Alto Impatto Di Un'analisi Di Polimorfismo Espanso Restrizione Lunghezza Frammento Sulla Rilevazione Di Resistenti Agli Ganciclovir UL97 Mutanti Di Citomegalovirus Umano

Antimicrobial Agents and Chemotherapy. Jan, 2003  |  Pubmed ID: 12499235

Malattia Da Citomegalovirus Resistenti Al Ganciclovir Dopo Trapianto Di Cellule Staminali Allogeniche: Insidie Della Diagnosi Fenotipica Di Selezione in Vitro Di Un Ceppo Mutante UL97

The Journal of Infectious Diseases. Jan, 2003  |  Pubmed ID: 12508158

Un corso di 9 mesi miglioramenti di una cellule staminali allogeniche transplant recipient (citomegalovirus umano [HCMV] serostatus, donatore positivo/destinatario negativo), in cui viene presentato il ganciclovir (GCV) resistenza sviluppata (UL97 mutazioni M460V, L595S e C603W) il giorno 164 dopo trapianto e che hanno sviluppato retinite HCMV ed encefalite fatale di HCMV. Ceppi virali isolati da colture secondarie sono stati analizzati da analisi di restrizione UL97 e sequenziamento e sono stati confrontati con primari estratti DNA degli esemplari stessi, che ha portato in prova molecolare un'iniziale HCMV ceppo-specifici in vitro selezione del ceppo mutante in vivo da non dominante UL97 L595S-C603 da 3 varianti virali presentano in vivo. Inoltre, è stato trovato compartimentazione del virus presente nel sangue e liquido cerebrospinale. L'influenza del carico di virus velocemente aumentante al plasma (a > 10 copie/mL) e la somministrazione orale di GCV l'emergere della resistenza GCV è mostrata. Queste scoperte hanno forti implicazioni per la diagnosi di resistenza ai farmaci HCMV.

L'influenza Di HCMV UL97 Misti Wildtype E Mutante Ceppi Sulla Suscettibilità Di Ganciclovir in Un Dosaggio Di Riduzione Di Placca Associato Cell

Journal of Clinical Virology : the Official Publication of the Pan American Society for Clinical Virology. May, 2004  |  Pubmed ID: 15072754

Ganciclovir (GCV) la resistenza è un problema emergente dopo trapianto d'organo. Un'analisi di restrizione frammento lunghezza polimorfismo (RFLP) è un metodo conveniente e rapido per scoprire mutazioni di resistenza noti all'interno del UL97 gene (fosfotransferasi) per la determinazione della resistenza GCV. Test di resistenza fenotipica rimane importante per l'identificazione dei ceppi citomegalovirus umano (HCMV) possibilmente harboring mutazioni romanzo e anche per la determinazione della resistenza foscarnet e cidofovir.

Gestione Della Malattia Polmonare Ostruttiva Cronica

The New England Journal of Medicine. Sep, 2004  |  Pubmed ID: 15459312

Valutazione Sistematica Di Un Modello Di Romanzo Per Precondizionamento Ischemico Cardiaco Nei Topi

American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 16766632

Cardioprotezione da precondizionamento ischemico (IP) rimane un'area di intensa ricerca. Per chiarire ulteriormente le sue basi molecolari, l'uso di topi transgenici sembra critica. A causa di difficoltà tecniche associate esecuzione IP cardiaca nei topi, abbiamo sviluppato un modello in situ per cardiaco IP utilizzando un sistema di sospensione-peso per occlusione dell'arteria coronaria. Questa tecnica ha il grande vantaggio di eliminare la necessità di intermittenza occludendo l'arteria coronaria con una sutura annodata. Per valutare sistematicamente in questo modello, abbiamo dimostrato prima correlazione di ischemia volte (10-60 min) con dimensioni di infarto [3.5 + /-1.3 a 42 + 5,2% dell'area a rischio (AAR), Evan s blu/triphenyltetrazolium cloruro colorazione]. IP (4 x 5 min) e ischemia fredda (27 gradi C) ridotto di infarct 69 + 6,7% e 84 + 4,2%, rispettivamente (n = 6, P < 0,01). Al contrario, un numero inferiore di IP cicli non alterava di infarct. Tuttavia, dimensioni infarto erano distintamente differenti nei topi da diversi background genetico. Oltre alla colorazione infarct, abbiamo testato la troponina cardiaca I (n) come marker di infarto del miocardio in questo modello. Infatti, i livelli plasmatici di n erano significativamente inferiori nei topi trattati con IP e strettamente correlato con dimensioni di infarto (R(2) = 0,8). Per dimostrare transcriptional conseguenze cardiache IP, abbiamo isolato RNA totale da AAR e ha mostrato la repressione dei trasportatori nucleoside equilibrative 1-4 di IP in questo modello. Presi insieme, questo studio dimostra protezione cardiaca da IP, riducendo così al minimo la variabilità associata con modelli basati sul nodo dell'occlusione coronarica e infarto altamente riproducibile dimensioni. Ulteriori studi su IP cardiaci utilizzando topi transgenici possono considerare questa tecnica.

