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Articles by Susan E. Ebeler in JoVE
JoVE General
Fruit Analisi Volatile Utilizzando un naso elettronico
1Department of Plant Sciences, University of California, Davis, 2Department of Chemical Engineering and Material Science, University of California, Davis, 3Department of Viticulture and Enology, University of California, Davis
Un metodo rapido per l'analisi di composti volatili in frutta viene descritto. I composti volatili presenti nello spazio di testa di un omogenato del campione vengono rapidamente separati e determinati con ultraveloce gas cromatografia (GC) accoppiato con un'onda acustica di superficie (SAW) sensore. Una procedura per la gestione dei dati e di analisi รจ anche discusso.
Other articles by Susan E. Ebeler on PubMed
Applicazione Delle Tecniche NMR Gradiente Di Campo Pulsato Per Indagare L'associazione Di Composti Di Sapore a Macromolecole
Due tecniche NMR basate sulla diffusione sono presentate e utilizzate per indagare l'associazione di composti selezionati sapore di macromolecole. Un metodo NMR (PFG-NMR) gradiente del campo pulsato è stato applicato per misurare i coefficienti di diffusione apparente di quattro composti alkanone come essi associati con albumina di siero bovino (BSA). La variazione del coefficiente di diffusione apparente in funzione del rapporto BSA/alkanone è stata montata a rendimento costanti di associazione (K(a)()) e stechiometria di associazione (n) per ogni alkanone. I risultati hanno mostrato che i coefficienti di diffusione apparente di alkanones aumentato con una diminuzione nei rapporti BSA/alkanone, e i valori misurati di K(a)() e n erano comparabili con quelli ottenuti con altri metodi e dipendeva la struttura alkanone. Un diffusione nucleare Overhauser effetto (chiamato diffusione NOE pompaggio) metodo basata è stato applicato anche alle miscele di schermo di sapore composti e identificare quelli che hanno un'affinità di legame di macromolecole complesse. Utilizzando questo benzaldeide tecnica e vanillina sono stati osservati da associare con albumina di siero bovino, mentre 2-phenylethanol è stato identificato come un ligand binding non vincolante o debolmente con BSA. La diffusione NOE pompaggio metodo è stato applicato anche ad una soluzione idrica alcolica di cacao fagiolo tannino estratti a cui è stata aggiunta una miscela di 2-phenylethanol, benzaldeide ed ethylbenzoate. La diffusione di pompaggio tecnica NOE chiaramente indicato che ethylbenzoate aveva una forte affinità di legame per il polimerico (-)-epicatechina unità il tannino cacao fagiolo estratti rispetto agli altri due composti di sapore. I risultati dimostrano con successo le possibili applicazioni di tecniche NMR basate su diffusione per studiare i sapori e le interazioni di matrice alimentare non volatile.
Il Presente E Il Futuro Del Settore Vitivinicolo Internazionale
Produzione di vino è sia arte e scienza, una miscela di creatività individuale e tecnologia innovativa. Ma la produzione vinicola è business, anche con fattori economici guida pratiche di fabbricazione. Per avere successo nel mercato moderno, un enologo deve integrare gli aspetti artistici ed economici della produzione di vino e possiedono una solida comprensione del intrinseco e fattori estrinseci che sottostanno alla motivazione di acquisto.
L'applicazione Di Desorbimento Termico GC/MS Con Simultanea Valutazione Olfattiva Per La Caratterizzazione E La Quantificazione Dei Composti Di Odore Da Un Caseificio
Alcuni metodi analitici esistono che combinano l'analisi chimica e sensoriale di composti odorosi in aria tutto. Composti organici volatili sono stati raccolti da aria di campionamento sottovento da un piccolo caseificio attraverso tubi di sostanza adsorbente Tenax TA e Carboxen 569. Sono stati analizzati campioni di desorbimento termico in un cryotrap e separazione cromatografica gas successive, seguito da olfattometria simultanea e spettrometria di massa. Perché composti sono concentrate durante il campionamento, l'analisi sensoriale rilevati composti ad una concentrazione 40 volte che nell'aria, rendendo questo un metodo utile per identificare la traccia composti che partecipano in odore. Venti composti odorosi e nonodorous sono stati identificati e quantificati, compresa la catena lineare di idrocarburi aromatici, composti clorurati, alcoli, chetoni, aldeidi e organici acidi, a concentrazioni di aria di 0.55-320.20 microg/m(3). Picchi composti sono stati caratterizzati da odori che vanno dall'offensiva di piacevole, dimostrando la natura integrativa dell'olfatto. Questo metodo potrebbe essere utile nello studio di molti generi di odori nell'aria.
Catechina Dietetiche Ritardi Tumore Esordio in Un Modello Murino Transgenico
Esistono prove che il vino rosso, che contiene una grande varietà di polifenoli, è protettivo contro il cancro e, possibilmente, le malattie cardiovascolari.
