인간의 신경 세포를 분화에 APP695 전사 수준에서 60 Hz 전자기장 노출의 효과

Bioelectrochemistry (Amsterdam, Netherlands). Jul, 2002  |  Pubmed ID: 12049751

역학 연구는 매체 높은 매우 낮은 주파수 (ELF) 전자기장 (EMF) 노출 귀착되 었 다가지고 있는 기본 직업으로 노동자 알츠하이머병 (AD) pathogenesis의 증가 위험이 있습니다 제안 했다. 세포 수준에서 엘 프 EMF 노출 및 광고 간의 연결의 가능성을 조사 하 고의 첫 번째 단계로, 우리는 차별화 IMR 32 신경 세포를 이용 했다. 이중 맹 검 실험 IMR 32 셀 분화 (분화 중간에 부 화 후 2, 10 일, 16 일)의 3 세에서 4 h 동안 50, 100, 200 microT 60hz의 주파수에서의 자기장 강도에 노출 됐다. 함수 발생기 및 사내 내장된 파워 앰프-60hz 정현파 신호에 의해 구동 맞춤 헬름홀츠 코일 설치 프로그램을 사용 했습니다. 노출 된 세포에서 추출 된 총 RNA agarose 젤 전기 이동 법으로 분리 되었고 북부 교 잡에 대 한 나일론 막 전송. APP695 RNA 프로브 Digoxygenin 표시 된 엘 프 EMF 노출에 대 한 응답에서 APP695 mRNA 수준에서 변화를 감지 사용 했다. 여기에 보고 된 결과 APP695 유전자 전사 IMR 32 차별화 시대 뿐만 아니라 자기장 노출 사이의 어떤 관계에 대 한 지원 제공. 이 연구 엘 프 EMF 노출 및 광고 발현 세포 수준에서 연관성의 가능성을 조사 하는 향한 첫 번째 단계를 구성 한다.

인간의 신경 (IMR-32) 셀 라인의 생 화 학적 및 Electrophysiological 분화 프로필

In Vitro Cellular & Developmental Biology. Animal. Sep, 2002  |  Pubmed ID: 12605539

인간의 신경 세포 선 (IMR-32) 때 차별화 된, 인간의 대뇌 피 질 및 특정 조직 문화 조건, 양식 세포내 fibrillary 소재, 일반적으로 알 츠 하이 머 병으로 영향을 받는 환자의 두뇌에서 관찰에서 큰 계획 싫어 하지. 우리의 목적은 체 외 자기장 노출 연구 시스템으로 차별화 된 사용 IMR 32 셀 것 이다. 우리 이전에 쉬고 막 잠재력 개발에 관하여 murine 신경 (N1E-115) 세포의 체 외 분화를 공부 했다. 이 연구의 목적은 우리의 조사 IMR 32 셀을 확장 하는. Electrophysiological (쉬고 막 잠재력, V(m)) 및 생 화 확 적인 (신경 관련 enolase 활동 [NSE]) 측정 16 d 기간에 대 한 모든 2 d를 촬영 했다. Cytometry 함께 전압에 민감한 oxonol 염료 v(m)에 상대적인 변화를 측정에 사용 되었다. 기계적 셀 분리로 인해 어떤 효과 배제 하기 V(m) 직접 하지 confocal 디지털 이미징 현미경 함께 느린 potentiometric 염료 (tetramethylrhodamine 메 틸 에스테 르)를 사용 하 여 측정 했다. 신경 관련 enolase 활동 2 인-d-glycerate 240에서에서 phosphoenolpyruvate의 생산에 따라 측정 되었다 nm. 우리의 결과 IMR 32 체 외 분화 NSE 활동의 증가 특징으로 되지 함께 쉬고 막 잠재력 개발을 나타냅니다. 이 찾는 IMR 32 셀의 생 화 학적 형태학 및 electrophysiological differentiations에 대 한 경로 서로 독립적 나왔다.

