된 여성 쥐 실행 가능한, 그리고 남성과 여성의 자손은 비옥한. 우리의 결과 alginate hydrogel 기반 3 차원 체 외 문화 모 낭의 정상적인 성장과 낭과 oocytes의 개발을 허용 하는 방법을 보여 줍니다. 이 시스템 여 포 생물학에서 검색을 위한 새로운 기회를 만들어 고 인간의 난 자 은행 들이 다 산의 보존을 위한 핵심 기술을 설정 합니다.

유전자 발현 및 국제화에 따라 벡터 움직이지 단백질 흡착: 단백질 신분과 밀도에 대 한 의존도

유전자 전달 비 바이러스 성 벡터의 일반적인 흡착 단백질 코팅 표면에 필요한 DNA의 양을 줄일 수 있으며 또한 transgene 표현과 transgene 표현 하는 셀의 수를 증가. 표면에 단백질을 세포 접착 및 벡터 중재 immobilization, 그리고 유전자 전달 향상 2 colocalize 기능. 이 보고서 조사 메커니즘과 특이성이 있는 단백질 코팅 유전자 전송을 강화 하 고 단백질 코팅 특정 통로 의해 국제화에 대 한 벡터를 대상으로 하는 경우를 결정 합니다.

규제와 SiRNA 메커니즘을 통해 조직 재생에 대 한 셀 동작의 지도

RNA intereference 및 짧은 방해 RNA (siRNA) 대상 유전자의 표정을 감소에 효과가 입증 되 고 홍보 하 고 감독 기능 조직 수리 및 재건 조직 공학 응용 프로그램의 성장을 위한 귀중 한 도구를 제공. Sirna는 유전자 입을 메커니즘입니다 이중 가닥 RNA 중재 시퀀스 특정 mRNA 저하를 포함 하 고 셀 동작을 제어 하는 강력한 메커니즘입니다. 대상 유전자의 표현을 줄이기 위해 siRNA 사용 하 여 한의 식을 일으킬 수 또는 조직 유도 요인 더 줄기 또는 뿌리 세포의 분화를 직접 조직 형성의 근본적인 연구 또는 vivo에서 재생을 촉진 시키는 응용 프로그램에 유용할 수 있는 중생을 억제 하는 요소를 제거 합니다. Sirna의 잠재력 신생 혈관, 뼈와 신경 재생 및 상처 치유 분야에서 구체적인 예제를 통해 보여 줍니다. 또한, siRNA 조직 공학 응용 프로그램에 대 한 효과적으로 전달 하기 위해 문제 해결 됩니다. siRNA 조사 조직 형성을 촉진 하는 강력한 도구를 나타내고 조직의 재생을 촉진 하는 목표를 식별 하 고 효과적인 전달 시스템 개발을 위한 수많은 기회는 존재.

비 바이러스 성 벡터 배달 못 히 알루 론 산 Hydrogels에서

Hydrogels 지원으로 조직 공학에서 조직 형성에 대 한 또는 비 바이러스 성 유전자 치료 벡터 로컬로 전달 하기 위해 널리 사용 되어 왔습니다. 이러한 기능을 결합 하 여 Hydrogels 홍보 조직 형성으로 이어지는 특정 세포 프로세스 기본 도구를 제공할 수 있습니다. 이 보고서는 hydrogel와 벡터에 대 한 물성의 함수로 hydrogels에서 유전자 치료 벡터의 제어 릴리스를 조사합니다. Hydrogels 4-팔 poly(ethylene glycol) (나무 못) 아크릴 photocrosslinking 아크릴 수정 히 알루 론 산 (HA)에 의해 형성 했다. 콘텐츠, 폴리머 및 HA와 못의 상대적인 조성 변조 붓기 비율, 물 콘텐츠 및 성능 저하는 hydrogel 통해 벡터의 전송에 영향을 미칠 수 있습니다. 모든 hydrogels 했다 물 94%의 콘텐츠 또는 더 높은, 하지만 물 콘텐츠 및 말뚝의 감소와 증가 비율 붓기: 하 비. Plasmids hydrogel 출시 초기 2 일 중 대부분에 안정적으로 통합 했다. 버퍼에 부 화에 대 한 누적 자료와 약 20% ~ 80 %hydrogel 구성에 따라 첫 번째 주 동안 발표 감소 말뚝 또는 콘텐츠, HA 증가 함께 증가 했다. Hydrogels hyaluronidase, 하, 저하 효소에서에서 incubated 크게 증가 hydrogels 4% 말뚝 및 4% 포함 된에 대 한 플라스 미드 분리 하 아크릴. 플라스 미드 polyethylenimine complexed 캡슐화 hydrogel 존재와 부재 hyaluronidase의 모두에서 출시 하는 단지의 미만 14% 했다. 복잡 한 크기와 벡터와 hydrogel 간의 상호 작용에서 단지 가능성이 결과의 제한 된 릴리스. 이러한 연구는 비 바이러스 성 벡터 자료는 hydrogel 및 비 바이러스 성 벡터의 지역화 된 납품을 극대화 하기 위한 벡터 및 hydrogel 디자인을 제안 하는 벡터의 물리적 특성에 대 한 의존도 보여줍니다.

여 포 Microenvironment 엔지니어링

체 외 난소 여 포 문화 folliculogenesis, 조사 도구를 제공 하 고 5 월 1 일 여성 불 임 보존 옵션을 제공 합니다. 난소 여 포 성숙에 조직 공학 원리 응용 뿌리 이내 여러 세포 구획의 성장을 조정 하 게 됩니다 제어할 수 있는 microenvironments의 생성 될 수 있습니다. 3 차원 문화 시스템 뿌리 건축, 그로 인하여 중요 한 셀을 유지 보존할 수 및 연결 된 뿌리 기존의 2 차원 문화 시스템에 잃어버린 세포-매트릭스 신호. 생 화 학적 및 기계적 환경 조작 하는 동안 follicular 구조를 유지 하 여 포 성숙 기본 근본적인 생물학 원리 조사를 관리할 수 있는 시스템 개발을 수 있게 된다. 이 검토 난소 여 포 문화의 최근 발전을 설명 하 고 직면 하 고 상 조 불 임 여성을 위한 번째 보존의 궁극적인 목적으로 뿌리 문화에 적용할 수 있는 조직 공학 원리를 강조.

Alginate Hydrogels 및 체 외 여 포 개발에 미치는 영향의 물리적 특성

기계적 특성 천연 및 합성 세포 외 매트릭스의 밀도 세포 프로세스에 영향을 미칠 및 규제 조직 형성 알려져 있다. 이 보고서에 이러한 요소 독립적으로 하지 난소 여 포 개발에 자신의 역할에 대 한 조사 되었다. 매트릭스 구성 고체 농도 또는 캡슐화 biomaterial의 어 금 니 질량 감소를 통해 제어할 alginate. 매트릭스 강성과 솔리드 농도 감소 여 포 성장 및 antral 구멍 형성 알 수 있듯 여 포 세포 유형의 조정된 차별화, theca 세포 분화, oocyte 성숙, 고 상대 호르몬 생산 수준 향상. 뻣 뻣 한 환경 선호 높은 황 체 호르몬 안 드로 겐의 분 비를 하는 동안 alginate 강성 감소 안 드로 겐과 progesterone 축적을 초과 하는 스 트로 겐 생산 귀착되 었 다. 이러한 연구 biomechanical 환경 및 여 포 기능 사이 직접 연결을 처음으로 공개 하 고 여 포 개발 규제 소설 비 호르몬 메커니즘을 제안.

정상적인 생식 기능을 기반이 되는 구조

메커니즘 및 생식 기능의 생리학은 시간에 걸쳐 과학자 매혹. 최근 세포질이 고 분자 수준의 구조 연구는 생식 시스템 및 시그널링 네트워크에 대 한 전례 없는 통찰력을 제공 합니다. ' 최첨단 ' 사설이 각이 영역, 즉, 여 포의 해부학 적 무결성, 바인딩 파트너와 activin의 분자 구조 및 inhibin의 분자 규제의 최근 예를 제공합니다. 이러한 세 가지 예의 구조 기능을 알리는 생식 건강을 설명 하는 데 도움이 및 생식 질병에 대 한 솔루션을 제공할 수 있습니다.

공간적 Neurite 확장에 대 한 지역화 된 신경 생존 유전자 배달 꽃무늬

자연 조직 부분에서 유전자 발현의 공간적 패턴에서 발생 하는 복잡 한 구조를 가질 수 있습니다. 손상 된 조직 재생 전략 이러한 아키텍처 기능을 복원 하려면 다시 만들어야 합니다. 이 문서에서는 지시 세포 프로세스에 대 한 기판에서 공간적 제어 유전자 전달을 보여 줍니다. 비 바이러스 성 벡터 결합 기법을 사용 하 여 선형 패턴에서 기판에 움직일 수 있었다 및 셀 표면에 교양 셀 인구 내에서 유전자 발현을 지역화 된 했다. Transfection는 패턴 폭 낮은 버스가 아닌 마이크로 채널 치료와 벡터 농도에 따라 효율성과 함께 100 엄마에서에서 달성 했다. 세포질 프로세스를 지역화 하는 꽃무늬 식의 능력은 신경 co-culture 모델을 사용 하 여 조사 하 고 있다. Diffusible neurotrophic 요인 신경 성장 인자 패턴된 표현의 시작 신경 생존과 직접 패턴에 인접 한 지역에서 크게 감소 하는 패턴에 주로 neurite 밖으로 성장 합니다. 기본 neurite 밀도 패턴 없이 표면에 패턴화 된 기판 보다 상당히 컸다. 이 방법은 조직 형성을 지시할 수 있는 복잡 한 세포 구조 조직에서 관찰을 다시 재생 전략에 고용 수 유전자 발현 패턴을 만드는 기본적인 기술을 보여 줍니다.

꽃무늬 PLG 기판 DNA 배달 지역화 및 Neurite 확장 됩니다

조직 공학 신경 재생 활성화 전략 홍보 하 고 병 변에서 neurite 확장을 직접 수 있는 방법이 필요 합니다. 이 보고서에서 감독된 neurite 파생물 neurite 확장을 촉진 하 고 확장 neurites을 직접 neurotrophic 요인의 식을 일으킬 수 지형학 패턴화 된 기판에서 유전자 배달을 사용 하 여 체 외 조합 접근을 조사. 도관 또는 재생을 위해 교량을 조작 하는 사용 된 Poly(lactide-co-glycolide) (PLG), 100, 150, 250 microm 너비와 채널을 만드는 성형 압축 했다. DNA 단지 PLG, 하 움직일 수 있었다 고 셀 기판에 교양 채널 폭과 DNA 금액에 따라 효율성과 함께 페 했다. 기본 신경 및 액세서리 셀으로 구성 된 co-culture 모델 neurite 파생물 채널 내에서 조사를 고용 했다. 액세서리 세포에 의해 신경 성장 인자 (NGF)의 지역화 된 분 비 신경 세포 생존 및 neurite 확장 추진. 신경 세포에서 NGF 식 채널의에서 교양 채널의 부재에서 보다 더 이상 기본 neurites 전시. 작은 폭 PLG microchannels 교양 뉴런 전시 방향 및 큰 채널 보다 보조 돋 아 덜 더 큰 정도. 마지막으로, 표면 immobilization 채널을 특정 신경 책자에 맞출 수 있습니다 각 채널에서 뚜렷한 plasmids의 배달에 대 한 허용. 이 이렇게 물리적 지도, 결합 하 여 유전자 전달 하는 기능을 보여 줍니다 및 대상 특정 axonal 인구 다양 한 neurotrophic 요인 요구에 맞게 수 있습니다.

생물 발광 영상 Transfected 세포 배열에서 정규화에 대 한 평가

Transfected 세포 배열 (TCAs) 높은 처리 기술을 기능 셀 반응 유전자 발현 상관 관계를 나타냅니다. Tcas의 진보에도 불구 하 고 개선의 폭이 광범위 하 게 응용 프로그램에 대 한 필요 합니다. 2 플라스 미드 시스템과 듀얼-생물 발광 양적 transfection에 다양성을 정상화 하 고 감도 증가 이미징 결합 TCA를 개발 했습니다. 2 플라스 미드의 구성: 각 자리 내 (i) 정규화 플라스 미드 및 관광 명소, 배열의 기능 끝점에 대 한 책임 사이 변화 한다 (ii) 기능성 플라스 미드. 듀얼 루시페라아제 기자 (renilla, 개 똥 벌레 루시페라아제)의 생물 발광 영상 최소한의 post-transfection 처리와 함께 세포 반응의 과민 하 고 정량적 검출을 제공합니다. 배열 MCF 7 유방암 세포에 있는 에스트로겐 수용 체 알파 (ERalpha) 활동 척도를 적용 했다. 개 똥 벌레 루시페라아제 식 감독 ERalpha 레 귤 레이트 된 프로모터를 포함 하는 플라스 미드는 양이온 지질 complexed 정규화 플라스 미드와 혼합 하 고 배열에 입금. 응급실 유도 유사 에스트로겐 유도 루시페라아제 식 10 배와 함께 전통적인 분석 실험 방법을 통해 얻은 결과 antiestrogen fulvestrant 또는 차량. 또한, 배열 복용량 응답 생물 발광 부 량의 감도 보여주는 스 트로 겐을 캡처한. 이 시스템 환자 특정 치료법의 개발에 대 한 잠재적인 응용 기초 과학 연구를 위한 도구를 제공합니다.