Metodo Headspace Solid-phase Microextraction Per Lo Studio Della Volatilità Dei Composti Di Sapore Selezionato
Variazioni nella volatilità dei composti di sapore selezionati in presenza di componenti di matrice alimentare non volatili sono stati studiati usando headspace solid-phase microextraction (HS-SPME) combinato con GC-MS quantificazione. Time-dependent adsorbimento profili alla fibra SPME e i coefficienti di partizione tra diverse fasi sono stati ottenuti per diversi singoli volatili, mostrando che HS-SPME analisi con un tempo di campionamento breve può essere utilizzata per determinare la concentrazione di "vero" headspace all'equilibrio tra la testa e una matrice del campione. Dialisi di equilibrio seguita da HS-SPME/GC-MS è stato effettuato per confermare la capacità di estrazione di HS-SPME per monitoraggio gratuiti composti volatili in presenza di proteine. In particolare, un tempo breve campionamento (1 min) evita ulteriore estrazione di volatili legati alla proteina. Interazioni tra diversi composti di sapore selezionato e componenti di matrice alimentare non volatile [beta-lactoglobulin o (+)-catechina] Inoltre sono stati studiati mediante HS-SPME/GC-MS analisi. La volatilità di etil esanoato, eptanone, ed esanale era notevolmente diminuito con l'aggiunta di beta-lactoglobulin rispetto a quella dell'acetato di isoamile. Catechina diminuito la volatilità di etil esanoato ed esanale da 10-20% e quella del 2-eptanone aumentato di circa il 15%. Questo studio indica che HS-SPME può essere un utile strumento per lo studio delle interazioni tra i composti volatili e matrice nonvolatile componenti forniti è considerato con attenzione il comportamento termodinamico e cinetico di volatili in relazione alla fibra scelto per gli studi.
Analisi Multiresidue Di Pesticidi Nei Vini Di Estrazione in Fase Solida E Capillare Rilevazione Spettrometria Totale Di Gas Cromatografia-massa Con Controllo Selettivo Dello Ione
È stato sviluppato un metodo per determinare i pesticidi nei vini. I pesticidi sono stati estratti dal vino mediante estrazione in fase solida su una cartuccia polimerica, e il coextractives sono stati rimossi con una cartuccia di aminopropyl-MgSO(4). L'analisi è stata eseguita mediante gascromatografia capillare con rilevazione spettrometria di massa di elettroni impatto selettivo Ion monitoring mode (GC-MSD/SIM). Tre iniezioni sono necessari per analizzare tutti gli organoalogenati 153, organonitrogen, organofosfati e organosolfuri pesticidi e residui. Pesticidi sono stati confermati dai tempi di ritenzione degli ioni del bersaglio e tre rapporti di ioni qualificatore a destinazione. Limiti di rilevazione per la maggior parte dei pesticidi sono stati meno di 0,005 mg/L, e la quantificazione è stata determinata da circa 0,01 a 5 mg/L. Spike recuperi sono stati eseguiti da fortificare i vini rossi e bianchi a 0,01 e 0,10 mg/L. A livello di 0,01 ppm, i recuperi di spike erano superiore al 70% per pesticidi 116 e 124 (fuori 153) nei vini rossi e bianchi, rispettivamente, mentre presso la maggiore concentrazione di spike di 0,10 mg/L, i recuperi sono stati superiori al 70% per 123 e 128 pesticidi nei vini rossi e bianchi, rispettivamente. I recuperi di meno del 70% erano probabilmente dalla polarità dei pesticidi o labilità, con conseguente l'adsorbimento inefficiente dell'antiparassitario per l'eluizione polimerico sorbent, inefficacia dell'antiparassitario da assorbente o degradazione termica dell'antiparassitario in condizioni di GC-MSD.
Indagine Del Comportamento Di Alfa - E Beta-Iononi Di Associazione Ai Beta-lactoglobulin a Valori Di PH Diversi Utilizzando Una Base Di Diffusione NOE Tecnica Di Pompaggio
Tecniche NMR basate sulla diffusione sono state impiegate per studiare gli effetti del pH sull'affinità di conformazione e l'associazione di beta-lactoglobulin (BLG) di alfa - e beta-ionone. Nella prima parte dello studio, è stato studiato l'influenza del pH sul coefficiente di diffusione del BLG in soluzione D (2) O usando un esperimento NMR eco stimolato. Il coefficiente di diffusione del BLG diminuita con l'aumento di valori di pH. A causa della distensione totale (denaturazione) della proteina, con conseguente aggregazione idrofobicamente guidato può essere una significativa diminuzione del coefficiente di diffusione osservata a pH 11. Un NOE diffusione-base tecnica di pompaggio è stato poi applicato per determinare l'affinità di legame relativo tra alfa e beta Iononi e BLG a valori di pH variabile da 3 a 11. A tutti gli intervalli di pH studiati è stato osservato un aumento in intensità di segnale per beta-ionone con l'aumento di rapporti di concentrazione molare tra beta-ionone e BLG. L'intensità di segnale maggiore riflettono legame relativo maggiore affinità. Il più grande affinità di legame si è verificato a pH 9 e la più bassa a pH 11. Alfa-Ionone ha mostrato evidenza di associazione solo a pH 9, e l'associazione è stata significativamente più debole rispetto a quella ottenuta per beta-ionone presso il pH stesso. L'alta affinità osservato per entrambi i composti aroma a pH 9 possono essere a causa di una conformazione flessibile di BLG a questo pH che aumenta l'accessibilità del ligando di sapore. Al contrario, denaturazione alcalina che si verificano a pH 11 dà luogo a relativamente bassa affinità di legame rispetto a quello osservato in altri valori di pH.
Un'elettroforesi Del Gel Di Analisi Per La Determinazione Simultanea Di Topoisomerase I Inibizione E Intercalazione Del DNA
Il DNA manutenzione enzima, la topoisomerasi I, è pensato a giocano un ruolo cruciale in tutte le cellule viventi e per questo gli inibitori di questo enzima motivo sono stati studiati molto. In questo articolo che descriveremo un metodo di elettroforesi del gel in grado di caratterizzare e quantificare l'inibizione della topoisomerasi I da selezionati composti. Inibitori della topoisomerasi sono spesso associati con l'associazione intercalative di DNA e il metodo può determinare simultaneamente intercalative associazione (come svolgimento del DNA) tranne nei casi in cui è proibitivamente forte inibizione. Il metodo utilizza il DNA circolare chiuso (plasmide) e possibile separare single-strand scalfito, linearizzato (double-strand scalfito), completamente rilassato, parzialmente rilassato (topoisomeri) e forme supercoiled del plasmide così che clivaggio del DNA topoisomerasi-dipendente (avvelenamento) può essere determinata anche. Da quantificare avvelenamento, inibizione e intercalazione contemporaneamente e separatamente in relazione a composti di riferimento è possibile effettuare le determinazioni quantitative di questi fenomeni a fini comparativi. Dati per la topoisomerasi I inibitore, Luteolina, sono presentati.
