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Articles by Wonder P. Drake in JoVE
JoVE Immunology and Infection
Enzima-inmunoensayo de ensayo (ELISPOT): La cuantificación de la Th-1 respuesta inmune celular contra antígenos microbianos
1Department of Medicine, Vanderbilt University School of Medicine, 2Department of Microbiology and Immunology, Vanderbilt University School of Medicine
Identificación de objetivos microbiana de la inmunidad adaptativa en las enfermedades idiopáticas se puede lograr mediante el uso de la prueba de inmunoensayo enzimático.
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Reconocimiento Celular De La Mycobacterium Tuberculosis ESAT-6 Y Péptidos KatG En La Sarcoidosis Sistémica
La sarcoidosis es una enfermedad enigmática con una similar a la de la tuberculosis patología. Hemos detectado Th-1 la respuesta inmune a Mycobacterium tuberculosis ESAT-6 y péptidos katG a partir de células mononucleares de sangre periférica de 15 / sarcoidosis 26, 1/24 purificado la proteína derivada negativos (PPD-) (p <0,0001, prueba exacta de Fisher) , y 7/8 PPD positivos (PPD +) sujetos (P = 0,21). Este hallazgo proporciona enlaces inmunológicas entre la sarcoidosis micobacterias y sistémica.
Superóxido Dismutasa Los Antígenos Derivados Del Análisis Molecular De Los Granulomas Sistémicos Sarcoidosis Elicit Th-1 Respuesta Inmune
La sarcoidosis es una enfermedad granulomatosa idiopática con características patológicas e inmunológicas similares a la tuberculosis. Tinción histológica de rutina y de la cultura no logran identificar los agentes infecciosos. Un medio alternativo para la investigación de un papel de agentes infecciosos en la patogénesis del ser humano consiste en el análisis molecular de los tejidos patológicos de ácidos nucleicos microbianos, así como el reconocimiento de antígenos microbianos por el sistema inmune del huésped. El análisis molecular de la superóxido dismutasa A (soda) permite la especiación de las micobacterias. Soda es un factor de virulencia en abundancia secreta que genera la respuesta inmune celular en los huéspedes infectados. El propósito de este estudio es investigar si los antígenos diana de la respuesta inmune sarcoidosis puede ser identificado por el análisis molecular de los granulomas de la sarcoidosis.
Las Respuestas Celulares a Antígenos De Micobacterias Están Presentes En El Líquido De Lavado Broncoalveolar Utilizados En El Diagnóstico De La Sarcoidosis
Considerable evidencia apoya el concepto de que las células CD4 (+) las células T son importantes en la patogénesis de la sarcoidosis, pero los antígenos responsables de la observada Th1 inmunofenotipo siendo difícil de alcanzar. La asociación epidemiológica con bioaerosoles y la presencia de la consideración granulomatosa apoyo inflamación de antígenos de micobacterias. Para explorar el papel de los antígenos de micobacterias en inmunopatogénesis sarcoidosis, se evaluó el reconocimiento inmune de los antígenos de micobacterias, el 6-kDa principios de proteína secretada antigénica (ESAT-6) y catalasa-peroxidasa (KatG), por las células T derivadas del lavado broncoalveolar (LBA ) líquido obtenido durante la broncoscopia de diagnóstico. Se reporta la presencia del antígeno específico de reconocimiento de ESAT-6 y katG en las células T de LBA de los sujetos con sarcoidosis 32/44, frente a 1/27 controles (p <0,0001). CD4 (+) las células T son los principales responsables para el reconocimiento inmunológico (32/44 sujetos con sarcoidosis), aunque CD8 (+) respuestas de células T se observaron (25/41 sujetos con sarcoidosis). El reconocimiento fue significativamente ausente en las células del líquido del LBA de los pacientes con otras enfermedades pulmonares, incluyendo enfermedades granulomatosas infecciosas. El bloqueo de los receptores Toll-like 2 reduce la fuerza de la respuesta inmune observada. La presencia de la respuesta inmune a antígenos de micobacterias en las células de LBA utilizados para el diagnóstico sarcoidosis sugiere una fuerte asociación entre la patogénesis de las micobacterias y la sarcoidosis. La inhibición de reconocimiento inmunológico con anticuerpos monoclonales contra el receptor tipo Toll-2 sugiere que la inducción de la inmunidad innata por micobacterias contribuye a la polarización respuesta inmune Th1.
