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- Protocole pour la dengue dans les moustiques (Aedes aegypti) et détermination de phénotype d'infection
- Protocole pour l'élevage des moustiques (A. gambiae)
- Protocole pour les infections à Plasmodium falciparum dans la détermination Phénotype moustiques et les infections
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Articles by Suchismita Das in JoVE
JoVE General
Protocole pour la dengue dans les moustiques (Aedes aegypti) et détermination de phénotype d'infection
Malaria Research Institute, Bloomberg School of Public Health, Johns Hopkins University
Une fois qu'un gène est identifié comme étant potentiellement réfractaires pour le virus de la dengue, il doit être évalué pour son rôle dans la prévention des infections virales dans le moustique. Ce protocole illustre la façon dont l'étendue des cas de dengue de moustiques peuvent être dosés. Les techniques pour cultiver le virus en culture, l'alimentation à membrane moustiques sang humain, et en dosant les titres viraux dans l'intestin moyen des moustiques sont démontrés.
JoVE General
Protocole pour l'élevage des moustiques (A. gambiae)
Malaria Research Institute, Bloomberg School of Public Health, Johns Hopkins University
Cette vidéo illustre les techniques générales utilisées pour l'arrière Anopheles gambiae dans le laboratoire. Les méthodes pour prendre soin de moustiques de laboratoire sont démontrées par tous les stades du cycle de vie de l'organisme à partir de larves en pupes au sang maternel adultes.
JoVE General
Protocole pour les infections à Plasmodium falciparum dans la détermination Phénotype moustiques et les infections
Malaria Research Institute, Bloomberg School of Public Health, Johns Hopkins University
Une fois qu'un gène est identifié comme étant potentiellement réfractaires au paludisme, il doit être évalué pour son rôle dans la prévention des infections à Plasmodium dans le moustique. Ce protocole illustre la façon dont l'étendue des infections à Plasmodium de moustiques peuvent être dosés. Les techniques de préparation de la culture de gamétocytes, se nourrissant de sang humain membrane moustiques, et en dosant les titres viraux dans l'intestin moyen des moustiques sont démontrés.
Other articles by Suchismita Das on PubMed
Découplage De La Phase S Et La Cytocinèse Chez Le Parasite Protozoaire Entamoeba Histolytica
L'alternance de la réplication de l'ADN dans la séparation de phase et chromosome S en phase M est une caractéristique du cycle cellulaire des eucaryotes plus étudiés et fait en sorte que les descendants n'ont pas plus que le complément normal de chromosomes et les gènes. Une exception à cette règle a été décrite dans les cellules cancéreuses qui parfois deviennent polyploïdes faute d'empêcher malgré l'échec à subissent une mitose complète de la phase S. Nous décrivons ici le cycle de division cellulaire de l'agent pathogène humain, Entamoeba histolytica, qui accumule systématiquement les cellules polyploïdes. Nous ont étudié la synthèse de l'ADN dans les cellules fraîchement individualisation et montrent que, contrairement à la plupart des eucaryotes, les cellules de Entamoeba reduplicate leur génome plusieurs fois avant que la division cellulaire se produit. En outre, polyploïdie peut survenir sans division nucléaire afin que les noyaux unique peuvent contenir de 1 à 10 fois ou plus contenu du génome. Cellules multinucléées peuvent également s'accumuler plusieurs matières de génome dans chaque noyau d'une cellule. Ainsi, les points de contrôle qui empêchent normalement reduplication ADN jusqu'après la cytokinèse dans la plupart des eucaryotes ne sont pas respectées dans E. histolytica.
Association Constitutive Des Protéines Mcm2-3-5 Avec La Chromatine à Entamoeba Histolytica
Les cellules eucaryotes dupliquer leur génome une fois et une seule fois par cycle cellulaire. Nos études antérieures avec le parasite protozoaire Entamoeba histolytica, ont montré que la reduplication du génome peut-être se produire plusieurs fois sans division nucléaire ou cellulaire. Le complexe protéique de Mcm2-7 est requis pour les licences de la réplication de l'ADN. Dans un effort pour comprendre si reduplication du génome se produit en raison d'absence ou de défaillance du système licence réplication ADN, nous avons analysé la fonction des protéines Mcm2-3-5 à d ' Entamoeba histolytica. Dans cette étude, nous avons cloné gènes MCM2 et Eh MCM5 d'e. histolytica (Eh), tandis que MCM3 Eh a été cloné en plus tôt. La séquence des gènes Eh MCM2-3-5 est bien conservée avec d'autres homologues eucaryotes. Nous avons montré que Eh Mcm2, 3 protéines sont fonctionnels dans Saccharomyces cerevisiae. Nos études dans E. histolytica ont montré que les protéines Eh Mcm2-3-5 sont associées à la chromatine constitutivement dans cyclistes de cellules et au cours de l'arrestation de synthèse de l'ADN induite par la privation de sérum. Alternance de duplication du génome avec la mitose est régie par l'association-dissociation des protéines Mcm2-7 avec la chromatine chez les autres eucaryotes. Nos résultats suggèrent qu'association constitutive de Mcm protéines avec la chromatine pourraient être l'une des raisons pourquoi la reduplication du génome se produit dans E. histolytica.
