Ablazione Condizionale Gene Stat3 Rivela Requisiti Di Segnalazione Differenziale Per La Sopravvivenza Dei Motoneuroni Durante Lo Sviluppo E Dopo Lesione Del Nervo Nell'adulto

The Journal of Cell Biology. Jan, 2002  |  Pubmed ID: 11807093

I membri del ciliary neurotrophic factor (CNTF) / leucemia inhibitory factor (LIF) famiglia del gene cardiotrophin sono fattori di sopravvivenza potente per i motoneuroni embrionale ed elettivamente. Questi fattori agiscono tramite complessi recettore che coinvolgono gp130 e VFR-beta e ligand binding conduce all'attivazione di vari percorsi di segnalazione, compresa la fosforilazione di Stat3. Il ruolo di Stat3 nella sopravvivenza neuronale è stato studiato nei topi da ablazione Cre-mediata del gene nei motoneuroni. CRE è espresso sotto il promotore neurofilamento catena leggera (NF-L), a partire da circa E12 quando questi neuroni diventano dipendenti su supporto neurotrofici. Perdita dei motoneuroni durante il periodo embrionale di biofiltri morte cellulare non è migliorata in NF-L-Cre; Stat3(flox/ko) topi anche se motoneuroni isolato da questi topi bisogno di concentrazioni più elevate di CNTF per la massima sopravvivenza nella cultura. Al contrario, la sopravvivenza del motoneurone è significativamente ridotta dopo lesione del nervo facciale nell'adulto. Questi neuroni, tuttavia, possono essere salvati con l'aggiunta di fattori neurotrofici, compresi CNTF. Stat3 è essenziale per la sovraregolazione di espressione Reg-2 e Bcl-xl in motoneuroni elettivamente. I nostri dati mostrano che attivazione Stat3 riveste un ruolo essenziale per la sopravvivenza del motoneurone dopo lesione del nervo nella vita postnatale, ma non durante lo sviluppo embrionale, che indica che i requisiti di segnalazione per la sopravvivenza del motoneurone cambiano durante la maturazione.

Un Polimorfismo Dell'antigene Dei Linfociti T Citotossici Umano 4 (CTLA4) Gene (esone 1 + 49) Altera La Attivazione Delle Cellule T

Immunogenetics. Apr, 2002  |  Pubmed ID: 11976786

L'antigene dei linfociti T citotossico 4 (CTLA4) è un modificatore importante di attivazione delle cellule T con proprietà giù-normative su B7 fidanzamento. Recentemente è stato descritto un polimorfismo allelica nell'esone 1 del gene CTLA4 che codifica per la sequenza leader peptide di CTLA4. Questo polimorfismo è stato rilevato in associazione con diverse malattie autoimmuni. In questo studio, abbiamo studiato l'impatto funzionale del dimorfismo di CTLA4 esone 1 + 49 A/G sulla localizzazione di attivazione e cellulare delle cellule T. Abbiamo esaminato la risposta delle cellule T da donatori sani sia omozigote per un o G nella posizione + 49 dell'esone 1. In condizioni non ottimali di stimolazione abbiamo trovato una maggiore risposta proliferativa delle cellule da donatori omozigoti per G in posizione + 49. FACS analisi di espressione CTLA4 ha rivelato una ridotta up-regolazione di CTLA4 da donatori G/G dopo l'attivazione delle cellule T, se confrontato con selvaggio-tipo celle. Distribuzione intracellulare di CTLA4 dimostrato qualitativamente differenti pattern di colorazione fra i due genotipi come determinato mediante microscopia di fluorescenza confocale. I nostri risultati suggeriscono che l'allele G nella posizione + 49 dell'esone 1 colpisce la down-regulation CTLA4-driven di attivazione delle cellule T e può essere un fattore importante nella patogenesi delle malattie autoimmuni.

Mutazione Missenso Nel Gene Tubulina-specifica E (BCE Chaperonina) Nel Topo Mutante Progressiva Motor Neuropatia, Un Modello Di Malattia Del Motoneurone Umana

The Journal of Cell Biology. Nov, 2002  |  Pubmed ID: 12446740

Topi mutanti progressiva motor neuropatia (pmn) sono stati utilizzati ampiamente come un modello per la malattia del motoneurone umana. Topi che sono omozigoti per il difetto del gene pmn appaiono sani alla nascita, ma sviluppano la malattia progressiva motoneurone, con conseguente debolezza muscolare grave e insufficienza respiratoria da postnatale settimana 3. La malattia comincia alle piastre motore e quindi conduce alla perdita assonale e infine all'apoptosi dei corpi cella corrispondenti. Abbiamo localizzato il difetto genetico in topi pmn a una mutazione missenso il chaperone tubulina specifico gene E (BCE chaperonina) sul mouse cromosoma 13. L'umano orthologue mappe al cromosoma 1q42.3. Il BCE chaperonina gene codifica per una proteina (cofattore E) che è essenziale per la formazione di complessi di heterodimeric primari tubulina alfa e beta-tubulina. Motoneuroni isolate da topi mutanti pmn presentano assoni brevi e rigonfiamento assonale con irregolarmente strutturato immunoreattività beta-tubulina e tau. Così, la mutazione del gene pmn fornisce la prima evidenza genetica che determinano alterazioni nell'assembly tubulina retrogrado, degenerazione degli assoni motori, infine con conseguente morte cellulare motoneurone.

Cambiamenti Dinamici Nella Fosforilazione C-Raf E Legame Con Le Proteine 14-3-3 in Risposta Alla Stimolazione Del Fattore Di Crescita: Differenziali Ruoli Di Siti Di Legame Della Proteina 14-3-3