내 피 세포를 정화 하 고 방지할 파생 및 미 발달 줄기 세포에서 체 외 확장

Endothelium : Journal of Endothelial Cell Research. 2003  |  Pubmed ID: 14741848

배아 줄기 (ES의) 세포 분화 이벤트를 공부 하 고 미래의 재생 치료 응용 프로그램에 대 한 다양 한 특수 세포 생성의 방법을 개발 하 고 우수한 체 외 시스템으로 제공 합니다. 미 발달 줄기 세포 사용과 관련 된 두 가지 장애물 등 차별화 된 세포의 분리 균질 인구 (a) 및 셀 인구가 더욱 확산 수 있는 차별화 된 (b) 말기를 얻는. 여기에서, 저자 매우 순화 된 인구를 생성 하 여이 두 가지 장애를 극복 했다 그들은 두 가지 방법을 설명 (> 96%) 적극적으로 확산의 마우스 ES 세포의 내 피 세포. 간단히, 60000 ES 세포 진행 셀 유도/확장 및 300만 이상의 내 피 세포 생성 두 셀 격리 절차의 세 가지 단계를 통해. 이 ES 파생 된 내 피 세포는 몇 가지 일반적인 내 피 마커를 표현 하는 그들은 혈관 내 피 세포와 비슷한 특성 표시, 뿐만 아니라 3 차원 (3D) 콜라겐 형식에서 복잡 한 microvessels 내가 젤, 그리고 그들은 그들의 cytoskeleton 기계적인 힘에 대 한 응답에서을 다시 구성 하는 기능을 유지 그들은 2 차원 (2D) tubelike 구조를 형성 합니다. 우리의 연구 결과 유전자 조작 ES 세포 또는 피더 세포와 coculturing ES 세포 마우스에서 동종 내 피 세포의 방지할 인구를 가져올 수 나타냅니다.

Pluripotency와 초기 발달 이벤트의 이해에 이르게 진 식 배아 줄기 세포의 프로 파일링

Biology of Reproduction. Dec, 2004  |  Pubmed ID: 15140800

미 발달 줄기 세포는 무한정 정상적인 karyotype undifferentiated 상태로 유지 하는 문화에 전파 하는 능력에 의해 특징입니다. 그들은 본문에서 어떤 특수 한 세포 유형으로 분화의 가능성이 있다. Pluripotency와 초기 개발 관련 transcriptional 프로필에 대 한 이해는 더 나은 그들의 발달 잠재력을 누르고 또한 그들의 undifferentiated 표현 형을 유지 하는 데 필요한. 현재, 여러 기술이 미 발달 줄기 세포의 유전자 식 프로필을 확인 하는 데 사용에 있습니다. 이 검토 마우스 및 인간의 세포에서 줄기 세포의 유전자 식 분석에 microarray 및 다른 방법을 사용 하 여 생성 된 정보를 요약 합니다. 우리는 또한 특정 접근 더 인간 배아 줄기 세포의 만능 자연 해독을 겨냥 한 미래 연구에 유용한 논의.

Transcriptional 인간 배아 줄기 세포의 초기 분화 이벤트의 프로 파일링

Biochemical and Biophysical Research Communications. Oct, 2004  |  Pubmed ID: 15369773

현재, 거기에 인간 배아 줄기 세포 (hESCs) 효율적으로 명백한 분화 이전에 신호 이벤트를 제어 하는 유전자의 이해의 부족으로 인해 가능 하 게 한 특정 셀 종류를 생산 하는 없는 차별화 전략. sed HepG2 세포 pluripotent 마커 Hescs의 쿼리 유전자 발현을 유지 하면서 마우스 ES 세포의 초기 분화 유도 매체 (MEDII)을 조절. 50 %Medii 매체 부착 한 Hescs의 치료 셀의 형식으로 마우스 배아의 유전자 발현의 기본 연속 단계 세포와 유사한 분화에 영향을. MEDII 치료 최대 조절 TDGF1 (Cripto), 마우스 배아 및 TGFB1/NODAL 신호 통로의 핵심 구성 요소에서 앞쪽에 후부 축과 mesoderm 형성에 필수적인 유전자. LEFTYA, NODAL/TDGF1 신호 앞쪽에 내장 endoderm 단위로의 길 항 근은 다운 MEDII 처리로 레 귤 레이트 된 FST, 관련된 INHBE1 통로 통해 mesoderm 유도의 억제제입니다. 요약 하자면, TGFB1/NODAL 통로 기본 행진 및 mesoderm 형성 및 MEDII를 사용 하 여 중요 한, 우리 pluripotent 유전자 발현 (POU5F1, NANOG) SSEA-4 마커 mesoderm 체 외의 더 균일 한 형성으로 이어질 수 있습니다 TGFB1/NODAL 통로에서 유전자를 조절 하는 동안 유지 하는 체 외 세포 인구를 생성 하기 위한 방법을 제시.