La Paroi Du Kyste D'Entamoeba Invadens Contient Chitosan (chitine Désacylé)
La paroi du kyste d'Entamoeba invadens (AE), un modèle pour le pathogène humain Entamoeba histolytica, contient de la chitine, qui est un homopolymère de beta-1, 4-lié N-acétyl-glucosamine (GlcNAc). Chez les champignons et bactéries qui rendent les facteurs de nodulation, chitine désacétylases faire chitosan, qui est un mélange de glucosamine et de GlcNAc et a donc une charge positive. L'activité d'une Ei chitine désacétylase a été révélée par une augmentation de 3 à 4 fois GlcNAc libéré lorsque les parois du kyste deproteinated ont été chimiquement acétylés avant le traitement avec une chitinase commerical. Car cette chitinase libère GlcNAc mais pas GlcN, augmentations GlcNAc libéré après que acétylation suggère la présence de chitosan en murs de kyste de l'AE. Cinq Ei et Eh chitine déacétylase gènes putatifs ressemblaient à ceux des champignons et des bactéries. Une désacétylase prédite de chitine Eh correspondait étroitement la structure tridimensionnelle d'une désacétylase peptiodglycan de Bacillus subtilis. Un recombinant Eh chitine déacétylase, exprimé chez Saccharomyces cerevisiae, désacétylé chitooligosaccharides in vitro. Ces résultats sont en accord avec l'idée qu'Ie chitine désacétylases modifient chitine pour produire le chitosan dans la paroi du kyste Ei.
L'exposition Continue à Des Résultats Plasmodium Sensibilité Réduite Et Divergence Transcriptomique Du Système Immunitaire D'Anopheles Gambiae
Infection à Plasmodium a été montré à compromettre l'aptitude du moustique vecteur, ce qui réduit sa fécondité et la longévité. Cependant, dans une perspective évolutive, l'impact de l'infection à Plasmodium comme une pression sélective sur le moustique est en grande partie inconnue.
Analyse Moléculaire De L'inhibition Photique De Sang Maternel Dans Anopheles Gambiae
Les moustiques Anopheles gambiae présentent une endophile, le comportement nocturne se nourrir de sang. Malgré l'importance de la lumière en tant que régulateur de la transmission du paludisme, nos connaissances sur les interactions moléculaires entre des signaux environnementaux, les oscillateurs circadiens et l'accueil et la recherche des systèmes d'alimentation des moustiques Anopheles est limité.
Trichomonas Cyclases Transmembranaires Résultent Du Développement De Duplication Et Concomitants Gène Massive Des Pseudogènes
Trichomonas vaginalis possède un génome inhabituellement élevé (environ 160 Mo) codant pour environ 60 000 protéines. Avec l'objectif de début de comprendre pourquoi certains gènes de Trichomonas sont présents en autant d'exemplaires, nous avons caractérisé ici une famille d'environ 123 Trichomonas gènes codant transmembranaire adénylate cyclases (TMACs).
Pathogénomique De Culex Quinquefasciatus Et Méta-analyse Des Réponses Des Infections à Divers Pathogènes
Le moustique Culex quinquefasciatus constitue une menace importante pour la santé humaine et vétérinaire comme principal vecteur du virus West Nile (WNV), le ver filaire Wuchereria bancrofti, et un parasite de la malaria aviaire. Phylogénomique comparative a révélé un élargissement canonique C. quinquefasciatus répertoire de gènes immunitaire par rapport à ceux des moustiques Aedes aegypti et Anopheles gambiae. Analyse transcriptomique des gènes chez C. quinquefasciatus sensibles au VNO, W. bancrofti, et non-indigènes bactéries facilité sans précédent méta-analyse de 25 vecteur-pathogène interactions impliquant arbovirus, filaires, les bactéries et les parasites du paludisme, révélant des réponses communes et distinctes de ces types d'agents pathogènes dans les trois genres de moustiques. Nos résultats soutiennent l'hypothèse que les moustiques agents pathogènes ont évolué pour se soustraire à des réponses immunitaires innées chez trois espèces de moustiques vecteurs d'importance médicale majeure.
Analyse Transcriptomique Et Fonctionnelle De La Glande Salivaire Chez Anopheles Gambiae Qui Concerne L'alimentation Du Sang
Les glandes salivaires Anopheles gambiae jouer un rôle majeur dans la transmission du paludisme et d'exprimer une variété de composants bioactifs qui facilitent se nourrissant de sang en empêchant l'agrégation plaquettaire, la coagulation du sang, une vasodilatation, et des réactions inflammatoires et d'autres sur le site de sondage sur l'hôte vertébré.
Engineered Immunité Anopheles à Plasmodium Infection
Un agent causal du paludisme humain, Plasmodium falciparum, est transmise par les moustiques anophèles. Le parasite du paludisme est en cours d'attaque intensive de innée du moustique du système immunitaire au cours de son développement sporogonique. On a utilisé le génie génétique pour créer immunitaire améliorée-moustiques Anopheles stephensi par le sang repas-inductible expression d'un transgène codant pour l'IMD voie contrôlée NF-kB facteur de transcription Rel2 dans l'intestin moyen et de la graisse corporelle du tissu. Moustiques transgéniques montré plus grande résistance à Plasmodium et l'infection microbienne à la suite de temps voulu concertées spécifiques de tissus attaques immunitaires impliquant effecteurs multiples. L'impact relativement faible de cette modification génétique sur l'aptitude des moustiques dans des conditions de laboratoire encourage une enquête plus approfondie de cette approche pour le contrôle du paludisme.