Effetto Dei Costituenti Alimentari Con Potenziale Chemiopreventivi Su Addotto La Formazione Di Una Bassa Dose Di Eterocicliche PhIP E IQ E Fase II Epatici Enzimi
Abbiamo condotto uno studio per valutare strategie dietetiche chemiopreventivi per ridurre gli effetti genotossici delle sostanze cancerogene 2-amino-1-methyl-6-phenyl-imidazo[4,5-b]pyridine (PhIP) e 2-ammino-3-methylimidazo [4,5-f] chinolina (IQ). PhIP e IQ sono eterocicliche (HCAs) che si trovano nella carne cotta e possono essere fattori di rischio per il cancro. Studi di chemioprevenzione tipici hanno usato dosi cancerogeno molti thousand-fold superiore a quello usuale dose giornaliera umana. Pertanto, abbiamo somministrato una dose bassa di [14C] IQ PhIP e [3h] e spettrometria di massa utilizzata acceleratore per quantificare PhIP addotti nel fegato, colon, prostata e plasma sanguigno e IQ addotti nel fegato e nel plasma sanguigno con alta sensibilità. Diete integrate con phenethylisothiocyanate (PEITC), genisteina, clorofillina o licopene sono state valutate per la loro capacità di diminuire addotto formazione di [14C] IQ PhIP e [3h] nei ratti. Abbiamo anche esaminato l'effetto dei trattamenti sull'attività del fase II disintossicazione enzimi glutatione S-transferasi (GST), UDP-glucuronyltransferase (UGT), fenolo sulfotransferase (SULT) e chinone reduttasi (QR). PEITC e clorofillina significativamente diminuito PhIP-DNA addotto livelli in tutti i tessuti esaminati, che è stato riflesso da simili cambiamenti PhIP associazione all'albumina nel sangue. Al contrario, genisteina e licopene tendevano ad aumentare PhIP addotto livelli. I trattamenti non alterano in modo significativo il livello di IQ-DNA o proteine addotti nel fegato. Con l'eccezione di licopene, i trattamenti ha avuto qualche effetto sull'attività degli enzimi di disintossicazione di II fase epatica da uno o più. Concludiamo che PEITC e clorofillina sono protettivi di genotossicità PhIP-indotta dopo una dose bassa esposizione della sostanza cancerogena, possibilmente attraverso la modificazione del metabolismo HCA.
Analisi Comparativa Delle Topoisomerasi IB Inibizione E Intercalazione DNA Di Flavonoidi E Composti Simili: Strutturale Determina Delle Attività
I flavonoidi e altri composti polifenolici hanno dimostrati di inibire la topoisomerasi umana IB (topo mi) attraverso sia l'inibizione dell'attività di rilassamento e attraverso la stabilizzazione del complesso fessurabili (avvelenamento). Alcuni flavonoidi hanno anche dimostrati di intercalavano DNA, ed è stata notata un'associazione di inibizione topoisomerasi con intercalazione. Abbiamo esaminato 34 composti polifenolici, principalmente flavonoidi glycones e aglycones, per la loro capacità di inibire il topo e a intercalavano DNA utilizzando un metodo di elettroforesi del gel in vitro. Dimostriamo che il topo più potente veleni sono in genere i flavoni e flavonoli e che questi, ma non sempre, si trovano ad per essere intercalators del DNA. Non non c'era alcuna chiara correlazione, tuttavia, di attività di topo-io-avvelenamento con il grado di svolgimento del DNA. Sorprendentemente, intercalazione DNA sia topo mi avvelenamento fossi mostrato a verificarsi con alcuni glycones flavoni, compreso il orientin C-glycosylflavone. Inibizione dell'attività di rilassamento di flavonoidi è stato trovato per essere difficili da quantificare e non era più probabile essere dovuto inibizione aspecifica attraverso aggregazione Flavonoide. Come parte di un'analisi di struttura-attività, abbiamo anche studiato la chimica acido-base di flavonoidi e determinato che molti flavonoidi mostrano attività acido-base con un pK(a) nella regione del pH fisiologico. Per questo motivo, cambiamenti di pH sottili possono avere effetti significativi sulle attività di soluzione di flavonoidi e la loro attività biologica concomitante. Inoltre, questi effetti possono essere complicati da aggregazione pH-dipendente e degradazione ossidativa. Infine, sviluppiamo un modello semplice per l'intercalazione di flavonoidi nel DNA e discutere le possibili conseguenze di intercalazione e inibizione topoisomerasi su un certo numero di processi cellulari.
Produrre Effetti Sulla Concentrazione Di 2-metossi-3-isobutylpyrazine in Cabernet Sauvignon Usando Un Metodo in Fase Solida Microextraction Gas Chromatography/mass Spectrometry
È stato sviluppato un metodo rapido e automatizzato in fase solida microextraction (SPME) isotopo stabile diluizione massa gas cromatografia spettrometria (GC-MS) per la quantificazione di 2-metossi-3-isobutylpyrazine (MIBP) nel vino rosso. Vini con 30% (p/v) NaCl e 2 - metossi-(2) H (3) -3-isobutylpyrazine standard interno sono state campionate con una fibra SPME divinylbenzene/carboxen/poly(dimethylsiloxane) di 2 cm per 30 min a 40 gradi C e analizzati mediante GC-MS. Il metodo è stato usato per misurare le concentrazioni di MIBP nei vini Cabernet Sauvignon che sono state prodotte da sei trattamenti di potatura invernale sopra due annate. Concentrazioni MIBP negativamente erano significativamente correlati con gemme per ceppo. Inoltre, la concentrazione di MIBP era direttamente correlata alle valutazioni sensoriali intensità vegetale ottenuti dall'analisi descrittiva.
