Rôle Des Inhibines Et Activines Dans Le Cancer De L'ovaire

Cancer Treatment and Research. 2002  |  Pubmed ID: 11775457

Inhibine Binding Protein (InhBP/p120), Betaglycan Et La Poursuite De Recherche Pour Le Récepteur De L'inhibine

Molecular Endocrinology (Baltimore, Md.). Feb, 2002  |  Pubmed ID: 11818494

Betaglycan (récepteur TGFbeta type III) et InhBP/p120 (un protéoglycane attaché à la membrane) ont été récemment identifiés comme récepteurs putatifs inhibine. Ici, nous passons en revue l'état actuel des connaissances concernant ces deux protéines en ce qui concerne leur rôle potentiel dans la biologie de l'inhibine. Ce qui est important, ni protéine semble satisfaire tous les critères requis pour la classification comme un récepteur de l'inhibine bona fide. Betaglycan ne semble pas être exprimées dans les gonadotropes hypophysaires, la cible principale des inhibines et InhBP/p120 en circulation ne lie pas inhibines en essais de fixation de récepteurs conventionnels. Alors que les deux protéines semblent capables de promouvoir la médiation inhibine antagonisme de l'activine signalisation, ni semble générer des signaux intracellulaires inhibine spécifiques. Récemment, les protéines liant l'inhibine supplémentaires ont été identifiés dans les tissus cibles d'inhibine, y compris l'hypophyse et les cellules de Leydig. Caractérisation de ces protéines, couplé avec les enquêtes en cours de betaglycan et InhBP/p120, conduira à une meilleure compréhension des mécanismes d'action de l'inhibine.

Exempt De Follistatine Activine A N'est Pas Associé Aux Naissances Prématurées

American Journal of Obstetrics and Gynecology. Mar, 2002  |  Pubmed ID: 11904608

Le but de cette étude était de déterminer si exempt de follistatine activine A (une protéine apparentée à l'inhibine avec élévation sérique avant travail terme) est liée à la prématurité spontanée chez une population ambulatoire.

Localisation Des Composants L'activine Signal Transduction Dans Des Follicules Ovariens Humains Normaux : Implications Pour Autocrine Et Paracrine Signalisation Dans L'ovaire

The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. Jun, 2002  |  Pubmed ID: 12050229

La fonction intraovarienne de l'activine gonadiquement produite n'est pas claire, et de nombreuses études in vitro ont suggéré un rôle pour l'activine en développement folliculaire. Pour identifier les étapes du développement folliculaires au cours de laquelle ces ligands peuvent agir, nous avons utilisé la localisation immunohistochimique des sous-unités de ligand, sous-types de récepteurs et Smad co-activating des protéines dans les follicules mêmes. Les premiers stades du développement folliculaire (primordiale pour primaire) ne montrent aucune immunoréactivité pour les sous-unités de l'activine ou leurs récepteurs. Ovocytes dès ces premières étapes contiennent immunostaining Smad2 et Smad4, cohérente avec le signalement par les autres membres de la superfamille des TGF-bêta. Immunomarquage pour le récepteur de l'activin type II apparaît tout d'abord dans des ovocytes et des cellules associées à l'ovocyte cumulus au stade follicule secondaire. Toutefois, l'activine n'est pas produit dans ces follicules, ce qui suggère que les récepteurs sont inactifs à ce stade ou ils sont utilisés par une autre protéine. Co-localisation des sous-unités de l'activine et inhibine, les récepteurs et les protéines SMAD se produit uniquement dans les cellules de la granulosa et de la thèque de petits follicules antrums, aromatase positif ainsi que les cellules de la granulosa des follicules atrésiques au début. En outre, analyse statistique multivariée révèle que les ligands et leurs cellulaires complexes de signalisation sont réglementées séparément. Ensemble, ces résultats suggèrent fortement que le rôle intraovarienne de l'activine est limité à certains stades de développement et que les autres membres de la famille TGF-bêta peuvent utiliser ce mécanisme de signalisation autonome cellule dans le développement du follicule.

Propriétés De Liaison De L'inhibine à Betaglycan, InhBP/p120 Et L'activine Type Récepteurs II

Molecular and Cellular Endocrinology. Oct, 2002  |  Pubmed ID: 12385827

Synthèse de la FSH stimulée par l'activine et communiqué par le gonadotrope hypophysaire est antagonisée par inhibines gonadiquement dérivées. Les deux isoformes de l'inhibine, inhibine A et B, lient le type de l'activine récepteurs II, mais à une plus faible affinité que les activines, mais ne stimulent pas la signalisation intracellulaire. En théorie, donc, inhibines peuvent empêcher l'activine signalisation via la liaison compétitive si elle est présente à des concentrations plus élevées que les activines. En réalité, les inhibines avérés antagoniser l'activine lorsque les deux types de ligands sont présents à des concentrations équimolaires de signalisation. Ces observations ont conduit à l'hypothèse que les protéines liant l'inhibine ou corécepteurs existent qui augmentent l'affinité des inhibines pour les récepteurs activine ou propagent les signaux intracellulaires inhibine spécifiques. Deux co-récepteurs inhibine de candidat, betaglycan et InhBP/p120, interagissent avec les récepteurs activine et augmentent l'antagonisme de l'activine action inhibine. Nous rapportons ici l'effet de betaglycan et InhBP/p120 sur l'inhibine A et la liaison de l'inhibine B aux récepteurs activine ActRIIA et ActRIIB2. InhBP/p120 ne se lient pas inhibine A ou B lorsque exprimé seul ou en combinaison avec les récepteurs activine, exigeant un réexamen du rôle de cette protéine dans la biologie de l'inhibine. Les deux inhibines lié le récepteur de l'activin type II, ActRIIB2. Inhibine B avait une plus grande affinité pour ce récepteur qu'inhibine A mais une affinité environ 10 fois plus faible que celle de l'activine A. inhibine A et B lié betaglycan avec une haute affinité ; Cependant, seulement une liaison à ActRIIB2 d'inhibine a été significativement accrue en présence de betaglycan. Les deux isoformes de l'inhibine a montré légère mais significative de la liaison à ActRIIA, mais cette liaison est potentialisée en présence de betaglycan. En outre, le complexe formé entre les inhibines, ActRIIA et betaglycan a été résistant à la rupture par l'activine A, tandis que l'activine A puissamment concouru pour la liaison de l'inhibine à ActRIIB2 et betaglycan. Ensemble, ces données montrent que les isoformes de l'inhibine ont des affinités différentes pour les récepteurs de l'activine type II mais lient betaglycan avec une haute affinité. Un modèle développé récemment de l'action de l'inhibine propose que les inhibines forment une affinité élevée, résistant à l'activine complexe ternaire avec les récepteurs de type II de l'activine et betaglycan, fournissant ainsi un mécanisme pour l'antagonisme de l'activine signalisation inhibine. Ce qui est important, les résultats présentés ici montrent clairement que ce modèle ne s'applique pas également aux deux formes d'inhibine, ni pour le type de l'activine différentes isoformes des récepteurs II. Il semble donc que les mécanismes d'action de l'inhibine peuvent varier selon les types de ligands et de récepteurs impliqués.

Surexpression De Smad4 Provoque L'ablation Des Cellules Germinales Et Hyperplasie Des Cellules Leydig Chez Des Souris Transgéniques

The American Journal of Pathology. Nov, 2002  |  Pubmed ID: 12414519

Membres de la superfamille des TGF-bêta (TGF-bêta) transformation jouent divers rôles importants dans le développement testiculaire et la fonction. Le gène suppresseur de tumeur, Smad4, est un médiateur commun de TGF-bêta, l'activine et voies signalisation induite par la protéine morphogénétique osseuse. Afin d'étudier le rôle du gène Smad4 pendant la fonction et le développement testiculaire, souris transgéniques ont été générés en utilisant un gène Smad4 indicateur étiquetées par 180 Pb de la Müller inhibant la séquence de promoteur en amont de substance. Trois fondateurs de Smad4 transgéniques (A, B et G) ont été détectés par analyse de Southern ; la ligne B a montré la plus haute expression du transgène Smad4 et a poursuivi l'étude. La fertilité dans la génération F1 (B) et de la génération F2 (BB) des souris transgéniques Smad4 n'a pas été altérée. Toutefois, dans la génération F3 (B2x) tous les animaux ont été touchés par la surexpression du transgène Smad4 et deux sortes de phénotypes ont été observés. Dans un groupe, les animaux étaient complètement stériles, tandis que dans l'autre groupe animaux était fertiles et engendré le nombre normal de petits par portée. Ces groupes sont désignés comme infertiles et fertile dans le texte. L'évaluation histologique des testicules du groupe infertile ont montré des degrés variables d'hyperplasie des cellules Leydig, l'apoptose des cellules germinales, arrestation de spermatogenèse, dégénérescence des tubes séminifères et infertilité. Dans le groupe fertile, il y n'avait aucun changement apparent dans l'histologie des testicules à l'exception d'une légère augmentation du nombre des cellules de Leydig. FSH sérique chez les animaux adultes des deux groupes de souris mâles transgéniques Smad4 n'était pas significativement différentes de la même portée normale ; Cependant, les niveaux de testostérone chez les deux groupes étaient significativement (P 0,05 <) a augmenté. Ces résultats suggèrent que la surexpression de Smad4 conduit à des anomalies testiculaires et infertilité qui supporte l'hypothèse que les voies de signalisation TGF-beta sont soigneusement orchestrées au cours du développement testiculaire. En l'absence de niveaux normaux de la fonction testiculaire Smad4 est compromise.

Règlement Du Promoteur Rat Hormone Folliculo - Stimulante Sous-unité Bêta De L'activine

Molecular Endocrinology (Baltimore, Md.). Mar, 2003  |  Pubmed ID: 12554780

FSH est contrôlée par une variété de stimuli positifs et négatifs, et la sous-unité FSHbeta unique est une cible majeure que le présent règlement. L'activine est un modulateur clé de sécrétion de transcription et de l'hormone FSHbeta. La voie de transduction de signal conduisant à l'expression de la FSH était inconnue. Ici, nous montrons que les facteurs de transcription Smad3 et Smad4 médient activité stimulée par l'activine du promoteur dans une lignée de cellules de dérivés pituitaire, LbetaT2 rat FSHbeta. Les cellules ont été transfectées de manière transitoire avec le promoteur de FSHbeta rat fusionné à un gène de rapporteur luciférase (- 338rFSHbeta - Luc), et une minime région favorisant l'activine a été identifiée. Transfection de Smad3, mais pas le Smad2 fortement liés, a conduit à une stimulation indépendante du ligand de l'activité de promoteur FSHbeta. Comme prévu, activine a causé une augmentation supplémentaire de l'expression de la luciférase, qui a été bloquée par co-traitement avec follistatine. Bien que Smad4 seul a eu aucun effet sur la transcription de FSHbeta, elle augmentée significativement Smad3 et stimulation induite par l'activine du promoteur. Un élément de liaison Smad palindromique consensus dans le promoteur proximal a été trouvé pour lier Smad4, et élimination de la région a entraîné une perte de transcription de FSHbeta véhiculée par l'activine. L'activine voie de signalisation est conservée dans un certain nombre de cellules, mais l'expression FSHbeta est limitée aux hormones gonadotropes. Un facteur de transcription pituitaire spécifique nécessaire pour l'induction de l'activine-dépendante de la FSHbeta promoteur a été identifié qui permet l'expression de FSHbeta dans les cellules nongonadotrope. Pitx2 est membre de la sous-famille Pitx facteurs liés bicoid homéodomaine qui est nécessaire pour le développement hypophysaire et est présent dans l'hypophyse adulte. Ce facteur a été transfecté dans des cellules de LbetaT2, où il provoque une régulation de l'activité de promoteur de FSHbeta véhiculée par l'activine et basale. En outre, cotransfection de Pitx2c avec Smad3 dans les cellules rénales-TSA a entraîné l'activine réglementés FSHbeta réponse, suggérant son rôle important dans le règlement de tissus de FSHbeta par l'activine. Un site de liaison de Pitx2c a été identifié dans le promoteur proximal, et élimination de cette région a aussi entraîné une perte d'activité de promoteur FSHbeta activin réglementés. Pris ensemble, ces études suggèrent que la régulation de la FSHbeta dépend de l'activine médiée par des facteurs signalisation de concert avec l'hypophyse dérivés des protéines de régulation nucléaires.

Structures D'un Complexe De ActRIIB:activin A Révèlent Une Nouvelle Mode Pour Les Interactions Ligand : Récepteur TGF-bêta De Liaison

The EMBO Journal. Apr, 2003  |  Pubmed ID: 12660162

La superfamille des TGF-bêta de ligands et de récepteurs stimulent les événements cellulaires dans divers processus allant de la spécification sort des cellules en développement à un déficit immunitaire. Activines définissent un sous-groupe important des ligands de TGF-bêta qui régulent l'apoptose, la prolifération, l'activation et la différenciation cellulaire. Activines du signal par le biais de complexes formés avec le type I et type les récepteurs II sérine/thréonine kinase. Nous avons résolu la structure cristalline de l'activine une limite à la région extracellulaire d'un récepteur de type II, ActRIIB, révélant les détails de cette interaction. ActRIIB se lie aux bords extérieurs des régions de doigt l'activine, avec les deux récepteurs juxtaposés à proximité, dans un mode différent de TGF-beta3 liaison aux récepteurs II de type. La structure du dimère de l'activine A diffère des autres structures connues de ligand de TGF-bêta, adopte une conformation compacte de dos plié. La structure cristalline du complexe est en accord avec le recrutement de deux récepteurs de type I dans une entente étroite emballée à la surface cellulaire et donne à penser que la diversité dans les arrangements conformationnelles des dimères de ligand de TGF-bêta pourrait influencer les processus de signalisation cellulaires.

Localisation Des Sous-unités De L'activine Et Inhibine, Les Récepteurs Et Les Protéines SMAD Dans La Glande Mammaire De La Souris

Molecular and Cellular Endocrinology. May, 2003  |  Pubmed ID: 12782414

L'activine et inhibine, deux hormones protéine apparentée, appartiennent à la superfamille de bêta (TGF-bêta) de facteur de croissance transformant des facteurs de croissance. L'activine et TGF beta ont été associés avec le développement de la glande mammaire de la souris et la carcinogenèse mammaire humain. Expression de TGF beta dans la glande mammaire a été décrite précédemment et a été trouvée à s'exprimer dans le tissu stérilisée et pendant la grossesse, pendant l'allaitement, diminuée et puis surexprimée durant l'involution. Le modèle d'expression des sous-unités de l'activine, des récepteurs et des molécules de signalisation cytoplasmiques n'a pas été complètement décrite dans le développement postnatal des glandes mammaires. Nous émettons l'hypothèse que l'activine signalisation composants sont dynamiquement réglementés au cours du développement de la glande mammaire, ce qui permettrait l'activine d'avoir des mesures de réglementation de croissance temporelles distinctes sur ce tissu. Pour examiner le système de transduction de signal de l'activine dans la glande mammaire, les tissus des souris femelles CD1 a été disséqué de stérilisées, jour 1, 10 et 20 d'allaitement et après le sevrage animaux jour 4. L'expression des récepteurs activine (ActRIIA, ActRIIB et ActRIB), inhibine corécepteur (betaglycan) et le ligand sous-unité (alpha, bêta A et bêta B), l'ARNm a été mesurée par RT-PCR semi-quantitative dans ces tissus. En outre, la compartimentalisation cellulaire de l'activine signalisation des protéines, y compris le cytoplasme signalisation co-activators, protéines SMAD 2, 3 et 4, ont été examinés par immunohistochimie. En général, ARNm de l'activine signalisation composants était la plus élevée dans les tissus stérilisées et ensuite diminué, tandis que l'immunoréactivité de la protéine pour les composants de signalisation activine a augmenté au cours de la lactation et diminue durant l'involution. Les protéines de la sous-unité alpha a été détectées dans les tissus stérilisées et celles qui allaitent jour 1 seulement. Ce qui est important, Smad 3, mais pas de Smad 2, a été détecté dans les noyaux des cellules épithéliales pendant tous les moments examinés, indiquant que l'activine signalisation est véhiculée par Smad 3 à ces moments. Ces résultats suggèrent que l'activine rôle régulateur de croissance pendant l'allaitement peut être distingué de celui du TGF beta pendant le développement mammaire postnatal. Les études futures mettra l'accent sur la détermination du rôle exact que ce ligand joue dans la néoplasie et différenciation des tissus mammaires.

Normale Fonction De Reproduction Chez La Souris InhBP/p120-déficientes

Molecular and Cellular Biology. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12832474

Les inhibines sont gonadiques transformant des hormones protéiques superfamille des TGF beta qui inhibent la synthèse pituitaire hormone folliculo - stimulante (FSH). Récemment, betaglycan et inhibine binding protein (InhBP/p120, également connu sous le nom du produit du gène de la superfamille des immunoglobulines 1 [IGSF1]) ont été identifiés comme corécepteurs inhibine de candidat, faire la lumière sur les bases moléculaires de la façon dont les inhibines peuvent affecter les cellules cibles. Les activines, qui concernent structurellement les inhibines, agissent au sein de l'hypophyse pour stimuler la production de FSH. Betaglycan augmente l'affinité des inhibines des récepteurs activine type IIA (ACVR2), bloquant l'activine liaison et signalisation par l'intermédiaire de ce récepteur. InhBP/p120 ne peut pas directement lier inhibines mais peut interagir avec le récepteur de l'activin type IB, ALK4 et participer à l'antagonisme de l'activine signalisation inhibine B. Pour mieux comprendre les fonctions in vivo de InhBP/p120, nous avons caractérisé l'ARNm InhBP/p120 et gène chez les souris et généré des souris mutantes InhBP/p120 en ciblant les gènes dans les cellules souches embryonnaires. InhBP/p120 des souris mâles et femelles mutants étaient viables et fertiles. En outre, ils ont montré aucune altération dans la synthèse de la FSH ou de sécrétion ou dans la fonction ovarienne ou testiculaire. Ces données contribuent à un nombre croissant de preuves indiquant que InhBP/p120 ne joue pas un rôle essentiel dans la biologie de l'inhibine.

Régulation à La Baisse De L'activine, Récepteurs Activine Et Protéines SMAD Dans Le Cancer Du Sein De Haute Qualité

Cancer Research. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12839974

Facteur de l'activine et la transformation de croissance (TGF)-bêta, membres de la superfamille des TGF-bêta de facteurs de croissance, ont été impliqués dans le développement de la glande mammaire et la cancérogenèse mammaire. TGF-bêta semble être impliquée dans le maintien de la glande mammaire canalaire architecture et involution postlactational. TGF-bêta sert les deux un suppresseur de tumeur et a des capacités oncogènes dans le tissu de cancer mammaire. L'activine est liée à la modulation de la croissance dans les organes glandulaires et ses récepteurs et les protéines de signalisation sont présents et réglementé au cours du développement de la glande mammaire après la naissance, principalement pendant la phase de lactation. La présence des principales composantes de la voie de transduction de signal de l'activine dans différentes qualités pathologiques des tissus du cancer du sein n'ait pas été décrit minutieusement, en dépit de preuves des études in vitro, ce qui suggère que l'activine peut inhiber la prolifération de cellules d'origine du cancer du sein. Sur la base de la capacité de réglementation de la croissance de l'activine, nous émettons l'hypothèse que les composants de ce système de transduction de signal auraient été déréglementés comme le cancer du sein devient plus agressif. Pour tester cette hypothèse, des échantillons de cancer du sein ont été substratified par grade pathologique, un marqueur pronostique connu du cancer du sein et a ensuite examinés la présence et la localisation cellulaire des sous-unités de ligand de l'activine (bêta A et bêta B-), récepteurs (RIIA Act Loi RIIB et Loi sur les côtes), et protéines de signalisation, protéines SMAD 2, 3 et 4, par immunohistochimie et analyse par immunofluorescence. Nous avons aussi étudié les tissus mammaires de santé patients subissant une réduction mammaire. La version bêta de l'activine sous-unité A était présente dans tous les tissus examinés, tandis que la bêta sous-unité B et les récepteurs de type II de l'activine protéines SMAD ont été moins évidents dans les cancers de haut grade. Des corrélations significatives ont été faites dans les échantillons de cancer du sein entre une réduction nucléaire Smad 3 abondance et grade tumoral élevé, haute qualité architecturale, plus grande taille de la tumeur, et la négativité de récepteurs hormonaux. Ainsi, l'activine composants de transduction des signaux sont présents dans les tissus normaux et cancer de grade 1 mais diminuée dans le cancer de haute qualité. La déréglementation de ce système de transduction de signal pourrait être utile à l'avancement des oncogène progression.

Murine Morphologie Cellules De La Granulosa Et De La Fonction Sont Régies Par Un Synthétique Arg-Gly-Asp Matrice

Molecular and Cellular Endocrinology. Jul, 2003  |  Pubmed ID: 12890562

De la matrice extracellulaire (ECM) des protéines sont établis les régulateurs de la survie des cellules de la granulosa, la morphologie, et la différenciation. Dans cette étude, les rôles de la densité ECM peptide d&#39;adhérence sur l&#39;adhésion cellulaire murin de la granulosa, la morphologie et la sécrétion des stéroïdes ont été sondés à l&#39;aide des matrices synthétiques. La matrice synthétique a été fabriqué à partir du polysaccharide alginate, qui ne pas intrinsèquement charge adhésion cellulaire mais peuvent être modifiés avec des densités contrôlées de peptides d&#39;adhérence (10 (-4) à 2 x 10 (-1) ng / cm (2)). GRM02, une lignée cellulaire murine granulosa et primaires murins cellules de la granulosa ont été cultivées sur des matrices d&#39;alginate modifiées par le couplage de séquences peptidiques synthétiques contenant le motif Arg-Gly-Asp communs à protéines de la MEC. Cellules cultivées sur ces surfaces peptide modifiés (0,02, 0,2 ng / cm 2)) fixé et propager, avec des morphologies spécifiques à l&#39;identité et la densité peptide. En outre, la progestérone et la sécrétion d&#39;estradiol était fonction de la densité peptide, avec du simple au triple augmente par rapport aux témoins. Ces résultats indiquent que la densité et l&#39;identité des peptides d&#39;adhésion réguler la fonction des cellules de la granulosa. Ce système fournit un mécanisme pour examiner les cellules de la granulosa-ECM interactions qui se produisent au cours de la maturation du follicule.