Interazioni Di Metabolismo E Cellula-cellula Di Nucleotidi

Methods in Molecular Biology (Clifton, N.J.). 2006  |  Pubmed ID: 16799190

Interazioni tra l'endotelio vascolare e leucociti polimorfonucleati (PMN) sono centrale per l'emigrazione di PMN in tessuti infiammati e percorsi diafonia neutrofili-endoteliali che modulano le risposte infiammatorie e funzione barriera vascolare. Per esempio, durante gli episodi di infiammazione, la migrazione transendoteliale (TEM) di PMN potenzialmente disturba barriera vascolare e dà luogo a stravaso fluido intravascolare ed edema. Tuttavia, a causa della stretta relazione speciale tra PMN e l'endotelio vascolare, TEM crea una situazione ideale per diafonia neutrofili-endoteliale. Mentre indaga su meccanismi innati per smorzare la perdita di liquidi intravascolare ed edema che si verificano durante il TEM, abbiamo osservato che pertanto rilascia nucleotidi adenina dopo l'attivazione (trifosfato di adenosina [ATP] e adenosina monofosfato [AMP]). ATP e AMP sono metabolizzati dagli enzimi di superficie della cellula endoteliali, ecto-apyrase (CD39, metabolizza ATP ad AMP) e la 5'--ecto nucleotidasi (CD73, metabolizza AMP di adenosina). Adenosina generato in questo modo può attivare i recettori dell'adenosina endoteliale, che conduce ad un aumento intracellulare di AMP ciclico e una chiusura delle giunzioni endoteliali, promuovendo così la funzione di barriera vascolare. Questo percorso di diafonia fornisce un meccanismo endogeno per smorzare la sindrome vascolare perdita durante l'interazione endotelio neutrofili. In altre parole, durante il TEM, neutrofili chiudere la porta dietro di loro.

Rilascio Di ATP Dai Neutrofili Attivati Si Verifica Tramite Connessina 43 E Modula La Funzione Di Adenosina-dipendente Delle Cellule Endoteliali

Circulation Research. Nov, 2006  |  Pubmed ID: 17038639

ATP extracellulare liberata durante l'ipossia e l'infiammazione sia possibile segnalare direttamente sui recettori purinergici o possono attivare i recettori dell'adenosina dopo la phosphohydrolysis di adenosina. Data l'associazione dei leucociti polimorfonucleati (PMN) con adenina nucleotide/nucleosidici segnalazione nel milieu infiammatoria, abbiamo ipotizzato che pertanto è una fonte di ATP extracellulare. Gli studi iniziali utilizzando high-performance liquid cromatografia luminometric ATP rilevamento saggi e ha rivelato che pertanto rilascia ATP attraverso percorsi di attivazione-dipendente. Modelli in vitro della funzione barriera endoteliale e adesione endoteliale/neutrofili indicato che ATP derivata da PMN segnali attraverso i recettori dell'adenosina endoteliali, quindi promuovere la funzione di barriera endoteliale e attenuanti adesione PMN/endoteliale. Metabolismo dell'ATP extracellulare di adenosina necessaria PMN, e studi di affrontare questi passaggi metabolici ha rivelato che i PMN esprimono superficie ecto-apyrase (CD39). Infatti, studi con PMN derivano da cd39(-/-) topi hanno mostrati livelli significativamente aumentati di ATP extracellulare e mancanza di dissipazione ATP da loro supernatanti. Dopo aver escluso il rilascio di ATP litico, abbiamo usato strategie farmacologiche per rivelare un potenziale meccanismo coinvolto nel rilascio di ATP PMN-dipendente (per es., verapamil, dipiridamolo, GBF1 A, acido glicirretico-18-alfa, peptidi connessina-mimetiche). Questi studi hanno dimostrato che il rilascio di ATP PMN avviene attraverso connessina 43 (Cx43) hemichannels in modo A-dipendente della proteina/fosfatasi. Risultati in PMN umani sono stati confermati in PMN derivato da topi Cx43(-/-) indotti, per cui attivate PMN rilascio inferiore al 15% di ATP rispetto alleverei controlla, mentre Cx43 eterozigote PMN sono stati intermedi nelle loro capacità per il rilascio di ATP (P < 0,01). Presi insieme, i nostri risultati identificano un ruolo precedentemente incompreso per Cx43 attivato versione PMN ATP, ivi contribuendo al controllo metabolico innato del milieu infiammatoria.

Ruoli Fisiologici Per Ecto-5'-nucleotidasi (CD73)

Purinergic Signalling. Jun, 2006  |  Pubmed ID: 18404475

Nucleotidi e nucleosidi influenzano quasi ogni aspetto della fisiologia e fisiopatologia. Nucleotidi extracellulari sono metabolizzati attraverso phosphohydrolysis regolamentati da una serie di ecto-nucleotidases. La formazione di adenosina extracellulare da adenosina 5'-monofosfato avviene principalmente tramite ecto-5'-nucleotidasi (CD73), una proteina di membrana fosfatidilinositolo legato glicosil presenti sulla superficie di una varietà di tipi di cellule. Recenti studi in vivo, implicando CD73 in un certo numero di meccanismi protettivi dei tessuti hanno fornito nuovo insight nel suo regolamento e funzione e hanno generato un notevole interesse. Qui, si rassegna di contributi di CD73 alla cellula e tessuto stress risposte, con una particolare enfasi sulle risposte fisiologiche a regolamentato CD73 espressione e funzione, come pure nuove scoperte che utilizzano animali Cd73-carenti.