Multiresidue Determinazione Di Pesticidi in Bevande Di Malto Mediante Gascromatografia Capillare Con Spettrometria Di Massa E Il Monitoraggio Di Ioni Selezionati
Un metodo è stato sviluppato per determinare antiparassitari nelle bevande di malto mediante estrazione in fase solida su una cartuccia polimerico e pulitura di campione con una cartuccia amminopropil MgSO4-condita, seguita da gascromatografia capillare con spettrometria totale impatto degli elettroni in ione selezionato monitoraggio modalità [GC-MS(SIM)]. Tre iniezioni di GC sono stati richiesti per analizzare e identificare organonitrogen pesticidi organofosfati e organoalogenati. I pesticidi sono stati identificati dai tempi di ritenzione dei picchi di ioni di destinazione e rapporti ione qualificatore a destinazione. Limiti di rilevabilità GC per la maggior parte dei pesticidi sono stati 5-10 ng/mL e linearità è stata determinata da 50 a 5000 ng/mL. A 10 ng/mL per tre bevande di malto che differiscono nelle proprietà come gradazione alcolica, solidi e l'aspetto sono stati eseguiti studi di fortificazione. I recuperi da tre bevande di malto erano maggiore del 70% per 85 dei 142 pesticidi (tra cui isomeri) studiato. I dati hanno mostrato che alle matrici di bevande di malto diverso ha avuto alcun effetto significativo sui recuperi. Questo metodo è stato poi applicato per lo screening e l'analisi delle bevande di malto per pesticidi, risultante nella rilevazione di carbaril il insectide e il fungicida dimetomorf in campioni reali. Lo studio indica che di antiparassitari nelle bevande di malto sono notevolmente inferiori ai livelli di tolleranza impostati per la United States Environmental Protection Agency per bevande di malto a partire ingredienti. L'utilizzo della procedura di estrazione/pulitura e analisi di GC-MS(SIM) si è dimostrato efficacia in bevande di malto per un'ampia gamma di pesticidi di screening.
Effetti Di Flavonoide Sull'ossidazione Del DNA a Basse Concentrazioni Rilevanti a Livelli Fisiologici
I flavonoidi, che sono abbondanti nella frutta e verdura, sono noti per avere molti effetti benefici sulla salute. Attività antiossidante, è probabile che sia una funzione principale ma è stata studiata principalmente a concentrazioni elevate Flavonoide che non sono realizzabili a livello intracellulare. In questo esperimento, sono stati esaminati diversi flavonoidi (ad es., catechina, quercetina, Miricetina, Luteolina, morin e cianidina) a basse concentrazioni fisiologicamente rilevanti. Timo di vitello DNA è stato trattato con diversi flavonoidi a concentrazioni di 0,1, 1, 10 e 100 microM utilizzando condizioni di Fenton per indurre l'ossidazione e diversi ossidativo addotti tra cui 8-idrossi guanina (7,8-dihydro-8-oxo-2'-deoxyguanosine; 8-OH guanina) sono stati analizzati mediante gas-cromatografia-massa spettrometria-selettivo dello ione monitoraggio (GC-MS-SIM). Catechina, quercetina e cianidina inibito la formazione di 8-OH guanina da 92%, 33% e 45%, rispettivamente, a basse concentrazioni (0,1 microM). Inoltre catechina e quercetina mostrato attività antiossidante sulla formazione della guanina 8-OH sopra tutte le concentrazioni. Quando il DNA ossidativo addotto 4,6-diammino-5-formamidopyrimidine (fapy-adenina) è stato misurato, tuttavia, le più alte concentrazioni di catechina e quercetina effettivamente aumentato addotto formazione. Questi risultati indicano che i flavonoidi possono agire come antiossidanti a basse concentrazioni rilevanti a livelli fisiologici. Tuttavia misurare solo uno DNA ossidativo addotto come un biomarker può provocare fuorvianti conclusioni per quanto riguarda l'attività antiossidante di prodotti naturali.
Analisi Dei Prodotti Di Ossidazione Del Carbonile Selezionati in Vino Mediante Cromatografia Liquida Con Rivelazione Mediante Serie Di Diodi
Un metodo di cromatografia liquida (HPLC) ad alte prestazioni per il rilevamento e la quantificazione di acetaldeide, gliceraldeide, acido piruvico, acido 2-ketoglutaric e formaldeide in vino, basata sulla formazione di 2,4-dinitrofenilidrazone, è presentato. Questi composti carbonilici spesso risultano dall'ossidazione chimica dei principali componenti del vini e sono noti per influenzare la stabilità di colore e sapore. Loro analisi nel vino sono complicato a causa della loro instabilità e la loro tendenza a reagire reversibilmente con bisolfuro di forma alfa-hydroxysulfonates. Metodi pubblicati che abbattere i sulfonati per la quantificazione di carbonyls totale nel vino coinvolgono idrolisi alcalina di solfito-bound carbonyls, ma ci mostrano, per la prima volta, che questo passo del trattamento alcalino aumenta significativamente la concentrazione di carbonyls durante l'analisi. Viene descritta una soluzione basata sull'esclusione di ossigeno. La tecnica offre buona specificità e riproducibilità (% RSD 0,45-10.6) limiti di rilevazione (1.29-7.53microgL(-1)). Il metodo è stato usato con successo per monitorare i cambiamenti di concentrazione di questi composti nei vini bianchi e rossi.
