Identificazione E Caratterizzazione Funzionale Di Distinti Elementi Di Risposta Specifica Della Proteina Morfogenetica Ossea Criticamente Importante Nel Promotore Id1

The Journal of Biological Chemistry. Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11729207

Transforming growth factor-beta (TGF-beta) familiari, che includono proteine morfogenetiche ossee (BMPs) e TGF-beta, suscitare la loro effetti cellulari attivando specifiche proteine Smad, che controllano la trascrizione dei geni bersaglio. BMPs e TGF-beta sono sovrapposti, nonché specifici effetti sulla differenziazione delle cellule mesenchimali per cui i meccanismi sono capiti in modo incompleto. Qui riportiamo che Id1, un inibitore negativo dominante di base helix-loop-helix proteine, è un gene bersaglio diretto per BMP. BMP, ma non il TGF-beta, fortemente attiva il promotore Id1 in maniera Smad-dipendente. Abbiamo identificato due regioni BMP-reattivo nel promotore del mouse Id1, che contengono tre elementi distinti sequenza; una regione contiene due elementi di associazione di Smad (SBEs), e l'altra regione contiene una sequenza di palindromo GGCGCC fiancheggiata da due CAGC e due motivi CGCC. Considerando che SBEs e GGCGCC sequenza sono criticamente importante, i motivi CAGC e CGCC sono necessari per l'attivazione del promotore efficace Id1 indotta da BMP. SMAD sono parte della trascrizione nucleare sequenza di complessi fattori che si legano specificamente SBEs e GGCGCC in risposta a BMP ma non TGF-beta. Multimerization tutti i tre motivi distinti sequenza è necessario per generare un rinforzatore specifico altamente sensibile e BMP/Smad-dipendente. I nostri risultati forniscono importanti nuove intuizioni come il pathway BMP/Smad specificamente può attivare geni bersaglio.

Perturbazione Transitoria Della Segnalazione Di Autocrine TGF-beta Porta a Una Maggiore Sopravvivenza E Potenziale Proliferazione Di Cellule Progenitrici Emopoietiche Umane Primitivi Singolo

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Jan, 2002  |  Pubmed ID: 11777969

Le cellule staminali emopoietiche (HSCs) sono mantenute alla relativa quiescenza dal bilanciamento tra i fattori positivi e negativi normativi che stimolare o inibire la loro proliferazione. Bloccando l'azione di fattori regolatori negativi può fornire un nuovo approccio per l'induzione di HSCs in proliferazione. Vari studi hanno suggerito che TGF-beta regola negativamente la progressione del ciclo cellulare di HSCs. In questo studio, un mutante dominante negativo recitazione del recettore TGF-beta tipo II (TbetaRIIDN) è stata transitoriamente espressa in HSCs mediante consegna genica mediata da vettore adenovirale, tale che gli effetti di perturbare la segnalazione di autocrine-TGF-beta nelle HSCs possono essere esaminati direttamente a livello di singola cellula. Vettori adenovirali che permette l'espressione di TbetaRIIDN e di fluorescenza verde proteina nelle cellule CD34(+)CD38(-)Lin(-) stesse sono stati costruiti. Sovraespressione di TbetaRIIDN perturbato in particolare TGF-beta-mediata segnalazione. Autocrino TGF-beta segnalazione nelle cellule CD34(+)CD38(-)Lin(-) è stato studiato in dosaggi di singola cellula in condizioni serum-free. Ostruzione transitoria di segnalazione di autocrine TGF-beta nelle cellule CD34(+)CD38(-)Lin(-) migliorato la sopravvivenza. Inoltre, la proliferazione globale potenziale e cinetica di proliferazione di queste cellule sono state significativamente migliorate rispetto con le cellule CD34(+)CD38(-)Lin(-) che esprimono la proteina fluorescenza verde da solo. Pertanto, abbiamo bloccato con successo il ciclo di regolamentazione TGF-beta-negativo autocrino di cellule progenitrici emopoietiche primitivo.

Fisica E Funzionale Interazione Tra GATA-3 E Smad3 Permette TGF-beta Regolazione Dei Geni Bersaglio GATA

Current Biology : CB. Jan, 2002  |  Pubmed ID: 11790301

Membri della famiglia GATA della trascrizione dito di zinco sono fattori geneticamente controllata "master" regolatori di sviluppo nel sistema ematopoietico e nervoso. Se fattori GATA servono anche a integrare segnali epigenetici su promotori di destinazione è tuttavia sconosciuto. La Superfamiglia transforming growth factor-beta (TGF-beta) è un grande gruppo di filogeneticamente conservate secrete fattori che controllano la proliferazione cellulare, differenziazione, migrazione e sopravvivenza nei tessuti multipli.

Azione Gamma Delle BMP è Definito Dal Suo Nucleo Di Base Dell'amminoacido N-terminale

Current Biology : CB. Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11839272

Durante lo sviluppo iniziale, le cellule ricevono informazioni posizionali da celle a modelli di tessuto di forma in strati germinali inizialmente uniforme vicine. Ligandi della superfamiglia transforming growth factor (TGF-beta) sono conosciuti per partecipare a questa formazione di pattern. In particolare, l'activin ha dimostrato di agire come un segnale di dorsalizing a lungo raggio per stabilire un gradiente di concentrazione in Xenopus. Al contrario, BMP-2 e BMP-4, altri membri della famiglia, sembrano influenzare e indurre ventrali destini solo dove essi sono espressi. Questo solleva una questione di come l'azione di BMPs è strettamente limitato alla regione all'interno e intorno alle cellule che li producono. Qui, abbiamo dimostrato che un nucleo base di solo tre amminoacidi nella regione N-terminale del BMP-4 è necessario per la sua restrizione ai non-neurale ectoderma come suo dominio di espressione. Anche i nostri risultati suggeriscono che eparan solfato dei proteoglicani legano a questo nucleo di base e quindi giocano un ruolo in abbondanza BMP-4. Il presente studio è il primo ad identificare il dominio critico di BMP che è responsabile della sua interazione con l'ambiente extracellulare che limita la sua diffusione in vivo.

Carente Smad7 Espressione: Un Difetto Molecolare Putativo Nella Sclerodermia

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Mar, 2002  |  Pubmed ID: 11904440

Sclerodermia è una malattia sistemica cronica che porta alla fibrosi degli organi colpiti. Transforming growth factor (TGF) beta è stato implicato nella patogenesi della sclerodermia. Le proteine SMAD sono segnalazione trasduttori a valle da recettori TGF-beta. Sono state identificate tre famiglie di SMAD: (i) ricevitore-regolato Smad2 e -3 (R-SMAD); (ii) comuni partner Smad4 (Co-Smad); e (iii) Smad6 inibitorio e -7 (SMAD, parte di un feedback negativo ciclo). Abbiamo studiato i componenti di segnalazione per il TGF-beta pathway e attività TGF-beta in lesioni di sclerodermia in vivo e in fibroblasti di sclerodermia in vitro. Livello basale e TGF-beta-inducible expression of Smad7 selettivamente sono diminuiti, mentre Smad3 espressione è aumentata in pelle sclerodermia e nei fibroblasti sclerodermia espiantato in cultura. Segnalazione eventi TGF-beta, tra cui la fosforilazione di Smad2 e -3 e la trascrizione del gene PAI-1 sono aumentati nei fibroblasti di sclerodermia, rispetto alla normali dei fibroblasti. Trasferimento del gene adenovirali in vitro con Smad7 ripristina la normale segnalazione TGF-beta in fibroblasti di sclerodermia. Questi risultati suggeriscono che alterazioni nel percorso Smad, compresi contrassegnato Smad7 deficit e Smad3 up-regolamento, possono essere responsabile di TGF-beta iperresponsività osservati nella sclerodermia.

Regolazione Della Proliferazione Cellulare Di Proteine Smad

Journal of Cellular Physiology. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11920677

Trasformando i familiari growth factor-beta (TGF-beta), che comprendono il TGF-beta, activins e proteine morfogenetiche ossee (BMPs) regolano un ampio spettro di risposte biologiche su una grande varietà di tipi di cellule. I membri della famiglia TGF-beta avviano le loro risposte cellulari legandosi ai recettori distinti con attività chinasica intrinseca serina/treonina e l'attivazione di specifici a valle effettori intracellulari chiamati proteine Smad. SMAD inoltrare il segnale dalla membrana cellulare al nucleo, dove essi possono influenzare la trascrizione dei geni bersaglio. Attivazione SMAD, distribuzione subcellulare e stabilità sono stati trovati per essere strettamente regolato e una vasta gamma di fattori di trascrizione sono state identificate come partner Smad. Importante attività di TGF-beta sono suoi potenti effetti anti-mitogenic e pro-apoptotici che, almeno in parte, sono mediati attraverso le proteine Smad. Fuga da inibizione della crescita TGF-beta/Smad-indotta e apoptosi sono osservata frequentemente nei tumori. Certo SMAD sono stati trovati per essere mutato in specifici tipi di cancro e ablazione di gene di SMAD particolare nei topi ha rivelato un tasso aumentato di tumorigenesi. Nei tumori di stadio tardo, TGF-beta ha dimostrato di funzionare come un promotore tumorale. TGF-beta è in grado di stimolare la de-differentiation delle cellule epiteliali di cellule maligne invasive e metastatiche fibroblastica. È interessante notare, TGF-beta possa mediare questi effetti direttamente sulle cellule tumorali attraverso sovvertita Smad-dipendente e/o percorsi Smad-indipendente.

Lo Stato Di Attivazione Dell'endotelio Tramite Due Distinte Di Bilanciamento TGF-beta Tipo I Recettori

The EMBO Journal. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11927558

La generazione di topi privi di componenti specifici della via del tranduction transforming growth factor-beta (TGF-beta) segnale indica che il TGF-beta è un giocatore chiave nello sviluppo e nella fisiologia del sistema cardiovascolare. Entrambe le proprietà pro - e anti-angiogenico sono state attribuite a TGF-beta, per cui non sono chiari i meccanismi molecolari. Qui riportiamo che TGF-beta può attivare due distinte tipo I recettori/Smad segnalazione percorsi con effetti opposti. TGF-beta induce la fosforilazione di Smad1/5 e Smad2 in cellule endoteliali e questi effetti possono essere bloccati su inibizione selettiva di espressione ALK1 o ALK5, rispettivamente. Considerando che il TGF-beta/ALK5 percorso conduce alla inibizione della migrazione cellulare e la proliferazione, il pathway di TGF-beta/ALK1 induce la proliferazione e migrazione delle cellule endoteliali. Abbiamo identificato i geni che sono indotti in particolare da TGF-beta-mediata attivazione ALK1 o ALK5. Id1 è stato trovato a mediare la migrazione TGF-beta/ALK1-indotta (e Smad-dipendente), mentre l'induzione del plasminogeno attivatore inibitore-1 da ALK5 attivato possa contribuire alla maturazione dei vasi sanguigni indotta da TGF-beta. I nostri risultati suggeriscono che il TGF-beta regola lo stato di attivazione dell'endotelio tramite un delicato equilibrio tra ALK5 e ALK1 di segnalazione.

Trasformare La Trasduzione Del Segnale Di Fattore Di Sviluppo Beta

Journal of Leukocyte Biology. May, 2002  |  Pubmed ID: 11994497

Trasformare la beta1 di fattore di crescita (TGF-beta1) è il membro prototipico di una grande famiglia di citochine strutturalmente correlati pleiotropica secreto che gioca un ruolo fondamentale nel controllo della differenziazione, proliferazione e dello stato di attivazione di molti diversi tipi di cellule tra cui le cellule immunitarie. I membri della famiglia TGF-beta hanno immunosuppressor potente attività in vitro e in vivo. Queste citochine innescano i loro effetti biologici inducendo la formazione del complesso recettoriale eteromerico transmembrana serina/treonina chinasi. Questi recettori, quindi avviare di segnalazione intracellulare attraverso l'attivazione delle proteine Smad, e SMAD specifiche diventa fosforilato e associare con altri SMAD. Questi complessi di Smad eteromerico si accumulano nel nucleo, dove essi modulano l'espressione dei geni bersaglio. I dati recenti supportano la nozione che SMAD sono importanti effettori intracellulari di TGF-beta in cellule del sistema immunitario. Qui, passiamo in rassegna i recenti progressi nella trasduzione del segnale del TGF-beta in cellule del sistema immunitario.

Sovraespressione Di Smad7 Provoca Gravi Alterazioni Patologiche Nei Tessuti Epiteliali Multiple

The EMBO Journal. Jun, 2002  |  Pubmed ID: 12032071

Studi biochimici hanno dimostrato che blocchi Smad7 segnalano di trasduzione della trasformazione di fattore di sviluppo beta (TGFbeta); Tuttavia, le sue funzioni in vivo sono in gran parte sconosciuti. Per determinare le funzioni di Smad7, abbiamo espresso Smad7 nei topi transgenici, utilizzando un promotore di K5 di cheratina (K5.SMAD7). K5.SMAD7 topi esposto le alterazioni patologiche nei tessuti multipli e morirono entro 10 giorni dopo la nascita. Questi topi erano nati con le palpebre aperte e difetti corneali, significativamente ritardati e morfogenesi del follicolo pilifero aberrante e iperproliferazione dell'epidermide e altri stratified epithelia. Inoltre, K5.Topi SMAD7 sviluppato grave atrofia del timo e morte massiccia timocita, suggerendo che Smad segnalazione in epiteli timici è essenziale per la sopravvivenza del timocita. È interessante notare che, oltre ad una riduzione della fosforilazione di Smad, i livelli di proteine dei recettori per TGFbeta, activin e bone morphogenetic protein erano notevolmente diminuiti in tessuti affetti di K5.SMAD7 topi. Il nostro studio fornisce la prova che Smad7 è un potente inibitore in vivo per la trasduzione del segnale della superfamiglia TGFbeta durante lo sviluppo e il mantenimento dell'omeostasi dei tessuti epiteliali multiple.

Attivazione Della Proteina Morfogenetica Ossea/Smad Segnalazione Delle Cellule Epiteliali Bronchiali Durante L'infiammazione Delle Vie Aeree

American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. Aug, 2002  |  Pubmed ID: 12151307

Proteine morfogenetiche ossee (BMPs) sono proteine secrete pleiotropica, strutturalmente correlate a transforming growth factor (TGF)-beta e activins. BMPs giocano un ruolo cruciale nella regolazione dello sviluppo embrionale del polmone e ramificazione delle vie aeree e recentemente sono stati considerati per influenzare i processi infiammatori negli adulti a causa della loro attività chemiotattica sui miociti fibroblasti e cellule infiammatorie. In questo studio, abbiamo studiato il possibile coinvolgimento di BMP in un modello di infiammazione allergica delle vie aeree sperimentale in situ usando gli anticorpi di rilevare le proteine Smad attivate, e hanno monitorato la modulazione dei ligands BMP durante la risposta infiammatoria. Cellule epiteliali bronchiali infiammate e poche sparse cellule alveolari espresse livelli di fosforilato Smad1 (pSmad1/5), indicativi di segnalazione BMP/Smad attivo. Questo era in contrasto con epitelio sano, che era privo di immunoreattività. Una spiegazione meccanicistica per maggiore pSmad1/5 colorazione durante l'infiammazione è stata fornita dal sovraregolati espressione di tutti i BMP di tipo I recettori, cioè, activin receptor-like chinasi (ALK) 2, ALK3 e ALK6, nelle cellule epiteliali bronchiali infiammate. Inoltre, i profili di mRNA e proteine per ligandi BMP erano significativamente alterati durante l'infiammazione delle vie aeree con induzione di BMP2, BMP4 e BMP6 e downregulation del BMP5 e BMP7. Collettivamente, i nostri dati dimostrano per la prima volta attivo BMP/Smad segnalazione durante l'infiammazione delle vie aeree in cellule epiteliali bronchiali e quindi aumentare la possibilità che BMPs potrebbe giocare un ruolo determinante nella Fisiopatologia respiratoria.

Impegno Di Activin E Bone Morphogenetic Protein Signaling Proteine Smad Pathway Nell'induzione Della Produzione Di Inibina B in Cellule Di Granulosa Ovarica

Molecular and Cellular Endocrinology. Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12354674

Nell'ovaio mammiferi differenziazione e la crescita cellulare è regolata da diversi membri della superfamiglia transforming growth factor beta (TGF beta) tra cui activins, inhibins, fattori di differenziazione di crescita e proteine morfogenetiche ossee (BMPs). Gli effetti della famiglia beta TGF membri sono mediati al bersaglio le cellule tramite complessi eteromerici di tipo I e II serina/treonina chinasi recettori che attivano vie di proteina in vari tipi di cellule di segnalazione Smad. Abbiamo precedentemente dimostrato che Inibina B, un prodotto ormonale importante da cellule di granulosa umana, è regolata fino activin e BMPs. Qui, segnaliamo l'uso della metodologia trasferimento gene adenovirali per manipolare il fattore di crescita TGF beta signaling system in colture primarie di cellule umane granulosa. Queste cellule sono estremamente difficili a transfect da metodi di transfezione convenzionale, ma sono stati praticamente 100% infettati con adenovirus ricombinante che esprimono la proteina fluorescente verde (GFP). Adenovirus esprimendo forme costitutivamente attive della sette mammiferi conosciuti tipo I recettori di activin receptor-like chinasi (annuncio-caALK1 tramite annuncio-caALK7) causano attivazione di Smad endogeni e adenovirally trasferite le proteine di segnalazione che Ad-caALK1/2/3/6 e annuncio-caALK4/5/7 indotto fosforilazione delle vie Smad1 e Smad2, rispettivamente. ACTIVIN A e BMP-2 attivato i percorsi Smad1 e Smad2 così come la produzione di Inibina B come hanno fatto tutti l'annuncio-caALKs. Inoltre, la sovraespressione di proteine Smad1 e Smad2 adenovirali senza leganti esogenicamente aggiunti indotta da produzione di Inibina B. La proteina inibitoria Smad7 soppressa BMP-2 e activin induce la produzione di Inibina B. Collettivamente, i dati presenti dimostrano che trasferimento genico adenovirali fornisce un approccio efficace per dissezionare i TGF beta segnalazione percorsi primari cellule ovariche in vitro e più specificamente indicare che le vie Smad1 e Smad2 sono coinvolti nella regolazione della produzione di Inibina B di TGF beta famiglie ligandi nell'ovaio.

Localizzazione Di Immunohistochemical Di Proteina Osteogenetic (OP-1) E Suoi Recettori Nella Cartilagine Articolare Coniglio

The Journal of Histochemistry and Cytochemistry : Official Journal of the Histochemistry Society. Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12364567

Abbiamo valutato la distribuzione e la relativa immunohistochemical colorazione intensità del osso morfogenetico proteina-7, osteogeniche proteina-1 (OP-1), nel suo pro - e maturo e forme e quattro dei suoi recettori, tipo I (ALK-2, ALK-3 e ALK-6) e II nel normale adolescente New Zealand White rabbit cartilagine articolare. Espressione della proteina e suoi recettori è stato esaminato anche nella cartilagine da articolazioni che erano stati precedentemente sottoposti a degradazione matrice della cartilagine. Pro-OP-1 è stato moderatamente espresso in condrociti delle zone di cartilagine superficiale, medio e profondo e gli osteociti. L'espressione di maturo OP-1 è stata simile, ad eccezione di meno colorazione nella zona superficiale della cartilagine. Espressione di queste due forme di OP-1 è stata migliorata nelle zone di cartilagine centrale e profonda dopo sfida catabolico. Il tipo I recettori, ALK-6, visualizzate la colorazione più forte dei recettori in cartilagine e osso, considerando che ALK-2 visualizzata la colorazione più deboli. Non sono state osservate differenze nel recettore colorazione livelli dopo sfida catabolico. Questo studio dimostra che OP-1 e suoi recettori sono stati identificati nel coniglio cartilagine articolare e osseo, suggerendo un possibile ruolo di questo percorso nella cartilagine e osso omeostasi.

Stimolazione Dell'espressione Id1 Da Bone Morphogenetic Protein è Sufficiente E Necessario Per L'attivazione Indotta Da Proteine Morfogenetiche Ossee Delle Cellule Endoteliali

Circulation. Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12390958

Proteine morfogenetiche ossee (BMPs) sono proteine multifunzionali che regolano la proliferazione, la differenziazione e la migrazione di una grande varietà di tipi di cellule. Come altri membri della famiglia transforming growth factor-beta, BMPs suscitare loro effetti cellulari attraverso l'attivazione di specifiche combinazioni di tipo I e tipo II serina/treonina chinasi recettori e loro proteine effettrici a valle, che sono denominate SMAD. Nel presente studio, abbiamo studiato l'espressione del recettore/Smad BMP e segnalazione nelle cellule endoteliali (ECs) e ha esaminato gli effetti di BMP sul comportamento CE.

Percorsi BMP Sono Coinvolti Nella Formazione Di Capsula Otic Ed Epiteliali-mesenchimali Segnalazione Nell'orecchio Interno Pollo in Via Di Sviluppo

Developmental Biology. Nov, 2002  |  Pubmed ID: 12435365

I vertebrati dell'orecchio interno è costituito da un complesso labirinto di cellule epiteliali che è circondato da una capsula ossea. I meccanismi molecolari di coordinare lo sviluppo di labirinti membranoso e ossei sono in gran parte sconosciuti. In precedenza, utilizzando retrovirus aviaria codifica Noggin (RCA-zucca) o perline impregnati con proteina Noggin, abbiamo dimostrato che le proteine morfogenetiche ossee (BMPs) sono importanti per lo sviluppo dell'epitelio otic nell'orecchio interno di pollo. Qui, utilizzando due altri retrovirus ricombinante aviaria, forme dominanti negative e costitutivamente attive dei recettori BMP IB (BMPRIB), che mostriamo BMPs, possibilmente agendo attraverso BMPRIB, sono importanti per formazione capsula otic. Mostriamo anche che Bmp2 è fortemente espresso nei futuri canali semicircolari a partire dal canale outpouch fase, suggerendo che BMP2 gioca un ruolo importante nella formazione del canale. Inoltre, correlando i modelli di espressione di Bmps, loro recettori e localizzazione di immunoreattività fosforilati di R-Smad (fosfo R-Smad), un indicatore di attivazione BMP, che mostriamo BMPs che emana dall'epitelio otic influenza chondrogenesis della capsula otic compresa la cartilagine che circonda i canali semicircolari.

Delucidazione Del Requisito Smad Nel Trasformare Growth Factor-beta Tipo Risposte Indotta Dal Recettore

The Journal of Biological Chemistry. Feb, 2003  |  Pubmed ID: 12446693

Trasformando growth factor-beta (TGF-beta) induce effetti cellulari attivando specifiche proteine Smad che controllano la trascrizione dei geni bersaglio. Considerando che c'è in crescita prove che esistono TGF-beta tipo I pathways intracellulari avviate dal recettore che sono distinte dal pathway Smad pivotal, loro importanza fisiologica nella segnalazione di TGF-beta non è ben compreso. Pertanto, abbiamo generato TGF-beta tipo I recettori (anche chiamato ALK5s) con mutazioni nel ciclo L45 del dominio chinasi, chiamato ALK5(D266A) e ALK5(3A). Questi mutanti hanno mostrato l'attività della chinasi conservato ma non erano in grado di attivare SMAD. Caratterizzazione delle loro proprietà segnalazione ha rivelato che i due mutanti loop L45 non mediare risposte di transcriptional Smad-dipendente, inibizione della crescita indotta da TGF-beta e della fibronectina e del plasminogeno attivatore-1 produzione nelle R4-2 visone polmonare cellule epiteliali manca ALK5 proteina funzionale. Mutazione nella regione del ciclo L45 non influenza il legame di SMAD inibitorie, ma ha fatto abrogare il legame debole di X-linked inibitore della proteina di apoptosis e disabili-2 a ALK5. Ciò suggerisce che il ciclo L45 nel dominio della chinasi è importante per l'attracco delle altre proteine leganti. È interessante notare che, l'attività della chinasi JNK mappa è stato trovato per essere attivato da mutante ALK5(3A) in vari tipi di cellule. In aggiunta, TGF-beta-induced inibizione dell'espressione di cyclin D1 e la stimolazione del PMEPA1 (androgeni-regolato prostatica mRNA) espressione sono stati trovati a verificarsi, seppur debolmente, in maniera indipendente Smad nelle cellule normali murino ghiandola mammaria. Tuttavia, il TGF-beta-induced transdifferenziazione epiteliali a mesenchimali è stato trovato a richiedere un ciclo L45 intatto e rischia di essere dipendente sulle vie Smad.