행렬 및 조직 공학에서 DNA 배달 건설 기계 임대

재생 의학 기능 조직을 대체 생성 하는 것을 목표로, 일반적으로 제어 환경을 만드는 과정을 촉진 하 고 생 또는 이식 줄기 또는 뿌리 세포의 분화를 지휘. 건설 기계 임대 지역 환경 제어 하는 방법을 제공 하 여 다양 한 전략에 중심 역할을 제공 합니다. 발판에서 유전자 전달 조작 지시 세포 기능에 대 한 로컬 환경에 다양 한 접근 방식을 나타냅니다. 생체 재료, 유전자 치료 및 약물 전달의 인터페이스에서 리서치 벡터 및 biomaterial scaffold 충족 되어야 하는 여러 디자인 매개 변수를 확인 했다. 재료와 효율적인 납품을 생산 하는 벡터에 대 한 디자인 원칙 추가 개발이 필요 하지만 진행 유전자 전달 조직 공학 비 계 내에서 달성으로 했다. 그럼에도 불구 하 고,이 진보 transgene 식 발판으로 취득 기회 배달 또는 식의 개발 하 고 조직 형성을 촉진 하는 최상의 방법을 식별할 수 만들었습니다. 전략 달성을 제어, 조직 공학 비 계 내에서 지역화 식 임상 치료에 대 한 큰 약속을 가진 많은 조직 재생을 광범위 한 응용 프로그램을 할 것 이다.

생명 공학 및 난소 여 포입니다

난소 여 포 개발에 세포 외 매트릭스의 역할

난소 여 포 개발의 규제는 여 포의 3 차원 건축과 주변 조직 물리적 강성, 내 분 비 및 paracrine 연기 호르몬에 따라 달라 집니다. 3 힘이 되도록 적절 일 분 비, 신체 세포의 분화 및 성숙 된 oocyte의 여 포의 라이프 사이클에 걸쳐 통합 되어 있다. 여 포의 성숙 과정은 이러한 요인의 영향을 받아 난소 여 포 개발을 이해 하기 위한 새로운 도구를 제공 합니다.

Wilms 종양 유전자 단백질 1 난소 암 전이 연결 되며 셀 침공 변조

전이성 질환 상피 난소 암 사망의 주요 원인 이지만, 저자의 지식 intraperitoneal 전이 조절 하는 세포 메커니즘 크게 알려지지 않은. 난소 암 세포 발생 metastasizing 콜라겐이 풍부한 microenvironment submesothelial 행렬은 주로 간 질 성 콜라겐의 구성 되어 있기 때문에 유형 I 및 III.

펩 티 드-중재 Lipofection이 따릅니다 Lipoplex 물성 및 표면 표시 아민의 밀도 하는 것

펩 티 드 lipoplex 유전자 이동 하는 속도 제한 단계를 극복 하기 위해 physiochemical 속성을 수정 하 여 지질 중재 유전자 배달을 약효 수 있습니다. 이 연구의 목표는 양이온 펩 티 드 lipofection 향상 정권 lipoplex 물리적 특성의 변화에서 발생 증가 셀룰러 협회 등 행동의 메커니즘을 조사 하 고 있었다. 양이온, 짧은 펩 티 드는 펩 티 드, 지질 및 DNA를 혼합 하 여 lipoplexes에 반영 되었습니다. Lipoplexes 젤 지체, 동적 광 산란, 형광 현미경 검사 법을 사용 하 여 특징 했다 그리고 fluorescamine에 의해 표면 표시 아민의 양을 계량 했다. 크기, 잠재력, 제타 및 lipoplexes에 대 한 표면 아민 펩 티 드/DNA 비율에 의존 했다. 최대 13-fold 페, 셀의 비율이 증가 하 고 최대 76-fold 단백질 발현 증가 lipoplexes에서 펩 티 드의 포함 귀착되 었 다. Transfection 향상이 작은 입자 직경 및 lipoplexes의 긍정적인 제타 잠재력에 대응 뿐만 아니라 표면 표시 아민의 양을 증가 했다. 지질 혼자 상대 펩 티 드 수정 lipoplexes의 이러한 속성 강화 lipoplexes과 transfection에 대 한 속도 제한 단계도 보고 된 셀룰러 협회. 펩 티 드의 추가 직접 화학 수정 지질 증가 transfection에 필요한 만큼의 lipofection 향상 간단한 방법입니다.

Actinin 운동 성 관련 알파-4는 고급 및 전이성 난소 암에 연결 됩니다

고급 및 전이성 난소 암은 부인과 악성 종양에서 죽음의 주요 원인. 내 습 및 전이 제어 요인의 보다 자세한 이해는 소설 anti-metastatic 요법으로 이어질 수 있습니다. 비교 cDNA microarray 분석 및 확실 한 실시간 반전 녹음 방송 PCR (RT-PCR) 3 차원 콜라겐 I. 유전자 발현 인간 난소 암 조직에서 실시간 RT-PCR 및 기술 사용 하 여 RNA와 단백질 수준에서 평가 늦은 단계 난소 암 microenvironmental 신호, 특히 네이티브에 대 한 응답에서 발생할 수 있는 유전자 발현의 변화를 밝히기 위해 고용 했다 intraperitoneal 전이 동안 발생 하는 모델 세포 상호 작용을 합니다. 셀의 침공과 마이그레이션 콜라겐 침공 분석 결과 및 스크래치 상처 분석 결과 평가 했다. 3 차원 콜라겐 나 문화 주도 여러 유전자의 차동 식. Actinin 알파-4 (ACTN4), 세포의 운동 성, 규제에 연루 cytoskeleton 관련 단백질의 역할은 자세히 조사 되었다. ACTN4 RNA와 단백질 식 고급 전이성 인간 난소 암과 관련 된 했다. 이 보고서는 cytoskeletal 관련 단백질 ACTN4 증가 침공 및 운동 성 난소 암 세포의 3 차원 콜라겐 문화 조건에 의해 upregulated 보여 줍니다. 인간의 난소 종양에서 actn4의 식 관련 고급 단 병과 복 막 전이 된 것으로 밝혀졌다.

세포 외 기질 단백질 코팅 건설 기계 임대 홍보 Extrahepatic 섬 이식 후 당뇨병의 반전

생존 및 이식된 췌 장 독도의 기능 제한, 때문에 일부 섬 매트릭스 첨부 파일 격리 절차 동안 중단 됩니다. 플랫폼으로 폴리머 건설 기계 임대를 사용 하 여 작은 섬이 식을 위한, 우리 vivo에서 독도 둘러싸고 알려진 주요 세포 외 기질 구성 요소 교체 extrahepatic 이식 사이트에서 이식 기능을 향상 시킬 것 이라고 가설을 조사 했다.

표면 폴 리 에틸렌 글리콜 Nonspecifically 움직이지 단지 기판 중재 유전자 전달을 향상 됩니다

기판 중재 유전자 배달 immobilization을 biomaterial 부착식된 셀 로컬 microenvironment 내에서 높은 DNA 농도를 노출 하 여 유전자 전송을 향상을 유전자 치료 벡터의 설명 합니다. 표면 화학 nonspecifically 움직이지 단지 골드 alkanethiols의 조립된 monolayers (SAMs)을 사용 하 여 transfection 영향을 보여줘 왔다. 이 보고서에 SAMs oligo(ethylene glycol)의 존재는 SAM에 (예:) 그룹화 여부 조사를 제어 표면 복잡 한 형태에 영향을 미칠 수 있고 transfection 향상 제공 데 다시. EG 그룹 세포 접착에는 영향을 미치지 않은 비율에 포함 됐다. EG 그룹이 포함 된 표면 보다 실질적으로 더 큰 transfection 귀착되 었 다 sam EG carboxylic 산 종료 alkanethiols의 조합을 포함 하는 복잡 한 일반 immobilization 또는 SAMs EG 그룹 다른 기능 그룹을 함께 구성. Transfection 수준에서 향상 복잡 한 바인딩 밀도 또는 공개 프로필에 표시 되지 수 수 없습니다. 원자 힘 현미경 이미징 움직이지 단지의 EG 그룹 SAMs 내 복잡 한 크기와 모양에 영향을 바인딩에 따라 복잡 한 형태를 유지 하기 위해 이러한 표면의 능력을 나타낼 수 있습니다 밝혔다. 유전자 전달 조직 공학 및 진단 응용 프로그램에 대 한 건설 기계 임대 움직이지 단지의 형태를 제어 및 표면 화학을 통해 transfection 수준에 영향을 미칠 수 있게 번역 될 수 있습니다.

Vivo에서 플라스 미드 배달에 대 한 계층화 된 PLG 건설 기계 임대입니다

조직 공학 건설 기계 임대에서 유전자 배달 생 또는 이식, 조상 세포의 기능을 직접 조직 유도 요소의 지역화 식을 일으킬 수 있다. 이 보고서에서 우리 캡슐화 된 플라스 미드와 건설 기계 임대 날조를 위한 층을 이루는 접근을 개발 하 고 intraperitoneal 지방 세포 이식에 대 한 널리 사용 되는 사이트에 이식 다음 in vivo 유전자 이동 조사. 다공성 poly(lactide-co-glycolide) (PLG) 건설 기계 임대 플라스 미드를 포함 하는 비 다공성 레이어 두 다공성 폴리머 레이어 사이 삽입 된 가스 발포 메서드를 사용 하 여 조작 했다. 계층화 된 비 계 디자인과 분리 마약 배달 차량으로 기능에서 비 계 구조 요구 사항을 크게 플라스 미드 병합 효율 건설 기계 임대 층 없이 형성 된 상대적인 증가. 다중에 대 한 플라스 미드 복용량 (200, 400, 및 800mug), transgene 식 레벨 처음 몇 일 동안 만족 하 고 다음 1-2 주 기간 동안 거부 했다. Transfected 세포 주변의 지방 조직 및 비 계 내부에서 관찰 했다. 대 식 세포를 풍부 하 게 transfected 세포 유형으로 확인 되었다. 플라스 미드 섬유 아 세포 성장 인자-2 인코딩을 제공 하는 건설 기계 임대 (FGF-2) 2 주 총 혈관 볼륨 분수 컨트롤을 기준으로 40% 증가 자극. 지역화 된 transgene 표현의 능력 비 계 기반 유전자 전달 시스템을 위한 플랫폼을 제공 유도 세포 재생 의학에 접근 한다.

공간적 가이드 Neurite 확장에 대 한 유전자 발현 패턴

지도 분자의 지역화 식에 의해 pathfinding 축 삭은 신경 시스템의 적절 한 개발에 대 한 중요 합니다. 이 보고서에서는 neurite 지침 체 외 조사를 잘 정의 된 공간적 패턴된 진 식 시스템 소개. 소프트 리소 그래피 기술로 기판 중재 유전자 배달 결합 하 여 nonviral 유전자 배달은 꽃무늬와 벡터 집중력과 시스템의 유연성을 강조 하는 패턴의 폭을 변경 하 여 지역화 된 식의 지역에서 생산 되는 단백질의 양을 다양 했다. 신경 coculture 모델은 신경 성장 인자 (NGF) 식의 공간적 패턴에 대 한 응답을 조사 하기 위해 사용 되었다. 수용 성 NGF 그라데이션 elicited 지침 큐 및 지침 정도 신경 패턴 및 액세서리 세포와 신경 seedings 사이의 시간에서 교양는 거리에 의해 지배 되었다. Diffusible NGF의 일부 세포 외 공간에 문화 표면에 바인딩되며 표면 관련 NGF 지원 신경 생존과 neurite 파생물. 그러나, 혼자 표면 바인딩 NGF 그라데이션 안내 신호를 유도 하지 않았다 및 사실 지도 큐 성 NGF 기울기로가 면. NGF 확산의 수학적 모델링 농도 기울기를 예측 하는 데 사용한 그리고 모두 절대 고 소수 그라디언트 지도 neurites 패턴화 된 유전자 발현에 의해 생산의 기존 설계 된 단백질 그라디언트 얻은 값에서 크게 달랐다. 공간적 패턴된 유전자 발현 neurite 지침을 홍보할 수 있습니다 요인 조사를 다양 한 도구를 제공 합니다.