Ruolo Protettivo Di Ecto-5'-nucleotidasi (CD73) Nell'ischemia Renale

Journal of the American Society of Nephrology : JASN. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17267736

Insufficienza renale acuta da ischemia contribuisce significativamente alla mortalità e morbilità cardiovascolare. Adenosina extracellulare è stato implicato come un anti-infiammatorio metabolita particolarmente durante condizioni di disponibilità limitata di ossigeno (ad es., ischemia). Perché ecto-5'-nucleotidasi (CD73) sono il tasso di limitazione per la generazione di adenosina extracellulare, questo studio ha esaminato il contributo della produzione di adenosina CD73-dipendente al precondizionamento ischemico (IP) dei reni. Dopo l'iniziale osservazione che induce murino CD73 trascrizione, proteine e la funzione renale IP, suo ruolo nella protezione IP-mediato renale è stata studiata. In realtà, aumento della concentrazione di adenosina renale con IP vengono attenuati in topi cd73(-/-). Inoltre, l'inibizione farmacologica del CD73 o la delezione di un gene bersaglio abolito protezione renale da IP come misurato da studi di sdoganamento, plasma elettroliti e distruzione renale tubulare e ricostituzione dei topi cd73(-/-) con solubile 5'-nucleotidasi portato in restauro completo di protezione renale da IP. Infine, danno renale dopo ischemia è stata attenuata dal trattamento intraperitoneale di topi wild-type con solubile 5'-nucleotidasi ad un grado simile come da IP. Presi insieme, questi dati rivelano che cosa si crede per essere un ruolo precedentemente non riconosciuto di CD73 nella protezione renale da ischemia e suggerire il trattamento con solubile 5'-nucleotidasi come un nuovo approccio terapeutico nel trattamento di malattie renali che sono precipitati dalla limitata disponibilità di ossigeno.

Upregulation Di Canale Di Acqua Acquaporina-4 Come Causa Potenziale Di Cella Postischemic Gonfiore in Un Modello Murino Di Infarto Del Miocardio

Cardiology. 2007  |  Pubmed ID: 17284903

L'ischemia del miocardio è generalmente accettato di essere caratterizzata da gonfiore dei miociti con conseguente disfunzione cardiaca. Tuttavia, i dati sono limitati riguardanti i meccanismi molecolari di flussi d'acqua veloce attraverso le membrane delle cellule nel cuore ischemico. Poiché Acquaporina-4 (AQP4) è un canale d'acqua con una capacità di flusso d'acqua enorme, abbiamo studiato in questo studio, se questa proteina canale d'acqua potrebbe giocare un ruolo nella myocyte gonfiore nell'infarto del miocardio. Per questo scopo, abbiamo studiato l'espressione del mRNA AQP4 in punti differenti di tempo di ischemia in un modello murino di infarto del miocardio. Abbiamo osservato una correlazione significativa tra la sovraregolazione di AQP4 mRNA e la dimensione dell'infarto. Esperimenti di ibridazione in situ ha mostrato in modo paragonabile più elevati livelli di espressione di mRNA AQP4 in miociti ischemici, e anti-AQP4 immunoreattività è stato trovato per essere più forte nel sarcolemma dei miociti ischemici. I nostri risultati implicano un ruolo della AQP4 nella formazione di edema del miocardio e questo potrebbe essere importante per future strategie di prevenzione e trattamento di questa situazione desolante al fine di minimizzare la disfunzione cardiaca e mortalità in una varietà di malattie cardiache in quale cella gonfiore è prevalente.

Cardioprotezione Da Ecto-5'-nucleotidasi (CD73) E Recettori Dell'adenosina A2B

Circulation. Mar, 2007  |  Pubmed ID: 17353435

Ecto-5' generazione dipendenti adenosina - nucleotidasi (CD73) - è stato implicato nella protezione del tessuto durante la lesione acuta. Una volta generato, l'adenosina può attivare recettori di superficie cellulare dell'adenosina (A1 AR, AR A2A, A2B AR, AR A3). Nel presente studio, definiamo il contributo dell'adenosina di cardioprotezione da precondizionamento ischemico.

Contributo Di E-NTPDase1 (CD39) a Protezione Renale Da Danno Da Ischemia-riperfusione

FASEB Journal : Official Publication of the Federation of American Societies for Experimental Biology. Sep, 2007  |  Pubmed ID: 17442731

Studi precedenti hanno mostrato maggiore nucleotidi extracellulari durante l'ischemia-reperfusion renale. Mentre i nucleotidi rappresentano la fonte principale per l'adenosina extracellulare e adenosina segnalazione contribuisce alla protezione renale da ischemia, abbiamo ipotizzato un ruolo per ecto-nucleoside-trifosfato-diphosphohydrolases (E NTPDases) in protezione renale. Abbiamo utilizzato un modello murino di ischemia-reperfusion e precondizionamento in situ-ischemica (IP) tramite un pensile peso sistema per l'occlusione dell'arteria renale atraumatica. Gli studi iniziali con un inibitore aspecifico di E-NTPDases (POM-1) ha rivelato l'inibizione della protezione renale da IP. Abbiamo perseguito quindi risposte di transcriptional di E-NTPDases (E-NTPDase1-3 e 8) per IP renale e trovato una robusta e selettiva induzione della trascrizione E-NTPDase1/CD39 e proteine. Inoltre, basata su studi di sdoganamento, plasma elettroliti e istologia renale tubulare, protezione IP fu abolita nei topi gene targeting per cd39 mentre adenosina renale maggiore contenuto con IP è stato attenuato. Inoltre, somministrazione di apyrase ricostituito protezione renale da IP in cd39-/-mice. Infine, apyrase il trattamento dei topi wild-type ha avuto adenosina renale maggiore concentrazione e un grado simile di protezione renale da ischemia come trattamento IP. Presi insieme, questi dati identificano phosphohydrolysis nucleotide CD39-dipendente in protezione renale. Inoltre, gli studi presenti suggeriscono il trattamento apyrase come un romanzo approccio farmacologico per patologie renali precipitato dalla disponibilità di ossigeno limitato.