비교 Transcriptional의 프로 파일링 두 인간 배아 줄기 세포 라인

Biotechnology and Bioengineering. Nov, 2004  |  Pubmed ID: 15493035

인간 배아 줄기 세포 (ESCs) self-renew 많은 다른 세포 유형 생산 하 고 자신의 능력으로 인해 엄청난 관심을 생성 한. 해당 제어 pluripotency와 초기 개발 microarray 기술와 함께, 인간의 ESCs 고용 해독 분자 메커니즘에 기반 하는 시스템 접근에 대 한 강력한 도구를 제공. 최근 작품은 "stemness" 및 pluripotency 마우스 및 인간의 ESCs 다른 실험 및 분석 방법에 따라 정의에 집중 했다. 우리 두 인간의 ESCs (BG01 및 H1) 농축 된 유전자의 목록을 얻으려면에서 얻은 데이터 집합 간의 엄격한 직접 비교 ESCs 보고 혼합된 선형 모델 통계적 접근법을 사용. 또한, 다른 pluripotent 인구 BG01 Escs에서 파생 된 사용 하는 우리 고려 pluripotency 유지에 중요 한 유전자의 목록을 가져옵니다. 총 133 유전자 3 pluripotent 인구 사이 겹쳐. 133 유전자의 대부분은 세포 주기 조절, 신호, 그리고 전사의 규제의 핵심 기능 범주 아래 분류 했다. 표현 하는 핵심 유전자 Oct4, Sox2, LeftyA, 및 Fgf2 했다. 또한 모든 세 인구에 농축 FLJ10713, 인코딩 표시 되었습니다 이전 연구에서 마우스 ESCs 체를 소유 하 고 클러스터도 밀접 하 게 인간의 Escs에 oct4와 알 수 없는 함수 가상 단백질 유전자입니다. 각 pluripotent 인구에 많은 유전자가 있었더라도 그들은 유사성 pluripotency 정의 기능 지능이 기반 공유. 우리의 연구의 중요성 균일 한 엄격한 분석 방법을 사용 하 여 더 나은 정의 pluripotency 생물 학적 유사성을 공유 하는 줄기 세포 인구의 직접적인 비교에 대 한 필요성을 밑줄. 우리의 연구 결과 pluripotency의 유지 보수에 대 한 중요 한 의미를가지고 개발에 다양 한 재생 응용 프로그램에 대 한 차별화 전략을 감독.

실시간 및 다운스트림 셀룰러 응답 순차적 조사에 대 한 단일 자기장 노출 시스템

Bioelectromagnetics. Jan, 2004  |  Pubmed ID: 14696050

실시간으로 막 잠재적인 또는 이온 플럭스 변화 매우 낮은 주파수 (ELF) 전자기장 (EMF) 노출 추가 다운스트림 유전자 전사 응답을 연관 시킬 수 있어야 우리는 대칭 원형 코일의 쌍으로 이루어진 실험 시스템을 고안 했습니다. (실시간 신호) 거꾸로 현미경 스테이지 뿐만 아니라 내부 통제 환경 incubators (유전자 전사 엔드 포인트)이이 시스템을 사용할 수 있습니다. 시스템 포함 독특한, 사용자 정의 눈부신 실험 직원 및 전력 증폭기에 대 한 상자를 전환 했다. 우리 보고 본 설계 및 선형 자기장 분포, 현미경 목표 렌즈 간섭에 대 한 보상을 포함 한 체 외 엘 프 EMF 노출 연구에서 중요 하 게 고려 하는 매개 변수 관련 시스템의 열 코일, 효과 및 신호의 고조파 콘텐츠.