The Journal of Biological Chemistry. Apr, 2004  |  Pubmed ID: 14688280

Gli eventi di fosforilazione giocano un ruolo cruciale nell'attivazione di Raf. La fosforilazione di serines 259 e 621 in C-Raf e serines 364 e 728 in B-Raf è stata suggerita per essere critici per associazione con le proteine 14-3-3. Per studiare le conseguenze funzionali di fosforilazioni Raf a queste posizioni, abbiamo sviluppato e caratterizzato phosphospecific anticorpi diretti contro epitopi associazione 14-3-3: un anticorpo monoclonale phosphospecific (6B4) diretto contro il pS621 e un anticorpo policlonale specifico per un epitopo B-Raf-pS364. Sebbene 6B4 rilevato sia C - e B-Raf nel Western Blot, specificamente riconosce il formato nativo di C-Raf ma non B-Raf. Al contrario di B-Raf, un mutante di morte-chinasi C-RAF è stato trovato solo male essere fosforilato in posizione Ser-621. Inoltre, Serina 259 a mutazione alanina ha impedito la fosforilazione della Ser-621 suggerendo un'interdipendenza tra questi due 14-3-3 domini di associazione. Studi di binding diretto di C-Raf.14-3-3 con proteine purificate combinate con concorrenza analisi ha rivelato che il 14-3-3 associazione dominio pS621 circostante rappresenta il sito di legame ad alta affinità, mentre l'epitopo pS259 media inferiore associazione affinità. Isoenzimi RAF differiscono nei loro tassi di associazione 14-3-3. Il corso del tempo di attivazione di C-Raf endogena in cellule di mammifero di nerve growth factor (NGF) è stato esaminato usando entrambi phosphospecific anticorpi diretti contro 14-3-3 siti di legame (6B4 e anti-pS259), come pure phosphospecific anticorpi diretti contro il dominio di attivazione (anti-pS338 e anti-pY340/pY341). Decorso della fosforilazione della Ser-621, in contrasto con la fosforilazione della Ser-259, esposto motivo imprevisto raggiungendo la fosforilazione massima entro 30 s di stimolazione di NGF. La fosforilazione della tirosina 340/341 ha raggiunto livelli di massimali successiva fosforilazione della Ser-621 ed era coincida con l'emergere di attività della chinasi. Presi insieme, abbiamo trovato differenze sostanziali tra C-Raf.14-3-3 associazione epitopi pS259 e pS621 e visualizzato per la prima volta la sequenza degli eventi di fosforilazione di C-Raf essenziali in cellule di mammifero in risposta alla stimolazione del fattore di crescita.

Assonali Difetti Nei Modelli Del Mouse Della Malattia Del Motoneurone

Journal of Neurobiology. Feb, 2004  |  Pubmed ID: 14704958

Malattia del motoneurone umana è caratterizzata dalla perdita delle piastre motore, degenerazione assonale e delle cellule morte dei motoneuroni. L'identificazione del gene sottostante difetti per ALS familial, atrofia muscolare spinale (SMA), e atrofia muscolare spinale con difficoltà respiratoria (SMARD) ha sottolineato distinti meccanismi fisiopatologici che sono responsabili per le varie forme della malattia. Accumulando prove da modelli murini suggerisce che una maggiore vulnerabilità e sensibilità agli stimoli Miselli è responsabile solo per alcuni, ma non tutte le forme di malattia del motoneurone. Meccanismi che modulano i microtubuli e i macchinari di trasporto assonale sono difettosi in parecchi spontanea ed ENU (ethylnitrososurea) mutagenized modelli di mouse ma anche nei pazienti con mutazioni della subunità p150 di DCTN1. Recenti evidenze suggeriscono che i difetti di crescita assonale contribuiscano significativamente alla fisiopatologia dell'atrofia muscolare spinale. Riduzione dei livelli di proteina motoneuron sopravvivenza che sono responsabili della SMA portare a disturbato RNA processing in motoneuroni. Questo potrebbe influenzare anche trasporto assonale dei mRNAs per beta-actina e altre proteine che svolgono un ruolo essenziale nella crescita axon e funzione sinaptica. La traduzione locale di proteine specifiche possa essere colpita, perché sviluppare motoneuroni contengono strutture simil-ribosoma in assoni distali e coni di crescita. Complessivamente, le prove da questi modelli di mouse e i nuovi dati genetici nei pazienti suggeriscono che la manutenzione e assone crescita comporta una varietà di meccanismi, tra cui i microtubuli e trasporto assonale di proteine e ribonucleoproteins (RNPs). Così, difetti di manutenzione assone potrebbero svolgere un ruolo guida nello sviluppo delle diverse forme della malattia del motoneurone umana.

Cellule Eritroidi-come Dalle Cellule Staminali Neurali Iniettate in Blastocisti

Experimental Hematology. Jul, 2004  |  Pubmed ID: 15246164

In contrasto con le cellule staminali embrionali (ES), che sono in grado di dare origine a tutti i tipi di cellule del corpo, le cellule staminali somatiche hanno pensate per essere più limitate nel loro potenziale di differenziazione in quanto sono impegnati a generare solo le cellule del loro tessuto di origine. Inaspettatamente, alcuni dati recenti suggeriscono che le cellule staminali somatiche isolate da un tessuto può anche generare cellule di eterologo tessuti e organi, che implica che le cellule staminali somatiche hanno un maggiore potenziale di differenziazione.

Glycinergic E GABAergico Attività Sinaptica Differenzialmente Regolano La Sopravvivenza Del Motoneurone E Innervazione Del Muscolo Scheletrico

The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Feb, 2005  |  Pubmed ID: 15689563

Trasmissione sinaptica GABAergico e glycinergic si propone di promuovere la maturazione e l'affinamento dello SNC in via di sviluppo. Qui forniamo prove morfologiche e funzionali che glycinergic e GABAergico sinapsi controllo motoneuron lo sviluppo in un modo specifico regione durante la morte programmata delle cellule. Nel deficit di gephyrin topi che mancano di tutti i recettori postsinaptici glicina e alcuni ammassi di recettore GABA(A), c'era maggiore spontanea attività motoria respiratorio, motoneuron respiratoria ridotta sopravvivenza e diminuito innervazione del diaframma. Al contrario, motoneuroni che innervano arto ha mostrato una ridotta attività spontanea e maggiore sopravvivenza aumentata innervazione dei loro muscoli bersaglio. Entrambi GABA e glicina aumentata attività motoneurone che innerva arto e ridotto l'attività respiratoria motoneuron nei topi wild-type, ma solo risposte glicina furono abolite nel gephyrin-deficient mice. I nostri risultati forniscono prove genetiche che lo sviluppo di glycinergic e GABAergico ingressi sinaptici su motoneuroni gioca un ruolo importante nella sopravvivenza, ramificazione assonale e attività spontanea dei motoneuroni nello sviluppo di embrioni dei mammiferi.

