Het verkrijgen van zeer zuivere Toxoplasma gondii Oöcysten door een discontinue Cesium Chloride Gradient

Summary

Deze studie beschrijft de ontwikkeling van een aangepaste CsCl methode die gemakkelijk T. gondii oöcysten zuivert van uitwerpselen van geïnfecteerde katten die geschikt zijn voor moleculair-biologische en weefselkweek manipulatie

Abstract

Toxoplasma gondii is een obligaat intracellulaire protozo ziekteverwekker die vaak infecteert mensen. Het is een goed gekarakteriseerde apicomplexan in verband met het veroorzaken van voedsel-en water-gedragen ziekte-uitbraken. De definitieve gastheer is de kat soort waar seksuele replicatie plaatsvindt resulteert in de ontwikkeling van de zeer besmettelijke en milieuvriendelijk bestendig oocysten. Besmetting vindt plaats via inname van weefsel cysten van besmet vlees of oöcysten uit de bodem of water. Infectie is meestal asymptomatisch bij gezonde personen, maar resulteert in een levenslange latente infectie die kan activeren waardoor toxoplasmic encefalitis en de dood als het individu wordt verzwakt immuunsysteem. Vlees besmet met T. gondii cysten zijn de primaire bron van besmetting in Europa en de Verenigde Staten, maar de recente veranderingen in het diermanagement en veehouderijpraktijken en verbeterde voedingsmiddelen en-verwerking procedures aanzienlijk verminderd de prevalentie van T. gondii cysten in vlees ^{1, 2.} Toch seroprevalentie in de mens blijft relatief hoog wat suggereert dat de blootstelling van oocysten verontreinigde grond of water waarschijnlijk is. Sterker nog, watergedragen uitbraken van toxoplasmose gemeld wereldwijde ondersteuning van de theorie van de blootstelling aan de milieu-oocysten formulier vormt een belangrijke risico voor de gezondheid ^3-5. Tot op heden is het onderzoek naar het begrijpen van de prevalentie van T. gondii oöcysten in het water en het milieu zijn te wijten aan het gebrek aan tools om oöcysten te detecteren in het milieu ^{5, 6} beperkt. Dit is voornamelijk te wijten aan het ontbreken van een efficiënte zuivering protocollen voor het verkrijgen van een groot aantal zeer gezuiverd T gondii oöcysten van geïnfecteerde katten voor onderzoeksdoeleinden. Deze studie beschrijft de ontwikkeling van een aangepaste CsCl methode die gemakkelijk zuivert T. gondii oöcysten uit uitwerpselen van geïnfecteerde katten die geschikt zijn voor moleculair-biologische en weefselkweek manipulatie ^7.

Protocol