인간 배아 줄기 세포의 유전 무결성을 유지 합니다

Nature Biotechnology. Jan, 2005  |  Pubmed ID: 15637610

붉은 털 미 발달 줄기 세포에서 부착 한 신경 조상 인구에 일정 한

Stem Cells and Development. Apr, 2006  |  Pubmed ID: 16646666

붉은 털 및 인간 배아 줄기 세포 (ESCs)은 비슷한 붉은 털 ESCs 정제 줄기 세포 치료를 위한 적절 한 전 임상 allograft 모델 만들기. 신경 유도 과정은 확장 가능 하 고 ESCs 또는 nonneural 셀을 오염에서 무료로 하는 경우 붉은 털 ESC 파생 신경 progenitors (NPs) 전 임상 응용 프로그램에서의 사용이 향상 됩니다. 이 연구에서 우리가 일시적인 유전자 발현을 측정할는 간단한 부착 한 피더 무료 문화를 사용 하 여 균일 한 Nps에 차별화 된 붉은 털 ESC의 변화. Nps는 신경 관련 유전자의 상당한 업 규제와 pluripotency 유전자의 downregulation를 전시. 또한, Hu, MAP2, Tuj1의 식을 보여주는 NPs post-mitotic 신경 세포를 형성할 수 있습니다. 이 연구는 신경 세포 기반 치료의 전 임상 시험에 대 한 부착 한 영장류 Nps를 생산 하는 간단 하 고 확장 가능한 수단을 나타냅니다.

인간 배아 줄기 세포 표면 마커 셀

Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2007  |  Pubmed ID: 18453248

인간 배아 줄기 세포 (hESCs)의 만능 자연 본문에 모든 셀 형식을 형성 하는 그들의 잠재력을 기반으로 합니다. 감독된 차별화 전략에 사용 하기 전에 이러한 세포 특성화 철저 하 게 해야 합니다. Glycoproteins과 세포 표면에 존재 하는 탄수화물의 많은 hESCs pluripotent 윤곽을 그리 다 하는 수단을 특성화를 위한 우수한 기회를 제공 하 고 차별화 된 셀 형식. 다양 한 탄수화물과 함께 무대 관련 배아 항 원-4 (SSEA-4) 탄수화물 연계에 대 한 그들의 특이성에 따라 14 lectins 패널 hESCs 다른 잠재적인 pluripotent 표식에 대 한 검사를 선정 되었습니다. 이러한 연구 흐름 cytometry 부착 한 식민지에서 바인딩 현지화 하 여 immunocytochemistry 하 여 바인딩 정량에 의해 달성 되었습니다. 우리가 특정 lectins 백분율 바인딩 및 바인딩 이러한 lectins 지역화 SSEA 4의 유사 하기 때문에 Hescs의 만능 상태와 관련 된 마커로 사용할 수 있습니다 것으로 나타났습니다. 이 선물 옵션 pluripotent Hescs의 체계적인 분류와 구별을 위한 차별화를 함께 glycan 프레 젠 테이 션을 기반으로 hESC 형식을 구분 합니다.

인간의 신경 조상 세포 급지대 무료 문화에서 미 발달 줄기 세포에서 파생 된

Differentiation; Research in Biological Diversity. May, 2008  |  Pubmed ID: 18177420

인간의 신경 progenitors (hNP) 문화에서 (hES) 인간 배아 줄기 세포에서 파생 피더 세포 또는 바른된 미디어 사용 하 여 보고 되었습니다. 이 프로세스를 제어 하는 요소에 대 한 요구를 정확 하 게 조사 하는 기능을 제한 하는 시스템에 정의 되지 않은 구성 요소를 소개 합니다. 또한, 비 인간 기원의 피더 세포의 사용 제한의 임상 유용성 zoonotic 전송에 대 한 가능성을 소개 합니다. 여기 우리 보고 hNP hES 세포에서 생산 하 고 다양 한 미디어 구성 요소는 과정에 참여의 결과 테스트 하려면 급지대 없는 시스템. 5 개의 프로토콜을 사용 하 여 정의 미디어 구성 요소 hNP 생성의 효율성에 대 한 비교 했다. 이 분석을 바탕으로, 우리는 기본적인 섬유 아 세포 성장 인자 (FGF2), N2 보충 교재, 비 필수 아미노산 (NEAA) 및 노크 아웃 역할 논의 hNP 생성의 과정에서 혈 청 교체 (KSR). 모든 프로토콜 Oct4/POU5F1 식의 다운 레 귤 레이 션을 주도 (90.5%에서 < 3%), 최대 레 귤 레이 션을 다양 한도. n 2만 하지 KSR와 NEAA 미디어 신경 조상 마커의 상당히 높은 문화를 생산 (p < 0.05) 신경 조상 마커 무사시 1 (MSI1)의 식. 이러한 셀의 약 89%가 Nestin (NES) + 3 주 후에 그들은 격 증 하지 않았다 하지만. 반면, KSR와 NEAA 보완 차별화 미디어 생산 적은 NES + (75%) 셀, 하지만이 세포 증식, 했다 그리고 이루어져 다섯 구절에 의해 문화 &gt; 97% 선 + 셀. KSR NEAA 보충 초기 차별화를 강화 하지 않았다 하지만 hNP 셀 문화 확산 홍보 했 어 나왔다. 이 hNP 세포의 큰 인구를 생성 하는 데 적합 한 견고 하 고 반복 가능한 효율적인 차별화 시스템 귀착되 었 다. 초기 인간 신경 분화에 분자 및 생화학 적인 메커니즘의 추가 연구를 용이 하 게 하 고 잠재적으로 급지대 레이어에서 zoonotic 전송의 걱정 없이 사용 하는 치료에 대 한 균일 한 신경 세포를 생산 합니다.