Identificazione Del Ectonucleotidases CD39 E CD73 in Protezione Innata Durante Il Danno Polmonare Acuto

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). Jun, 2007  |  Pubmed ID: 17548651

Danno polmonare acuto (ALI), come quello che si verifica con ventilazione meccanica, contribuisce alla morbilità e mortalità di malattie gravi. Tuttavia, in molti casi, ALI si risolve spontaneamente attraverso meccanismi sconosciuti. Pertanto, abbiamo ipotizzato la presenza di percorsi adattativi innate per proteggere i polmoni durante la ventilazione meccanica. In questo studio, abbiamo usato il danno polmonare ventilatore-indotto come un modello per identificare meccanismi endogeni di protezione del polmone. Iniziali studi in vitro hanno rivelato che supernatanti da lesioni indotte dal tratto contenevano un fattore stabile che diminuita perdita endoteliale. Questo fattore è stato successivamente identificato come l'adenosina. Ulteriori studi in vivo hanno rivelato importanti aumenti nei livelli di adenosina polmonare con ventilazione meccanica. Perché ectoapyrase (CD39) ed ecto-5'-nucleotidasi (CD73) sono rate limiting per la generazione di adenosina extracellulare, abbiamo esaminato il loro contributo alle ALI. Infatti, sia polmonare CD39 e CD73 sono indotte dalla ventilazione meccanica. Inoltre, abbiamo osservato aumenti di pressione - e tempo-dipendente in edema polmonare e infiammazione in topi cd39(-/-) ventilato. Allo stesso modo, l'inibizione farmacologica o delezione di un gene bersaglio di cd73 è stato associato con severità di sintomo maggiore di ALI ventilatore-indotto. Ricostituzione dei topi cd39(-/-) o cd73(-/-) con apyrase solubile o 5'-nucleotidasi, rispettivamente, invertito tali aumenti. Inoltre, ALI è stato notevolmente attenuato e migliorato la sopravvivenza dopo trattamento i.p. di topi wild-type con apyrase solubile o 5'-nucleotidasi. Presi insieme, questi dati rivelano un ruolo precedentemente non riconosciuto per CD39 e CD73 nella protezione del polmone e suggeriscono il trattamento con loro composti solubili come una strategia terapeutica per noninfectious ALI.

Mancanza Di Effetto Della Generazione Di Adenosina Extracellulare E Segnalazione Sulla Secrezione Di Eritropoietina Renale Durante L'ipossia

American Journal of Physiology. Renal Physiology. Nov, 2007  |  Pubmed ID: 17855480

Precedenti studi hanno prodotto risultati contrastanti per quanto riguarda se generazione adenosina extracellulare e segnalazione contribuisce all'ipossia-indotto aumenti nella secrezione renale eritropoietina (EPO). In questo studio, abbiamo combinato farmacologico e approcci genetici per delucidare un potenziale contributo dell'adenosina extracellulare di EPO renale rilasciare nei topi. Per stimolare la secrezione di EPO, abbiamo usato esposizione murino monossido di carbonio (400 e 750 parti per milione CO, h 4), ipossia ambient (8% di ossigeno, 4 h) o arteriosa hemodilution. Perché l'ecto-5-nucleotidasi (CD73, conversione di AMP adenosina) sono considerato il pacemaker della generazione di adenosina extracellulare, abbiamo testato l'effetto di bloccare la generazione di adenosina extracellulare con le specifica CD73-inibitore adenosina 5'-(alpha,beta-methylene) difosfato (APCP) o dall'eliminazione di gene targeting di cd73. Questi studi hanno mostrato che APCP-trattamento né eliminazione mirata di cd73 ha portato a cambiamenti di stimolata EPO mRNA o siero livelli, anche se gli aumenti dei livelli di adenosina nel rene dopo esposizione CO sono stati attenuati nei topi con trattamento APCP o nei topi cd73(-/-). Inoltre, studi farmacologici, utilizzando specifici inibitori dei recettori dell'adenosina individuali (A1 AR, DPCPX; UNA AR 2A, DMPX; UNA AR 2B, PSB 1115; A3AR, MRS 1191) ha mostrato alcun effetto sulla stimolata aumenti dei livelli di mRNA o siero EPO. Infine, stimolata secrezione di EPO non è stata attenuata nel gene targeting topi privi A1A (- / -, A3AR, A2BAR(-/-) o A2A AR- / -- / -. Insieme, questi studi si combinano genetica e farmacologica prove in vivo che aumenta la secrezione di EPO durante la disponibilità di ossigeno limitato non sono interessati dalla generazione di adenosina extracellulare o di segnalazione.

Trifosfato Di CD39/ectonucleoside Diphosphohydrolase 1 Assicura La Protezione Del Miocardio Durante Lesioni Cardiache Ischemia/reperfusion

Circulation. Oct, 2007  |  Pubmed ID: 17909107

Adenosina extracellulare, generato da nucleotidi extracellulari via ectonucleotidases, si lega ai recettori specifici e fornisce cardioprotezione da ischemia e riperfusione. Nel presente studio, abbiamo studiato ecto-enzimatico ATP/ADP-phosphohydrolysis da selezionare membri della famiglia diphosphohydrolase (E-NTPDase) ectonucleoside trifosfato durante l'ischemia del miocardio.