Trasformando Le Mutazioni Growth Factor-beta 1 in Piombo Malattia Sindrome Di Camurati-Engelmann Per Segnalazione Aumentata Alterando O Attivazione O Secrezione Della Proteina Mutante

The Journal of Biological Chemistry. Feb, 2003  |  Pubmed ID: 12493741

Trasformando il fattore di crescita-beta1 (TGF-beta1) è secreta come un precursore latente, che consiste di un omodimero di latency-associated peptide e del peptide maturo. TGFbeta-1 può solo esercitare sue molteplici funzioni dopo essere andato da questo latente in uno stato attivo, in cui il sito di legame del peptide maturo per il suo recettore non è non più schermato da latency-associated peptide. Noi e gli altri segnalati che mutazioni in TGFB1 causano la sindrome di Camurati-Engelmann malattia, una malattia ossea rara. Fino ad ora, sono state pubblicate sette mutazioni. In questo studio, abbiamo indagare l'effetto delle mutazioni LLL12-13ins, Y81H, R218C, H222D e C225R sul funzionamento del TGF-beta1 in vitro. Un reporter di luciferase assay specifico per risposta trascrizionale indotta da TGF-beta con wild type e mutanti TGF-beta1 costrutti ha mostrati un effetto positivo di tutte le mutazioni su attività TGF-beta1. A titolo di enzyme-linked immunosorbent assay, abbiamo trovato che nei costrutti mutanti, R218C, H222D e C225R, questo effetto è causato da un aumento di TGF-beta1 attivo nel mezzo delle celle transfected. Le mutazioni LLL12-13ins e Y81H al contrario hanno un profondo effetto sulla secrezione; viene secreta una quantità ridotta di TGF-beta1, ma l'attività aumentata luciferase dimostra che l'accumulo intracellulare di TGF-beta1 (aberrante) può avviare una migliorata risposta trascrizionale, suggerendo l'esistenza di un'alternativa signaling pathway. I nostri dati indicano che le mutazioni del peptide segnale e latency-associated peptide facilitano TGF-beta1 di segnalazione, così causando la sindrome di Camurati-Engelmann.

Crescita Fattore Di Differenziazione-9 Induce Attivazione Smad2 E Produzione Di Inibina B in Cellule Di Granulosa-luteale Umane Colte

The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. Feb, 2003  |  Pubmed ID: 12574210

Il TGF beta membro della famiglia crescita differenziazione factor-9 (GDF-9) è un fattore derivato da ovocita che è essenziale per mammiferi follicologenesi ovarica. GDF-9 mRNAs hanno dimostrato di essere espressa nel follicolo ovarico umano dal palco follicolo primario in avanti, e GDF-9 ricombinante ha dimostrato di promuovere la crescita del follicolo ovarico umano in vitro. In questo studio con colture primarie di cellule umane granulosa-luteale (hGL), abbiamo studiato se GDF-9 ricombinante attiva componenti di Smad signaling pathways noti per essere differenzialmente attivato dal TGF beta e le proteine morfogenetiche ossee (BMPs). Come con TGF beta, GDF-9 trattamento causato la fosforilazione delle proteine endogene 53-kDa rilevata Western blots con anticorpi antiphospho-Smad2 (alfa PS2). Tuttavia, a differenza di BMP-2, GDF-9 non attiva la fosforilazione dell'anticorpo antiphospho-Smad1 (alphaPS1)-proteine immunoreattive nelle cellule hGL. Infezione di hGL celle con un adenovirus esprimendo Smad2 (annuncio-Smad2) ha confermato che la GDF-9 attiva specificamente la fosforilazione della proteina Smad2. Infezione delle cellule hGL con annuncio-Smad7, che esprime la proteina inibitoria Smad7, soppresso i livelli delle sia indotta da GDF-9 endogeno e adenovirali alfa PS2-reattiva. Inoltre, GDF-9 aumentato i livelli dello stato stazionario di Inibina beta (B)-subunità mRNAs in hGL celle e fortemente stimolato la secrezione di Inibina dimerica B. Ancora una volta, annuncio-Smad7 bloccata produzione GDF-9-stimolato Inibina B in modo concentrazione-dipendente. Identifichiamo qui per la prime volta distinte componenti molecolari della via di segnalazione GDF-9 nell'ovaio umano. I nostri dati suggeriscono che la GDF-9 da intermediario il suo effetto attraverso il pathway comunemente attivato dal TGF beta e activin, ma che non attivato da molti BMPs. Inoltre, i risultati sono coerenti con il suggerimento che oltre al controllo endocrino della Inibina produzione di gonadotropine, un controllo locale paracrina della produzione di Inibina è probabile che si verifichino tramite fattori derivati da ovocita nell'ovaio umano.

Trasformando Il Fattore Di Crescita-beta1 (TGF-beta)-indotto Apoptosi Delle Cellule Tumorali Della Prostata Comporta Attivazione Smad7-dipendente Di P38 Chinasi Attivata TGF-beta 1 E Chinasi Della Chinasi Di Proteina Mitogene-attivato 3

Molecular Biology of the Cell. Feb, 2003  |  Pubmed ID: 12589052

L'inibitore Smad7, un gene bersaglio diretto per trasformare growth factor-beta (TGF-beta), media l'apoptosi indotta da TGF-beta1 in diversi tipi di cellule. Qui, segnaliamo che il apoptosis del cancro alla prostata umano PC-3U cellule indotte da TGF-beta1 o Smad7 sovraespressione è causata da un modo di attivazione specifica del p38 mitogene-attivata della proteina chinasi via in una chinasi attivata TGF-beta 1 (TAK1) - e chinasi della chinasi di proteina mitogene-attivato 3 (MKK3) - dipendente. Espressione di dominante negativo p38, MKK3 negativo dominante o incubazione con l'inibitore selettivo p38 [4-(4-fluorophenyl)-2-(4-methylsulfinylphenyl)-5-(4-pyridyl)1H-imidazole], ha impedito il TGF-beta1-induced apoptosis. L'espressione di Smad7 è stato richiesto per l'attivazione del TGF-beta-induced MKK3 e p38 chinasi e Smad7 endogeno è stato trovato a interagire con p38 fosforilato in modo ligando-dipendente. Espressione ectopica di selvaggio-tipo TAK1 promosso TGF-beta1-indotta della fosforilazione di p38 e apoptosi, mentre dominante negativo TAK1 ridotta fosforilazione TGF-beta1-indotta di p38 e l'apoptosi. Smad7 endogeno è stato trovato a interagire con TAK1 e TAK1, MKK3 e p38 furono coimmunoprecipitated con Smad7 in celle transitoriamente transfected COS1. Inoltre, ectopically espresso Smad7 enhanced coimmunoprecipitation di HA-MKK3 e bandiera-p38, sostenendo la nozione che Smad7 può agire come una proteina di ponteggi e facilitare l'attivazione mediata da TAK1 e MKK3 di p38.

Triterpenoidi Sintetici Migliorano Transforming Growth Factor Beta/Smad Segnalazione

Cancer Research. Mar, 2003  |  Pubmed ID: 12649201

Abbiamo studiato gli effetti di due nuovi triterpenoidi sintetici, acido 2-cyano-3,12-dioxooleana-1,9-dien-28-oic (CDDO) e suoi derivati, 1-(2-cyano-3,12-dioxooleana-1,9-dien-28-oyl) imidazolo (CDDO-Im), il transforming growth factor (TGF)-beta/Smad di segnalazione. Questi agenti, a concentrazioni nanomolari, aumentano l'espressione dei geni di TGF-beta-dipendente, come quelli dell'inibitore dell'attivatore del plasminogeno 1 e il recettore di tipo II TGF-beta, ed essi sinergizzare con TGF-beta, a questo proposito. Essi prolungano l'attivazione di Smad2 indotti dal TGF-beta e migliorare notevolmente la capacità di attivare un elemento di associazione di Smad, CAGA-luciferase Smad3. Dosaggi di transfezione, essi invertire gli effetti inibitori di Smad7. CDDO e CDDO-Im anche migliorare Smad segnalazione nei percorsi di altri due membri della superfamiglia TGF-beta, vale a dire, activin e bone morphogenetic protein. Infine, questi triterpenoidi inducono l'espressione del fattore trascrizionale coactivator p300-CBP-associati e sinergizzare con TGF-beta, a questo proposito. Questi sono i primi studi di valorizzazione della relazione di segnalazione Smad di triterpenoidi sintetici e dovrebbe ulteriormente il loro uso ottimale per applicazioni nella prevenzione o nella cura di malattie in cui c'è aberrante funzione di TGF-beta.

Proteine SMAD E TGF-beta Segnalazione in Vascolare Liscio Delle Cellule Muscolari

International Journal of Molecular Medicine. May, 2003  |  Pubmed ID: 12684705

Fattore di crescita-beta1 di trasformazione (TGF-beta1) svolge un ruolo nel rimodellamento vascolare da stimolante muscolatura liscia vascolare cella (SMC) crescita e matrix la sintesi proteica nei siti di lesione vascolare. Le proteine SMAD hanno dimostrate di mediare di segnalazione intracellulare di questo fattore di crescita. Abbiamo studiato l'espressione e la fosforilazione di SMAD in cellule del muscolo liscio aortiche coltivate ratto. Inoltre, abbiamo valutato gli effetti della sovraespressione di proteine Smad sulla trasduzione del segnale del TGF-beta da trasferimento di adenovirus-mediata del gene. Nel ratto SMC, Smad1, Smad2, Smad3, Smad4 e Smad5 sono stati rilevati da immunoprecipitazione. Utilizzando antisieri contro fosforilata Smad2, abbiamo dimostrato che la fosforilazione indotta da TGF-beta1 Smad2 in maniera concentrazione - e tempo-dipendente. Utilizzando il metodo di transfezione mediata da adenovirus, abbiamo dimostrato che sovraespressione di Smad2 o Smad4 è stata associata con un aumento della produzione di TGF-beta1-indotta del plasminogeno attivatore inhibitor-1 (PAI-1). Tuttavia, l'espressione più prominente di PAI-1 è stata osservata su cotransfection di Smad2 e Smad4. Sia l'effetto proliferativo di TGF-beta1 condizioni serum-free e il suo effetto anti-proliferative in condizioni di siero ricco furono soppresse dalla sovraespressione di Smad7 adenovirus-mediata. Questi risultati hanno indicato che le proteine SMAD sono stati espressi in SMC vascolare e che hanno mediato TGF-beta segnalazione in quelle celle.

DSmurf Degrada Selettivamente Attivati Decapentaplegic MAD, E Sconvolge La Sua Sovraespressione Sviluppo Disco Immaginale

The Journal of Biological Chemistry. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12754252

MAD gioca un ruolo importante nel decapentaplegic (DPP) di segnalazione per tutto lo sviluppo della drosofila. Nonostante un recente studio che descrive la restrizione del DPP segnalazione via putativo di ubiquitin E3 ligasi dSmurf (1), i meccanismi molecolari di come dSmurf influisce DPP segnalazione restano inesplorati. Verso questo obiettivo abbiamo dimostrato la degradazione della MAD fosforilata da dSmurf. dSmurf selettivamente interagito con MAD, ma non di Medea e di papà, e l'interazione di MAD-dSmurf è stata indotta da DPP costitutivamente attive thickveins del recettore di tipo I. DSmurf di tipo selvatico, ma non suo mutante C1029A, mediata ubiquitination dipendente dalla degradazione di MAD. Silenziamento del dSmurf mediante RNA interference stabilizzato MAD proteina nelle cellule di Drosophila S2. Espressione mirati di dSmurf in vari tessuti abolito fosforilato MAD e perturbato patterning e crescita. In contrasto, simile sovraespressione di dSmurf(C1029A) inattivo ha mostrato effetti significativi sullo sviluppo. Concludiamo che dSmurf specificamente fosforilata MAD alla degradazione del proteasoma-dipendente si rivolge e regola il DPP segnalazione durante lo sviluppo.

Distribuzione Di Smad2 Fosforilata Identifica Tessuti Bersaglio Dei Ligandi TGF Beta Nello Sviluppo Del Mouse

Gene Expression Patterns : GEP. Jun, 2003  |  Pubmed ID: 12799085

Transforming growth factor beta (TGF beta) e relativi familiari controllano lo sviluppo dei tessuti di apoptosi, differenziazione, migrazione e regolazione della proliferazione cellulare. Trasmettono segnali al nucleo tramite la fosforilazione delle proteine Smad. Qui, abbiamo utilizzato un anticorpo che riconosce specificamente fosforilata Smad2 (PSmad2) per identificare i tessuti che hanno ricevuto segnali di TGF beta familiari agente via Smad2, ad esempio beta TGF, activins e nodale. Al giorno embrionale (E) 5.5-E8.5, punctuated PSmad2 colorazione nucleare era sparsi in tutto l'embrione. Presso E10.5-E12.5, zone specifiche del tubo neurale e cervello, i gangli, masse premuscle e precartilage primordia esposto pronunciato colorazione nucleare, mentre i tessuti sottoposti a interazioni epiteliali-mesenchimali ha mostrate colorazione citoplasmatica prominente. È interessante notare che, nell'endocardio e cellule endoteliali più PSmad2 non viene rilevato al E10.5-E12.5, anche se a E8.5 queste cellule erano macchiate. Questi dati documento le cellule che possono aver ricevuto uno stimolo TGF beta-like e illustrare, per la prima volta, la regolazione dinamica nello spazio e nel tempo di Smad2 fosforilata durante lo sviluppo del mouse.

Fattore Nucleare YY1 Inibisce Transforming Growth Factor Beta - Bone Morphogenetic Protein-indotta Delle Cellule Differenziazione E

Molecular and Cellular Biology. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12808092

Le proteine SMAD trasducono transforming growth factor beta (TGF-beta) e segnali di morphogenetic protein (BMP) che regolano la differenziazione e la crescita delle cellule dell'osso. Abbiamo identificato YY1, un fattore di trascrizione che positivamente o negativamente regola la trascrizione di numerosi geni, come una romanzo proteine Smad interagenti. YY1 reprime l'induzione di geni immediati inizi di TGF-beta e BMP, come il gene inibitore 1 attivatore plasminogeno (PAI-1) e l'inibitore di differenziazione/inibitore di DNA del 1 gene (Id-1). YY1 inibisce il legame di SMAD a loro affine elementi di DNA in vitro e blocchi di reclutamento Smad nella regione di elemento ricco di Smad-associazione del promotore del PAI-1 in vivo. YY1 interagisce con il dominio di omologia Mad 1 N-terminale conservato di Smad4 e in misura minore con Smad1, Smad2 e Smad3. Il dominio del dito di zinco YY1 media l'associazione con SMAD ed è necessario per l'effetto repressivo di YY1 sull'attività trascrizionale Smad. Inoltre, downregulation di YY1 endogena da strategie di RNA interferenti antisense e piccole risultati in enhanced transcriptional responses to BMP o TGF-beta. Espressione ectopica di YY1 inibisce, mentre migliora l'atterramento di YY1 endogena, differenziamento cellulare indotta da TGF-beta e BMP. Al contrario, sovraespressione o atterramento di YY1 non influisce l'inibizione della crescita indotta da BMP o TGF-beta. Di conseguenza, YY1 non interferisce con la regolazione dell'inizio immediati del geni coinvolti nella risposta inibitoria di crescita TGF-beta, il p15 di inibitori del ciclo cellulare e p21 e il proto-oncogene c-myc. In conclusione, YY1 reprime Smad attività trascrizionale in un modo specifico del gene e quindi regola il differenziamento cellulare indotta da percorsi Superfamiglia TGF-beta.

SMAD7 Impedisce L'attivazione Delle Cellule Stellate Epatiche E Fibrosi Epatica Nel Ratto

Gastroenterology. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12851882

Numerosi studi coinvolgono il fattore di crescita trasformante (TGF)-beta segnalazione nel fegato fibrogenesis. Per perturbare il pathway di TGF-beta nel corso di questo processo, abbiamo overexpressed Smad7, un antagonista intracellulare di segnalazione di TGF-beta, in vivo e in coltura primaria stellate cellule epatiche (HSCs).

Analisi Matrice Del Gene Della Proteina Morfogenetica Ossea Di Tipo Differenziazione Indotta Dal Recettore Degli Osteoblasti

Journal of Bone and Mineral Research : the Official Journal of the American Society for Bone and Mineral Research. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12854827

La risposta genomica a BMP è stata studiata da espressione ectopica di attivato BMP di tipo I recettori in C2C12 myoblast usando i microarrays del cDNA. Sono stati identificati nuovi geni bersaglio di recettore BMP con possibili ruoli nell'inibizione del myoblast differenziazione e stimolazione della differenziazione degli osteoblasti.

Trasduzione Del Segnale Di Proteine Morfogenetiche Ossee Nella Differenziazione Degli Osteoblasti

The Journal of Bone and Joint Surgery. American Volume. 2003  |  Pubmed ID: 12925607

Controllare La Differenziazione Delle Cellule Staminali Mesenchimali Da Membri Della Famiglia TGFBeta

Journal of Orthopaedic Science : Official Journal of the Japanese Orthopaedic Association. 2003  |  Pubmed ID: 14557946

Cellule staminali mesenchimali possono differenziarsi in vari tipi di tessuti tra cui osso, cartilagine, grasso e muscolo. Membri della famiglia, tra cui TGFBetas e bone morphogenetic proteins (BMP), trasformando growth factor-Beta (TGFBeta) giocano un ruolo importante nel dirigere le decisioni del destino per le cellule staminali mesenchimali. TGFBeta può fornire competenza per le prime fasi di chondroblastic e di differenziazione osteoblastica, ma inibisce l'adipogenesi myogenesis e differenziazione degli osteoblasti fase tardiva. BMPs anche inibisce l'adipogenesi e myogenesis, ma promuovono fortemente la differenziazione degli osteoblasti. TGFBeta familiari del segnale tramite specifici serina/treonina chinasi recettori e loro effettori nucleare, chiamati proteine Smad. In questa recensione discutiamo i recenti progressi nella comprensione dei meccanismi molecolari da cui TGFBeta familiari controllano la differenziazione delle cellule staminali mesenchimali.

Activin Receptor-like Chinasi (ALK) 1 è Un Mediatore Antagonistico Di Segnalazione TGFbeta/ALK5 Laterale

Molecular Cell. Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14580334

Trasformando growth factor-beta (TGFbeta) regola lo stato di attivazione dell'endotelio tramite due opposte tipo I percorsi del recettore/Smad. Activin receptor-like chinasi-1 (ALK1) induce la fosforilazione di Smad1/5, portando a un aumento della proliferazione delle cellule endoteliali e migrazione, mentre ALK5 promuove Smad2/3 attivazione e inibisce entrambi i processi. Qui, segnaliamo che ALK5 è importante per TGFbeta/ALK1 di segnalazione; manca ALK5 le cellule endoteliali sono carenti di risposte TGFbeta/ALK1-indotta. Più specificamente, mostriamo che ALK5 da intermediario un reclutamento TGFbeta-dipendente di ALK1 in un complesso di recettori TGFbeta e che l'attività della chinasi ALK5 è necessaria per l'attivazione di ALK1 ottimale. È anche richiesto per l'attivazione ALK1 di TGFbeta TGFbeta recettore di tipo II. È interessante notare che, ALK1 non solo induce una risposta biologica opposta a quella di ALK5 ma anche direttamente antagonizza ALK5/Smad di segnalazione.

Controllare Il Destino Delle Cellule Da Bone Morphogenetic Protein Receptors

Molecular and Cellular Endocrinology. Dec, 2003  |  Pubmed ID: 14656483

Proteine morfogenetiche ossee (BMPs) sono proteine multifunzionali che regolano la sorte dei diversi tipi di cellule, tra cui le cellule endoteliali e mesenchimali. BMPs inibiscono la differenziazione miogena, ma promuovere la differenziazione delle cellule mesenchimali in osteoblasti. Inoltre, la migrazione endoteliale e la formazione del tubo sono stimolati da BMPs. Come altri membri della superfamiglia transforming growth factor-beta (TGF-beta), BMPs suscitare loro effetti cellulari tramite specifici tipi I e II serina/treonina recettori. Il BMP attivato tipo I recettori tirosine specifico recettore-regolato (R) - proteine Smad, che assembla in complessi eteromerici con comuni partner (Co) - Smad4. Heteromeric Smad complessi efficientemente traslocano nel nucleo, dove si regola la trascrizione dei geni bersaglio. Inibitori della differenziazione (Id) sono geni che sono specificamente indotta da BMP in tessuti di diversa origine. Analisi del promotore di Id1 indicano tre elementi di sequenza distinti che sono essenziali per l'efficace attivazione indotta da BMP e sufficienti. Inoltre, recenti studi rivelano una funzione effector importante per Id1 in varie risposte biologiche indotta da BMP.

Fattore Di Crescita Nervosa Media L'attivazione Del Percorso in Cellule PC12 Smad

European Journal of Biochemistry / FEBS. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 15009204

Oligomerizzazione indotta dal ligando dei recettori è un passo fondamentale nell'avvio di segnalazione del fattore di crescita. Tuttavia, risposte biologiche complesse richiedono spesso ulteriori meccanismi trans-segnalazione che coinvolgono due o più cascate di segnalazione. Per le celle di origine neuronale, è stato dimostrato che gli effetti neurotrofici evocata dal fattore di crescita nervosa o altre neurotrofine dipendono altamente la cooperatività con citochine che appartengono alla Superfamiglia delle beta (TGF-beta) fattore di crescita trasformante. Abbiamo trovato che le cellule di feocromocitoma di ratto, che rappresentano un sistema modello per differenziazione neuronale, non risponde al TGF-beta1 dovuto limitare i livelli del suo recettore, TbetaRII. Tuttavia, la stimolazione con fattore di crescita nervosa conduce all'attivazione del percorso Smad indipendente di TGF-beta. A differenza di segnalazione di TGF-beta, attivazione di Smad3 da fattore di crescita nervosa non avviene tramite la fosforilazione del motivo-SSXS C-terminale, ma porta alla formazione dei complessi eteromerici con Smad4, traslocazione nucleare di Smad3 e attivazione trascrizionale dei geni reporter Smad-dipendente. Questa risposta è diretta e non richiede de novo sintesi proteica, come dimostrato dal trattamento cicloeximide. Questa iniziazione della trascrizione dipende da recettori chinasi della tirosina funzionale e può essere bloccata da Smad7. Questi dati forniscono ulteriore prova che le proteine Smad non sono attivate esclusivamente dalla classica TGF-beta ha attivato il meccanismo. Il potenziale di NGF per attivare il pathway Smad indipendente di TGF-beta rappresenta un importante meccanismo normativo con particolare rilevanza per lo sviluppo e la funzione delle cellule neuronali o di altre cellule NGF-sensibili, in particolare quelli che sono resistenti al TGF-beta.

Sclerostin è Un Regolatore Negativo Espresso Osteocita Della Formazione Ossea, Ma Non Un Classico Antagonista BMP

The Journal of Experimental Medicine. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 15024046

Sclerosteosi, una malattia scheletrica caratterizzata dalla massa ossea elevato a causa dell'attività degli osteoblasti aumentato, sono causata dalla perdita del prodotto del gene del SOST, sclerostin. La localizzazione in osso e il meccanismo di azione del sclerostin non sono ancora noti, ma si è ipotizzato che esso può agire come un antagonista di bone morphogenetic protein (BMP). Mostriamo qui che SOST/sclerostin si esprime esclusivamente da osteociti in mouse e ossa umane e inibisce la differenziazione e la mineralizzazione delle cellule preosteoblastic murine (KS483). Sebbene sclerostin condivide alcune delle azioni della zucca antagonista BMP, mostriamo qui che ha anche azioni nettamente diverse da esso. In contrasto con la zucca, sclerostin non inibire l'attività basale della fosfatasi alcalina (ALP) nelle cellule KS483, né ha fatto esso antagonizzare attività ALP BMP-stimolati in cellule di topo C2C12. Inoltre, sclerostin ha avuto alcun effetto sulla fosforilazione Smad BMP-stimolato e attivazione trascrizionale diretta di MSX-2 e BMP reporter elemento risposta costruisce nelle cellule KS483. Sua unica localizzazione e azione su osteoblasti suggeriscono che sclerostin può essere il fattore derivato Osteocita precedentemente proposto che è trasportato in osteoblasti presso la superficie dell'osso e inibisce la formazione del tessuto osseo.

Nuove Intuizioni Di Segnalazione Di TGF-beta-Smad

Trends in Biochemical Sciences. May, 2004  |  Pubmed ID: 15130563

Trasformando growth factor beta (TGF-beta) avvia sue risposte cellulari diverse dall'associazione a e l'attivazione di recettori di superficie specifica delle cellule che hanno attività chinasica intrinseca serina/treonina. Questi recettori di TGF-beta attivati stimolano la fosforilazione del recettore-regolato Smad proteine, che a loro volta formano complessi con Smad4 che si accumulano nel nucleo e regolano la trascrizione dei geni bersaglio. Risposte di TGF-beta possono essere specifiche del tipo di cellula e sono dipendente sulla concentrazione di TGF-beta segnalazione componenti e l'attività di altre vie di trasduzione del segnale, che possono sinergizzare con o inimicarsi il pathway di TGF-beta. Recenti ricerche ha fornito approfondimenti i determinanti di specificità del TGF-beta-Smad segnalazione, comprese le associazioni combinatoria ligando-recettore, selettive interazioni tra la SMAD e altri componenti di percorso che sono mediati attraverso motivi definiti e regolazione differenziale della durata e dell'intensità della segnalazione.