핵 인자 나 Isoforms 이다에 인간의 신경 Progenitors의 차별화 중 유전자 발현 조절

Stem Cells (Dayton, Ohio). May, 2009  |  Pubmed ID: 19418463

비록 이다 정상적인 두뇌 기능 및 개발 및 neuropathological 상태, 신경 퇴행 성 질환과 관련 된 neuroinflammation 등의 진행에 중요 한 사이토 차별화 중 유전자 발현 제어 메커니즘 이해 가난 하 게 된다. 지금까지 여러 가지 신호 경로 사이토 차별화, JAK 합계, 뼈 morphogenic 단백질-2/Smads, 노치 등 규제를 표시 했다. 더 최근에, 핵 인자-1 (생-A,-B,-C와-X)의 가족 생 A와 척추 텍 개발 규제에 연루 됐다-b gliogenesis 발병을 제어 합니다. 여기, 우리 신경 progenitors (NP)와 연속적 이다 쪽으로 줄기 세포의 분화의 체 외 모델 개발. 줄기 세포에서 progenitors로의 전환 삭스 2, Oct4, 무사시 1 등 하는 마커의 식 프로필에서 예상 된 변화에 의해 동행 했다. 그 후, 생성 된 이다 적절 한 형태, 증가 조미료 통풍 관 및 표식 유전자 발현 특징 했다. 식 Nfis의 기능을 공부 하 고이 체 외 분화 모델을 사용 했습니다. 차별화 NP 활성화 된 생 A의 식을 동안 줄기 세포만 배경 수준의 NFIs, 표현 하는 재미 있게 더 중요 한 것은 생 X 식 이다 쪽으로 차별화의 나중 단계 동안 유도 되었다. 또한, 생-X와-C 교 fibrillary 산 성 단백질 및 비 단백질 산 성 고 풍부한 단백질 cystein 같은 1, 차별화의 나중 단계에서 이다 마커는 표현을 위한 필요 했다. 우리는 Nfis의 식 프로그램 이다, 생-X와-C 차별화의 후반 단계에서 astrocytic 마커의 식 제어의 분화 하는 동안 실행을 결론 지었다.

Bioinspired 고분자 Pluripotent 줄기 세포 운명 결정에 있는 역할

Regenerative Medicine. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19580405

인간의 pluripotent 줄기 세포, 배아 및 유도 만능 줄기 세포를 포함 한 세포 유형 치료 응용 프로그램에 대 한 유용한 생성 하는 그들의 기능 때문에 많은 질병의 치료에 대 한 엄청난 잠재력을 보유. 현재, 많은 줄기 세포 문화 전파와 차별화 시스템 자기 갱신과 차별화를 홍보 하기 위한 동물에서 파생 된 구성 요소를 통합 합니다. 그러나, 이러한 구성 요소를 사용은 노동 집약적인, 운반 xenogeneic 오염 위험 하 고 복제 하기 어려운 손상 된 실험 결과 생성 합니다. 생체 재료의 관점에서 줄기 세포의 자체 재생을 위한 적절 한 물리적, 화학적 신호를 제공 하 동물 및 셀 프리 biomimetic microenvironment의 생성 또는 이상적인 것이 특수 한 세포 유형으로 차별화. 이 검토 선물 전파를 지 원하는 천연 및 합성 폴리머를 사용 하 여 줄기 세포의 분화 요인 줄기 세포 운명의 결정에 대 한 책임에 대해 분명히 이해를 얻기 위해 시도.