기판 중재 유전자 배달 갖고 펩 티 드 Lipoplexes

Biomaterial 기반 유전자 전달 효율 자료와 벡터의 상호 작용에 의해 결정 됩니다. Lipoplexes, 표면 immobilization 셀 셀 어레이 및 패턴된 transfection 통해 모델 조직 형성 transfect에 사용 되었습니다. 배달 효율성이 더 증가 자료/벡터 상호 작용을 변경 하 여 극복할 수 있습니다 셀룰러 국제화에 의해 제한 됩니다. 이 보고서에서 우리 양이온 펩 티 드와 자기 조립 통해 lipoplex 물리적 속성 수정을 조사 하 고 이후에 셀룰러 협회, 국제화 및 DNA와 transfection 핵 누적 계량. 지질 혼자 상대 펩 티 드 lipoplexes 강화 하 여 transfection 최대 4.6-fold. Lipoplex에 펩 티 드의 존재 증가 하 여 국제화 효율 최대 4.5-fold 2.1-fold에 의해 lysosomal DNA의 비율을 감소 및 3.0-fold에 의해 핵 축적 효율을 증가. 또한, 펩 티 드 lipoplexes에 대 한 국제화 경로 분석 표시 clathrin 및 펩 티 드 무료 lipoplexes에 대 한 관찰 하지는 macropinocytosis에 상대적인 endocytosis caveolae 중재의 큰 역할. 이 결과 표면 immobilization 증가 셀룰러 국제화 및 세포 기반 분석 실험에서 재생 의학에 이르기까지 다양 한 응용 프로그램은 핵 축적 하 여 유전자 이동의 펩 티 드 유도 향상을 보여 줍니다.

마우스 여 포 Microenvironment Antrum 형성과 스테로이드 생산 조절: 유전자 표현 프로필 변경

Folliculogenesis 조정된 프로세스 이며 개발을 규제 하는 유전자는 vivo에서 조사 하기 어렵다. 체 외 문화 시스템 므로 진 여 포 개발 하는 동안 모니터링할 식 패턴 개발 하는 동안 개별 모 낭의 평가 허용 합니다. 마우스 다중된 보조 모 공 (지름에서 150-180 microm) 8 일에 대 한 물성을 다양 한 3 차원 매트릭스에서 경작 했다. 체 외 뿌리 성장의이 기간 동안 antrum 형성 및 스테로이드 생산 감시 되었다, 그리고 Mrna는 격리 된. (스타, Cyp11a1, Cyp17a1, Hsd3b1, Cyp19a1, Fshr, Lhcgr, Aqp7, Aqp8, Aqp9, 및 Hif1a) 유전자의 식 수준은 측정 되었고 여 포 발달 상태에 상관. Antrum 개발 및 적절 한 수준의 에스트로겐과 황 체 호르몬을 생산 하는 모 낭 문화의 날 8 시 Cyp19a1 식의 스타, Aqp7, Aqp8, 및 Hif1a 및 34-fold 증가의 변하지 않는 표현 했다 고 Lhcgr 일 6과 8의 문화에서 상승 했다. 그러나 낭을 건강 한 했다 하지만 하거나 하지 않은 한 antrum 양식, 스테로이드, 적절 한 수준의 생산 증가 수준의 스타, Aqp7, Aqp8, 및 Hif1a 및 Cyp19a1, 문화의 날 8 시에 15 증가 시연 및 Lhcgr 레벨 문화의 날 8까지 상승 하지 했다. 우리의 지식을 하려면이 연구 alginate hydrogels 여 포 개발 하는 동안 성장 및 steroidogenesis를 연관 시키고 건강 한 모 낭 및 발달 불이익된 낭 식 패턴을 식별 하는 개별 문화를 사용 하 여 유전자 발현의 첫 번째 임시 분석을 제공 합니다.

척수 손상 후 Transgene 식에 대 한 여러 채널 다리를 공개 하는 플라스 미드

복잡 한 구조와 조직 재생 적절 한 세포질 프로세스를 촉진 하 고 조직의 직접 할 수 있는 전략을 필요로 한다. 플라스 미드 로드 여러 채널 브리지 및 세포질 프로세스를 직접 지원과 부상 사이트에서 유전자 이동 능력을 가진 척수 재생을 위해 설계 되었다. 다리 가스 발포 기술로 제조 된 제어할 수 있는 직경을 가진 여러 채널을 했다 및 플라스 미드를 캡슐화 합니다. 초기 조사 연구 다리 이식 subcutaneously (SC) 표시 transgene 식 44 일에 대 한 vivo에서 다리의 유전자 발현의 기 공 크기에 따라 달라 집니다. 쥐 척수에서 다리 측면 hemisection 지원 상당한 셀 침투에 이식, 채널과 transgene 식 레벨 rostral 꼬리를 감소 하는 임 플 란 트 사이트에 높은 수준의 걸쳐 채널, 축 색 성장을 내에서 셀 정렬. 기술 임 플 란 트 사이트에서 transfected 세포 모 공 및 다리의 채널에 있던 Schwann 세포, 섬유 아 세포, 대 식 세포의 transfection 내림차순으로 주로 발견 했다 밝혔다. 유전자 전달 및 비 계 아키텍처 간의이 시너지가 복잡 한 구조와 조직 공학 될 수 있습니다.

ECM 코팅 Poly(lactide-co-glycolide)에서 로컬 유전자 배달 여러 채널 척수 손상 후 다리

복잡 한 형상의 조직 엔지니어링 건설 기계 임대 조직 형성을 지시 하는 아키텍처를 제공할 수 있습니다. 재생을 촉진 시키는 이러한 건설 기계이 임대에서 약물 전달 복잡 한 제조 프로세스 때문에 자주 까다롭습니다. 여러 채널 브리지에서 DNA 배달 표면 중재 lipoplexes in vivo 부상된 척수에 전달 하기 위해 적용 되었습니다. 폴리머, DNA 증 착, 건조의 유무 및 ECM 컴포넌트의 존재의 표면 특성을 조사 했다. 생체 외에서 연구 그 fibronectin 생산 큰 식 수준과 immobilization 효율성 콜라겐, laminin, 그리고 아무 코팅에 비해 공개. 또한, ECM 코팅 PLG에 lipoplex 인큐베이션 식 건조 방법 중 하나를 기준으로 증가. 또한, 부 화 방법 더 homogeneously 분산된 lipoplexes와 더 높은 transfected 세포 건조 조건 기준으로 했다. 3 차원 교량을 번역 transgene 식 체 외의 높은 수준에 이르렀다. Vivo에서 다리를 움직일 수 lipoplexes 생산 2-fold 알몸 플라스 미드 보다 큰 했다 쥐 척수 hemisection 모델의 transgene 식 수준. 또한 lipoplexes 사용 하 여 식을 최소한 3 주 동안 지속. 표면 중재 배달 transgene 식 vivo에서 홍보 하는 복잡 한 형상의 건설 기계 임대에 적용할 수 있습니다.

움직이지 Polyplexes 및 기판 중재 유전자 배달에 대 한 Lipoplexes의 효능

비 바이러스 성 유전자 기판 중재 셀 접착제 생체, 되 나 과정을 단지 immobilization, 배달 배달 transfected 세포 또는 조직의 성장 모델 등 많은 생체 외에서 연구 응용 프로그램은. 이 보고서에서 우리 양적 표면 immobilization, 유전자 전달 효율을 조사 하 고 일반적인 bolus 납품이 효율성을 비교. 셀룰러 국제화 하면서 벡터를 무력화 하는 기능 biomaterial 및 벡터 속성에 의해 영향을 합니다. 따라서,이 벡터 형식 및 전달 방법 사이이 효율성 비교를 transfection 조건 처음 발견 했다 transgene 식을 최대화 하는. 폴리스 티 렌, DNA 단지 조직 문화에서에서 표면 배달 했다 bolus 배달에 셀 시드 이전 pre-adsorbed 혈 청 단백질에 움직일 수에 대 한 단지 부착 한 셀 위에 미디어에 추가 되었습니다. 수학적 모델링의 벡터 바인딩, 릴리스 및 2-사이트 모델을 사용 하 여 셀 연결 셀 바인딩 polyplex의 속도 lipoplexes에 대 한 보다 빠른 아직 두 벡터는 반감기가 약 17 분의 표면에 표시. Bolus 및 표면 배송에 대 한 대부분의 시스템에서 DNA 솔루션 또는 표면에,을 각각 남아. Polyplexes, 표면 배송에 대 한 핵에 polyplexes 셀에 연결의 인신 매매의 효율은 유사 하거나 bolus 배달, 그 표면 immobilization 단지의 활동 저하 될 수 있습니다 제안 보다 적습니다. 셀 연결 된 lipoplexes에 대 한 원자력 협회의 효율은 유사 하거나 bolus 상대적인 표면 배송에 대 한 더 큰. 이러한 연구 lipoplex 배달 강화 국제화 증가 소재 디자인 대상으로 해야 하는 반면 polyplexes의 표면 배달을 강화 하는 전략 벡터 디자인의 힘을 향상 프로그램이 제안.

Alginate Hydrogel 난소 또는 개별 모 낭의 Cryopreservation 다음에 문화에 의해 보조 여 포의 성장과 Oocyte 성숙

여성 암 진단에 직면에 대 한 다 산 보존을 위한 옵션 포함 됩니다 이후 re-transplantation에 대 한 난소 조직 cryopreservation 또는 암의 reintroduction 피하기 위해 선호 하는 문화를 체 외와 체 외 문화. 작은 미 숙 낭 동결-해 동 과정 생존과 여 포 성숙 (IFM) 여 포의 초기 성장을 포함 하 고 이후는 oocyte 성숙에 통해 성숙 수 있습니다. 난소 조직을 두 가지 형태로 cryopreserved 수 있습니다: (i) 대뇌 피 질의 스트립 여 포와 주변 기질 (곳을 알아내는-Ov) 또는 (ii) 개별적으로 고립 된 모 낭으로 구성 된 (곳을 알아내는에서). 이 연구의 목표는 스트립 또는 느린 냉동 cryopreservation 메서드를 사용 하 여도 cryopreserved 했다 낭 모 근 성장과 oocyte 성숙 평가 했다. 두 뿌리 그룹 비 cryopreserved 제어 낭 함께 12 일에 대 한 3 차원 문화 alginate 기반 시스템에서 성장 했다. 전반적인 생존 크기 증가 및 antrum 형성 속도 세 그룹 간의 비교 했다. 문화의 날 12, Androstenedione 레벨 기준으로 다른 두 곳을 알아내는-Ov 그룹에서 감소 했다 하 고 컨트롤에 상대적인 두 cryopreserved 그룹에 estradiol에 황 체 호르몬의 비율이 증가 했다. Gja1 (connexin 43 라고도 함)과 Gja4 (connexin 37 라고도 함) mRNA 식 컨트롤을 기준으로 cryopreserved 그룹의 날 6 감소 했다와 하루 12, gja1는 모든 세 그룹에 대 한 유사. 또한, 곳을 알아내는-결과 낮은 GVBD 속도 일부을 나타내는 장애 oocyte 개발. 전반적으로, 현재의 연구 시연 하는 마우스 preantral 낭, 난소 조직 내에서 또는 개별적으로 고립 된, 수 수 성공적으로 cryopreserved 느린 냉동 메서드에서 post-thaw 모 근 개발 및 steroidgenesis, oocyte 성숙 및 분자 마커 oocyte 및 granulosa 셀 연결에 대 한 입증.

폴 리 에스테 르 탄성 체 구 연산 산 성 기반을 통해 지속적인된 Transgene 식

고분자 건설 기계 임대는 조직 공학에서 중요 한 도구와 유전자 배달 다공성 건설 기계 임대를 사용 하 여 제어 조직 응답 가능한 방법이 될 수 있습니다. 여기는 생 분해성 폴 리 에스테 르 탄성 중합체, poly(1,8-octanediol-co-citrate) (POC) 플라스 미드 immobilization와 식민지 셀의 세포 transfection 기판으로 사용에 설명 합니다. 플라스 미드 (pDNA) 중 poly(ethyleneimine) (페이) polyplexes 형성 또는 기본 상태로 complexed 표면 흡착을 통해 건설 기계 임대 POC에 움직일 수 있었다. Polyplex 포함 된 건설 기계 임대 높은 로드 하 고 벌 거 벗은 pDNA 포함 된 건설 기계 임대 보다 출시 초기 속도 느리게 나타났다. HEK293 세포와 돼지 대동맥 평활 근 세포 (PASMC)의 polyplex에 시드 로드 건설 기계 임대 시연 세포 증식과 transfection 생체 외에서 최대 12 일 bolus transfection에 상대적으로 훨씬 더 오래 걸립니다. Vivo에서 transfection 마우스 intraperitoneal (IP) 지방 모델을 사용 하 여 평가 되었습니다. 생체 외에서 연구와 달리 장기 transgene 배달만 벌 거 벗은 pDNA 포함 된 건설 기계 임대와 함께 달성 했다. 특히, 벌 거 벗은 pDNA 포함 된 건설 기계 임대 높은 수준의 루시페라아제 및 녹색 형광 단백질 (GFP) 식 2 주에 대 한 vivo에서 승진. 결과 POC 건설 기계 임대 기판 중재 유전자 배달에 대 한 적합 한 소재는 보여줍니다. POC 건설 기계 임대 중재 비 바이러스 성 유전자 전달 통해 조직 형성에 장기적인 생물학적 신호 지원 잠재적으로 수 있습니다.