Triple Knock-out Di CNTF, LIF E CT-1 Definisce Cooperativi E Distinti Ruoli Di Questi Fattori Neurotrofici Per La Manutenzione Del Motoneurone E Funzione

The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Feb, 2005  |  Pubmed ID: 15716414

I membri del ciliary neurotrophic factor (CNTF)-famiglia del gene leucemia inhibitory factor (LIF) svolgono un ruolo essenziale per la sopravvivenza di sviluppare e motoneuroni postnatale. Quando la subunità del recettore condivisa complessa sono inattivate da ricombinazione omologa, i topi muoiono alla nascita circa e presentano un numero ridotto di motoneuroni nel midollo spinale e nuclei del tronco encefalico. Tuttavia, topi in cui cntf, lif o cardiotrophin-1 (ct-1) sono inattivato possono sopravvivono e mostrano meno perdita di cellule del motoneurone. Questo suggerisce ruoli cooperativi e ridondanti di questi leganti. Tuttavia, le loro funzioni cooperative non sono ben compresi. Abbiamo generato cntf/lif/ct-1 tripla-knock-out e combinazioni di double-knock-out topi per studiare i ruoli individuali e combinati di CNTF, LIF e CT-1 sulla sopravvivenza del motoneurone postnatale e funzione. Topi knock-out tripla esposizione motoneurone maggiore perdita di cellule del midollo spinale lombare che correla con debolezza muscolare durante lo sviluppo postnatale precoce. Deficit di LIF conduce alla marcata perdita di assoni distali e piastra terminale motore alterazioni, mentre mouse CNTF-e/o CT-1-carenti non mostrano variazioni significative nella morfologia di queste strutture. Nei topi knock-out tripla cntf/lif/ct-1, si trovano vari gradi di raggruppamento di tipo di fibra muscolare, che indica che si era verificato denervazione e Reinnervazione. Concludiamo queste constatazioni che CNTF, LIF e CT-1 hanno funzioni distinte per la sopravvivenza del motoneurone e funzione e che LIF gioca un ruolo più importante per la manutenzione postnatale di assoni distali e piastre motore di CNTF o CT-1.

Molto Gentile è Un Romanzo Del Sistema Nervoso Fattore Di Scambio Di Nucleotide Di Guanina Specifico Per Ras GTPases

Gene Expression Patterns : GEP. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16099729

Il dominio c-Lobo non catalitica chinasi (genere) evoluto da catalitica della proteina chinasi piega in un modulo di interazione della proteina potenziale per la segnalazione di proteine. Spir actina famiglia organizzatori e il tipo di fosfatasi non recettoriale 13 (tipo PTP 13) codificare un dominio gentile nel molto N-terminale parti delle proteine. Qui riportiamo la caratterizzazione e la clonazione di un terzo membro della famiglia della proteina gentile, che abbiamo chiamato molto gentile (VKIND) a causa delle sue due domini di tipo. Come gli altri membri della famiglia della proteina, VKIND ha un dominio gentile presso il N-terminus. Un secondo dominio gentile è situato nella parte centrale della proteina. Il C-terminale metà codifica un guanina nucleotide exchange factor motivo Ras-come GTPases (RasGEF) e un modulo di RasGEF N-terminale (RasGEFN). C'è un solo gene VKIND nei genomi dei mammiferi e fino ad ora abbiamo trovato il gene solo nei vertebrati. Durante l'embriogenesi del mouse il gene VKIND è stato specificamente espresso in sviluppo del sistema nervoso. In topi adulti ibridazioni del Nord ha rivelato alta espressione solo nel cervello. Espressione bassa potrebbe essere rilevato nell'ovaio. Ibridazioni in situ ha mostrato un'espressione specifica di VKIND in cellule neuronali del granulare e strati di cellule di Purkinje del cervelletto.

Bag1 è Essenziale Per La Differenziazione E La Sopravvivenza Delle Cellule Ematopoietiche E Neuronali

Nature Neuroscience. Sep, 2005  |  Pubmed ID: 16116448

Bag1 è un cochaperone per le proteine di scossa di calore Hsp70 che interagisce con C-Raf, B-Raf, Akt, recettori ormonali Bcl-2, steroidi e altre proteine. Qui usiamo rottura gene mirati nei topi per mostrare che Bag1 ha un ruolo fondamentale nella sopravvivenza della differenziazione dei neuroni e cellule emopoietiche. Le cellule del fegato fetale e sviluppo del sistema nervoso in Bag1-/-mice subì un massiccia apoptosi. Mancanza di Bag1 non disturbare la funzione primaria di Akt o Raf, come la fosforilazione del fattore di trascrizione forkhead FKHR e l'attivazione della chinasi segnale-regolata extracellulare (Erk) -1/2 non sono stati colpiti. Tuttavia, il difetto è stato associato con il disturbo di un complesso tripartito formato da Akt, B-Raf e Bag1, oltre all'assenza di fosforilazione male a Ser136. Abbiamo anche osservato ridotta espressione dei membri dell'inibitore dell'apoptosi famiglia (IAP). I nostri dati mostrano che Bag1 è un mediatore fisiologico dei segnali extracellulari sopravvivenza legata ai meccanismi cellulari che impediscono il apoptosis in cellule progenitrici ematopoietiche e neuronali.

Interazione Reversibile Membrana Di BAD Richiede Due Domini Di Associazione C-terminale Dei Lipidi in Collaborazione Con Associazione Della Proteina 14-3-3

The Journal of Biological Chemistry. Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16603546

BAD è un dominio di omologia di Bcl-2 3 (BH3)-solo Miselli membro della famiglia della proteina Bcl-2 che è regolata dalla fosforilazione in risposta a fattori di sopravvivenza. Associazione di male ai mitocondri è pensato per essere esclusivamente mediata dal suo dominio BH3. Mostriamo qui che male si lega ai lipidi con alta affinità, prevalentemente di fosfolipidi negativamente caricati, quali fosfatidilserina, acido fosfatidico e cardiolipina, così come ai liposomi ricchi di colesterolo. Sono stati identificati due domini di lipidi vincolante (LBD1 e LBD2) con le preferenze di associazione diversa, entrambe situate nella parte C-terminale della proteina difettosa. MALE facilita la traslocazione di membrana di Bcl-XL in un processo che richiede LBD2. L'integrità del LBD1 e LBD2 è richiesta anche per Miselli attività in vivo. Fosforilazione di male non influisce sul legame di membrana ma rende cattivo suscettibile alla estrazione di membrana di proteine 14-3-3. MALE possono essere rimosso in modo efficiente da 14-3-3zeta,-eta-tau e lesxs in modo efficiente da altre isoforme di 14-3-3. Il complesso BAD.14-3-3 assemblato esposte ad alta affinità per i liposomi ricchi di colesterolo ma bassa affinità per le membrane mitocondriali. Possiamo concludere che il male è una proteina associata di membrana che ha le caratteristiche di un recettore piuttosto che un ligando. Associazione dei lipidi è essenziale per la funzione di Miselli di male in vivo. I dati supportano un modello nel quale cattivo servizio navette in modo fosforilazione-dipendente tra mitocondri e altre membrane e dove 14-3-3 è un regolatore chiave di questo trasferimento. L'interazione dinamica del male con le membrane è legata alla attivazione e traslocazione di membrana di Bcl-XL.