RLP, Un Romanzo Proteina Ras-simile, è Un Immediato Inizio Trasformante Gene Di Destinazione Growth Factor-beta (TGF-beta) Che Regola Negativamente L'attività Trascrizionale Indotta Da TGF-beta

The Biochemical Journal. Oct, 2004  |  Pubmed ID: 15239668

Abbiamo descritto in precedenza l'uso della tecnologia microarray per identificare i geni bersaglio romanzo di TGF-beta (transforming growth factor-beta) segnalazione nei fibroblasti di embrione di topo carenti di Smad2 o Smad3 [Yang, Piek, Repubblica, Liang, Xie, Heyer, Pavlidis, Kucherlapati, Roberts e Böttinger (2003) proc Acad Sci U.S.A. 100, 10269-10274. Natl.]. Tra i geni bersaglio TGF-beta identificati, è stato identificato un gene romanzo con omologia di sequenza ai membri della superfamiglia Ras, che noi abbiamo designato come RLP (proteina Ras-simile). RLP è un gene di destinazione TGF-beta inizio immediato del dipendente Smad3, sua espressione essere indotta entro 45 min. Bone morphogenetic proteine inducono anche espressione di RLP, considerando che il fattore di crescita epidermico ed estere del forbolo PMA sopprimere espressione di TGF-beta-indotta di RLP. Northern blot analisi hanno rivelato che RLP era fortemente espresso nel cuore, cervello e reni e sotto il livello di rilevamento nella milza e nei muscoli scheletrici. A livello di proteina, RLP è circa 30% omologhe con membri della superfamiglia Ras, particolarmente nella caratteristica di domini per piccolo GTPases. Tuttavia, confrontato con Ras prototipiche, RLP contiene un P-loop modificato, manca il loop di consenso G2 e i C-terminale prenilazione sito e porti aminoacidiche in posizioni che rendono Ras prototipiche oncogenica. Tuttavia, RLP non ha attività di trasformazione, non influisce la fosforilazione della chinasi di proteina mitogene-attivata e non è in grado di legare il GTP o PIL. RLP fu trovato da associare con alcuni sottotipi della famiglia del recettore TGF-beta, alzando la possibilità che RLP gioca un ruolo nella trasduzione del segnale del TGF-beta. Sebbene RLP non ha fatto interagire con SMAD e non influisce sulla fosforilazione di Smad2 indotta dal recettore TGF-beta, inibito attivazione del TGF-beta-induced transcriptional reporter, suggerendo che è un romanzo regolatore negativo di segnalazione di TGF-beta.

Attivazione Spazio-temporale Di Smad1 E Smad5 in Vivo: Monitoraggio Dell'attività Trascrizionale Di Proteine Smad

Journal of Cell Science. Sep, 2004  |  Pubmed ID: 15331632

Segnalazione di proteine morfogenetiche ossee è essenziale per un'ampia varietà di processi di sviluppo. Recettore-regolato Smad proteine, SMAD 1 e 5, sono mediatori intracellulari di bone morphogenetic protein signaling. Insieme a Smad4, queste proteine traslocano nel nucleo e modulano la trascrizione, legandosi alle sequenze specifiche sui promotori dei geni bersaglio. Abbiamo cercato di mappa trascrizionale Smad1/5 attività in via di sviluppo tramite la generazione di linee di cellule staminali embrionali portando un elemento di risposta Smad1/5-specifico derivato dal promotore Id1 accoppiato al beta-galattosidasi o luciferase come reporter. Tre linee indipendenti (BRE-lac1, BRE-lac2 e BRE-luc) hanno dimostrato l'esistenza di un autocrino bone morphogenetic protein signaling pathway in cellule staminali embrionali di topo. Attività di reporter è stato rilevato in embrioni chimerici, suggerendo la sensibilità alle concentrazioni fisiologiche di proteine morfogenetiche ossee. Attività di giornalista in embrioni da linee di topo transgenico è stato rilevato nei tessuti dove un ruolo essenziale per la proteina morfogenetica ossea attivo di segnalazione via SMAD 1 o 5 era stato precedentemente stabilito. Noi abbiamo così generato, per la prima volta, una lettura in vivo per studiare il ruolo dell'attività trascrizionale Smad1/5-mediata in sviluppo.

Espressione Del Fattore Di Crescita Del Tessuto Connettivo E Smad Segnalazione Durante Il Mouse Cuore Sviluppo E Infarto Del Miocardio

Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists. Nov, 2004  |  Pubmed ID: 15376321

Tessuto connettivo growth factor (CTGF) è segnalato per essere un gene bersaglio di trasformare growth factor beta (TGFbeta) e bone morphogenetic protein (BMP) in vitro. Suo ruolo fisiologico nella angiogenesi e skeletogenesis durante lo sviluppo del mouse è stata descritta recentemente. Qui, noi abbiamo mappato espressione del mRNA CTGF durante lo sviluppo del cuore di topo, postnatale vita adulta e dopo infarto miocardico sperimentale. Inoltre, abbiamo studiato la relazione tra CTGF e il BMP/TGFbeta signaling pathway in particolare durante lo sviluppo del cuore in topi mutanti. Dopo la nascita, CTGF espressione nel cuore è stato limitato all'atrio. Sorprendentemente, 1 settimana dopo un infarto del miocardio, quando miociti sono scomparsi dalla zona di infarto, CTGF e TGFbeta espressione nonché attivate forme di TGFbeta ma non BMP, Smad effettrici proteine sono colocalized esclusivamente nei fibroblasti del tessuto cicatriziale, suggerendo possibile cooperazione tra CTGF e TGFbeta durante la risposta fibrotica patologica.

Endoglin Promuove La Proliferazione Delle Cellule Endoteliali E Trasduzione Del Segnale Del TGF-beta/ALK1

The EMBO Journal. Oct, 2004  |  Pubmed ID: 15385967

Endoglin è un recettore transmembrana accessorio per trasformare growth factor-beta (TGF-beta) che è prevalentemente espressa sulle cellule endoteliali proliferanti nella cultura e sui vasi sanguigni angiogenesi in vivo. Endoglin, così come altri componenti di segnalazione di TGF-beta, è essenziale durante l'angiogenesi. Mutazioni in endoglin e activin receptor-like chinasi 1 (ALK1), un specifico endotelio TGF-beta del recettore di tipo I, sono state collegate a disturbi vascolari, teleangiectasia emorragica ereditaria. Tuttavia, la funzione di endoglin nella segnalazione di TGF-beta/ALK è rimasta poco chiara. Qui riportiamo che quello endoglin è necessaria per la segnalazione di TGF-beta/ALK1 efficiente, che indirettamente inibisce la segnalazione di TGF-beta/ALK5. Manca endoglin le cellule endoteliali non crescono perché TGF-beta/ALK1 segnalazione è ridotto e TGF-beta/ALK5 segnalazione è aumentato. Le cellule sopravvissute adattano a questo squilibrio di riducono espressione ALK5 per proliferare. La capacità di endoglin di promuovere ALK1 segnalazione spiega anche perché espressione ectopica endoglin in cellule endoteliali promuove la proliferazione e blocchi di arresto di crescita TGF-beta-indotta indirettamente riducendo la segnalazione di TGF-beta/ALK5. I nostri risultati indicano un ruolo cardine per endoglin nell'equilibrio di ALK1 e ALK5 di segnalazione per regolare la proliferazione delle cellule endoteliali.

Difettoso Paracrina Segnalazione Da TGFbeta Nel Sistema Vascolare Del Sacco Vitellino Di Topi Mutanti Endoglin: Un Paradigma Per La Teleangiectasia Emorragica Ereditaria

Development (Cambridge, England). Dec, 2004  |  Pubmed ID: 15548578

Teleangiectasia emorragica ereditaria (HHT) è una malattia autosomica dominante negli esseri umani che è caratterizzata da displasia vascolare multisistemica ed emorragia ricorrente. Mutazioni germinali in uno dei due geni differenti, endoglin o ALK1 possono causare HHT. Entrambi sono transforming growth factor (TGF) beta del recettore familiari delle proteine e sono espressi principalmente sulla superficie delle cellule endoteliali (ECs). Topi che mancano di endoglin o activin receptor come chinasi (ALK) 1 die a mid-gestation a causa di difetti nel sistema vascolare sacco vitellino. Qui, abbiamo analizzato TGFbeta segnalazione nel tuorlo sacs da topi knockout endoglin e da topi con delezione endoteliali specifiche del recettore di TGFbeta tipo II (TbetaRII) o ALK5. Mostriamo che TGFbeta/ALK5 segnalazione da cellule endoteliali adiacenti cellule mesoteliali è difettoso in questi topi, come evidenziato dalla riduzione della fosforilazione di Smad2. Il risultato è il fallimento delle cellule muscolari lisce vascolari per differenziare e associare con le cellule endoteliali, in modo che i vasi sanguigni rimangono fragili e diventare dilatati. La fosforilazione di Smad2 e differenziazione del muscolo liscio può essere salvati dalla cultura di vitellino con TGFbeta1 esogeno. I nostri dati mostrano quella rottura del TGFbeta segnalazione in cellule endoteliali vascolari risultati nella ridotta disponibilità di proteina TGFbeta1 per promuovere il reclutamento e la differenziazione delle cellule muscolari lisce e forniscono una possibile spiegazione per pareti debole vaso associato HHT.

Funzione Di Recettore TGF-beta in Endotelio

Cardiovascular Research. Feb, 2005  |  Pubmed ID: 15664386

Studi genetici in esseri umani e topi hanno rivelato il ruolo cruciale della trasformazione di growth factor-beta (TGF-beta) segnalazione durante l'angiogenesi. Topi carenti per i vari componenti di segnalazione di TGF-beta presentano una letalità embrionale a causa di difetti vascolari. Nei pazienti, mutazioni in TGF-beta ALK1 recettore di tipo I o nell'accessorio endoglin recettore TGF-beta sono legate ad una malattia autosomica dominante di displasia vascolare definita teleangiectasia emorragica ereditaria (HHT). Esso ha sconcertato i ricercatori per anni per spiegare gli effetti del TGF-beta essendo uno stimolatore e un inibitore dell'angiogenesi in vitro e in vivo. Recentemente, un modello è stato proposto in cui TGF-beta, legandosi al recettore TGF-beta tipo II può attivare due distinte tipo I recettori nelle cellule endoteliali (ECs), vale a dire, l'ALK1 CE-limitato e la largamente espresso ALK-5, che hanno di fronte gli effetti sul comportamento di ECs. ALK1 via Smad1/5 fattori di trascrizione stimola CE proliferazione e migrazione, mentre ALK5 via Smad2/3 inibisce la migrazione e la proliferazione di CE. Qui, le nuove scoperte sono presentate riguardanti i meccanismi molecolari che avvengono in ECs precisamente regolamentare e anche passare tra le risposte biologiche TGF-beta-indotta. In particolare, il ruolo dell'accessorio endoglin recettore TGF-beta nella regolazione del comportamento CE è indirizzato e nuove intuizioni sono discussi riguardanti i possibili meccanismi che sono implicati nello sviluppo di HHT.

Nuovi Meccanismi Di Immunità Innata Della Pelle: Differenziazione Dei Cheratinociti Mediata Da ASK1 Regola L'espressione Di Beta-defensine, LL37 E TLR2

European Journal of Immunology. Jun, 2005  |  Pubmed ID: 15864780

Cheratinociti epidermici differenziano e formano un multistrato dell'epidermide, che è la principale barriera tra il corpo e l'ambiente esterno. L'epidermide è costantemente esposti ad una varietà di agenti patogeni microbici, la sua funzione di resistere gli agenti patogeni microbici è vitale. Questa caratteristica è formata durante la differenziazione. L'analisi di immunohistochemical ha rivelato che l'epidermide superiore di cute umana normale esprime beta-defensine 1-3 e LL37. Abbiamo ipotizzato che i cheratinociti epidermici sviluppano una barriera immunitaria innata basata su beta-defensine umane (hBD) e LL37 durante la differenziazione. Per dimostrare questo, abbiamo introdotto una forma attiva del apoptosis segnale di regolazione della chinasi-1 (ASK1), un regolatore intracellulare della differenziazione dei cheratinociti, in colti normali cheratinociti umani. Transfezione di questa forma attiva, ASK1-Deltana, migliorato significativamente l'espressione di hBD1-3 e LL37. Inoltre, un inibitore della p38 abolito questa induzione, indicando che la cascata ASK1-p38 regola l'espressione di hBD1-3 e LL37. Inoltre, il pathway p38 ASK1 regolato anche l'espressione del recettore Toll-like (TLR) 2 nei cheratinociti. Il contatto tra S. aureus e cheratinociti ha provocato la fosforilazione di p38 e indotta l'espressione di hBD2 e hBD3. Inoltre, l'inibitore della p38 ridotto questa induzione. In conclusione, la cascata ASK1-p38 regola dell'immunità innata della pelle formando una barriera immunitaria consistente di hBD, LL37 e TLR2 durante la differenziazione dell'epidermide.

SOST/sclerostin, Un Derivato Osteocita Regolatore Negativo Della Formazione Ossea

Cytokine & Growth Factor Reviews. Jun, 2005  |  Pubmed ID: 15869900

Sclerosteosi e Van Buchem malattia sono due disturbi strettamente correlati caratterizzate da ispessimento progressivo osso a causa della formazione ossea aumentata. Sclerosteosi sono associata a mutazioni nel gene SOST e Van Buchem malattia con una delezione di 52 kb a valle del gene SOST che probabilmente influisce sulla trascrizione del gene. Espressione del gene prodotto sclerostin in osso è limitato agli osteociti ed è un regolatore negativo della formazione ossea. Essa inibisce la formazione di osso BMP-stimolata, ma non può inimicarsi tutte le risposte BMP. Il fenotipo osseo esclusivo di buona qualità dei pazienti con Sclerosteosi e Van Buchem malattia e la localizzazione specifica della sclerostin lo rendono una destinazione attraente per lo sviluppo dell'osso formando therapeutics.

Fattore Di Crescita Trasformante-beta1 Fino All'osso

Endocrine Reviews. Oct, 2005  |  Pubmed ID: 15901668

TGF-beta1 è un fattore di crescita onnipresente che è implicato nel controllo della proliferazione, migrazione, differenziazione e sopravvivenza di molti diversi tipi di cellule. Esso influenza tali processi diversi come l'embriogenesi, l'angiogenesi, infiammazione e la guarigione della ferita. Nel tessuto scheletrico, TGF-beta1 gioca un ruolo importante nello sviluppo e manutenzione, che interessano il metabolismo sia cartilagine e osso, quest'ultimo è oggetto di questa recensione. Perché colpisce sia le cellule del lignaggio degli osteoblasti e degli osteoclasti, TGF-beta1 è uno dei fattori più importanti nell'ambiente di osso, aiutando a mantenere l'equilibrio tra i processi dinamici di formazione ossa e riassorbimento dell'osso. Molti rapporti apparentemente contraddittori sono stati pubblicati sull'esatto funzionamento del TGF-beta1 nel milieu osso. Questa review fornisce un quadro complessivo delle azioni osso-specifica del TGF-beta1 e riconcilia discrepanze sperimentali che sono state segnalate per questa citochina multifunzionale.

Analisi Globale Di Smad2/3-dipendente TGF-beta Segnalazione Nei Topi Viventi Rivelano Prominente Tessuto-specifiche Risposte a Lesioni

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Jul, 2005  |  Pubmed ID: 15972691

SMAD2 e Smad3 (Smad2/3) le proteine sono molecole di segnalazione chiave per TGF-beta e alcuni relativi familiari che regolano la trascrizione di numerosi centinaia geni. TGF-beta hanno ruoli chiave in sviluppo, omeostasi del tessuto e la patogenesi di molte malattie umane, tra cui il cancro, malattie fibrotiche, difetti di sviluppo e neurodegenerazione. Per studiare i modelli temporali e spaziali di Smad2/3-dipendente di segnalazione in condizioni normali e patologiche nell'organismo vivente, abbiamo progettato di topi transgenici con un reattivo Smad luciferase reporter construct (SBE-luc topi). Utilizzando bioluminescenti imaging, abbiamo valutato Smad2/3 segnalazione attività in modo non invasivo nei topi vivi. Al basale, questa attività è stata più alta nel cervello, intestino, cuore e pelle e correlate con misurazioni biochimiche dell'attività di giornalista. Astrociti primari colta da SBE-luc topi ha mostrati l'attivazione specifica del reporter in risposta ai membri della famiglia TGF-beta Smad2/3-attivazione. Trattamento di topi con le endotossine LPS ha provocato un rapido e vigoroso, ma transitoria attivazione del reporter nell'intestino. Anche se la risposta fu altrettanto rapida nel cervello, è rimasto aumentato, che indica importanti ma diverse risposte cellulari alla sfida di endotossine in questi organi. Trauma cranico con una pugnalata ago portato nel locale attivazione dei geni Smad2/3-dipendente e un aumento molteplicemente bioluminescenza nei topi vivi. SBE-luc topi quindi possono essere utilizzati per studiare l'attivazione temporale, tessuto-specifici di segnalazione Smad2/3-dipendente nei topi vivi in condizioni normali o patologiche pure per quanto riguarda l'identificazione dei modulatori endogeni o sintetiche di questo percorso.

L'enzima Deubiquitinating UCH37 Interagisce Con SMAD E Regola La Segnalazione Di TGF-beta

Oncogene. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16027725

Interruzione dei componenti in cascata di segnalazione della transforming growth factor-beta (TGF-beta) è un evento comune nei tumori umani. Attivazione di pathway di TGF-beta viene eseguita tramite i recettori di serina/treonina chinasi e fattori di trascrizione Smad intracellulare. Un passaggio chiave normativo coinvolge specifici ubiquitination di Puffi che mediano la degradazione proteosomale di SMAD e/o recettori. Riportiamo un romanzo interazione tra SMAD e ubiquitina idrolasi del C-terminale UCH37, un enzima deubiquitinating che potenzialmente potrebbe invertire ubiquitination Puffo-mediata. In discesa GST esperimenti, UCH37 legato debolmente Smad2 e Smad3 e legato molto fortemente a Smad7 in una regione che è distinta dal - PY-motif in Smad7 che interagisce con Puffo ubiquitina ligasi. Smad7 endogeni e UCH37 formano un complesso stabile nelle cellule U4A/JAK1 e bandiera-Smad7 co-immunoprecipitated con HA-UCH37 in celle transfected HEK-293. Inoltre, mostriamo che UCH37 può deubiquitinate e stabilizzare il tipo mi recettore TGF-beta. Inoltre, sovraespressione di UCH37 sopraregola le trascrizione TGF-beta-dipendente e questo effetto è invertito in cellule soggette a RNAi-mediata atterramento di UCH37 endogeni. Questi risultati supportano un ruolo nuovo per gli enzimi deubiquitinating nel controllo della via di segnalazione del TGF-beta e forniscono un romanzo bersaglio molecolare per la progettazione di inibitori con potenzialità terapeutiche nel cancro.

Trasduzione Del Segnale Transforming Growth Factor-beta Nei Disturbi Vascolari E L'angiogenesi

Chest. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16373850

Transforming growth factor (TGF)-beta è una proteina multifunzionale che avvia la sua diverse risposte cellulari legandosi ai e attivando specifici di tipo I e type II serina/treonina chinasi receptors. TGF-beta può agire come regolatore di proliferazione, migrazione, sopravvivenza, differenziazione e sintesi di matrice extracellulare in cellule endoteliali e cellule muscolari lisce vascolari, così come nel mantenimento dell'omeostasi vascolare. Importante, gli studi genetici negli esseri umani hanno rivelato il ruolo del TGF-beta, così come suoi componenti segnalazione nell'angiogenesi. Mutazioni in due recettori di TGF-beta (cioè, l'activin receptor-like chinasi (ALK) 1 e l'accessorio endoglin recettore TGF-beta) sono state collegate a disturbi vascolari denominati teleangiectasia emorragica ereditaria. Inoltre, topi knockout per i diversi componenti della via di segnalazione di TGF-beta hanno dimostrato che il TGF-beta è indispensabile per l'angiogenesi. Recenti studi hanno rivelato che TGF-beta è in grado di regolare l'omeostasi vascolare equilibrando la segnalazione tra due distinti tipo TGF-beta I recettori (vale a dire, l'ALK1 endoteliali limitato e i recettori ALK5 largamente espressi). L'attivazione di questi recettori ha dimostrato di indurre effetti opposti sul comportamento delle cellule endoteliali e l'angiogenesi. In questa recensione, ci presenterà i recenti progressi nella comprensione del ruolo del TGF-beta segnalazione nelle cellule endoteliali, nonché i meccanismi molecolari sottostanti da cui perturbazione di questo percorso può portare a disturbi vascolari.

Il Soppressore Del Tumore Smad4 è Richiesto Per Il Fattore Di Crescita Trasformante Beta-indotta Epiteliali Di Mesenchymal Transizione E Metastasi Ossee Delle Cellule Di Cancro Al Seno

Cancer Research. Feb, 2006  |  Pubmed ID: 16489022

Trasformando growth factor beta (TGF-beta) può agire come soppressore e promotore della progressione del cancro. Intracellulare proteine Smad (cioè, il ricevitore regolato SMAD e mediatore comune Smad4) giocano un ruolo fondamentale nella mediazione antimitogenic e Miselli effetti di TGF-beta, ma non è chiara la loro funzione in TGF-beta-indotta di invasione e metastasi. Qui, abbiamo studiato il ruolo di Smad4 in un modello di cellulare e il mouse per la progressione del cancro al seno indotta da TGF-beta. Coerente con la sua funzione di soppressore tumorale, specifico silenziamento di Smad4 NMuMG ghiandola mammaria utilizzando piccolo hairpin RNA (shRNA) nelle cellule epiteliali-esprimendo la RNAi vettori fortemente attenuato inibizione della crescita indotta da TGF-beta e l'apoptosi. Smad4 atterramento anche potentemente inibiti transizione epiteliale a mesenchimali TGF-beta-indotta delle cellule NMuMG come misurato da trasformazione morfologica da epiteliale cellule simil-fibroblasti, formazione di fibre di stress, l'inibizione dell'espressione di E-caderina e l'aumento dell'espressione di vari marcatori mesenchimali. Inoltre, mostriamo che atterramento di Smad4 in MDA-MB-231 cellule di cancro al seno fortemente inibito la frequenza delle metastasi ossee in topi nudi di 75% e aumentato significativamente la sopravvivenza libera da metastasi. Comunicazione delle cellule MDA-MB-231 con il microambiente osseo, che è necessario per la crescita delle cellule tumorali ottimale e metastasi, potrebbe essere interessata in celle di colpo Smad4 come espressione di TGF-beta-indotta dell'interleuchina-11 è stato attenuato su atterramento Smad4. Presi insieme, i nostri risultati mostrano che Smad4 gioca un ruolo importante nella soppressione del tumore e la progressione delle cellule di cancro al seno.

SMAD7 E Proteine Fosfatasi 1alpha Sono Critici Determinanti Nella Durata Di Segnalazione Di TGF-beta/ALK1 Nelle Cellule Endoteliali

BMC Cell Biology. 2006  |  Pubmed ID: 16571110

Nelle cellule endoteliali (CE), transforming growth factor-beta (TGF-beta) può associare e trasdurre segnali attraverso ALK1 e ALK5. I TGF-beta/ALK5 e TGF-beta/ALK1 percorsi hanno effetti opposti sul comportamento di CE. Oltre al legame con recettore differenziale, la durata della segnalazione di TGF-beta è un determinante importante specificità per le risposte di segnalazione. TGF-beta/ALK1-induced Smad1/5 fosforilazione in ECs si verifica transitoriamente.