섬유 소 Hydrogels 비 바이러스 성 벡터 배달 생체 외에서

기반으로 하는 섬유 소 hydrogels 체 외 조직 형성을 촉진 하 고 분자 메커니즘을 기본 조사를 발판으로 고용 되어. 이러한 hydrogels 다양 한 세포질 프로세스 지원 및 생물 학적 신호의 프레 젠 테이 션을 향상 또는 특정 조직에 대 한 생물학적 신호에 맞게 개발 되 고 있다. 이러한 단서의 프레 젠 테이 션 또는 로컬 환경에서 조직 유도 요인의 식을 유도 하기 위해 고용 수 있습니다 유전자 납품을 통해 향상 될 수 있습니다. 이 보고서 조사 섬유 소 hydrogels 조직 성장의 두 체 외 모델에 대 한 내 진 배달: 내 i) 세포 캡슐화 및 ii) 세포는 hydrogel에 시드. 벌 거 벗은 플라스 미드 및 lipoplexes 효율적으로 내는 hydrogel 속 수 및 솔루션에서 1 일 후 봉된 DNA의 70% 이상 지속적인된 출시 최소 19 일에 대 한 관찰과, 젤 내에서 유지 됩니다. 캡슐화 된 lipoplexes 집계 하지 않았고 그들의 원래 크기를 유지 합니다. Transgene 식 lipoplexes의 전달에 의해 체 외는 차례로 DNA 농도의 함수. 캡슐화 된 셀에 대 한 모든 세포가 세포내 플라스 미드 졌고 transgene 식 주 1 달성 최대 수준으로 적어도 10 일 동안 지속. 셀 침투 식 수준 캡슐화에 대 한 관찰 보다 덜 했다 고 식에 비례하여 증가 문화 기간. 증가 식 수준을 제안 lipoplexes 캡슐화; 후에 그들의 활동을 유지 그러나, 섬유 소 및 lipoplexes 가능성이 제한 국제화 사이의 상호 작용. Hydrogels 섬유 소를 기반으로 비 바이러스 성 벡터의 포함 transgene 표현의 캡슐화 및 침투 세포를 유도 하기 위해 고용 수 있습니다 및 섬유 소의 내장 bioactivity을 증가 시키기 위해 조직 성장의 체 외 모델 고용 수 있습니다.

여성 불 임 치료에 따라 유지: 현재 및 미래의 가능성

어린이 생식 연령의 여성 암 진단에 점점 살아 나 기는 하 고 따라서 장기적인 삶의 질 문제 진단의 시간에 더 큰 중요성은. 암 치료 방사선 및 화학 요법을 포함 하 여 다 산, 해가 될 수 있습니다 및 따라서 많은 환자 들은 암 치료 전에 비 옥도 유지 하는 동기. 보존 날짜에 불 임에만 매우 성공적인 방법은 배아 cryopreservation, 나이, 치료, 암 종류 및 무대, 뿐만 아니라 허용 정자 기증자의 지연으로 인해 일부 환자에 적합 하지 않을 수 있습니다. Oocyte cryopreservation 및 난소 조직 은행을 포함 한 다른 방법 또한 환자에 게 추가적인 유연성을 제공 하면서 다 산을 보존할 수 있습니다. 조직 은행에 따라 체 외 난소 여 포 성숙 지연 난소 자극에 대 한 암 치료에 즉각적인 정자 기증자가 필요 하지 않으며 고 악성 세포 조직 이식에 따라 다시의 위험을 수행 하지 않습니다 필요 하지 않으며 하나의 잠재적인 접근 이다. 체 외 여 포 문화 시스템 마우스에서 성공적인 라이브 출생에서 이어지고 있다. 그러나, 번역은 인간을 시스템에 많은 과제를 해결 합니다. 이 검토 다 산 보존 현재 접근을 요약 하 고 최근 개발 및 미래의 전에 인간의 체 외 뿌리 문화 시스템 개발에 대해 설명 합니다.

비 바이러스 성 유전자 전달 Transfection 프로필 체 외 Co-culture 모델에서 신경 아키텍처를 영향을 줍니다

조직 공학 건설 기계 임대에서 유전자 전달 식 세포 프로세스 재생성에 필요한 자극을 조직 유도 요소의 일으킬 수 있다. Transfected 세포 transfected 세포의 수, 분배 및 식 수준에 따라 로컬 농도 그라디언트를 만들 수 있는 diffusible 단백질을 분 비 합니다. 이 기온 변화도 세포 조직과 조직 아키텍처에 embryogenesis 동안에 연결 됩니다. 이 보고서에서 우리 신경 건축물과 transfected 세포에서 neurotrophic 요인의 지역화 된 분 비 함으로써 농도 기울기에 대 한 응답에서 neurite 지침을 조사 합니다. Co-culture 모델 프로필, transfection 여러 신경 응답을 검사 하 비 신경 성장 인자 (NGF)의 현지 농도 영향을 미치는 고용 했다. 신경 당 neurites의 수와 neurites의 길이 의해 정의 된 신경 건축 transfection 프로필에 의해 좌우 했다. 몇 가지 transfected 세포에서 NGF 생산 낮은 수준의 식 상부를 기준으로 분기 적은 더 이상 기본 neurites를 생산 또는 transfected 세포의 숫자를 증가. 또한, 낮은 NGF 몇 transfected 세포에 의해 생산,는 축 삭의 성장 원뿔 표시 되었다 더 확장 하 고 더 큰 표면 영역에 의해 지도 큐의 존재를 제안. NGF 농도가 다양 한 제어 연구는 실질적으로 추가 지 원하는 지역화 된 농도 기울기의 영향을 단순히 농도 신경 아키텍처를 변경 하지 않았다. NGF 확산의 수학적 모델링 transfection 프로필 제작한 농도 기울기를 예측 하기 위해 고용 했다 그리고 결과 그라디언트는 세포질 응답에 상관 했다. 이 보고서는 transfection 프로필, 농도 기울기 및 유전자 전달 재생 의학에의 응용 프로그램에 대 한 중요 한 설계 고려 사항이 제안 결과 셀룰러 아키텍처 연결 합니다.

재조합 형 단백질을 사용 하 여 기판 중재 유전자 배달에 대 한 엔지니어링 표면

움직이지 fibronectin과 다른 자연 단백질 내장 bioactivity와도 움직이지 단백질의 물리적 특성에서 명백한 공헌 기판 중재 유전자 전달 향상 활용 되었습니다. 이 보고서에서 우리는 재조합 단백질, 유전자 배달 메커니즘을 조사 하기 위한 표면 코팅으로 전체 길이 fibronectin 단백질에 비해 사용 조사는 fibronectin으로 유전자 전송을 향상. 재조합 fibronectin 조각 FNIII(7-10) (FNIII) fibronectin alpha(5)beta(1) 바인딩 도메인을 포함 하 고 재조합 단백질 폴리머 PP 12 또한 부정 청구 및 FNIII, 하지만 부족 셀 바인딩 도메인 비슷한 분자량을가지고 반면 세포 접착을 지원 합니다. Transfection는 FNIII, 전체 길이 fibronectin 또는 PP 12로 수정 하는 표면에 비교 되었다. 전체 길이 fibronectin는 셀과 관련 된 DNA의 크기와 일치 하는 FNIII 또는 PP 12 transgene 식의 가장 큰 범위를 제공. FNIII 각각 polyplexes 및 lipoplexes, fibronectin 상대적인 4.2-fold-4.7-fold 대의 낮은 식 수준을 했다. PP 12 생산 식 수준을 각각 317-fold 및 12.0-fold polyplexes 및 lipoplexes, fibronectin 보다 덜 했다. 식은 PP 12 기준으로 FNIII에 더 큰, 셀당 FNIII와 관련 된 DNA의 수준은 비슷하거나 PP-12, 생리 활성 시퀀스는 향상 된 세포내 인신 매매에 기여할 수 있습니다 제안에 그들 보다 덜 했다. FNIII에 전달 하는 lipoplexes에 대 한 세포내 인신 매매의 효율과 수준의 caveolar DNA 전체 길이 fibronectin 또는 PP 12 관찰 하는 보다 큰 했다. Polyplexes, fibronectin 조각 PP 12 단백질 고분자에 비해 높은 세포내 밀매 효율 결과. 재조합 형 단백질 기판 중재 유전자 배달에 대 한 전체 길이 세포 외 기질 단백질 대신 사용할 수 있습니다 및 생리 활성 시퀀스 transfection을 극대화 하기 위해 유전자 전달 과정에서 하나 이상의 단계를 좌우할 수 있다.

3 차원 매트릭스로 결합 조직 성장 인자 Downregulation 난소 암 세포 침공을 향상 시킵니다

상피 난소 암 (EOC)는 죽음의 주요 원인이 부인과 악성 종양에서 인해 검색 되지 않는 전이성 질병의 퍼짐에 주로. 전이성 병 변의 intraperitoneal 정박 하는 동안 셀 침공 과정 공동된 규제 접착 세포 외 기질 및 지역화 된 침공의 변조를 포함 한 많은 프로세스의 필요 합니다. 탐구 cDNA microarray 분석 (3D 콜라겐 문화의 4 시간 후 변경) 초기 응답 유전자의 결합 확정 실시간-역전사 중 합 효소 연쇄 반응, 여러 개의 3D 셀 문화 행렬, 서쪽 오 점, immunostaining, 접착, 마이그레이션 및 침입 분석 실험 접착을 EOC 진행 및 전이에 대부분의 변조기를 식별 하는 데 사용한. cDNA microarray 분석 표시 결합 조직 성장 인자 (CTGF)의 극적인 downregulation EOC 셀에 침공-조건 (3D 나 콜라겐을 입력)를 흉내 낸. 인간의 EOC 표본 시험 공개 CTGF 식 결 석 했다 테스트 샘플의 46%에서 (n = 41), 100% 정상 난소 상피 샘플에 존재 했지만 (n = 7). 감소 된 CTGF 식 많은 종류의 세포에서 발생 하 고 일반 현상 세포 발생 하는 3D 환경에 의해 표시 될 수 있습니다. CTGF 레벨 같은 것의 upregulation 감소 콜라겐 침공 하면서 CTGF의 downregulation 증가 침공 서로 반비례 했다. 셀 준수 우선적으로 두 콜라겐으로 이루어져 표면 I와 CTGF 혼자 integrins alpha6beta1 및 alpha3beta1를 사용 하 여 두 구성 요소를 기준으로. 이러한 데이터 제안 EOC 셀에 CTGF의 그 downregulation 함께 세포-매트릭스 접착의 변조를 통해 셀 침공에 대 한 중요 한 수 있습니다.

척수 부상에 대 한 여러 채널 교량: 호스트 응답의 세포 특성화

척수 부상된 치료를 위해 다리 부상 사이트 2 차 손상을 방지 하 고 재생을 촉진 하는 관대 한 환경을 만들를 안정화 해야 합니다. 부상에 응답 하는 셀 형식을 분 비 물질로, 억제 요인 가능성이 다리 호스트 응답 관대 한 환경을 만드는 중심 이다. 우리 척수 중생에 대 한 여러 채널 교량을 조사 하 고 다리 구조 세포 침투 및 axonal 신장에 상관. Poly(lactide-co-glycolide) 다리는 가스 거품/입자 leaching 프로세스에 의해 조작 했다. 다리 내 채널 150 이나 250 microm 직경 졌고 다리의 본체는 제어할 수 있는 기 공 크기와 높은 다공성. 쥐 척수 hemisection 사이트, 다리 모 공 및 채널에 침투 하는 세포에에서 주입 시 기 공 크기와 침투 속도 영향을 미치는. 모 섬유 아 세포, 대 식 세포, S 100beta 양성 세포, 내 피 세포 등 중요 한 세포 침투를 했다. 다리의 채널 완전히 축방향, 정렬 했다 게재, S-100beta-긍정적인 세포 및 내 피 세포로 주로 이루어져 있는 세포로 침투 했다. 반응성 이다 주로 다리, 외부 관찰 했다 고 다리 없이 연구에 상대적으로 다리 주변 지역에서 감소는 콘 proteoglycans에 얼룩. 모 공에 상대적인 브리지 채널 내 신경 섬유의 우선 성장을 밝혀 neurofilament 얼룩. 여러 채널 브리지 세포 침투를 지원 하 고 관대 한 환경을 만드는 감독 신경 섬유의 성장을 홍보 하 고 척수 재생 감독에 대 한 잠재력을가지고.