Sapore Vino: Chimica in Un Bicchiere
Anche se centinaia di composti chimici è stati identificati nelle uve e dei vini, solo pochi composti effettivamente contribuiscono alla percezione sensoriale di sapore di vino. Questa revisione critica si concentra sui composti volatili che contribuiscono al profumo di vino e fornisce una panoramica dei recenti sviluppi nelle tecniche analitiche per l'analisi di composti volatili, compresi i metodi utilizzati per identificare i composti che fanno i più grandi contributi all'aroma complessivo. Conoscenza della composizione volatile da sola non è sufficiente per capire completamente l'aroma del vino in generale, tuttavia, a causa di complesse interazioni di odorizzazione con a vicenda e con altri componenti della matrice non volatile. Queste interazioni e il loro impatto sulla volatilità aroma sono al centro di gran parte della ricerca corrente e sono anche recensiti qui. Infine, il sequenziamento del genoma vite e lievito in circa 10 anni offre l'opportunità per emozionanti studi multidisciplinari volto a comprendere l'influenza di molteplici fattori genetici e ambientali sul sapore di uva e vino biochimica e metabolismo (147 riferimenti).
Antocianina Interazioni Con DNA: Intercalazione, Topoisomerase I Inibizione E Reazioni Ossidative
Antocianine e antocianidine loro aglicone sono pigmentati flavonoidi trovati in quantità significative in molti cibi comunemente consumati. Essi presentano una complessa composizione chimica in soluzione acquosa, che rende difficile studiare la loro chimica in condizioni fisiologiche. Qui abbiamo utilizzato un dosaggio di elettroforesi su gel che impiegano plasmide DNA supercoiled per esaminare la capacità di questi composti (1) a intercalavano DNA, (2) per inibire la topoisomerasi umana che attraverso sia l'inibizione della attività di rilassamento del plasmide (inibizione catalitica) e la stabilizzazione del complesso DNA-topoisomerasi fessurabili (avvelenamento) e (3) per inibire o rafforzare ossidativo DNA single-strand intaccare. Abbiamo non trovato alcuna prova di intercalazione DNA da anthocyan (id) ins nella gamma di pH fisiologico per uno qualsiasi dei composti utilizzati in questo studio-cianidina cloruro, cyanidin 3-O-glucoside, cyanidin 3,5-O-malvidolo, malvidina-3-O-glucoside e luteolinidin cloruro. Gli antociani inibiscono topoisomerasi attività relax solo a concentrazioni elevate (> 50 mamma) e siamo non riusciti a trovare alcuna prova di topoisomerase I fessurabili stabilizzazione complessi di questi composti. Tuttavia, abbiamo osservato che tutti di anthocyan (id) ins utilizzato in questo studio sono stati in grado di indurre significativo ossidativo fenditura strand DNA (intaccature) in presenza di 1 mM DTT (ditiotreitolo), mentre il scavenger di radicali liberi, DMSO, a concentrazioni in genere utilizzata in studi simili, completamente inibito intaccare DNA. Infine, proponiamo un meccanismo per spiegare la anthocyan (id) in indotta ossidativo DNA cleavage osservata sotto le nostre condizioni sperimentali.
Headspace Solid-phase Microextraction Gas Cromatografia Spettrometria Di Massa Per La Profilatura Liberi Composti Volatili Nei Vini E Uve Di Cabernet Sauvignon
Il complesso aroma del vino è derivata da molte fonti, con componenti derivati da uva essendo responsabile per il carattere varietale. La capacità di monitorare l'aroma dell'uva composti consentirebbe per una migliore comprensione di come il vigneto pratiche e processi di vinificazione influenzano la composizione finale volatile del vino. Qui, descriviamo una procedura mediante GC-MS combinata con headspace solid-phase microextraction (HS-SPME) per l'analisi di composti volatili liberi in uve di Cabernet Sauvignon. Preparazione dei campioni differenti (SPME tipo di fibra, tempo di estrazione, temperatura di estrazione e diluizione solvente) e GC-MS condizioni sono state valutate per ottimizzare il metodo. Per il metodo finale, bucce sono stati omogeneizzati con acqua e 8 ml di campione sono stati collocati in un flacone di headspace 20 ml con aggiunta di NaCl; una fibra SPME polidimetilsilossano è stata utilizzata per l'estrazione a 40 gradi C per 30 min con agitazione continua. Utilizzando questo metodo, 27 sapore composti sono stati monitorati e usati per profilare i componenti volatili liberi nell'uva Cabernet Sauvignon a livelli di maturità diversi. Dieci composti da uve, tra cui 2-phenylethanol e beta-damascenone, inoltre sono stati identificati nei vini corrispondenti. Utilizzando questa procedura è possibile seguire volatiles selezionati attraverso il processo di vinificazione.
