Summary
تصف هذه الورقة بالتفصيل إجراءات العملية والاحتياطات الواجب اتخاذها أثناء الكى في علاج التهاب الفقار اللاصق في فئران التجارب.
Abstract
التهاب الفقار اللاصق (AS) هو شكل من أشكال التهاب المفاصل يزداد سوءا وتعطيلا يؤثر بشكل أساسي على الهيكل العظمي المحوري. هذا المرض يشمل أساسا العمود الفقري والمفصل العجزي الحرقفي. قد يحدث اندماج العمود الفقري والمفصل العجزي الحرقفي في المرحلة المتأخرة من المرض ، مما يؤدي إلى تصلب العمود الفقري وحداب ، وكذلك صعوبة في المشي ، مما يؤثر بشكل خطير على جودة العمل وأنشطة الحياة اليومية ويفرض عبئا ثقيلا على المريض والأسرة والمجتمع. تم إيلاء اهتمام متزايد للعلاج غير الدوائي كعلاج بديل ل AS. الكى هو تقنية علاجية قديمة تستخدم في الطب الصيني التقليدي (TCM). علاج الكى Du ، وهو علاج خارجي فريد ومبتكر تم تطويره على أساس الكى العادي ، له تأثير علاجي واضح على AS. يجمع Du-mokibustion بمهارة بين التقنيات المتوافقة للطب الصيني التقليدي لدمج خطوط الطول ونقاط الوخز والأدوية العشبية الصينية والكي. يصف هذا البحث إجراءات التشغيل والاحتياطات الواجب اتخاذها أثناء الكى المثاني في فئران التجارب بالتفصيل لتوفير أساس تجريبي لدراسة آلية الكى المثاني في علاج AS.
Introduction
التهاب الفقار اللاصق (AS) هو شكل من أشكال التهاب المفاصل يزداد سوءا وتعطيلا يؤثر بشكل أساسي على الهيكل العظمي المحوري. وفقا لأحدث مسح وبائي ، ~ 0.01٪ -1.8٪ من الناس في العالم يعانون من هذه الحالة1 ، معظمهم من الشباب الذكور (نسبة الذكور إلى الإناث هي ~ 2-3: 1) 2. معدل حدوث AS في السكان الصينيين هو 0.2 ٪ -0.4 ٪. هذا المرض يشمل أساسا العمود الفقري والمفصل العجزي الحرقفي. قد يحدث اندماج العمود الفقري والمفصل العجزي الحرقفي في المراحل المتأخرة من المرض ، مما يؤدي إلى تصلب العمود الفقري وحداب ، وكذلك صعوبة في المشي ، مما يؤثر بشكل خطير على جودة العمل وأنشطة الحياة اليومية ويفرض عبئا ثقيلا على المريض والأسرة والمجتمع1. حاليا ، لا يوجد حل نهائي ل AS ، وتركز العلاجات المقدمة ، الدوائية وغير الدوائية ، في المقام الأول على تخفيف الألم ، وإبطاء تطور المرض ، وتحسين نوعية الحياة. في السنوات الأخيرة ، نظرا لأن خيارات العلاج الدوائي كانت محدودة للغاية3 ، فقد تم إيلاء اهتمام متزايد للعلاج غير الدوائي ، والذي أصبح علاجا بديلا ل AS. في الصين ، غالبا ما يفضل المرضى العلاج الخارجي الذي يتكون من الطب الصيني التقليدي (TCM) ، والذي له آثار جانبية طفيفة وراحة كبيرة أثناء العلاج.
الكى هو تقنية علاجية قديمة تستخدم في الطب الصيني التقليدي. الكى المدو هو تقنية علاج خارجية تتكون من "الكى الطبي بالرغوة" على الجزء الفقري من خط الطول Du. يستخدم بشكل رئيسي في علاج AS وقد أظهر السلامة والفعالية. بالمقارنة مع الكى العادي ، يتميز Du-moxibustion بخصائص منطقة الكى الواسعة ، ومخروط moxa الكبير ، وقوة النيران القوية ، ودرجة الحرارةالعالية 4. تشير المراجعة المنهجية والتحليل التلوي إلى أن الكى هو علاج تكميلي فعال ل AS5. أكدت دراسة حديثة أن الأعراض السريرية وبعض العوامل الالتهابية لمرضى AS قد تحسنت بسبب الكى6. كشفت الدراسات أن الكى Du يمكن أن يزيد من محتوى الدماغ من β-endorphin ويمارس تأثيرا مسكنا مركزيا7 ، ويقلل من تنظيم التعبير عن جين HLA-B27 8 ، ويؤخر معدل تكرار AS. كما أن الكى المتساوي له تأثير محسن على تطور AS عن طريق تقليل مؤشر الالتهاب ESR (ESR) ومستويات البروتين التفاعلي C (CRP) ، والببتيد C-terminal من الكولاجين من النوع الأول (CTX-I) ، وبروتين Dickkopf1 (DKK1) 9,10.