캡슐화 된 3 차원 문화 Nonhuman 영장류 보조 여 포의 개발을 지원합니다

체 외 난소 여 포 문화 조 불 임 때문에 암 치료에 직면 하는 여성에 게 다 산 보존 옵션을 제공할 수 있습니다. 마우스에 대 한 성숙한 oocyte 생산 셀 통신 및 지원 여 포 개발을 유지 하는 생체를 이용 하 여 캡슐화 된 3 차원 (3 차원) 문화 시스템 개발 되었습니다. 이 캡슐화 된 3 차원 시스템은 nonhuman 영장류 preantral 모 공, 체 외 성장 보고 하지 않았다의 개발을 지원 또한 여부를 테스트 합니다. 세 가지 질문 조사 했다: 여 포 개발에 영향을 주기 단계는 여 포는 격리있지 않습니다? Hydrogel의 강성 모 근 생존과 성장 영향지 않습니다? 여 포는 steroidogenesis에 대 한 황 호르몬 (LH), 여 포-자극 호르몬 (FSH), 이외에 필요 합니까? 2 차 낭 성인 붉은 털 원숭이, alginate hydrogels 내에 캡슐화 하 고 개별적으로 대 한 교양에서 고립 되었다 < / 30 일 =. 월 경 주기의 follicular 단계에서 분리 된 모 낭 했다 더 높은 생존 율 (P < 0.05) luteal 단계;에서 고립 된 것 보다 그러나,이 차이 또한 다른 단계에서 분리 된 모 낭의 서로 다른 크기에 표시 될 수 있습니다. 낭 살아남 고 두 hydrogel 조건 (0.5%와 0.25 %alginate)에서 성장 했다. 여 포 직경 큰 정도 증가 (P < 0.05) FSH는 FSH 플러스 LH 보다 혼자 존재. 생식 선 자극 호르몬 치료에 관계 없이 모 낭 체 외 14-30 일 estradiol, androstenedione, 및 황 체 호르몬을 생산. 따라서, alginate hydrogel 개별 보조 원숭이 모 낭의 3 차원 구조를 유지, 여 포 성장, 허가 및 지원에 대 한 steroidogenesis < = 30 일 체 외 /. 이 연구 영장류 조직 아키텍처를 유지 하기 위해 alginate 시스템의 첫 번째 사용 하 고 결과 캡슐화 된 3 차원 문화 인간 모 낭의 체 외 발달 지원에 성공적으로 될 것이 좋습니다.

암에서 인간 난소 난 포를 성장 하는 체 외에서 환자 Oocyte 성장을 지원 합니다

젊은 여성 성인 및 청소년 암 환자 생명을 보존 하지만 다 산을 위협 하 고 항 암 치료-또는 방사선 치료에 직면 하 고 그들의 생식 가능성을 보호 하기 위해 옵션 점점 더 추구 하는. 난소 조직 cryopreservation 이식 된 암 환자에서 다 산을 보호 하기 위해 유망 기술 이다. 그러나,이 방법은 다시 질병의 생존자를 원래 암 위험이 있습니다. 따라서, 개발 미 숙 모 낭의 체 외 성장 하는 방법 나중에 불 임 복원 하는 방법을 제공할 수 있습니다.

체 외 난소 여 포 개발을 위한 섬유 소-alginate 행렬을 Interpenetrating

이 보고서에서 우리가 난소 낭의 체 외 성장에 적용 하는 섬유 소-alginate interpenetrating 네트워크 동적 셀 응답성이 뛰어난 기계적 특성을 제공 하기 위해 (FA IPN)를 조사 합니다. 기계적 특성 및 중 합 속도 젤의 레 올로 지, 조사를 했다 하 고 섬유 구조는 전자 현미경에 의해 몇 군데. 마우스 모델을 사용 하 여, 2 층 보조 낭 FA Ipns에서 캡슐화 했다 고 성장, 형태학, 호르몬 생산, 섬유 소 저하 율과 유능한 계란의 번호를 평가 했다. FA IPN의 초기 역학 복합 재료에 의해 결정 됩니다 및 캡슐화 된 세포에 의해 섬유 소의 후속 저하 때문에 혼자 alginate 기계적 특성을 가진 재료를 생산할 것 이라고 합니다. Meiotically 유능한 oocytes FA IPN에서 문화 생산의 속도 크게 alginate 혼자 보다는 82% 이었다. Oocyte 품질이 증가 여 포 성숙, 조사 하기 위해 근본적인 도구를 제공할 수 있는 여성 암 진단에 직면에 대 한 생식 옵션을 제공 하는 인간의 모 낭의 성장을 촉진에 적용할 수 있습니다 3D 문화 시스템 식별에 중요 한 단계 이다.

줄기/뿌리 셀 중재 드 노 보 중생 치과 펄프의 in Vivo 모델에서 상 아질의 연속 레이어를 새로 예치

이 연구의 궁극적인 목표는 잃어버린된 치과 펄프 및 줄기/뿌리 셀 기반 접근 방식 및 조직 공학 기술을 통해 상 아질 생성. 이 연구에서 우리는 채널 루트 비워진된 공간에 vascularized 인간의 치과 펄프를 재생 하 고 인간의 루트 조각 및 immunocompromised 마우스 모델 줄기/뿌리 셀 중재 접근을 사용 하 여 기존 dentinal 벽에 새 상 아질 생산의 가능성 시험. 혀끝 젖꼭지와 치과 펄프의 줄기 세포의 줄기/시 조 세포 고립 되었다, 특징, 합성에 시드 폴 리 D로 구성 된 건설 기계 임대, L-lactide/glycolide, 치아 조각을 삽입 하 고 쥐에 이식. 우리의 결과 루트 채널 공간 설립 vascularity로 펄프 같은 조직에 의해 전적으로 가득 했다 보여주었다. 또한, 상 아질 같은 조직의 연속 레이어 운하 dentinal 벽에 입금 했다. 이 상 아질 같은 구조 표현 하는 상 아질 sialophosphoprotein, 뼈 sialoprotein, 알칼리 성 인산 가수분해 효소 및 CD105 새로 형성된 된 odontoblast 같은 셀의 계층에 의해 생산 될 것으로 보인다. 재생성 된 펄프와 같은 조직에 있는 세포 안티 미토 콘 드리 아 항 체, 나타내는 그들의 인간의 기원에 긍정적으로 반응. 이 연구는 펄프 같은 조직을 다시 생성 수를 보여주는 최초의 증거 제공 꼭대기 젖꼭지와 기존 dentinal 벽에 상 아질 같은 조직을 생산 하는 odontoblast 같은 셀을 일으키 치과 펄프 줄기 세포에서 줄기 세포에 의해 비워진된 루트 채널 공간에서 드 노 보.

건설 기계 임대 엔지니어링 조직에 흡착 하 여 Lentivirus 배달입니다

지역화 된 유전자 전달 능력이 biomaterial 건설 기계 임대 및 조직 형성의 근본적인 연구를 위한 모델 시스템으로 다양 한 재생 의학 응용 프로그램에 대 한 조사를 받고 있습니다. 이 원고에 조직 공학 비 계 표면 immobilization 전략을 사용 하 여에서 lentivirus 배달 조사. Poly(lactide-co-glycolide) (PLG)는 다양 한 조직 엔지니어링 응용 프로그램에 대 한 널리 사용 되는 배달 biomaterial로 고용 했다. 바이러스는 발판으로 바이러스의 동결 하 고 이후 동결 하 여 움직일 수 있습니다. 동결 및 동결 하는 동안 자당의 존재 lentivirus, 활동을 유지 하 고 아 데 노 바이러스 컨트롤과 유사 하 게 되었다. 콜라겐과 fibronectin 표면 immobilization 향상을 자신의 능력에 대 한 조사 되었다. Fibronectin 겸손 하 게 증가 된 바인딩 및 아 데 노 바이러스, 변환 아직 크게 영향 lentivirus 배달 했다. 움직이지 lentivirus 대부분 24 시간 이내 비 계에서 나왔다. Vivo에서 주입 된 장비의 나왔고 transgene 식 4 주 이상 지속. 이러한 연구 결과 lentivirus 엔지니어링 건설 기계 임대 표면 immobilization 전략을 사용 하 여 조직에서에서 제공 하기 위한 잠재력을 나타냅니다. 우리의 지식을 하려면이 보고서 lentivirus 배달 다공성 조직 엔지니어링 건설 기계 임대에서 조사를 처음 이다. PLG 건설 기계 임대에서 lentiviral 벡터의 전달 조직 형성의 생체 외 및 생체 조건 모델에 사용 하기 위해 효율적이 고 다재 다능 한 유전자 전달 시스템을 제공할 수 있다 궁극적으로 치료 응용 프로그램에 대 한.

플라스 미드 디자인 및 릴리스 양이온 폴리머에서 배달 다음 in Vivo 유전자 발현에 기여 수정 건설 기계 임대

건설 기계 조직 공학 임대 유전자 전달의 능력 또한 유도 요인의 식을 유도 하는 동안 조직 형성을 지 원하는 구조를 제공할 수 있습니다. 지속적인된 출시 전략은 로컬로 유전자 전송을 향상 시킬 수 있는 상승 된 플라스 미드 농도 유지 하기 위해 가설을 세웠다. 이 보고서에서 플라스 미드 분리 속도 론 및 범위와 기간 transgene 식의 사이의 관계를 조사합니다. 건설 기계 임대 폴리머 microspheres 양이온 폴리머 (polyethylenimine, poly(L-lysine), poly(allylamine hydrochloride), polydiallyldimethylammonium) 또는 polydopamine (PD), PD 강화 법인 및 릴리스 둔화로 수정에서 조작 했다. 복 막 지방 패드에 장비의 vivo에서 이식이 했다 수준과 transgene 식 PD와 수정 되지 않은 건설 기계 임대 기간에 큰 변화가 없다. 플라스 미드와 제어 연구 급속 한 자료를 전시 하 고, 건설 기계 임대에 건조 하 고 비슷한 수준 및 기간 식의 출시 초기 수량을 줄이기 위해 확장 leaching로 건설 기계 임대 했다. 플라스 미드 디자인 변경, C는 유비퀴틴을 세포 (CMV)에서 (UbC) 발기인은 실질적으로 식 기간 변경. 이러한 연구는 초기 복용량 발표 벡터 디자인 영향 범위와 기간 몇 주, 잠재적으로 이어지는 세포 이식과 재생 의학에 다양 한 응용 프로그램을 통해 지속 될 수 있습니다 transgene 식의 좋습니다.

마우스에서 초기 단계 난소 낭의 체 외 문화에 대 한 소설 2 단계 전략

개발 초기 단계 모 낭의 성장을 지원 하 고 생산 하는 생체 외에서 전략 수정에 대 한 유능한 oocytes 성숙.

Lentivirus Immobilization Hydrogels에서 향상 하 고 지역화 된 배달에 대 한 나노 입자를

Hydrogels 재생 의학에 다양 한 응용 프로그램 제어 셀 microenvironment 제공할 수 및 유전자 치료 벡터의 배달 그들의 bioactivity를 향상 시키기 위해 채택 될 수 있다. 우리 hydrogels에서 lentiviral 벡터의 납품을 조사 하 고 hydroxylapatite (HA) 나노 입자를 lentivirus immobilization 유지 hydrogels, 내에 벡터를 안정화 하 고 배달 효율성 증가 하는 수단으로 사용. 벡터는 hydrogel 내 혼자의 함정 유지는 hydrogel의 부재에 비해 효과적으로 더 많은 바이러스의 활동 및 릴리스는 hydrogel의 증가 고체 콘텐츠로 둔화 했다. HA는 lentivirus 연관 72 시간 동안 바이러스 활동을 증가 하는 단지의 활동 증가. Hydrogels lentivirus 하 로드에 시드 셀 하의 부재에 상대적인 hydrogel의 외부 감염 된 세포의 감소 수를 했다. 콜라겐 hydrogels와 in vivo 연구 lentivirus 로드 되 고 HA lentivirus 시연과 지역화 lentivirus 하 콤플렉스를 사용 하 여 향상 된 식으로 적어도 4 주 동안 transgene 식. 나노 입자 immobilization 안정화 및 벡터 유지의이 전략 hydrogels에 광범위 하 게 적용 되며 유전자 치료 및 재생 의학에 응용 프로그램에 대 한 생체 재료를 결합 하 여 다양 한 도구를 제공할 수 있습니다.

성장과 발전에 영장류 원시 난 포의 마커는 느린 Cryopreservation 후 유지 됩니다

영장류 원시 난 포 난소 조직 조각 내에서 기능과 형태에 느린 cryopreservation의 효과 조사.

척수 손상 후 다중 채널 브리지 패턴된 Transgene 식

건설 기계 임대 엔지니어링 조직 내의 sub-millimeter 길이 비늘에 유전자 전달의 패턴화 조직의 복잡 한 구조를 다시 만드는 근본 이다. 표면 중재 배달 fibronectin 섞인 lipoplexes의 poly(lactide-co-glycolide) (PLG) 다리의 250 microm 채널 내에 패턴 벡터를 조사 했다. PLG 표면에 생체 외에서 수행 하는 초기 연구 fibronectin 1:20에 DNA의 무게 비율을 각 채널 안에 0.07 microg mm(-2)의 DNA 밀도 최대화 transfected 세포 수와 transgene 식의 레벨 표시. 신경 성장 인자 (NGF)에 대 한 인코딩 꽃무늬 벡터 채널 내에서 지역화 된 neurite 확장 귀착되 었 다. 3 차원 다중 채널 브리지를 번역 신경 세포 몸과 NGF 인코딩을 DNA의 납품을 위한 neurite 확장의 큰 증가 함께 1: 4와 여러 DNA 증언의 DNA: fibronectin 비율에 대 한 채널을 통해 다른 벡터의 패턴화 transfection 사용할 수 있습니다. Vivo에서 채널 내에 비 바이러스 성 벡터의 immobilization DNA를 포함 하는 다리의 채널 주위 즉시 다리의 기 공 구조 내에서 지역화 된 transfection 결과. 이 표면 immobilization 전략 꽃무늬 하면 유전자 생체 외 및 생체 길이에 수백 미크론의 비늘 전달과 복잡 한 구조와 조직 재생을 겨냥 한 전략에 유틸리티를 찾을 수 있습니다.