Utilizzo Di Un Sistema Di Sospensione-peso Per L'occlusione Dell'arteria Renale Isolata Durante Il Precondizionamento Ischemico Nei Topi

American Journal of Physiology. Renal Physiology. Jan, 2007  |  Pubmed ID: 16912063

Insufficienza renale da ischemia contribuisce alla morbilità e mortalità. Precondizionamento ischemico (IP) rappresenta una strategia potente per la protezione di rene, e i recenti progressi nei topi transgenici possono aiutare a chiarire i meccanismi molecolari. Tuttavia, IP murino è tecnicamente impegnativo e dettagli sperimentali influenzano significativamente i risultati. Così abbiamo sviluppato un modello di romanzo per renale IP utilizzando un sistema di sospensione-peso per l'occlusione dell'arteria renale isolata. A differenza dei modelli precedenti, questa tecnica elimina la necessità per il bloccaggio del peduncolo vascolare (arteria/vena). Infatti, la valutazione del danno renale dopo diversi periodi di tempo di ischemia (10-60 min) ha rivelato altamente riproducibili aumenti nei livelli plasmatici di creatinina e potassio, mentre la clearance della creatinina, flusso urinario ed escrezione di potassio sodio erano significativamente attenuati. Utilizzando diversi numeri di cicli di IP, abbiamo trovato la massima protezione con quattro cicli di 4 min di ischemia-reperfusion. Al contrario, è stata osservata alcuna significativa protezione renale con IP del peduncolo vascolare. Per valutare le risposte di transcriptional in questo modello, abbiamo isolato RNA da tempo reni e trovato dipendente dal tempo induzione di eritropoietina livelli di mRNA e plasma con IP. Presi insieme, questo modello fornisce altamente riproducibile danno renale e protezione da IP, riducendo la variabilità associata precedenti tecniche basate sul bloccaggio del peduncolo renale. Ulteriori studi su ischemia renale/IP nei topi possono considerare questa tecnica.

Recettore Dell'adenosina A2b Smorza Perdita Vascolare Indotta Da Ipossia

Blood. Feb, 2008  |  Pubmed ID: 18056839

Adenosina extracellulare è stato implicato nell'adattamento all'ipossia e studi precedenti hanno dimostrato un ruolo centrale nelle risposte vascolari. Qui, abbiamo esaminato il contributo dei recettori dell'adenosina individuali (ARs: A1AR/A2AAR/A2BAR/A3AR) a perdita vascolare indotta da ipossia. Studi analisi iniziali ha rivelato che siRNA-mediata repressione della A2BAR selettivamente aumentata perdita endoteliale in risposta all'ipossia in vitro. In parallelo, permeabilità vascolare è stata aumentata significativamente negli organi vascolari di A2BAR(-/-)-topi sottoposti ad ipossia ambient (8% di ossigeno, 4 ore; ad esempio, del polmone: 2.1 + aumento 0.12-fold). Al contrario, perdita vascolare indotta da ipossia non era accentuato in A1AR(-/-)-, A2AAR(-/-)-o A3AR(-/-)-deficient topi, suggerendo un certo grado di specificità per il A2BAR. Ulteriori studi in topi wild type ha rivelato che l'antagonista selettivo A2BAR PSB1115 provocato profonda aumenta in perdite vascolari associate all'ipossia mentre A2BAR agonista (BAY60-6583 [2-[6-amino-3,5-dicyano-4-[4-(cyclopropylmethoxy)-. fenil] pyridin-2-ylsulfanyl] acetammide]) il trattamento è stato associato con quasi completa inversione del leakage vascolare indotta da ipossia (per es., polmone: 2.0 + 0.21-fold riduzione). Studi nei topi A2BAR chimerici del midollo osseo ha suggerito che un ruolo predominante della A2BARs vascolare in questa risposta, mentre sono state associate all'ipossia aumenti i neutrofili tessuto, almeno in parte, mediata da cellule ematopoietiche che esprimono A2BAR. Presi insieme, questi studi forniscono la prova genetica e farmacologica per vascolare A2BAR segnalazione come punto centrale di controllo di perdite vascolari associate all'ipossia.

Impatto Dei Tempi Di Ischemia E Riperfusione Sul Formato Di Infarto Del Miocardio Nel Topo in Vivo

Experimental Biology and Medicine (Maywood, N.J.). Jan, 2008  |  Pubmed ID: 18156310

Il modello murino in vivo di infarto miocardico acuto è sempre più utilizzato per studiare le vie di trasduzione del segnale. Tuttavia, raramente pubblicati dettagli metodologici di questo modello e le durate di ischemia e riperfusione (REP) tempo variano notevolmente tra i diversi laboratori. In questo studio, abbiamo testato l'ipotesi che di infarct (IS) è dipendente sia durata dell'ischemia e tempo di REP. Pentobarbital anestetizzato topi C57BL/6 maschi erano intubati, ventilati meccanicamente e strumentazione per il monitoraggio continuo della pressione arteriosa media e frequenza cardiaca. Dopo toracotomia quarto sinistro, arteria coronaria discendente anteriore sinistra era legato. Topi sono stati assegnati in modo casuale a ricevere 30, 45, o 60 minuti di occlusione dell'arteria coronaria (CAO) e 120, 180 o 240 minuti di REP, rispettivamente. È stato determinato con cloruro di triphenyltetrazolium e la zona a rischio (AAR) con blu di Evans, rispettivamente. Emodinamica e l'analisi di gas del sangue arterioso non erano differenti tra i gruppi. Prolungamento del CAO da 30 a 60 minuti in modo significativo (* P < 0.05) IS è aumentato dal 18% + /-5% al 69% + /-3% *, da 20% + /-2% al 69% + /-6% e dal 42% + /-10% a 75% + /-2% * dopo 120, 180 e 240 minuti REP, rispettivamente. È, inoltre, è stato aumentato dal 18% + /-5% al 42% + /-10% * (min. 30 CAO) e dal 40% + /-3% al 72% + /-6% * (min. 45 CAO) quando tempo REP fu prolungata da 120 a 240 minuti. Non è stato aumentato quando REP fu prolungata da 120 a 240 minuti a 60 minuti CAO (69% ± 3% vs 75% + /-2%). Nel presente studio, ci descrivono importanti aspetti metodologici del modello murino in vivo di infarto miocardico acuto e fornire prove che, in questo modello, sono dipende sia durata dell'ischemia e tempo REP.

