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Articles by Tanner Nevill in JoVE
JoVE General
Microfluidic 흐름 전지를 사용하여 흐름에서 혈소판 접착 및 집계
혈소판 유착 계단식는 전단 흐름의 존재에서 일어나는, 요인은 종래의 (정적) 잘 철판 assays에서 차지하는 없습니다. 이 문서의 생리 전단 흐름 조건을 에뮬레이트하는 microfluidic 잘 플레이트 형식을 이용한 혈소판 - 집계 분석에 대한 보고서.
Other articles by Tanner Nevill on PubMed
통합된 미세 세포 배양 및 세포의 용 해 칩에
우리는 여러 시 약 및 수동 절차를 요구 하는 시스템에 향상 된 자동화 된 세포 분석을 위한 통합 된 미세 세포 문화와 lysis 플랫폼을 제시. 이전 기술 개발 연구소 (즉, 내장 세포 문화와 화학적 셀 lysis) 우리가 설계, 조작, 하 고 경작 헬러의 통합된 미세 플랫폼 특징에서 조합을 통해 MCF 7, Jurkat, 그리고 조 K1 5 일 및 이후 lysing 시 약을 추가 하지 않고도 셀 lysing 세포. 온 디맨드 lysis 두 proteinacious (GFP)를 방출 하는 미세 챔버 내 로컬 수산화 이온 생성에 의해 달성 했습니다 및 유전자 (DNA Hoescht 스테인드) 소재. 샘플 단백질 전기 화학 세포의 용 해 조건에 노출 immunodetectable (p53) 되었고 그들의 효소 활동 (HRP)을 조사 했다.
조작 모 세관 및 광섬유에 대 한 저렴 한 비용, 제작 방법을 결합 장치에 대 한 상호 연결
미세 칩 광원, 광 검출기, 시 약 저수지 등 더 큰 거시적인 구성 요소에는 연결이 필요합니다. 이 문서에서는 미세 칩 채널와 모세 혈관, 광학 섬유 전선의 통합을 위한 비 발한 방법 소개. 방법 미세 칩에서 평면 상호 연결 채널을 형성 하 고이 채널에 모세 혈관, 광섬유, 또는 전선 삽입으로 이루어져 있다. 자외선의 끝에 수동으로 이동 된 현미경을 사용 하 여 상호 연결. UV 경화 접착제는 모세 혈관, 섬유, 또는 그것은, 액체 단단한 연결을 치료 하는 와이어 끝에 심지 수 다음. 빛을 지도 모세 혈관과 광학 섬유와 함께 사용 하는이 기술은 변종에 UV 빛 섬유, 또는 모 세관으로 감독 하 고 UV 접착제 각 모 세관 또는 섬유의 끝에서 나오는 빛의 원추형으로 치료. 이 기술은 완전 자동, 품질 및 제조의 크게 향상 된 상호 연결, 그리고의 제조 수 있도록 잠재력을가지고 완전 자동화 된 방식으로 상호 연결. 10000 이상 인터커넥트 반자동된 구현의 두 번째 기법을 포함 하 여 이러한 메서드를 사용 하 여 만들어진 다양 한 경직 된 자료의 거의 2000 미세 칩에 형성 되었습니다. 인터커넥트 결과 적어도 800 psi까지 압력을 견딜 수 있도록, 볼륨 10 femtoliters 추정 unswept가지고 죽은 볼륨은 모 세관 길이 의해서만 정의 된.