Localisation De Betaglycan Dans L'hypophyse De Rat Femelle : Implications Pour La Régulation De L'hormone Folliculo - Stimulante De L'inhibine

Endocrinology. Dec, 2003  |  Pubmed ID: 14500575

Stimulée par l'activine la synthèse de la FSH et la sécrétion de la gonadotrope hypophysaire est modulée négativement par inhibine ovarienne ; Toutefois, le mécanisme cellulaire de l'antagonisme de l'inhibine est inconnu. Inhibine et l'activine part une sous-unité bêta commune à travers laquelle inhibine peut concurrencer l'activine pour la liaison au récepteur de l'activin type II et prévenir l'activine transduction de signal. Bien que l'affinité de l'inhibine pour liaison au récepteur de l'activin est bien inférieure à celui de l'activine lui-même, inhibine est capable d'inhiber la synthèse de la FSH stimulée par l'activine et sécrétion même à des concentrations faibles ou équimolaires. On sait maintenant que le récepteur de TGFbeta type III, betaglycan, agit comme un corécepteur inhibine qui lie les inhibines et leur affinité pour le récepteur activine de type II, ce qui améliore l'effet antagoniste de l'inhibine sur la transduction du signal de l'activine augmente. Pourtant, malgré la caractérisation de betaglycan est un corécepteur inhibine dans plusieurs modèles de cellules in vitro, que le rôle de cette protéine dans la régulation de la FSH in vivo n'a pas été démontré. Dans cette étude, nous avons cherché à comprendre plus pleinement la fonction de betaglycan dans le contrôle de la libération de FSH par la gonadotrope en décrivant l'immunolocalisation betaglycan dans l'hypophyse et en évaluant sa corrélation aux fluctuations de la FSH et inhibine pendant tout le cycle oestral de rat. En général, l'immunoréactivité de la betaglycan était présente dans l'hypophyse antérieure à tous les moments de cycle oestral, mais se limitait à la membrane des gonadotropes juste avant et après les hausses de FSH primaires et secondaires. Ce qui est important, betaglycan localisée dans la membrane gonadotrope lorsque inhibine doit réduire rapidement de FSH au taux de base après la flambée de FSH secondaire. Ces données appuient indirectement un rôle pour betaglycan in vivo comme un corécepteur qui est nécessaire pour la libération de FSH inhibine modulée par l'hypophyse.

Nouvelle Approche Pour La Culture Tridimensionnelle De La Granulosa Cell-ovocytes Complexes

Tissue Engineering. Oct, 2003  |  Pubmed ID: 14633385

La culture in vitro de follicules ovariens immatures est utilisée pour examiner les facteurs qui régulent le développement des follicules et qui peut finalement proposer des options pour l&#39;infertilité de la reproduction. L&#39;objectif de cette étude était de développer un modèle tridimensionnel dans le système de culture in vitro pour la croissance et le développement de chaque cellule de la granulosa-ovocytes complexes. Un hydrogel d&#39;alginate a été utilisé pour encapsuler immatures de souris des cellules de la granulosa ovocytes complexes (officiers généraux commandants) qui ont ensuite été maintenus dans un milieu sans sérum dans la culture in vitro. Une efficacité d&#39;incorporation global de 50% a été atteint. Les complexes ont été évaluées par microscopie électronique à transmission des modifications de l&#39;ultrastructure au cours de la croissance in vitro. L&#39;architecture du complexe folliculaire a été maintenue lors de l&#39;encapsulation et la culture subséquente. Les cellules de la granulosa prolifèrent, et les ovocytes ont également augmenté en volume et a obtenu les caractéristiques structurelles des ovocytes matures, y compris la formation de granules corticaux, bien développée zone pellucide de microvillosités, les structures habituelles de mitochondries, et en forme de treillis dans le cytoplasme. Les ovocytes récupérés et mûri étaient en mesure de reprendre la méiose, une étape nécessaire pour le bon développement. Ainsi, ce système représente une nouvelle méthodologie in vitro pour la croissance des cellules individuelles de la granulosa-ovocytes complexes.

Compartimentation Follicule Restreints De Transformer Le Facteur De Croissance Beta Superfamille Des Ligands Dans L'ovaire Féline

Biology of Reproduction. Mar, 2004  |  Pubmed ID: 14656728

Le développement folliculaire ovarien, sélection du follicule et le processus de l'ovulation restent mal compris dans la plupart des espèces. Tout au long de la vie reproductive, sort du follicule est équilibré entre la croissance et l'apoptose. Ces forces opposées sont contrôlés par les nombreux endocrines paracrine et autocrine facteurs, y compris les ligands représentées par la superfamille de bêta (TGF) facteur de croissance transformant. TGFbeta activine, inhibine, protéine morphométriques de l'os (BMP) et facteur de différenciation de croissance 9 (GDF-9) sont présents dans l'ovaire de nombreux animaux ; Toutefois, aucune analyse exhaustive de la localisation de chaque ligand ou ses récepteurs et des molécules de signalisation intracellulaires pendant la folliculogenèse n'a été fait. Le chat domestique est un modèle idéal pour l'étude dynamique du follicule ovarien en raison de l'abondance de toutes les populations de follicules, y compris l'étape primordiale et la quantité de tissu disponible après la routine de la stérilisation animale. En outre, la connaissance des facteurs impliqués dans le développement folliculaire félin pourrait avoir un impact important sur la maturation in vitro/succès de la fécondation in vitro (MIV/FIV) pour des espèces félines. Ainsi, la présence et la position des membres superfamille des TGF dans l'ovaire félin ont été évaluées à tous les stades du développement folliculaire par immunolocalisation. La protéine de sous-unité alpha inhibine chat est présente dans toutes les étapes de follicule mais elle augmente en intensité dans les cellules de la granulosa murales en gros follicules antrums. L'inhibine Bibeau et Beytat sous-unités protéiques, en plus de l'activine type I (ActRIB) et récepteur de l'activin type II (ActRIIB), sont produites dans les cellules de la granulosa des follicules primordiaux et principaux. En outre, la sous-unité Bibeau inhibine est détectée dans les cellules des thèque du secondaire par le biais de classes de taille de gros follicules antraux. GDF-9 est limitée à l'ovocyte de follicules antrums et de preantral, tandis que le type de protéine réceptrice (BMP-RII) II BMP est principalement localisé de follicules primordiaux et de stades primaires. TGFbeta1, 2 et 3 l'immunoréactivité de ligand est observée dans les follicules petits et grands, tandis que le récepteur TGFbeta II (TGFbeta RII) est détecté dans les cellules ovocytaire et la granulosa des follicules antraux. Les protéines de signalisation intracellulaires Smad2 et Smad4 sont présents dans le cytoplasme des cellules granuleuses de toutes les classes de taille de follicule. Smad3 est détecté dans le noyau de cellules de granulosa, l'ovocyte et du noyau de cellules thécales de toutes les classes de taille de follicule. Ces résultats suggèrent que la voie de transduction de signal de l'activine complet est présente dans petits follicules et que les gros follicules produisent principalement les inhibines. Nos données suggèrent que les récepteurs et ligands TGFbeta sont logées à gros follicules antrums. Pris ensemble, les ligands, les récepteurs et les protéines de signalisation de la superfamille des TGF sont présents à différents points tout au long de la folliculogenèse féline, suggérant des rôles distincts pour chacune de ces ligands au cours de la maturation du follicule.

Inhibine : Actions Et Signalisation

Growth Factors (Chur, Switzerland). Mar, 2004  |  Pubmed ID: 15176454

Inhibine est surtout connu comme une hormone reproductrice qui inhibe la libération d'hormone folliculo - stimulante (FSH) par l'hypophyse. Au cours de la dernière décennie ou alors un certain nombre d'autres rôles biologiques ont émergé, inhibine plus dans la classe d'un facteur de croissance. Malgré cela, on connaît des voies de signalisation de cette protéine. Cet article de revue résume les aspects pertinents de la biologie de l'inhibine et met l'accent sur quatre possibles mécanismes de signalisation à travers lequel inhibine pourrait influencer le fonctionnement cellulaire, nommément disponibilité de sous-unité, montage du récepteur, corécepteurs et signalisation par le biais de voies de signalisation spécifiques inhibine.

Analyse Liée à L'âge D'inhibine A, Inhibine B Et L'activine Un Parent à L'hormone Folliculostimulante Monotrope Accrétions élévation Chez Les Femmes Ovulatoires Normales

The Journal of Clinical Endocrinology and Metabolism. Jun, 2004  |  Pubmed ID: 15181087

Des études antérieures ont signalé que la hausse monotrope FSH chez les femmes est associée à une diminution inhibine B et/ou un niveau et des niveaux accrus de l'activine A. considérant que la plupart des chercheurs ont constaté une diminution phase folliculaire inhibine B, les rôles d'inhibine A et de l'activine A en tant que modulateurs de l'élévation de la FSH ne sont pas claires. Cette étude visait à déterminer si les niveaux de carences en circulant d'inhibine A, inhibine B, et/ou l'activine un exister au cours de l'intervalle entre deux cycles en ovulatoire plus âgé (âge, 40-45 ans; n = 16), comparativement aux femmes plus jeunes (âge, 20-25 ans; n = 13). Échantillons de sang ont été prélevés quotidiennement tout au long d'un cycle menstruel et la phase folliculaire de la subséquente du cycle et ont été analysés pour LH, les FSH, les estradiol, les inhibine A et les B et les A. activine Malgré l'augmentation significative de la FSH, aucune anomalie n'en A de l'inhibine, l'activine A ou estradiol ont été détectés chez les sujets plus âgés. En fait, inhibine A était significativement plus élevée chez les personnes âgées au cours de la phase entre deux cycles (P = 0,01), tandis que l'inhibine B est significativement plus faible. Ainsi, la hausse monotrope FSH ne semble pas résulter de changements dans l'inhibine A ou l'activine A, supportant la notion qu'inhibine B joue un rôle essentiel dans la médiation de la montée de FSH chez les femmes âgées.

Développement Du Follicule Ovarien Exige Smad3

Molecular Endocrinology (Baltimore, Md.). Sep, 2004  |  Pubmed ID: 15192076

Smad3 est un important Médiateur de la TGF-bêta voie de signalisation. Fait intéressant, déficients en Smad3 (Smad3-/-) souris ont réduit la fécondité par rapport aux souris de type sauvage (WT). Pour mieux comprendre les mécanismes moléculaires responsables de la diminution de la fertilité chez les animaux de Smad3 /, ce travail a vérifié l'hypothèse que la carence en Smad3 interfère avec trois aspects cruciaux de la folliculogenèse : atrésie, de croissance et de différenciation. La croissance a été évaluée en comparant la taille des follicules, expression de l'antigène nucléaire de prolifération cellulaire et l'expression des gènes du cycle cellulaire dans Smad3-/- et souris WT. Atrésie a été évaluée en comparant l'incidence de l'atrésie et l'expression de bcl-2 gènes impliqués dans la mort cellulaire et la survie des cellules en Smad3-/- et souris WT. La différenciation a été évaluée en comparant l'expression du FSH récepteur (kappa), estrogen receptor (ER) alpha et bêta ER inhibine alpha-, beta(A)- et bêta (B) - sous-unités dans Smad3-/- et souris WT. Parce que l'atrésie, de croissance et de différenciation sont réglementés par les hormones, oestradiol, FSH et LH niveaux ont été comparées chez Smad3-/- et souris WT. En outre, parce que les altérations de la folliculogenèse peuvent affecter la capacité des souris à ovuler, le nombre de corps jaunes et les œufs en réponse aux traitements de gonadotrophine ont été comparé chez Smad3-/- et animaux WT. Les résultats indiquent que la carence en Smad3 ralentit la croissance folliculaire, qui se caractérise par des diamètres de petits follicules, faibles taux de prolifération cellulaire antigène nucléaire et la faible expression de gènes du cycle cellulaire (kinase cycline-dépendante 4 et cycline D2). Smad3 carence provoque également des follicules atrésiques, ovocytes dégénérés et faible expression de bcl-2. De plus, Smad3 carence affecte différentiation folliculaire comme en témoigne une diminution expression de ER beta, augmentation de l'expression de l'alpha ER et une diminution d'expression des sous-unités alpha inhibine. Smad3 carence provoque l'estradiol faible et des niveaux élevés de FSH. Enfin, Smad3-/-ovaires n'ont aucun corps jaunes, et ils ne peuvent pas ovulent après induction ovulatoire avec des gonadotrophines exogènes. Collectivement, ces résultats fournissent la première preuve que réduit la fertilité chez les souris-/-Smad3 est due à la folliculogenèse avec facultés affaiblies, associée à une expression altérée de gènes qui régulent la progression du cycle cellulaire, la survie des cellules et la différenciation des cellules. Les conclusions que Smad3/les follicules ont une déficience de croissance, atrésie accrue et différenciation altérée en présence de niveaux élevés de FSH, expression normale de Kappa et plus faible expression de cycline D2, suggèrent une interaction possible entre Smad3 et FSH de signalisation en aval de Kappa dans l'ovaire de la souris.

Biologie Moléculaire De L'action De L'inhibine

Seminars in Reproductive Medicine. Aug, 2004  |  Pubmed ID: 15319829

Inhibines sont des glycoprotéines dimères qui ont principalement été étudiés pour leur rôle dans l'antagonisme des médiée par l'activine libération d'hormone folliculo - stimulante (FSH) de gonadotropes de l'antéhypophyse. Comme un membre de la superfamille de bêta (TGF) facteur de croissance transformant des ligands et de récepteurs, inhibine partage plusieurs caractéristiques structurelles et de traitement avec d'autres ligands de la famille. Une molécule d'inhibine est composée d'une sous-unité alpha et une sous-unité bêta, et deux isoformes ont été largement étudiées, inhibine (alpha/Bibeau) et inhibine B (alpha/Beytat). Chaque isoforme subit une transformation d'un grand précurseur de la protéine à une forme mature de 32 – 34 kDa, selon le degré de glycosylation. En l'absence d'inhibine, par exemple, chez les animaux ayant subi une ovariectomie ou femmes ménopausées sériques de FSH augmentent abruptement. Chez les animaux ayant subi une ovariectomie unilatérale la brève perte d'inhibine se traduit par une hausse soudaine de la FSH, qui induit l'ovaire restant pour compenser avec expression sous-unité inhibine dans un grand nombre de follicules antraux. Taux de FSH est restaurées et le cycle se répète. Ces études démontrent la nécessité d'inhibine ovarienne à maintenir des niveaux normaux de la gonadotrophine. Des études récentes ont fourni un mécanisme d'action d'inhibine qui est conforme à son rôle dans la reproduction et la fonction d'inhibine pourrait s'étendre aux tissus à l'extérieur de l'axe reproducteur. Betaglycan est capable de lier l'inhibine, et en présence de betaglycan, l'affinité de l'inhibine pour récepteurs activine est augmentée de 30 fois. Grâce à l'interaction avec le corécepteur, inhibine peut perturber l'activine interaction avec ses récepteurs et peut également perturber l'interaction des récepteurs activine avec d'autres membres de la superfamille des TGF, tels que les protéines morphogénétiques osseuses. Ces nouvelles études fournissent des indications pour activité inhibine dans nombreux organes du corps et de médiation des systèmes contrôlés par des molécules autres que l'activine.

Beta A Versus Beta B: Est-ce Simplement Une Question D'expression ?

Molecular and Cellular Endocrinology. Oct, 2004  |  Pubmed ID: 15451562

Les activines sont des membres de la superfamille de bêta (bêta) de facteur de croissance (TGF) transformation des protéines qui fonctionnent dans un large éventail de processus physiologiques. Comme autres ligands TGFbeta, les activines sont biologiquement actifs comme dimères. Une molécule de l'activine est composée de deux sous-unités bêta, dont quatre isoformes ont été identifiés : Bibeau, Beytat, betaC et betaE. Les activines plus étudiés à ce jour sont l'activine (Bibeau/Bibeau), activine B (Beytat/Beytat) et l'activine AB (Bibeau/Beytat). Inhibine est un antagoniste activine naturels qui se compose d'une sous-unité alpha disulfure liée à l'une des sous-unités bêta activine, production d'inhibine (alpha/Bibeau) ou inhibine B (alpha/Beytat). Le développement de faire la distinction entre différentes formes d'activines et inhibines, ainsi que des modèles de knock-in et knock-out, ont fourni l'évidence que les sous-unités Bibeau et Beytat ont un rôle indépendant et distinct physiologiquement. En outre, évaluation des interactions ligand-récepteur indique des différences significatives entre les isoformes de l'activine, ainsi qu'entre les isoformes de l'inhibine l'affinité du récepteur. Dans cette revue, nous explorons les différences entre l'activine/inhibine Bibeau - et Beytat-sous-unités, y compris les profils d'expression, des propriétés de liaison et les aspects structurels spécifiques de chacun. Appartenant au groupe croissant des connaissances concernant les activines et inhibines, les nouvelles données confirment l'hypothèse que sous-unités Bibeau et Beytat sont fonctionnellement différemment.

Clonage D'un ADNc Alpha Inhibine Roman De Testicules De Singes Rhésus

Reproductive Biology and Endocrinology : RB&E. Oct, 2004  |  Pubmed ID: 15471543

Inhibines sont des hormones de dimères de protéine des gonades qui régulent négativement la sécrétion et la synthèse de FSH hypophysaire. Inhibine B est produit par les cellules de Sertoli testiculaires et est la principale forme circulante d'inhibine chez les mammifères mâles adultes plus. Inhibine B se compose de la sous-unité alpha inhibine disulfure-liée à la sous-unité de Beytat inhibine / l'activine. Nous décrivons ici le clonage de l'ADNc codant pour les sous-unités de testicules de singe rhésus adulte RNA.

Induction De La Cycline D2 Dans Les Cellules De La Granulosa De Rat Nécessite Relevée De FSH Dépendant De Répression FOXO1 Couplée Avec Des Signaux Positifs De Smad

The Journal of Biological Chemistry. Mar, 2005  |  Pubmed ID: 15613482

Des follicules ovariens subissent une croissance exponentielle en réponse à l'hormone folliculo - stimulante (FSH), principalement en raison de la prolifération des cellules de la granulosa (GCs). In vitro dans des conditions sans sérum, GCs de rat se différencient en réponse à la FSH mais proliférer pas à moins que l'activine est également présent. En présence de FSH ainsi que l'activine, GCs présentent une expression accrue de la cycline D2 comme inhibine-alpha, l'aromatase, steroidogenic factor-1 (SF-1), chaîne latérale de cholestérol (SCC) et ÉPIRÉGULINE. Dans le présent rapport, nous avons cherché à identifier les voies de signalisation qui en FSH et l'activine favorisent la différenciation et la prolifération de la GC. Nos résultats montrent que ces réponses sont associés à la phosphorylation d'Akt prolongée par rapport aux témoins appariés selon l'heure et sont tributaires de la phosphatidylinositol 3-kinase (PI 3-kinase) et la signalisation de Smad2/3, fondée sur la capacité du PI 3-kinase inhibiteur LY294002 ou infection avec adénoviraux Smad3 négative dominante mutant (DN-Smad3) pour atténuer l'induction de la cycline D2, inhibine-alpha, aromatase, SCC, SF-1 et ÉPIRÉGULINE. La DN-Smad3 mutante également abolie prolongée Akt phosphorylation stimulée par la FSH ainsi que l'activine 24 h après le traitement. Une infection causée par la protéine de boîte contenant adénoviraux de forkhead constitutivement actif, sous-famille O (FOXO) 1 mutant supprimée induction de cycline D2, aromatase, inhibine-alpha, SF-1 et ÉPIRÉGULINE. Transfections transitoires du GCs constitutivement actif FOXO1 mutant a également supprimé cycline D2, inhibine-alpha et activités de promoteur-journaliste ÉPIRÉGULINE. Les résultats de l'immunoprécipitation de la chromatine démontrent in vivo l'association du FOXO1 avec le promoteur de cycline D2 dans les GCs non traitées et la libération de FOXO1 provenant du promoteur de cyclin D2 lors de l'addition de FSH ainsi que l'activine. Ces résultats suggèrent que les prolifération et la différenciation du GCs en réponse à la FSH ainsi que l'activine nécessite deux enlèvement de répression FOXO1-dépendante et signalisation positive de Smad2/3.

Smad3 Négocie L'activine Induite Par La Transcription Du Gène Bêta Sous-unité Hormone Folliculo - Stimulante

Molecular Endocrinology (Baltimore, Md.). Jul, 2005  |  Pubmed ID: 15761025

Synthèse de la FSH par l'hypophyse antérieure est réglementée par l'activine, membre de la superfamille des FSH(beta) de ligands. L'activine signaux par une voie qui implique l'activation des transcriptionnelles corégulateurs Smad2 et Smad3. Des travaux précédent de notre laboratoire ont démontré que Smad3 et pas de Smad2, est suffisante pour la stimulation du promoteur du FSH(beta) rat, dans une lignée de cellules dérivées pituitaire L (bêta) T2. Ici, nous avons utilisé la technologie de RNA interference indépendamment de diminuer l'expression de protéines Smad dans les cellules T2 L (bêta) pour approfondir l'étude des rôles Smad2 et Smad3 dans le règlement de l'activine-dépendante du promoteur FSHbeta. Régulation à la baisse de la protéine Smad2 par petit duplex de RNA interférents affecte seulement basale transcription de FSH(beta), alors que la diminution de l'expression de Smad3 abroge l'activine médiée par stimulation de transcription de FSH(beta). Bien que fortement liés, Smad2 et Smad3 diffèrent par leur homologue Mad (MH) des domaines 1, où la protéine Smad2 contient deux portions supplémentaires d'acides aminés qui empêchent ce facteur de liaison à l'ADN. Nous avons examiné si ces caractéristiques structurelles contribuent à différentielle FSH(beta) transactivation de Smad2 et Smad3. Une variété de constructions de chimère Smad ont été générés et utilisés dans les études de transfection transitoire pour répondre à cette question. Seule cotransfection des constructions de la chimère qui contiennent le domaine MH1 de Smad3 entraîne activin véhiculée par la stimulation du promoteur FSH(beta) rat. Par ailleurs, l'insertion de Smad2 boucles dans la protéine Smad3 rend inactifs, ce qui suggère que l'attache d'ADN est nécessaire pour Smad3 induite par la stimulation du promoteur FSH(beta) rat. Pris ensemble, ces résultats indiquent que les différences fonctionnelles entre Smad2 et Smad3 dans leur capacité à transactiver le promoteur FSH(beta) de rat se situent principalement dans le domaine MH1 et comportent des motifs structurels qui affectent l'attache d'ADN.