Id1 è Un Mediatore Critico Di Transdifferenziazione TGF-beta-indotta Delle Cellule Stellate Epatiche Di Ratto

Hepatology (Baltimore, Md.). May, 2006  |  Pubmed ID: 16628634

Transforming growth factor (TGF)-beta criticamente è coinvolto nell'attivazione delle cellule stellate epatiche (HSCs) che si verifica durante il processo di danni al fegato, per esempio, da alcol, virus epatotossici o aflatossine. Sovraespressione di antagonista Smad7 TGF-beta inibisce la transdifferenziazione e arresti di HSCs in una fase quiescente. Inoltre, legatura del dotto biliare (BDL)-fibrosi indotta è migliorata con l'introduzione di adenovirus esprimendo Smad7 con collagene giù-regolato e l'espressione di alfa-smooth muscle actin (alpha-SMA). Lo scopo di questo studio era di caratterizzare ulteriormente i dettagli molecolari di percorsi di TGF-beta che controllano il processo di transdifferenziazione. Nel tentativo di delucidare i geni bersaglio di TGF-beta responsabile fibrogenesis, è stata eseguita un'analisi dei profili di espressione di mRNA Smad7-dipendente nelle HSCs, con conseguente identificazione dell'inibitore della differenziazione 1 gene (Id1). Espressione ectopica Smad7 HSCs fortemente ridotto Id1 espressione di mRNA e proteine. Al contrario, Id1 sovraespressione di HSCs enhanced attivazione delle cellule e aggirate inibizione Smad7-dipendente di transdifferenziazione. Inoltre, knock-down di Id1 in HSCs interferito con formazione di alfa-SMA fibra, che indica un ruolo cardine di Id1 per fibrogenesis. Trattamento di HSCs con TGF-beta1 portò alla aumentata espressione della proteina di Id1, che non è stato mediato direttamente da ALK5/Smad2/3, ma il percorso ALK1/Smad1. In vivo, espressione Id1 e fosforilazione Smad1 erano co-induced durante fibrogenesis. In conclusione, Id1 è identificato come gene bersaglio TGF-beta/ALK1/Smad1 in HSCs e rappresenta un mediatore critico di transdifferenziazione che possa essere coinvolti in fibrogenesis epatica. Materiale supplementare per questo articolo può essere trovato sul sito di EPATOLOGIA (http://interscience.wiley.com/jpages/0270-9139/suppmat/index.html).

Degrado Indotto SMAD7 Beta-catenina Altera Lo Sviluppo Epidermico Appendice

Developmental Cell. Sep, 2006  |  Pubmed ID: 16950122

Per valutare se la segnalazione Smad colpisce lo sviluppo della pelle, abbiamo generato topi transgenici in cui è stata indotta da un antagonista di Smad, Smad7, nei cheratinociti, comprese le cellule staminali epidermiche. Induzione transgene SMAD7 turbare la morfogenesi del follicolo pilifero e la differenziazione, ma accelerato morfogenesi delle ghiandole sebacee. Un'ulteriore analisi ha rivelato che indipendente del suo ruolo nella segnalazione anti-Smad, Smad7 associato beta-catenina e indotta da degradazione di beta-catenina con l'assunzione di una ligasi E3, Smurf2, per il complesso Smad7/beta-catenina. Di conseguenza, segnalazione Wnt/beta-catenina fu soppressa nel Smad7 transgenici follicoli piliferi. Coexpression dei transgeni Smurf2 e Smad7 esacerbato indotta Smad7 anomalie nei follicoli piliferi e delle ghiandole sebacee. Al contrario, quando Smad7 endogeno è stato abbattuto, cheratinociti esposti aumentata della proteina beta-catenina ed enhanced segnalazione Wnt. I nostri dati rivelano un meccanismo per Smad7 a inimicarsi segnalazione Wnt/beta-catenina, quindi spostando il programma di differenziazione della pelle da formare follicoli piliferi di ghiandole sebacee.

Un Approccio Di Equazione Di Tasso Per Delucidare La Cinetica E La Robustezza Del Percorso TGF-beta

Biophysical Journal. Dec, 2006  |  Pubmed ID: 17012329

Vi presentiamo un modello di equazione di tasso per il percorso di TGF-beta in cellule endoteliali insieme al romanzo misurazioni. Questo gioca pathway un ruolo prominente in inter- e comunicazione intracellulare e sovversione può condurre a cancro, disturbi vascolari fibrosi e malattie immunitarie. Il modello descrive correttamente la cinetica dei dati sperimentali e predice anche correttamente il comportamento negli esperimenti dove è perturbato il sistema. Un nuovo metodo in questo contesto, simulato rinvenimento, viene utilizzato per inserire i parametri del modello ai dati. Fornisce un insieme di soluzioni di alta qualità, che vengono analizzati con metodi di clustering e visualizzare una struttura gerarchica evidenziando sottospazi distinti parametro con interpretazioni biologiche. Questa analisi discrimina tra diversi meccanismi biologici per ottenere un segnale transiente da un input di TGF-beta sostenuta, dove è possibile utilizzare un feedback negativo per spegnere il segnale. Un'ulteriore analisi in termini di sensibilità del parametro rivela che questo ciclo di feedback negativo nella segnalazione di TGF-beta rende l'affidabilità globale del sistema. Questo getta una luce sul ruolo della proteina Smad7 in questo sistema.

Endoglin Ha Un Ruolo Fondamentale Nella Riparazione Vascolare Mediata Delle Cellule Del Sangue

Circulation. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 17088457

Endoglin, un recettore accessorio per trasformare growth factor-beta nelle cellule endoteliali vascolari, è essenziale per l'angiogenesi durante lo sviluppo del mouse. Mutazioni nel gene umano causano teleangiectasia emorragica ereditaria tipo 1 (HHT1), una malattia caratterizzata da malformazioni vascolari che aumentano con l'età. Sebbene aploinsufficienza è la causa della malattia, HHT1 individui mostrano grande eterogeneità nell'età di insorgenza, la sintomatologia clinica e la gravità.

Metilazione Del Smad6 Di Arginina Della Proteina N-metiltransferasi 1

FEBS Letters. Dec, 2006  |  Pubmed ID: 17118358

Vie di trasduzione del segnale utilizzano le modifiche di posttranslational per regolamentare l'attività dei loro componenti in modo efficiente e temporale-spaziale. Metilazione di arginina è una delle modifiche di posttranslational che possono provocare e monomethylated-, dimetilata asimmetrica - o residui di arginina-dimetilata simmetrica in proteine. Qui dimostriamo che inibitorio-SMAD (Smad6 e Smad7), ma non il recettore-regolato - SMAD (R-) e il comune-partner Smad4, possono essere metilati di arginina della proteina N-metiltransferasi (PRMT) 1. Utilizzando analisi di spettrometria di massa, abbiamo trovato che PRMT1 dimethylates arginine(74) (Arg(74)) mouse Smad6. PRMT1 interagisce con il dominio N-terminale del Smad6 in cui Arg(74) residuo si trova. Dosaggi esaminati finora hanno mostrato differenze significative tra le funzioni di Smad6 e quelli di metilazione-difettoso Smad6 (Smad6R74A). Entrambi wild-type e Smad6R74A erano ugualmente efficaci nel bloccare l'arresto della crescita indotta da BMP su loro espressione ectopica in HS-72 cellule di topo B-cellula dell'ibridoma.

KLF2 Sopprime TGF-beta Segnalazione Nell'endotelio Attraverso Induzione Di Smad7 E Inibizione Di AP-1

Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17194892

Il fattore di flusso-reattivo simil-Kruppel 2 (KLF2) è fondamentale per il mantenimento di quiescenza delle cellule endoteliali. Qui, descriviamo gli effetti dettagliati sulla trasformazione di segnalazione growth factor-beta (TGF-beta), che normalmente ha effetti proatherogenic sull'endotelio.

SOST Espressione è Limitata Alle Grandi Arterie Durante Lo Sviluppo Embrionale E Neonatale Cardiovascolare

Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists. Feb, 2007  |  Pubmed ID: 17195180

Regolamento spazio-temporale di proteine morfogenetiche ossee (BMP) e attività di Wnt è essenziale per il normale sviluppo cardiovascolare e alterata attività di questi fattori di crescita provoca variano del tratto di efflusso cardiaco e grandi arterie. Nel presente studio, mostriamo che SOST, un membro della famiglia ha riferito inimicarsi attività BMP e Wnt, di Dan è espresso all'interno della parete del vaso mediale delle grandi arterie che contiene cellule muscolari lisce. L'aorta ascendente, arco aortico, arteria brachiocefalica, carotidi comuni e tronco polmonare sono stati tutti associati con SOST che esprimono le cellule muscolari lisce, mentre il cuore stesso, comprese le valvole e le arterie più distali, cioè, arterie polmonari, arterie succlavia e discendente di aorta, sono stati negativi. SOST è stata espressa dal giorno embrionale 15,5 fino al periodo neonatale. Espressione SOST, tuttavia, non ha corrisposto con inibizione di Smad dipendente BMP o attività Wnt beta-catenina-dipendente nelle grandi arterie. Attività di due vie di segnalazione era già giù-regolato prima dell'induzione dell'espressione di SOST.

Aberrante Bmp Segnalazione E Notocorda Delaminazione Nella Patogenesi Dell'atresia Esofagea

Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17260385

Malformazione apparentemente umano noto come atresia esofagea con fistola tracheo-esofagea (EA/TEF) si verifica in 1 in 4.000 nati vivi con eziologia sconosciuta. Abbiamo trovato che topi privi di zucca (Nog(-/-)) visualizzato tipo C EA/TEF, la forma più comune negli esseri umani, e notochordal i difetti sorprendentemente simile al modello EA/TEF ratto indotta da Adriamicina. In accordo con atresia esofagea, embrioni Nog(-/-) visualizzato riduzione l'endoderma apparentemente dorsale, che è stato associato con ridotta aderenza e interrotto la membrana basale. Tuttavia, apoptosis significativo nella Nog(-/-) dorsale apparentemente non è stato osservato. Invece, non notochordal, probabile endodermico, le cellule sono state trovate in Nog(-/-) notocorda, suggerendo che la funzione Noggin è necessaria nella piastra di notochordal per la sua corretta delaminazione dalla dorsale apparentemente. In particolare, ablazione Bmp7 funzione in embrioni Nog(-/-) salvato EA/TEF e notocorda ramificazione difetti, che istituisce un ruolo critico dell'antagonismo Bmp7 Noggin-mediata nella patogenesi EA/TEF.

Regolazione Negativa Della Trasduzione Del Segnale Di TGF-beta Del Recettore/Smad

Current Opinion in Cell Biology. Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17317136

I membri della famiglia transforming growth factor-beta (TGF-beta) sono proteine di segnalazione cella multifunzionale altamente conservato che sono di fondamentale importanza per il controllo dell'omeostasi embriogenesi e tessuto. A prima vista, segnalazione attraverso i membri della famiglia TGF-beta sembra essere un processo semplice: ligandi legano ai recettori transmembrana specifici serina/treonina chinasi, che attivano le proteine effettrici Smad intracellulare che a sua volta inoltrare il segnale al nucleo per controllare la trascrizione del gene. Tuttavia, la ricerca recente ha rivelato che ulteriori strati di complessità presenti ad ogni passo nella via del TGF-beta/Smad. L'espressione, attivazione ed inattivazione, localizzazione sottocellulare e stabilità dei componenti di segnalazione di TGF-beta sono strettamente regolamentati e soggetto a input da altre vie di segnalazione. Un'ampia gamma di partner interagenti Smad e diversificate traslazionali di SMAD sono stati identificati. Recentemente, importanti sono stati fatti progressi nella nostra comprensione di come segnali famiglie TGF-beta sono attenuati e terminati per mantenere il controllo su questo percorso versatile.

Trasformando Il Recettore Di Tipo Growth Factor-beta Programma Di Gene Fibrogenic-dipendente è Mediato Tramite Attivazione Delle Vie Smad1 E Di ERK1/2

The Journal of Biological Chemistry. Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17317656

Il fattore di crescita trasformante (TGF)-beta/Smad3 signaling pathway è considerato un mediatore centrale di fibrosi dell'organo patologico; Tuttavia, contributo di segnalazione di TGF-beta Smad2/3-indipendente non è stata pienamente esplorata. Il presente studio in precedenza utilizzava un modello descritto di fibrosi sclerodermia (SSc) basato sull'espressione forzata di TGF-betaRI (ALK5) (Petito, J., Gardner, H., Shearstone, J. R., Smith, E. e Trojanowska, M. (2006) artrite Rheum. 54, 3011-3021). Questo studio è stato finalizzato a determinare i meccanismi molecolari sottostanti il programma profibrotic in questo modello. Dimostriamo che il TGF-betaRI-dipendente up-regolazione di collagene e CCN2 (CTGF) non comporta la attivazione Smad2/3 ma è mediata da vie ALK1/Smad1 e di ERK1/2. I risultati seguenti supportano questa conclusione: (i) Smad2 e -3 sono non stati fosforilati in risposta al TGF-betaRI, (ii) un mutante TGF-betaRI difettoso in attivazione Smad2/3, ALK5(3A), la produzione di collagene potentemente stimolato, (iii) elevazione del TGF-betaRI innescato associazione sostenuta di ALK5 con ALK1 e alti livelli di fosforilazione di Smad1, (iv) blocco di Smad1 tramite piccolo RNA interferente abrogata collagene e CCN2 up-regulation in questo modello, (v) elevata TGF-betaRI portò ad una prolungata attivazione di ERK1/2, (vi) l'inibitore di ERK1/2 farmacologica inibito Smad1 fosforilazione e abrogato profibrotic effetti di elevata TGFbeta-RI. Ulteriori esperimenti hanno dimostrato che un elemento di risposta GC-ricco si trova -6 a -16 (a monte del sito di inizio della trascrizione) nella CCN2 promotore mediata Smad1-dipendente aumentata attività di promotore in questo modello. Questo elemento è stato mostrato in precedenza per mediare la up-regolazione del promotore CCN2 nei fibroblasti SSc. In conclusione, questo studio definisce un romanzo ALK1/Smad1- ed ERK1/2-dipendente, modalità Smad3 indipendente di segnalazione di TGF-beta che può operare nella fase cronica della fibrosi in SSc.

Segnalazione Da ALK5 Da Intermediario Espressione Di TGF-beta-induced ET-1 in Cellule Endoteliali: Un Ruolo Per La Migrazione E La Proliferazione

Journal of Cell Science. Apr, 2007  |  Pubmed ID: 17376964

Endotelina-1 (ET-1) è un potente vasocostrittore 21-amminoacido endothelial derived peptide e sua espressione potentemente è regolata dalla citochina trasformando growth factor-beta (TGF-beta). La maggior parte dei tipi di cellule contengono un TGF-beta tipo I forma di recettore noto come activin receptor-like chinasi 5 (ALK5). Tuttavia, le cellule endoteliali coexpress un ulteriore tipo recettore denominato ALK1. Queste forme non costituiscono recettori ridondanti con la stessa funzione, ma attivano programmi differenti Smad-mediata espressione portando a specifici fenotipi endoteliali. Lo scopo del nostro studio era di caratterizzare il percorso di TGF-beta-indotta che porta a ET-1 espressione in cellule endoteliali e il contributo di valorizzazione TGF-beta-mediata di ET-1 del regolamento della capacità di migrazione e proliferazione delle cellule endoteliali. Nostri esperimenti indicano che il TGF-beta induce espressione di ET-1 preferenzialmente attraverso il pathway ALK5/Smad3. Specifica ALK5 inibizione bloccato totalmente l'effetto anti-angiogenico di TGF-beta. Antagonismo dei recettori ET regredisce parzialmente l'effetto del TGF-beta, che indica che una parte significativa delle azioni anti-proliferative e anti-migratory di questa citochina è mediata da ET-1 che agiscono in modo autocrino sulle cellule endoteliali.

Induzione Di Mediatori Di Sonic Hedgehog Trasformando Growth Factor-beta: Attivazione Smad3-dipendente Dell'espressione Gli2 E Gli1 in Vitro E in Vivo

Cancer Research. Jul, 2007  |  Pubmed ID: 17638910

Hedgehog (Hh) e transforming growth factor-beta (TGF-beta) i membri della famiglia sono coinvolti in numerosi processi sovrapposti durante lo sviluppo embrionale, ciclo dei capelli e cancro. Nel presente documento, mostriamo che TGF-beta induce l'espressione di Hh segnalazione molecole Gli1 e Gli2 in vari tipi di cellule umane, tra cui normali fibroblasti e cheratinociti, così come diverse linee di cellule di cancro. GLI2 induzione da TGF-beta è rapido, indipendenti dal recettore Hh di segnalazione e richiede un percorso funzionale Smad. Gli1 espressione viene successivamente attivato in modo Gli2-dipendente. Nei topi transgenici con sovraesprimono relativa TGF-beta1 nella pelle, espressione Gli1 e Gli2 è anche elevata e dipende Smad3. In linee cellulari adenocarcinoma pancreatico resistente all'inibizione di Hh, blocco farmacologico del TGF-beta segnalazione conduce alla repressione della proliferazione cellulare, accompagnata da una riduzione nell'espressione Gli2. Identifichiamo così TGF-beta come un potente induttore di transcriptional Gli fattori di trascrizione. Targeting per la cooperazione di Hh e TGF-beta segnalazione può fornire nuove opportunità terapeutiche per il trattamento del cancro.

BMP7, Un Putativo Regolatore Dell'omeostasi Epitelio Di Prostata Umana, è Un Potente Inibitore Delle Metastasi Ossee Di Carcinoma Prostatico in Vivo

The American Journal of Pathology. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17724140

Osso morfogenetico proteina 7 (BMP7) contrasta fisiologica transizione epitelio mesenchimale, un processo che è indicativo della plasticità epiteliale. Perché transizione epitelio mesenchimale è coinvolto nel cancro, abbiamo studiato se BMP7 svolge un ruolo nella crescita del cancro alla prostata e metastasi. BMP7 espressione nel tessuto del cancro alla prostata umano primario laser-microdissected era fortemente giù-regolato rispetto al normale epitelio del lume della prostata. Inoltre, BMP7 espressione in linee cellulari di cancro della prostata era inversamente correlata alla genetica e metastatico potenziale significativamente correlato ai rapporti di E-caderina/vimentina e in vivo. Aggiunta esogena di BMP7 di cellule umane di cancro alla prostata inibito dose-dipendente fattore di crescita trasformante beta-indotta attivazione nucleare Smad3/4 complessi tramite ALK5 e l'espressione di E-caderina indotta. Inoltre, BMP7 indotta da attivazione di nucleare Smad1/4/5 segnalazione transduced via BMP di tipo I recettori è stata stimolata sinergicamente in presenza di trasformazione di fattore di sviluppo beta, un fattore di crescita che è arricchito nel microambiente osseo. Somministrazione giornaliera di BMP7 a topi nudi ha inibito la crescita delle cellule tumorali in osso. Al contrario, nessun effetto inibitorio di una crescita significativa di BMP7 è stata osservata in intraprostatic xenotrapianti. Collettivamente, le nostre osservazioni suggeriscono che BMP7 controlla e conserva il fenotipo epiteliale nella prostata umana e sottolineano il ruolo decisivo del microambiente tumorale nella mediazione della risposta terapeutica del BMP7. Così, BMP7 può ancora contrastare il processo di transizione epitelio mesenchimale nel tumore metastatico, BMP7 di posizionamento come una romanzo molecola terapeutica per il trattamento della malattia metastatica ossea.

Bone Morphogenetic Protein 7 Lo Sviluppo E Il Trattamento Delle Metastasi Ossee Da Cancro Al Seno

Cancer Research. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17875715

Bone morphogenetic protein 7 (BMP7) contrasta la transizione epitelio mesenchimale fisiologica (EMT), un processo che è indicativo della plasticità epiteliale. Perché EMT è coinvolto nel cancro, abbiamo studiato se BMP7 svolge un ruolo nella crescita del cancro al seno e metastasi. In questo studio, mostriamo che diminuita espressione BMP7 nel cancro al seno primario è significativamente associata con la formazione di metastasi ossee clinicamente evidenti in pazienti con > o = 10 anni di follow-up. In linea con queste osservazioni cliniche, BMP7 espressione è inversamente correlata a tumorigenicity e il comportamento invasivo di linee di cellule di cancro al seno umano. Inoltre, BMP7 diminuita espressione di vimentina, un marker mesenchimale associato con invasività e prognosi infausta, in umano MDA-MB-231 (cellule di cancro al seno MDA-231)-B/Luc(+) sotto basale e transforming growth factor-beta (TGF-beta)-stimolato le condizioni. Inoltre, aggiunta esogena di BMP7 alle cellule MDA-231 TGF-beta-stimolato inibito segnalazione Smad-mediata TGF-beta. Inoltre, in un modello di metastasi ossee ben consolidata utilizzando reporter bioluminescenti whole-body imaging stabile sovraespressione di BMP7 nelle cellule MDA-231 inibito de novo formazione e progressione delle metastasi ossee osteolitiche e, quindi, loro capacità metastatica. In linea con queste osservazioni, la somministrazione giornaliera di i.v. di BMP7 (100 mug/kg/d) significativamente inibito ortotopico e intrabone crescita di cellule MDA-231-B/Luc(+) in topi nudi. I nostri dati suggeriscono che è diminuito BMP7 espressione durante la carcinogenesi del seno umano contribuisce all'acquisizione di un fenotipo metastatico osseo. Perché esogena BMP7 ancora in grado di contrastare la crescita del cancro al seno sul sito primario e in osso, BMP7 può rappresentare una romanzo molecola terapeutica per la repressione del locale e crescita metastatica ossea del tumore al seno.

Una Rapida E Sensibile Analisi Biologica Per Misurare L'attività Della Proteina Morfogenetica Ossea

BMC Cell Biology. 2007  |  Pubmed ID: 17880711

Proteine morfogenetiche ossee (BMPs) sono membri della superfamiglia TGF-beta e originalmente sono state identificate come proteine che inducono ectopica formazione dell'osso. BMPs furono successivamente mostrato di essere coinvolto in diversi processi biologici durante lo sviluppo e in tessuti adulti attraverso la regolazione della crescita, differenziazione e apoptosi dei vari tipi di cellule. Una fosfatasi alcalina (ALP)-metodo di dosaggio basata è il più ampiamente usato per valutare attività BMP. Tuttavia, il dosaggio ALP non è rapida e non abbastanza sensibile per misurare l'attività BMP a concentrazioni fisiologiche. In questo articolo, descriviamo un saggio altamente sensibile, rapido e specifico cell-based per la quantificazione dell'attività BMP.

Controllo Extracellulare Del TGFbeta Segnalazione in Malattia E Sviluppo Vascolare

Nature Reviews. Molecular Cell Biology. Nov, 2007  |  Pubmed ID: 17895899

Il meccanismo intracellulare di trasformare growth factor-beta (TGFbeta) segnalazione tramite i recettori della chinasi ed effettori SMAD è fermamente stabiliti, ma recenti studi di sindromi cardiovascolari umane come la sindrome di Marfan e pre-eclampsia hanno rifocalizzare l'attenzione sull'importanza di regolare la disponibilità di attivo TGFbeta extracellulare. Sembra che componenti elastici matrice extracellulare (ECM) hanno un ruolo cruciale nel controllo TGFbeta segnalazione, mentre solubile e membrana associati a forme di corecettori TGFbeta aggiungere ulteriori strati di regolamento. Insieme, queste interazioni extracellulare determinano la biodisponibilità finale del TGFbeta alle cellule vascolari e disregolazione è associato a un numero crescente di patologie vascolari.

TGF-beta E BMP7 Interazioni in Metastasi Osso E Progressione Tumorale

Clinical & Experimental Metastasis. 2007  |  Pubmed ID: 18008174

Lo scheletro è il secondo più frequente sito di metastasi. Tuttavia, solo un numero limitato di tumori solidi, specialmente quelli della mammella e della prostata, è responsabile per la maggior parte delle metastasi ossee. Malattia metastatica ossea è delle principali cause di morbilità, caratterizzata da forti dolori e alta incidenza di scheletrico ed ematopoietica complicanze (fratture, compressione del midollo spinale e del midollo osseo aplasia) che necessitano di ricovero ospedaliero. Nonostante la frequenza di metastasi scheletriche, i meccanismi molecolari per la loro propensione a colonizzare l'osso sono scarsamente comprensibili e opzioni di trattamento sono spesso insoddisfacenti. TGF-beta e il signalling pathway controlla sembra giocare ruoli importanti nella patogenesi di molti carcinomi, entrambi nelle loro fasi iniziali, quando TGF-beta atti ad per arrestare la crescita di molti tipi di cellule e più tardi nella progressione del cancro quando contribuisce, paradossalmente, il fenotipo di invasività tumorale. Qui si discute alcune intuizioni del TGF-beta Superfamiglia, tra cui BMP e loro antagonisti-nel romanzo la formazione di metastasi ossee. Crescente evidenza suggerisce che la Superfamiglia TGF-beta è coinvolto nell'osso homing, dormienza tumorale e lo sviluppo di micrometastases in metastasi ossee palese. Il ruolo consolidato di TGF-beta/BMPs e loro antagonisti in epiteliali plasticità durante lo sviluppo embrionale ricorda da vicino i processi neoplastici sul sito primario così come metastasi (osso). Per esempio, le interazioni tumore-stroma che si verificano nel tessuto di origine di cancro, tra cui la transizione epitelio-mesenchima (EMT), orso somiglianze con il ruolo di bone matrix-derivato TGF-beta nella formazione di metastasi scheletriche.