Ustione Superficiale E Lo Sviluppo Di Butteratura Amara Nelle Mele Transgeniche Mazzoni Soppressa Per La Biosintesi Di Etilene
L'ormone vegetale etilene regola frutto climaterico maturazione e svolge un ruolo importante nello sviluppo dell'ustione superficiale nella frutta mela durante la conservazione frigorifera. È stato studiato l'effetto della conservazione frigorifera a 0 gradi C su sviluppo di ustione superficiale e butteratura amara (BP) in transgenici mele Greensleeves (GS) soppressa per la biosintesi di etilene. Quattro linee di apple sono state utilizzate: essendo GS; linea 68 G, soppressa per ossidasi acido 1-aminocyclopropane-1-carbossilico (ACC) (ACO); e linee 103Yand 130Y, soppressa per ACC sintetasi (ACS). Frutta dal trasformato linee 68 G, 103Y, e 130Y prodotto molto poco etilene durante i 3 mesi di conservazione frigorifera a 0 gradi C e dopo il successivo trasferimento a 20 gradi C, considerando che non trasformati frutta prodotto significativi etilene durante la conservazione frigorifera, che ha aumentato drammaticamente a 20 gradi C. respirazione, espressa come produzione mentre, era simile in tutte le linee di quattro apple. Dopo 2 mesi a 0 gradi C, tutte le linee di apple ha mostrato alcuni sintomi di BP, ma linee G 68 e 103Y sono stati più colpiti rispetto GS non trasformati o linea 130 Y. Entrambi trasformati e non trasformate mele prodotte alfa-farnesene, ma concentrazioni erano inferiori a frutto giallo rispetto a frutto verde in tutte le linee ma 68 G. Linea 68 G prodotto più alfa-farnesene dopo 2 mesi a 0 gradi C, compresi (E, E), alfa-farnesene e (Z, E) Alfa-farnesene. Concentrazioni di (E, E) Alfa-farnesene erano 100 volte superiori a quelle di (Z, E) Alfa-farnesene in tutte le linee. Dopo 4 mesi a 0 gradi C più 1 settimana a 20 gradi C, mele GS non trasformate esposto l'ustione più superficiali, mentre frutti da linee 68 G e 103Y erano meno interessati e linea 130Y non aveva alcuna ustione. Gravità superficiale ustione era più alto nel frutto verde rispetto a frutto giallo in tutte le linee interessate. Queste linee esposte anche significativa produzione di 6-methyl-5-hepten-2-one (MHO), un prodotto di ossidazione maggiore di (E, E) Alfa-farnesene. Linea 130Y esposto ustione superficiale né prodotto MHO. Qui viene mostrato che anche transgeniche mele soppresse per geni della biosintesi dell'etilene possono produrre alfa-farnesene, che a sua volta può ossidare i radicali liberi e MHO, portando a scottare lo sviluppo.
Analisi Di Pesticidi Multiresidue Dei Vini Di Estrazione Fase Solida Dispersivi E Spettrometria Di Massa Tandem Cromatografia Liquida Ultraelevato-prestazioni
Per la determinazione di 72 pesticidi nei vini è descritto un metodo multiresidue antiparassitario. Pesticidi sono state estratte utilizzando acetonitrile saturata con magnesio solfato e cloruro di sodio, seguita dalla fase solida dispersivo pulitura utilizzando primario-secondario ammina e nero di carbone grafitato assorbenti. Analisi sono eseguita da spettrometria di massa tandem ionizzazione del liquido cromatografia-electrospray di ultraperformance (UPLC-MS/MS). I limiti di rivelabilità (LOQs) per la maggior parte dei pesticidi andavano da 0,3 a 3,3 μg/L ad eccezione di ciromazina, fenhexamid e acibenzolar-S-metile (LOQ > 10 μg/L), e la quantificazione è stata determinata dalle curve di calibrazione degli standard contenente 5,0-2500 μg/L con r(2) > 0,99. Sono stati eseguiti studi di recupero da fortificare i campioni di vino con gli antiparassitari a concentrazioni di 10, 100 e 1000 μg/L, con conseguente recuperi di > 80% per la maggior parte dei pesticidi. Inferiore (< 70%) e superiore (> 120%) recuperi erano probabilmente le complicazioni della labilità dei pesticidi o volatilità, interferenze di matrice o desorbimento inefficiente da assorbenti la fase solida. Il metodo è stato utilizzato per analizzare i 10 vini raccolti da un'indagine di mercato basket e 19 diversi pesticidi, soprattutto fungicidi, erano presenti in concentrazioni che vanno da < 1.0 a 1000 μg/L.
La Quercetina Inibisce Il Danno Al DNA Indotto Da Perossido Di Idrogeno E Migliora La Riparazione Del DNA Nelle Cellule Caco-2
I flavonoidi sono noti per avere attività antiossidante che può limitare il danno al DNA e aiutare a prevenire malattie degenerative, tra cui il cancro. Tuttavia, la nostra conoscenza del ruolo dei flavonoidi in meccanismi comprendono protezione/riparazione del DNA è limitato. Questo studio ha studiato gli effetti della quercetina sull'ossidazione del DNA e riparazione del DNA nelle cellule Caco-2 con o senza sfida ossidante (H2O2). Quercetina (1, 100 microM) ridotto significativamente il danno ossidativo al DNA, come misurato dal numero di single-strand break identificato tramite l'elettroforesi del gel di singola cellula. Trattamento di quercetina causato anche un aumento misurabile l'espressione del mRNA di umano 8-oxoguanine DNA glycosylase (hOGG1) a 0 e 4 h dopo il trattamento di H2O2 (misurato mediante RT-PCR). Inoltre, il più alto livello di quercetina testato (100 microM) mantenuta espressione hOGG1 a livelli basali o superiore per fino a 12 h dopo il trattamento di H2O2, mentre trattamento ossidante da solo ha portato riduzione significativa di hOGG1 a 8 h. Il nostro studio indica che la quercetina potrebbe proteggere sia riducendo il danno ossidativo al DNA e dal miglioramento del DNA di riparazione attraverso la modulazione dell'espressione di enzimi DNA riparazione del DNA.