줄기 세포 기반 모델 및 신경 퇴행 성 질환에 대 한 치료

Critical Reviews in Biomedical Engineering. 2009  |  Pubmed ID: 20528730

여러 신경 퇴행 성 장애 취소할 손상과 전문된 신경 세포 또는 신경 세포의 인구의 부적 절 한 작동에서 결과 일반적으로. 이러한 장애 neurodegeneration 진행을 변경할 수 있습니다 하지 않는 한 이미 overburdened 의료 시스템에 기여할 가능성이 있다. 예측의 부족에 의해 이해 신경 퇴행 성 세포 생물학의 진보를 방해 하 고 일부 관련 세포 모델을 주장 것입니다. 또한, 새로운 약물을 개발 하 고 손상 된 신경 세포의 수리 또는 교체에 대 한 방법을 결정 하는 데 필요한 연구는 적절 한 체 외 인간 신경 세포 기반 모델의 부족에 의해 심각 하 게 방해 된다. 이 컨텍스트, pluripotent 줄기 세포 및 신경 progenitors 무제한 확산을 포함 하 여 해당 속성에 다른 셀 유형과 셀-쉽게 사용할 수 소스를 생성 하는 소성 포즈 ex vivo 주 문화 또는 신경 퇴행 성 세포 생물학 및 화학 물질의 치료 또는 cytotoxic 영향을 분석 하는 능력의 우리의 이해에 기여에 설립된 불멸 하 게 셀 라인에 우수한 대안마약과 xenobiotics. 이러한 장애의 신경 죽음의 기본 "창세기"를 정의 하는 많은 질문 또한 미토 콘 드 리아 기능 장애에 대 한 중요 한 역할을 제안 하는 증거, 답이 남아. 줄기 세포, 신경 progenitors 및 엔지니어링 된 성인 세포 평가 개발 신경 및 신경 퇴행 성 프로세스에 유용한 통찰력을 제공할 수 있습니다. 마지막으로, 신경 퇴행 성 질환에 대 한 세포 및 유전자 기반 치료제의 조합에 대 한 가능성도 논의 했다.

인간의 Pluripotent 줄기 세포 전파에 대 한 인간의 섬유 아 세포에서 파생 된 세포 외 매트릭스 구성 요소 특성화

Acta Biomaterialia. Dec, 2010  |  Pubmed ID: 20659593

우리 연구소에서 최근 연구 acellular 기판 성공적으로 인간의 섬유 아 세포에서 생성 된 인간의 pluripotent 줄기 세포 (hPSCs)를 undifferentiated 상태로 연장된 기간에 대 한 유지는 것으로 나타났습니다. 더 나은 특성화를 목표로 우리 마우스 배아에서 세포 외 기질 (ECM) 단백질 식별 proteomic 분석 실시-고 두 인간의 섬유 아 세포 파생 acellular 기판. 우리의 연구 식별 heparan 황산 proteoglycan (HSPG)이 기판 및 immunocytochemical 분석의 핵심 구성 요소 HSPG proteomic 분석을 통해 식별 된 다른 ECM 단백질의 존재를 확인 합니다. 서피스를 개발 하는 우리의 시도 모방 fibroblast 입금 ECM 및 그들의 자기 갱신 기능, HSPG 및 기타 핵심 ECM 단백질으로 구성 된 기판 공식화 되었고 hPSC 자기 갱신의 기능에 대 한 평가. 이러한 기판에서 유지 관리 하는 WA09 및 BG01v hPSCs 전시 pluripotency, (i) 등의 여러 특성 꽉 식민지 형성 일반적인 줄기 세포 형태학; (알칼리 성 인산 가수분해 효소, SSEA3, SSEA4 및 immunocytochemical 분석; 기반 Oct4 (iii) 긍정적인 표현 2) 긍정적인 표현 (iv) POU5F1, NANOG, SOX2 mRNA 식; 그리고 (v) 체 외 분화 및 세균 레이어 관련 마커의 식. 우리의 연구는 또한 자체 않는다 하 여 HSPG hPSC 자기 갱신을 지원 하지, HSPG 및 fibronectin 기판은 Hpscs의 undifferentiated 전파에 대 한 충분 공개. 이러한 연구 synergistically 접착 및 신호 경로 hPSC 자기 갱신에 대 한 책임의 활성화를 촉진 하는 기판에 적절 한 ECM 구성 요소 식별을 위한 기초를 형성 합니다.