확장 결합 시스템에서 축 농도 기울기의 필터링 저역 통과 채널
화학 그라디언트 축방향 미세 채널에서 자주 실행 하는 바람직하지 않은 높은 주파수 농도 변화, 또는 시스템의 기계적 및 열 변동에서 발생 하는 잡음 포함. 이 논문에서 우리는 '확장 채널' 이라는 수동 미세 구성 요소 설명 (EC)는 축 분산을 통해 고주파 노이즈를 제거 합니다. 우리 표시 필터의 동작은 원통인, 모델링 수 시 외.에 의해 파생 된 미세 채널의 전달 함수에 대 한 식을 사용 하 여 (Y. W. 샤, L. 첸과 C. H. Mastrangelo, 랩 칩, 2008, 8, 907-912). 그라디언트 형성에 미세 채널에서 enyzmatic 분석 실험에서에서 잡음을 제거 하는 ECs 사용 하 여 보여 줍니다. 결과 데이터 품질 화학 모델 및 보다 정확한 분석에 더 맞는 수 있도록 향상 되었습니다. Ecs는 많은 미세 응용 프로그램, 예를 들어 액체 착 색 인쇄기, 생화학 및 chemotaxis 연구에에서 있는 축 농도 기울기에서 잡음 제거에 매우 효과적 이어야 한다.
단일 셀의 연속 차동 임피던스 분광학입니다
유체 셀 트래핑에 의해 개최 하는 단일 셀의 연속 차동 임피던스 분석 장치 제공 됩니다. 측정은 두 개의 밀접 하 게 위치한 전극 쌍, 한 빈 (참조) 포함 하는 셀에서 전류를 기록 하 여 수행 됩니다. 동적 화학 물결에 대 한 응답에서 생산 하는 단일 셀 임피던스의 측정 시간에 따라 보여 줍니다. 시스템은 계면 활성 제 농도에 갇혀 셀의 임피던스 감소 트윈 효과를 HeLa 세포의 반응 분석 결과를 사용 하는 첫째, 종속 방법 및 세포 막의 점진적인 lysis로 해석 됩니다. 둘째, 세균 기 공 형성 독, Streptolysin-O의 효과 측정은: 임피던스에 일시적인 지 수 감퇴 점점 투과성 세포 막으로 기록 됩니다. 붕괴 시간 상수는 독 소 농도 반비례 (482, 150, 및 30의 0.1, 1, 및 10 구/ml, 각각). 전자 보충 자료:이 문서의 온라인 버전 (doi:10.1007 / s10404-009-0534-2) 권한이 있는 사용자가 사용할 수 있는 보조 자료를 포함 합니다.
IonFlux: 미세 패치 클램프 시스템을 인간의 에테르-à-이동-이동 함께 평가 관련 유전자 채널 생리학 및 약리학
이온 채널 분석 실험 약물 발견 뿐만 아니라 임상의 유망한 새로운 화합물을 식별 하는 데 뿐만 아니라 잠재적인 부작용의 가능성을 최소화 하기 위한 필수적입니다. 두 응용 프로그램 수요에 최적화 된 처리량, 비용, 그리고 현재 측정 된 멤브레인의 예측 정확도 evoked 또는 약물 후보에 의해 변조 된 변경 됩니다. 이 수요를 해결 하기 위해 사용할 수 있는 여러 경쟁 electrophysiological 기술 하지만 중요 한 간격을 유지 합니다. 우리 소설 미세 기반 기술 결합 하 여 화합물, 셀, 및 단일 표준 잘 접시에 버퍼의 산업 응용 기술. 셀 트랩, 전체 셀 및 복합 관류 공 압 밸브, 로봇 공학, 유체 배관 및 관련된 유지 보수 시스템을 해방 하는 결합 된 미세 채널 상호 연결에서 수행 됩니다. IonFlux ™는 온도 제어와 연속 전압 클램프 전압 및 리간드 개폐 이온 채널 변조기에 대 한 심사에서 잠재적인 응용 프로그램에 대 한 최신의 소형 시스템. 여기, IonFlux 시스템의 앙상블 녹음 인간의 이동 이동 à 에테르 관련된 유전자 (hERG) 채널 (안정적으로 중국 햄스터 난소 세포 라인 단위로 함), 생물 리 및 약리 특성에 다른 자동 평면 패치 시스템 설립 검증 했다. 우리 채널 활성화와 잠재적인 그 반전의 온도 의존성을 특징. 알려진된 hERG 차단제와 IonFlux 시스템으로 얻은 제어 화합물의 농도 응답 특성 문학과 QPatch HT 시스템과이 셀 라인에서 얻은 내부 데이터와 상관 된다. 생물 리 및 약리 데이터를 바탕으로, 우리는 IonFlux 시스템 소설, 다재 다능 한, 프로 파일링 및 이온 채널 표적 온도 제어의 혜택에 대 한 시스템 검사 자동 제공 결론.