Chimica E Il Sapore Del Vino: Esaminando Il Cristallo
Durante il secolo passato, i progressi nella chimica analitica hanno giocato un ruolo significativo nella comprensione sapore e vino chimica. Considerando che la messa a fuoco nel XIX e il XX secolo è stato sulla determinazione dei principali componenti (etanolo, acidi organici, zuccheri) e individuare le frodi, più di recente l'enfasi è stata sulla quantificazione traccia composti compresi quelli che possono essere correlati a sapori varietali. Inoltre, negli ultimi 15 anni, applicazioni di combinato analitiche e tecniche sensoriali (ad esempio, gas cromatografia-olfattometria) hanno migliorato la capacità di relazionarsi composizione chimica con proprietà sensoriali, identificando impatto se composti o chiarire gli effetti matrice. Rimangono molte sfide, tuttavia. Questa carta discute alcune delle recenti ricerche volte a comprendere come viticola e pratiche enologiche influenzano volatili dell'uva e del vini. Inoltre, le sfide nel collegamento composizione di proprietà sensoriali anche saranno riesaminate. Infine, futuri progressi nel collegamento tra uva, lievito e genomica umana alla chimica ed il sapore del vino verranno brevemente discussi.
Interazioni Tra I Composti Volatili Vini E Uva E Vino Matrice Componenti Influenza Aroma Composto Headspace Partizionamento
Un disegno fattoriale completo è stato utilizzato per valutare gli effetti di matrice di etanolo, glucosio, glicerolo, catechina e prolina sulla compartimentazione volatile di 20 composti volatili considerati a giocare un ruolo nel vino aromatico. Analisi della varianza ha dimostrato che le interazioni a due vie di etanolo e glucosio, etanolo e glicerolo e glicerolo e catechina significativamente influenzato headspace partizionamento dei volatili. Gli esperimenti sono stati condotti per osservare l'effetto dell'etanolo variegata e concentrazioni di glucosio su headspace partizionamento di una costante concentrazione di sostanze volatili. Analisi della varianza e l'analisi di regressione lineare mostrò che la presenza di glucosio aumentato la concentrazione di volatili nello spazio di testa, mentre aumentando la concentrazione di etanolo è stata correlata negativamente con headspace partizionamento dei volatili. Un successivo studio ha valutato l'effetto di diluizione vini bianchi e rossi con acqua ed etanolo. Ancora una volta fu osservato che la concentrazione di etanolo maggiore ridotto significativamente l'abbondanza relativa di composti volatili nello spazio di testa campione. Questo studio indaga alcune delle interazioni matrice complessa dei principali componenti dell'uva e del vino che influenzano il partizionamento headspace composti volatili. La grandezza di ogni interazione matrice volatile era etanolo > glucosio > glicerolo > catechina, mentre prolina ha dimostrato alcuna interazione apparente. I risultati chiaramente identificano che crescenti concentrazioni di etanolo riducono significativamente la concentrazione di headspace di composti volatili aroma, che può contribuire a spiegare le recenti osservazioni di ricerca sensoriale che indicano l'etanolo può sopprimere gli attributi di aroma di frutta nel vino.
Periodo Breve Anaerobiosi Prima Dello Stoccaggio Freddo Allevia La Butteratura Amara E Scottature Superficiali Nelle Mele Granny Smith
Mele Granny Smith californiano sono molto sensibili alla butteratura amara (BP) e sintomi di ustione superficiale che si sviluppano durante la conservazione frigorifera. Il principale mezzo di prevenzione è difenilammina applicazione ad immersione e/o gassosi dell'etilene inibitore 1-methylcylclopropene (1-MCP), che è efficace contro le scottature superficiali, ma non contro BP. Questo studio ha studiato l'efficacia di un non-prodotto chimico alternativo, low-O(2) (LO2) stress, nella prevenzione di questi due disturbi fisiologici.
2-Metossi-3-isobutylpyrazine in Chicchi D'uva E La Sua Dipendenza Dal Genotipo
2-Metossi-3-isobutylpyrazine (MIBP) contribuisce un aroma di peperone per molte cultivar dell'uva e ha una soglia di aroma segnalati di ∼2 ng L(-1) in acqua. Lo scopo di questo studio era duplice: (1) sviluppare una procedura utilizzando micro-estrazione in fase solida headspace combinato con GC-MS in ione selezionato (HS-SPME-GC-MS-SIM) modalità di monitoraggio per analisi di MIBP in chicchi d'uva e (2) determinare la posizione di biosintesi MIBP in vigne di approccio innesto ammassi di Vitis vinifera L. cvs Cabernet Sauvignon e Muscat blanc sulla vicenda. I solidi solubili e pH della matrice succo d'uva/omogeneizzato da fasi di sviluppo differenti uva bacca influenzato la precisione del metodo; Pertanto, è stato utilizzato quantificazione tramite il metodo dell'aggiunta standard. Utilizzando il nostro metodo sviluppato, il limite di rilevazione (LOD) e limite di quantificazione (LOQ) di MIBP sono stati 0,1 ng L(-1) e 2 ng L(-1), rispettivamente, misurata in un succo di modello e non-MIBP contenente succo di Chardonnay. Recuperi a spillo in media tra 91 e 112% Cabernet Sauvignon e Pinot noir omogeneati e la deviazione standard relativa complessiva era inferiore al 10%. Il metodo è stato utilizzato per analizzare MIBP 29 cultivar di uva e frutta dal cluster innestate su vitigni di Cabernet Sauvignon o Muscat. Livelli quantificabili sono stati trovati soltanto in Cabernet franc, Cabernet Sauvignon, Merlot, Sauvignon blanc e Semillon, che fornisce informazioni sulla connessione genetica per l'occorrenza di MIBP nell'uva. No MIBP è stato rilevato nelle bacche di Muscat blanc cluster innestati su vitigni di Cabernet Sauvignon quando campionate a maturità di frutto. MIBP è stata rilevata in tutte le bacche di Cabernet Sauvignon indipendentemente dalla configurazione dell'innesto. I dati indicano che MIBP o suoi precursori provengono in bacca e la sua formazione dipende dal genotipo dell'uva.