Il Gene HIF2A in Eritrocitosi Familiare

The New England Journal of Medicine. May, 2008  |  Pubmed ID: 18450610

Diretto Trattamento Del Mouse O Sangue Umano Con Solubile 5'-nucleotidasi Inibisce L'aggregazione Piastrinica

Arteriosclerosis, Thrombosis, and Vascular Biology. Aug, 2008  |  Pubmed ID: 18511695

Segnalazione di adenosina è noto per inibire l'aggregazione piastrinica. Adenosina extracellulare deriva principalmente da phosphohydrolysis enzimatica di nucleotidi precursore tramite ecto-5'-nucleotidasi. Studi precedenti suggeriscono che solubile 5'-nucleotidasi (5'-NT) derivato da Crotalus atrox veleno può essere clinicamente utile in perdite vascolari, ischemia miocardica, renale e intestinale o danno polmonare acuto. Tuttavia, gli effetti della 5'-trattamento NT sull'aggregazione piastrinica rimangono sconosciute. Abbiamo esaminato gli effetti diretti della 5'-trattamento NT sull'aggregazione piastrinica in vivo ed ex vivo utilizzando un metodo di aggregazione di sangue intero.

Il Reno-vascolare Recettore Adenosina A2B Protegge Il Rene Da Ischemia

PLoS Medicine. Jun, 2008  |  Pubmed ID: 18578565

Insufficienza renale acuta da ischemia contribuisce significativamente alla morbilità e mortalità in situazioni cliniche e strategie per migliorare la resistenza renale di ischemia sono urgentemente necessari. Qui, abbiamo individuato un percorso romanzo di protezione renale da ischemia utilizzando precondizionamento ischemico (IP).

Hypoxia-inducible Factor-1 è Centrale Alla Cardioprotezione: Un Nuovo Paradigma Di Precondizionamento Ischemico

Circulation. Jul, 2008  |  Pubmed ID: 18591435

Precondizionamento ischemico fornisce forti cardioprotezione da ischemia, ma suoi meccanismi molecolari rimangono sconosciute. Prove convincenti conferma un ruolo centrale dell'hypoxia-inducible factor (HIF) -1 nell'omeostasi dell'ossigeno dei mammiferi. Così, abbiamo perseguito HIF-1 come un componente centrale di cardioprotezione precondizionamento ischemico.

Utilità Della Ventilazione a Pressione Controllata Ad Alta Pressione Inspiratoria Per Indurre Il Danno Polmonare Acuto Nei Topi

American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18708630

Danno polmonare acuto (ALI), come si verifica con ventilazione meccanica prolungata, contribuisce alla morbilità e mortalità di malattie gravi, e gli studi su nuovi bersagli farmacologici o genetiche sono aree di indagine intensa. Qui, abbiamo sistematicamente testato un modello murino di ALI mediante ventilazione a pressione controllata per indurre il danno polmonare ventilatore-indotto. Per questo scopo, C57BL/6 o Sv129 topi sono stati anestetizzati e ha subito la tracheotomia, seguita da induzione di ALI tramite ventilazione meccanica. Topi sono stati ventilati in un ambiente controllato di pressione a livelli differenti di pressione inspiratoria (15-45 mbar) e sopra diverse volte (0-90 min., 100% di ossigeno). Come parametri di risultato, abbiamo valutato edema polmonare (rapporti di bagnato-asciutto), contenuto di albumina fluido broncoalveolare, attività polmonare mieloperossidasi, macrofagi infiammatori proteina-2 e scambio gassoso polmonare. Questi studi hanno rivelato differenze massimale gravità del danno polmonare tra ceppi diversi del mouse dopo 90 min tempo di ventilazione a 45 mbar. Impiego di concentrazioni più basse di ossigeno ispirato non ha modificato la gravità della malattia. Aumento della trascrizione CD73 (5'-ectonucleotidase, stimolatore della produzione di adenosina extracellulare) o livelli di adenosina polmonare totale con ventilazione meccanica erano meno pronunciato nei topi C57BL/6, suggerendo protezione adenosina attenuato nei topi C57BL/6. Insieme, questi studi dimostrano la fattibilità di questo modello per indurre murino ALI.