Règlement De Développement Des Follicules De Souris Par Hormone Folliculo-stimulante Dans Un Tridimensionnelle Dans Le Système De Culture in Vitro Dépend De Stade De Follicule Et La Dose

Biology of Reproduction. Nov, 2005  |  Pubmed ID: 15987824

Les besoins de développement de follicules ovariens sont tributaires de la phase de maturation du follicule, en particulier, des études élégantes avec des modèles génétiques ont indiqué que la FSH est nécessaire pour antrale, mais pas la croissance préantral follicule, et la maturation. Pour élucider davantage le rôle de la FSH et d&#39;autres molécules régulatrices dans le développement des follicules préantral, dans les systèmes de culture in vitro sont nécessaires. Nous avons utilisé une approche basée sur les biomatériaux à la culture du follicule, dans lequel follicules ont été encapsulées dans des matrices qui ont été adaptés aux besoins spécifiques de développement du follicule. Ce système à trois dimensions a été utilisée pour examiner l&#39;impact de doses croissantes de la FSH sur le développement des follicules pour deux couches secondaires (100-130 microm; deux couches de cellules de la granulosa entourant l&#39;ovocyte) et multicouche secondaire (150-180 microM, plusieurs couches des cellules de la granulosa entourant l&#39;ovocyte) follicules isolés de souris. Deux couches follicules secondaires étaient FSH sensibles lorsqu&#39;elles sont cultivées dans de l&#39;alginate-collagène I matrices, présentant FSH augmentation dose-dépendante de la croissance folliculaire, la production de lactate, et la sécrétion des stéroïdes. Multicouches follicules secondaires étaient FSH dépendante, à la survie du follicule, la croissance, la sécrétion des stéroïdes, le métabolisme et la maturation des ovocytes tous régis par la FSH. Cependant, des doses supérieures à 25 mUI / ml de FSH un impact négatif sur le développement des follicules multicouche secondaire (la survie du follicule réduite). Les résultats actuels indiquent que les besoins hormonaux et environnementaux du changement folliculaire complexe au cours du processus de maturation. Le système de culture peut être adaptée à chaque stade de développement, qui sera particulièrement critique pour la traduction en follicules humains qui ont une plus longue période de développement.

Bêta Ou Non Bêta : Les Récepteurs Des œstrogènes Et La Fonction Ovarienne

Endocrinology. Aug, 2005  |  Pubmed ID: 16009972

La Structure De La Follistatin:activin Complexe Révèle L'antagonisme Des Deux Types : J'ai Et Liaison Du Récepteur De Type II

Developmental Cell. Oct, 2005  |  Pubmed ID: 16198295

Ligands TGF-bêta stimulent divers processus de différentiation cellulaire et la croissance par la signalisation par l'intermédiaire de type I et II récepteurs. Antagonistes de ligand, comme follistatine, bloquent de signalisation et sont des régulateurs essentiels des réponses physiologiques. Nous rapportons ici la structure de l'activine A, un ligand du TGF-bêta, lié à la follistatine haute affinité antagoniste. Deux molécules de follistatine encerclent l'activine, neutralisant le ligand en enterrant un tiers de ses résidus et ses sites de liaison du récepteur. Des études antérieures ont suggéré que le récepteur de la catégorie I liaison ne serait pas bloqué par la follistatine, mais la structure cristalline révèle que le domaine N-terminal de follistatine a un pli inattendu qu'imite un universel motif de récepteurs de type I et occupe de ce site de liaison du récepteur. La formation de follistatin:BMP:type j'ai des complexes du récepteur peuvent être expliquées par l'arrangement stoechiométrique et géométrique de l'activin:follistatin complexe. Le mode de liaison du ligand par follistatine a des répercussions importantes sur sa capacité à neutraliser les ligands homo - et hétérodimères de cette famille de facteur de croissance.

Activine A Inhibition De La Croissance De Médiation Et Arrêt Du Cycle Cellulaire Grâce à Smad Dans Les Cellules Humaines Du Cancer Du Sein

Cancer Research. Sep, 2005  |  Pubmed ID: 16140969

Le facteur de croissance transformant bêta (TGF-beta) superfamille de facteurs de croissance est responsable d&#39;une variété d&#39;actions physiologiques, y compris la régulation du cycle cellulaire. Activine est un membre de la superfamille de TGF-bêta qui inhibe la prolifération des cellules cancéreuses du sein. Fonctions activine en interagissant avec son type I et récepteurs de type II pour induire la phosphorylation de molécules de signalisation intracellulaires connus sous le nom Smad. Smad régulent la transcription de nombreux gènes dans une cellule et les tissus de manière spécifique. Dans cette étude, le rôle de l&#39;activine A régulation de la croissance dans des cellules cancéreuses du sein a été étudiée. Activine stimule le promoteur Smad sensible, p3TP, 2 fois plus de contrôle dans T47D cellules cancéreuses du sein. Activine inhibe la prolifération cellulaire des cellules cancéreuses du sein T47D après 72 heures, un effet qui pourrait être abrogée par une incubation avec le type inhibiteur du récepteur de l&#39;activine I, SB431542. Activine arrêtés cellules T47D dans la phase G0-G1 du cycle cellulaire. Smad2 et Smad3 ont été phosphorylés en réponse à l&#39;activine et accumulé dans le noyau de cellules traitées T47D. L&#39;infection des cellules T47D avec Smad3 adénoviral a entraîné l&#39;arrêt du cycle cellulaire et l&#39;activation de p3TP-luciférase, tandis qu&#39;un adénoviral dominante-négative Smad3 bloqué activine médiée par un arrêt du cycle cellulaire et la transcription des gènes. Activine maintenu l&#39;expression de p21 et de p27 inhibiteurs de kinases cycline-dépendantes impliquées dans le contrôle du cycle cellulaire, une expression accrue de p15, de réduire la cycline A l&#39;expression et la phosphorylation réduite du rétinoblastome (Rb) de protéine. Surexpression Smad3 récapitulé activine induite par p15 expression et la répression de la cycline A et de la phosphorylation de Rb. Ces données indiquent que l&#39;activine A inhibe la prolifération cellulaire du cancer du sein et active les Smad responsables pour initier un arrêt du cycle cellulaire.

Le Développement D'un Modèle Murin De L'endosalpingiosis Ovarienne

Endocrinology. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16141389

Douleur pelvienne est une affection présente répandue chez les femmes, souvent lié à l'ovulation, l'endométriose, grossesse précoce, cancer de l'ovaire et kystes. Diagnostic différentiel clair pour chaque condition provoquée par ces étiologies variées est difficile et peut ralentir l'administration du traitement qui, dans le cas de cancer de l'ovaire, peut être mortelle. Endosalpingiosis ovarienne, une condition gynécologique caractérisée par la présence de structures glandulaires kystiques, bordée par un épithélium tubaire/salpingeal bénigne, est également associée à des douleurs pelviennes chez les femmes. Les antécédents cellulaires exactes de ces structures kystiques lignées épithéliales ne sont pas connues, ni y a-t-il un lien connu pour le cancer de l'ovaire. Un modèle murin de l'endosalpingiosis ovarienne a été développé par diriger une version négative dominante du facteur de transcription TGF-bêta, Smad2, de l'ovaire à l'aide du promoteur de substance inhibant la canaux (MIS-Smad2-dn). Des souris femelles développent un phénotype endosalpingeal ovarienne dès l'âge de 3 mois. Important, continues avec la surface ovarienne épithéliale des kystes ont été identifiés, ce qui indique que ces cellules de kyste peuvent être dérivées de la couche des cellules épithéliales surface ovarienne très plastique. Un deuxième modèle de souris transgénique qui provoque la perte de puissance de l'activine (souris transgéniques de sous-unité alpha inhibine) développe des structures similaires kystiques, soutenant une dépendance de TGF-bêta/activin/Smad2 dans l'apparition de cette maladie.

Un Agent De Contraste Stéroïdes Conjugués Pour L&#39;imagerie Par Résonance Magnétique De La Signalisation Cellulaire

Journal of the American Chemical Society. Sep, 2005  |  Pubmed ID: 16173742

Nous avons synthétisé le premier stéroïde hormone-MR conjugué agent de contraste destiné à suivre le processus de signalisation cellulaire lors de la liaison à un système de commutation des gènes. Le dérivé a une relaxivité élevée et lors d&#39;un essai in vitro est actif comme antagoniste de la progestérone (RU-486). En combinant un système de transcription et une technologie d&#39;imagerie non invasive, telles que l&#39;IRM, il serait un outil puissant pour des recherches sur la voie de signalisation cellulaire in vivo.

Base Structurale Pour Antagoniste Fonctionnel Dans La Superfamille De Bêta De Facteur De Croissance Transformant

The Journal of Biological Chemistry. Dec, 2005  |  Pubmed ID: 16186117

Au sein de la superfamille de bêta de facteur de croissance transformant, la relation de l'agoniste-antagoniste entre l'activine et inhibine est unique et essentielle à la fonction intégrée de reproduction. L'activine agit dans l'hypophyse pour stimuler l'hormone folliculo - stimulante et est antagonisée par perturbateurs agissant, inhibine gonadiquement dérivée. Nous avons entrepris une analyse mutationnelle de la sous-unité de betaA activin afin de déterminer les aspects structurels précis qui contribuent à l'antagonisme de l'activine inhibine. En substituant les résidus d'acides aminés spécifiques dans la sous-unité de betaA activin avec des acides aminés de même alignées de la sous-unité alpha, nous avons mis le doigt sur les résidus requis pour la fixation aux récepteurs activine et activité, ainsi que pour l'antagonisme de l'activine grâce à ses récepteurs inhibine. En outre, nous avons identifié un mutant de l'activine avec une affinité plus élevée pour l'activine type I récepteur qui fournit des preuves de structure pour l'évolution des interactions ligand-récepteur dans la superfamille de bêta de facteur de croissance transformant.

Classe De Grandeur De Follicule Contribue à Motifs Distincts De La Sécrétion D'inhibine Isoformes Durant Le Cycle Oestral De Rat

Endocrinology. Jan, 2006  |  Pubmed ID: 16195413

La production différentielle des inhibines doit être exquise contrôlée au niveau cellulaire pour s'assurer de la sécrétion du ligand approprié à des moments spécifiques au cours du cycle de reproduction. Les mécanismes sous-jacents Assemblée dimère inhibine, traitement et sécrétion ne sont pas bien comprises. Ici, nous vérifions que la sécrétion d'inhibine A et inhibine B de cellules de la granulosa est discordante au cours du cycle oestral : production discordante ou la sécrétion de l'inhibine n'a pas été observée au cours du cycle d'induite par la gonadotrophine sérique jument gravide. Nous en corrélation la production discordante et sécrétion d'inhibine A et inhibine B dans le sérum avec profils distincts de colocalisation de sous-unité alpha - et bêta inhibine pendant le cycle dans la granulosa. Nous avons déterminé que le modèle discordant d'inhibine A et inhibine B durant le cycle oestral de rat est due à des populations indépendantes de follicules antraux inhibine B (petits follicules antraux) ou inhibine A (gros follicules antrums).

Ingénierie Tissulaire Follicules Produisent En Direct, Une Descendance Fertile

Tissue Engineering. Oct, 2006  |  Pubmed ID: 17518643

Les ovocytes cultivées in vitro sont de faible qualité et le rendement peu naissances vivantes, ce qui limite la capacité de stocker ou de la banque les ovules des femmes qui souhaitent préserver leur fertilité. Nous avons appliqué les principes du génie tissulaire à la culture de follicules immatures de souris par la conception d&#39;une matrice d&#39;hydrogel d&#39;alginate pour maintenir 3 de l&#39;ovocyte - dimensions (3D), l&#39;architecture et interactions cellule-cellule in vitro. Une culture 3D imite l&#39;environnement dans follicule vivo, et un hydrogel encapsulées follicules développer ovocytes matures dans la capacité pour la fertilisation similaire à celle d&#39;ovocytes matures in vivo. Embryons à partir d&#39;ovocytes fécondés in vitro en culture et transféré à pseudogravides souris femelles étaient viables, et les deux progéniture mâle et femelle sont fertiles. Nos résultats démontrent que l&#39;alginate hydrogel à base de 3D en culture in vitro de follicules permet une croissance normale et le développement des follicules et des ovocytes. Ce système crée de nouvelles opportunités pour la découverte en biologie du follicule et établit une technologie de base pour les banques d&#39;oeufs humains pour la préservation de la fertilité.

Gonadotrophine Induite Par Superovulation Disques De L&#39;ovaire De Surface épithéliums Contre La Prolifération Dans Des Souris CD1

Endocrinology. May, 2006  |  Pubmed ID: 16484319

L&#39;épithélium de surface de l&#39;ovaire (OSE) est une monocouche de cellules qui entourent l&#39;ovaire et d&#39;accommoder la déchirure répétée et la réparation en réponse à l&#39;ovulation. Cellules OSE sont considérés comme les ancêtres de 90% des cancers de l&#39;ovaire. Actuellement, le montant total de la prolifération de l&#39;OSE n&#39;a pas été signalée en réponse à un événement ovulatoire. Dans cette étude, la prolifération de l&#39;OSE a été quantifiée en réponse à la superovulation induite par injection intrapéritonéale de sérum de jument gravide gonadotrophine (PMSG) et la gonadotrophine chorionique humaine (hCG) dans immatures 27-d-anciens souris CD1 utilisant bromodésoxyuridine (BrdU). L&#39;incorporation de BrdU dans les cellules OSE a été mesurée à partir du moment de l&#39;injection d&#39;hCG pour une étiquette total cumulé de 12 h. Incorporation de BrdU a également été mesurée à partir du moment de PMSG d&#39;injection pour une étiquette total de 60 h à corréler la prolifération à une stimulation spécifique de gonadotrophine. La prolifération OSE était significativement plus élevée chez les animaux superovulées par rapport aux souris témoins à tous les points dans le temps. La prolifération a été également analysé en coupes anatomiques discrètes et a indiqué que OSE couvrant follicules antraux et corps jaunes ont proliféré plus rapidement que OSE distale à la croissance folliculaire. Enfin, l&#39;apoptose a été évaluée en réponse à l&#39;ovulation, et pratiquement pas de mort cellulaire dans l&#39;OSE a été détectée. Ces données démontrent que l&#39;OSE, en particulier près des follicules antraux et de corps jaunes, prolifère de façon significative en réponse à la PMSG et HCG gonadotrophines. Par conséquent, la division cellulaire de l&#39;ovaire de surface en réponse à l&#39;ovulation pourraient contribuer à cancer de l&#39;ovaire par mutations de l&#39;ADN induites par la prolifération et la progression de la cellule transformée.

Folliculogenèse Chez Le Chat Domestique (Felis Catus)

Theriogenology. Jul, 2006  |  Pubmed ID: 16620931

La régulation dynamique de la folliculogenèse chez les mammifères est un élément clé du processus de reproduction. Traditionnellement, le rongeur avait été utilisé comme modèle pour étudier la fonction ovarienne et la physiologie de la reproduction en raison de la disponibilité des animaux, leur longueur de cycle relativement court, des taux élevé de fécondité et l'intervalle de génération court. Nous maintenons que beaucoup des informations de base peuvent être déterminées à l'aide d'ovaires de chat domestique provient de cliniques vétérinaires locales après castration systématique, sans avoir la charge de maintenir une colonie de chats de laboratoire. Études de la physiologie normale de la reproduction féline et avances en technologie de la reproduction peuvent être extrapolées pour utilisation dans des félins non domestiques en voie de disparition. Une meilleure compréhension de la reproduction féline sera bénéfique à la médecine vétérinaire et aux groupes de travail pour contrôler les populations de chat sauvage. Il est important d'examiner les mécanismes de reproduction chez les modèles animaux alternatives qu'il y a un grand nombre d'espèces menacées et en voie de disparition, dans laquelle nous n'avons pas l'information de reproduction critique nécessaire pour aider à préserver leur survie à long terme.

L'expression De La Bêta De L'inhibine B Est Riche En Adipocytes Humains, Réduits Par La Perte De Poids Et Est Corrélée à Des Facteurs Impliqués Dans Les Maladies Métaboliques

Biochemical and Biophysical Research Communications. Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16650820

Le tissu adipeux est un organe endocrine qui produit et sécrète des adipokines. Le but de cette étude était d'identifier les gènes exprimés majoritairement dans les adipocytes humains sous-cutanée. À cet effet, un algorithme a été développé et profils d'expression ADN microarray de 33 types de cellules et tissus humains ont été utilisés pour sélectionner les gènes. Bêta de l'inhibine B (INHBB, codant pour la sous-unité de Beytat l'activine) a été identifié et forte expression dans les adipocytes a été confirmée par PCR en temps réel et l'immunohistochimie. INHBB expression dans le tissu adipeux a été bas régulée par la perte de poids induite par l'alimentation (p < 0,001). En outre, une corrélation positive expression INHBB total (p < 0,001) et sous-cutanée (p < 0,01) zones de tissu adipeux et des taux sériques d'insuline jeûne (p < 0,01) et de cholestérol (p < 0,05). En conclusion, l'expression INHBB était riche en adipocytes humains, réduits de poids perte du tissu adipeux INHBB mRNA niveaux corrélés à métaboliques facteurs de risque et. Ceci suggère que l'activine B produite dans les adipocytes peut-être jouer un rôle dans le syndrome métabolique.

Les Survivants Du Cancer Et L&#39;infertilité: Un Examen D&#39;un Nouveau Problème Et Réponses Nouveaux

The Journal of Supportive Oncology. Apr, 2006  |  Pubmed ID: 16669459

Améliorations dans le traitement du cancer ont changé la façon dont le cancer est vu et vécu. Cependant, ces mêmes traitements ont conduit à de nombreux effets précoces et tardifs, y compris la perte de la fertilité. L&#39;infertilité peut influer sur le biologique et la santé psychologique des deux survivants, hommes et femmes. Reproduction science peut maintenant offrir des méthodes pour répondre à cette préoccupation et fournir de nouvelles approches prometteuses qui peuvent éliminer ou d&#39;atténuer ce résultat lié au traitement. Pour les options actuelles et futures en matière de reproduction pour servir les besoins des survivants de façon plus complète, les prestataires de santé doivent comprendre les complexités de l&#39;infertilité ainsi que leur rôle dans la prestation de réponses à leurs patients ont besoin. Cet examen sera de discuter ce qui est connu sur les causes et l&#39;expérience de l&#39;infertilité chez les survivantes du cancer du ainsi que les formes de préservation de la fertilité disponibles.

Spécificité Cellulaire De Transformer La Réponse De Facteur De Croissance-bêta Est Dictée Par La Biodisponibilité Du Récepteur

Journal of Molecular Endocrinology. Jun, 2006  |  Pubmed ID: 16720726

Membres de la famille des transforming growth factor-beta (TGF) contrôlent diverses réponses cellulaires, y compris la prolifération, différenciation, mort cellulaire contrôlée et la migration. La réponse d'une cellule à un ligand individuel est très restreinte mais les voies de signalisation des protéines morphogéniques TGF, activine et OS partagent un nombre limité de récepteurs et activer similaires corégulateurs cytoplasmiques intracellulaires, SMAD. Une question centrale dans l'étude de cette famille de ligands est comment les cellules titrer et intègrent chaque signal de TGF-like afin de répondre de manière spécifique ligand et cellulaire. Cette étude utilise la lignée gonadotrope hypophysaire, LbetaT2, comme un modèle pour délimiter la contribution relative des ligands TGF et l'activine pour la biosynthèse de l'hormone folliculo - stimulante (FSH). Il a été constaté que les cellules de gonadotrope hypophysaire n'expriment pas de récepteur TGF type II (TbetaRII) et ne sont donc pas adaptés aux ligand TGF. Transfection du récepteur restaure les capacités de signalisation TGF et la stimulation de TGF-mediated de transcription des gènes dans les cellules de LbetaT2 FSHbeta. Par conséquent, nous avons évalué la présence de le TbetaRII dans l'hypophyse de souris adulte. TbetaRII ne pas colocalisés avec des cellules productrices de FSH ; Toutefois, il est détecté à la surface cellulaire des cellules de la prolactine et l'hormone de croissance-positifs. Pris ensemble, ces résultats suggèrent que la biodisponibilité du récepteur TGF spécifiques plutôt que TGF dicte gonadotrope hypophysaire sélectivité à l'activine, qui est nécessaire pour maintenir la fonction de reproduction normale. Il est probable que les mécanismes de ligand restreints utilisés par la gonadotrope sont présents dans d'autres cellules, ce qui pourraient expliquer le contrôle distinct de nombreux processus cellulaires par les membres de la superfamille des TGF.

Répartition De La Matrice Protéines Collagène De Type I, Collagène De Type IV, La Fibronectine, Laminine Et Extracellulaire Dans La Folliculogenèse Souris

Histochemistry and Cell Biology. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 16758163

La matrice extracellulaire (MEC) joue un rôle de premier plan dans la fonction ovarienne en participant à des processus tels que la migration cellulaire, la prolifération, la croissance et le développement. Bien que certains de ces processus de signalisation ont été caractérisés chez la souris, la quantité relative et la distribution de protéines de la MEC dans les follicules en développement de l&#39;ovaire n&#39;ont pas été caractérisé. Cette étude utilise l&#39;immunohistochimie et PCR en temps réel pour caractériser le type ECM composants du collagène, collagène de type IV, la fibronectine, laminine et de l&#39;ovaire de souris en fonction du stade de follicule et compartiment cellulaire. Collagène de type I était présent tout au long de l&#39;ovaire, avec des concentrations plus élevées dans l&#39;épithélium de surface de l&#39;ovaire et les compartiments folliculaires. Collagène IV était abondant dans le compartiment des cellules thèque à faible niveau d&#39;expression dans les cellules du stroma et de la granulosa. La distribution de collagène a été cohérente dans l&#39;ensemble la maturation du follicule. Coloration de la fibronectine dans le compartiment des cellules du stroma et de la thèque augmenté tout au long du développement du follicule, tandis que la coloration dans le compartiment cellulaire de la granulosa diminué. Coloration lourd a également été observée dans le liquide folliculaire des follicules antraux. La laminine a été localisé principalement dans le compartiment cellulaire thèque, avec un anneau défini à l&#39;extérieur des cellules de la granulosa folliculaires de marquage de la membrane basale. Les faibles niveaux de la laminine sont également apparues dans le stroma et le compartiment de cellules de la granulosa. Pris dans leur ensemble, le contenu ECM des changements ovaire de souris au cours du développement folliculaire et révèle un motif distinct spatiale et temporelle. Cette compréhension de la composition ECM et de la distribution peut être utilisé dans les études de base de la fonction ECM au cours du développement du follicule, et pourrait aider dans le développement de systèmes in vitro pour la croissance des follicules.

La Base Structurelle De TGF-bêta, La Protéine Morphogénétique Osseuse Et La Liaison De Ligand Activin

Reproduction (Cambridge, England). Aug, 2006  |  Pubmed ID: 16885528

La transformation superfamille growth factor-beta (TGF-bêta) est un grand groupe de facteurs de croissance structurellement apparentés qui jouent un rôle majeur dans une variété de processus cellulaires. L'importance et la prévalence de la signalisation TGF-bêta se traduisent également par le réseau complex des points de contrôle qui existent le long de la voie de signalisation, y compris un certain nombre d'extracellulaires antagonistes et modulateurs de signalisation-niveau de la membrane. Récemment, un certain nombre d'importantes structures cristallines de TGF-bêta ont émergé et nous a donné une clarté sans précédent sur plusieurs aspects de la processus de transduction de signal. Cet examen va mettre en évidence ces dernières avancées et présenter nos connaissances actuelles sur les mécanismes de la spécificité et le règlement sur la signalisation TGF-bêta à l'extérieur de la cellule.