Cryorecovery 및 성장 잠재력 인간의 모 체 외에 비 침 투 적인 인덱스입니다

Cryopreservation oocytes에서 배아의 다 산을 유지 하기 위해 주로 사용 됩니다. 그러나, 여성 암 치료를 받고는 시간이 없을 수 있습니다 또는 이러한 옵션에 대 한 좋은 후보가 되지 않을 수 있습니다. 난소 대뇌 피 질의 조직 cryopreservation 및 이후 조직 이식 성공 입증 되었습니다 아직 큰 보조 모 낭 보존에 비효율적인 여성 특정 암과 다 산 보존 옵션으로 권장 되지 않습니다. 설치류, nonhuman 영장류와 인간 영장류의 대체 옵션으로 개별 모 낭의 cryopreservation를 평가 했습니다. 최적의 조건에서 cryopreserved 마우스 보조 낭 후속 모 근 성장에 필수적인 granulosa 셀 oocyte 작용을 다시 수 있었다. 개별 보조 낭 살아남은 cryopreservation, antral 단계로 3 차원 alginate hydrogel 매트릭스에서 경작 될 수 있었다 고 동봉 된 oocytes 수정에 대 한 관할 했다. 우리 해 동된, bioassay 수 있었다 중요 한 이미징 기법 (pol 범위) 많은 불 임 센터에서 근무를 사용 하 여, 낭 체세포와 세균 세포 사이 transzonal 연결의 존재에 대 한 교양. 이러한 연계의 물결 낭 최적의 냉동 조건 하에서 cryopreserved 이었다 때 반대를 표시 했다. 우리 격리 된 붉은 털 원숭이 인간의 보조 낭에 최적화 된 cryopreservation 프로토콜을 적용 하 고 birefringent bioassay를 사용 하 여, 우리 초기 모 근 성장과 건강 한 체세포 oocyte 연결 사이 좋은 상관 관계를 보여줄 수 있었다. 우리의 결과 난소 낭 수 수 cryopreserved, 해 동, 그리고 분석 된 noninvasively, 젊은 암 환자 들을 위해 모 근 보존 추가 옵션을 만드는 것이 좋습니다.

Phosphatidylserine Immobilization Lentivirus 지역화 된 유전자 이동에 대 한 의입니다

지역화 및 효율적인 유전자 이동 벡터 biomaterial 사이의 상호 작용을 이용 하 여 승격할 수 있습니다. 벡터-소재 상호작용의 규제 lentivirus와 phosphatidylserine (PS), 원형질 막의 구성 요소 간의 바인딩을 이용 하 여 조사 했다. 추 신: microspheres lactide 유제 프로세스를 사용 하 여 glycolide (PLG)의 공중 합체의 구성에 통합 되었다. Ps. Lentivirus 하지만 아 데 노 하지 바이러스, PS PLG microspheres, 연관의 더 큰 설립을 주도 PLG PS의 무게 비율을 증가 및 바인딩 PS PLG 혼자 상대를 특정 또는 PLG phosphatidylcholine로 수정. 움직이지 lentivirus transduced 셀의 다 수를 생산 하 고 바이러스 혼자 상대 transgene 식 증가. Microspheres 이후에 다공성 조직 엔지니어링 건설 기계 임대, lentivirus 바인딩의 보존으로 형성 되었다. Lentivirus immobilization subcutaneously 이식된 비 계 내에서 장기 및 지역화 식 귀착되 었 다. Microspheres 또한 척수에 주입을 위한 다중 채널 교량으로 형성 되었다. Rostrally 및 caudally 다리에서 배달 lentivirus 이식 및 식의 그라데이션에 최대한 식 생산. Lentiviral 벡터 biomaterial 건설 기계 임대를이 특정 바인딩을 재생 의학 또는 조직 개발 조사 모델 시스템 내에서 다양 한 응용 프로그램에 대 한 다양 한 도구를 제공할 수 있습니다.

균형 조정 매트릭스 저하 셀 마이그레이션 Hydrogels 내에서 3 차원으로 배양 세포를 유전자 전달을 향상 시킵니다

재생 의학 hydrogels 결함을 작성 하 고 궁극적으로 조직을 재생 수 있는 셀의 침투 지원에 사용 됩니다. Hydrogels 침투 셀을 대상으로 내 진 배달 조직 형성 촉진 잠재력을가지고 있지만 hydrogels 내 비 바이러스 성 벡터의 전달 효율은 낮은 조직 재생에 그들의 적응성을 방해. 그들의 기능을 개선 하기 위해 우리 기계 연구 셀 마이그레이션 및 매트릭스 저하 유전자 전달에의 기여를 조사를 실시 했습니다. 이 보고서에서 lipoplexes hydrogels 매트릭스 metalloproteinase 분해 시퀀스를 포함 하는 펩 티 드 poly(ethylene glycol) (나무 못) crosslinked 기반 안에 속 했다. 이러한 hydrogels 메쉬 크기는 실질적으로 벡터를 유지 하는 기능 수 봉된 lipoplexes의 크기 보다 적습니다. 셀 마이그레이션과 transfection 동시에 세포 접착 사이트 (Arg Gly Asp 펩 티 드) 및 고체 콘텐츠 다양 한 밀도와 hydrogels 내에서 측정 했다. RGD 밀도 증가 식 수준을 증가 최대 약, 16days에 대 한 높은 고체 콘텐츠 지속적인된 식 수준 동안. RGD 밀도 증가 감소 하는 고체 콘텐츠 증가 셀 마이그레이션 식 레벨 증가 증가 셀 마이그레이션을 나타냅니다. 처음 노출 셀 벡터 2days, 식 유지 마이그레이션 요구 확인 후 거부 과도 식 결과. Transfected 세포 주로 이주 하는 인구 내에 위치한 했다 hydrogels 지원에 대 한 셀 셀 마이그레이션. 작은 메쉬 크기 32days 후 셀의 부재에서 lipoplexes의 적어도 70%를 유지 하는 있지만 셀의 존재 16days 후 보존 기간을 10% 감소. 이러한 결과 벡터 연락처 마이그레이션하 셀 hydrogels 내에서 유지 하 고 영구 셀 마이그레이션 유지할 수 있는 높은 식 수준을 나타냅니다. 따라서, 매트릭스 저하 및 셀 마이그레이션 hydrogels 내 유전자 전달 극대화를 위한 기본 설계 매개 변수는.

Microenvironmental 레 귤 레이 션 (C-X-C-모티브) Chemokine 수용 체 4 난소 암 종에서의

상피 난소 암 (EOC)으로 진단 하는 여성의 대부분 전이성 질환의 합병증으로 인해 굴복 하는 제안 하는 antimetastatic 요법 환자 생존을 향상 시킬 수 있습니다. EOC 전이 뒤에 접착 기본 종양에서 세포의 intraperitoneal 흘리기 포함 하 고 지역화 된 침투 앵커 전이성 submesothelial 매트릭스의 임 플 란 트. 악성 복수의 축적도 일반적입니다. 따라서, 독특한 microenvironmental 틈새 설립, 악성 세포와 수용 성 요인에 의해 분 비의 과다 한 포함 하는-또는 응답을 종양 세포에. Submesothelial 표면 침투 하는 세포에서 발생 하는 간 질 성 콜라겐이 풍부한 세포 외 매트릭스로 우리는 3 차원 사용 intraperitoneal 정박에서 발생 하는 초기 이벤트 모델링 콜라겐 젤 타입. 이 연구에서 우리가 beta1 integrin-통해 CXCR4 upregulation의 새로운 통로 표시 하 고 3 차원에 대 한 응답 NFkappaB 종속 신호 경로 유형 I 콜라겐. 우리는 또한 콜라겐 침입 및 확산, 전이성 EOC와 관련이 CXCR4 SDF1 축 참여를 보여줍니다. 우리의 데이터 인간의 Eocs에 해당 CXCR4 식을 보여 SDF1 존재는 복수에서 뿐만 아니라 질병의 진행 및 전이 상관 된다. 이러한 데이터의 전이 EOC CXCR4 SDF1 축 중요성을 강조 하 고 EOC 전이 대상으로이 메커니즘에 대 한 설명 되어야 하는 것이 좋습니다.

생체 재료와 디자인 여 포 환경 상호 작용입니다

이식 또는 이식-질문입니다

동적, 대규모 전사 요소 활동에서의 프로 파일링 셀 3D 문화에 살고 있습니다

신호 변환 통로 그들의 다운스트림 대상 녹음 방송 요인 (TFs)의 세포 외 활성화는 세포 프로세스 및 조직 개발의 중요 한 레 귤 레이 터. 세포내 신호 네트워크 복잡 하 고 수많은 경로 활동을 계량 하 고 그들의 활동 결과 표현 형을 연결 하는 기술을 신호 및 조직 개발 규제 메커니즘 식별 것입니다. 조직 개발 조사 능력 해야 동적 경로 활동 캡처하고 vivo에서 고기를 모방 하는 구조로 세포 조직을 지 원하는 환경이 필요 합니다. 함께 찍은 우리의 목표 셀 3D 문화 내에서 구형 구조로 구성으로 TF 활동의 역동적이 고 대규모 정량화에 대 한 세포 어레이 개발 했다.

체 외 Oocyte 성숙 Preantral 뿌리 문화 Luteal 단계 개 코 원숭이 난소에서 성숙한 Oocytes 생산

다 산 보존을 추구 하지만 난소 자극 및 배아 보존 받을 수 없는 여성 암 환자 1) 미 숙 oocytes 뒤에 체 외 성숙 (IVM) 또는 뒤에 이식 또는 생체 외에서 여 포 문화 2) 난소 조직 cryopreservation의 검색을 고려할 수 있습니다. 기존의 IVM은 월 경 주기의 follicular 단계 동안 수행 됩니다. 그 미 숙 oocyte 중 검색을 보여 주는 제한 된 증거가 luteal 단계 체 외 성숙 수 하 고 가능한 배아를 생산 하기 위해 수정 된. 체 외 여 포 문화 설치류에 성공 하는 동안 nonhuman 영장류에서의 응용 프로그램 제한 진행을 했다. 이 연구의 목적은 미 숙 luteal 단계 oocytes에서 개 코 원숭이의 능력을 조사 하 고 원숭이 preantral 뿌리 문화와 oocyte 성숙 체 외에 여 포-자극 호르몬 (FSH)의 효과 결정 하는. Oocytes 다중 적 운 레이어 (42%)와 작은 antral 모 근 적 운 oocyte 복합물 (COCs)에서 더 많은 가능성이 meiosis 고 적 운 셀 이하의 단일 레이어와 oocytes 보다 II (MII) 분열 진행을 다시 시작 했다 (23% 대 3%, 각각). 성숙한 oocytes의 24 %intracytoplasmic 정자를 주입 하 여 수정 된 성공적으로 했다 하 고 이들 중 25%를 개발 morula 단계 배아. Preantral 낭 섬유 소 alginate matrigel 행렬에 캡슐화 하 고 FSH 독립적인 방식으로 작은 antral 단계로 교양 했다. FSH oocyte 무결성을 방해 하 여 모 근 건강에 부정적인 영향을 하 고 적 운 셀 문의. FSH의 부재에서 자란 낭 MII oocytes 정상적인 스핀 들 구조와 생산. 결론적으로, 개 코 원숭이 luteal 단계 COCs 및 교양된 preantral 모 낭에서 oocytes 체 외에서 성숙 수 있습니다. Oocyte meiotic 능력 적 운 세포 층 수와 긍정적으로 상관 된다. 이 연구 nonhuman 영장류의 뿌리 문화 시스템의 매개 변수를 명확히 하 고 암과 여성에 대 한 다 산 보존 옵션으로 향후 임상 개발을 위한 기초 데이터를 제공 합니다.

Hydrogel 네트워크 디자인 다기능 Macromers를 사용 하 여 조직의 성숙 난소 여 포 문화에 조정

가변 속성을 가진 합성 hydrogels 재생 의학에 대 한 매력이 있습니다. 낮은 고체 농도에서 hydrogel 디자인의 중요 한 제한 겔 화 시간으로 늘리고 붓기, 탄력을 줄일 수 있으며 결함의 형성 이다. 여기, 우리는 펩 티 드 4-팔 폴 리-(ethylene glycol) (나무 못) hydrogels 적용할 교가 그 trifunctional 감소 붓기와 겔 화 시간 bi 기능 crosslinkers 기준으로 보고 합니다. 이중 기능성 펩 티 드, 펩 티 드 intramolecular 상호 연결을 형성 하는 경우 분기 지점 생성에서 3 가교 사이트는 달리는 hydrogel 네트워크에서 작동 하지 않는 "매달려-끝" 방해 하 고 탄력적 액티브 크로스 링크의 수를 향상. 향상 된 네트워크 형성 가능 마우스 난소 여 포 캡슐화 및 체 외 성숙. Bi 기능 crosslinkers와 Hydrogels 세포 탈수, 장기간된 겔 화 하는 동안 삼 투 문제일 가능성이 귀착되 었 다. Trifunctional crosslinkers는 hydrogels 17-fold 체적 확장을 조직의 문화, 동안 plasmin의 단백질 활동에 가교 펩 티 드의 감도 통해 제어 되는 자사의 microenvironment를 다시 정렬 하 여 포의 기능에 따라 확장 된 지원. 향상 된 네트워크 디자인 완전히 합성 시스템에서 난소 여 포 문화를 사용 하 고 직면 하는 암 치료에서 조기 불 임 여성을 위한 다 산 보존 기술 사전 수 있습니다.