Misurazione Coefficienti Gas-liquido Partizione Di Composti Aroma Da Fase Solida Microextraction, Campionamento Headspace O Liquido
Composti idrofobici sono importanti odorifere e nutrienti negli alimenti e bevande, così come contaminanti ambientali e prodotti farmaceutici. Fattori che influenzano la loro suddivisione all'interno di sistemi multicomponenti e/o dalla fase liquida alla rinfusa all'aria sono fondamentali per comprendere la qualità di aroma e la biodisponibilità dei nutrienti. L'equilibrio di partizionamento di analiti idrofobici tra aria e acqua è stato analizzato utilizzando microextraction in fase solida (SPME) nello spazio di testa (HS-SPME) e tramite immersione diretta nel liquido (DI-SPME). I composti studiati servono come modelli per i composti idrofobici aroma che coprono una gamma di coefficienti di partizione aria-acqua che si estende su quattro ordini di grandezza. Variando la quantità totale di analita come pure il rapporto dei vapori di liquido nel sistema chiuso, statico, può essere determinato il coefficiente di partizione, K(vl), senza la necessità di una calibrazione esterna, eliminando molti dei potenziali errori sistematici. Determinazione K(VL) utilizzando DI-SPME in questo modo non è stato dimostrato prima. C'era buon accordo tra risultati determinati da DI-SPME e HS-SPME sopra la vasta gamma di comportamento studiato il partizionamento. Questo dimostra che questi due metodi sono in grado di fornire misurazioni accurate, complementari. Precisione nella determinazione di K(vl) dipende fortemente dal K(vl) grandezza e il rapporto tra le fasi liquide e aria.
Misurazione Distribuzioni Sapore Locale Equilibrio in Soluzione SDS Utilizzando Headspace Solid-phase Microextraction
Microextraction fase solida (SPME) campionamento di headspace sopra una soluzione acquosa micellare di sodio dodecil solfato (SDS) è stato indicato per essere efficace per quantificare il partizionamento di equilibrio del soluto limonene tra acqua e aggregati micellari SDS. Concentrazioni nello spazio di testa sono stati determinati dalla quantità assorbita dalla fibra SPME durante estrazioni min 1, con la quantità di fibra determinato mediante gascromatografia/spettrometria di massa (GC/MS). Concentrazioni di headspace in funzione della concentrazione di tensioattivo erano montare un bilancio di massa per produrre il coefficiente e concentrazione micellare critica. Quando il limonene totale nel sistema era abbastanza basso che potrebbe essere sciolto completamente dall'acqua in assenza di micelle, un valore costante per il coefficiente di M(-1) 1700 è stato ottenuto, indipendente della concentrazione limonene. Tuttavia, a concentrazioni più elevate di limonene totale, il coefficiente di divenne una funzione della quantità di limonene in micelle, come confermato da esperimenti separati in cui è stata variata o limonene o concentrazione di SDS. L'aumento osservato nel coefficiente di partizione con crescente limonene probabile segnala uno spostamento da micelle a micelle gonfie e in definitiva di microemulsione goccioline. L'effetto della concentrazione di SDS al limite di solubilità acquosa del limonene potrebbe essere osservato anche in esperimenti di HS-SPME dove SDS o limonene è stato variato.
Frutta Di Maturazione in Vitis Vinifera: Intensità Della Luce Prima E Non Durante La Maturazione Determina La Concentrazione Di 2-metossi-3-isobutylpyrazine in Bacche Di Cabernet Sauvignon
I ruoli di luce e la temperatura nell'accumulo di vegetale impatto composti 2-metossi-3-isobutylpyrazine (MIBP) di uva (Vitis vinifera L.) bacche sono stati determinati. Singoli cluster sono stati esposti a varie intensità luminose con densità neutra ombra panno prima maturazione, durante la maturazione o per tutta la stagione in tre stagioni di crescita. Un metodo di recente sviluppato utilizzando headspace solid-phase microextraction combinato con GC-MS in modalità di monitoraggio di ioni selezionate è stato impiegato per misurare MIBP in bacche. Berry MIBP concentrazione aumentata successivamente berry insieme, ha raggiunto un massimo prima dell'inizio della maturazione e poi è diminuito da allora in poi fino al raccolto. Ombreggiatura completa dei cluster aumentato la concentrazione di MIBP più del 100% rispetto ai controlli le 2 di 3 anni. Luce sempre più inibiti MIBP concentrazioni fino a 25-50% dell'intensità luminosa ambientale (1500 µmol fotoni m(-2) s(-1)). Tuttavia, solo i cambiamenti nell'intensità della luce prima maturazione avevano alcun effetto sul MIBP accumulo o concentrazione finale MIBP. Analisi dei dati meteo ha mostrato che il 1 anno in cui ombreggiatura era inefficace era insolitamente caldo, caldo all'inizio della stagione e aveva più caldi giorni e giorni di laurea all'inizio della stagione superiori rispetto gli altri 2 anni. In esperimenti di ambiente controllato, condizioni di crescita calda ridotto concentrazioni MIBP di frutta circa tanto quanto l'esposizione luce ridotta concentrazioni MIBP in esperimenti di campo. I risultati indicano che sia luce e temperatura influenzano in modo significativo MIBP nella raccolta frutta, ma che la luce ambiente durante la maturazione non influisce in modo significativo concentrazioni MIBP negli acini alla vendemmia.