Le Destin De La Piscine Folliculaire Initiale: La Preuve Empirique Et Mathématique Soutenir Sa Suffisance Pour La Fertilité Des Adultes

Developmental Biology. Oct, 2006  |  Pubmed ID: 16925987

L&#39;importance de la piscine follicule initiale de la fécondité chez les mammifères femelles adultes a récemment été débattue. Utilisant un modèle mathématique de la dynamique de la progression de follicule (primordiale à l&#39;enseignement primaire au secondaire), nous avons examiné si la piscine follicule initiale est suffisante pour la fertilité des adultes par la sénescence reproductive dans des souris CD1. Follicules dans chaque étape ont été comptés à partir jour postnatal de 6 à 12 mois et les données ont été ajustées à une série d&#39;équations différentielles du premier ordre représentant les deux mécanismes: un groupe initial de follicules primordiaux comme la source du follicule seulement (modèle de piscine fixe), ou une première piscine follicule primordial complétée par des cellules souches germinales (modèle de cellules souches). Le modèle de piscine fixe ajuster les données expérimentales, précision représentant le nombre maximum observé follicule primaire atteint par 4-6 mois d&#39;âge. Bien qu&#39;aucune des cellules souches germinales pourraient être identifiés par l&#39;AESS-1 immunomarquage, le modèle de cellules souches a été testée en utilisant une gamme de novo primordiales taux de production de follicules. Le modèle de cellules souches n&#39;ont pas pour décrire les diminutions observées dans les follicules au cours du temps et ne pas en parallèle avec l&#39;accumulation et la réduction subséquente dans les follicules primaires au cours de la durée de vie fertile début de la souris. Nos résultats sont en accord avec le dogme établi que la dotation initiale des follicules ovariens n&#39;est pas complétée par un nombre appréciable de cellules souches, mais plutôt, il est suffisant pour assurer la fertilité besoin de la souris adulte.

Règlement Postnatale Des Cellules Germinales Par Activine: La Création De La Réserve Folliculaire Initiale

Developmental Biology. Oct, 2006  |  Pubmed ID: 16930587

Femelles de mammifères de la puberté avec des réserves folliculaires qui dépassent le nombre nécessaire pour l&#39;ovulation au cours d&#39;une seule vie. Appauvrissement de la couche folliculaire se produit tout au long de la vie reproductive et se termine à la ménopause, ou sénescence reproductive, lorsque la piscine follicule est épuisé. Les mécanismes de régulation de la production d&#39;un pool spécifique de l&#39;espèce follicule initial ne soient pas bien comprises. Toutefois, la mise en place d&#39;une réserve folliculaire est essentielle pour définir la longueur de la cyclicité de la reproduction. Ici, nous montrons que l&#39;activine A (rh-ACTA), un régulateur connu de la formation de follicules et la croissance in vitro, a augmenté le nombre de follicules primordiaux de la souris après la naissance de 30% lorsqu&#39;il est administré à des animaux nouveau-nés pendant le temps de panne kyste lignée germinale et l&#39;assemblage follicule. Cette expansion dans la piscine follicule initiale a été caractérisée par une augmentation significative de cellules germinales à la fois et la prolifération cellulaire de la granulosa. Toutefois, les follicules en excès formée peu de temps après la naissance n&#39;a pas persisté dans la puberté et les deux animaux adultes rh-ACTA-et traités avec le véhicule a démontré une fertilité normale. Un follicule atrésie constante cinétique (k (A)) a été modélisée pour les deux groupes d&#39;animaux, et cohérente avec les données empiriques, le k (A) pour rh-ACTA-traité était double de celui des véhicules chez les animaux traités. Les constantes cinétiques pour la formation de follicules, la perte des follicules et l&#39;expansion du follicule de la naissance à 19 jours après la naissance ont également été établies pour les conditions de traitement des véhicules et rh-ActA. Il est important, l&#39;introduction de facteurs exogènes rh-ActA révélé un quorum intrinsèque de l&#39;ovaire de détection mécanisme qui contrôle le nombre de follicules disponibles à la puberté. Nous proposons qu&#39;il y ait un nombre optimal d&#39;ovocytes présents à la puberté, et lorsque le nombre de follicules est dépassé, il se produit au détriment de la qualité ovocytaire. Le mécanisme proposé fournit un moyen par lequel l&#39;ovaire élimine les follicules contenant des ovocytes excédentaires de mauvaise qualité avant la puberté, ce qui maintien de la fertilité dans le visage de stimuli hormonaux anormaux dans la période pré-pubertaire.

Fonctions De Matrice Extracellulaire Dans La Maturation Du Follicule

Seminars in Reproductive Medicine. Sep, 2006  |  Pubmed ID: 16944423

La matrice extracellulaire (MEC) favorise et / ou inhibe de nombreux processus cellulaires, y compris mais non limité à la prolifération, la différenciation et la survie, qui doit se produire pour la croissance folliculaire et la maturation des ovocytes. Le règlement ECM de processus cellulaires dans les cellules ovariennes est à l&#39;étude dans de nombreux modèles animaux, y compris aviaire, rat, bovine, porcine, lapin, mouton, l&#39;homme, et de la souris. Cellules de la granulosa sont plus souvent employées, mais la culture de follicules intacts et des ovaires a été développé et permet des fonctions ECM dans la folliculogenèse à étudier. Composants ECM qui ont été examinées sont utilisés individuellement (collagène, la laminine, la fibronectine) ou collectivement (Matrigel, isolé lame basale, et ECM produit par les lignées cellulaires) dans les deux systèmes et les deux modèles tridimensionnels. Dans les cultures de cellules de la granulosa, ECM affecte la morphologie, l&#39;agrégation et de la communication, la survie, la prolifération et la stéroïdogenèse; alors que les cultures du follicule et de l&#39;ovaire montrent un règlement de la folliculogenèse. Cet article décrit la fonctionnalité ECM sur les cellules ovariennes au cours du développement, et met en évidence le potentiel des technologies en développement pour identifier les relations structure-fonction dans la maturation du follicule.

Identification D&#39;un Permissive Stage-spécifique Dans L&#39;environnement De La Culture in Vitro Pour La Croissance Folliculaire Et Le Développement Des Ovocytes

Biology of Reproduction. Dec, 2006  |  Pubmed ID: 16957022

La disponibilité des ovocytes viables est le facteur limitant dans le développement de nouvelles techniques de reproduction. De nombreuses tentatives ont été faites pour développer des ovocytes immatures in vitro au cours des dernières décennies. Récemment, une modification de l&#39;alginate de système basé sur la culture en trois dimensions a été conçu pour soutenir la croissance et la maturation des follicules secondaires multicouches. Ce système était capable de produire des ovocytes ayant réussi la méiose, la fécondation et le développement jusqu&#39;au stade de blastocyste. Les tentatives ultérieures pour la culture à deux couches follicules secondaires ont été infructueuses dans les conditions originales. Ici, nous avons étudié l&#39;effet de la cohérence d&#39;alginate sur la croissance des follicules à deux couches et de la compétence ovocytaire au développement en encapsulant follicules dans les échafaudages d&#39;alginate de différentes concentrations. Bien qu&#39;il n&#39;y ait pas de différences significatives dans les taux de survie, 0,25% et 0,5% d&#39;alginate soutenu la croissance plus rapide des follicules et la formation antre, comparativement à 1,5% et l&#39;alginate de 1,0% après 8 jours de culture. Alginate échafaudage de concentration également affecté la prolifération et la différenciation des cellules somatiques (thèque et les cellules de la granulosa), mesurée en termes de changements morphologiques, profils stéroïdiens (androstènedione, l&#39;estradiol et la progestérone), et des marqueurs moléculaires spécifiques (FSHR, Lhcgr, et Gja1). La prolifération des cellules Thèque et la production de stéroïdes ont été entravés dans les follicules cultivées dans de l&#39;alginate de 1,5%. La fécondation in vitro et la culture des embryons a révélé que les ovocytes obtenus à partir d&#39;alginate de 0,25% retenu la plus haute compétence de développement. Dans l&#39;ensemble, la présente étude a montré que la cohérence d&#39;alginate échafaudage affecte la folliculogenèse et le développement des ovocytes in vitro et que le système de culture d&#39;alginate peuvent et doivent être adaptés au maximum à soutenir la croissance du follicule en fonction de la taille et le stade des follicules sélectionnés pour la culture.

Le Règlement in Vitro Du Développement Des Follicules De L&#39;ovaire En Utilisant Des Gels Matrice D&#39;alginate-extracellulaires

Biomaterials. Feb, 2006  |  Pubmed ID: 16076485

La matrice extracellulaire (ECM) fournit une structure tridimensionnelle qui favorise l&#39;adhésion cellulaire et régule et fournit des signaux qui dirigent les processus cellulaires conduisant au développement des tissus. Dans ce rapport, des matrices synthétiques qui présentent définis composants de l&#39;ECM ont été utilisés pour étudier ces effets de signalisation sur la formation des tissus en utilisant la maturation du follicule ovarien comme un système modèle. Dans les systèmes in vitro pour la culture des follicules sont en cours d&#39;élaboration afin de préserver la fertilité pour les femmes, et les cultures ont été réalisées pour tester l&#39;hypothèse selon laquelle l&#39;ECM réglemente la maturation du follicule d&#39;une manière qui dépend à la fois l&#39;identité ECM et le stade de développement des follicules. Follicules immatures de souris ont été cultivées dans les matrices à base d&#39;alginate qui ont été modifiés avec des composants ECM spécifiques (par exemple, la laminine) ou des peptides RGD. La matrice maintient l&#39;in vivo, comme la morphologie du follicule et fournit un environnement qui prend en charge le développement des follicules. Les composants de l&#39;ECM signaler les cellules somatiques du follicule, affectant leur croissance et leur différenciation, et de façon inattendue aussi affecter la compétence méiotique de l&#39;ovocyte. Ces effets dépendent à la fois l&#39;identité des composants de l&#39;ECM et de la phase initiale du follicule, ce qui indique que l&#39;ECM est un régulateur dynamique de développement des follicules. Le développement de matrices synthétiques qui favorisent la maturation du follicule pour produire des ovocytes méiose compétentes peuvent prévoir un mécanisme permettant de préserver la fertilité, ou plus généralement, de fournir des principes de conception pour échafaudage approches fondées sur l&#39;ingénierie tissulaire.

Les Structures Qui Sous-tendent Le Fonctionnement Normal De La Reproduction

Molecular and Cellular Endocrinology. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17140726

Les mécanismes et la physiologie de la fonction reproductrice ont fasciné les scientifiques à travers le temps. De récentes études de niveau cellulaire et moléculaire structurelles ont fourni un aperçu sans précédent dans les systèmes de reproduction et de réseaux de signalisation. Cette «pointe» de rédaction fournit un exemple récent dans chacun de ces domaines, à savoir, l&#39;intégrité anatomique du follicule, la structure moléculaire de l&#39;activine avec ses partenaires de liaison et la régulation moléculaire de l&#39;inhibine. Ces trois exemples de structure de l&#39;information aide la fonction expliquer la santé reproductive et peut fournir des solutions à la maladie de la reproduction.

Neonatal Exposure to Oestrogènes Supprime L'activine Expression Et Signalisation Dans L'ovaire De La Souris

Endocrinology. May, 2007  |  Pubmed ID: 17255206

Dans l'ovaire, l'oestrogène hormone stéroïde et l'activin de membre superfamille des TGF-bêta sont toutes deux produites par les cellules de la granulosa et ils ont tous deux fonctions intraovarienne. Des preuves nouvelles a indiqué une interaction entre ces deux voies de signalisation. Basée sur le fait que l'oestrogène et l'activine peuvent avoir un impact formation folliculaire précoce et développement, nous émettons l'hypothèse que les oestrogènes traitement peut modifier l'activine signalisation dans l'ovaire néonatal. Par conséquent, cette étude visait à examiner l'effet de néonatal diéthylstilbestrol (DES) et d'oestradiol (exposition E(2)) sur les niveaux d'ARNm et de protéines des principaux facteurs impliqués dans l'activine signalisation dans l'ovaire de la souris. Souriceaux CD-1 ont reçu des injections quotidiennes DES, e ou d'huile sur postnatal d 1-5, et des ovaires et sérum ont été prélevés sur la d 19. Neonatal exposure DES ou e a diminué le nombre de petits follicules antraux, induit la formation de follicule multioocytic et diminue les niveaux d'ARNm et de protéines bêta sous-unité activin. Conformément à la perte locale d'expression de la sous-unité bêta, la phosphorylation de Smad 2, un marqueur de l'activine-dépendante de signalisation, a diminué dans les ovaires imprégnées d'oestrogène. L'expression de la sous-unité bêta baisse a entraîné une diminution du taux sérique d'inhibine, avec une augmentation correspondante de la FSH. Oestrogène supprima également les activités de promoteur de gène sous-unité activin, suggérant un effet transcriptionnel direct. Dans l'ensemble, cette étude démontre que l'activine sous-unités sont des cibles de l'action des œstrogènes dans les ovaires de souris au début.

Couplage Structurel Et Biophysique De L'héparine Et L'activine Liaison Vers Des Fonctions De L'isoforme De Follistatine

The Journal of Biological Chemistry. May, 2007  |  Pubmed ID: 17409095

Follistatin (FS) réglemente le transforming growth factor-beta superfamille des ligands et est nécessaire au développement normal de follicule embryonnaire et de l'ovaire. Follistatin est exprimée en deux variants d'épissage (FS288 et FS315). Des études antérieures a montré des différences dans la fixation de l'héparine entre FS288 et FS315, potentiellement influer sur les fonctions physiologiques et les emplacements de ces isoformes. Nous avons déterminé la structure de la liaison de l'héparine complexe et quantitativement par rapport A FS315-activin par deux isoformes. La structure complexe de FS315 montre que les deux isoformes inhibent l'activine de la même façon, mais FS315 montre des mouvements au sein de la follistatine domaine 3 (FSD3) apparemment liées à la liaison de l'extension C-terminale. Étonnamment, les affinités de liaison de FS288 et FS315 pour l'héparine sont semblables à des forces ioniques inférieures avec FS315 liaison diminue plus fortement en fonction de la concentration en sel. Lorsqu'elle est liée à l'activine, FS315 lie l'héparine similaire à l'isoforme FS288, conformément à la structure du complexe, dans laquelle les résidus acides de l'extension C-terminale ne peuvent pas interagir avec le site de liaison de l'héparine. Activin induite par la liaison de l'héparine est unique à l'isoforme FS315 et peut stimuler le dégagement des FS315 complexes.

Kystes Ovariens épithéliaux Inclusion Dans Chroniquement Superovulées CD1 Et Smad2 Dominant Négatif Souris

Endocrinology. Aug, 2007  |  Pubmed ID: 17431007

L&#39;ovulation chronique en tant que facteur contribuant au développement du cancer épithélial de l&#39;ovaire chez les femmes a longtemps été une hypothèse exceptionnelle. Pour tester l&#39;hypothèse d&#39;ovulation incessante, les souris ont été superovulés utilisant hebdomadaires injections ip de sérum de jument gravide gonadotrophine (5 UI / animal), suivie 48 heures plus tard par la gonadotrophine chorionique humaine (5 UI / animal). De type sauvage souris CD1 ont été utilisées avec CD1 souris exprimant une Smad2 dominant négatif (Smad2DN) transgène sous le contrôle du promoteur substance inhibant l&#39;expression Müllérienne qui cible à l&#39;ovaire et améliore la formation de kystes. Après des injections chroniques, les ovaires ont été analysés à partir d&#39;animaux de 6 mois pour le nombre total ajusté des kystes, la zone du kyste, l&#39;emplacement du kyste, et les principaux voies de signalisation. Tous les kystes observés ont été confirmés comme étant d&#39;origine épithéliale. Le nombre de kystes n&#39;était pas significativement différente entre les souris superovulées et de contrôle dans les groupes soit de type sauvage ou Smad2DN. Cependant, la combinaison du transgène Smad2DN et superovulation a entraîné une augmentation de la formation d&#39;un kyste par rapport à la même portée normales qui ont été non stimulées. La prolifération rapide des cellules qui tapissent les kystes a été détectée à l&#39;aide bromodésoxyuridine et phospho-histone H3 immunohistochimie, mais n&#39;était pas différente dans l&#39;épithélium de surface de l&#39;ovaire ou dans la doublure kyste entre les groupes. Ces données suggèrent que la superovulation chronique dans les résultats de souris Smad2DN une incidence plus élevée de la formation d&#39;un kyste par rapport aux témoins non stimulées, mais les kystes épithéliaux bordés n&#39;a pas évoluer vers un cancer au cours de cette étude.

Oligosaccharides N-liés Directement L'Assemblée Différentielle Et La Sécrétion De Dimères De Sous-unité Alpha Et BetaA Inhibine

Molecular Endocrinology (Baltimore, Md.). Jul, 2007  |  Pubmed ID: 17456790

La voie de biosynthèse régissant hétérodimère inhibine (alpha/bêta) et l'activine homodimer (beta/beta) Assemblée et sécrétion par les cellules folliculaires ovariens n'est pas entièrement comprise. Ici, nous avons examiné le rôle de l'inhibine sous-unité glycosylation dans l'Assemblée et de sécrétion d'inhibine mature A et l'activine A. Inhibition de la glycosylation de la sous-unité de tunicamycine traitement d'alpha - et beta (A)-exprimant des lignées de cellules CHO réduit inhibine mais pas l'activine sécrétion. Inhibine dimérique A est préférentiellement sécrétée par les cellules parentales isogéniques sauvage (wt) lignes (alpha(wt)beta(wt)). Mutation d'un site de glycosylation unique à l'asparagine 268 (alpha(Delta268)beta(wt)) réduit la sécrétion de l'inhibine de 78 % et permet l'Assemblée beta/beta et la sécrétion. À l'inverse, un profit d'un site de glycosylation (GOG) dans la région analogue de la version bêta (A)-sous-unité (alpha(wt)beta(GOG327)) améliore la sécrétion de l'inhibine A. La présente étude démontre que glycane N-linked sites directement hétérodimère vs homodimère Assemblée et prévention de glycosylation abroge la sécrétion de l'inhibine. Ces données supportent un rôle définitif pour in situ N-glycosylation dans Conseil d'inhibine/activin dimère assemblée et la sécrétion.

L&#39;ingénierie Du Microenvironnement Folliculaire

Seminars in Reproductive Medicine. Jul, 2007  |  Pubmed ID: 17594609

Dans la culture in vitro follicule ovarien fournit un outil pour enquêter sur la folliculogenèse, et pourrait un jour fournir aux femmes à la fertilité de préservation des options. L&#39;application des principes du génie tissulaire à la maturation du follicule ovarien pourrait permettre la création de microenvironnements contrôlables qui sera chargé de coordonner la croissance des compartiments cellulaires multiples dans le follicule. Systèmes de culture en trois dimensions peuvent préserver l&#39;architecture du follicule, ce qui maintient critiques de signalisation cellule-cellule et cellule-matrice perdus dans traditionnels à deux dimensions ci-jointes des systèmes de culture du follicule. Le maintien de la structure folliculaire lors de la manipulation de l&#39;environnement biochimique et mécanique va permettre le développement des systèmes contrôlables pour enquêter sur les principes fondamentaux qui sous-tendent la maturation du follicule biologiques. Cette revue décrit les avancées récentes dans la culture du follicule ovarien, et met en évidence les principes de l&#39;ingénierie tissulaire qui peuvent être appliquées à la culture du follicule, avec l&#39;objectif ultime de la préservation lignée germinale chez les femmes face à l&#39;infertilité prématurée.

Oeufs Dans Le Nid

Endocrinology. Aug, 2007  |  Pubmed ID: 17639032

Propriétés Physiques Des Hydrogels D&#39;alginate Et Leurs Effets Sur Le Développement Des Follicules Dans In Vitro

Biomaterials. Oct, 2007  |  Pubmed ID: 17643486

Les propriétés mécaniques et la densité de naturels et synthétiques matrices extracellulaires sont connus pour influer sur les processus cellulaires et de réglementer la formation des tissus. Dans ce rapport, ces facteurs ont été d&#39;une enquête indépendante pour leur rôle dans le développement du follicule ovarien. Composition de matrice a été contrôlé par diminution de la concentration en matières solides ou la masse molaire de l&#39;encapsulation biomatériau, d&#39;alginate. Diminution matrice de rigidité et de la concentration en solides follicule amélioration de la croissance et la différenciation coordonnée des différents types cellulaires du follicule, comme en témoigne la formation de cavités antrale, thèque niveaux de différenciation cellulaire, la maturation des ovocytes, et la production d&#39;hormones par rapport. Bien que d&#39;un environnement favorable à la progestérone rigide de haute et de la sécrétion d&#39;androgènes, ce qui diminue la rigidité alginate abouti à la production d&#39;œstrogènes qui a dépassé la progestérone et de l&#39;accumulation des androgènes. Ces études révèlent, pour la première fois, un lien direct entre l&#39;environnement et de la fonction biomécanique du follicule, et de proposer un roman non-hormonale du développement folliculaire mécanisme de régulation.

Conception Rationnelle, Synthèse Et évaluation Biologique De La Progestérone Modifiés Agents De Contraste IRM

Chemistry & Biology. Jul, 2007  |  Pubmed ID: 17656319

Une série d&#39;agents de contraste pour imagerie par résonance magnétique (IRM) de façon non invasive visant à déterminer le statut des récepteurs hormonaux du cancer in vitro a été développé. Ces agents de contraste IRM ont été préparés par la conjugaison de la progestérone utilisée cliniquement Gd (III) chélates. Ces agents ont un sens élevé des affinités de liaison récepteur de la progestérone dans la gamme nanomolaire et l&#39;accumulation intracellulaire. Des valeurs élevées de logP des composés modifiés suggéré que la lipophilie des stéroïdes conjugués peuvent avoir contribué à la perméabilité membranaire. Le rayonnement synchrotron à rayons X et microscopie à fluorescence images par résonance magnétique a révélé que les conjugués synthétisés ont montré la plus grande accumulation cellulaire et une augmentation importante de la relaxivité in vitro par rapport à la déjà mis au point des stéroïdes modifié agent. Dosages de transcription en utilisant l&#39;élément de réponse progestérone liée à la luciférase a indiqué que les agents de contraste entré dans la cellule, en interaction avec la cible biologique, et a conduit spécifique de la progestérone médiée par la transcription.

