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Articles by Russell A. Gould in JoVE
JoVE General
Isolamento di cellule endoteliali valvolare
Department of Biomedical Engineering, Cornell University
Forniamo un metodo per isolare e popolazioni coltura pura di cellule endoteliali valvola cardiaca (VEC). VEC può essere isolato da entrambi i lati della cuspide o depliant e subito dopo, alla base di cellule interstiziali (VIC) isolamento è semplice.
Other articles by Russell A. Gould on PubMed
Quantificazione Della Biomeccanica Della Valvola Atrioventricolare Embrionale Durante La Morfogenesi
Assemblaggio dei tessuti nell'embrione in via di sviluppo è un processo rapido e complesso. Mentre molta ricerca è focalizzata sulla genetica normativa macchine, comprensione livello tessuto cambia come resti di rimodellamento biomeccanici un impegnativo enigma sperimentale. Nel caso particolare delle valvole atrio-ventricolare embrionale, micro-scala, amorfi cuscini rapidamente rimodellare in volantini fibrosi mentre contemporaneamente interagiscono con un ambiente esigente di meccanico. In questo studio ci avvaliamo di due sistemi di misura meccanici su microscala in combinazione con analisi agli elementi finiti per quantificare la valvola d'irrigidimento durante valvulogenesis. La tecnica di aspirazione pipetta viene confrontata con una deformazione di carico monoassiale, e l'espressione analitica per un bar uniassiale caricato viene utilizzato per stimare i parametri del materiale non lineari dei dati sperimentali. Densità di energia efficace modulo e ceppo sono analizzati come potenziale metrica per il confronto di rigidità meccanica. Aviaria valvole atrioventricolare da fasi di Hamburger-Hamilton globulare HH25-HH34 sono stati testati tramite il metodo pipetta, mentre i planar HH36 volantini sono stati testati utilizzando la tecnica post deformabile. Densità di energia di deformazione tra HH25 e HH34 del setto depliant piega maggiore 4.6±1.8 (± SD). La densità di energia di deformazione del foglio illustrativo del setto HH36 era quattro ordini di grandezza maggiori del risultato di pipetta HH34. I nostri risultati stabiliscono soglie morfologiche che impiegano la micropipetta aspirazione e deformabile post tecniche per la misurazione monoassiale proprietà meccaniche dei tessuti embrionali. Analisi biomeccanica quantitativa sono un complemento importante e trascurato per sperimentazione molecolari e genetici della morfogenesi embrionale.
Anisotropia Di Deformazione Ciclica Regola Il Fenotipo Delle Cellule Interstiziali Valvolari E Il Rimodellamento Del Tessuto in Coltura Tridimensionale
Molti tessuti connettivi planari presentano arrangiamenti di fibra matrice anisotropico complessa che sono fondamentali per la loro funzione biomeccanica. Questa struttura organizzata è creata e modificata da residenti nei fibroblasti in risposta alle forze meccaniche nel loro ambiente. La direzionalità dei campi di sforzo applicato cambia drammaticamente durante lo sviluppo, invecchiamento e malattia, ma l'effetto specifico della direzione ceppo sul rimodellamento della matrice è meno chiaro. Attuale inchiesta mechanobiological dei tessuti planari è limitato a equibiaxial o monoassiale stretch, che simula non adeguatamente molti ambienti in vivo. In questo studio, abbiamo implementare un sistema di romanzo bioreattore per dimostrare che l'effetto unico di ceppo anisotropico controllato sul comportamento del fibroblasto in tridimensionale (3D) progettato ambienti di tessuto, usando le cellule interstiziali del fibroblasto valvola aortica come sistema di modello. Cella seminato collagene 3D idrogel erano profili sottoposti a ciclico ceppo anisotropico mantenute a grandezza costante sforzo areal fino a 96 h a 1 Hz. aumentando l'anisotropia di tensione biassiale ha portato maggiore orientamento cellulare e allineamento fibre collagene lungo le direzioni principali di orientamento delle cellule e del ceppo è stato trovato a precedere la riorganizzazione di fibra. Proliferazione cellulare e apoptosi sono stati entrambi significativamente migliorata sotto la crescente tensione biassiale anisotropia (P < 0,05). Mentre ceppo ciclico ridotto sia vimentina e actina muscolo liscio-alfa rispetto ai controlli unstrained, vimentina ed espressione dell'actina muscolo liscio alfa aumentato con ceppo anisotropia e correlato con direzione (P < 0,05). Collettivamente, questi risultati suggeriscono che ceppo campo anisotropia è un regolatore indipendente dei fibroblasti cellule fenotipo, fatturato e matrice riorganizzazione, che può informare, normale e patologico rimodellamento nei tessuti molli.