أظهرت دراسة سريرية أخرى أن الكى Du يمكن أن يزيد من ضبط المجموعات الفرعية للخلايا التائية المضطربة ، Ig ، ويكمل C3 لتحقيق التوازن بين آلية المناعة11. من حيث استقلاب العظام ، يمكن أن يمنع الكى صعود الفوسفاتيز القلوي في الدم (ALP) وفوسفور المصل (S-P) ، ويزيد من الكالسيوم في الدم (S-Ca) ، وكثافة المعادن في العظام (BMD) ، وقوة العظام12. علاوة على ذلك ، يمكن ل Du-mokibustion إصلاح وظيفة العمود الفقري في نقاط متعددة لتخفيف أعراض التعب لدى مرضى AS13. كشفت بعض الدراسات التي أجريت على عن الآلية المحتملة للكي في علاج AS. أشارت دراسة إلى أن الكى حسن بشكل كبير الحالة الصحية العامة ، وقلل من مستويات سمك المخلب ، وقلل من مستويات IL-1β و PGE2 و IL-6 و TNF-α في عينات أنسجة الأربطة في العمود الفقري. ربط تحليل المسار الأيضي المستقلبات المحددة بدورة TCA ، وكذلك الدهون والأحماض الأمينية والنباتات المعوية واستقلاب البيورين14. أظهرت دراسة أخرى أن الكى قمع التعبير عن السيتوكينات المؤيدة للالتهابات ، IL-1β ، TNF-α ، IL-17 ، و IL-6. خفض مستويات mRNA من RANKL و RANK و ALP و OCN ؛ وتحسين السمات النسيجية المرضية في الفئرانAS 15.
في حين أن هذه الدراسات تشير إلى أن الكى قد يكون فعالا في علاج AS، هناك حاجة إلى مزيد من البحوث لتأكيد هذه النتائج وتحديد بروتوكول العلاج الأمثل للكي في المرضى الذين يعانون من AS. قام فريقنا بإنشاء وتعديل علاج الكى بناء على النظرية الأساسية والتشغيل العملي للكي الصيني التقليدي ، والذي تم تنفيذه وتطبيقه على نطاق واسع في الممارسة السريرية الصينية لأكثر من 35 عاما. على الرغم من وجود عدد قليل من الدراسات عالية الجودة حول علاج AS بواسطة Du-moxibustion ، إلا أن دلالته في علاج AS مدعومة بالأدلة. ومع ذلك ، فإن آلية علاج AS مع Du-mokibustion تستحق مزيدا من الدراسة. تعد الدراسة على طريقة مهمة لاستكشاف آلية الكى في علاج AS. العملية السريرية ل Du-mokibustion ناضجة نسبيا ولكنها نادرا ما تستخدم في دراسة الآلية في التجارب على. تصف هذه الورقة بالتفصيل العملية والاحتياطات الواجب اتخاذها أثناء الكى Du في علاج فئران التجارب AS.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تمت الموافقة على جميع التجارب على من قبل لجنة مراجعة أخلاقيات رعاية التجريبي بجامعة شاندونغ للطب الصيني التقليدي (No. SDUTCM20230831301).
1. إعداد
- تحديد المجموعات التجريبية وعدد لكل مجموعة مقدما.
- اختر ذكور الفئران BALb / c ، وقم بإيوائها في درجة حرارة ثابتة تبلغ 22 ± 1 درجة مئوية ، ورطوبة ثابتة تبلغ 60 ± 5٪ ، وبيئة إضاءة دورة نهارية لمدة 12 ساعة.
2. إنشاء نموذج الماوس AS
ملاحظة: تم تحفيز نموذج AS باستخدام بروتيوغليكان الغضروف (PG) ، وهي طريقة نمذجة كلاسيكية16،17،18،19،20،21. تم تحصين الفئران من سلالة BALB / c بشكل متكرر باستخدام PG للحث على التهاب الأوتار والتهاب الفقار. انظر جدول المواد للحصول على التفاصيل المتعلقة بالمواد والكواشف والأدوات المستخدمة في هذا البروتوكول.
- استخدم ماصة 200 ميكرولتر لسحب 200 ميكرولتر من PG و CFA (أو IFA) في أنبوب طرد مركزي سعة 1.5 مل. يهتز بلطف لخلط السائل في أنبوب الطرد المركزي.
- ضع أنبوب الطرد المركزي في مطحنة الأنسجة للتجانس ثم احتضانه على الثلج لمدة 4 دقائق. كرر 5x. اضبط المعلمات التالية في مطحنة الأنسجة: 60 هرتز ، طحن 30 ثانية ، فاصل 10 ثوان لما مجموعه 6 دورات.
- استخراج 0.2 مل من بروتين PG المستحلب من أنبوب الطرد المركزي مع حقنة 1 مل.
- الاستيلاء على الماوس وإصلاحه باليد اليسرى. ضع الماوس في وضع ضعيف ، مع إبقاء الرأس أقل من الذيل لمنع تلف أعضاء البطن عند إدخال المحقنة.