Sox10 Regola L'espressione Genica Di Ciliary Neurotrophic Factor in Cellule Di Schwann

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. May, 2006  |  Pubmed ID: 16684879

Ciliary neurotrophic factor (Cntf) svolge un ruolo essenziale nel mantenimento postnatale dei motoneuroni spinali. Considerando che l'espressione di questo fattore neurotrophic è basso durante lo sviluppo embrionale, è altamente regolato in su dopo la nascita in myelinating Schwann cellule di roditori. Per caratterizzare i meccanismi trascrizionali sottostanti, abbiamo analizzato e confrontato gli effetti di vari fattori di trascrizione gliale. In contrasto con Pit-1, Oct-1, Unc-86 omologia regione (POU) dominio classe 3, transcription factor 1 (Oct6/SICp/Tst-1) e accoppiato gene casella 3 (Pax3), gene SRY-scatola contenente 10 (Sox10) induce Cntf espressione in cellule di Schwann. Analisi successive promotore usando il gene reporter luciferasi ed EMSA identificati gli elementi di risposta corrispondente all'interno del promotore Cntf. Sovraespressione di Sox10 primaria nervo sciatico cellule di Schwann conduce a un > 100 volte su-regolazione della proteina Cntf e la soppressione di Sox10 di interferenza del RNA nella cellula di Schwann spontaneamente immortalata linea 32 riduce Cntf espressione di > 80%. Topi con inattivazione eterozigote del gene Sox10 mostrano significativamente ridotti livelli di proteina Cntf nervi sciatico, indicando che Sox10 è necessaria e sufficiente per la regolamentazione del Cntf espressione nel sistema nervoso periferico.

Difetti Di Migrazione Corticale Nei Topi Che Esprimono A-RAF Dal Locus B-RAF

Molecular and Cellular Biology. Oct, 2006  |  Pubmed ID: 16980614

Abbiamo precedentemente dimostrato che topi cui manca la chinasi di proteina B-RAF sono difetti di lignaggi di cellule endoteliali e neurali e di morire intorno embrionale giorno 12 (E12). Per delineare la funzione di B-RAF nel cervello, topi di B-RAF KIN/KIN privi di B-RAF ed esprimendo A-RAF sotto il controllo del locus B-RAF sono stati creati. Embrioni di B-RAF KIN/KIN visualizzato senza difetti vascolari, no apoptosi endoteliale e neuronali, o lordi anomalie dello sviluppo e una percentuale significativa di questi animali è sopravvissuto fino a 8 settimane. Proliferazione cellulare nella neocorteccia è stato ridotto da E14.5 in poi. Neuroni corticali neonati sono stati alterati nella loro migrazione verso la placca corticale, causando una deplezione dei neuroni piramidali Brn-2-esprimere nei livelli II, III e V della corteccia postnatale. I nostri dati rivelano che B-RAF è un importante mediatore della formazione dendrite, sopravvivenza e migrazione neuronale e quello A-RAF non può compensare pienamente queste funzioni.

Modulazione Differenziale Di Crescita Dei Neuriti Da S - E La L-forme Di Bag1, Un Aha1 Di Hsp70

Neuro-degenerative Diseases. 2007  |  Pubmed ID: 17596720

Bag1 agisce come un cochaperone per Hsp70. Tuttavia, si lega anche ai membri della famiglia RAF e di Akt. Inoltre, bag1 e Hsp70 sono parte di un complesso con i recettori glucocorticoidi e quindi modulano attivazione trascrizionale mediata dal recettore di glucocorticoidi. Sviluppo del sistema nervoso, bag1 è espresso in almeno due isoforme. La forma a L (bag1L) contiene un segnale nucleare di localizzazione e così può traslocano nel nucleo. Al contrario, la forma di S (bag1S) è localizzata esclusivamente nel citoplasma. Precedenti studi hanno dimostrato che B-RAF è essenziale per la sopravvivenza Neurotrofina-mediata segnalazione nei motoneuroni e neuroni sensoriali, e che bag1 gioca un ruolo nel coordinamento di B-RAF e funzione di Akt in questo contesto. In assenza di B-RAF, embrionale motoneuroni e neuroni sensoriali non sono in grado di sopravvivere, che indica che bag1 e B-RAF sono mediatori essenziali per la sopravvivenza neuronale in risposta a fattori neurotrofici durante lo sviluppo. Tuttavia, il ruolo del complesso contenente bag1, Hsp70 e B-RAF nella mediazione della crescita dei neuriti in risposta a fattori neurotrofici è rimasto poco chiaro. Abbiamo quindi studiato l'effetto della sovraespressione di bag1 in cellule di feocromocitoma (PC12) del ratto. Previo trattamento di NGF, proliferanti PC12 diventano postmitotic e crescere i processi neuronali. Bag1S sovraespressione interferisce con estensione dei neuriti in cellule PC12. Al contrario, bag1L non disturbare escrescenza dei neuriti. Interazione di bag1S con Hsp70 appare necessario per questo effetto. Questi dati indicano che la forma citosolica di bag1 partecipa alla crescita dei neuriti Neurotrofina-mediata, e quell'interazione con Hsp70 gioca un ruolo cruciale in questo contesto.

B - E C-RAF Mostrano Differenze Essenziali Nella Loro Associazione a Ras: Il Capolinea Di N Specifici Di B-RAF Facilita L'associazione Ras

The Journal of Biological Chemistry. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17635919

Reclutamento della chinasi di RAF a membrana del plasma è stato inizialmente proposto di essere mediato da proteine Ras tramite l'interazione con il dominio di legame RAF Ras (RBD). Dati di segnalazione che le chinasi RAF possiedono alta affinità per i lipidi di membrana particolare sostengono un nuovo modello in cui Ras-RAF interazioni possono essere spazialmente limitate al piano della membrana. Anche se le caratteristiche di accoppiamento dell'associazione Ras per l'isolato RBD RAF sono state investigate in grande dettaglio, poco si sa circa le interazioni della Ras trasformati con la chinasi RAF funzionale e integrale. Qui di seguito presentiamo un'analisi quantitativa delle proprietà associazione di farnesylated e nonfarnesylated H-Ras per entrambi full-length B - e C-RAF in presenza e in assenza di ambiente lipidico. Anche se frammenti isolati di RBD associano con alta affinità sia farnesylated e nonfarnesylated H-Ras, il full-length chinasi di RAF ha rivelato differenze fondamentali rispetto alla Associazione Ras. In contrasto con C-RAF che richiede farnesylated H-Ras, B-RAF citosolico associa efficacemente e con significativamente maggiore affinità sia con farnesylated e nonfarnesylated H-Ras. Per investigare la potenziale Synthase associazione siti abbiamo preparato diversi frammenti N-terminale di C-RAF e trovato che in presenza di dominio ricco di cisteina solo farnesylated forma di H-Ras si lega con tariffe alta associazione. Il capolinea N estremo di B-RAF si rivelò di essere responsabile per la facilitazione del legame di Ras indipendente dei lipidi di B-RAF, dal momento che il troncamento di questa regione ha provocato una proteina che ha cambiato la sua proprietà di chinasi e simile a C-RAF. Studi in vivo utilizzando cellule PC12 e COS7 supportano i risultati in vitro. Misure di collocazione con etichetta Ras e RAF documentato differenze essenziali tra B - e C-RAF rispetto alla associazione con Ras. Presi insieme, questi dati suggeriscono che l'attivazione di B-RAF, in contrasto con C-RAF, possa aver luogo presso la membrana plasmatica e l'ambiente citosolico.