Segnalazione Compensativo Indotta Nel Sistema Vascolare Sacco Vitellino Dalla Cancellazione Dei Recettori TGFbeta Nei Topi

Journal of Cell Science. Dec, 2007  |  Pubmed ID: 18029401

Sviluppo vascolare dipende dalla trasformazione di fattore di sviluppo beta (TGFbeta), ma se la segnalazione di questa proteina è necessaria per lo sviluppo delle cellule endoteliali (ECs), muscolo liscio vascolare cellule (VSMCs) o entrambi non è chiaro. Per risolvere questo problema, abbiamo eliminato selettivamente il tipo I (ALK5, TGFBR1) e recettori di tipo II (TbetaRII, TGFBR2) nei topi. Assenza di entrambi receptor a ECs ha provocato difetti vascolari in vitellino, come si è visto in topi privi di recettori in tutte le cellule, causando la letalità embrionale embrionale Day (E) 10.5. Eliminazione dei TbetaRII in particolare VSMCs ha portato anche in difetti vascolari in vitellino; Tuttavia, queste sono state osservate nelle fasi successive di sviluppo, permettendo l'embrione di sopravvivere a E12.5. Perché TGFbeta può anche segnalare in ECs via ALK1 (ACVRL1), abbiamo sostituito ALK5 da un mutante difettoso in SMAD2 e SMAD3 attivazione (SMAD2/3) che ha mantenuto la capacità di transactivate ALK1. Questo nuovo causato difetti nel sistema vascolare vitellino con letalità embrionale presso E10.5, dimostrando che TGFbeta/ALK1 segnalazione in ECs non può compensare la mancanza di TGFbeta/ALK5-induced SMAD2/3 segnalazione in vivo. Inaspettatamente, la fosforilazione SMAD2 e muscolo liscio alfa actina (SMAalpha, ACTA2) espressione si è verificato il tuorlo sacs ALK5(-/-) embrioni e cellule staminali embrionali ALK5(-/-) subendo vasculogenesi, e questi processi potrebbero essere bloccati da un ALK4 (ACVR1B) / ALK5 inibitore. Insieme, i dati mostrano che ALK5 è necessaria in ECs e VSMCs per vasculogenesi vitellino; in assenza di ALK5, ALK4 media SMAD2 fosforilazione e conseguenza l'espressione SMAalpha.

Ma Non BMP è Coinvolto Nell'azione Inibitoria Di Sclerostin Sulla Formazione Ossea BMP-stimolato Di Segnalazione Wnt

Journal of Bone and Mineral Research : the Official Journal of the American Society for Bone and Mineral Research. Jan, 2007  |  Pubmed ID: 17032150

Sclerostin è un regolatore negativo Osteocita-derivato della formazione ossea. Inibisce la formazione di osso BMP-stimolati in vitro e in vivo, ma non ha alcun effetto diretto su segnalazione BMP. Invece, sclerostin inibisce Wnt segnalazione che è necessaria per la differenziazione osteoblastica BMP-stimolata.

Due Recettori Di Tipo Romanzo II Mediano Segnalazione BMP E Sono Tenuti a Stabilire Asimmetria Sinistra-destra Nello Zebrafish

Developmental Biology. Mar, 2008  |  Pubmed ID: 18222420

Ligandi della superfamiglia transforming growth factor beta (TGFbeta), come Nodal e bone morphogenetic protein (BMP), sono fondamentale per stabilire l'asimmetria di sinistra-destra (LR) nei vertebrati. Tuttavia, i recettori di questo processo di mediazione sono sconosciuti. Qui abbiamo identificato due recettori II tipo nuovi per BMPs in zebrafish chiamati bmpr2a e bmpr2b che inducono una risposta classica Smad1/5/8 a associazione BMP. Oligonucleotides-mediata atterramento di bmpr2a e bmpr2b hanno dimostrato che sono necessari per l'istituzione dell'asimmetria di LR viscerale e cardiache concomitanti. Espressione di marker precoce di lateralità in morphants indicato che bmpr2a e bmpr2b atto a Monte di pitx2 e il mancino nodale correlati (spaw), che sono espressi in modo asimmetrico nel mesoderma della placca laterale (LPM) e successivamente regolare lefty2 e bmp4 nel campo del cuore sinistro. Abbiamo dimostrato che bmpr2a è necessaria per lefty1 espressione nella linea mediana a segmentazione precoce mentre bmpr2a/bmpr2b heteromers mediare espressione di sinistra-parteggiato spaw nel LPM. Proponiamo un meccanismo per cui questa interpretazione differenziale di BMP segnalazione attraverso bmpr2a e bmpr2b è essenziale per la creazione di asimmetria LR nell'embrione di zebrafish.

Endoglin in Malattie Vascolari E L'angiogenesi

Angiogenesis. 2008  |  Pubmed ID: 18283546

Endoglin è un recettore transmembrana ausiliario per trasformare growth factor-beta (TGF-beta) che è prevalentemente espressa sulle cellule endoteliali proliferanti. Endoglin die topi carenti durante midgestation a causa di difetti cardiovascolari. Mutazioni in endoglin e activin receptor-like chinasi 1 (ALK1), un specifico endotelio TGF-beta del recettore di tipo I, sono stati collegati a teleangiectasia emorragica ereditaria (HHT), una displasia vascolare dominante autosomal caratterizzata da teleangectasie e malformazioni artero-venose. Endoglin eterozigote topi sviluppano anomalie vascolari simil-HHT, hanno alterato il tumore e angiogenesi il e dimostrano un deterioramento endoteliale di ossido nitrico sintasi-dipendente la regolazione del tono vascolare. In pre-eclampsia, derivate da placenta endoglin ha dimostrato di essere fortemente sovraregolati e alti livelli di endoglin solubili vengono rilasciati nella circolazione. Endoglin solubile è stato trovato a collaborare con una forma solubile del recettore del fattore di crescita endoteliale vascolare 1 nella patogenesi della preeclampsia inducendo disfunzione delle cellule endoteliali. Endoglin è altamente espresso nell'endotelio tumore-associati, e gli anticorpi endoglin sono stati utilizzati con successo a bersaglio le cellule endoteliali attivate e suscitare effetti anti-angiogenic in modelli murini di tumore. Queste eccitanti progressi fornire opportunità per lo sviluppo di nuove terapie per le malattie con anomalie vascolari.

Derivato Da Osteocita Sclerostin Inibisce La Formazione Di Osso: Suo Ruolo Nella Bone Morphogenetic Protein E Segnalazione Wnt

The Journal of Bone and Joint Surgery. American Volume. Feb, 2008  |  Pubmed ID: 18292354

Sclerosteosi e Van Buchem malattia sono malattie rare, alta della massa ossea che sono state legate a deficit del gene SOST, codifica sclerostin. Sclerostin appartiene alla famiglia di glicoproteine, la cui famiglia più membri hanno dimostrati di antagonizzare bone morphogenetic protein (BMP) e/o attività di Wnt DAN. Sclerostin è specificamente espressa da osteociti e inibisce la differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP e formazione di osso ectopico. Sclerostin si lega solo debolmente a BMPs e non inibire risposte dirette indotta da BMP. Invece, sclerostin antagonizza canonica Wnt segnalazione legandosi a Wnt coreceptors, lipoproteine a bassa densità receptor-related protein 5 e 6. Diverse lipoproteine receptor-related protein-5 mutanti che causano il tratto alto della massa ossea sono difettosi in associazione sclerostin. Così, massa ossea elevato in Sclerosteosi e Van Buchem malattia possa derivare da segnalazione Wnt aumentata a causa della assenza di o insensibilità a sclerostin.

L E S-endoglin Modulare Differenzialmente TGFbeta1 Segnalazione Mediata Da ALK1 E ALK5 in L6E9 Myoblasts

Journal of Cell Science. Mar, 2008  |  Pubmed ID: 18303046

TGFbeta regola i processi cellulari legandosi al tipo I e tipo II TGFbeta recettori (TbetaRI e TbetaRII, rispettivamente). Oltre a questi recettori di segnalazione, endoglin è un accessorio dei recettori TGFbeta che regola TGFbeta signaling. Anche se ci sono due differenti splicing isoforme di endoglin, L-endoglin (L, lunga) e (corta S) S-endoglin, poco si sa circa gli effetti dell'isoforma S-endoglin su TGFbeta signaling. Qui, abbiamo analizzato i percorsi di segnalazione TGFbeta1 e gli effetti di L - e S-endoglin nelle cellule L6E9 endoglin-carenti. Abbiamo trovato che TGFbeta attiva due distinti percorsi di segnalazione TbetaRI-Smad: ALK1-Smad1-Id1 e PAI1-ALK5-Smad2, in queste cellule. È interessante notare che, L-endoglin migliorato il pathway ALK1-Id1, mentre S-endoglin promosso l'itinerario ALK5-PAI1. Questi effetti su segnalazione sono supportati da effetti biologici sul collagene indotta TGFbeta1 I espressione e inibizione della proliferazione cellulare. Così, mentre L-endoglin diminuito TGFbeta1-indotta di collagene I ed espressione CTGF e aumentata proliferazione indotta da TGFbeta1, S-endoglin fortemente aumentato collagene TGFbeta1-indotta e I espressione CTGF e ridotta proliferazione cellulare indotta da TGFbeta1.

ALK1 Oppone ALK5/Smad3 Di Segnalazione E Di Espressione Dei Componenti Della Matrice Extracellulare Nei Condrociti Umani

Journal of Bone and Mineral Research : the Official Journal of the American Society for Bone and Mineral Research. Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18333754

TGF-beta è un regolatore multifunzionale di condrociti proliferazione, differenziazione e la produzione di matrice extracellulare. Disregolazione dell'azione del TGF-beta è stata implicata in malattie della cartilagine come l'artrosi. Segnalazione di TGF-beta è transduced attraverso una coppia di transmembrana serina/treonina chinasi, conosciuto come il tipo I (ALK5) e tipo di recettori II. Tuttavia, recenti studi sulle cellule endoteliali hanno identificato ALK1 come un secondo tipo I recettore TGF-beta e hanno dimostrato che ALK1 e ALK5 sono opposte funzioni in queste cellule. Qui abbiamo esaminato ALK1 espressione e relativo regolamento di segnalazione di TGF-beta e risposte nei condrociti umani.

VE-caderina è Un Regolatore Critico Endoteliale Di Segnalazione Di TGF-beta

The EMBO Journal. Apr, 2008  |  Pubmed ID: 18337748

VE-caderina è una proteina transmembrana endoteliali specifici concentrata nelle giunzioni cellula-cellula adherens. Oltre a promuovere l'adesione delle cellule e controllo della permeabilità vascolare, VE-caderina trasferimenti intracellulari segnali che contribuiscono alla stabilizzazione vascolare. Tuttavia, il meccanismo molecolare che regola la VE-caderina omeostasi vascolare è ancora poco conosciuta. Qui, segnaliamo che espressione VE-caderina e clustering giunzionale sono necessari per la ottimale transforming growth factor-beta (TGF-beta) segnalazione in cellule endoteliali (ECs). TGF-beta antiproliferativi e risposte antimigratory sono aumentate in presenza di VE-caderina. ECs manca VE-caderina sono meno sensibili alla fosforilazione Smad TGF-beta/ALK1 e TGF-beta/ALK5-indotta e la trascrizione del gene bersaglio. VE-caderina coimmunoprecipitates con tutti i componenti del complesso recettore TGF-beta, TbetaRII, ALK1, ALK5 ed endoglin. Cluster VE-caderina reclute TbetaRII e può promuovere la segnalazione di TGF-beta potenziando la TbetaRII/TbetaRI assieme in un complesso recettoriale attivo. Presi insieme, i nostri dati indicano che VE-caderina è un regolatore positivo e CE-specifiche di segnalazione di TGF-beta. Questo suggerisce che la riduzione o inattivazione di VE-caderina possa contribuire alla progressione di malattie in cui è compromessa la segnalazione di TGF-beta.

Il Pathway Della Proteina Morfogenetica Ossea è Inattivato Nella Maggior Parte Dei Tumori Del Colon-retto Sporadici

Gastroenterology. May, 2008  |  Pubmed ID: 18471510

Il ritrovamento di bone morphogenetic protein (BMP) recettore 1a mutazioni nella poliposi giovanile suggerisce che BMPs sono importanti per il cancro del colon-retto (CRC). Abbiamo studiato il percorso BMP in CRC sporadico.

Smad1 Pathway è Attivato in Fibroblasti Di Sclerosi Sistemica E Preso Di Mira Dal Imatinib Mesylate

Arthritis and Rheumatism. Aug, 2008  |  Pubmed ID: 18668566

Attivazione di segnalazione Smad1 recentemente è stato implicato nello sviluppo della fibrosi. L'obiettivo del presente studio è stato per acquisire ulteriori conoscenze in attivazione del percorso Smad1 in fibrosi nella sclerosi sistemica (SSc) e determinare se questo percorso è mirato dalla antifibrotic farmaco imatinib mesilato.

Trasformando Growth Factor Beta E Wound Healing in Colesteatoma Umana

The Laryngoscope. Jan, 2008  |  Pubmed ID: 17989584

Colesteatoma è una lesione nonmalignant, distruttiva dell'osso temporale che gradualmente si espande e provoca complicazioni dall'erosione delle strutture ossee adiacenti. Le conseguenze possono essere così gravi come paralisi facciale e complicanze intracraniche. Fino ad ora, la chirurgia è stato l'unico trattamento di scelta. La patogenesi del Colesteatoma rimane controversa. Concetti attuali postulano che Colesteatoma può essere un processo di guarigione della ferita, anche se prova formale manca ancora. Diversi rapporti forniscono prove del coinvolgimento della trasformazione di fattore di crescita (TGF) beta in normale e anormale la guarigione delle ferite.

Trasformando Il Fattore Di Crescita Beta-induced Endothelial Mesenchimali Transizione: Un Interruttore Di Fibrosi Cardiaca?

Trends in Cardiovascular Medicine. Nov, 2008  |  Pubmed ID: 19345316

Fibrosi cardiaca è un processo dannoso che si traduce in un progressivo irrigidimento delle pareti ventricolari, la perdita di contrattilità e anomalie nella conduttanza cardiaca. Qualunque sia la causa, la fibrosi cardiaca è associata con eccessivo accumulo di proteine della matrice extracellulare da fibroblastica cellule perivascolari e compartimenti interstiziali del miocardio. Rapporti recenti suggeriscono che una frazione significativa di questi fibroblasti interstiziale sono derivato dall'endotelio mediante un processo di beta-dipendente dal fattore di crescita trasformante chiamato transizione endoteliali mesenchimali (endo-MT). La generazione di cellule mesenchimali profibrotic da cellule endoteliali da questo processo sembra riassumere la transdifferenziazione delle cellule endoteliali che porta alla formazione delle valvole cardiache nello sviluppo embrionale. Nella fibrosi cardiaca, endo-MT possono non solo contribuire alla generazione di cellule profibrotic, ma anche una riduzione della densità capillare, anche definito rarefazione. Qui noi esamineremo il ruolo del transforming growth factor beta in endo-MT nello sviluppo embrionale e il suo ruolo potenziale nella fibrosi cardiaca. Endo-MT ben può agire come un interruttore profibrotic e rappresentano una destinazione romanzo nella prevenzione della fibrosi del tessuto.

Formazione Povera Nave in Embrioni Di Topi Knock-in Esprimendo ALK5 Con Mutazione Del Ciclo L45 Difettoso in Attivazione Smad

Laboratory Investigation; a Journal of Technical Methods and Pathology. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19398960

Transforming growth factor (TGF)-beta regola lo sviluppo vascolare attraverso due recettori di tipo I: activin receptor-like chinasi (ALK) 1 e ALK5, ognuno dei quali si attiva un diverso percorso di Smad a valle. La cellula endoteliale (CE)-ALK1 specifico aumenta CE proliferazione e migrazione, considerando che la ALK5 ubiquitously espresso inibisce entrambi questi processi. Come ALK1 richiede l'attività della chinasi di ALK5 per l'attivazione ottimale, la mancanza di ALK5 in ECs risultati difettosi della fosforilazione di entrambi percorsi Smad su stimolazione di TGF-beta. Per capire perché TGF-beta segnalazione attraverso ALK1 e ALK5 ha opposti effetti su ECs e se questo prende posto in vivo, abbiamo confrontato attentamente il fenotipo di ALK5 knock-in (ALK5(KI/KI)) topi, in cui il residuo di acido aspartico 266 nel ciclo L45 del ALK5 è stato sostituito da un residuo di alanina, con i fenotipi di ALK5 knock-out (ALK5(-/-)) e topi wild-type. I topi ALK5(KI/KI) ha mostrato difetti angiogenico con letalità embrionale presso E10.5-11.5. Anche se il fenotipo dei topi ALK5(KI/KI) era abbastanza simile a quella dei topi ALK5(-/-), la struttura gerarchica dei vasi sanguigni, formata in embrioni ALK5(KI/KI) è stata sviluppata più di quello i mutanti di ALK5(-/-). Così, la mutazione di loop L45 in ALK5 salvato parzialmente i primi difetti vascolari in embrioni ALK5(-/-). Questo studio supporta la nostra osservazione precedente che maturazione vascolare in vivo richiede sia TGF-beta/ALK1/BMP-Smad e TGF-beta/ALK5/activin-Smad percorsi per il normale sviluppo vascolare.

Trasformando L'angiogenesi Tumorale E Di Segnalazione Growth Factor-beta

Frontiers in Bioscience : a Journal and Virtual Library. 2009  |  Pubmed ID: 19482591

Transforming growth factor-beta (TGF-beta) i membri della famiglia sono secrete multifunzionale citochine che svolgono un ruolo cruciale nello sviluppo e malattia. Il membro prototipico di questa famiglia, TGF-beta, svolge un ruolo doppio nella cancerogenesi, che agisce come un soppressore del tumore nelle fasi iniziali e come promotore tumorale nelle ultime fasi della progressione del tumore. Numerosi studi supportano la nozione che l'angiogenesi patologica è uno dei marchi di cancro. L'angiogenesi tumorale è regolata da una rete di fattori di crescita, inclusi i membri della famiglia TGF-beta. TGF-beta agisce in maniera dipendente dal contesto e può stimolare o inibire l'angiogenesi tumorale. In questa recensione, discutiamo la nostra attuale comprensione come membri della famiglia TGF-beta influenzano endoteliale e funzione delle cellule muscolari lisce e segnalazione di TGF-beta come perturbato può contribuire all'angiogenesi tumorale e progressione del tumore.

Dominante Negativo ALK2 Allele Si Associa a Difetti Cardiaci Congeniti

Circulation. Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19506109

Gravi cardiopatie congenite si verificano come conseguenza di sviluppo improprio del setto atrioventricolare (AVS) durante l'embriogenesi. Nonostante la vasta conoscenza del controllo genetico dello sviluppo AVS, sono state identificate alcune lesioni genetiche che sono responsabili per cardiopatie congenite associate all'AVS.

Endoglin Aploinsufficienza Riduce Indotta Da Radiazioni Formazione Fibrosi E Telangectasie Nei Reni Mouse

Radiotherapy and Oncology : Journal of the European Society for Therapeutic Radiology and Oncology. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19576647

Endoglin è un ricettore di beta (TGF-beta) fattore di crescita trasformante espressa prevalentemente in cellule endoteliali. Si regola la sopravvivenza e la proliferazione cellulare e sovraregolati presso siti di riparazione della nave. Mutazioni in endoglin sono state collegate per la teleangiectasia emorragica ereditaria (HHT) di malattia vascolare. I pazienti HHT visualizzare capillari dilatati (telangiectasia) che sono inclini a rottura. I malati di cancro che ricevono radioterapia sviluppano simile danno vascolare nei tessuti normali che si trova nel campo di irradiazione. Se si trova nella mucosa, telangiectasia indotta da irradiazione può portare a gravi emorragie. Pertanto, questo studio mirava ad indagare il ruolo della endoglin nella formazione indotta da radiazioni telangiectasia.

SMAD3 è Un Mediatore Chiave Nonredundant Della Trasformazione Di Fattore Di Crescita Beta Segnalazione Delle Cellule Epiteliali Mammarie Nme Del Mouse

Molecular Cancer Research : MCR. Aug, 2009  |  Pubmed ID: 19671686

SMAD2 e Smad3 sono mediatori intracellulari di trasformazione di fattore di sviluppo beta (TGFbeta) segnalando che condividono varie proprietà biochimiche, ma i dati emergenti dall'analisi funzionale in diversi tipi di cellule indicano che queste due proteine Smad possono trasmettere risposte cellulari distinte. Pertanto, abbiamo studiato i singoli ruoli di Smad2 e Smad3 nel mediare gli effetti citostatici e Miselli TGFbeta, nonché la loro funzione nella transizione epitelio mesenchimale. Per questo scopo, abbiamo transitoriamente impoverito un cellule epiteliali mammarie (Nme) di topo di Smad2 e/o Smad3 principalmente da una strategia affidarsi RNaseH-indotta di degradazione del mRNA. È stato analizzato l'effetto di tale deplezione sugli eventi di segno distintivo di transizione epitelio mesenchimale TGFbeta-driven, tra cui la dissoluzione delle giunzioni epiteliali, formazione di fibre di stress e di adesioni focali, attivazione delle metalloproteinasi e regolazione trascrizionale dei geni bersaglio riconosciuto. Inoltre, abbiamo studiato l'effetto di Smad2 e Smad3 atterramento su transcriptome TGFbeta-regolato da analisi di microarray. I nostri risultati identificano Smad3 come un fattore chiave per innescare eventi TGFbeta regolamentati e attribuiscono questa proteina soppressore del tumore, nonché attività oncogenica.

VEGF E Inibitori Del TGFbeta Tipo-io Della Chinasi Del Recettore Sinergicamente Promuovere La Formazione Di Vasi Sanguigni Inducendo Espressione Alpha5-integrina

Journal of Cell Science. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19706683

Fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF) e fattore di crescita trasformante-beta (TGFbeta) sono potenti regolatori dell'angiogenesi. Come VEGF e TGFbeta signaling diafonia percorsi non è ben compreso. Pertanto, abbiamo analizzato gli effetti del VEGF e inibitori di tipo-I recettori TGFbeta (SB-431542 e LY-2157299) sulla funzione delle cellule endoteliali (CE) e l'angiogenesi. Mostriamo che SB-431542 migliora drasticamente la formazione indotta da VEGF di fogli CE da metatarsi fetali del mouse. Dosi sub-ottimale di VEGF e SB-431542 indotta in sinergia CE migrazione e germinazione di sferoidi CE, considerando che la sovraespressione di una forma costitutivamente attiva di TGFbeta tipo-I recettori ha avuto effetti opposti. Mediante PCR quantitativa, abbiamo dimostrato che VEGF e SB-431542 sinergicamente sovraregolati l'espressione del mRNA di geni coinvolti nell'angiogenesi, tra cui le integrine alpha5 e beta3. Downregulation specifiche di espressione dell'integrina alpha5 o blocco funzionale di integrina alpha5 con un anticorpo neutralizzante specifico inibito l'effetto cooperativo di VEGF e SB-431542 su CE che spuntano. In vivo, LY-2157299 indotta angiogenesi e rafforzata VEGF e basic-fibroblasto-crescita-fattore-indotta angiogenesi in una spina di Matrigel dosaggio, considerando che l'aggiunta di che un anticorpo alpha5-integrina-neutralizzante per il Matrigel selettivamente inibita questa risposta avanzata. Induzione dell'espressione dell'integrina alpha5 è quindi un fattore determinante di cui inibitori di tipo TGFbeta-mi della chinasi del recettore e VEGF sinergicamente promuovere l'angiogenesi.