Segnalazione Del Ricevitore Dell'adenosina Di A2B Attenua Il Danno Polmonare Acuto Potenziando La Liquidazione Fluido Alveolare Nei Topi

The Journal of Clinical Investigation. Oct, 2008  |  Pubmed ID: 18787641

Anche se danno polmonare acuto contribuisce significativamente alla malattia critica, risoluzione spesso si verifica spontaneamente tramite attivazione di percorsi non completamente capiti. Abbiamo recentemente scoperto che ventilazione meccanica dei topi aumenta il livello di adenosina polmonare, e quello carente di topi per Visualizza generazione adenosina extracellulare aumentato edema polmonare e infiammazione dopo il danno polmonare ventilatore-indotto (VILI). Qui, abbiamo profilato la risposta a VILI nei topi con delezioni genetiche di ciascuno dei 4 recettori dell'adenosina (ARs) e scoperto che la delezione del gene A2BAR è stato specificamente associati con il tempo di sopravvivenza ridotta e aumentate perdite di albumina polmonare dopo l'infortunio. Nei topi WT, trattamento con un antagonista selettivo A2BAR portato a una maggiore infiammazione polmonare, edema e lo scambio di gas attenuato, mentre un agonista A2BAR attenuato VILI. Nel midollo osseo-chimerici A2BAR topi, sebbene la risposta infiammatoria polmonare coinvolto A2BAR segnalazione da cellule derivate dal midollo osseo, A2BARs situato sul tessuto polmonare attenuato perdite di albumina indotta da VILI ed edema polmonare. Inoltre, misura della clearance fluido alveolare (AFC) ha dimostrato che A2BAR segnalazione migliorato trasporto fluido amiloride-sensibili ed elevazione dei livelli di campi polmonari in seguito VILI, suggerendo che il A2BAR trattamento agonista protegge da asciugarsi i polmoni. Simile valorizzazione del campo polmonare e AFC sono stati osservati anche dopo stimolazione beta-adrenergici, una via conosciuta per promuovere AFC. Presi insieme, questi studi rivelano un ruolo per A2BAR segnalazione nell'attenuare VILI e coinvolgono questo recettore come un potenziale bersaglio terapeutico durante il danno polmonare acuto.

Ruolo Centrale Del CD39 Sp1-regolato Nella Protezione Di Ipossia/ischemia

Blood. Jan, 2009  |  Pubmed ID: 18812468

L'ipossia è comune a diverse malattie infiammatorie, dove diversi tipi di cellule rilasciare adenina-nucleotidi (particolarmente trifosfato di adenosina/adenosina difosfato). Viene metabolizzato trifosfato di adenosina/adenosina difosfato di adenosina attraverso una reazione enzimatica 2-fase iniziata da CD39 (ectonucleoside-trifosfato-diphosphohydrolase-1). Così, adenosina extracellulare diventa disponibile per regolare più endpoint infiammatorio. Qui, abbiamo ipotizzato che l'ipossia transcriptionally up-regola l'espressione di CD39. Gli studi iniziali hanno rivelato aumenti ipossia-dipendente CD39 mRNA e immunoreattività sull'endotelio. Esame del promotore del gene CD39 umano identificato una regione importante in 270ms ipossia. Più livelli di analisi, compresi mutagenesi luogo-diretta, immunoprecipitazione della cromatina e inibizione da antisenso, ha rivelato un ruolo critico per il fattore di trascrizione Sp1 in ipossia-induzione di CD39. Utilizzando una combinazione di cd39(-/-) topi e piccolo RNA interferente Sp1 in modelli di ischemia cardiaca in vivo ha rivelato ad induzione Sp1-mediata del CD39 cardiaco durante l'ischemia del miocardio. In sintesi, questi risultati identificano una romanzo via regolamentare Sp1-dipendente per CD39 e indicano la probabilità che il CD39 è centrale a risposte protettive di ipossia/ischemia.

PHD2 Mutazione Ed Eritrocitosi Congenite Con Paraganglioma

The New England Journal of Medicine. Mar, 2009  |  Pubmed ID: 19321876

Eliminazione Selettiva Del Recettore Dell'adenosina A1 Abolisce Gli Effetti Di Rallentamento Frequenza Cardiaca Di Adenosina Intravascolare in Vivo

PloS One. 2009  |  Pubmed ID: 19707555

Adenosina endovenosa induce bradicardia temporanea. Ciò è dovuto all'attivazione dei recettori dell'adenosina extracellulare (ARs). Mentre l'adenosina può segnalare attraverso uno qualsiasi dei quattro ARs (A1AR, A2AAR, A2BAR, A3AR), precedente ex vivo studi implicati A1AR degli effetti di rallentamento frequenza cardiaca. Qui, abbiamo usato il comparativi genetici studi in vivo per affrontare il contributo dei singoli ARs per gli effetti di rallentamento frequenza cardiaca di adenosina intravascolare.

Ruolo Di Adenosina Extracellulare Nel Danno Polmonare Acuto

Physiology (Bethesda, Md.). Oct, 2009  |  Pubmed ID: 19815856

Danno polmonare acuto (ALI) è una malattia polmonare, caratterizzata da edema polmonare e grave ipossia. Nell'ultimo decennio ha ospitato una ricerca per meccanismi endogeni di controllo infiammazione polmonare ed edema polmonare durante ALI. Come tale, recenti evidenze indicano adenosina extracellulare nell'orchestrare la risoluzione dell'infiammazione ed edema polmonare durante ALI.