Recettori Adenosinici A2A-R Contribuisce Alla Sopravvivenza Del Motoneurone Transactivating Recettore Tirosina Chinasi TrkB

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Oct, 2007  |  Pubmed ID: 17940030

Neurotrofine sono fattori di sopravvivenza potente per lo sviluppo e il ferimento di neuroni. Tuttavia, essi non sono utilizzati per il trattamento di malattie neurodegenerative a causa delle difficoltà nell'amministrazione e numerosi effetti collaterali che sono stati incontrati in precedenti studi clinici. Loro attività biologica utilizza le chinasi transmembrana tirosina Trk (chinasi tropomiosina-correlati). Pertanto, un approccio alternativo consiste nell'utilizzare percorsi di transattivazione come agonisti del recettore 2A dell'adenosina, che possono attivare i recettori Trk segnalazione indipendente dell'associazione Neurotrofina. Tuttavia, la rilevanza in vivo e l'applicabilità di questi eventi di transattivazione durante condizioni neurodegenerative e le lesioni non sono mai state ampiamente studiate. Qui dimostriamo che sopravvivenza del motoneurone dopo lesioning nervo facciale è significativamente migliorata di transattivazione di chinasi di tirosina del recettore Trk da agonisti di adenosina. Inoltre, sopravvivenza dei motoneuroni direttamente necessaria l'attivazione del recettore TrkB BDNF e un aumento nell'attività di Akt (AKT8 omologo del oncogene virus cellulare). La capacità di piccole molecole per attivare una risposta trofica tramite segnalazione Trk fornisce un meccanismo unico di promuovere la sopravvivenza segnali nei motoneuroni e suggerisce nuove strategie per l'utilizzo di transattivazione in malattie neurodegenerative.

Sinaptica PRG-1 Modula La Trasmissione Eccitatoria Via Fosfato-mediata Segnalazione Dei Lipidi

Cell. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19766573

Plasticità related gene-1 (PRG-1) è una proteina di membrana di cervello-specifiche relative alla fosfatasi di fosfato del lipido, che agisce nell'ippocampo in particolare presso la sinapsi eccitatoria che terminano sui neuroni glutamatergico. Eliminazione del prg-1 nei topi porta a crisi epilettiche e aumento di EPSCs, ma non IPSCs. Elettroporazione in utero di PRG-1 in animali carenti ha rivelato che il PRG-1 modula eccitazione alla giunzione sinaptica. Mutazione del dominio extracellulare del PRG-1 cruciale per la sua interazione con l'acido lysophosphatidic (LPA) ha abolito la possibilità di impedire ipereccitabilità. Come applicazione di LPA in vitro indotta da ipereccitabilità nel wild-type, ma non in animali con deficit del recettore LPA(2), e assorbimento dei fosfolipidi è ridotta nei neuroni PRG-1-carenti, abbiamo valutato gli animali con deficit del recettore PRG-1/LPA(2) e trovato che la fisiopatologia osservata nei topi deficienti-PRG-1 è stato completamente ripristinata. Così, proponiamo PRG-1 come un giocatore importante nel controllo modulante di hippocampal eccitabilità dipendente presinaptica LPA(2) receptor signaling.

Perdita Progressiva Postnatale Motoneurone in Topi Privi Di GDF-15

The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Oct, 2009  |  Pubmed ID: 19864576

Fattore di crescita/differenziazione-15 (GDF-15) è ampiamente espresso distante membro della superfamiglia TGF-beta con effetti neurotrofici prominente sui neuroni dopaminergici mesencefalo. Mostriamo qui che mouse GDF-15-carenti presentano perdite postnatale progressive dei motoneuroni spinali, facciali e del trigemino. Questo deficit raggiunge un massimo di 6 mesi di circa il 20% ed è accompagnata da perdite di motore assoni e significativa compromissione delle abilità rotarod. Allo stesso modo, i neuroni sensoriali nei gangli spinali (L4, L5) sono ridotti del 20%, mentre i neuroni simpatici non sono interessati. GDF-15 è espresso e secreto dalle cellule di Schwann, retrogradely trasportate lungo il nervo sciatico adulti assoni e promuove la sopravvivenza dei neuroni del viso regenerativo come pure colta dei neuroni motori, sensoriali e simpatici. Nonostante la sorprendente somiglianze nella GDF-15 e fenotipi knock-out CNTF, i livelli di espressione di CNTF e altri fattori neurotrofici nel nervo sciatico erano inalterati suggerendo che GDF-15 è un genuino romanzo fattore trofico per i neuroni motori e sensoriali.

Ossido Nitrico Agli Nitrosylates Ni(I) E Cu(I) C-organonitroso Addotti

Journal of the American Chemical Society. Dec, 2009  |  Pubmed ID: 20000860

Monovalenti complessi di beta-diketiminato di nichel e rame reagiscono con ArN = O (Ar = 3,5-Me(2)C(6)H(3), Ph) a dare C-nitroso addotti che presentano tre diverse modalità di incollaggio con vari gradi di attivazione del legame N-O. L'aggiunta di ArNO a 2 equiv di [Me(2)NN]Ni(2,4-lutidine) {[Me(2)NN](-) = 2,4-bis(2,6-dimethylphenylimido) pentile} dà {[Me(2)NN]Ni}(2)(mu-eta(2):eta(2)-ONAr) (1a e 1b), che esibiscono legame simmetrico dell'ArN = moiety O tra due [Me (2) NN] frammenti di Ni, con una distanza di legame N-O di 1.440(4) A 1a che è significativamente più lungo rispetto a quelli liberi composti C-organonitroso (1.13-1,29 A). [Me (2) NN]Cu(NCMe) reagisce con 0,5 equiv di ArNO in etere per dare il diciclici addotti {[Me(2)NN]Cu}(2)(mu-eta(2):eta(1)-ONAr) (2a e 2b), che presentano eta(2) ed eta(1) incollaggio dell'ArN = moiety O con separata [Me (2) NN] Cu frammenti distanze N-O possesso di 1.375(6) un (2a) e 1.368(2) A (2b). In arene solventi, un frammento di beta-diketiminatocopper(I) si dissocia da 2 a dare [Me(2)NN]Cu(eta(2)-ONAr) (3a e 3b), che può essere isolato mediante l'aggiunta di 1 equiv dell'ArNO a [Me(2)NN]Cu(NCMe). Le strutture dei raggi x di 3a e 3b sono simili a quelli dei relativi Cu(I) Alchenico addotti, con distanze di N-O nella ristretta gamma 1.333(4)-1.338(5) IR A. spettri del nitrosobenzene addotti 1b, 2b e 3b esposizione nu(NO) stretching frequenze a 915, cm(-1), 1040 e 1113, rispettivamente, seguendo il grado di attivazione N = O diminuzione osservata nelle strutture dei raggi x della specie 12 e 3. 3A e 1a reagiscono con NO(g) anaerobica per dare i corrispondenti complessi di N-Aril-N-nitrosohydroxylaminato [Me(2)NN]M(kappa(2)-O(2)N(2)Ar) [M = Ni (4), Cu (5)]. Nella reazione di diciclici 1a con NO, uno [Me (2) NN] frammento Ni è intrappolato come il nichel nitrosyl [Me(2)NN]Ni(NO). Reazione del complesso monovalente [Me(2)NN]Cu(eta(2)-ONAr) con NO(g) per dare bivalente [Me(2)NN]Cu(kappa(2)-O(2)N(2)Ar) rappresenta un esempio di ossidazione nitrosilazione.