Autocrino Osso Morphogenetic Protein-9 Segnali Attraverso Activin Receptor-like Chinasi-2/Smad1/Smad4 Per Promuovere La Proliferazione Delle Cellule Di Cancro Ovarico

Cancer Research. Dec, 2009  |  Pubmed ID: 19996292

Bone morphogenetic proteins (BMP) atto come regolatori centrali della fisiologia ovarica e possono essere coinvolti nello sviluppo del cancro ovarico. Nel tentativo di comprendere questi processi, abbiamo caratterizzato transforming growth factor receptor beta/BMP ed espressione Smad immortalata ovarico delle cellule epiteliali superficiali e un pannello di linee di cellule di carcinoma ovarico. Questi studi ci ha spinti a valutare il potenziale ruolo della BMP9 di segnalazione nel carcinoma ovarico. Utilizzando piccolo RNA interferente, trappola ligando, inibitore e approcci di stimolazione ligando, mostriamo che BMP9 agisce come fattore di proliferativo per le cellule epiteliali superficiali ovariche immortalate e linee di cellule di cancro ovarico, segnalazione prevalentemente attraverso un pathway ALK2/Smad1/Smad4, piuttosto che attraverso ALK1, il recettore BMP9 principale in cellule endoteliali. Soprattutto, abbiamo trovato che alcune linee di cellule di carcinoma ovarico hanno guadagnato autocrino BMP9 segnalazione che è necessaria per la proliferazione. Inoltre, analisi immunoistochimica di un cancro ovarico tissue microarray rivelano che circa il 25% dei tumori ovarici epiteliali esprimono BMP9, considerando normali dell'ovaio superfici epiteliali campioni umani non lo fanno. I nostri dati indicano che BMP9 segnalazione attraverso ALK2 può essere un romanzo obiettivo terapeutico nel carcinoma ovarico.

Complessi Co-repressor Sci Mantengono Lo Stato Represso Basale Del Gene Dell'obiettivo Di TGF-beta, SMAD7, Via HDAC3 E PRMT5

Genes to Cells : Devoted to Molecular & Cellular Mechanisms. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 19032343

I prodotti codificati da sci e gene correlato, sno, (sci e Sno) agiscono come co-repressors transcriptional e interagiscano con altri co-repressors come N-CoR/SMRT e mSin3A. Sci e Sno mediare transcriptional repressione da vari repressori, Mad, Rb e Gli3. Sci/Sno sopprimere anche trascrizione indotta da molteplici attivatori, come SMAD e c-Myb. In particolare, l'inibizione della trascrizione di TGF-beta-indotta dal legame con SMAD è correlata con l'attività oncogenica di sci e Sno. Tuttavia, il meccanismo molecolare con cui sci e Sno mediare transcriptional repressione rimane sconosciuto. In questo studio, riportiamo la purificazione e caratterizzazione di complessi di sci. I complessi di sci purificato da HeLa celle contenute dell'istone deacetylase 3 (HDAC3) e proteina arginina methyltransferase 5 (PRMT5), oltre che più proteine Smad (Smad3, Smad2 e Smad4). Analisi di immunoprecipitazione della cromatina indicato che questi componenti dei complessi sci erano localizzati sul promotore del gene SMAD7, che è il gene bersaglio di TGF-beta, in cellule HepG2 TGF-beta-non trattata. Atterramento di questi componenti mediante siRNA ha portato alla up-regolazione di SMAD7 mRNA. Questi risultati indicano che complessi sci servono a mantenere un promotore TGF-beta-reattivo a livello basale represso attraverso l'attività di deacetylase dell'istone e istone metiltransferasi arginina.

TGF-beta Segnalazione in Disfunzione E Biologia Vascolare

Cell Research. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 19114994

Transforming growth factor (TGF)-beta familiari sono citochine multifunzionale che suscitano i loro effetti sulle cellule, comprese le cellule endoteliali e murale, tramite specifici tipo I e tipo II serina/treonina chinasi recettori e fattori di trascrizione Smad intracellulare. Modelli di topo Knock-out per la famiglia di TGF-beta segnalazione componenti pathway hanno rivelato la loro fondamentale importanza nella corretta vitellino angiogenesi. Studi genetici in esseri umani hanno collegato le mutazioni in questi componenti specifiche sindromi cardiovascolari come teleangiectasia emorragica ereditaria, ipertensione polmonare primaria e la sindrome di Marfan di segnalazione. In questa recensione, ci presentano i recenti progressi nella nostra comprensione del ruolo del recettore TGF-beta segnalazione nella malattia e nella biologia vascolare e discutere come questo può essere applicato per la terapia.

Radiazioni Ionizzanti Sposta L'equilibrio Di PAI-1/ID-1 E Attiva La Tacca Di Segnalazione in Cellule Endoteliali

International Journal of Radiation Oncology, Biology, Physics. Feb, 2009  |  Pubmed ID: 19147015

Trasformando growth factor-beta (TGF-beta) e Notch signaling pathways sono importanti regolatori dell'omeostasi vascolare e il rimodellamento del vaso; mutazioni in questi percorsi possono portare a disturbi vascolari. Fenotipi vascolari simili si sviluppano nei tessuti normali dei malati di cancro come un effetto a lungo termine della radioterapia. Irradiazione colpisce più duramente i capillari, che diventano incapaci di ritenere e dilatate e alla fine potrebbero rompersi. Per studiare il meccanismo di tale danno capillare, abbiamo studiato l'effetto del TGF-beta e Notch signaling in cellule endoteliali microvascolari.

Identificazione Di Un Residuo Chiave Mediando Bone Morphogenetic Protein (BMP) -6 Resistenza All'inibizione Di Zucca Permette BMPs Ingegnerizzati Con Attività Agonista Superiore

The Journal of Biological Chemistry. Apr, 2010  |  Pubmed ID: 20048150

Proteine morfogenetiche ossee (BMPs) sono usate clinicamente per indurre la nuova formazione di osso in fusioni spinali e fratture di ossa lunghe non-Unione. Tuttavia, grandi quantità di BMPs sono necessari per ottenere questi effetti. BMPs sono state trovate per aumentare l'espressione degli antagonisti, che potenzialmente limitano la loro efficacia terapeutica. Tuttavia, la suscettibilità relativa di osteoinduttività BMPs a diversi antagonisti non è ben caratterizzata. Qui vi mostriamo che BMP-6 è più resistente alla inibizione noggin e più potente nel promuovere la differenziazione degli osteoblasti in vitro e indurre la rigenerazione ossea in vivo quando confrontato con relativo paralog BMP-7 strettamente correlati. Zucca è stato trovato a giocare un ruolo critico come un regolatore di feedback negativo di BMP-7 ma non indotta di BMP-6 risposte biologiche. Utilizzo di BMP-6/7 chimere, abbiamo identificato lisina 60 come un residuo chiave che conferiscono resistenza zucca all'interno della proteina BMP-6. È stata trovata una notevole correlazione tra la presenza di una lisina in questa posizione e zucca resistenza tra un panel di osteoinduttività BMPs. introduzione di un residuo di lisina a posizioni corrispondenti di BMP-2 e BMP-7 ammessi per ingegneria molecolare di BMP ricombinanti con maggiore resistenza all'antagonismo di zucca.

Genetica E Farmacologica Di Targeting Di Activin Receptor-like Chinasi 1 Altera L'angiogenesi E La Crescita Tumorale

The Journal of Experimental Medicine. Jan, 2010  |  Pubmed ID: 20065063

Transforming growth factor beta (TGF-beta) familiari sono stati geneticamente legati a vascolare formazione durante l'embriogenesi. Tuttavia, contraddittorio studi sul ruolo del TGF-beta e altri membri della famiglia con le funzioni vascolari segnalate, come bone morphogenetic protein (BMP) 9, in fisiologico e patologico angiogenesi rendono la necessità di Studi meccanicistici apparente. Dimostriamo, con mezzi farmacologici e genetici, che il TGF-beta e BMP9 del recettore activin receptor-like chinasi (ALK) 1 rappresenta un nuovo obiettivo terapeutico per l'angiogenesi tumorale. Diminuzione del dosaggio del gene ALK1 o trattamento sistemico con la proteina di fusione ALK1-Fc RAP-041 ritardata crescita tumorale e la progressione di inibizione dell'angiogenesi in un modello murino transgenico di tumorigenesi multistep. Inoltre, RAP-041 alterato significativamente la risposta angiogenic in vitro e in vivo verso il fattore di crescita endoteliale vascolare A e fattore di crescita dei fibroblasti di base. Nel cercare il meccanismo per gli effetti osservati, abbiamo scoperto un'inaspettato segnalazione sinergia tra TGF-beta e BMP9, attraverso il quale l'azione combinata di due fattori aumentata la risposta delle cellule endoteliali a stimoli angiogenico. Noi delineare un ruolo decisivo per la segnalazione di membri della famiglia TGF-beta nell'angiogenesi tumorale e offrire comprensione meccanicistica per il prossimo sviluppo clinico di farmaci blocco ALK1 in oncologia.

TMEPAI, Una Proteina Transmembrana Di TGF-beta-inducible, Sequestra Le Proteine Smad Dalla Partecipazione Attiva Nella Segnalazione Di TGF-beta

Molecular Cell. Jan, 2010  |  Pubmed ID: 20129061

Fattore di crescita trasformante-beta (TGF-beta) è una citochina multifunzionale di fondamentale importanza per il controllo dell'omeostasi del tessuto e l'embriogenesi. Come segnali di TGF-beta sono attenuati e terminati non è ben compreso. Qui, ci mostra che TMEPAI, un gene bersaglio diretto di segnalazione di TGF-beta, antagonizza TGF-beta segnalazione interferendo con tipo TGF-beta I recettori (TbetaRI)-indotta R-Smad fosforilazione. TMEPAI può interagire direttamente con R-SMAD via un motivo di interazione Smad. TMEPAI compete con ancoraggio Smad per l'attivazione del recettore per R-Smad vincolante, quindi sequestranti R-SMAD dall'attivazione della chinasi di TbetaRI. In cellule di mammifero, espressione ectopica di TMEPAI inibito regolamento TGF-beta-dipendente dell'attivatore del plasminogeno inibitore-1, DonBeo, inibitori della chinasi ciclina-dipendente ed espressione di c-myc, considerando specifico atterramento dell'espressione TMEPAI prolungata durata del TGF-beta-induced Smad2 e Smad3 fosforilazione e reattività cellulare simultaneamente potenziato a TGF-beta. Coerentemente, TMEPAI inibisce la formazione del mesoderma activin-mediata in embrioni di Xenopus. Pertanto, TMEPAI partecipa a un ciclo di feedback negativo per controllare la durata e l'intensità di segnalazione di TGF-beta/Smad.

Annexina A1 Regola La Segnalazione Di TGF-beta E Promuove La Formazione Di Metastasi Delle Cellule Di Cancro Al Seno Basal-like

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Apr, 2010  |  Pubmed ID: 20308542

Annexina A1 (AnxA1) è un regolatore del candidato dell'epitelio - mesenchimale (EMT)-come interruttore fenotipica, un evento cruciale nella progressione del cancro al seno. Mostriamo qui che AnxA1 espressione è associata a un sottotipo di tumore seno basale-come altamente invasiva entrambi in un pannello di linee di cellule di cancro al seno umano come in pazienti affetti da cancro al seno e quello AnxA1 è funzionalmente correlata alla progressione del cancro al seno. AnxA1 atterramento in cellule di cancro mammario invasivo basale-come ridotto il numero di metastasi polmonare spontanea, mentre ulteriore espressione di AnxA1 maggiore diffusione metastatica. AnxA1 promuove la formazione di metastasi potenziando la riorganizzazione di segnalazione e actina TGFbeta/Smad, che facilita un EMT-come switch, consentendo in tal modo efficiente cella migrazione e invasione del carcinoma mammario metastatico le cellule tumorali.

Matrix Metalloproteinase-14 (MT1-MMP)-mediata Endoglin Spargimento Inibisce L'angiogenesi Tumorale

Cancer Research. May, 2010  |  Pubmed ID: 20424116

Endoglin è un coreceptor transforming growth factor-beta con un ruolo cruciale nell'angiogenesi. Una forma solubile di endoglin è presente in circolazione, ma il ruolo di endoglin solubile (sEndoglin) è poco compreso. Inoltre, non è noto il meccanismo di spargimento di endoglin. Pertanto, abbiamo esaminato il ruolo di sEndoglin nell'angiogenesi tumorale e il meccanismo mediante il quale il dominio extracellulare di endoglin viene rilasciato dalla membrana.In campioni di tumore del colon-retto, abbiamo osservato l'espressione della proteina alta endoglin endoteliale, accompagnato con un po' più bassi livelli di sEndoglin nella circolazione, rispetto ai controlli sani. Analisi in vitro utilizzando dosaggi di germogliatura endoteliale ha rivelato che sEndoglin ridotto spontanea e vascolare endoteliale indotta dal fattore di crescita endoteliale germinazione. Cellule endoteliali vascolari ombelicale umano sono state trovate a secernere alti livelli di sEndoglin. Endoglin spargimento è stato inibito da matrix metalloproteinase (MMP) inibitori e MMP-14 short hairpin RNA, indicando MMP-14 come il endoglin principali proteasi di spargimento. Coexpression di endoglin e membrana-limiti MMP-14 ha portato a un forte aumento dei livelli di sEndoglin. Endoglin spargimento necessaria un'interazione diretta tra endoglin e membrana localizzato MMP-14. Usando mutanti sito di clivaggio, abbiamo determinato che MMP-14 spaccati endoglin presso un sito nelle immediate vicinanze del dominio transmembrana. Presi insieme, questo studio dimostra che MMP-14 media endoglin spargimento, che può regolare il potenziale di angiogenic delle cellule endoteliali nel microambiente del tumore (colon-retto).

Rilevamento Di Prossimità in Situ Legatura Dei Dimeri Di C-Jun/AP-1 Rivela Aumento Dei Livelli Di C-Jun/Fra1 Complessi in Linee Di Seno Aggressivo Cancro Cellule in Vitro E in Vivo

Molecular & Cellular Proteomics : MCP. Sep, 2010  |  Pubmed ID: 20511396

Studi biochimici e genetici hanno mostrato che selettivi interazioni tra Jun, Fos e l'attivazione di componenti (ATF) fattore di trascrizione del fattore di trascrizione attivando la proteina 1 (AP-1) esibiscono le funzioni specifiche e critiche nella regolazione della proliferazione cellulare, la differenziazione e la sopravvivenza. Per esempio, il rapporto tra c-Jun/c-Fos e c-Jun/ATF2 dimeri nella cella può essere un fattore determinante nella risposta cellulare al oncogenica o stimoli apoptotic. Fino a poco tempo, metodi non erano disponibili per rilevare i complessi di AP-1 endogene in cellule e tessuti in situ. Qui, abbiamo validato il dosaggio di legatura di prossimità (PLA) per la sua abilità nello specifico visualizzare e quantificare le variazioni endogene di c-Jun/c-Fos, c-Jun/ATF2 e c-Jun/Fra1 complessi utilizzando, tra gli altri, mutanti selettivi, partner di c-Jun. Inoltre, abbiamo esaminato i livelli di c-Jun/AP-1 dimeri in linee cellulari che rappresentano diversi tipi di cancro al seno umano e ha trovato che le cellule di cancro aggressivo al seno basale-come possono essere discriminate da molto meno invasive del lume-come le cellule di rilevamento di PLA di c-Jun/Fra1 piuttosto che di c-Jun/ATF2 e c-Jun/c-Fos. Anche nel tessuto tumorale derivata da altamente metastatiche delle cellule MDA-MB231 basal-like, sono stati rilevati alti livelli di c-Jun/Fra1 complessi. Insieme, questi risultati dimostrano che il PLA in situ è un potente strumento diagnostico per analizzare e quantificare la quantità di dimeri di AP-1 biologicamente critici in celle fisse e materiale tissutale.

Elevata TGFbeta-Smad Segnalazione in Modelli Sperimentali Di Pkd1 E Pazienti Umani Con Rene Policistico

The Journal of Pathology. Sep, 2010  |  Pubmed ID: 20549648

Malattia policistica renale autosomica dominante (ADPKD) è una comune malattia renale ereditaria caratterizzata da molte cisti piene di liquido e fibrosi interstiziale nei reni, che porta a insufficienza renale cronica. Durante il cystogenesis i tubuli renali subiscono alterazioni strutturali estese che sono accompagnati da alterazione cellulare segnalazione, direttamente o indirettamente regolati da proteine PKD1- und PKD2. Dal transforming growth factor (TGF)-beta segnalazione modula la proliferazione cellulare, differenziazione, apoptosi, adesione e migrazione di vari tipi di cellule, abbiamo studiato l'attivazione di questa via di segnalazione in modelli murini di Pkd1-mutante nelle diverse fasi della malattia. Pertanto, abbiamo analizzato le espressione del TGFbeta-Smad signalling pathway e suoi geni bersaglio in diversi modelli di topo mutante Pkd1 in vari stadi di malattia policistica. Accumulo nucleare di P-Smad2 in cisti cellule epiteliali di rivestimento non è stato osservato nella fase di iniziazione, ma è stata osservata nelle fasi lieve e più avanzati di PKD. Questo coincide con lieve fibrosi e aumentati livelli di mRNA di geni bersaglio TGFbeta, come la fibronectina, collagene di tipo I, dell'inibitore dell'attivatore del plasminogeno 1 e matrix metalloproteinase-2. In questa fase che sono stati trovati molti fibroblasti interstiziali intorno le cisti, che ha anche mostrato di localizzazione nucleare per P-Smad2. Tuttavia, bone morphogenetic protein (BMP) di segnalazione, che può contrapporrsi TGFbeta segnalazione, non è interessato, poiché espressione nucleare di P-Smad1/5/8 e l'espressione del gene dell'obiettivo BMP, inibitore della DNA binding/differenziale-1 (ID-1) non è alterata rispetto al wild-type controlli. Inoltre, reni umani con ADPKD progressiva ha mostrato maggiore localizzazione nucleare del P-Smad2, mentre in generale l'espressione della P-Smad1/5/8 era debole. Questi risultati escludono TGFbeta segnalazione all'inizio del cystogenesis, ma indicano un ruolo importante durante la progressione della cisti e nel fibrogenesis di ADPKD progressiva.

Integrazione Dei Segnali Trascrizionali Davanti Tumore Delle Cellule Invasive

Cell Cycle (Georgetown, Tex.). Jul, 2010  |  Pubmed ID: 20647778

Segnalazione Da Parte Dei Membri Della Famiglia TGF-beta Nella Morfogenesi Vascolare E Malattia

Trends in Cell Biology. Sep, 2010  |  Pubmed ID: 20656490

Membri della famiglia transforming growth factor-beta (TGF-beta) giocano un ruolo cruciale nello sviluppo e malattia. Queste citochine suscitano loro effetti pleiotropici sulle cellule, tra cui endoteliali e cellule murale, attraverso specifica tipo I e tipo II serina/treonina chinasi recettori e fattori di trascrizione Smad intracellulare. Mette in evidenza questa recensione recenti progressi nella nostra comprensione di segnalazione di TGF-beta nella angiogenesi e sviluppo vascolare e del TGF-beta come perturbato segnalazione potrebbe contribuire a patologie vascolari, l'angiogenesi tumorale e progressione del tumore. La ricerca recente ha fornito interessanti intuizioni nel ruolo del TGF-beta tipo I recettori (ALK1) nell'angiogenesi tumorale e gli effetti curativi della talidomide su malformazioni vascolari in teleangiectasia emorragica ereditaria (HHT). Questi progressi forniscono opportunità per lo sviluppo di nuove terapie per le malattie con anomalie vascolari.

Mutazione ALK2 R206H Collegato a Fibrodisplasia Ossificante Progressiva Conferisce Attività Costitutiva Di BMP Del Recettore Di Tipo I E Sensibilizza Le Cellule Mesenchimali Alla Formazione Di Osso E Differenziazione Degli Osteoblasti Indotta Da BMP

Journal of Bone and Mineral Research : the Official Journal of the American Society for Bone and Mineral Research. Jun, 2010  |  Pubmed ID: 19929436

Fibrodisplasia ossificante progressiva (FOP) è una rara malattia invalidante, caratterizzata da ossificazione eterotopica, per i quali non c'è attualmente nessun trattamento disponibile. FOP è stato collegato di recente a una mutazione in eterozigosi R206H in osso morphogenetic protein (BMP) tipo recettore activin receptor-like chinasi 2 (ALK2). Espressione del recettore mutante ALK2-R206H (FOP-ALK2) si traduce in aumentata della fosforilazione della valle proteine effettrici di Smad1 ed elevati basali attività transcriptional reporter BMP-dipendente, che indica che la FOP-ALK2 è costitutivamente attive. Attività trascrizionale indotta da ALK2 FOP potrebbe essere bloccato con sovraesprimono relativa o della SMAD inibitorie, Smad6 o -7, o da un trattamento farmacologico BMP tipo I dorsomorphin inibitore del recettore. Tuttavia, in contrasto con il selvaggio-tipo ALK2, FOP-ALK2 non è inibita dal regolatore negativo FKBP12. Cellule mesenchimali che esprimono il recettore FOP-ALK2 sono più sensibili a in fase di mineralizzazione e la differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP. Formazione dell'osso in vivo è stata valutata da carico umane cellule staminali mesenchimali (hMSCs) che esprime il recettore ALK2 R206H su impalcature di fosfato di calcio e l'impianto nel topo nudo. Confrontato con la controllo cellule FOP-ALK2-esprimendo cellule indotta aumentata formazione ossea. Presi insieme, la mutazione R206H ALK2 conferisce attività costitutiva del recettore mutante, sensibilizza le cellule mesenchimali a differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP e stimola la formazione di nuovo osso. Noi abbiamo generato un modello animale che può essere utilizzato come un trampolino di lancio per studi preclinici puntati inibendo la caratteristica ossificazione eterotopica di FOP.

Acido 5-aminosalicilico Inibisce La Segnalazione Di TGF-beta1 in Cellule Di Cancro Del Colon-retto

Cancer Letters. Jan, 2010  |  Pubmed ID: 19541409

Via del transforming growth factor-beta (TGF-beta) è un percorso importante nell'iniziazione e progressione del cancro del colon-retto. Abbiamo mirato a determinare gli effetti dell'acido 5-aminosalicilico (5-ASA) su segnalazione di TGF-beta in cellule di cancro del colon-retto in vitro. 5-ASA inibito TGF-beta1 segnalazione HCT116 cellule e fibroblasti del colon, giudicata da un dosaggio di gene reporter TGF-beta-specifici, plasminogen activator inhibitor-1 mRNA e proteina livelli, trans-differenziazione dei fibroblasti, Smad3 fosforilazione e traslocazione nucleare. Concludiamo che 5-ASA inibisce la segnalazione di TGF-beta1 in cellule di cancro del colon-retto e potrebbe essere un potente coadiuvante terapeutico farmaco, interferendo con la segnalazione di TGF-beta aberrante nel cancro del colon-retto.

Distinte Modalità Di Inibizione Da Sclerostin Su Bone Morphogenetic Protein E Vie Di Segnalazione Wnt

The Journal of Biological Chemistry. Dec, 2010  |  Pubmed ID: 20952383

Sclerostin è espressa da osteociti ed ha effetti catabolici sull'osso. È stato dimostrato per antagonizzare bone morphogenetic protein (BMP) e/o attività di Wnt, sebbene al momento non sono chiari i meccanismi sottostanti. Coerente con i risultati precedenti, Sclerostin si oppose Wnt3a-indotta ma non dirette BMP7-indotta risposte dirette quando sia ligando e antagonista sono stati forniti esogenicamente alle cellule. Tuttavia, abbiamo trovato che quando entrambe le proteine sono espressi nella stessa cella, sclerostin può contrapporrsi BMP segnalazione direttamente inibendo la secrezione BMP7. Sclerostin interagisce con entrambi il dominio BMP7 maturo e pro-domain, portando a ritenzione intracellulare e degradazione proteosomale di BMP7. Analisi di topi knock-out sclerostin ha rivelato un'azione inibitoria della sclerostin su Wnt segnalazione in osteoblasti e osteociti nelle ossa corticali e spugnose. BMP7 segnalazione principalmente è stata inibita da sclerostin in osteociti del calcagno e osso corticale della tibia. I nostri risultati suggeriscono che sclerostin esercita i suoi effetti catabolici osso potente da antagonizzando Wnt segnalazione in maniera paracrina e autocrino e inimicarsi BMP segnalazione selettivamente in osteociti che sintetizzano simultaneamente sia sclerostin e BMP7 proteine.

Misurazione Dell'attività Costitutiva Di BMP Di Tipo I Recettori

Methods in Enzymology. 2010  |  Pubmed ID: 21036238

Proteine morfogenetiche ossee (BMPs) sono citochine pleiotropica controllando una moltitudine di processi, tra cui la formazione ossea. BMPs funzione legandosi e attivazione BMP di tipo I e tipo recettori II, con conseguente attivazione di fattori di trascrizione Smad e l'espressione dei geni bersaglio BMP. Mutazioni in BMP di tipo recettore ALK2 sono state identificate in pazienti affetti da Fibrodisplasia Ossificante Progressiva (FOP). La mutazione trovata in tutti i pazienti mostrando sintomi FOP classici, la mutazione ALK2 R206H, rende ALK2 costitutivamente attive. Qui forniamo una descrizione dettagliata di come determinare se altre mutazioni ALK2 conferirà attività costitutiva del recettore.