Decellularized 인간 기판에 인간의 배아 및 유도 만능 줄기 세포의 안정적 전파

Biotechnology Progress. Jul-Aug, 2010  |  Pubmed ID: 20730767

인간 배아 줄기 세포 (hESCs)를 포함 하는 인간의 pluripotent 줄기 세포 (hPSCs)와 인간 유도 만능 줄기 세포 (hiPSCs) 재생 생물 의학 치료에 대 한 잠재적인 소스 및 초기 개발 공부를 위한 모델 시스템으로 엄청난 관심을 얻고 있다. 전통적으로, 마우스 미 발달 섬유 아 세포 Hpscs의 지속적인된 전파에 대 한 지지가 피더 레이어로 사용 되었습니다. 그러나, nonhuman 파생 된 지류를 사용 하 여 hPSC 문화에 실험 결과에서 xenogenic 오염, 노동 최고값과 변화 가능성에 대 한 우려를 제공합니다. 이러한 문제 중 일부 주소 지정으로 우리 보고 급지대 무료 기질 (ECM)에 세 개의 서로 다른 Hpscs의 전파-기반 인간 섬유 아 세포에서 파생 된 기판. Hpscs이이 설정에서 전파 체 외 분화 및 진 식 패턴 hPSCs fibroblast 급지대 레이어에 직접 경작에서 식민지 형태학, pluripotency 단백질 마커의 식, trilineage을 포함 한 여러 기준에 의해 구별할 수 있었다. 또한, hPSCs 후에이 설정 15 구절 분석 하면 정상적인 karyotype 유지. 이 ECM 기반 문화 시스템 개발 humanized 전파 시스템 안정적인 Hpscs의 생산에 대 한 연구 및 치료 적 응용 프로그램에 대 한 파생 상품의 개발에 중요 한 요소가 될 수 있는 hPSC 전파 방법에서 중요 한 사전입니다.

간접 Co-culture 시스템에 인간의 배아 및 유도 만능 줄기 세포의 전파

Biochemical and Biophysical Research Communications. Mar, 2010  |  Pubmed ID: 20117095

우리가 개발 하 고 두 셀 종류의 완전 한 분리를 유지 하면서 인간의 섬유 아 세포와 문화 매체의 실시간 컨디셔닝 수 있는 인간의 pluripotent 줄기 세포 (hPSC) 전파의 미소 poly(ethylene terephthalate) 간접 co-culture 멤브레인 기반 시스템의 유효성을 검사 합니다. 인간 배아 줄기 세포 (hESC) 라인과 인간 유도 만능 줄기 세포 (hiPSC) 라인의 전파 및 pluripotent 특성 장기 문화에이 시스템에서 공부를 했다. 우리 보고 게재와 간접 co-culture에 의해 세포 막에 교양 hPSCs hPSCs fibroblast 급지대 레이어에 직접 경작에서 여러 조건을 사용 하 여 구별할 수 있었다. 따라서이 co-culture 시스템 hPSCs 및 피더 세포의 혼합을 방지 하면서 연속 매체 컨디셔닝 손쉬운 줄기 세포 확장 시스템을 제공 하는 hPSC 문화 방법에서 중요 한 사전 이다. 막 문화 이렇게 신기한 급지대 셀 및 co-culture를 사용 하 여 다른 세포 유형으로 분화 연구의 테스트 가능 하 게 됩니다 그리고 단계적된 분화 프로토콜에 대 한 문화 상황의 stepwise 변화를 단순화.