Isolamento E L'arricchimento Dei Motoneuroni Embrionali Del Mouse Dal Midollo Spinale Lombare Degli Embrioni Del Mouse Singoli

Nature Protocols. 2010  |  Pubmed ID: 20057379

Colte motoneuroni spinali sono uno strumento prezioso per studiare i meccanismi fondamentali della crescita assone e dendrite e anche per l'analisi dei Pathomechanismen sottostanti malattie come la sclerosi laterale amiotrofica (SLA) e atrofia muscolare spinale (SMA). Come i motoneuroni del midollo spinale in via di sviluppo di topi costituiscono solo una minore popolazione di neuroni, queste cellule devono essere arricchito per studiarle in assenza di contaminazione delle cellule neuronali e non neuronali. Qui, descriviamo un protocollo per l'isolamento e la coltura in vitro di motoneuroni primari embrionali da embrioni del mouse singoli. Dissezione dei tessuti, isolamento delle cellule e un p75 (NTR) - Anticorpo - base tecnica panning, che arricchisce altamente motoneuroni all'interno < 8 h sono descritti. Questo protocollo ha lo scopo di fornire un'alternativa ai protocolli basati su FACS stabiliti descrivendo p75 (NTR)-basato su arricchimenti dei neuroni. Questo protocollo contribuirà a facilitare la ricerca sui meccanismi molecolari sottostanti meccanismi di sviluppo, la sopravvivenza e la malattia del motoneurone.

Global Privazione Di Brain-derived Neurotrophic Factor Nel SNC Rivela Un Requisito Di Aree Specifiche Per La Crescita Dendritica

The Journal of Neuroscience : the Official Journal of the Society for Neuroscience. Feb, 2010  |  Pubmed ID: 20130183

Sebbene brain-derived neurotrophic factor (BDNF) è collegato con un crescente numero di condizioni che causano disfunzioni cerebrali, suo ruolo nel SNC postnatale è rimasto difficile da valutare. Questo è perché il bdnf-null mutazione provoca la morte degli animali prima che i livelli di BDNF hanno raggiunto livelli adulti. Inoltre, il trasporto assonale anterograda di BDNF complica l'interpretazione della delezione di un gene specifico del settore. Il presente studio descrive la generazione di un nuovo mutante del mouse condizionali essenzialmente privo di BDNF in tutta la CNS. Essa mostra che il BDNF non è essenziale per la sopravvivenza prolungata postnatale, ma che il comportamento di tali animali mutanti è marcatamente alterato. Rivela anche che il BDNF non è un fattore di sopravvivenza maggiore per la maggior parte dei neuroni di CNS e per la mielinizzazione dei loro assoni. Tuttavia, è necessario per la crescita postnatale dello striato e a cella singola analisi hanno evidenziato che una marcata diminuito nella complessità dendritiche e la densità della colonna vertebrale. Al contrario, BDNF è superfluo per la crescita dell'ippocampo e solo minimi cambiamenti sono stati osservati nei dendriti dei neuroni piramidali CA1 in animali mutanti. Densità della colonna vertebrale è rimasta invariata, mentre la proporzione della colonna vertebrale tipo di fungo è stata moderatamente diminuita. In linea con queste osservazioni in vivo, abbiamo trovato che BDNF marcatamente promuove la crescita dei neuroni striatali colta e dei loro dendriti, ma non di quelli dei neuroni ippocampali, suggerendo che la reattività differenziale di BDNF è parte di un programma neuron-intrinseco.

Ruolo Funzionale Di Brain-derived Neurotrophic Factor in Neuroprotective Autoimmunità: Implicazioni Terapeutiche in Un Modello Di Sclerosi Multipla

Brain : a Journal of Neurology. Aug, 2010  |  Pubmed ID: 20826430

Brain-derived neurotrophic factor svolge un ruolo chiave nella sopravvivenza neuronale ed assonale. Brain-derived neurotrophic factor è espresso nelle cellule immunitarie nelle lesioni di encefalomielite autoimmune sperimentale e la sclerosi multipla, quindi potenzialmente mediazione effetti neuroprotettivi. Abbiamo studiato il ruolo funzionale di brain-derived neurotrophic factor in guaina mielinica Oligodendrocita glicoproteina-indotta sperimentale autoimmune encefalomielite, un modello animale di sclerosi multipla. Deficit di topi per brain-derived neurotrophic factor in cellule immunitarie visualizzato una risposta immunitaria attenuata nella fase acuta di encefalomielite autoimmune sperimentale, ma progressiva disabilità con maggiore perdita assonale in fase cronica della malattia. Nei topi carenti per derivati dal sistema nervoso centrale brain-derived neurotrophic factor via gliale fibrillare acida proteina crescentina-mediata cancellazione, è stato osservato un corso più severo di encefalomielite autoimmune sperimentale e una generale aumentata perdita assonale. In un approccio lentivirale, iniezione di cellule T con sovraesprimono relativa fattore neurotrophic cervello-derivato ha portato a un corso meno grave di encefalomielite autoimmune sperimentale e protezione diretta assonale. I nostri dati implicano un ruolo funzionale di brain-derived neurotrophic factor in demielinizzazione autoimmune da mediare protezione assone.