Activine Et Diaphonie Estrogen Régule La Transcription Dans Les Cellules Humaines De Cancer Du Sein

Endocrine-related Cancer. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17914098

Activine est un membre de la superfamille du facteur de croissance transformant bêta qui régule le fonctionnement des cellules mammaires au cours du développement, la lactation, et dans le cancer. Activine ralentit la croissance des cellules cancéreuses du sein en induisant G (0) / G (1) arrêt du cycle cellulaire. L&#39;œstrogène est une hormone stéroïde qui stimule la prolifération des cellules épithéliales mammaires dans le développement et l&#39;oncogenèse. La diaphonie entre les œstrogènes et l&#39;activine qui régule l&#39;expression de l&#39;activine ligand, l&#39;activine et la transduction du signal d&#39;oestrogène, et arrêt du cycle cellulaire a été étudiée dans cette étude. Oestrogène-dépendante antagonisé activine la production d&#39;inhibiteur de l&#39;activateur du plasminogène 1 (PAI-1) ARNm, tandis activine refoulée oestrogène-dépendante de transcription du facteur trèfle 1. La répression de l&#39;œstrogène de signalisation par l&#39;activine a été récapitulé l&#39;aide d&#39;un élément de réponse simple oestrogène-luciférase construction et a été augmentée en présence d&#39;alpha des récepteurs des oestrogènes surexprimé (ERalpha). En revanche, les œstrogènes médiée par la répression de l&#39;activine de signalisation n&#39;ont pas pu être récapitulés sur une simple CAGA Smad-élément de liaison, mais ne inhiber la courte PAI-1 promoteur, p3TP-luciférase, surtout quand ERalpha était surexprimé. Répression de la transcription à la fois l&#39;œstrogène et de l&#39;activine-réglementé a été jugée induite par un ligand et Smad3 dépendante. En plus de répression de la transcription, l&#39;œstrogène a aussi réduit le montant de l&#39;activine B ARNm et la protéine produite par les cellules MCF7 du cancer du sein. Ces études démontrent l&#39;importance de la diaphonie activine et l&#39;oestrogène pendant la croissance des cellules mammaires et l&#39;initiation du cancer.

L'activine Réglemente Expression Des Gènes Récepteurs Oestrogènes Dans Les Ovaires De Souris

The Journal of Biological Chemistry. Dec, 2007  |  Pubmed ID: 17951260

L'activine, membre de la superfamille des transforming growth factor-beta, est un important modulateur de synthèse de l'hormone folliculo - stimulante et sécrétion dans la glande pituitaire et joue un rôle autocrine/paracrine dans la régulation du développement des follicules ovariens. D'une étude de microarray sur granulosa ovaires de souris, nous avons découvert que la bêta de récepteur d'oestrogène (ERbeta) est inductible par activin. Nous avons démontré précédemment qu'oestrogène supprime l'expression des gènes activin, suggérant une relation de rétroaction entre ces deux hormones régulatrices du follicule. Le but de cette étude était d'étudier de manière exhaustive l'activine une régulation de l'expression de ER. Tests de reverse transcription-PCR en temps réel sur les cellules de la granulosa cultivées ont montré que fois ERalpha et ERbeta ARNm ont été induites par l'activine A à 4, 12 et 24 h de façon dose-sensible. Transferts Western a confirmé une augmentation de leur taux de protéines. Conformément à l'augmentation de l'expression ERalpha et ERbeta, activine A stimulé l'oestrogène estradiol induit par réponse élément promoteur activité. Stimulation Activin A d'expression ER a un effet direct au niveau de la transcription du gène, car il n'était pas aboli par la cycloheximide, mais a été abolie par l'actinomycine D, et dans la granulosa transfectée cellules activine A stimulé ERalpha activité du promoteur. Pour étudier l'effet de l'activine in vivo et, ainsi, sa signification biologique, nous avons examiné l'expression de ER chez les souris transgéniques inhibine ont diminué l'activine expression et découvert que ces souris avaient diminué ERalpha et ERbeta expression dans l'ovaire. Nous avons également constaté que les niveaux d'ARNm ER ont diminué dans les canaux inhibant promoteur de substance (MIS)-souris négatives dominantes Smad2, qui ont une déficience de l'activine signalisation par le biais de Smad2 et petits ARN interférents ciblant Smad2 ou Smad3 supprimée ERalpha activation de promoteur, suggérant que Smad2 et Smad3 sont impliqués dans la régulation des niveaux d'ER. Par conséquent, cette étude révèle un rôle important pour l'activine dans l'induction de l'expression de l'ERs dans l'ovaire de la souris et suggère importante interaction entre l'activine et signalisation d'oestrogène.

L'émergence D'un Nouveau Interdiscipline : Oncofertility

Cancer Treatment and Research. 2007  |  Pubmed ID: 18080653

Bio-ingénierie Et Le Follicule Ovarien

Cancer Treatment and Research. 2007  |  Pubmed ID: 18080658

Fertilité Préservation Et L'adolescent Cancéreux : Leçons Tirées Des Adultes Survivants Du Cancer Chez Les Enfants Et Leurs Parents

Cancer Treatment and Research. 2007  |  Pubmed ID: 18080667

Déclaration De Consensus Pour Le Consortium Oncofertility : Lignes Directrices Pour La Cryopréservation De Tissu Ovarien

Cancer Treatment and Research. 2007  |  Pubmed ID: 18080669

Le Rôle De La Matrice Extracellulaire Dans Le Développement Des Follicules De L&#39;ovaire

Reproductive Sciences (Thousand Oaks, Calif.). Dec, 2007  |  Pubmed ID: 18089604

Régulation du développement des follicules ovariens dépend des hormones du système endocrinien et paracrine effet, l&#39;architecture 3-dimensions du follicule et la rigidité physique du tissu environnant. Ces 3 forces sont intégrées tout au long du cycle de vie du follicule pour assurer la sécrétion d&#39;hormone appropriée, la différenciation des cellules somatiques, et la maturation de l&#39;ovocyte. Le processus de maturation du follicule en fournit un nouvel outil pour comprendre le développement du follicule ovarien sous l&#39;influence de ces facteurs.

Fœtales Et Le Début Des Expositions Environnementales Postnatales Et Effets De Santé De La Reproduction Chez La Femelle

Fertility and Sterility. Feb, 2008  |  Pubmed ID: 18308062

Cette courte revue présente les recherches actuelles sur le rôle de l'environnement dans la fonction reproductrice femelle normale et pathogenèse, spécifiquement axé sur les ovaires et l'utérus.

Un Récepteur D&#39;oestrogène-alpha Knock-in Mutation Fournir Des Preuves De Signalisation Indépendante Du Ligand Et Permet La Modulation Induite Par Le Ligand De Pathways in Vivo

Endocrinology. Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18339713

Estrogen-répondaient pas aux récepteurs d&#39;oestrogènes alpha (ERalpha) knock-in (ENERKI) souris ont été générés à distinguer entre le ligand-induits et indépendante du ligand ER-alpha actions in vivo. Ces souris ont une mutation [glycine 525 à leucine (G525L)] dans le domaine de liaison du ligand de ERalpha, ce qui réduit considérablement l&#39;interaction avec ERalpha et la réponse aux œstrogènes endogènes, tandis que n&#39;affectant pas l&#39;activation du facteur de croissance de ligand des voies indépendantes. Souris ENERKI avait une hypoplasie des tissus utérins et rudimentaires des glandes mammaires canalaires arbres. Les femmes étaient stériles en raison d&#39;une anovulation, et leurs ovaires contenaient follicules kystiques hémorragiques en raison des niveaux chroniquement élevés de LH. Le phénotype ENERKI confirmé que ligand-activation induite par ERalpha est crucial dans le tractus génital féminin et développement de la glande mammaire. Traitements des facteurs de croissance induite utérine prolifération épithéliale chez les femelles ovariectomisées ENERKI, directement démontrant que ERalpha ligand des voies indépendantes étaient actives. En outre, la synthèse ERalpha agoniste sélectif propyle pyrazole triol (PPT) et le diéthylstilbestrol agoniste ER (DES) étaient encore en mesure d&#39;activer induite par le ligand G525L voies ERalpha in vitro. Traitements PPT initiés à la puberté stimule l&#39;utérus ENERKI développement, alors que les traitements néonatals ont été nécessaires pour restaurer l&#39;allongement glande mammaire canalaire, ce qui indique que néonatale induite par le ligand d&#39;activation ERalpha peut amorcer conduits mammaires pour devenir plus sensible aux œstrogènes dans les tissus adultes. Il s&#39;agit d&#39;un modèle utile pour l&#39;évaluation in vivo des voies ERalpha ligand-induites et tendances temporelles de la réponse. DES n&#39;a pas stimuler une réponse utérotrophique ENERKI. Parce que ERbeta peut moduler l&#39;activation ERalpha et ont une fonction anti-prolifératif dans l&#39;utérus, nous émettons l&#39;hypothèse que les animaux ENERKI étaient particulièrement sensibles à DES-inhibition du ERalpha due à des niveaux réglementés utérines ERbeta.

Le Rôle De L'activine A Et Akt/GSK Signalisation En Biologie De Tumeur Ovarienne

Endocrinology. Aug, 2008  |  Pubmed ID: 18450971

Niveaux A l'activine élevée dans le sérum, le liquide du kyste et liquide péritonéal de patients atteints de cancer ovarien suggèrent un rôle pour cette hormone peptidique dans le développement de la maladie. Nous émettons l'hypothèse que l'activine A joue un rôle dans la biologie de tumeur ovarienne et ont analysé l'activine pro-oncogéniques signalisation médiée par in vitro et l'expression de l'activine signalisation des molécules voie in vivo. Règlement Activin A d'Akt et GSK et les effets de réprimer les activités de ces molécules (avec inhibiteurs pharmacologiques) sur la prolifération cellulaire ont été évalués dans la lignée cellulaire, OVCA429. Activine A activé Akt, qui phosphorylé GSK, réprimer l'activité GSK in vitro. Activine A stimulé la prolifération cellulaire et répression de GSK augmentée prolifération activin réglementés. Pour valider les observations in vitro, l'immunomarquage de la sous-unité betaA activine A et phospho-GSKalpha/beta (Ser9/21) a été réalisée, et la corrélation entre les niveaux de l'immunoréactivité de ces marqueurs et la survie a été évaluée chez Cystadénome séreux bénigne, tumeur borderline et Cystadénocarcinome microarrays. Analyse de microarrays de tissu a révélé que betaA expression dans l'épithélium n'est pas corrélé avec la survie ou de la malignité, mais expression était élevée chez les cellules stromales de carcinomes en comparaison avec les tumeurs bénignes. Phospho-GSKalpha/beta (Ser9/21) la coloration est plus intense dans les cellules de carcinome mitotiquement actives et présentaient une localisation polarisée dans les néoplasmes bénins qui était absente dans les carcinomes. Notamment, abaisser l'immunoréactivité de la phospho-GSKalpha/beta (Ser9/21) en corrélation avec la meilleure survie pour les patients atteints d'hypernéphrome (P = 0, 046). Nos résultats sont compatibles avec un modèle dans lequel l'activine A pourrait véhiculer oncogenèse ovarienne par activation Akt et réprimer GSK pour stimuler la prolifération cellulaire.

Transforming Growth Factor-beta1, Transforming Growth Factor-beta2 Et Transforming Growth Factor-beta3 Améliorent Le Potentiel Métastatique Du Cancer Ovarien En Induisant Une Transition épithéliale-mésenchymateuse Smad3-dépendante

Molecular Cancer Research : MCR. May, 2008  |  Pubmed ID: 18505915

Transforming growth factor-beta (TGF-bêta) est censé jouer un rôle dans la progression pathobiological de cancer de l'ovaire, parce que cette hormone peptidique est surexprimée dans les tissus cancéreux, le plasma et le liquide péritonéal. Dans la présente étude, nous avons étudié le rôle de la voie de TGF-bêta/Smad3 dans les métastases du cancer de l'ovaire par le règlement d'une transition épithéliale-mésenchymateuse. Lorsque les cellules cancéreuses ont été cultivés sur plastique, TGF-beta1, TGF-bêta 2 et TGF-bêta 3 induisent la sécrétion pro-matrix métalloprotéinases (MMP), perte des jonctions cellule-cellule, down-regulation de la E-cadhérine, régulation de la N-cadhérine et l'acquisition d'un phénotype fibroblastoid, compatible avec une transition épithéliale-mésenchymateuse. En outre, Smad3 petite transfection de RNA interférente inhibée TGF-bêta-mediated des changements à une morphologie fibroblastique, mais pas la sécrétion de MMP. Lorsque les cellules cancéreuses ont été cultivés sur une matrice de collagène en trois dimensions, TGF-beta1, TGF-bêta 2 et le TGF-bêta 3 stimulent les pro-MMP et sécrétion active de MMP et invasion. Smad3 petite transfection de RNA interférente des cellules cultivées sur une matrice de collagène abrogée invasion TGF-bêta stimulée et la sécrétion de MMP. Analyse d'expression nucléaire Smad3 microarrays de Cystadénocarcinome séreuses tumeurs bénignes et tumeurs borderline a révélé que Smad3 expression pourrait servir à distinguer les tumeurs bénignes et à la limites du carcinome (P = 0,006). Supérieure Smad3 expression également corrélée avec faible taux de survie (P = 0. 031). En outre, un lien direct existe entre Smad3 expression nucléaire et l'expression du marqueur mésenchymateuse N-cadhérine chez les patients cancéreux (P = 0,0057). Collectivement, ces résultats impliquent un rôle important pour la voie TGF-bêta/Smad3 dans la médiation de l'oncogenèse ovarienne en améliorant le potentiel métastatique.

Smad3 Et Pitx2 Coopèrent Dans La Stimulation De La Transcription Du Gène FSHbeta

Molecular and Cellular Endocrinology. Jan, 2008  |  Pubmed ID: 18022758

L'activine est membre de la superfamille des TGF des facteurs de croissance et de différenciation qui contrôlent une variété de fonctions cellulaires et physiologiques. La voie intracellulaire canonique de ce ligand est bien établie et implique des Smad molécules de signalisation. La tissu - et cellule-spécificité d'action l'activine est obtenue par Smad interaction avec divers cofacteurs transcriptionnels dans le noyau. Dans l'axe de reproduction, activine a induit la biosynthèse et la sécrétion d'hormone (FSH) par l'intermédiaire de contrôle transcriptionnel de la sous-unité FSHbeta folliculo-stimulante. Considérant qu'il a été bien démontré que ce règlement est médiée par la voie des Smad, les mécanismes moléculaires sous-jacents de l'expression du gène FSHbeta gonadotrope spécifique ne sont pas totalement comprises. Auparavant, nous avons identifié Pitx2 comme un facteur de transcription pituitaire-exprimé impliqué dans l'induction de l'activine-dépendante du promoteur FSHbeta. Données actuelles démontrent que la Pitx2 est non seulement suffisantes, mais également nécessaires pour la transcription du gène FSHbeta, comme une régulation négative de siARN-médiation d'expression de protéine Pitx2 abroge les deux Smad3 et l'activine-induite par la stimulation du promoteur FSHbeta. En outre, la diminution de l'expression de la protéine Smad3 a un effet significatif sur la stimulation Pitx2 dépendante du promoteur FSHbeta, ce qui suggère que la coopération entre ces facteurs est nécessaire pour l'activation de la transcription complète du promoteur FSHbeta. De plus, nous montrons que des complexes de protéine Pitx2/Smad assemblent et peuvent être co-immunoprécipitée. Cette interaction est médiée par l'homéodomaine de Pitx2 et est importante pour la stimulation de la transcription du gène FSHbeta. Dans l'ensemble, ces données contribuent au mécanisme moléculaire émergent qui sous-tendent la régulation des gènes FSHbeta basale et l'activine-dépendante.

Une Boucle De Régulation Activin/furin Module Le Traitement Et La Sécrétion De Dimères De Sous-unité Alpha Et Beytat Inhibine Dans Les Cellules De Gonadotrope Hypophysaire

The Journal of Biological Chemistry. Nov, 2008  |  Pubmed ID: 18826955

Tous les ligands, facteur de croissance transformant bêta superfamille, inhibine et activines sont une paire physiologiquement pertinente qui est des antagonistes fonctionnels de l'autre. L'activine stimule alors qu'inhibine bloque la biosynthèse de l'hormone folliculo - stimulante et de sécrétion des cellules de gonadotrope hypophysaire, et ensemble, inhibine et l'activine contrôlent l'hypophyse gonadal essentiel pour la fonction de reproduction normale. Partage une sous-unité bêta similaire, la sécrétion d'inhibine hétérodimères (alpha/bêta) ou l'activine homodimères (beta/beta) en tant que ligands bioactifs matures dépend, en partie, la protéolyse des protéines précurseurs. Une voie réglementaire contrôlant la sécrétion de traitement et de dimère de précurseur en boucle courte a été découvert. L'activine stimule endogène inhibine alpha et Beytat-sous-unité ARNm, protéines et traitement protéolytique. Simultanément, l'activine a stimulé la furine proconvertase à travers un processus dépendant de Smad2/3. Les données fournissent un mécanisme où la réglementation des sous-unités de furine et inhibine coopère dans une boucle de rétroaction de courte positive importante. Cette boucle de régulation augmente la sécrétion de bioactive activin mature B, ainsi que dimères d'inhibine B, nécessaires pour règlement bêta FSH local.

Troubles De La Reproduction Féminines : Le Rôle Des Composés Perturbant Le Système Endocrinien Et Le Moment Du Développement

Fertility and Sterility. Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18929049

Pour évaluer le possible rôle des perturbateurs endocriniens composés (CPSE) sur les troubles de reproduction féminins mettant l'accent sur la plasticité développementale et la complexité de l'ontogenèse dépendant du système endocrinien des organes reproducteurs. Baisse des tarifs et l'incidence élevée des perturbations reproducteurs femelles justifient l'évaluation de l'impact des perturbateurs endocriniens sur la santé de la reproduction féminine de conception.

Faire Des Oeufs : C'est Maintenant Ou Plus Tard ?

Nature Medicine. Nov, 2008  |  Pubmed ID: 18989303

Le Microenvironnement Folliculaire Souris Régule La Formation Antre Et La Production De Stéroïdes: Modifications Dans Les Profils D&#39;expression Génique

Biology of Reproduction. Mar, 2009  |  Pubmed ID: 19005169

Folliculogenèse est un processus coordonné, et les gènes qui régulent le développement sont difficiles à étudier in vivo. Dans les systèmes de culture in vitro permet l&#39;évaluation de follicules individuels au cours du développement, ce qui permet l&#39;expression des gènes à surveiller au cours du développement du follicule. Souris multicouches follicules secondaires (150-180 microm de diamètre) ont été cultivées dans des matrices tridimensionnelles de différentes propriétés physiques pour 8 jours. Pendant cette période, la croissance du follicule in vitro, la formation antre et la production de stéroïdes ont été suivis, et l&#39;ARNm a été isolé. Les niveaux d&#39;expression de gènes (étoile, CYP11A1, Cyp17a1, Hsd3b1, cyp19a1, FSHR, Lhcgr, AQP7, AQP8, AQP9, et HIF1A) ont été mesurées et corrélées à l&#39;état de développement du follicule. Les follicules qui se sont développées un antre et produit des niveaux appropriés de l&#39;oestrogène et la progestérone avait l&#39;expression immuable de Star, AQP7, AQP8, et HIF1A et une augmentation de 34 fois dans cyp19a1 expression au Jour 8 de la culture et avait élevé Lhcgr aux jours 6 et 8 de la culture . Les follicules qui étaient en bonne santé, mais ne forment pas un antre ou de produire des niveaux appropriés de stéroïdes, cependant, ont démontré des niveaux croissants de Star, AQP7, AQP8, et HIF1A et une augmentation de 15 fois dans cyp19a1 au Jour 8 de la culture, et les niveaux n&#39;étaient pas Lhcgr élevée jusqu&#39;à ce que la Journée 8 de la culture. À notre connaissance, cette étude fournit la première analyse temporelle de l&#39;expression des gènes en utilisant la culture individuelle dans les hydrogels d&#39;alginate qui est en corrélation la croissance et la stéroïdogenèse au cours du développement du follicule et identifie les profils d&#39;expression dans les follicules sains et dans les follicules développemental défavorisés.

La Croissance Du Follicule Secondaire Et De La Maturation Des Ovocytes Par La Culture Dans L&#39;hydrogel D&#39;alginate Après Cryopréservation De L&#39;ovaire Ou Des Follicules Individuels

Biotechnology and Bioengineering. Jun, 2009  |  Pubmed ID: 19191350

Une option pour préservation de la fertilité pour les femmes face à un diagnostic de cancer implique la cryoconservation de tissu ovarien pour plus tard une nouvelle transplantation ou en culture in vitro, avec la culture in vitro a préféré éviter la réintroduction du cancer. Les petits follicules immatures survivent au processus de gel-dégel, et peut être affiné par le biais de la maturation du follicule (IFM) qui implique une croissance initiale du follicule et la maturation de l&#39;ovocyte après. Le tissu ovarien peut être cryoconservés sous deux formes: (i) des bandes corticales constitué de follicules et dans les environs du stroma (Cryo-Ov) ou (ii) les follicules isolés les uns des (Cryo-In). Le but de cette étude était d&#39;évaluer la croissance folliculaire et la maturation des ovocytes de follicules qui ont été cryoconservés soit sous forme de bandes ou individuellement en utilisant une méthode de cryoconservation lente congélation. Les deux groupes folliculaires, avec follicules de contrôle non cryoconservés, ont été cultivées dans un système à base d&#39;alginate culture tridimensionnelle pendant 12 jours. Le taux de formation de la survie globale, augmentation de la taille et de l&#39;antre étaient comparables entre les trois groupes. Au jour 12 de la culture, les niveaux ont été androstènedione diminué dans le groupe Cryo-Ov par rapport aux deux autres, et le rapport de la progestérone à l&#39;estradiol a augmenté dans les deux groupes cryoconservés par rapport à la commande. Les deux Gja1 (connu sous le nom de la connexine 43) et Gja4 (connu sous le nom de la connexine 37) l&#39;expression d&#39;ARNm ont diminué au jour 6 dans les groupes cryoconservés par rapport aux témoins, et au jour 12, Gja1 était semblable pour les trois groupes. En outre, Cryo-En abouti à taux GVBD inférieure indique une certaine développement des ovocytes avec facultés affaiblies. Dans l&#39;ensemble, la présente étude a démontré que les follicules de souris préantraux, soit au sein des tissus ovariens ou individuellement isolé, pourrait être cryoconservés avec succès par la méthode de congélation lente, comme en témoigne le développement des follicules post-dégel et steroidgenesis, la maturation des ovocytes et des marqueurs moléculaires pour l&#39;ovocyte et / ou de la granulosa cellules connexion.