PLG 비 계의 영구 보호 Allogeneic 섬 이식 기증자 ECDI 고정 Splenocyte 약으로 치료 하는 당뇨병 쥐에 이식

Allogeneic 작은 섬 세포 이식 인간 타입-1 당뇨병을 위한 유망한 치료입니다. 현재, 인간의 독도 intra-portal 혼합을 통해 이식 됩니다. 성공 하는 동안 인스턴트 혈액 중재 염증 반응에서 중요 한 초기 섬 감소율을 리드. Extra-hepatic 사이트는 미소 poly(lactide-co-glycolide) (PLG) 건설 기계 임대 syngeneic 섬에 epididymal 지방 패드에 이식 모델 섬 로드 이식에 의해 설립 되었다. 이 연구 allogeneic 섬 이식에서이 기술 및 이식 공차 PLG 비 계 이식 allogeneic 독도 보호 하기 위해 효과적으로 유도 수 있는지 여부를 확인 했습니다. 기증자 splenocytes ethylcarbodiimide(ecdi)로 치료를 사용 하 여 설정 된 관용 유도 전략의 효능을 테스트 했습니다. ECDI 고정 기증자 splenocytes 전과 1 일 섬 이식 후 7 일을 주입 했다. 즉시 normoglycemia 복원 된 및 마우스 치료 쥐 섬 이식 이식의 20 일 이내에 거부 하는 반면 무기한 normoglycemia 유지 치료. 흥미롭게도, 관용 유도 효능 PLG 비 계 intra-portal 이식된 독도 비해 우수 했다. PLG 비 계 섬 allografts의 보호는 관련 된 면역 조절의 여러 메커니즘. 요약 하자면, PLG 건설 기계 임대 관용 유도 손상 하지 않는 섬 이식에 대 한 대체 배달 시스템으로 사용할 수 있습니다. 관용 유도 비 계 섬 이식 함께 결합이 방법은 인간의 작은 섬이 식 위한 잠재적인 치료 적 의미를 갖는다.

향상 된 Transfection Hydrogels 선호도 펩 티 드로 수정 기반으로 유전자 치료 벡터

손상 된 조직 재생 전략 모집 및 직접 조상 셀 마이그레이션 및 차별화 하는 생 화 확 적인 단서를 제시 하는 것을 목표로. 조직의 성장 및 유도 단백질;의 식을 유도 하기 위해 다양 한 방법으로 지원 하기 위한 Hydrogels 지역화 된 유전자 전달의 능력을 개발 되 고 있다 그러나, 기간, 수준, 및 지역화 식의 충분 하지 않습니다 종종 중생에 대 한. 우리는 따라서 벡터 보존을 강화 하 고 행렬 내의 transfection 증가 선호도 펩 티 드와 hydrogels 수정 조사. 페그 hydrogels lysine 기반 반복 (K4, k 8) 제어 펩 티 드 보다 약 25% 더 많은 벡터를 유지 하는 함께 수정 되었습니다. Transfection 증가 5-하 15 배 k 8와 K4 RDG 제어 펩 티 드를 통해 각각. K8 K4 수정 hydrogels 바인딩된 벡터, 비슷한 양의 아직 K8, transfection 제한 과도 한 바인딩 제안에 대 한 벡터 분리 속도 감소 했다. 이러한 hydrogels 이후에 NGF 식 유도 및 neurite 파생물을 홍보 하는 체 외 co-culture 모델에 적용 했다. K4 수정 hydrogels 승진 최대한 neurite 파생물, 벡터와는 NGF의 보존 때문에 발생 합니다. 따라서, 선호도 펩 티 드 향상 된 벡터 보존 및 증가 유전자 전달, 그리고 이러한 hydrogels 수정 hydrogels 수많은 재생 의학 응용 프로그램에 대 한 다양 한 비 계를 제공할 수 있습니다.

마우스 난소 여 포 개발 전 대 Vivo 유전자 발현 Vivo Alginate 문화 시스템

난소 여 포 성숙 내 분 비, paracrine, 직접 셀 상호 작용의 복잡 한 상호 작용에서 유래한 다. 이 연구는 3D alginate hydrogel 시스템에서 folliculogenesis in vivo 및 체 외 문화 중 주요 발달 유전자의 동적 표현 비교. 후보 유전자 식 프로필 마우스 2 층 보조 모 낭, 멀티 보조 낭 및 적 운 oocyte 복합물 (COCs) 내에서 측정 되었다. 20 내 분 비, 성장 신호, 커뮤니케이션과 oocyte 개발에 관련 된 유전자의 식 실시간 PCR에 의해 조사 되었다. 유전자 제품 수준 i) 낭 비슷한 무대와 ii) COCs 생체 내에서 또는 체 외 문화에 의해 파생 된 사이 비교 했다. 4 일 동안 배양 하는 낭에 대 한 식 패턴 및 식 수준 12 유전자의 생체 조건 및 체 외 동일 했다. 일부 내 분 비 (시 토 크롬 P450, 가족 19, 아 A, polypeptide 1 (Cyp19a1) 및 inhibin βA 소 단위 (Inhba)) 및 성장 관련 유전자 (뼈가 전체적 단백질 15 (Bmp15), 리간드 (Kitl) 키트 및 변형 성장 인자 β 수용 체 2 (Tgfbr2)) downregulated vivo에서 여 포를 기준으로 했다. COCs 교양된 낭에서 얻은에 대 일 분 비 관련 유전자 (inhibin α 소 단위 (인하)과 Inhba) 성장 관련 유전자 (Bmp15, 성장 차별화 요소 9, 및 키트 (Kit) oncogene)과 zona pellucida 유전자 감소 된 반면 vivo에서 대응에 상대적인 식을 증가 했다. 그러나 oocyte 특정 유전자의 대부분 (번째 α (Figla)에서 요인 예: 가변 1 (Jag1) 및 Nlrp5 (교)) 체 외 동일한 수준에서 그리고 vivo에서 파생 된 모 낭에서 동일한 패턴으로 표현 했다. 이러한 연구는 유사점과 차이점 생체 조건 및 체 외 교양된 모 공, 모 근 개발 및 oocyte 품질을 극대화 하는 환경 만들기 지침을 설정 합니다.

바이러스 성 벡터 유전자 전달 향상 Biomaterial 시스템 엔지니어링

조작된 생체와 바이러스 성 유전자 전달의 통합은 다양 한 도전 극복 하기 위해 유망한 전략 연관 바이러스 중재 유전자 전달, 비효율적인 배달 특정 세포 유형, 제한 된 tropism, 벡터 먼 사이트 및 면역 반응의 확산을 포함 하 여. 바이러스 성 벡터는 재료 내에서 캡슐화를 통해 또는 immobilization 소재 표면에 생체 재료와 결합할 수 있습니다. 후속 biomaterial 기반 배달 함으로써 잠재적으로 제공 하는 지역화 된 배달 변환, 강화 하 고 유전자 발현 기간 연장 대상 사이트 내에서 벡터의 체류 시간을 늘릴 수 있습니다. 또는 생체와 바이러스 성 벡터의 물리적 또는 화학적 수정 바이러스 tropism을 변조 하거나 염증 성 면역 반응을, 변환의 혜택을 받을 수 있는 고용 될 수 있습니다. 이 검토 바이러스 성 유전자 전달 기술 생체를 사용 하 여, 유전자 치료의 다양 한 응용 프로그램에 대 한 기회를 제공 하 고 잠재적으로 상속 또는 장애, 전염 성 질병 및 재생 의학 인수를 홍보 하는 전략을 설명 합니다.

혈관 내 피 성장 인자 및 섬유 아 세포 성장 인자 2에서에서 배달 척수 다리 부상에 따라 신생 강화를

척수 부상에 대 한 호스트 응답 세포의 죽음을 일으킬 수 있는 허 혈 성 환경을 발생할 수 있습니다 및 한계 세포 이식 접근 척수 재생을 촉진. 지역화 및 지속적인 자료를 혈관 내 피 성장 인자 (VEGF)와 섬유 아 세포 성장 인자 2 (FGF-2)를 제공 하는 척수 다리 부상 내의 신생 및 신경 성장을 촉진 하는 능력에 대 한 조사 되었다. 다리는 가스 거품/입자 기술, leaching를 사용 하 여 poly(lactide-co-glycolide) microspheres의 융합에 의해 조작 했다 고 단백질 캡슐화를 microspheres 또는 거품 전에 microspheres 혼합에 의해 통합 했다. 혼합 방법에 비해 캡슐화 leaching 하는 동안 손실 감소 및 VEGF FGF-2 보다 더 빠르게 나온 반면 느린 단백질 출시 했다. VEGF와 함께 로드 된 교량의 in vivo 주입 1 주에서 상해 내 VEGF의 수준을 향상 하 고 공개 VEGF와 FGF-2 교량 내 피 세포의 침투와 6 주 postimplantation에서 혈관 형성 증가. 또한, 브리지; 내에서 관찰 되었다 상당한 neurofilament 얼룩 그러나, 단백질의 유무 다리 사이 큰 차이가 관찰 되었다. 교량 angiogenic 요인 발표 재생을 제한 하는 허 혈 성 환경을 극복 하기 위해 접근 하 고 세포 이식-기반 접근을 제공할 수 있습니다.

섬유 소 캡슐화 및 혈관 내 피 성장 인자 전달 촉진 쥐의 난소 이식 생존

난소 cryopreservation 화학 요법 및 autotransplantation 전에 후 조기 난소 실패와 여성들에 게 임신을 복원할 수 있습니다. 대부분 원시 난 포의 생존 cryopreservation 주기, 비록 follicular 풀 허 혈 성 죽음으로 인해 이식 후 줄일 수 있다. 따라서, 우리는 난소 이식 마우스 모델에서 신생 촉진 biomaterial 기반 시스템 설계. 불 임 증의 임상 상황을 모방, 양자 ovariectomy 2 주 전에 이식, 어느 시간 동안 follicular 자극 호르몬의 혈 청 수치가 폐 경기 수준에 상승 했다 수행 했다. 이식 전에 12 일 된 C57Bl/6J 새끼에서 난소 조직은 해 vitrified/동는 헤 파 린 바인딩 펩 티 드 (HBP), 헤 파 린로 수정 및 0.5 μg 혈관 내 피 성장 인자 (VEGF)와 함께 로드 된 섬유 소에 캡슐화 됩니다. 섬유 소 HBP VEGF와 이식 그룹 2 배 많은 살아남은 원시 난 포와 혈관 아니 biomaterial 컨트롤에 상대적인 수가 증가 했다. 이식된 조직은 가능한 살에 자연 임신을 지원 하 고 건강 한 자손. VEGF 배달 라이브 출생의 타임 라인 기본 모 낭 이식, 살아남은 첫 번째 쓰레기는 gametes 제공 제안. 따라서 섬유 소에서 VEGF 배달 호스트와 이식의 통합을 지원, 신생, 승진 및 engraftment와 조직의 기능을 강화.

녹음 방송 요인 활동의 대규모 분석을 위한 세포 배열

일반적으로 mRNA 나 단백질; 풍부한 측정 대규모 세포 분석 기반 분자 메커니즘 또는 치료 대상 식별 그러나 활동으로 풍부한 반드시 연결 되지 않습니다. 통로 활동 보고 구문의 병렬 유전자 전달 된 세포 어레이 사용 하 여 활성 경로의 직접적인 대규모 정량화 하는 방법을 알려드립니다. 기자 구문 인코딩 루시페라아제, 누구의 식 바인딩 경로 신호의 다운스트림 대상 녹음 방송 요인 (TFs)의 영향을 받습니다. 루시페라아제 수준을 측정할 생물 발광 영상 (BLI)에 의해 신속 하 게, 비-침략 적 측정에 대 한 수 있습니다. 32 Tfs BLI 활동 프로 파일 표준 세포 세포의 용 해 기술, 일관성, 고 재현, 강력 하 고 상호 관련 된 했다. 배열 phorbol 12-myristate-13-초 산 (PMA) 중 차동 활동 5 TFs 식별-유방암 세포의 분화를 유도 합니다. 통로 활동의 신속 하 고 대규모, BLI 정량화를 위한 시스템 세포 반응과 프로세스의 기계 론 적인 연구에 대 한 활성화 기술을 제공합니다.