Catalitica Amminazione Di C-H Con Ammine Non Attivate Attraverso Ammidi Di Rame (II)

Angewandte Chemie (International Ed. in English). Nov, 2010  |  Pubmed ID: 20845346

Influenza Delle Molecole Di Matrice Gliali Derivato, Soprattutto Condroitina Solfati, Sulla Crescita Dei Neuriti E Sopravvivenza Dei Motoneuroni Embrionali Del Mouse Colta

Journal of Neuroscience Research. Dec, 2010  |  Pubmed ID: 21154466

Meccanismi di controllo della rigenerazione e la sopravvivenza neuronale svolgono un ruolo importante durante lo sviluppo, dopo la nascita e in condizioni di lesione. Motoneuroni isolato embrionali del mouse sono stati uno strumento utile per lo studio di tali meccanismi di base. Questi motoneuroni colti dipendono da molecole della matrice extracellulare (ECM), che sono potenti mediatori di sopravvivenza e di crescita assonale e di orientamento nel SNC e in vitro, esibendo sia spunti di orientamento attraente o repellenti. Inoltre, glicoproteine e proteoglicani ECM sono componenti della cicatrice glia che agisce come una barriera di crescita per la rigenerazione di assoni. Confrontato con escrescenza assone CNS, meno è conosciuto circa gli spunti che guidano i motoneuroni verso i loro bersagli periferici. Perché ci interessa gli effetti dei proteoglicani gliali derivato Condroitin solfato (CSPG), abbiamo lavorato fuori un sistema modello per studiare le influenze delle molecole di matrice gliali derivato sul motoneurone escrescenza e sopravvivenza. Abbiamo usato motoneuroni colta embrionali del mouse per studiare gli effetti di crescita axon di molecole di matrice prodotti dal astrociti cellule gliali derivato linee A7, Neu7 e Oli-neu primario come wellas la cellula di Schwann immortalata linea IMS32. I risultati indicano che molecole di ECM, soprattutto condroitina solfati, svolgono un ruolo importante come spunti growth-promoting assone. Noi potremmo dimostrare un effetto modificando dei componenti matrix sulla sopravvivenza del motoneurone e apoptosi indotta da caspase3. © 2010 Wiley-Liss, Inc.

Influenza Delle Molecole Di Matrice Gliali Derivato, Soprattutto Condroitina Solfati, Sulla Crescita Dei Neuriti E Sopravvivenza Dei Motoneuroni Embrionali Del Mouse Colta

Journal of Neuroscience Research. Feb, 2011  |  Pubmed ID: 21162121

Meccanismi di controllo della rigenerazione e la sopravvivenza neuronale svolgono un ruolo importante durante lo sviluppo, dopo la nascita e in condizioni di lesione. Motoneuroni isolato embrionali del mouse sono stati uno strumento utile per lo studio di tali meccanismi di base. Questi motoneuroni colti dipendono da molecole della matrice extracellulare (ECM), che sono potenti mediatori di sopravvivenza e di crescita assonale e di orientamento nel SNC e in vitro, esibendo sia spunti di orientamento attraente o repellenti. Inoltre, glicoproteine e proteoglicani ECM sono componenti della cicatrice glia che agisce come una barriera di crescita per la rigenerazione di assoni. Confrontato con escrescenza assone CNS, meno è conosciuto circa gli spunti che guidano i motoneuroni verso i loro bersagli periferici. Perché ci interessa gli effetti dei proteoglicani gliali derivato Condroitin solfato (CSPG), abbiamo lavorato fuori un sistema modello per studiare le influenze delle molecole di matrice gliali derivato sul motoneurone escrescenza e sopravvivenza. Abbiamo usato motoneuroni colta embrionali del mouse per studiare gli effetti di crescita axon di molecole di matrice prodotti dal astrociti cellule gliali derivato linee A7, Neu7 e Oli-neu primaria così come la cellula di Schwann immortalata linea IMS32. I risultati indicano che molecole di ECM, soprattutto condroitina solfati, svolgono un ruolo importante come spunti growth-promoting assone. Noi potremmo dimostrare un effetto modificando dei componenti matrix sulla sopravvivenza del motoneurone e apoptosi indotta da caspase3.

Esteri Dell'acido Fumarico Esercitano Effetti Neuroprotettivi in Neuroinflammation Tramite Attivazione Del Percorso Nrf2 Antiossidante

Brain : a Journal of Neurology. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21354971

Infiammazione e stress ossidativo sono pensati per promuovere il danno tissutale nella sclerosi multipla. Così, nuove terapie, migliorando la resistenza cellulare a radicali liberi potrebbero rivelarsi utile per il trattamento della sclerosi multipla. BG00012 è una formulazione orale di dimetilfumarato. In una fase di sclerosi multipla II trial, BG00012 ha dimostrato gli effetti benefici sulla ricaduta tasso e risonanza magnetica marcatori indicativi di infiammazione, come pure la distruzione assonale. Prima abbiamo studiato gli effetti di dimetilfumarato sul corso della malattia, del sistema nervoso centrale, l'integrità dei tessuti e il meccanismo molecolare di azione in un modello animale di sclerosi multipla cronica: glicoproteina di guaina mielinica Oligodendrocita indotta da encefalomielite autoimmune sperimentale nei topi C57BL/6. Nella fase cronica di encefalomielite autoimmune sperimentale, applicazione di misure preventive o terapeutiche di dimetilfumarato migliorato il decorso della malattia e la migliore conservazione della guaina mielinica, assoni e neuroni. In vitro, l'applicazione di fumarates aumentata sopravvivenza neuronale murino e protetto gli astrociti umani o roditori contro lo stress ossidativo. Applicazione di dimetilfumarato ha portato alla stabilizzazione di trascrizione fattore fattore nucleare (derivato da eritroidi 2) - correlate fattore 2, attivazione del fattore nucleare (derivato da eritroidi 2) - correlato fattore trascrizionale attività 2-dipendente e l'accumulo di NADP(H) chinolina ossidoriduttasi-1 come un gene bersaglio prototipo. Inoltre, il metabolita immediato di dimetilfumarato, monomethylfumarate, conduce a dirigere la modificazione dell'inibitore del fattore nucleare (derivato da eritroidi 2) - fattore 2, Kelch correlati - come ECH-associated protein 1, a residui di cisteina 151. A sua volta, ha aumentato i livelli del fattore nucleare (derivato da eritroidi 2)-correlati sono state individuate nitrosilazione proteina fattore 2 e ridotto il sytem nervosa centrale dei topi trattati con dimetilfumarato. Fattore nucleare (derivato da eritroidi 2)-correlati fattore 2 è stato anche sovraregolati nel midollo spinale di esemplari di autopsia non trattata nei pazienti con sclerosi multipla. Nei topi trattati con dimetilfumarato affetti da encefalomielite autoimmune sperimentale, aumentata immunoreattività per fattore nucleare (derivato da eritroidi 2)-correlati fattore 2 è stato rilevato da microscopia confocale in neuroni della corteccia motoria e il tronco cerebrale così come in oligodendrociti e astrociti. Nei topi carenti per il fattore nucleare (derivato da eritroidi 2)-correlate fattore 2 sullo stesso background genetico, il dimetilfumarato mediata effetti benefici sul decorso clinico, conservazione assone e attivazione Astrocita erano quasi completamente aboliti dimostrando così la rilevanza funzionale di questo fattore di trascrizione per meccanismo d'azione neuroprotettiva. Possiamo concludere che la capacità di attivare il fattore nucleare (derivato da eritroidi 2) dimetilfumarato-correlati fattore 2 può offrire una modalità di romanzo citoprotettivo che ulteriormente aumenta le risposte antiossidante naturale nel tessuto di sclerosi multipla e non è ancora mirati da altre terapie sclerosi multipla.