Roles for Transforming Growth Factor Bêta Superfamille Des Protéines Dans La Folliculogenèse Précoce

Seminars in Reproductive Medicine. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 19197801

Formation de follicule primordial et le passage ultérieur des follicules aux stades primaires et secondaires englobent les événements précoces au cours de la folliculogenèse chez les mammifères. Ces processus mettre en place la piscine du follicule ovarien et amorcer des follicules pour l'entrée dans les phases de croissance subséquente au cours du cycle de reproduction. Des perturbations au cours de la formation du follicule peuvent affecter la taille du pool de follicules primordiaux significativement et altérations en transition follicule peuvent provoquer des follicules à l'arrestation à stades immatures ou de provoquer l'épuisement de la réserve folliculaire. Déterminer les événements moléculaires qui régissent la formation des follicules primordiaux et début de la croissance folliculaire peut conduire au développement de nouveaux traitements de fertilité. Durant la dernière décennie, la plupart des facteurs de croissance et des protéines de signalisation qui médient les premières étapes de la folliculogenèse ont été identifiées à l'aide de modèles génétiques de la souris, études in vivo injection et ex vivo organ culture approches. Ces études révèlent un rôle important pour la superfamille de bêta (TGF-bêta) de facteur de croissance transformant des protéines dans l'ovaire. Cet article examine ces rôles pour les protéines de la famille TGF-bêta et se concentre en particulier sur le travail de nos laboratoires sur les fonctions de l'activine dans la folliculogenèse précoce.

Préservation De La Fertilité Chez Les Patients Atteints De Cancer

The New England Journal of Medicine. Feb, 2009  |  Pubmed ID: 19246362

Perte De Follicule Primordial Prepubertal Chez La Souris N'est Pas En Raison De Voies Apoptotiques Classique

Biology of Reproduction. Jul, 2009  |  Pubmed ID: 19264701

Plus de la moitié des follicules primordiaux qui sont formés de 6 jours de vie postnatale chez la souris sera éliminée de l'ovaire au moment de la puberté. L'apoptose, une forme de mort cellulaire programmée, est un mécanisme par lequel ces follicules soient activement perdues. Afin d'étudier si l'apoptose est responsable de la perte des follicules primordiaux, atrésie folliculaire a été examiné durant la période pré-pubertaire, lorsque les follicules meurent et sont effacés de l'ovaire à un taux extrêmement élevé. Quatre caractéristiques de l'apoptose classique ont été mesurées dans les follicules présents dans les ovaires prépubères. La cohorte de follicule primordial n'était pas corrélée positivement avec rétrécissement nucléaire de condensation ou de la cellule, activation de la caspase 3, clivage de poly(ADP ribose) polymérase 1 (PARP1) ou fragmentation de l'ADN. Ces données sont compatibles avec une voie de nonapoptotic qui est responsable de la mort du petit follicule.

Préserver Femme De Traitement Du Cancer Fertilité Après: Options Et Les Possibilités Futures

Pediatric Blood & Cancer. Aug, 2009  |  Pubmed ID: 19301373

Les enfants et les femmes en âge de procréer sont de plus en plus survie diagnostics de cancer, et donc à long terme la qualité de vie questions sont d&#39;une grande importance au moment du diagnostic. Thérapies contre le cancer, y compris radiothérapie et la chimiothérapie peut être préjudiciable à la fertilité, et donc de nombreux patients sont motivés pour préserver la fertilité avant traitement anticancéreux. La seule méthode couronnée de succès dans la préservation de la fertilité à ce jour est la cryoconservation des embryons, qui ne peut être approprié pour certains patients en raison de l&#39;âge, le retard dans le traitement, le cancer du type et du stade, ainsi que la disponibilité d&#39;un donneur de sperme acceptable. D&#39;autres méthodes, y compris la cryoconservation des ovocytes et des banques de tissus de l&#39;ovaire peut également préserver la fertilité tout en offrant une flexibilité supplémentaire pour les patients. Dans l&#39;ovaire maturation in vitro des tissus bancaire follicule qui suit est une approche potentielle qui ne nécessiterait pas un retard dans le traitement du cancer pour la stimulation ovarienne, ne nécessiterait pas un donneur de sperme immédiate, et ne porte pas le risque de réintroduction de cellules malignes qui suivent la transplantation de tissus. Dans les systèmes de culture in vitro des follicules ont abouti à succès naissances vivantes chez la souris. Cependant, de nombreux défis doivent être abordés dans la traduction du système à l&#39;être humain. Cette revue résume les approches actuelles de préservation de la fertilité et examine l&#39;évolution récente et les défis futurs dans le développement de l&#39;être humain dans le système de culture in vitro des follicules.

Encapsulé En Trois Dimensions De La Culture Soutient Le Développement De Primate Non Humain Follicules Secondaires

Biology of Reproduction. Sep, 2009  |  Pubmed ID: 19474063

In vitro les cultures des follicules ovariens peut fournir la fécondité en préservant des options pour les femmes victimes de prématurée l&#39;infertilité due au traitement du cancer. Encapsulé système à trois dimensions de la culture (3-D) en utilisant des biomatériaux pour maintenir la communication cellulaire et le développement des follicules support pour produire un ovocyte mature a été développé pour la souris. Nous avons vérifié si ce système encapsulé 3-D serait également soutenir le développement des follicules de primate non humain préantraux, pour lesquels la croissance in vitro n&#39;a pas été signalés. Trois questions ont été étudiées: Est-ce le stade du cycle au cours de laquelle les follicules sont isolés affectent le développement des follicules? Est-ce la rigidité de la survie du follicule hydrogel influence et la croissance? Ne follicules exigent l&#39;hormone lutéinisante (LH), en plus de l&#39;hormone folliculostimulante (FSH), pour la stéroïdogenèse? Follicules secondaires ont été isolés à partir des singes rhésus adultes, encapsulées dans des hydrogels d&#39;alginate, et cultivées individuellement pour </=30 days. Follicles isolated from the follicular phase of the menstrual cycle had a higher survival rate (P < 0.05) than those isolated from the luteal phase; however, this difference may also be attributed to differing sizes of follicles isolated during the different stages. Follicles survived and grew in two hydrogel conditions (0.5% and 0.25% alginate). Follicle diameters increased to a greater extent (P < 0.05) in the presence of FSH alone than in FSH plus LH. Regardless of gonadotropin treatment, follicles produced estradiol, androstenedione, and progesterone by 14-30 days in vitro. Thus, an alginate hydrogel maintains the 3-D structure of individual secondary macaque follicles, permits follicle growth, and supports steroidogenesis for </=30 days in vitro. This study documents the first use of the alginate system to maintain primate tissue architecture, and findings suggest that encapsulated 3-D culture will be successful in supporting the in vitro development of human follicles.

Cultivées in Vitro Follicules Ovariens De L&#39;homme à Partir De Patients Atteints De Cancer De Soutenir La Croissance Des Ovocytes

Human Reproduction (Oxford, England). Oct, 2009  |  Pubmed ID: 19597190

Jeune femelle adulte et les patients du cancer des adolescents face à la vie-la préservation de la fertilité en danger, mais la chimio-ou radio-thérapie sont de plus en plus la recherche d&#39;options pour protéger leur potentiel de reproduction. Cryoconservation de tissu ovarien de la transplantation est une technique prometteuse pour sauvegarder la fertilité chez les patients cancéreux. Cependant, cette méthode peut risquer la réintroduction du cancer d&#39;origine pour le survivant de la maladie. Ainsi, l&#39;élaboration d&#39;une méthode de croissance in vitro de follicules immatures peuvent fournir une méthode pour restauration de la fertilité dans l&#39;avenir.

Interpénétrés De Fibrine D&#39;alginate Matrices Dans Le Développement in Vitro Follicule Ovarien

Biomaterials. Oct, 2009  |  Pubmed ID: 19616843

Dans ce rapport, nous étudions le réseau de fibrine-alginate interpénétré (FA-IPN) de fournir des dynamiques de cellules sensibles propriétés mécaniques, que nous appliquons à la croissance in vitro des follicules ovariens. Les propriétés mécaniques et le taux de polymérisation des gels ont été étudiées par rhéologie, et la structure de la fibre a été imagée par microscopie électronique. L&#39;utilisation d&#39;un modèle de souris, deux couches follicules secondaires ont été encapsulés dans FA-IPN, et la croissance, la morphologie, la production d&#39;hormones, le taux de dégradation de la fibrine et les numéros d&#39;œufs compétentes ont été évalués. La mécanique initiales du FA-IPN sont déterminées par le matériau composite, et la dégradation de la fibrine par la suite les cellules encapsulées produirait un matériau avec des propriétés mécaniques dues à l&#39;alginate seul. Le taux de méiose des ovocytes compétentes produites par culture en FA-IPN était de 82%, ce qui était significativement plus élevé que dans de l&#39;alginate seul. Cette augmentation de la qualité des ovocytes est une étape importante dans l&#39;identification des systèmes de culture en 3D qui peuvent fournir un outil fondamental pour enquêter sur la maturation du follicule, et peut être appliqué pour favoriser la croissance des follicules de l&#39;homme, qui peut être utilisé pour fournir des options en matière de reproduction pour les femmes confrontées à un cancer diagnostic.

Préserver La Fertilité Durant Le Traitement Du Cancer

Nature Medicine. Oct, 2009  |  Pubmed ID: 19812566

Régulation De L'expression Génique De Wilms' Tumor Par Facteur De Croissance Nerveuse Et L'hormone Folliculo - Stimulante Dans Les Ovaires De Souris Immatures

Fertility and Sterility. Apr, 2009  |  Pubmed ID: 18774569

Cette étude porte sur la régulation du gène de la tumeur de Wilms (WT1) dans l'ovaire par facteur de croissance nerveuse et FSH pour mieux comprendre les signaux qui initient le début de la croissance folliculaire. Facteur de croissance nerveuse a montré un effet stimulant direct sur expression endogène de WT1, tandis que la FSH atténué basale et stimulée par facteur de croissance nerveuse WT1 expression de la protéine, qui dépendait probablement de réactivité de la FSH en fonction du stade de croissance du follicule.

Suppression De La Protéine Notch Signaling in the Neonatal Mouse Ovaire Diminue La Formation De Follicules Primordiaux

Endocrinology. Feb, 2009  |  Pubmed ID: 18818300

Signalisation Notch dirige sort de la cellule au cours de l'embryogenèse en influençant l'apoptose, la différenciation et la prolifération cellulaire. Encoche gènes sont exprimés dans les ovaires de souris adultes et rôles pour encoche dans la régulation folliculogenèse commencent à émerger des modèles génétiques de la souris. Nous avons étudié comment la signalisation Notch pourrait influer sur la formation des follicules primordiaux. Assemblée du follicule se déroule lorsque les cellules germinales syncytiums au sein de l'ovaire se décomposent et les cellules germinales sont encapsulés par les cellules pregranulosa. Chez la souris, cela se produit pendant les premiers 4-5 jours après la naissance. L'expression des gènes de la famille encoche dans les ovaires de souris néonatales a été déterminée au moyen de mesures de RT-PCR. Transcriptions Jagged1, Notch2 et Hes1 ont été le plus abondamment exprimé ligand, récepteurs et gène cible, respectivement. ARNm Jagged1 et Hey2 ont été régulée au cours de la période de formation du follicule. Les études de localisation ont démontré que JAGGED1 est exprimée dans les cellules germinales avant l'assemblage du follicule et dans les ovocytes des follicules primordiaux. Les cellules Pregranulosa qui entourent les cellules germinales nids expriment HES1. En outre, pregranulosa des cellules des follicules primordiaux expriment NOTCH2 et Hey2 ARNm. Nous avons utilisé un ex vivo système de culture ovaire pour évaluer l'exigence pour la signalisation Notch au début du développement folliculaire. Ovaires nouveau-né cultivées en présence d'inhibiteurs de la gamma-sécrétase, composés que Notch atténuer, signalisation, avait une nette réduction des follicules primordiaux comparés aux ovaires imprégnées sur le véhicule, et il y avait une augmentation correspondante dans les cellules germinales qui restait dans les nids. Ces données confirment un rôle fonctionnel pour la signalisation Notch dans la régulation de la formation de follicules primordiaux.

La Piscine Primordiale Des Follicules Et La Dégradation De Nid Dans Les Ovaires Chez Les Mammifères

Molecular Human Reproduction. Dec, 2009  |  Pubmed ID: 19710243

La création du pool de follicules disponibles pour la sélection et l'ovulation est un processus fortement réglementé aux multiples facettes qui s'étend sur la période du développement embryonnaire par le biais du premier cycle de reproduction de l'organisme. Chez les souris, cette évolution peut se produire dans les semaines simples, mais chez les humains, elle est maintenue pendant ans. Développement des cellules germinales embryonnaires implique la migration des cellules primordiales de germes à la crête génitale et la division mitotique des cellules germinales noyaux sans cytokinèse complet pour former un syncytium multinuclées, ou nid de cellules germinales. Grâce à l'action combinée de l'apoptose des cellules germinales et la migration de cellules somatiques, les noyaux des cellules germinales sont emballés, avec entourant les cellules de la granulosa, dans les follicules primordiaux pour former le pool initial follicule. Bien que souvent rejetée comme quiescente et peut-être sans intérêt, cette piscine de follicule initiale est effectivement très dynamique. Dans un mécanisme très strictement contrôlé, une grande partie des follicules primordiaux initiales formé est perdue par atrésie, avant le début de cyclisme même. Restant des follicules peut subir des destins alternatifs continu ou en sélection conduisant à la différenciation et la croissance folliculaire. Ensemble, les processus impliqués dans les décisions du sort de l'atrésie, dormance prolongée ou activation tailler la piscine du follicule de la puberté, la piscine d'ovocytes disponibles à partir de laquelle tous les futurs cycles de reproduction de la femelle peut choisir. La formation du follicule initiale et pubertaire piscines peuvent être prévisible affectées par un traitement exogène d'hormones ou des molécules telles que l'activine, démontrant la manière de l'ovaire contrôle la qualité et la quantité des cellules germinales maintenu. Ici, nous passons en revue les processus biologiques impliqués dans la formation de la piscine de follicule initial et la piscine de follicule de la puberté, adresse le suppléant modèles pour réglementer le nombre de cellules germinales et comment l'ovaire-contrôles de qualité les cellules germinales produits de contour.

Le Rôle Régulateur De Dicer Dans La Folliculogenèse Chez La Souris

Molecular and Cellular Endocrinology. Feb, 2010  |  Pubmed ID: 19799966

Dicer est la ribonucléase III pour la synthèse de la maturité fonctionnelle microARN (miARN), qui joue un rôle important dans la régulation du développement des cellules. Dans l'ovaire de la souris, la protéine de Dicer1 a été exprimée dans les ovocytes et granulosa cellules du follicule. Dans la présente étude, le rôle des miARN en développement ovarien chez la souris a été exploré à l'aide de tissus ovariens souris knock-out conditionnel (cKO) de Dicer1 (Amhr2 Cre /-; Dicer flox/flox), dans lequel Dicer1 est supprimé, spécifiquement dans les cellules folliculaires de la granulosa. Le profil d'expression de gène et de la morphologie de cKO et les ovaires de souris de type sauvage (WT) à différents stades de développement (jour 4, jour 8, 8 semaines et 8 mois) ont été examinés. Analyse comparative du nombre follicule a indiqué que l'inactivation conditionnelle des Dicer1 dans les cellules folliculaires de la granulosa, conduit à une dotation de piscine accrue des follicules primordiaux, recrutement accéléré de follicule précoce et plus dégénérées follicules dans les ovaires de cKO. En outre, des différences significatives ont été observées l'expression de certains follicule liés au développement gènes entre cKO et les ovaires de souris WT, comme Amh, Inhba, Cyp17a1, Cyp19a1, Zps, Gdf9 et Bmp15, suggérant que la fonction des miARN dans la régulation de l'expression des gènes est fonction du temps et de gène. L'inactivation de la Dicer1, mmu-mir-503, un miRNA qui est plus abondante dans les ovaires de souris que dans d'autres tissus, était diminuées considérablement. Pendant ce temps, l'expression de mmu-mir-503 a diminué notamment avec le développement de follicules dans les ovaires de souris sensibilisées gonadotrophine. Régulation de mmu-mir-503 dans la granulosa cultivés primaires ont entraîné la diminution de l'expression du gène ciblé et gène non ciblées au niveau transcriptionnel, qui impliquent des gènes associés à la luteinization et la prolifération des cellules de la granulosa. En conclusion, Dicer1 joue un rôle important dans le développement de cellules folliculaires à travers la régulation différentielle de l'expression génique.

Indice Non Invasive Du Potentiel Et De Croissance Pour Cryorecovery Follicules Humains in Vitro

Biology of Reproduction. Jun, 2010  |  Pubmed ID: 20200211

Cryoconservation des ovocytes et des embryons est couramment utilisé pour préserver la fertilité. Cependant, les femmes qui subissent le traitement du cancer ne peut pas avoir le temps ou peut-être pas de bons candidats pour ces options. Cryoconservation de tissu ovarien cortical et de transplantation de tissus qui a suivi a fait ses preuves encore inefficace dans la préservation de grands follicules secondaires, et n&#39;est pas recommandée comme une option préservation de la fertilité pour les femmes atteintes de certains cancers. Nous avons évalué la cryoconservation des follicules individuels comme une option alternative chez les rongeurs, les primates non humains et les primates de l&#39;homme. Dans des conditions optimales, les follicules de souris cryoconservés secondaires étaient en mesure de rétablir la granulosa cellule ovocyte interactions, qui sont essentiels pour la croissance folliculaire ultérieure. Individuels follicules secondaires survécu à la cryopréservation, ont pu être cultivés dans une matrice tridimensionnelle alginate hydrogel à l&#39;étape antrale, et les ovocytes fermés étaient compétents pour la fertilisation. En utilisant une technique d&#39;imagerie vitale (pol-champ) travaillent dans des centres de fertilité de nombreux, nous avons pu les essais biologiques, décongelées et follicules cultivés pour la présence de connexions entre le transzonales cellules somatiques et germinales. Perturbations dans ces liens se sont révélées être inversée lorsque les follicules ont été cryoconservés dans des conditions optimales de congélation. Nous avons appliqué le protocole de cryoconservation optimisé pour le singe rhésus et l&#39;homme isolé follicules secondaires, et en utilisant du bio-essai biréfringent, nous avons pu montrer une bonne corrélation entre la croissance des follicules sains précoce et de cellules somatiques-ovocytes connexions. Nos résultats suggèrent que les follicules ovariens peuvent être cryoconservés, décongelé, et analysé de façon non invasive, ce qui rend la préservation du follicule une option supplémentaire pour les jeunes patients atteints de cancer.

Phylogenomic Analyses Révèlent L'origine évolutive De L'inhibine Alpha Sous-unité, Un Antagoniste De Superfamille Des TGF Unique

PloS One. 2010  |  Pubmed ID: 20209104

Transforming growth factor-beta (TGF) homologues forment une superfamille diversifiée qui a pris naissance au début de la fonction cellulaire évolution et contrôle animale, par le biais de transmembranaire, conservée sérine-thréonine kinases (récepteurs RII et RI). L'activine et inhibine sont des dimères connexes au sein de la superfamille des TGF qui partagent une sous-unité bêta commune. L'évolution de la sous-unité alpha inhibine a créé le seul antagoniste dans la superfamille des TGF et le seul membre connu pour agir comme une hormone endocrine. Cette hormone a présenté un nouveau niveau de complexité et de contrôle de la fonction reproductrice vertébrée. Les nouvelles fonctions de la sous-unité alpha inhibine semblent refléter les changements d'insertion / délétion spécifiques au sein de la sous-unité bêta inhibine survenus au cours de l'évolution. Selon l'analyse de phylogenomic, nous en corrélation insertions spécifiques avec l'acquisition de fonctions distinctes qui sous-tendent la complexité phénotypique des vertébrés processus de reproduction. Cette approche phylogenomic présente une nouvelle façon de comprendre les relations structure-fonction entre inhibine, activine et la superfamille des TGF plus grande.

À L'aide D'arbres De Décision Pour Améliorer Le Travail D'équipe Interdisciplinaire : Le Cas D'oncofertility

Journal of Assisted Reproduction and Genetics. May, 2010  |  Pubmed ID: 20386978

Oncofertility, une nouvelle discipline à l'intersection du cancer et de la fertilité, s'efforce de donner le cancer options les patients lorsqu'ils sont confrontés à une infertilité potentielle par suite du traitement du cancer. Fertilité préservation décisions doivent être prises avant le début de traitement, ajoutant la contrainte au processus décisionnel.

Le Oncofertility Consortium--abordant La Fertilité Chez Les Jeunes Atteints De Cancer

Nature Reviews. Clinical Oncology. Aug, 2010  |  Pubmed ID: 20498666

Le nombre de survivants du cancer jeune augmente en raison de progrès dans les traitements du cancer, mais beaucoup doivent faire face à l'infertilité à la suite de leur traitement. Les technologies qui existent déjà pour les patients cancéreux préoccupés par leur fertilité future incluent sperme bancaire pour les hommes et l'intervention hormonale, suivie de la fécondation in vitro et la cryopréservation d'embryon pour les femmes. Toutefois, les barrières logistiques à orientation patiente en temps opportun et de la coordination des soins entre spécialités peuvent limiter l'accès patient à toutes les options disponibles. En outre, il existe peu d'alternatives pour les jeunes femmes et jeunes filles qui ne peuvent retarder leur traitement contre le cancer, ou qui sont incapables de subir une intervention hormonale. Le Oncofertility Consortium est un réseau de chercheurs, de médecins et de savants qui font progresser la fertilité des options de conservation pour jeunes cancéreux. Recherches sur les implications sociales, éthiques et juridiques estégalement également une partie importante des travaux effectués par le Oncofertility Consortium, qui fournit des perspectives nouvelles sur patient prise de décisions sur la façon d'accéder à ces nouvelles techniques de reproduction. Experts dans les domaines de l'oncologie, médecine de la reproduction, les sciences sociales, droit, éducation et sciences humaines collaborent pour développer des interventions reproduction de génération et de favoriser la communication entre chercheurs, cliniciens, patients et le public pour s'assurer que les jeunes cancéreux est équipés de l'information plus appropriée et les options pour avoir une famille à l'avenir.

Fixer Le Cap : Direction Le NICHD

Biology of Reproduction. Jul, 2010  |  Pubmed ID: 20505167

Biais De Sexe Dans Les Essais Et Le Traitement Doit Se Terminer

Nature. Jun, 2010  |  Pubmed ID: 20535184

Sexe Et Sensibilité : Besoin De La Poursuite Pour La Recherche Biomédicale Fondée Sur Le Sexe Et La Mise En œuvre

Women's Health (London, England). Jul, 2010  |  Pubmed ID: 20597615

L'expression « recherche en santé des femmes » embrasse les femmes dans le cadre du moteur de recherche biomédicale tout en classant les femmes comme étant séparé. Avant médecine personnalisée puisse devenir une réalité, nous devons nous assurer tout d'abord que les différences physiologiques fondamentales entre les sexes sont clairement délimitées. Dans cet article, nous considérons que la recherche sur les différences entre les sexes devrait être encouragée au niveau plus fondamental des sciences biomédicales. En outre, il faut toujours critique une représentation appropriée des deux sexes comme participants aux études cliniques. Les organisations académiques et gouvernementales doivent continuer à articuler politique forte afin d'assurer l'inclusion et l'analyse du sexe comme une variable critique. Attention focalisée sur le sexe comme un facteur contribuant à la santé, la maladie et l'activité thérapeutique sera augmenter nos fonds de connaissances au sujet de notre santé tous les jours, accélérer le rythme de la recherche clinique et une population en meilleure santé.