난소 여 포 개발에 관한 새로운 가설: 선택과 건강의 레 귤 레이 터로 난소 강성

포유류 난소와 난소의 주변에 위치한 단일 oocyte 각 휴면 미 성숙한 난 포의 다 수 구성 됩니다. 각 생식 주기와 그룹 미 성숙한 난 포의 성장, 다시 활성화 순차적으로 그리고 gonadotropins 뇌 하 수 체 및 난소 스테로이드 및 펩타이드 호르몬 성장과 개발 추가 되도록 협조. 하나의 지배적인 여 포 결국 나온다 하 고 ovulates, 다음 낭 다음 그룹 선택할 수 involutes. Folliculogenesis의 나중 단계를 제어 하는 호르몬 알려져 있습니다, 그러나 약간 휴면 여 포 풀에서 개별 미숙한 원시 난 포를 활성화 하는 경로 대 한 알려져 있다. 우리는 새로운 가설을 사전: 모 근 활성화 잘 설립 호르몬 신호 외에 난소의 물리적 환경에 따라 달라 집니다. 난소 기능에 대 한이 새로운 관점은 모 근 역학을 공부 하 고 난소 기능 장애에 대 한 치료 목표를 식별 하는 새로운도 제공할 수 있습니다.

Syngeneic 마우스와 Allogeneic 돼지 모델에서 미소 폴리머 건설 기계 임대와 Extrahepatic 섬 이식

독도의 intraportal 이식 선택 타입-1 당뇨병 환자를 성공적으로 치료 했다. 그러나, 중요 한 초반과 후반 섬 손실에 기여 하는 intravascular 주입 및 intrahepatic 사이트 아직 임상 대안 애매 남아 있다. 우리 돼지 모델과 allogeneic syngeneic 마우스를 사용 하 여 extrahepatic 사이트에 작은 섬이 식 위한 수단으로 비 캡슐화, 다공성, 생 분해성 폴리머 건설 기계 임대 조사. 최소한의 염증 반응으로 독도의 revascularization 이어지는 세포 침투를 향상 시키기 위해 비 계 건축으로 바뀌었습니다. 당뇨병 마우스 모델에서 건설 기계 임대 epididymal 지방 패드에 이식에 시드 125 독도 1.95 일 평균 내만 75 독도 12.1 일 필요한 이식 normoglycemia 복원. 섬 섬 상호 작용을 증가 기 공 크기를 늘리면 섬 기능 크게 영향 되지 않았다. 돼지 모델 초기 섬 engraftment를 조사 하는 데 사용한. 섬 시드 engrafted 독도의 큰 질량을 밀도 증가, 그래도 섬 생존의 효율성 감소 했다. 돼지 omentum에 이식 위 submucosa 보다 더 큰 섬 engraftment을 제공 합니다. 이 결과 건설 기계 임대 높은 효율으로 murine 섬 이식 지원 타당성 대형 동물에 이식 microenvironment 제어 플랫폼으로 건설 기계 임대와 지속적인된 조사 연구 지원 보여 줍니다.

조직 공학 면역 응답의 변조에 대 한 도구

조직 공학 건설 기계 임대 재생 의학 내에서 강력한 도구로 떠오르고 있다. 이러한 재료의 조합 사용 하 여 재생을 촉진 하는 환경을 만드는 설계 되 고 있습니다: (i) 비 계 아키텍처, (ii) 조상 세포 이식에 대 한 차량으로 장비의 사용 및/또는 (iii) 지역화 된 유도 요인 또는 이러한 귀납적 요인에 대 한 인코딩을 하는 유전자의 전달. 이 검토에는 이러한 각 구성이 요소와 관련 된 기술을 설명 합니다. 또한, 면역 반응이 점점 재생에 영향을 미치는 요인으로 인식 된다. 임 플 란 트에 대 한 면역 반응 상해 및 외국 자료의 타고 난 인식 급성 반응 항 원 (예를 들어, 이식된 세포)의 특정 인식에 관련 된 후속 만성 면역 반응으로 결국 이식의 거부로 이어질 수 있는 적응형 면역 반응에 의해 시작 됩니다. 따라서, 우리는 또한 면역 반응 및 변조, 아직 재생 의학에 대 한 또 다른 중요 한 도구를 나타내는 재생을 촉진 하기 위해 로컬 면역 응답을 제거 하는 것이 아니라 (예를 들어, 소재 디자인, 안티-염증 성 cytokine 배달 및 면역 세포 모집/이식) 전략에 각 구성 요소에 미치는 영향을 설명 합니다.

Hydrogels 미소 조직 엔지니어링 건설 기계 임대에서에서 in Vivo Lentivirus 배달 변조

조직 재생을 유도 하는 수많은 전략 건설 기계 임대 공간을 만들고 개발을 촉진 하는 현재의 생물 학적 신호를 사용 합니다. 이 보고서에서 미소 건설 기계 임대 구조적 지원을 제공 하는 세포 접착 및 마이그레이션 hydrogels로 가득 차 있었다와 in vivo 유전자 치료 벡터에 대 한 배달 차량으로 조사 되었다. 다공성 건설 기계 임대 lentivirus 속 콜라겐 또는 섬유 소 hydrogels, 둘 다 세포 접착 지원 아직 속도 저하와 세포 침투는 다양 한으로 가득 차 있었다. 빈 건설 기계 임대 및 alginate hydrogels 후자 하지 지원 셀 침투와 컨트롤로 고용 했다. Hydrogel 가득 건설 기계 임대 유지 합니다 lentivirus 빈 건설 기계 임대 보다 더 효과적으로 그리고 transgene 식 모든 비 계 조건에 대 한 관찰 되었다. 빈 및 섬유 소 가득 건설 기계 임대 콜라겐과 비슷한 수준으로 alginate 이어서 최대한 transgene 식을 vivo에서 했다. Transduced 대 식 세포와 수지상 세포 처음 참석 했다 비 계 경계와 인접 한 조직에 고 나중 시간 포인트에서 비 계 내 alginate 조건을 제외한 모든. 3, 7 일, 식은 또한 비장 및 thymus 이식에서 세포 마이그레이션에서 발생할 수 있는 몇 군데. 이러한 연구 hydrogels 유전자 전달 세포 이식과 재생 의학에 사용 되는 건설 기계 임대에서 변조 수 보여 줍니다.

미 발달 섬유 아 세포 활성화 Alginate Hydrogels 내 기본 난소 낭의 문화

Hydrogel 캡슐화 문화 시스템 마우스, 비 인간 영장류 인간; 등 다양 한 종에서 난소 낭의 일관 된 성장을 지원합니다 그러나, 추가 혁신은 품질 oocytes 초기 단계 모 낭에서의 효율적인 생산 필요 합니다. 이 보고서에서 우리 뿌리 생존 및 성장에 필요한 중요 한 paracrine 요소를 제공 하는 수단으로 배아 줄기 (ES의) 세포의 undifferentiated 성장을 촉진 피더 세포로 일반적으로 사용 하는 마우스 마우스 미 발달 섬유 아 세포 (MEFs)와 난소 낭의 co-culture를 조사 했다. 낭 alginate hydrogels 내에서 캡슐화 하 고 14 일에 대 한 Mefs와 co-cultured 했다. Co-culture 활성화 생존과 초기 보조 (90-100 µ m의 평균 직경)와 주 (70-80 µ m의 평균 직경) 모 낭의 성장 하는 antral 충 치 개발과 251-347 µ m 직경에 있는 증가. 14 일 후에 여 포 생존 70 µ m 모 낭의 23%를 100 µ m 모 낭의 70%에서 ranged. MEF co-culture 없이 모든 모 낭 6-10 일 이내에 퇴 화. 또한, 살아남은 모 낭에서 oocytes의 72-80% 받았습니다 germinal 기 쇠 약 (GVBD), 그리고 분열 II (MII) 계란의 비율이 41-69% 이었다. Mefs에 의해 단련 미디어 단방향 paracrine 신호 메커니즘 제안 생존, 성장, 및 meiotic 능력에 대 한 비슷한 효과 했다. 이 발전 초기 단계 모 낭의 성장을 촉진 하는 것에 대 한 책임이 중요 한 요인의 식별을 용이 하 게 하 고 다 산 보존을 위한 새로운 전략으로 이어질 수 있습니다.

Neurite 확장을 극대화 하기 위해 Neurite 파생물 및 촉진 유전자 전달을 지원 하기 위한 Hydrogel 디자인

Hydrogels 유전자 전달의 수 neurite 파생물 및 유전자 전달 유도 요인의 식을 유도 지원 hydrogel 신경 재생을 위한 적 접근을 제공 합니다. 이 보고서는 유전자 전달 증진을 위한 neurite 성장 이러한 요구 사항을 지원 하기 위한 요구 사항을 균형 hydrogels 디자인 조사. Neurite 파생물 안내 물리적 채널에서 캡슐화 느 루트 ganglia explants, 섬유 아 세포, 및 신경 성장 인자 인코딩 lipoplexes enzymatically 해 성 페그 hydrogels gelled 했다. 섬유 아 세포의 transfection Arg Gly Asp (RGD) 세포 접착 사이트의 농도 증가 하 고 감소 하는 페그 콘텐츠 증가. Neurite 길이 증가 10%가 내의 증가 RGD 농도 페그 hydrogels 아직 7.5% 내에서 최대 중간 RGD 수준 못 hydrogels. 젤 내 lipoplexes를 제공 NGF 보완 미디어 또는 co-culture의 문화 보다 더 긴 neurites 캡슐화 전에 DNA에 노출 셀 생산. Hydrogels neurite 파생물을 지원 하 고 유전자 치료 벡터 로컬로 제공 하도록 설계 되었습니다 궁극적으로 재생을 제한 하는 여러 장벽을 해결 하기 위해 고용 수 있습니다. Biotechnol입니다. Bioeng입니다. 2012; 109:830-839. © 2011와 일리 정기 간행물 주식 회사

다기능, 다채널 Lentivirus 중생 다음 척수 부상에 대 한 인코딩을 제공 Neurotrophin 그 다리

척수 부상 다음 치료 전략 재생을 제한 하는 여러 장벽을 해결 해야 합니다. 이식에 따라 부상 안정화 및 축 삭 재생을 위한 실제 지침을 제공 하는 여러 채널 교량 개발 되었습니다. 이 교량은 지금 lentivirus의 지역화 된 배달 차량으로 고용 되어. Lentivirus 이식 4 주 이상 지속 된 여러 채널 교량 생산된 transgene 식 로드. 식은 최대한 빠른 시간 지점에서 임 플 란 트에 주입, 시간 증가 함께 저하로 서 rostral 하 고 꼬리 다리. 대 식 세포, Schwann 세포, 섬유 아 세포, 및 다리 및 인접 한 조직 내에서 이다 변환 표시 Immunohistochemical 얼룩. 그 후,는 科 인코딩 lentivirus 배달 NT 3 요인 또는 BDNF 크게 증가 빈 건설 기계 임대 상대 다리에 axonal 성장의 정도. 축 색 성장을 추진 하 고, 뿐만 아니라 neurotrophic 요인의 유도 식 myelination 컨트롤을 기준으로 myelinated 축 삭의 수는 현저 하 게 향상 된 다리의 채널 내에서 축 삭의 이끌어 냈다. 실제 지침을 제공 하 고 관대 한 환경을 창조 하는 생체 유전자 배달 결합 axonal 성장을 강화 하 고 재생을 촉진 하는 플랫폼을 제공할 수 있습니다.

섬유 소 Hydrogels Lentiviral 유전자 전달 체 외 및 생체 조건에 대 한

Hydrogels에서 유전자 전달 재생 이어질 세포질 프로세스를 홍보할 수 있는 조직 유도 요소의 지역화 된 식에 대 한 다양 한 접근 방식을 나타냅니다. Lentiviral 유전자 치료 벡터 섬유 소 hydrogels, 혼자서 또는 hydroxylapatite (HA) 나노 입자에 complexed 안에 속 했다. 집계 외부 기 공 구조의 명백한 변경 없이 함께 hydrogel 전역에 배포 하는 작은 집계의 형성을 주도 hydrogel에 하의 포함. 하의 존재 콜라 하 고 섬유 소, 상대적인 plasmin 여 hydrogel 저하를 둔화 그리고 또한 셀 마이그레이션 속도 감소. Lentivirus HA의 유무를 형성 하는 섬유 소 hydrogels에서 비슷한 릴리스를 했다. 변경 된 hydrogel 속성 제안 나노 입자와 섬유 소, 비슷한 릴리스 프로필을 선도 하는 입자에서 바이러스를 치환 수 간의 상호 작용. Transgene 식 셀 hydrogel 체 외로 이주 하 여 하, 일치 transgene 식 세포 이동의 역할의 존재 감소 했다. Vivo에서 lentivirus 로드 섬유 소 hydrogels 승진 지역화 transgene 식 하루 9 통해 증가 하 고 하루에 14 통해 감소입니다. 섬유 소만 hydrogels에 대 한 식 날 14 후 거절 계속 했다. 그러나 하와 hydrogels 감소 하기 전에 추가 2 주에 대 한이 transgene 식 수준 유지. Immunostaining 식별 되는 섬유 소 밖에 서 주로 transgene-하 젤 날 9; 그러나 21 일에 transgene 식 고 섬유 소 내에서 주로 관찰 되었다-하 젤. Lentivirus 지역화 된 배달 재생 의학에 응용 프로그램의 광범위 한 섬유 소 hydrogels bioactivity을 향상 시킬 수 있는 기회를 제공 합니다.

Waiting
simple hit counter