분석 실험 잘 판 결합 장치를 사용 하 여 전단 기반 혈전 증을 실시 하
전단 응력 혈관 부상의 사이트에서 혈소판 접착 력 및 혈전 형성 조절에 중요 한 역할을 한다. 이와 같이 혈소판은 종종 그들의 hemostatic 및 thrombotic 기능 제어 전단 흐름 조건 하에서 체 외 검사 합니다. 일반적인 전단 기반 혈소판 분석 유전자 돌연변이, 억제 또는 실험적인 화합물, 매트릭스 기판 및 다른 생리 적 및 병 적인 전단 세력의 효과 평가 포함합니다. 여러 실험실 전단 흐름, 콘, 병렬 플레이트 관류 챔버 및 플레이트 viscometers 등을 공부 하는 데 널리 사용 되는. 이러한 기술 관련 샘플, 기판, 혈액 볼륨 및 처리량의 종류에서 넓게 변화 한다. 여기, 우리 전단 흐름에서 혈소판 분석을 위한 결합 시스템을 설명합니다. 우리는 사용 하는 소자 나 고 폰 Willebrand 인자에 콜라겐에 혈전 형성을 연구. 시스템 당 단일 환자 샘플 데이터 요소 수를 극대화에 중점을 두고 전단 흐름 조건 하에서 antiplatelet 화합물 Abciximab, 복용량 응답 조사도 사용 되었다. 제시 방법은 기존의 방법에 비해 여러 장점을 수 여. 이들은 실시간으로 동시에 최대 24 상황을 평가, 실험, 동일한 물리적 조건 유지 및 기증자 매우 낮은 볼륨을 사용 하는 기능을 포함 합니다.
잘 결합 시스템 변수 전단 로드가 동적 혈소판 문제의 조사를 위한 접시
실시간으로 혈소판 동작 연구 제어 전단 스트레스 많은 혈관 질환의 기본 메커니즘에 대 한 통찰력을 제공 하 고 혈소판에 초점을 맞춘 치료제의 평가. 균일 전단 흐름에서 혈관 벽에 혈소판 동작을 연구 하는 데 사용 하는 가장 일반적인 두 가지 방법에는 병렬 플레이트 흐름 챔버와 콘-플레이트 viscometers. 일반적으로 이러한 메서드는 사용 하 여, 실험 유연성 부족, 낮은 데이터 콘텐츠, 낮은 처리량, 필요 시 약을 큰 볼륨을 제공 하기가 어렵습니다. 여기, 우리 보고 잘 플레이트 결합 (WPM)-높은 처리량 낮은 시 약 사용량과 사용 하기 쉽게 잘 접시 형태로 높은 실험 유연성을 제공 하는 시스템을 기반으로 합니다. 시스템 잘 번호판 미세 채널, 공 압 인터페이스, 자동화 된 현미경 및 소프트웨어의 통합 된 배열을 사용 하 여 구성 됩니다. WPM 시스템이 전단 응력에서 동적 혈소판 동작을 조사 하는 데 사용한. 여러 채널 디자인을 제시 하 고 혈전 형성 연구에 그들의 적응성을 확인 하기 위해 전체 혈액으로 전단 하 중에 대 한 테스트. 정상적인 생리 적 전단 (0.1-20 dyn/cm(2))와 병 적인 전단 (20-200 dyn/cm(2)) 장치 다양 한 전단, 매트릭스 코팅 및 단층 조건에서 생체 외에서 혈소판 동작을 연구에 사용 되었다. 높은 생리 적 관련성 낮은 혈액 사용량과 처리량 증대 만들 귀중 한 기법을 사용할 수 있는 혈관 생물학 연구자. 또한 접근 확장성 염증, 암 생물학, 그리고 발달/줄기 세포 연구를 포함 한 다른 연구 분야에 있다.