Disponibilité De Zinc Régule La Sortie De La Méiose Chez Les Mammifères Ovocytes Amenés à Maturation

Nature Chemical Biology. Sep, 2010  |  Pubmed ID: 20693991

Flux d'ions métalliques cellulaires sont connus dans les métaux alcalins et alcalino-terreux, mais ne sont pas bien documentés dans les métaux de transition. Nous décrivons ici les changements majeurs dans la physiologie de zinc de l'ovocyte de mammifères qu'il mûrit et initie le développement embryonnaire. Seule cellule analyse élémentaire des ovocytes de souris par axés sur le rayonnement synchrotron de microscopie de fluorescence de rayons x (XFM) a révélé une augmentation de 50 % de la teneur en zinc total dans le délai de 12-14 h de maturation méiotique. Perturbation de l'homéostasie de zinc avec une progression de méiose chélateur de petites molécules cellulaires perméables bloqué passé télophase I. Zinc supplémentation a sauvé ce phénotype lorsqu'il est administré avant ce bloc méiotique. Cependant, après l'arrestation de la télophase, parthénogenèse zinc déclenchée, ce qui suggère que la sortie de cette étape de méiose est étroitement contrôlée par la disponibilité d'un signal de zinc dépendante. Ces résultats impliquent le bolus de zinc acquis au cours de la maturation méiotique comme une partie importante de l'héritage maternel à l'embryon.

Conception Folliculo-environnement Interactions Avec Des Biomatériaux

Cancer Treatment and Research. 2010  |  Pubmed ID: 20811822

Préservation Des Gamètes

Cancer Treatment and Research. 2010  |  Pubmed ID: 20811823

À Transplanter, Ne Pas Transplanter - Telle Est La Question

Cancer Treatment and Research. 2010  |  Pubmed ID: 20811824

Espérance Médicale, Des écueils Juridiques : Problèmes Juridiques Potentiels Dans Le Domaine émergent De L'oncofertility

Cancer Treatment and Research. 2010  |  Pubmed ID: 20811829

Adoption, Après Le Cancer : Attitudes Agence Adoption Et Perspectives Sur Le Potentiel De Postcancer Parent

Cancer Treatment and Research. 2010  |  Pubmed ID: 20811831

L'Académie Du Samedi Oncofertility : Un Paradigme Pour élargir Les Possibilités D'éducation Et Les Ambitions Des Lycéennes

Cancer Treatment and Research. 2010  |  Pubmed ID: 20811845

Oncofertility : Perspectives éthiques, Juridiques, Sociales Et Médicales. Préface

Cancer Treatment and Research. 2010  |  Pubmed ID: 21213472

Un Roman En Deux étapes Stratégie De Culture in Vitro Des Follicules Ovariens En Début De Carrière Chez La Souris

Fertility and Sterility. May, 2010  |  Pubmed ID: 20004373

Pour développer une stratégie in vitro pour soutenir la croissance des follicules à un stade précoce et de produire des ovocytes matures compétentes pour la fertilisation.

Les Marqueurs De La Croissance Et Le Développement Dans Primate Follicules Primordiaux Sont Conservées Après La Cryoconservation Lente

Fertility and Sterility. May, 2010  |  Pubmed ID: 20074723

Pour étudier l&#39;effet de la cryopréservation lente sur la morphologie et la fonction de primates follicules primordiaux au sein des tranches de tissu ovarien.

Altéré De Concentrations De L'hormone Sexuelle Et Gonadiques ARNm D'expression Des Facteurs Signalisation Activin Alligators De La Progéniture D'un Lac De Floride Contaminé

Journal of Experimental Zoology. Part A, Ecological Genetics and Physiology. Apr, 2010  |  Pubmed ID: 20166196

Activines et oestrogènes participent à la régulation de la ventilation des cellules germinales ovariennes nids et Assemblée de follicule chez les mammifères. En 1994, notre groupe a signalé des fréquences élevées des anormaux, multioocytic des follicules ovariens dans les alligators femelles âgées de 6 mois, environnementales contaminant exposés après le défi de la gonadotrophine. Ici, nous avons étudié si maternelle contribution des perturbateurs contaminants dans le œuf par la suite modifie l'oestrogène/inhibin/activin signaling in progéniture femelle Hostgator, présumément prédisposant une fréquence accrue de formation du follicule multioocytic. Nous avons mesuré les concentrations stimulée par la gonadotrophine basales et exogènes des hormones stéroïdes plasmatiques et l'activine ovarienne abondance ARNm facteur dans les alligators de la progéniture de la même contaminés (Lac Apopka) et des lacs de référence (Lac Woodruff) de Floride, de la signalisation en circulation comme examiné en 1994. Basale circulants estradiol et testostérone plasmatique est plus alligators de l'environnement contaminé, alors que l'activine/inhibine betaA sous-unité et follistatine les ARNm abondances sont inférieures aux valeurs mesurées dans les ovaires d'animaux du lac référence. Animaux contestées, contaminant exposés ont montré une augmentation plus robuste dans la concentration d'oestradiol plasmatique suite à un défi d'hormone (FSH) par rapport aux alligators de site de référence de folliculostimuline aiguë. Aromatase et les niveaux d'ARNm follistatine augmentent en réponse à une stimulation prolongée de FSH chez les animaux de site de référence, mais pas chez les animaux exposés au contaminant. Dans les alligators Hostgator, les follicules ovariens n'ont pas encore formé ; par conséquent, ces différences endocriniens sont susceptibles d'affecter le développement ovarien ultérieur, y compris l'Assemblée follicule ovarien.

Registre De Santé De La Femme De L'Illinois : Faire Progresser Les Femmes Recherche En Santé Et L'éducation Dans L'Illinois, USA

Women's Health (London, England). Mar, 2010  |  Pubmed ID: 20187725

Pour atteindre l'objectif de la médecine personnalisée, nous devons d'abord améliorer notre compréhension des différences entre hommes et femmes dans la santé et la maladie. Le but de registre de santé féminines de l'Illinois (USA) est de fournir un outil de recherche et d'enseignement qui fait progresser la connaissance scientifique des différences de sexe et sexiste in health and disease. Plus précisément, le registre est un confidentielle 30 min Enquête santé et style de vie pour les résidantes de l'Illinois, âgés de plus de 18 ans. L'enquête comprend des questions concernant la santé, environnement, les comportements liés à la santé, les symptômes et maladies ou conditions qu'un participant peut avoir maintenant ou a eu dans le passé. En s'inscrivant dans le registre, femmes tout au long de l'État sont fournies avec les informations et l'accès aux études de recherche clinique qu'ils peuvent être admissibles, basées sur leurs informations d'auto-évaluation de la santé. Non seulement le registre sert de plate-forme pour le recrutement dans les études pivotales, mais représente aussi le début d'une base de données nationale qui permet aux chercheurs d'examiner l'information collective santé anonymisées fournie par les femmes qui vivent dans l'Illinois. En fin de compte, une analyse transversale et longitudinale de ces données aideront à clarifier les questions que les femmes s'identifient comme leurs problèmes de santé principaux. En réponse à ces préoccupations, une recherche spécifique des études peuvent être conçus et lancés, permettant éventuellement offrir des options de traitement et de prévention adaptées aux femmes. Enfin, en créant un outil fiable de recherche axés sur l'État, développé par le personnel qui est formé dans la recherche sur la santé des femmes, nous pouvons comparer les problèmes de santé à travers l'État et appliquer des stratégies d'amélioration où il est le plus nécessaire. Cet article fournira des exemples de différences entre les sexes dans la maladie, le manque d'exécution des lois fédérales pour l'inclusion des femmes dans les études, chercheur-perçu des charges et fondée sur le sexe des raisons quant à pourquoi le recrutement des femmes est considéré comme plus difficile. En outre, cet article discutera de ce qui est le registre de la santé des femmes et pourquoi nous avons besoin l'un dans l'Illinois, comment nous avons recruté des femmes et de nos réussites et défis. Notre objectif est d'informer le lecteur sur l'utilité d'un outil basé sur l'État et à fournir qu'une discussion portant sur les leçons apprises afin d'aider les autres États à mettre en œuvre ce genre de programme.

Les Interactions Entre L'effet Stimulateur De L'hormone Folliculo - Stimulante Et L'effet Inhibiteur De L'oestrogène Sur Souris Folliculogenèse Primordiale

Biology of Reproduction. Jan, 2010  |  Pubmed ID: 19641178

La piscine de la murine follicule primordial se développe en grande partie dans les 3 jours après la naissance par l'intermédiaire de cellules germinales nichent ventilation et boîtier d'ovocytes dans les cellules pregranulosa. Les mécanismes qui déclenchent la formation de follicule primordial probable sont influencés par une transition de la maternelle au milieu hormonal foetale au moment de la naissance. Des niveaux élevés d'oestrogène maternel maintiennent intact dans les cellules germinales nid dans l'ovaire foetal et diminuent des œstrogènes après que la naissance est permissif de formation du follicule. Dans la présente étude, nous avons mesuré une augmentation dans le sérum néonatal hormone folliculo - stimulante (FSH), qui correspondait à l'estradiol chute (E(2)) niveaux durant la fenêtre critique de formation de follicule primordial (1-3 jours). Pour déterminer si les hormones foetales contribuent de manière active à la formation du follicule primordial, ovaires foetaux de souris (postcoitus 17,5 jours) ont été cultivées in vitro à deux concentrations d'e (censé refléter les niveaux foetus et maternels de E(2)) et de FSH pendant 6 jours. Des niveaux élevés de cellules germinales e (10(-6) M) inhibée nichent de ventilation, et cet effet a été significativement réduit lorsque ovaires foetaux sont cultivées dans la faible concentration d'e (10(-10) M). FSH a facilité le nid dans les cellules germinales ventilation et primordial follicule en formation, dans des conditions de culture e hautes et basses. E Low a été identifié comme étant le plus permissif pour les effets de la FSH sur la formation du follicule primordial en stimulant la régulation de Fshr et l'activine bêta A sous-unité (Inhba) expression, pregranulosa la prolifération cellulaire et la survie de l'ovocyte. La diminution d'e et de la présence de FSH après la naissance sont essentiels pour la formation du follicule primordial et l'expression des facteurs de transcription spécifiques ovocyte (Figla et Nobox) à cet exposition inappropriée de FSH ou e pendant la formation du follicule a entraîné folliculogenèse primordiale prématurée ou retardée. En conclusion, avec la baisse du niveau e après la naissance, FSH favorise la formation du follicule primordial chez les souris en stimulant les voies de signalisation locale activine et l'expression des facteurs de transcription spécifiques ovocyte.

Le Temps Est Maintenant D'une Nouvelle Approche De L'insuffisance Ovarienne Primaire

Fertility and Sterility. May, 2011  |  Pubmed ID: 20188353

Pour exprimer la nécessité d'une nouvelle approche pour une insuffisance ovarienne primaire. La condition, aussi appelée ménopause précoce ou insuffisance ovarienne prématurée, est définie par la présence des gonadotrophines ménopausiques niveau sérique en liaison avec les menstruations irrégulières dans les adolescentes ou des femmes de moins de 40 ans. Elle peut être iatrogène en rapport avec le traitement du cancer, ou peut-être survenir spontanément, soit seul, soit dans le cadre d'une multitude de syndromes rarissime. Dans un grand pourcentage de cas spontanés, aucun mécanisme pathogène ne peut être identifié.

Intégrant Le Soin Des Patients En Oncologie Jeune De Préservation De La Fertilité

Cancer. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 21235031

Le nombre de survivants du cancer continue d'augmenter, oncologues doivent faire face au défi de fournir le traitement du cancer aux patients qui mai 1 jour veulent avoir des enfants. Encore, les traitements du cancer gonadotoxiques peuvent compromettre leur fertilité future, temporairement ou définitivement. Il y a un moyen établi de la préservation de la fertilité avant le traitement du cancer ; plus précisément, cryoconservation de sperme pour les hommes et la cryoconservation de fertilisation et de l'embryon in vitro pour les femmes. Plusieurs techniques innovantes sont activement étudiées, y compris les ovocytes et cryoconservation du follicule ovarien, transplantation de tissu ovarien et la maturation du follicule in vitro, qui peut augmenter le nombre de choix de préservation de la fertilité des jeunes cancéreux. Préservation de la fertilité peut également exiger des modifications du traitement du cancer ; ainsi, souhaits des patients concernant leur fertilité future et des solutions de rechange préservation de la fertilité disponibles devraient être discutées avant l'initiation du traitement. Ce commentaire donne un aperçu de la gamme d'options de préservation de la fertilité actuellement disponibles et en cours d'élaboration, l'utilisation des discussions axées sur les cas pour illustrer les façons dont la fécondité préservation peut être incorporée dans soins oncologiques. On décrit des cas mettant en cause le cancer du sein, cancer du testicule et du cancer rectal pour illustrer les problèmes vécus par les patients masculins et féminins de la fertilité, ainsi que des exemples de stratégies pour la modification chirurgicale, médicale et radiothérapie pour épargner la fertilité. Les lignes directrices actuelles en médecine de l'oncologie et la reproduction sont également revus afin de souligner l'importance de communiquer les options de préservation de la fertilité aux jeunes patients atteints de cancer.

Conception Du Réseau Hydrogel En Utilisant Macromères Multifonctionnels Afin De Coordonner Les Maturation Des Tissus En Culture Follicule Ovarien

Biomaterials. Apr, 2011  |  Pubmed ID: 21247629

Hydrogels synthétiques avec des propriétés accordables lancent un appel pour la médecine régénérative. Une limitation critique dans la conception d&#39;hydrogel à une concentration faible teneur en solide est la formation de défauts, ce qui augmente les temps de gélification et de gonflement, et de réduire l&#39;élasticité. Ici, nous rapportons que trifonctionnels réticulation peptides appliqués à des hydrogels à 4 bras poly-(éthylène glycol) (PEG) a diminué l&#39;enflure et le temps de gélification par rapport à bi-fonctionnels réticulants. Contrairement à bi-fonctionnels des peptides, le troisième site de réticulation sur le peptide créé un point de ramification si un intramoléculaire cross-link formé, ce qui a empêché non-fonctionnels &quot;dangling-end&quot; dans le réseau d&#39;hydrogel et d&#39;améliorer le nombre de élastiquement actives des liens croisés. La formation améliorée réseau compatible souris follicule ovarien encapsulation et de la maturation in vitro. Les hydrogels avec bi-fonctionnels réticulants abouti à une déshydratation cellulaire, probablement due à l&#39;osmose au cours de la gélification prolongée. Pour réticulants trifonctionnels, les hydrogels supporté une expansion de 17 fois en volume du tissu pendant la culture, avec expansion dépend de la capacité du follicule de réarranger son micro, qui est commandé par la sensibilité du peptide de réticulation à l&#39;activité protéolytique de plasmine. La conception améliorée du réseau a permis la culture follicule ovarien dans un système entièrement synthétique, et peut faire progresser la technologie préservation de la fertilité pour les femmes face à l&#39;infertilité prématurée de thérapies anticancéreuses.

Altération De L'expression Des Gonades De Signalisation Des Facteurs Environnementaux Alligators Juvéniles Exposés Au Contaminant Superfamille Des TGF-β

The Journal of Steroid Biochemistry and Molecular Biology. Oct, 2011  |  Pubmed ID: 21251980

L'exposition aux contaminants environnementaux peut influer sur les stéroïdes gonadiques signalisation des milieux ; Toutefois, peu de recherches a enquêté sur la vulnérabilité des voies de signalisation non stéroïdiens dans les gonades. Ici, nous utilisons des alligators américains (Alligator mississippiensis) issues des œufs récoltés sur le terrain pour analyser gonadique niveaux de transcription des ARNm du gène activin-inhibin-follistatine expression réseau et croissance différenciation facteur 9. Les oeufs ont été prélevés de Woodruff Lake National Wildlife Refuge, un site avec une influence anthropique minimale et le Lac Apopka, un lac hautement contaminé adjacent à un ancien site de l'EPA Superfund. Les alligators de nouveau-nés ont été soulevées pour 13 mois dans des conditions contrôlées, limitant ainsi les différences d'origines embryonnaires. Nos données révèlent un dimorphisme sexuel expression de l'ARNm dans les gonades de 13 mois alligator similaires aux modèles établis chez les vertébrés avec détermination du sexe génétique. En outre, nous avons observé une relation entre le lac d'expression ARNm et l'origine de l'activine/inhibine sous-unités α et βB follistatine et croissance facteur de différenciation 9. Notre étude suggère qu'embryonnaire exposition aux contaminants environnementaux peut affecter les futurs modèles de signalisation non stéroïdiens dans les gonades d'une espèce de longue durée de vie.

Une Population De Cellules Stromales Enrichie En Cellules Macrophages Et Thèque Influe Sur La Croissance Et La Survie Des Immatures Follicules Murins in Vitro

Reproduction (Cambridge, England). Jun, 2011  |  Pubmed ID: 21389078

Innovations dans la culture in vitro follicule ovarien ont révolutionné le domaine de la préservation de la fertilité, mais la culture réussie d'isolé follicules secondaires primaires et petits reste difficile. Ici, les auteurs décrivent un système révisé de la culture 3D qui utilise une couche de cellules du stroma ovariens de conducteur à l'appui du développement de la follicule. Ce système de culture permet de grandement améliorées follicule secondaire primaire et du début de croissance et de survie. Les cellules stromales, comprenant surtout des cellules thécales et les macrophages ovariennes, récapitulent les conditions in vivo de ces petits follicules et accroître la production d'androgènes et cytokines manque de conditions de culture sans cellules stromales. Ces résultats démontrent que les petits follicules ont une dépendance spécifique au stade sur l'environnement de l'ovaire, et que la croissance et la survie peuvent être améliorés in vitro dans un milieu créé par co-culture prépubères cellulaire du stroma ovarien.

Structure De Betaglycan Zone Pellucide (ZP)-domaine C Donne Un Aperçu à La Polymérisation Des Protéines ZP-mediated Et Liaison De TGF-bêta

Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21402931

Le domaine de la zone pellucide (ZP) est une protéine bipartite élément structurel composée de régions ZP-N et C-ZP. Plus connu pour sa capacité de provoquer la polymérisation des protéines, beaucoup de protéines ZP polymérise et assemble dans longues fibrilles qui forment les matrices extracellulaires spécialisées. Autres protéines ZP (à savoir betaglycan et endogline) polymériser pas mais servent de corécepteurs important de membrane pour les ligands de la super-famille des transforming growth factor-β (TGF-β). Nous présentons ici la structure cristalline de 2.0 Å la résolution de la région de betaglycan ZP-C en combinaison avec une région en aval, connue comme le patch externe hydrophobe (EHP). Similaire à la région de ZP-N, la région de ZP-C adopte également un pli d'immunoglobuline-like, malgré le partage aucune homologie de séquence et possédant les disulfures différents. La région de EHP, qui était auparavant considérée comme extérieures à la région de la ZP, fait partie intégrante du domaine de la ZP-C et correspond au strand ZP-C G. Notre structure indique également que le clivage de la critique de la maturation des protéines de la ZP, un processus qui active des protéines naissantes de ZP pour la polymérisation, se produit dans le domaine de l'immunoglobuline à la boucle de FG. Nonpolymerizing ZP protéines telles que betaglycan et endogline ne contiennent pas de ce site de clivage. Enfin, notre structure donne à penser que la boucle AB et la poche surface convexe sont des régions importantes pour la liaison du ligand TGF-β.

Rôle De L'expression De PCSK5 Dans Le Développement Des Follicules Ovariens Chez La Souris : Identification De L'inhibine α - Et β-sous-unités Comme Substrats De Candidat

PloS One. 2011  |  Pubmed ID: 21408162

Inhibine et l'activine sont des glycoprotéines dimères essentiels appartenant à la superfamille des transforming growth factor-beta (TGFβ). Inhibine est un hétérodimère des sous-unités α et β, alors que l'activine est un homodimère de sous-unités β. Production d'inhibine est réglementée au cours du cycle de reproduction et exige le traitement de pro-ligands pour produire l'hormone mature. Furin est une subtilisine proprotéine convertase (proconvertase) qui active les protéines précurseurs de clivage dans les sites de base au cours de son transit par la voie de sécrétion et/ou à la surface cellulaire. Nous avons émis l'hypothèse que furin-comme proconvertases sont des régulateurs centraux d'inhibine α - et β-sous-unité traitement au sein de l'ovaire. Nous avons analysé l'expression de la furine proconvertases, PCSK5, PCSK6 et PCSK7 dans l'ovaire en développement de souris par RT-PCR quantitative en temps réel. Les données ont montré que les enzymes proconvertase sont temporellement exprimés dans les cellules ovariennes. Avec le passage de deux couches de follicule secondaire à pre-antral, seulement PCSK5 ARNm était significativement élevé. Sélectivement, activine A amélioré l'expression de l'ARNm de la PCSK5 et a diminué l'expression de furine et PCSK6 dans les follicules secondaires de deux couches. L'inhibition de l'activité enzymatique proconvertase par dec-RVKR-chlorométhylcétone (CMK), un inhibiteur compétitif puissant et hautement spécifique de subtilisine proconvertases, entravée de manière significative les deux maturation de sous-unité α - et β inhibine dans les cellules de la granulosa murine. La surexpression du PC5/6 dans les cellules déficientes furine a conduit à l'inhibine accrue α - et β (B)-maturation de la sous-unité. Nos données appuient le rôle de proconvertase PCSK5 dans le traitement des sous-unités de l'inhibine ovarienne au cours de la folliculogénèse et suggèrent que cette enzyme peut être un important régulateur de la biodisponibilité d'inhibine et activin.