Segnalazione Attraverso I Recettori Dell'adenosina A2B Smorza Danno Polmonare Acuto Indotto Da Endotossine

Journal of Immunology (Baltimore, Md. : 1950). May, 2010  |  Pubmed ID: 20348420

Sepsi e danno polmonare acuto settico sono tra le principali cause di morbilità e mortalità di malattie gravi. Adenosina extracellulare è una molecola di segnalazione implicata nell'adattamento cellulare all'ipossia, ischemia o infiammazione. Pertanto, abbiamo perseguito il ruolo del recettore dell'adenosina A2B (AR) come potenziali target terapeutici nel danno polmonare acuto indotto da endotossine. Abbiamo acquisito l'intuizione iniziale da studi in vitro di endotelio colta o epiteli esposti a mediatori infiammatori mostrando induzione dipendente dal tempo della A2BAR (fino a 12,9 + o - 3.4-fold, p < 0,05). Analogamente, studi murini di danno polmonare indotta da endotossine identificato un'induzione della trascrizione di A2BAR quasi 4.6-fold e induzione della proteina corrispondente con l'esposizione di LPS. Gli studi che utilizzano costrutti promotore A2BAR e analisi di RNA protezione indicarono che A2BAR induzione coinvolto stabilità mRNA. Studi funzionali del danno polmonare indotta da LPS ha rivelato che l'inibizione farmacologica o eliminazione genetica della A2BAR è stato associato con aumenti drammatici nell'infiammazione polmonare e lesioni istologiche del tessuto. Studi di A2BAR del midollo osseo di topi chimerici suggerito polmonare A2BAR segnalazione nella protezione del polmone. Infine, gli studi con un agonista specifico A2BAR (baia 60-6583) hanno dimostrato attenuazione dell'infiammazione polmonare ed edema polmonare nel wild-type, ma non nei topi gene targeting per il A2BAR. Questi studi suggeriscono la A2BAR come potenziale target terapeutico nel trattamento delle forme di endotossina-indotta di danno polmonare acuto.

Toll-like Receptor Signaling Durante L'ischemia Del Miocardio

Anesthesiology. Mar, 2011  |  Pubmed ID: 21278567

Interazione Di Ipossia E Recettori Dell'adenosina A2B Nella Protezione Dei Tessuti

Advances in Pharmacology (San Diego, Calif.). 2011  |  Pubmed ID: 21586359

Che l'adenosina segnalazione può suscitare risposte adattive tessuto durante condizioni di disponibilità limitata di ossigeno (ipossia) è una nozione lungamente sospettata che recentemente ha guadagnato l'accettazione generale dagli studi di genetici e farmacologici di adenosina signaling pathway. Come ipossia e infiammazione condividere un rapporto di interdipendenza, questi studi hanno dimostrato che l'adenosina di segnalazione eventi possono essere mirati per smorzare l'infiammazione indotta da ipossia. Qui, noi costruiamo sull'ipotesi che specialmente il recettore di adenosina A(2B) (ADORA(2B)) svolge un ruolo centrale nell'adattamento del tessuto all'ipossia. Infatti, la ADORA(2B) richiede più alte concentrazioni di adenosina rispetto a qualsiasi altri recettori dell'adenosina. Tuttavia, durante condizioni di ipossia o ischemia, l'ascesa di ipossia-elicitata in adenosina extracellulare è sufficiente per attivare il ADORA(2B). Inoltre, diversi studi hanno dimostrato induzione molto robusto di ADORA(2B) ha suscitato dai meccanismi trascrizionali che coinvolgono ipossia-dipendente signaling pathways e il fattore di trascrizione "fattore ipossia-indotto" 1. Nel presente capitolo, prova genetica e farmacologica è presentata per supportare la nostra ipotesi di un ruolo protettivo dei tessuti di ADORA(2B) segnalazione durante condizioni ipossiche, comprese le perdite vascolari ha suscitato l'ipossia, ischemia organo o danno polmonare acuto. Tutti questi modelli di malattia sono caratterizzati da infiammazione del tessuto ha suscitato l'ipossia. Come tale, il ADORA(2B) è emerso come un obiettivo terapeutico per bagnatura infiammazione indotta da ipossia e l'adattamento dei tessuti a disponibilità limitata di ossigeno.

Gli Obiettivi Di Droga Link E Potenziale Ipossia-infiammazione

Current Opinion in Anaesthesiology. Aug, 2011  |  Pubmed ID: 21659868

Ipossia rappresenta uno dei più forti stimoli trascrizionali noti a noi. Nella maggior parte dei casi, ipossia-indotto cambiamenti nell'espressione genica sono diretti verso adattare tessuti alle condizioni di disponibilità di ossigeno limitato.

Ischemia E Riperfusione - Dal Meccanismo Di Traduzione

Nature Medicine. 2011  |  Pubmed ID: 22064429

Ischemia e riperfusione elicitata tessuto lesioni contribuiscono alla morbilità e mortalità in una vasta gamma di patologie, tra cui infarto del miocardio, ictus ischemico, lesioni renali acute, trauma, arresto circolatorio, falciforme e apnea del sonno. Ischemia-reperfusion injury è anche una sfida importante durante i trapianti d'organo e chirurgia cardiotoracica e vascolare e generale. Uno squilibrio nell'offerta e la domanda metabolica all'interno dell'organo ischemico provoca ipossia tissutale profondo e disfunzione microvascolare. Successiva riperfusione ulteriormente migliora l'attivazione della risposta immunitaria innata e adattiva e programmi di morte delle cellule. I recenti progressi nella comprensione delle conseguenze molecolari e immunologiche di ischemia e riperfusione possono portare a strategie terapeutiche innovative per il trattamento di pazienti con ischemia e riperfusione-tessuto infiammazione e organo disfunzione.