ATR 및 ATM에 이중 가닥 브레이크 의존도 동적 인간 배아 줄기 세포와 신경 하위 항목 복구

PloS One. 2010  |  Pubmed ID: 20368801

DNA 이중 가닥 브레이크 (DSB) DNA 손상의 가장 독성 형태입니다. 연구 개발 하는 동안 DNA 수리 특성화 목표로 그 동종 재조합 복구 (HRR)는 만능 세포 nonhomologous 끝을에 지배 되 (NHEJ)에 가입 하는 체세포 분화에 비해 더 중요 한 것이 좋습니다. 우리는 인간 배아 줄기 세포 (hESCs), 그리고 신경 세포 체 외 파생 DNA 이중 가닥 브레이크 (DSB) 수리의 품질과 DNA 손상 반응 (DDR) 특징입니다. 전리 방사선-유도 foci (IRIF)의 해상도 DSB 수리 대리로 서 사용 되었다. 감마 H2AX foci의 해상도 hESCs 신경 progenitors (NPs)에 비해 더 느린 속도로 발생 하 고 아마도 더 복잡 한 DSB의 반사 이다 Hescs의 복구. 또한, 활성 동종 재조합 복구 (HRR)을 나타내는 RAD51 foci의 해상도가 보였다 Nps로 hESCs HRR에 대 한 높은 능력을가지고 되기 반면 이다 안 수 있습니다. 중요 한 것은, ATM 니 foci 형성 이다, 하지만 hESCs, DDR은 이러한 셀에 서로 다른 제안에 대 한 중요 한 표시 했다. 이다에서 ATM 니 차단 뿐만 아니라 형성을 방해 하지만 완전히 미리 형성한 수리 foci 분해. SiRNAs ATR, 그 hESCs 연루에 대 한 타겟 DSB 수리 규제에 대 한 ATM 보다는 ATR에 의존 하 고 카페인 Hescs의 능력을 IRIF를 폐지 했다. 이 관계는 동적으로 차별화 된 셀으로 변경. 흥미롭게도, 이다에서 DNA PKcs 니 (그리고 아마도 비 동종 endjoining [NHEJ])의 저해 둔화 IRIF 해상도 hESCs 하지 않았다, 그러나 그 수리 Hescs의 제안 사용 되지 않습니다 DNA-PKcs. 모두 우리의 결과 보여 hESCs 이다 비판적으로 어떤 부분에 DNA PKcs 무관 NHEJ에 대 한 현금에 의존 하는 반면 주로 ATR 종속 HRR은 효율적인 DSB 복구 했습니다.

서로 다른 Lectin 신경 조상 세포의 고립에서 인간 배아 줄기 세포와 파생 상품 보조 프로 파일을 바인딩

PloS One. 2011  |  Pubmed ID: 21850265

인간 배아 줄기 세포 (hESCs)와 그들의 차별화 된 자손 정상 배아 발달 중의 중요 한 변경/이벤트 조사에 대 한 허용. 현재 대부분 연구의 분화 줄기 세포와 약간의 이용으로 발생 하는 변경 셀 표면 glycosylation 패턴의 변화에 대 한 알려져 있다 proteinacous에 초점을 맞추고. 세포 계보 특정 glycans의 유지 관리, 증식 및 분화에 그들의 역할을 이해 수 있습니다. 또한, 이러한 glycans 셀의 동질적인 집단의 격리 표식으로 사용할 수 있습니다. 8 Biotinylated lectins 패널을 사용 하 여, hESCs hESCs 파생 된 인간의 신경 progenitors (hNP) 전지와 hESCs 파생 엽 조상 (hMP) 셀의 glycan 식을 조사 했다. 우리의 목표는 hNP 셀에 대 한 고유 하 고 해당 lectins를 사용 하 여 셀 격리에 대 한 glycans를 식별 하는. Cytometry와 immunocytochemistry는 각 세포 유형에 표현과 glycans, 지역화를 각각 결정 하 사용 되었다. 이러한 결과 glycan 식 Hescs의 분화에 따라 변경 하 고 신경 및 중간 엽 혈통에 대 한 다른 보여 줍니다. 예를 들어, PHA L lectin의 바인딩에 낮은 hESCs (14±4.4%) 하지만 상당히 높은 차별화 된 hNP 셀 (99±0.4%)과 hMP 셀 (90±3%). 3 Lectins: VVA, DBA 및 LTL hESCs hMP 셀에서 낮은 바인딩 하지만 상당히 높은 바인딩 hNP 셀에 있다. 마지막으로, VVA lectin 바인딩에 hNP 셀 hESCs hNP 전지와 hMP 셀의 혼합 된 인구에서 격리 사용 되었다. 이러한 인간의 줄기 세포 계보 glycan 식 비교 고 상당한 차이 식별 하는 첫 번째 보고서입니다. 또한,이 인간의 신경 조상 세포에 대 한 격리 VVA lectin를 사용 하는 첫 번째 연구 이다.