Étincelles De Zinc Sont Déclenchées Par La Fertilisation Et Facilitent La Reprise Du Cycle Cellulaire Dans Les œufs Chez Les Mammifères

ACS Chemical Biology. Jul, 2011  |  Pubmed ID: 21526836

Dans les dernières heures de maturation, l'ovocyte de souris reprend plus de 20 milliards atomes de zinc et d'arrestations après la première division méiotique, jusqu'à ce que la fécondation ou l'intervention pharmacologique stimule la progression du cycle cellulaire vers un embryon de nouveau. À l'aide de sondes chimiques et physiques, nous montrons que la fertilisation de la maturité, œufs enrichis en zinc déclenche l'éjection du zinc dans le milieu extracellulaire dans une série d'événements coordonnés appelé étincelles de zinc. Ces événements immédiatement suivent la série bien établie des oscillations de calcium dans l'oeuf activé et sont évolutivement conservés dans plusieurs espèces de mammifères, y compris les rongeurs et les primates non humains. D'un point de vue fonctionnel, les étincelles de zinc véhiculent une diminution de la teneur en zinc intracellulaire qui est nécessaire à la progression continue de cycle cellulaire, comme des niveaux croissants de zinc dans les résultats de le œuf activés dans le rétablissement de l'arrêt du cycle cellulaire lors de la métaphase. Ainsi, l'oeuf chez les mammifères utilise un mécanisme interrupteur zinc dépendante pour basculer entre l'arrestation de la métaphase et reprise de la méiose des cellules au début du développement embryonnaire.

L&#39;expression Génique Dans Le Développement Des Follicules De L&#39;ovaire De Souris in Vivo Par Rapport Un Système De Culture in Vivo Alginate Ex

Reproduction (Cambridge, England). Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21610168

Les résultats de l&#39;ovaire follicule maturation d&#39;une interaction complexe du système endocrinien, paracrine et directs interactions cellule-cellule. Cette étude a comparé l&#39;expression dynamique de certains gènes clés du développement au cours folliculogenèse in vivo et au cours de la culture in vitro dans un système d&#39;hydrogel d&#39;alginate 3D. Profils d&#39;expression génique candidats ont été mesurées dans la souris à deux couches follicules secondaires, multi-couches follicules secondaires, et des complexes cumulus-ovocytes (COC). L&#39;expression de 20 gènes impliqués dans la communication du système endocrinien, la signalisation de croissance, et le développement des ovocytes a été étudiée par PCR en temps réel. Niveaux de produits de gènes ont été comparés entre i) les follicules de même stade et ii) COC proviennent, soit in vivo ou par culture in vitro. Pour follicules cultivées pendant 4 jours, le modèle d&#39;expression et le niveau d&#39;expression de 12 gènes étaient les mêmes in vivo et in vitro. Certains endocrinien (cytochrome P450, famille 19, subfamily A, polypeptide 1 (cyp19a1) et inhibine βA sous-unité (Inhba)) et la croissance des gènes liés à la protéine morphogénétique osseuse (15 (BMP15), kit ligand (KITL), et en transformant β facteur de croissance receptor 2 (TGFBR2)) étaient régulés à la baisse par rapport à des follicules in vivo. Pour COC obtenu à partir de follicules de culture, le système endocrinien des gènes liés à l&#39;inhibine α (sous-unité (INHA) et Inhba) a augmenté par rapport à l&#39;expression de leurs homologues in vivo, alors que la croissance des gènes liés à (BMP15, facteur de différenciation de croissance de 9, et un kit oncogène (Kit) ) et zona pellucida gènes ont diminué. Cependant, la plupart des gènes spécifiques des ovocytes (par exemple le facteur dans la lignée germinale α (Figla), déchiquetée 1 (JAG1), et Nlrp5 (Mater)) ont été exprimées in vitro au même niveau et avec le même schéma que in vivo dérivé follicules. Ces études démontrent les similitudes et les différences entre les in vivo et in vitro dans les follicules de culture, directeurs de la création d&#39;environnements qui optimisent le développement des follicules et la qualité des ovocytes.

Une Isoforme Smad3 Tronquée, Induite Par L'activine Agit Comme Un Répresseur Transcriptionnel D'expression FSHβ Dans L'hypophyse De La Souris

Molecular and Cellular Endocrinology. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21664424

Le récepteur-regulated protein Smad3 est un acteur clé dans la cascade de signalisation stimulée par la liaison de l'activine à son récepteur de surface cellulaire. Lors de la phosphorylation, Smad3 forme un hétérocomplexe avec Smad2 et Smad4, translocation vers le noyau et agit comme un co-activateur transcriptionnel. Nous avons identifié une isoforme unique de Smad3 qui s'exprime dans mature gonadotropes hypophysaires. 5' Course a révélé que cette isoforme Smad3 tronquée est transcrit à partir d'un site ATG au sein de l'exon 4 et se compose de 7 exons codant la moitié de la région et dans la région de MH2. Dans les cellules hypophysaires, l'isoforme Smad3 tronqué est phosphorylée par traitement activin, d'une manière qui était dans le temps distinct de la phosphorylation de Smad3 pleine longueur. Phosphorylation induite par l'activine Smad3 et l'isoforme Smad3 tronquée a été bloquée par la follistatine tant de précipitation induite par le siARN de Smad3. L'isoforme Smad3 tronqué antagonise l'activité médiée par Smad3, favorisant l'activine promoteur. Nous proposons que la gonadotrope hypophysaire contienne une boucle de rétroaction d'ultra-courtes, favorisant l'activine utilisant deux isoformes de Smad3, celui qui agit comme un agoniste (Smad3) et un autre qui agit comme un antagoniste intracrine (tronqué Smad3 isoforme) de réglementer la production de FSHβ.

Encapsulation De Fibrine Et De Livraison Vasculaire Facteur De Croissance Endothélial Favorise La Survie Du Greffon Ovarienne Chez Les Souris

Tissue Engineering. Part A. Dec, 2011  |  Pubmed ID: 21740332

La cryoconservation ovarienne avant la chimiothérapie et autogreffe de post-traitement peut restaurer la fertilité aux femmes ayant une insuffisance ovarienne prématurée. Bien que la majorité des follicules primordiaux survivent à la cryoconservation du cycle, la piscine folliculaire est réduite après la transplantation en raison de la mort ischémique. Par conséquent, nous avons conçu un système de biomatériau à base de promouvoir l&#39;angiogenèse dans un modèle murin de greffe de l&#39;ovaire. Pour imiter la situation clinique de la stérilité, une ovariectomie bilatérale a été réalisée 2 semaines avant la transplantation, au cours de laquelle les niveaux sériques de temps l&#39;hormone folliculo-stimulante ont atteint des niveaux de la ménopause. Avant la transplantation, vitrifiés / tissu ovarien décongelé de chiots C57BL/6J 12 jours d&#39;âge a été encapsulé dans la fibrine modifiée avec de l&#39;héparine-peptide de liaison de la propriété (RAP), l&#39;héparine, et chargé avec 0,5 ug de facteur de croissance endothélial vasculaire (VEGF). Le groupe transplanté avec la fibrine-RAP-VEGF avaient deux fois plus nombreux survivants follicules primordiaux et d&#39;un nombre accru de vaisseaux sanguins par rapport au témoin sans biomatériau. Tissu transplanté était viable et soutenue par une conception naturelle qui a conduit à vivre et sa progéniture en bonne santé. Le calendrier des naissances vivantes avec la livraison du VEGF a suggéré que les follicules primaires survécu transplantation, et a fourni les gamètes pour la première portée. Ainsi, la prestation du VEGF de la fibrine soutenu l&#39;intégration de la greffe avec l&#39;hôte, l&#39;angiogenèse promu, et la prise de greffe renforcée et la fonction du tissu.

Maladies Non Malins Et Traitements Associés à Une Insuffisance Ovarienne Primaire : Un Rôle élargi Pour La Préservation De La Fertilité

Journal of Women's Health (2002). Oct, 2011  |  Pubmed ID: 21827325

Les traitements du cancer peuvent nuire à la fertilité ; la littérature récente a mis l'accent sur les efforts de préservation de la fertilité pour cette population de patients. Il faut reconnaître, cependant, que plusieurs conditions médicales non malins et interventions thérapeutiques pourraient être de même dangereuses pour la fertilité. Certaines de ces maladies non malins et leurs traitements qui peuvent nuire à l'axe de reproduction sont les maladies gastro-intestinales, troubles rhumatologiques, conditions hématologiques non malins, troubles neurologiques, troubles rénaux, des conditions gynécologiques et maladies métaboliques. Leurs effets négatifs sur la fonction de reproduction sont maintenant seulement appréciées et comprennent l'altération de la fonction ovarienne, la fonction endocrine, ou fonction sexuelle et incapacité à mener une grossesse à terme. Les complications et les comorbidités associées à certaines maladies peuvent limiter le succès des options de conservation de fertilité établie. Les progrès récents dans les techniques de préservation de la fertilité peuvent fournir ces patients grâce aux nouvelles options pour la procréation. Ici, nous passons en revue plusieurs conditions qui menacent la fertilité et des traitements, décrire le courant établi et options de conservation de fertilité expérimentale et présentes trois initiatives qui peuvent aider à minimisent les effets négatifs de reproduction de ces pathologies et traitements en sensibilisant davantage les questions et les options: (1) sensibiliser davantage les praticiens quant aux conséquences de reproduction de certaines maladies et traitements, (2) faciliter l'aiguillage des patients vers des programmes d'épargne fertilité ou réparatriceet (3) fournir l'éducation des patients sur le risque d'infertilité au moment du diagnostic avant l'instauration du traitement.

Le Gynécologue a Un Rôle Unique En Matière De Oncofertility Aux Jeunes Cancéreux

US Obstetrics & Gynaecology. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 21927621

Face à un diagnostic de cancer à tout âge est dévastateur. Cependant, les jeunes cancéreux ont le fardeau supplémentaire que les traitements contre le cancer salvatrices, y compris la chirurgie, chimiothérapie et radiothérapie, peuvent compromettre leur fertilité future. La possibilité du dysfonctionnement reproductif par suite de traitements contre le cancer a un impact négatif sur la qualité de vie des survivantes du cancer. Le domaine de l'oncofertility, qui fusionne les spécialités cliniques d'oncologie et endocrinologie de la reproduction, a été développé pour explorer et développer des options de préservation de la fertilité et de mieux gérer le statut reproductif des cancéreux. Préservation de la fertilité pour les femmes s'est avéré pour être un défi particulier parce que les gamètes femelles matures sont rares et difficiles à acquérir. Le but de cet article est de fournir un aperçu global de l'incidence des traitements contre le cancer sur l'axe reproducteur femelle, le gynécologue délimiter les options de préservation fertilité diverses qui sont actuellement disponibles ou en cours d'élaboration pour les jeunes femmes et décrivent les mesures actuelles de la réserve ovarienne qui peut être utilisé de traitement pré- et postcancer1. Comme un fournisseur de soins de santé primaires, le gynécologue probablement interagit avec les patients dans tout le continuum des soins du cancer. Ainsi, le gynécologue est dans une position unique pour rejoindre l'équipe d'oncofertility en fournissant des jeunes cancéreux avec informations de conservation de fertilité à jour et des références à des spécialistes.

Création D'un Continuum De Soins : Intégration Des Obstétriciens Et Des Gynécologues Dans Le Soin Des Jeunes Cancéreux

Clinical Obstetrics and Gynecology. Dec, 2011  |  Pubmed ID: 22031251

Le traitement du cancer peut sauver la vie mais diminuent de façon importante potentiel reproducteur femelle. Cet examen donne un aperçu des effets délétères des traitements du cancer sur la fonction reproductrice, les options de conservation de fertilité actuellement disponibles pour les jeunes femmes et les résultats de la grossesse après le traitement du cancer. En outre, les considérations spéciales pour les femmes qui reçoivent un diagnostic de cancer pendant la grossesse sont discutées. Pour optimiser la continuité des soins pour le patient, nouveaux couloirs de communication entre obstétriciens, gynécologues et spécialistes en oncologie doivent être élaborés pour assurer les meilleurs résultats pour le patient, tant en termes de traitement du cancer et de la préservation de la fertilité.

Une Nouvelle Hypothèse Qui Concerne Le Développement Des Follicules De L&#39;ovaire: La Rigidité De L&#39;ovaire En Tant Que Régulateur De Sélection Et De La Santé

Journal of Assisted Reproduction and Genetics. Jan, 2011  |  Pubmed ID: 20872066

L&#39;ovaire chez les mammifères est constitué d&#39;un grand nombre de dormants follicules immatures, chacun contenant un seul ovocyte et situé sur la périphérie de l&#39;ovaire. Avec chaque cycle de reproduction, un groupe de follicules immatures est activés séquentiellement pour relancer la croissance, et les gonadotrophines pituitaires et des hormones stéroïdes ovariens et le peptide de coopérer pour assurer la croissance et le développement. Un seul follicule dominant qui se dégage finalement, l&#39;ovulation, et puis développantes pour permettre la sélection du prochain groupe de follicules. Bien que les hormones sont connues pour contrôler les étapes ultérieures de la folliculogenèse, peu est connu sur les voies qui activent individuelles immatures follicules primordiaux dans la piscine du follicule en dormance. Nous avançons une nouvelle hypothèse: que l&#39;activation du follicule dépend de l&#39;environnement physique de l&#39;ovaire, en plus de bien établies indices hormonaux. Cette nouvelle perspective sur la fonction ovarienne peut fournir de nouvelles avenues pour étudier la dynamique du follicule et identifier des cibles thérapeutiques pour traiter la dysfonction ovarienne.

Exigence De Zinc Au Cours De La Méiose I-la Méiose II Transition Dans Des Ovocytes De Souris Est Indépendante De La Voie De La MOS-MAPK

Biology of Reproduction. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21076080

Le zinc est essentiel pour de nombreux processus biologiques, y compris le bon fonctionnement des gamètes. Nous avons récemment rapporté que zinc niveaux augmenter de plus de 50 % au cours de la maturation des ovocytes et cette atténuation de la disponibilité de zinc pendant cette période pourrait être atteint en utilisant la membrane perméable heavy metal chélateur N, N, N', N'-tetrakis(2-pyridylmethyl) éthylènediamine (TPEN). Cette insuffisance de zinc conduit à la formation de grandes masses de polar, arrestation de métaphase II, à défaut et troubles de la mise en place de polarité corticale. Comme ces phénotypes ressemblent à ceux d'ovocytes null MOS, nous avons examiné l'incidence de l'insuffisance de zinc sur la voie de la MOS-MAPK. Les niveaux réduits de deux protéines de MOS et la phosphorylation de MAP2K1/2 sont observés dans les ovocytes de zinc insuffisantes ; Toutefois, ces différences apparaissent uniquement après la fin de la première division méiotique. En outre, l'activation de l'effecteur de la voie de MOS, MAPK3/1, n'est pas affectée par l'insuffisance de zinc, et niveaux réduits de MOS sont observés qu'avec la présence de TPEN après la première extrusion globule polaire. Ces données sont incompatibles avec l'hypothèse selon laquelle réduit MOS intervient dans le phénotype observé. Enfin, la surexpression de MOS sauver pas le phénotype d'ovocytes zinc-insuffisants, confirmant que les perturbations observées des anomalies de division et de la tige asymétriques ne peuvent être attribuées à MOS avec facultés affaiblies de signalisation. Zinc-insuffisante ovocytes n'augmentent pas de maturation, promotion de l'activité du facteur (MPF) suite à la première division méiotique, et augmenter l'activité MPF à travers l'expression d'imputrescible cyclin B1 partiellement sauve la capacité d'ovocytes zinc-insuffisants pour entrer la métaphase II. Bien que nous avons montré que le zinc a un nouveau rôle dans la méiose des cellules, il n'est pas médiée par la voie de la MOS-MAPK.

Les Résultats De L'enquête Pour La Préservation De L'étude Sur La Reproduction Adolescent (de Rechange): égalité Entre Les Sexes De Disparité Dans La Livraison Du Message De Préservation De La Fertilité Aux Adolescents Atteints De Cancer

Journal of Assisted Reproduction and Genetics. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21110080

Diminue de la capacité reproductrice est une conséquence dévastatrice des thérapies d'épargne vie de néoplasie de l'enfance. En 2006, l'American Society of Clinical Oncology (ASCO) publie des recommandations de préservation de la fertilité (ASCOR) soulignant l'importance de la discussion précoce et d'intervention pour les stratégies de préservation de la fertilité. À l'aide de l'enquête pour la préservation de REproduction Adolescent (rechange), nous avons cherché à déterminer les attitudes de préservation de la fertilité et des pratiques modèles post-ASCOR de spécialistes en oncologie pédiatrique à l'échelle nationale.

La Maturation Ovocytaire in Vitro Et De La Culture Folliculaire De L&#39;ovaire Préantraux Babouin Lutéale Phase Produire Des Ovocytes Matures

Biology of Reproduction. Apr, 2011  |  Pubmed ID: 21123815

Femmes atteintes de cancer qui cherchent préservation de la fertilité, mais ne peut pas subir une stimulation ovarienne et la préservation d&#39;embryons peut considérer 1) la récupération d&#39;ovocytes immatures et leur maturation in vitro (MIV) ou 2) la cryoconservation de tissu ovarien suivie d&#39;une greffe ou à la culture in vitro des follicules. IVM conventionnelle est effectuée pendant la phase folliculaire du cycle menstruel. Il existe des preuves limitées démontrant que ovocyte immature récupérées lors de la phase lutéale peut mûrir in vitro et être fécondé pour produire des embryons viables. Alors que dans la culture in vitro des follicules est couronnée de succès chez les rongeurs, son application dans les primates non humains a fait des progrès limités. L&#39;objectif de cette étude était d&#39;enquêter sur la compétence de immatures en phase lutéale ovocytes de babouin et de déterminer l&#39;effet de l&#39;hormone folliculostimulante (FSH) sur la culture babouin follicule préantral et la maturation des ovocytes in vitro. Les ovocytes de petits follicules antraux complexes cumulus-ovocytes (COC) avec des couches multiples cumulus (42%) étaient plus susceptibles de reprendre la méiose et le progrès à la métaphase II (MII) que les ovocytes avec une seule couche de cellules du cumulus ou moins (23% vs 3%, respectivement). Vingt-quatre pour cent des ovocytes matures ont été fécondés avec succès par injection intracytoplasmique d&#39;un spermatozoïde, et 25% d&#39;entre eux mis au point pour morula-embryons au stade. Follicules préantraux ont été encapsulés dans la fibrine alginate-Matrigel matrices et de culture au stade antral petite d&#39;une manière FSH-indépendante. Un impact négatif sur la santé FSH follicule en perturbant l&#39;intégrité de l&#39;ovocyte et les cellules de cumulus de contact. Follicules cultivées en l&#39;absence de la FSH produite ovocytes MII avec la structure de broche normale. En conclusion, le babouin lutéale phase COC et les ovocytes de follicules culture préantraux peut être mûri in vitro. La compétence des ovocytes méiotique était corrélée positivement avec le nombre de couches de cellules du cumulus. Cette étude précise les paramètres du système de culture folliculaire chez les primates et fournit des données fondamentales pour le développement clinique futur comme une option préservation de la fertilité pour les femmes atteintes d&#39;un cancer.

Amélioration De La Fertilité Préservation Soins Pour Les Patients De Sexe Masculin Atteints De Cancer Après La Mise En Place Du Programme Officiel D'oncofertility

The Journal of Urology. Mar, 2012  |  Pubmed ID: 22264454

Survie jusqu'à l'âge de reproduction chez les hommes atteints de cancer a augmenté régulièrement et encore le traitement du cancer et le cancer lui-même peuvent porter le risque d'infertilité. Depuis 2006, nous avons utilisé un programme de préservation de fertilité formalisée avec soin la fertilité accélérée dans notre établissement. Nous avons évalué l'impact de ce programme en comparant la fréquence des caractéristiques de cryoconservation et patient de sperme avant et après sa mise en œuvre.

Inhibine Sous-unité α Aminée Interagit Avec L'activine Type IB à Perturber L'activine Signalisation De Récepteur

The Journal of Biological Chemistry. Jan, 2012  |  Pubmed ID: 22267736

Inhibine est une hormone peptidique de hétérodimère produite dans l'ovaire qui antagonise l'activine de signalisation et de la synthèse de la FSH dans l'hypophyse. La sous-unité β inhibine interagit avec le récepteur activine type II (ActRII) d'antagoniser fonctionnellement activin. Le domaine mature de la sous-unité α d'inhibine (N-terminal) a surgi relativement tôt au cours de l'évolution de l'hormone, et fonction d'inhibine est diminuée par un anticorps dirigé contre la région d'extension de N-terminale de sous-unité α ou par suppression de la région N-terminale. Nous avons émis l'hypothèse que la région d'extension N-terminale sous-unité α interagit avec le type de l'activine j'ai récepteur (ALK4) d'antagoniser l'activine signalisation dans l'hypophyse. Homme ou poulet gratuite sous-unité α inhibée l'activine signalisation dans un gonadotrope hypophysaire dérivé lignée cellulaire (LβT2) de manière dose-dépendante, contrairement à un mutant de délétion d'extension N-terminale. Un peptide N-terminal de sous-unité α, mais pas un peptide de contrôle, a pu inhiber l'activine A signalisation et diminuer la synthèse de FSH stimulée par l'activine. Biotinylé inhibine A, mais pas l'activine A, lié ALK4. Soluble bioneutralized ALK4-DCE humaine libre sous-unité α dans les cellules LβT2, mais n'a pas affecté l'activine A fonction. Liaison compétitive ELISA avec des mutants N-terminale et un peptide de région N-terminale a confirmé que cette région est essentielle pour une interaction directe avec le ALK4 de la sous-unité α. Ces données élargir notre compréhension de comment endocrinien inhibine réalise antagonisme puissant d'action locale, constitutive de l'activine dans l'hypophyse, grâce à un mécanisme combiné de liaison compétitive de ActRII et de ALK4 de chaque sous-unité de l'hétérodimère inhibine, conjointement avec le corécepteur betaglycan, afin de bloquer la liaison récepteur-ligand activin, complexes d'assemblage et de signalisation en aval.

Un Mécanisme Dépendant Du Zinc Régule Méiotique Progression Dans Les Ovocytes Chez Les Mammifères

Biology of Reproduction. Feb, 2012  |  Pubmed ID: 22302686

Une coordination précise de la progression de la méiose est un facteur déterminant de la capacité d'un ovule à être fécondé avec succès, et zinc a émergé comme un élément régulateur clé dans ce processus. Une manifestation précoce d'un rôle réglementaire pour ce métal de transition est l'augmentation significative en zinc intracellulaire total : cette accumulation est essentielle pour la progression méiotique au-delà de télophase j'ai et la mise en place d'arrêt méiotique lors de la métaphase II. Le développement subséquent, fertilisation, induit une expulsion rapide du zinc labile qui est un événement de marque distinctive en reprise méiotique. Ici, nous montrons que les flux de zinc fonctionnent en partie en modifiant l'activité du facteur cytostatique (CSF), l'activité cellulaire requis pour la création et l'entretien de métaphase arrestation II dans l'ovule mature, non fécondé. Nous proposons un modèle dans lequel le zinc exerce règlement concentration-dépendante de la méiose grâce au volet de CSF EMI2, une protéine liant le zinc. Ensemble, les données appuient la conclusion que le zinc lui-même, grâce à son interaction avec EMI2, est un élément central de la peste porcine classique.