Effetti Bifasico Di Trasformare La Differenziazione Degli Osteoblasti Growth Factor-β Su Bone Morphogenetic Protein-indotta

Journal of Bone and Mineral Research : the Official Journal of the American Society for Bone and Mineral Research. Dec, 2010  |  Pubmed ID: 21162084

Proteine morfogenetiche ossee (BMPs) esercitano un ruolo importante nello sviluppo scheletrico, l'omeostasi ossea adulti e guarigione della frattura e hanno dimostrato l'utilità clinica per la rigenerazione ossea. Tuttavia, BMPs caduta breve come agenti rigeneranti poiché al fine di ottenere effetti terapeutici devono essere utilizzati alte dosi di BMPs. Determinare i meccanismi molecolari di controllo formazione ossea indotta da BMP può portare allo sviluppo di terapie più efficaci basate su BMP.Al fine di identificare chinasi mediando la differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP, abbiamo eseguito una schermata di siRNA per trovare chinasi modulante attività BMP6-indotta della fosfatasi alcalina (ALP). Sorprendentemente, anche se trasformare growth factor-β (TGF-β) è generalmente considerata inimicarsi la differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP, C2C12 celle transfected con siRNA targeting i recettori del TGF-β visualizzati ridotta attività ALP BMP6-indotta. Inoltre, di tipo farmacologici inibitori bloccano il TGF-β recettori alterata attività ALP BMP-indotta in cellule KS483 e C2C12 e mineralizzazione delle cellule KS483. Coerentemente, co-stimulation con BMPs e TGF-β ulteriormente aumentata espressione di geni specifici degli osteoblasti, attività ALP e mineralizzazione delle cellule KS483 e cellule staminali mesenchimali primarie rispetto al BMP da solo. Gli effetti inibitori ed stimolante del TGF-β sono stati trovati a dipendere dalla tempistica e durata della co-stimulation. TGF-β inibite attivazione indotta da BMP di un reporter di luciferase BMP-Smad-dipendente, suggerendo che l'effetto stimolante del TGF-β non è dovuto alla maggiore attività BMP-Smad. TGF-β inibisce anche l'espressione dell'antagonista BMP Noggin e prolungata attività BMP indotta da BMP.In conclusione, TGF-β, oltre che agisce come un inibitore, può inumidirsi il ciclo di feedback negativo Noggin-mediata anche migliorare differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP, che potrebbe essere utile nella guarigione della frattura. © 2010 American Society for Bone e la ricerca di minerale.

ALK2 Mutazione in Un Paziente Con Sindrome Di Down E Un Cuore Congenito Difetto

European Journal of Human Genetics : EJHG. Apr, 2011  |  Pubmed ID: 21248739

Sindrome di Down (DS), risultanti da un'ulteriore copia del cromosoma 21 (trisomia 21), è frequentemente associata a difetti cardiaci congeniti (CHDs). Anche se il dosaggio maggiore di sequenze di cromosoma 21 è probabile che sia parte dell'eziologia dei difetti cardiaci, solo una percentuale di pazienti DS presentano un difetto cardiaco congenito (nascita prevalenza 40-60%). Attraverso uno schermo grande candidato di sequenziamento gene in pazienti con difetti del setto atrioventricolare, sono state identificate le sostituzioni in bone morphogenetic protein (BMP) tipo I recettori ALK2 e due altri geni in un paziente con DS e un difetto del setto interatriale tipo primum. Modellazione strutturale del dominio citoplasmatico del recettore ALK2 suggerisce che H286 è nelle immediate vicinanze del sito nucleotide-binding del dominio chinasi. Abbiamo valutato se questa sostituzione p.His286Asp alterata funzione ALK2 utilizzando dosaggi sia in vitro, così come in vivo. La variante p.His286Asp dimostrato alterata attività funzionale come misurato dai dosaggi risposta trascrizionale BMP-specifici. Inoltre, lieve attività interferenti dominante è stata osservata in vivo rispetto al wild-type ALK2 come determinato dalla iniezione di RNA in embrioni di zebrafish. Questi dati indicano che, nel contesto di un background di DS, riduzione ALK2-mediata della segnalazione BMP possa contribuire alla CHDs.

Endoglin Promuove La Segnalazione Di TGF-β/Smad1 Nei Fibroblasti Di Sclerodermia

Journal of Cellular Physiology. Dec, 2011  |  Pubmed ID: 21344387

TGF-β è il principale induttore delle proteine della matrice extracellulare nella sclerodermia (sclerosi sistemica, SSc). Gli studi precedenti indicano che in un sottoinsieme dei fibroblasti SSc TGF-β segnalazione viene attivato tramite livelli elevati di activin receptor-like chinasi (ALK) 1 e fosforilato Smad1 (pSmad1). L'obiettivo di questo studio era di determinare il ruolo del endoglin/ALK1 nella segnalazione di TGF-β/Smad1 nei fibroblasti SSc. Nei fibroblasti di SSc, aumentati livelli di endoglin correlato con i livelli elevati del fattore di crescita pSmad1, collagene e tessuto connettivo (CCN2). Endoglin deplezione via siRNA in SSc fibroblasti inibito pSmad1 ma non influisce sulla pSmad2/3. In seguito deplezione endoglin livelli di mRNA e di proteine di collagene e CCN2 erano significativamente diminuiti in fibroblasti SSc ma è rimasta invariati nei fibroblasti normali. ALK1 fu espressa a livelli simili in SSc e fibroblasti normali. Deplezione di ALK1 ha provocato l'inibizione della pSmad1 e una moderata ma significativa riduzione dei livelli di mRNA e di proteine di collagene e CCN2 nei fibroblasti SSc. Inoltre, costitutivamente alti livelli di endoglin sono stati trovati nei complessi con ALK1 nei fibroblasti SSc. Sovraespressione di ALK1 costitutivamente attive (caALK1) in normale e fibroblasti SSc ha condotto ad un moderato aumento di collagene e CCN2. Tuttavia, caALK1 potentemente indotta endotelina 1 (ET-1) livelli di mRNA e proteine nei fibroblasti SSc. Ulteriori esperimenti hanno dimostrato che endoglin e ALK1 mediare induzione di TGF-β di ET-1 nella SSc e fibroblasti normali. In conclusione, questo studio ha rivelato un ruolo importante profibrotic di endoglin nei fibroblasti SSc. Il percorso endoglin/ALK1/Smad1 potrebbe essere un obiettivo terapeutico nei pazienti con SSc, se opportunamente bloccato.

Mancanza Di Ciliari Primes Shear-induced Endothelial Mesenchimali Transizione

Circulation Research. Apr, 2011  |  Pubmed ID: 21393577

Ciliari sono protrusioni cellulari che servono come mechanosensors per il flusso di fluido. Nelle cellule endoteliali (ECs), funzionano da transducing informazioni sul flusso sanguigno locale in risposte funzionali, come ad esempio la produzione di ossido nitrico e l'iniziazione dell'espressione genica. Ciglia è presenti su ECs nelle zone del basso o disturbato flusso e assente nelle zone di alto flusso. Nel cuore embrionale, ad alto flusso regime applicabile alla zona Endocardica cuscino, e l'assenza di ciglia qui coincide con il processo di transizione endoteliali mesenchimali (EndoMT).

FAS-associated Factor 1 Antagonizza Segnalazione Wnt, Promuovendo La Degradazione Di β-catenina

Molecular Biology of the Cell. May, 2011  |  Pubmed ID: 21411632

Il pathway canonico di Wnt gioca un ruolo importante nella regolazione della proliferazione cellulare e la differenziazione. Attivazione di questa via di segnalazione provoca interruzioni di Axin/adenomatosa polyposis coli/glicogeno sintasi chinasi 3beta complesso, con conseguente stabilizzazione della β-catenina e la sua associazione con fattore fattore/T-cellule linfoidi enhancer nel nucleo. Qui, ci identifichiamo Fas-associated factor 1 (FAF1) come un regolatore negativo di segnalazione Wnt/β-catenina. Abbiamo trovato la sovraespressione di FAF1 per inibire fortemente l'attività di reporter transcriptional Wnt-indotte e per contrastare l'accumulo di β-catenina Wnt-indotte. Inoltre, atterramento di FAF1 ha provocato un aumento nei livelli di β-catenina e nell'attivazione della trascrizione di Wnt/β-catenina-indotta. FAF1 è stato trovato a interagire con β-catenina all'inibizione del proteasoma. Espressione ectopica di FAF1 promosso β-catenina degradazione potenziando la sua polyubiquitination. Studi funzionali in C2C12 myoblasts e cellule preosteoblastic KS483 ha mostrato che FAF1 esaurimento provocato nell'attivazione dei geni endogeni Wnt-indotte e migliorata differenziazione degli osteoblasti, mentre FAF1 sovraespressione ha avuto l'effetto opposto. Questi risultati identificano FAF1 come un romanzo fattore inibitorio di Wnt canonico signaling pathway.

TGFbeta Attiva Attivata Mitogene E Lo Stress Della Proteina Chinasi-1 (MSK1) Per Attenuare La Morte Delle Cellule

The Journal of Biological Chemistry. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 21106525

Trasformare l'associazione growth factor-β (TGFβ) al suo recettore porta alla fosforilazione intracellulare di Smad2 e Smad3, che oligomerize con Smad4. Questi complessi si accumulano nel nucleo e inducono la trascrizione del gene. Qui descriviamo chinasi mitogene - e lo stress-attivato 1 (MSK1) come antagonista di morte cellulare indotta da TGFβ. Induzione dell'attività MSK1 di TGFβ dipende dall'attivazione di MAPK Smad4 e p38. Atterramento di GADD45, un regolatore a Monte Smad4-indotta di p38 MAPK impedisce p38 TGFβ-indotta e attività MSK1. MSK1 funzionalmente regola pro-apoptotic proteine BCL2 BH3-only, come MSK1 atterramento riduce la fosforilazione difettosa e migliora l'espressione Noxa e Bim, portando a maggiore TGFβ-indotta caspase-3 attività e cellule morte. Questa scoperta suggerisce che MSK1 rappresenta un percorso pro-survival biforcante a valle di p38 e antagonizza la funzione di pro-apoptotic stabilito p38 MAPK. Inoltre, EGF potrebbe invertire tutti gli effetti osservati dopo il colpo MSK1. Monitoraggio dello stato di attività MSK1 in cancro promette nuovi obiettivi terapeutici come inattivazione sia MSK1 ed EGF segnalazione maggio (re)-sensibilizzare le cellule morte cellulare indotta da TGFβ.

ACTIVIN A Induce Un Fenotipo Non Fibrotico Nelle Cellule Muscolari Lisce a Differenza Di TGF-β

Experimental Cell Research. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 20955695

ACTIVIN A e transforming growth factor-β1 (TGF-β1) appartengono alla stessa famiglia di fattori di crescita e differenziazione che modulano la formazione di lesione vascolare in modi distinti, che noi vorremmo capire meccanicistico.

I Ruoli Dinamici Di TGF-β Nel Cancro

The Journal of Pathology. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 20957627

Il signalling pathway di transforming growth factor-β (TGF-β) svolge un ruolo critico e dual nella progressione del cancro umano. Durante la prima fase della progressione tumorale, TGF-β agisce come un soppressore tumorale, esemplificato da delezioni o mutazioni nei componenti di nucleo del pathway di segnalazione di TGF-β. Al contrario, TGF-β promuove anche i processi che supportano la progressione tumorale come invasione delle cellule tumorali, diffusione ed evasione immune. Di conseguenza, il risultato funzionale della risposta TGF-β è fortemente dipendente dal contesto compreso cellula, tessuto e il tipo di cancro. In questa recensione, descriviamo le vie di segnalazione molecolare impiegate da TGF-β nel cancro e come questi, quando perturbato, può portare allo sviluppo di cancro. Simultaneamente con maggiore apprezzamento dei meccanismi molecolari che regolano il TGF-β segnalazione, il potenziale bersaglio terapeutico specifico sub-arms oncogenica del TGF-β pathway aumenta. Infatti, sono state avviate sperimentazioni cliniche con sistemici inibitori di segnalazione di TGF-β per il trattamento di pazienti affetti da cancro. Tuttavia, considerando l'importante ruolo del TGF-β in cardiovascolari e molti altri tessuti, un'attenta selezione dei pazienti è garantita per minimizzare indesiderati effetti collaterali sul bersaglio.

Elevato Fattore Di Crescita Trasformante β E Percorsi Della Chinasi Di Proteina Mitogene-attivata Mediano Fibrotici Tratti Di Fibroblasti Di Morbo Di Dupuytren

Fibrogenesis & Tissue Repair. 2011  |  Pubmed ID: 21711521

ABSTRACT:

Esplorare Le Terapie Anti-TGF-β Nel Cancro E Fibrosi

Growth Factors (Chur, Switzerland). Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21718111

Trasformare growth factor-β (TGF-β) è una citochina multifunzionale, con ruoli importanti nel mantenimento dell'omeostasi del tessuto. TGF-β segnali via transmembrana serina/treonina chinasi recettori e intracellulari regolatori trascrizionali Smad. Segnalazione di TGF-β perturbato è stato implicato in una grande varietà di condizioni patologiche. Aumentati livelli di TGF-β sono stati trovati in pazienti con cancro, fibrosi e sclerosi sistemica e sono stati correlati con la gravità della malattia. Nel cancro, TGF-β media invasione tumorale e le metastasi, interessando sia le cellule tumorali e il microambiente tumorale tra cui attivazione dei fibroblasti e soppressione immunitaria. Inoltre, TGF-β è un forte stimolatore della deposizione di matrice extracellulare. Sulla base di queste osservazioni, piccole molecole inibitori della chinasi del recettore TGF-β, neutralizzando gli anticorpi che interferiscono con il ligando? interazioni recettore, oligonucleotidi antisenso riduzione dell'espressione di TGF-β e recettore solubile ectodomains che sequestrare il TGF-β sono stati sviluppati per intervenire con eccessiva attività di segnalazione di TGF-β nel suddetti disturbi. Qui, passiamo in rassegna lo stato attuale della terapia anti-TGF-β in studi clinici.

Controllo Dell'angiogenesi Da Due Unici TGF-β Di Tipo Receptor Signaling Pathways

Histology and Histopathology. Sep, 2011  |  Pubmed ID: 21751154

Studi genetici in esseri umani e topi hanno rivelato una funzione cruciale per la trasformazione di growth factor-beta (TGF-β) in sviluppo vascolare ed il mantenimento dell'omeostasi vascolare. Topi carenti per i vari componenti di segnalazione di TGF-β sviluppano una letalità embrionale a causa di difetti vascolari. Nei pazienti, mutazioni nei recettori del TGF-β sono state associate a displasia vascolare come teleangectasia emorragica ereditaria (HHT) e ipertensione arteriosa polmonare (PAH). Oltre a effetti indiretti regolando anche l'espressione di regolatori di angiogenic, TGF-β ha potenti effetti diretti sulla crescita delle cellule endoteliali e migrazione, e abbiamo proposto che il TGF-β regola lo stato di attivazione dell'endotelio tramite due opposti tipo I percorsi del recettore/Smad, activin receptor-like chinasi (ALK) 1 e ALK5. TGF-β è anche fondamentale per la differenziazione dei precursori murale in pericytes e cellule muscolari lisce. Inoltre, segnalazione paracrina difettoso TGF-β tra cellule endoteliali e vicine murale può essere responsabile di un fenotipo leaky imbarcazione che è caratteristico di HHT. In questa recensione, discutiamo la nostra attuale comprensione della via di segnalazione di TGF-β e il regolamento della funzione delle cellule muscolari lisce endoteliali e vascolare.

Inattivazione GSK3β Induce L'apoptosi Delle Cellule Di Leucemia Di Reprimere La Funzione Del C-Myb

Molecular Biology of the Cell. Sep, 2011  |  Pubmed ID: 21795403

Glicogeno sintasi chinasi 3beta (GSK3β) regola diversi processi fisiologici, tra cui il metabolismo, sviluppo, oncogenesi e neuroprotezione. L'attività della chinasi GSK3β è stato segnalato per essere critici per vari tipi di cellule tumorali, ma il meccanismo è rimasto sfuggente. Questo studio esamina il meccanismo mediante il quale GSK3β regola la sopravvivenza delle cellule di leucemia. Dimostriamo che all'inibizione della chinasi GSK3β diversi tipi di leucemia cellule mostrano difetti gravi proliferazione apoptosi. Il fattore di trascrizione c-Myb si trova ad per essere il principale bersaglio dell'inibizione GSK3β nella sopravvivenza delle cellule. GSK3β inattivazione riduce l'espressione di c-Myb promuovendo la sua degradazione mediata ubiquitination, inibendo l'espressione di geni antiapoptotici c-Myb-dipendente Bcl2 e survivina. Coimmunoprecipitation, reporter assays, immunoprecipitazione della cromatina e atterramento studi mostrano che c-Myb deve interagire e collaborare con fattore di trascrizione LEF-1 nell'attivazione di Bcl2 e survivina e che entrambi fattori di trascrizione sono necessari per la sopravvivenza di cella. Questi dati rivelano un meccanismo non ancora sconosciuto da cui GSK3β controlli cellula di sopravvivenza.

Migrazione Di Monociti TGF-β1/ALK5-indotto Coinvolge Vie PI3K E P38 E Non è Influenzato Negativamente Da Diabete Mellito

Cardiovascular Research. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21478266

Monociti contribuiscono a arteriogenesis da infiltrazione di siti di crescita collaterale e successiva produzione e rilascio di fattori di crescita. Trasformazione β1 growth factor (TGF-β1) da intermediario motilità monociti e stimola arteriogenesis. Meccanismi di segnalazione TGF-β1 mediando motilità monociti sono sconosciuti finora. Inoltre, l'influenza del fattore di rischio cardiovascolare diabete sulla migrazione di monociti indotta da TGF-β1 rimane per essere chiarita.

TGF-β Segnalazione in Breast Cancer Cell Invasione E Metastasi Dell'osso

Journal of Mammary Gland Biology and Neoplasia. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21494783

Il contributo di trasformazione di fattore di crescita β (TGF-β) di segnalazione per il cancro al seno è stato studiato per più di due decenni. In una fase precoce di TGF-β può agire come un soppressore tumorale, mentre più tardi, quando le cellule sono diventati resistenti ai suoi effetti anti-mitogenic, il ruolo del TGF-β passa verso la conversione maligna e progressione. TGF-β stimola l'invasione cellulare e modifica il microambiente a vantaggio delle cellule tumorali. Studi hanno dimostrato che il TGF-β promuove metastasi ossee e polmonari mediante diversi meccanismi. Le strategie terapeutiche a bersaglio il pathway di TGF-β nel cancro al seno stanno diventando sempre più chiare. Questa recensione si concentrerà sul ruolo TGF-β in invasione di cancro al seno e metastasi.

Dual Exon Skipping in Miostatina E Distrofina Per La Distrofia Muscolare Di Duchenne

BMC Medical Genomics. 2011  |  Pubmed ID: 21507246

Miostatina è un inibitore della crescita muscolare potente che appartiene alla famiglia dei Transforming Growth Factor-β (TGF-β). Le mutazioni che portano alla miostatina non funzionale sono state associate con hypermuscularity in vari organismi. Al contrario, distrofia muscolare di Duchenne (DMD) è caratterizzata da una perdita di fibre muscolari e rigenerazione compromessa. In questo studio, ci proponiamo di miostatina atterramento mediante exon skipping, una tecnica che è stata applicata con successo a riformulare il difetto genetico del gene della distrofina nei pazienti DMD.

TGFβ/Alk5 Di Segnalazione è Necessaria Per L'espressione Klf2 Shear Stress Indotto in Cellule Endoteliali Embrionali

Developmental Dynamics : an Official Publication of the American Association of Anatomists. Jul, 2011  |  Pubmed ID: 21604321

Le cellule endoteliali (CE) tradurranno le forze biomeccaniche in risposte funzionali e fenotipiche che giocano un ruolo importante nello sviluppo cardiaco. In particolare, CE nelle zone di elevata sollecitazione di taglio, cioè, nel tratto di efflusso cardiaco e canale atrioventricolare, sono caratterizzati da alta espressione di Krüppel-like factor 2 (Klf2) e da trasformare-like growth factor-beta (Tgfβ)-driven endoteliali mesenchimali transizione. Extraembryonic ostruzione venosa (modello clip venoso) risultati in cardiopatie congenite e venose indotta da clip alterazioni nell'espressione genica shear stress-correlati sono suggestivi di un aumento in cardiaco shear stress. Qui, si studiano gli effetti della sollecitazione di taglio su espressione Klf2 e segnalazione in embrionali CE in vivo, utilizzando il modello a clip venoso associato al Tgfβ e in vitro sottoponendo CE colta al flusso del fluido. Risposte cellulari sono state valutate mediante l'analisi dei Klf2, Tgfβ ligandi e i loro obiettivi di segnalazione a valle. Risultati mostrano che, nel CE embrionale, shear stress attiva la segnalazione di Tgfβ/Alk5 e che l'induzione di Klf2 è un processo dipendente Alk5.

Bifasico Effetti Di Trasformazione Di Fattore Di Crescita β Sulla Differenziazione Degli Osteoblasti Indotta Da Proteine Morfogenetiche Ossee

Journal of Bone and Mineral Research : the Official Journal of the American Society for Bone and Mineral Research. Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21611961

Proteine morfogenetiche ossee (BMPs) esercitano un ruolo importante nello sviluppo scheletrico, l'omeostasi ossea adulto e guarigione della frattura e hanno dimostrato l'utilità clinica per la rigenerazione ossea. Tuttavia, BMPs caduta breve come agenti rigenerativi perché dosi elevate devono essere utilizzati per ottenere effetti terapeutici. Determinare i meccanismi molecolari di controllo formazione ossea indotta da BMP può portare allo sviluppo di terapie più efficaci basate su BMP. Per identificare la chinasi mediando la differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP, abbiamo eseguito un schermo di siRNA per trovare chinasi modulando l'attività indotta da BMP-6 della fosfatasi alcalina (ALP). Sorprendentemente, anche se trasformare growth factor β (TGF-β) generalmente è considerato inimicarsi la differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP, C2C12 celle transfected con siRNA targeting i recettori del TGF-β visualizzati ridotta attività indotta da BMP-6 ALP. Inoltre, di tipo farmacologici inibitori bloccano il TGF-β recettori alterata attività ALP BMP-indotta in cellule KS483 e C2C12 e mineralizzazione delle cellule KS483. Coerentemente, costimulation con BMPs e TGF-β ulteriormente aumentata espressione di geni specifici degli osteoblasti, attività ALP e mineralizzazione delle cellule KS483 e cellule staminali mesenchimali primarie rispetto al BMP da solo. Gli effetti inibitori ed stimolante del TGF-β sono stati trovati a dipendere dalla tempistica e durata della costimulation. TGF-β inibite attivazione indotta da BMP di un reporter di luciferase BMP-Smad-dipendente, suggerendo che l'effetto stimolante del TGF-β non è dovuto alla maggiore attività BMP-Smad. TGF-β inibisce anche l'espressione della zucca antagonista BMP e prolungata attività BMP indotta da BMP. In conclusione, TGF-β, oltre che agisce come un inibitore, anche possibile, il ciclo di feedback negativo zucca-mediata di bagnatura, migliorare differenziazione degli osteoblasti indotta da BMP, che potrebbe essere utile nella guarigione della frattura.

TGF-β Receptor Signaling Pathways in Angiogenesi; Destinazioni Emergenti Per La Terapia Anti-angiogenesi

Current Pharmaceutical Biotechnology. May, 2011  |  Pubmed ID: 21619534

L'angiogenesi, la formazione di nuovi vasi sanguigni è essenziale per diversi processi fisiologici quali lo sviluppo, ma anche per condizioni patologiche come la crescita tumorale. Più studiato in questo contesto sono tirosina chinasi signaling pathways come quelli che coinvolgono il fattore di crescita endoteliale vascolare (VEGF). C'è tuttavia accumulando prove che più percorsi sono essenziali per l'angiogenesi. Studi di Knockout di fattori nella trasformazione del fattore di crescita β (TGF-β) di segnalazione per esempio hanno mostrato che anche questo percorso è indispensabile per l'angiogenesi. Questa recensione mette in evidenza la nostra comprensione di segnalazione di TGF-β nella angiogenesi e sviluppo vascolare. In particolare, ci concentriamo su recenti intuizioni nel ruolo del tipo TGF-β I recettori ALK1 e ricettore endoglin nell'angiogenesi tumorale, che offrono opportunità per lo sviluppo di nuove terapie anti-angiogenesi per il trattamento di pazienti affetti da cancro.