La Vitamina D, La Inmunidad Innata Y La Inflamación Granulomatosa, Sarcoidosis: Contribuciones De La Investigación Por Micobacterias
Los recientes descubrimientos arrojan dudas sobre la formación de granulomas únicamente como un mecanismo de protección, y poner de relieve la importancia de la inmunidad innata de la respuesta del huésped a patógenos. Aquí, un breve repaso evidencia de que antígenos de micobacterias están involucrados en la patogénesis de la sarcoidosis, y explorar cómo los defectos en la inmunidad innata podría contribuir a la enfermedad.
El Papel Etiológico De Antígenos Infecciosos En La Patogénesis Sarcoidosis
La sarcoidosis es una enfermedad de etiología desconocida, se caracteriza histológicamente por granulomas no caseificantes que con mayor frecuencia involucran el pulmón, piel, ganglios linfáticos, y los ojos. Síndromes con similares características patológicas e inmunológicas a la sarcoidosis, tales como la enfermedad crónica de berilio, la neumonitis por hipersensibilidad, y la tuberculosis, ponen de manifiesto que las enfermedades granulomatosas pueden o no pueden tener una etiología infecciosa. Aunque la etiología de la sarcoidosis sigue siendo desconocida, los últimos estudios moleculares, genéticos, inmunológicos y de fortalecer la asociación de la sarcoidosis con antígenos infecciosos. En la actualidad, los más fuertes de los agentes considerados incluyen Propionibacterium y especies de Mycobacterium. Estudios independientes reportan la presencia de microbios ácidos nucleicos y las proteínas dentro de las muestras sarcoidosis. 1 º-la respuesta inmunológica a las proteínas micobacterianas se han detectado dentro de la sarcoidosis de diagnóstico de lavado broncoalveolar (LBA). Estas proteínas son secretados activamente por el sistema de secreción de micobacterias Seca 2 y son importantes para evadir el sistema inmune del huésped. Los recientes descubrimientos con respecto a MHC de clase II alelos proporcionar información adicional sobre el papel de los antígenos microbianos en la patogenia de la sarcoidosis. Aunque la investigación aún está garantizado, los progresos recientes de los laboratorios independientes, utilizando técnicas complementarias, refuerza el papel de los antígenos microbianos en la patogenia de la sarcoidosis. Estos estudios sentar una base sólida hacia la identificación de dianas terapéuticas.
Desarrollo De Un Modelo Murino Sarcoidosis Granuloma Pulmonar Por Mycobacterium Superóxido Dismutasa Usando Un Péptido
La sarcoidosis se caracteriza por granulomas no caseificantes que contienen CD4 (+) las células T con un inmunofenotipo de células Th1. Aunque los antígenos causantes permanecen desconocidos, los estudios independientes observó evidencia molecular e inmunológica de los factores de virulencia de micobacterias en las muestras de la sarcoidosis. Un importante factor limitante en el descubrimiento de nuevos conocimientos sobre la patogenia de la sarcoidosis es la falta de un modelo animal. El uso de un superóxido dismutasa distinta que un péptido (soda) asociado con sarcoidosis los granulomas, hemos desarrollado un modelo de la inflamación pulmonar, sarcoidosis granulomatosa. Los ratones se sensibilizaron por una inyección subcutánea de sosa, que se incorpora en adyuvante incompleto de Freund (IFA). Control de los sujetos consistió en ratones sin sensibilización (Conns), sensibilizadas con IFA solamente (ConIFA), o con huevos de Schistosoma mansoni. Catorce días más tarde, los ratones sensibilizados fueron impugnadas por la inyección de cola de la vena de cuentas desnudos, unido covalentemente a péptidos de soda o huevos a los antígenos de esquistosomas (SEA). El análisis histológico reveló adenopatías hiliares y granulomas no caseificantes en los pulmones de los ratones tratados con sosa o SEA tratos. Citometría de flujo de lavado broncoalveolar (LBA) se manifestaron CD4 (+) respuestas de células T contra péptidos de soda en los ratones sensibilizados sosa solamente. El análisis de citometría de grano mostró diferencias significativas en IL-2 e IFN-γ secreción en el líquido de BAL de ratones tratados con sosa, en comparación con los ratones que recibieron cuentas de SEA o desnudo (p = 0,008, test de Wilcoxon). Los ratones y Conns ConIFA demostró que no había una formación significativa de granulomas, y no inmunofenotipo Th1. El uso de péptidos microbianos distintos para la sarcoidosis revela una histológico y el perfil inmunológico en el modelo murino que se correlaciona bien con los perfiles señalados en la sarcoidosis humana, proporcionando el marco para investigar la base molecular de la progresión o la resolución de la sarcoidosis.
