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쥐의 장간막의 Exteriorization : Angiogenesis에 관련된 세포 역학을 조사하기위한 모델


JoVE 3954 5/20/2012

1Department of Biomedical Engineering, Tulane University, 2Department of Biomedical Engineering, University of Virginia, 3Center for Stem Cell Research and Regenerative Medicine, Tulane University

이 문서에서는 쥐의 장간막에 angiogenesis을 자극하기위한 간단한 모델을 설명합니다. 모델은 아래로 단일 세포 수준까지 전체 microvascular 네트워크의 얼굴 시각화 중이다있게 조직에서 비교적 짧은 시간 코스 이상의 모세관 돋아, 혈관 영역과 혈관 밀도의 극적인 증가를 생성합니다.

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Microvessels in Vivo Hemodynamic 스트레스를 증가에 노출의 부드러운 근육 세포 커버리지를 향상

혈관 성인 유기 체에 개장, 하는 동안 새로운 모 세관 성장 종종 arterioles 및 venules, 채용 해야 하는 프로세스의 적응과 부드러운 근육으로 전조 세포의 분화와 결합 이다. 우리는 높은 압력과 mesenteric microvascular 네트워크에 대 한 결 찰 전략을 사용 하 여 원주 벽 스트레스의 존재는 microvessels의 생체 조건 적응을 공부 했다. 급성 압력 42.6 ± 18%의 증가 17.1+/-2.3% 각각 25-를 30-microm-직경 venules와 네트워크 공급 arterioles elicited 했다. 벽 전단 률이 크게 바뀌지 않았다; 그러나, 직경에 있는 증가 했다 &gt; 10 microm 직경 venules 및 &gt; 20 microm 직경 arterioles. 부드러운 근육 세포 수축 형 (SM-MHC, 완전히 차별화 된 부드러운 근육의 표식) 부드러운 근육 myosin 무거운 체인 및 부드러운 근육 알파 말라 (fibroblast/pericyte 혈통의 미숙한 평활 근을 포함 한 모든 매끄러운 근육에 대 한 마커)의 식을 관찰 하 여 모든 microvessels에 결정 했다. 부드러운 근육 알파 말라 양성 혈관 길이 SM MHC 긍정적인 선박 길이의 비율 증가 &gt; 결 찰 치료 2-fold 후 5, 10 일. 부드러운 근육 확산 bromodeoxyuridine 설립 하 여 공부는 하 고 SM MHC 라는 microvessel 길이 밀도 증가 결 찰 후 SM MHC 라는 세포를 5, 10 일의 확산에 측정 변화가 동행 했다. 이러한 결과 5 또는 10 일, mesenteric microvessels의 기간 후 나타냅니다 < 높은 압력과 벽 긴장에 노출 되는 직경에서 40 microm 전시 성숙 하 고 완벽 하 게 차별화 된 부드러운 근육 세포의 향상 된 범위.

Mesenteric Microvascular 네트워크 개장 높은 Hemodynamic 스트레스에 대 한 응답에서에서 세포 증식

이 연구의 목적은 기계적 스트레스 증가에 대 한 응답 microvascular 개장 부드러운 근육 세포 (SMCs)에 의해 증가 범위에 의해 특징의 특정 양식 하는 동안 기존 혈관 및 perivascular 셀의 확산을 계량 하는. 쥐 mesentery에 있는 동맥/정 맥 쌍의 조정된 ligations 대상된 microvascular 네트워크 내의 hemodynamic 스트레스 상승 귀착되 었 다. 부드러운 근육 (SM) 알파 말라 긍정적인 그릇의 단위 길이 당 BRDU 정 관 결 찰 2, 5, 10 일에 다음과 같은 평가 받았다. 2 일에 BRDU 설립 가짜와 합자 치료 크게 증가 하지만 합자 응답 가짜 응답 위로 상승 하지는. 5 일 후에 두 그룹에 대 한 확산 unstimulated 수준으로 돌아. 결과 표시 hemodynamic 스트레스에 적당 한 고도 쥐 mesenteric microvessels 함께 perivascular 세포 증식 되지 않습니다, 따라서 동일한 microvessels 따라 차별화 Smcs의 증가 범위 혈관의 확산을 포함 하지 않는다 또는 perivascular 셀.

Microvessels 함께 Perivascular 셀에서 NG2 Proteoglycan의 차동 동맥/정 맥 식: Venule 특정 Phenotype을 식별 합니다

부드러운 근육 (SM) 알파-말라, PDGF-베타-수용 체, desmin, 등 다른 혈관 pericyte 마커 비슷합니다 NG2 proteoglycan 하지 pericyte 특정입니다. 따라서, 다른 일반 pericyte 표식에 비해 셀 혈통 연구에 특히 pericyte 마커로 NG2 사용 하려면 어떻게 그 표현 microvascular 네트워크 내에서 공간적 변화에 대 한 이해 필요. 이 연구의 목적은 쥐 microvascular 네트워크 내에서 혈관을 따라 NG2 식 특성화 고 SM 알파 말라 식에 이것을 비교 했다.

Perivascular 셀 Venules Upregulate Microvascular 리 모델링 하는 동안 NG2 식 따라

최근 저자 그 신경 교 항 원 2 (NG2) perivascular 셀 모 세관, arterioles 따라 하지만 venules 무부하 쥐 mesenteric microvascular 네트워크에 따라 하지에 의해 표현 됩니다 것으로 나타났습니다. 조사를 어떻게 microvascular 리 모델링 하는 동안이 proteoglycan 변화의 공간 분포가이 연구의 목표는 성인 쥐 mesenteric microvascular 네트워크 활성 개장 겪고 NG2 식의 특성을.

전산 네트워크 모델 예측 간격 스 프린트에서 Arteriolar 리 모델링 때문에 Hemodynamic 변경의 골격 근육 훈련

연습 훈련 높은 강도 간격 스 프린트 훈련 (IST) 주로 영향을 미치는 근육 빠른 트 위치 glycolytic 섬유의 비율이 높은 골격 근육 혈액 흐름 용량을 향상 알려져 있다. 이 연구의 목적은 새로운 arteriole 형성 및 lumenal arteriolar 리 모델링 향상 된 흐름 용량을 로컬 microvascular hemodynamics 깊은 근육 내에 이러한 적응에 미치는 영향의 상대적 기여를 확인 했다.

성인 쥐 Microvascular 네트워크 따라 EphB4 식: EphB4 정 맥 특정 마커 보다 더 많은입니다

EphrinB2 및 EphB4 배아 발달 중 동맥/정 맥 정체성의 표식 수 간주 됩니다. 그러나, 성인 microvascular 네트워크에 이러한 동맥/정 맥 관련 마커의 식 패턴 불분명 남아 있습니다. 이 연구의 목적은 unstimulated 그리고 개장 성인 쥐 mesenteric microvascular 네트워크의 계층 구조를 따라 EphB4 식의 세포 분포의 특성을 했다.

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