La Molecola Di Matrice Extracellulare Tenascina C Modula I Livelli Di Espressione E Territori Della Chiave Creazione Di Serie Di Geni Durante Specifiche Astrocita Del Midollo Spinale

Development (Cambridge, England). Dec, 2011  |  Pubmed ID: 22071102

La generazione degli astrociti durante lo sviluppo del midollo spinale dei mammiferi è scarsamente compreso. Qui, noi dimostrare per la prima volta che la glicoproteina di matrice extracellulare tenascina C regola l'espressione dei geni chiave patterning durante lo sviluppo embrionale del midollo spinale tardo, portando ad una tempestiva maturazione delle cellule precursori neurali gliogenic. Dimostriamo prima che tenascina C è espresso dalle cellule precursori neurali gliogenic durante lo sviluppo embrionale tardo. La perdita di tenascina C conduce a una generazione sostenuta e migrazione di Fgfr3-esprimendo immaturi astrociti in vivo in ritardo. Coerente con un'aumentata generazione di cellule astroglial, abbiamo documentato un aumento del numero di astrociti GFAP-positivi nelle fasi successive. Meccanicistico, noi potremmo dimostrare uno spostamento upregulation e dominio dei geni patterning Nkx6.1 e Nkx2.2 in vivo. Inoltre, solfatasi 1, un noto bersaglio a valle di Nkx2.2 nel midollo spinale ventrale, fu anche sovraregolati. Solfatasi 1 regola il fattore di crescita di segnalazione dalla scissione di residui di solfato di eparan proteoglicani dei solfato. Coerente con questa funzione, abbiamo osservato cambiamenti in entrambi FGF2 ed EGF reattività delle cellule precursori neurali del midollo spinale. Presi insieme, i nostri dati coinvolgono Tnc nella regolazione della proliferazione e progressione del lignaggio di progenitori astroglial in domini specifici del midollo spinale in via di sviluppo.

Na (+)-D-che Glucosio SGLT1 è Fondamentale Per L'assorbimento Intestinale Del Glucosio E La Secrezione Di Incretine Glucosio-dipendente

Diabetes. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22124465

Per chiarire il ruolo fisiologico del Na (+)-D-che glucosio SGLT1 nel piccolo intestino e rene, Sglt1(-/-) topi sono stati generati e caratterizzata fenotipicamente. Dopo la sonda gastrica di d-glucosio, sono stati analizzati assorbimento intestinale del glucosio piccolo attraverso la membrana pennello-confine (BBM) via SGLT1 e GLUT2. Glucosio-indotta secrezione di ormone insulinotropic (GIP) e di glucagon-like peptide 1 (GLP-1) nel wild-type e Sglt1(-/-) topi sono stati confrontati. L'impatto di SGLT1 sul maneggiamento renale glucosio è stato studiato da studi microponfi. È stato osservato che topi Sglt1(-/-) sviluppato una sindrome da malassorbimento di glucosio-galattosio, ma prosperano normalmente quando alimentato una dieta priva di glucosio-galattosio. Nei topi wild-type, passaggio del D-glucosio attraverso il BBM intestinale era prevalentemente mediata da SGLT1, indipendente dal carico di glucosio. Alte concentrazioni di glucosio aumentato la quantità di SGLT1 e GLUT2 nel BBM, e SGLT1 è stato richiesto per la sovraregolazione di GLUT2. SGLT1 era situato nella membrana luminale delle cellule immunopositive GIP e GLP-1, e Sglt1(-/-) topi esposti ridotti livelli GIP e GLP-1 attivato da glucosio. Nel rene, SGLT1 riassorbito il glucosio filtrato in condizioni normoglycemic ∼3%. I dati indicano che SGLT1 è 1) fondamentale per l'assorbimento intestinale di massa di d-glucosio, 2) innesca la secrezione glucosio-indotta di GIP e GLP-1 e 3) innesca la sovraregolazione di GLUT2.

Modulazione Di Demielinizzazione Autoimmune Di Laquinimod Tramite Induzione Di Brain-derived Neurotrophic Factor

The American Journal of Pathology. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22152994

Laquinimod è un composto promettente, disponibile per via orale che è stata correttamente valutato in studi placebo-controllato di fase II/III recidivante-remittente di sclerosi multipla (SM). Gli studi sono in corso per definire ulteriormente i meccanismi modulatrice di laquinimod. Le analisi nel modello animale di encefalomielite autoimmune sperimentale (EAE) dimostrano che laquinimod riduce l'infiltrazione dei leucociti nel sistema nervoso centrale, induce un Th1 a Th2/3 MAIUSC e sopprime le risposte Th17. Per valutare la potenziale capacità di neuroprotective di laquinimod tramite modulazione di brain-derived neurotrophic factor (BDNF), abbiamo analizzato l'espressione di BDNF nei campioni di sangue da MS 203 pazienti trattati con laquinimod. Inoltre, abbiamo studiato l'effetto di laquinimod in EAE utilizzando un ceppo di knockout BDNF condizionale carente espressione di BDNF nelle cellule mieloidi e cellule T (topi LLF). Il trattamento con laquinimod ha provocato un aumento significativo e persistente nei livelli sierici di BDNF di pazienti affetti da MS rispetto alla linea di base e pazienti trattati con placebo. Topi LLF trattati con laquinimod visualizzano un decorso della malattia più grave EAE rispetto ai topi wild-type. Inoltre, trattati con laquinimod selvaggio-tipo monociti secreto un pattern di citochine anti-infiammatorie rispetto ai monociti selvaggio-tipo non trattati e trattati monociti LLF. Trasferimento adottivo di laquinimod monociti stimolati in topi con EAE migliorato il decorso della malattia. Coerenti con le proprietà immunomodulatorie, laquinimod inclinata monociti verso un fenotipo regolamentare e anche agito tramite modulazione di BDNF, che possono contribuire alla neuroprotezione in pazienti affetti da MS.