Induzione Transgene Smad7 Temporale Nell'epidermide Del Mouse Accelera La Guarigione Delle Ferite Della Pelle

The American Journal of Pathology. Oct, 2011  |  Pubmed ID: 21944279

L'espressione di Smad7, un antagonista di growth factor-β (TGFβ) del tumore, è aumentato durante la guarigione delle ferite cutanee. Per valutare questo significato, abbiamo temporaneamente indotta Smad7 espressione del transgene in pelle ferita in gene-interruttore-Smad7 topi transgenici (tg Smad7). Induzione SMAD7 nei cheratinociti epidermici ha causato un aumento nella proliferazione dei cheratinociti con ridotta attivazione Smad2, indicando che Smad7 abrogata inibizione della crescita TGFβ-mediata. Inoltre, pelle ferita da topi Smad7 tg esposto re-epithelialization accelerata, con aumentata attivazione della chinasi segnale-regolata extracellulare (Erk), e un test di migrazione in vitro hanno rivelato che attivazione di Erk ha contribuito alla migrazione dei cheratinociti Smad7-mediata. Espressione del transgene Smad7 specifici dell'epidermide, in particolare, ha anche un effetto profondo sulla ferita stroma, con conseguente ridotta infiammazione, l'angiogenesi e di produzione di tipo I collageno. Ridotta attivazione Smad2 è stata osservata in stroma ferito da Smad7 topi transgenici (tg Smad7), possibilmente a causa di meno infiltrati producono TGFβ leucociti rispetto a quelle nelle ferite da topi di controllo. Perché non viene secreta Smad7, questi effetti potrebbero riflettere cambiamenti funzionali nei cheratinociti Smad7 tg. Sostenere questa nozione, l'attivazione di NF-κB, un complesso di proteine nonsecreted che attiva transcriptionally citochine infiammatorie, è stato ridotto nell'epidermide feriti da topi Smad7 tg rispetto a quello in feriti selvaggio-tipo dell'epidermide. In somma, sovraespressione Smad7 epidermico accelerato la guarigione della ferita attraverso gli effetti diretti sulla migrazione e la proliferazione dei cheratinociti e attraverso gli effetti indiretti sulla ferita stroma.

Regolamento Specifico Tipo Di Cellule Della Miostatina Segnalazione

The FASEB Journal : Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. Dec, 2011  |  Pubmed ID: 22202673

Il fattore di crescita trasformante (TGF)-β membro della famiglia miostatina è un regolatore importante del myoblast, degli adipociti e la crescita dei fibroblasti e differenziazione, ma i meccanismi di segnalazione devono ancora essere stabilito. Abbiamo pertanto determinato il contributo della miostatina tipo I recettori activin receptor-like chinasi-4 (ALK4) e -5 (ALK5) e diversi coreceptors in C2C12 myoblasts, C3H10T1/2 cellule staminali mesenchimali e fibroblasti 3T3-L1, così come in myoblast primario e fibroblasti. Abbiamo eseguito siRNA-mediata atterramento di ogni recettore e misurato usando luciferase Smad3-dipendente e dosaggi di fosforilazione Smad2 con siRNA nontargeting come controllo segnalazione di attività. Troviamo che miostatina utilizza ALK4 in mioblasti, considerando che ha una preferenza per ALK5 nelle cellule nonmyogenic. In particolare, i nostri risultati mostrano che coreceptor Cripto è espressa in mioblasti, ma non nelle cellule nonmyogenic e che regola l'attività della miostatina. Più specificamente, miostatina richiede Cripto in mioblasti, mentre Cripto reprime activin attività e segnalazione di TGF-β è Cripto indipendente. Miostatina cripto-mediata segnalazione dipende sia fattore di crescita epidermico (EGF)-Cripto-FRL1-criptico e come domini (CFC), considerando che activin segnalazione è conferito esclusivamente dal dominio di CFC. Inoltre, Cripto down-regulation aumenta la differenziazione del myoblast, mostrando la sua importanza nella segnalazione della miostatina. Insieme, i nostri risultati identificano un meccanismo molecolare che spiega gli aspetti specifici del tipo di cella di segnalazione di miostatina e altri membri famiglia TGF-β.-Kemaladewi, U. d., de Gorter, d. J. J., Aartsma-Rus, a., van Ommen, G.-J. dieci Dijke, P., ' t Hoen, P. A., Hoogaars, regolamento specifico W. M.-tipo di cellula della miostatina segnalazione.

Il Percorso Di TGF-β/Smad Induce Al Seno Cancro Cellule Invasione Attraverso La Up-regulation Di Matrix Metalloproteinase 2 E 9 in Un Sistema Modello Di Invasione Sferoide

Breast Cancer Research and Treatment. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 20821046

Trasformando growth factor-β (TGF-β) ha opposti ruoli nella progressione del cancro al seno che agisce come un soppressore del tumore in fase iniziale, ma stimolante invasione e metastasi nelle fasi successive. In contrasto con i meccanismi con cui TGF-β induce arresto della crescita, le vie che mediano l'invasione tumorale non sono ben compresi. Qui, descriviamo un sistema di dosaggio dell'invasione TGF-β-dipendente costituito da sferoidi di MCF10A1 cellule epiteliali del seno normale (M1) e RAS-trasformato (pre) maligni derivati (M2 e M4) incorporati in gel di collagene. Basale e TGF-β-induced invasione di queste linee cellulari è stato trovato per correlare con il loro potenziale tumorigeno; M4 mostrando il comportamento più aggressivo e M1 mostrando il minimo. Invasione basale è stato fortemente inibito da inibitore delle chinasi del recettore SB-431542, che indica il coinvolgimento di autocrine attività TGF-β o TGF-β-come il TGF-β. Invasione di TGF-β-indotta in M2 precancerose e cellule altamente maligne M4 era inibito anche su specifica atterramento di Smad3 o Smad4. È interessante notare che, sia un inibitore di ampio spettro matrix metalloproteinase (MMP) e un inibitore selettivo di MMP2 e MMP9 mitigato invasione TGF-β-indotta delle cellule M4, lasciando inalterati invasione basale. In linea con questo, TGF-β è stato trovato per indurre fortemente MMP2 e MMP9 espressione in modo Smad3 e Smad4 dipendente. Questo sistema incorporato di collagene sferoide offre quindi un modello di screening preziose per TGF-β/Smad- e MMP2 e MMP9 dipendente invasione di cancro della mammella.

BMP Antagonisti Migliorano La Differenziazione Miogena E Migliorare Il Fenotipo Distrofica in Un Modello Murino DMD

Neurobiology of Disease. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 20940052

Distrofia muscolare di Duchenne (DMD) è un X-linked letale atrofia muscolare malattia caratterizzata da necrosi e degenerazione della fibra muscolare. La patologia progressiva della DMD può essere spiegata da un'insufficiente risposta rigenerativa con conseguente formazione di fibrosi e di tessuto adiposo. BMPs sono noti per inibire la differenziazione miogena e in un precedente studio abbiamo trovato un'aumentata espressione di un membro della famiglia BMP BMP4 in DMD myoblasts. Lo scopo di questo studio è stato quindi di indagare se l'inibizione della segnalazione BMP potrebbe essere utile per myoblast differenziazione e i processi di rigenerazione muscolare in un contesto DMD. Tutti testati BMP inibitori, Noggin, dorsomorphin e LDN-193189, sono stati in grado di accelerare e migliorare la differenziazione miogena. Tuttavia, dorsomorphin repressa sia BMP e TGFβ segnalazione ed è stato trovato per essere tossici per colture cellulari primarie myoblast. Al contrario, Noggin è stato trovato per essere un potente e selettivo inibitore BMP e quindi è stato testato in vivo in un modello murino DMD. Locale adenovirali mediata sovraespressione di Noggin nel muscolo ha provocato un'aumentata espressione dei geni regolatori miogena Myog e Myod1 e istologia muscolare migliorata. In conclusione, i nostri risultati suggeriscono che repressione della segnalazione BMP possa costituire un'attraente terapia adiuvante per pazienti DMD.

Malattie Cardiovascolari E Segnalazione Di TGFβ

International Journal of Biological Sciences. 2012  |  Pubmed ID: 22253564

Trasformando growth factor β (TGFβ) membri della famiglia sono coinvolti in una vasta gamma di diverse funzioni e svolgono un ruolo chiave nell'embriogenesi, lo sviluppo e l'omeostasi dei tessuti. Perturbazione di TGFβ segnalazione può portare a malattie vascolari e altre. Studi in vitro hanno fornito evidenze che TGFβ familiari hanno una vasta gamma di diversi effetti sulle cellule vascolari, che sono altamente dipendenti sul contesto cellulare. Coerentemente con queste osservazioni studi genetici in esseri umani e topi ha dimostrato che i membri della famiglia TGFβ hanno effetti ambigui sul funzionamento del sistema cardiovascolare. In questa recensione abbiamo discutere i progressi recenti su TGFβ segnalazione nelle malattie vascolari (cardio) e descrivere il valore di TGFβ segnalazione come marcatore di malattia sia un obiettivo terapeutico per le malattie vascolari (cardio).

Proteasi Ubiquitin-specifiche 4 Mitiga Toll-like/interleukin-1 Receptor Signaling E Regola L'attivazione Immunitaria Innata

The Journal of Biological Chemistry. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22262844

Il recettore Toll-like (TLR) / recettore interleuchina 1 (IL-1R) signaling pathway è essenziale per la risposta immunitaria innata e omeostasi del sistema immunitario. Fattore associato al recettore di lisina 63 polyubiquitinated fattore di necrosi tumorale (TRAF) 6 media l'attivazione di segnalazione a valle. In un guadagno dello schermo di espressione di enzimi deubiquitinating diversi 66 (DUBs), abbiamo individuato proteasi ubiquitin-specifiche (USP) 4 come un potente regolatore negativo della segnalazione di TLR/IL-1R e TRAF6 proteina d'interazione. USP4 deubiquitinates TRAF6 e quindi impedisce l'attivazione di fattori trascrizionali NF-κB e AP-1 e le successive risposte pro-infiammatorie. Larve di zebrafish impoverito usp4 LPS-trattati espresso più elevati livelli di citochine pro-infiammatorie e sono più suscettibili alla sfida settico. Presi insieme, i nostri risultati dimostrano che USP4 gioca un ruolo essenziale nella regolazione negativa di TLR-IL-1R mediata segnalazione innato risposta immunitaria.

Non-sinonimo Varianti Del Gene SMAD6 Predispongono a Malformazioni Cardiovascolari Congenite

Human Mutation. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22275001

Malformazioni congenite cardiovascolari (CVM) esibisce predisposizione familiare, ma la maggior parte dei fattori genetici specifici coinvolti sono sconosciuta. Postulare che rare varianti nei geni nelle vie dello sviluppo cardiaci critici predispongono a CVM, abbiamo sistematicamente esaminati tre geni della proteina ossea morfogenetica (BMP) segnalazione percorso per varianti romanzo. Esonico, sito di splice e regioni non codificanti di geni BMPR1A, BMPR2 e SMAD6 sono stati sequenziati in 90 casi sporadici non correlati di CVM. Una variante non sinonimo (p.C484F) con il previsto impatto funzionale è stato trovato in omologia MAD 2 (MH2) dominio di SMAD6, un inibitore intracellulare della segnalazione BMP. Sequenziamento questo dominio in altri casi 346 di CVM ceduto due ulteriori non-sinonimi di varianti (p.P415L e p.A325T). Gli effetti funzionali delle tre SMAD6 tutte le mutazioni sono stati studiati mediante saggi in vitro di segnalazione BMP. Due varianti di SMAD6 (p.C484F e p.P415L) erano significativamente (p < 0.05) abbassare attività più selvaggio-tipo SMAD6 nell'inibire la segnalazione BMP in un dosaggio di transcriptional reporter. Inoltre, la variante p.C484F aveva una significativamente (p < 0.05) abbassare la capacità di inibire una risposta osteogeniche a segnalazione BMP. Possiamo concludere che la bassa frequenza deleterie varianti in SMAD6 predispongono a CVM. Questo è il primo rapporto di un fenotipo della malattia umana correlato alla variazione genetica in SMAD6...

Una Legame Covalente Dimerized Ricombinante Umano Bone Morphogenetic Protein-15 Variante Identifica Bone Morphogenetic Protein Receptor Tipo 1B Come Un Recettore Di Superficie Cellulare Chiave Su Cellule Di Granulosa Ovarica

Endocrinology. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22294741

Studi genetici hanno identificato bone morphogenetic protein-15 (BMP15) come un regolatore essenziale della fertilità femminile nell'uomo e negli ovini. BMP15 ovocita-derivato è un fattore di crescita noncovalently collegato dimerica mediare i suoi effetti alle cellule somatiche ovariche in maniera paracrina. Sebbene ectodomains recettori capaci di legare BMP15 precedentemente sono stati segnalati, nessuna cella superficie recettori complessi coinvolti in BMP15 segnalazione ha precedentemente stato caratterizzato. Qui abbiamo espresso e purificato ricombinante umani BMP15 varianti di dimero non covalente e covalente. In cellule di granulosa-luteale umane coltivate o COV434 granulosa cellula cellule del tumore mediante dosaggi di transcriptional reporter BMP-reattivo e un Inibina B ELISA sono stati valutati gli effetti biologici di queste varianti BMP15. Caratterizzazione biochimica delle interazioni ligando-recettore è stata eseguita con affinità-etichettatura esperimenti utilizzando [(125) i] iodati BMP15 varianti. Entrambe le varianti di ligando sono state mostrate a forma omodimeri e per stimolare la produzione di Smad1/5/8 di segnalazione e di Inibina B in cellule di granulosa umana in un modo simile. [(125) I]Iodinazione di entrambi ligands è stato raggiunto, ma solo la variante di dimero covalente mantenuto capacità legante del recettore. Il [(variante 125)I]BMP15(S356C) preferenzialmente associato a BMP endogeno del recettore 1B (BMPR1B) e BMPR2 recettori sulle cellule COV434. Associazione esperimenti in cellule COS con sovraespressione di questi recettori ha confermato che il [(variante 125)I]BMP15(S356C) associa a BMPR1B e BMPR2 formando il complesso BMP15 segnalazione. I risultati forniscono la prima prova diretta a qualsiasi specie sull'identificazione di superficie recettori specifici delle cellule per un membro della sottofamiglia dei fattori di crescita ovocita GDF9/BMP15. Il fatto che BMP15 utilizza preferenzialmente BMPR1B come tipo I recettori suggeriscono un ruolo importante per il recettore BMPR1B nella fertilità femminile umana. Il risultato è in linea con la dimostrazione dell'insufficienza ovarica in un soggetto umano recentemente segnalato con un omozigote mutante di BMPR1B perdita di funzione.

Alterazione Di Età-dipendente Di Segnalazione Di TGF-β in Osteoartrite

Cell and Tissue Research. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 21638205

L'osteoartrite (OA) è una malattia della cartilagine articolare, con l'invecchiamento come il principale fattore di rischio. In OA, cambiamenti nei condrociti portano alla distruzione autolitica della cartilagine. Trasformando il fattore di crescita-β ha recentemente dimostrato di segnale non solo via activin receptor-like chinasi 5 (ALK5)-indotto fosforilazione Smad2/3, ma anche tramite la fosforilazione indotta ALK1 Smad1/5/8 nella cartilagine articolare. Nella cartilagine di invecchiamento e OA sperimentale, il rapporto ALK1/ALK5 è stato trovato per essere aumentato, e l'espressione di ALK1 è correlata con la espressione di matrix metalloproteinase-13. Il passaggio di età-dipendente verso Smad1/5/8 segnalazione potrebbe innescare la differenziazione dei condrociti articolari con un fenotipo autolitico.

Regolazione Della Plasticità Delle Cellule Endoteliali Da TGF-β

Cell and Tissue Research. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 21866313

Recenti prove hanno dimostrato che le cellule endoteliali possono avere una notevole plasticità. Mediante un processo chiamato endoteliali e mesenchimali cellule endoteliali di transizione (EndMT) conversione di un tipo di cellule mesenchimale più che può dare origine a cellule quali i fibroblasti, ma anche le cellule dell'osso. EndMT è essenziale durante la rigenerazione di tessuto e lo sviluppo embrionale. È interessante notare, gioca anche un ruolo in condizioni patologiche come la fibrosi di organi come il cuore e il rene. Inoltre, EndMT contribuisce alla generazione di fibroblasti di cancro associato che sono noti per influenzare il tumore-microambiente favorevole per le cellule tumorali. EndMT è una forma di più ampiamente conosciuto e studiato epiteliale-mesenchimale (EMT) di transizione. Come EMT, EndMT può essere indotta da transforming growth factor (TGF)-β. Infatti, molti studi hanno sottolineato l'importante ruolo di TGF-β recettori/Smad segnalazione e downstream target, come repressore trascrizionale lumaca in EndMT. Di targeting selettivo del recettore TGF-β EndMT patologica di segnalazione può essere inibita per il beneficio terapeutico dei pazienti con cancro e fibrosi.

BMP-7 Inibisce Invasione TGF-β-indotta Delle Cellule Di Cancro Al Seno Attraverso L'inibizione Dell'integrina β(3) Espressione

Cellular Oncology (Dordrecht). Feb, 2012  |  Pubmed ID: 21935711

Il fattore di crescita trasformante (TGF)-Superfamiglia β comprende citochine come TGF-β e Bone Morphogenetic Proteins (BMP), che hanno un ruolo fondamentale in una moltitudine di processi biologici. Nel cancro della mammella, elevati livelli di TGF-β sono associati con scarso risultato, considerando che l'inibizione di TGF-β-segnalazione riduce le metastasi. Al contrario, BMP-7 inibisce la metastasi ossee delle cellule di cancro al seno.

TGF-β Nella Progressione Della Malattia Epatica

Cell and Tissue Research. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22006249

Trasformare growth factor-β (TGF-β) è un regolatore centrale nelle malattie croniche del fegato contribuendo a tutte le fasi di progressione della malattia da danno epatico iniziale tramite infiammazione e fibrosi alla cirrosi e hepatocellular carcinoma. Fegato-danni-induced livelli di TGF-β attivo migliorano la distruzione degli epatociti e mediano le cellule stellate epatiche e attivazione dei fibroblasti con conseguente una risposta la guarigione della ferita, tra cui la generazione myofibroblast e deposizione di matrice extracellulare. Essere riconosciuto come una citochina profibrogenic principali, il targeting del pathway di segnalazione di TGF-β è stato esplorato per quanto riguarda l'inibizione della progressione della malattia epatica. Considerando che l'interferenza con la segnalazione di TGF-β in vari modelli animali a breve termine ha fornito risultati promettenti, la progressione della malattia epatica negli esseri umani è un processo di decenni con varie fasi in cui TGF-β o la sua destinazione potrebbe avere esiti favorevoli e sfavorevoli. Abbiamo basato sulla recente letteratura, riassumere il ruolo di arma a doppio taglio diretto cellula-tipo di TGF-β in vari stadi di malattia del fegato. Sottolineiamo che, al fine di ottenere effetti terapeutici, abbiamo bisogno di indirizzare la segnalazione di TGF-β nel tipo di cellula giusta al momento giusto.

Chiave Segnalazione Nodi Di Sviluppo Della Ghiandola Mammaria E Cancro: Integrazione Segnale Smad Nella Plasticità Delle Cellule Epiteliali

Breast Cancer Research : BCR. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22315972

ABSTRACT: Le proteine Smad sono degli intermedi chiavi di trasformare growth factor-beta (TGF-β) nell'omeostasi del tessuto di segnalazione durante lo sviluppo. Perturbazioni nella segnalazione di TGF-β/Smad sono stati implicati nel cancro e altre malattie. Nel nucleo della cellula, Smad complessi attivano programmi transcriptional cella specifici del contesto e del tipo, quindi trasmettere e integrare i segnali provenienti da una varietà di ligandi della superfamiglia TGF-β e altri stimoli nel microambiente delle cellule. Il risultato effettivo di transcriptional e biologico di Smad attivazione dipende criticamente l'integrità genomica e lo stato di modifica del genoma e della cromatina della cella. Le SMAD citoplasmatici e nucleari possono inoltre modulare l'attività di altri enzimi quali fattori di microRNA-elaborazione e trasduttori di segnale. In caso di cancro al seno, il ruolo di SMAD nella plasticità epiteliali, interazioni tumore-stroma, invasione e metastasi sembra di particolare importanza.

Segnalazione Wnt/β-catenina Cambia C2C12 Myoblast Proliferazione E Differenziazione Di Indurre L'espressione Id3

Biochemical and Biophysical Research Communications. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22326917

Segnalazione Wnt canonico gioca un ruolo importante nella regolazione della differenziazione e proliferazione cellulare. In questo studio, riportiamo quello inibitore della differenziazione (Id) 3 è un Wnt-inducible gene in mouse C2C12 myoblasts. Wnt3a indotta Id3 espressione in modo β-catenina-dipendente. Bone morphogenetic protein (BMP) indotta anche potentemente Id3 espressione. Tuttavia, espressione Id3 Wnt-indotta si è verificato indipendente della via BMP/Smad. Studi funzionali hanno mostrato che Id3 deplezione in cellule C2C12 ridotta proliferazione cellulare indotta da Wnt3a e attività della fosfatasi alcalina, un marker precoce di cellule degli osteoblasti. ID3 deplezione elevata induzione myogenin durante la differenziazione miogena e Wnt3a parzialmente vedenti soppressa myogenin espressione in cellule C2C12. Questi risultati suggeriscono che Id3 è un importante gene Wnt/β-catenina indotta nella determinazione di destino delle cellule myoblast.

Ruolo Chiave Per La Modifica Della Proteina Di Ubiquitin Nella Trasduzione Del Segnale TGFβ

Upsala Journal of Medical Sciences. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22335355

Astratto della superfamiglia β (TGFβ) fattore di crescita trasformante di molecole di trasduzione del segnale interpreta ruoli cruciali nella regolazione del comportamento delle cellule. TGFβ regola la trascrizione del gene attraverso le proteine Smad e segnali tramite vie non-Smad. Il pathway TGFβ è strettamente regolato e perturbazioni portano alla tumorigenesi. Diversi componenti del pathway sono noti per essere mirate per degradazione proteosomale via ubiquitination da E3 ligasi. Puffi sono ben noti regolatori negativi del TGFβ, che funzionano come E3 ligasi reclutato da adattatori come-SMAD. TGFβ segnalazione può essere rafforzata anche da E3 ligasi, quali Arkadia, che repressori per la degradazione di destinazione. Sta diventando chiaro che E3 ligasi target spesso percorsi multipli, quindi che agiscono come mediatori di segnalazione cross-talk. Regolamento via ubiquitination coinvolge una complessa rete di E3 ligasi, adattatore proteine ed enzimi deubiquitinating (DUBs), la recitazione rimuovendo ubiquitina dai suoi obiettivi ultimi. È interessante notare che, anche modifiche non degradazione ubiquitina sono noti per giocare ruoli importanti nella segnalazione di TGFβ. Ubiquitin modifiche quindi giocano un ruolo chiave nella trasduzione del segnale TGFβ, e in questa recensione ci forniscono una panoramica dei giocatori noti, concentrandosi sui recenti progressi.

Regolamento Della Funzione Di Barriera Endoteliale Di TGF-β Tipo I Recettori ALK5: Ruolo Potenziale Dei Meccanismi Contrattili E Proteine Di Scossa Di Calore 90

Journal of Cellular Physiology. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 21465483

Citochina multifunzionale trasformando growth factor-beta (TGF-β1) svolge un ruolo critico nella patogenesi dell'infiammazione polmonare acuta controllando permeabilità endoteliale monostrato. TGF-β1 regola le funzioni delle cellule endoteliali (CE) via due distinti recettori, activin receptor-like chinasi 1 (ALK1) e activin receptor-like chinasi 5 (ALK5). Il ruolo preciso di ALK1 e ALK5 nella regolazione della disfunzione dell'endotelio polmonare indotta da TGF-β1 principalmente rimanga sconosciuto. Riportiamo ora che l'infezione adenovirale con ALK5 costitutivamente attive (caALK5), ma non caALK1, induce la retrazione del CE e che questo recettore controlla prevalentemente permeabilità CE. Dimostriamo che ubiquitarie ALK5 e fosforilata heat shock proteina 27 (fosfo-Hsp27) specificamente accumulano nella frazione del citoscheletro, che parallels con microtubule collasso, actina corticale smontaggio e aumento della permeabilità CE. Abbiamo trovato che ALK1 e ALK5 interagiscono con proteine di scossa di calore 90 (Hsp90). Inoltre, il radicicol inibitore Hsp90 (RA) impedisce l'accumulo di caALK5 ubiquitarie e fosfo-Hsp27 nella frazione citoscheletriche e ripristinare la ridotta permeabilità CE indotta da caALK5. Ipotizziamo che specifica traslocazione di ubiquitarie ALK5 recettore nel vano del citoscheletro a causa della sua mancanza di degradazione è il meccanismo che causa la divergenza di caALK1 e caALK5 di segnalazione.