- تعقيم البطن مع مسحات الكحول باستخدام اليد اليمنى.
- مع وجود المحقنة في اليد اليمنى ، أدخل الإبرة تحت الجلد قليلا إلى يسار أو يمين الخط البطني في النصف السفلي من البطن.
- ادفع الإبرة 3-5 مم بالتوازي مع خط منتصف البطن ثم ادفع الإبرة إلى تجويف البطن بزاوية 45 درجة على الجلد.
- اختراق الصفاق ، وسحب سد الإبرة ، وحقن ببطء بروتين PG المستحلب.
3. دو الكى
ملاحظة: قم بإعداد أهم ثلاث مواد خام ل Du-mokibustion مسبقا (الشكل 1).
- تحضير المخاريط moxa. خذ المخمل في اليد ، مع وجود راحتين تواجهان اتجاهين متعاكسين يمارسان قوة التواء لفرك المخمل في شكل مغزل (الشكل 2)
- قطع الزنجبيل إلى قطع صغيرة وهرسه في عصارة (الشكل 3). تصفية هريس الزنجبيل من خلال الشاش القطني. افصل عصير الزنجبيل وطين الزنجبيل عن هريس الزنجبيل للتحضير للخطوة التالية.
- تحضير 10 غرام من طين الزنجبيل و 20 مل من عصير الزنجبيل ووضعها في أكواب ورقية لاستخدامها لاحقا.
- تزن 0.1 غرام من مسحوق الطب الصيني التقليدي (خليط من مسحوق القرفة ، مسحوق القرنفل ، مسحوق notopterygium ، مسحوق أنثاريدين ، والمسك الاصطناعي)22 وطحنها في الهاون.
- ضع الفئران في صندوق تحريض التخدير في آلة التخدير الحيواني وقم بتخديرها بمزيج من 2-3٪ إيزوفلوران وأكسجين بمعدل تدفق 2 لتر / دقيقة.
- قم بتقييم عمق التخدير من خلال مراقبة عدم وجود منعكس مفاجئ في البداية والتحقق من مستوى التخدير الجراحي عن طريق التحقق من عدم وجود منعكس دواسة استجابة لقرصة إصبع القدم اللطيفة.
- بعد أن يصل الماوس إلى التخدير الجراحي للطائرة ، أخرجه من الصندوق وقم بتثبيته على طاولة العمليات في وضع الانبطاح. قم بمحاذاة فم الفأر وأنفه مع مخرج المخدر.
- إدارة التخدير عن طريق قناع متصل بجهاز التخدير ، والذي يتم من خلاله توصيل الأيزوفلوران والأكسجين عبر دائرة غير قابلة لإعادة التنفس. حافظ على التخدير واحتفظ بالماوس على وسادة تسخين 37 درجة مئوية أثناء الإجراء التشغيلي بأكمله. ضع مادة التشحيم على العينين لمنع الجفاف.
- حدد موقع نقاط الوخز وحدد منطقة التحفيز (الشكل 4).
- حلق الشعر على ظهر الفأر حتى يظهر الجلد بلون اللحم على ظهر الماوس. تأكد من أن عرض إزالة الشعر ~ 1.5 سم والطول من فقرة عنق الرحم السابعة إلى فقرة الذيل (الشكل 5 أ).
- ضع عصير الزنجبيل المحضر بشاش قطني على المنطقة المحلوقة (الشكل 3).
- رش مسحوق TCM بالتساوي بفرشاة كتابة على الخط المتوسط للجزء الخلفي من الماوس وقم بتغطيته بورق التوت (الشكل 5B-D).
- اصنع عمود زنجبيل شبه منحرف بطول 6 سم وعرض 1.5 سم وسمك 3 مم بطين الزنجبيل. ثبت عمود الزنجبيل على ورق التوت (الشكل 5E).
- اصنع أخدودا فوق خط الوسط لعمود الزنجبيل (الشكل 3) ، وضع مخروط moxa على عمود الزنجبيل.
- أشعل مخروط moxa ، وضع مخروط moxa جديدا بعد احتراق المخروط السابق. تحقق من صلابة عمود الزنجبيل لمنع حرق الماوس ، وحرق ما مجموعه ثلاثة مخاريط (الشكل 5F).
- بعد حرق مخاريط moxa ، امسح الزنجبيل ومسحوق TCM ، ونظف الجزء الخلفي من الماوس. توقف عن التخدير في هذه المرحلة.
- اسمح للفأر باستعادة وعيه في قفص جديد مع وصول غير مقيد إلى الطعام والماء. ضع القفص على وسادة ساخنة للمساعدة في عملية التعافي. راقب حتى يستعيد وعيه الكافي.
- بمجرد أن يتعافى الماوس تماما ، تأكد من وجود رد الفعل الصحيح قبل إعادته إلى غلافه الطبيعي.
ملاحظة: أثناء العملية ، من الضروري مراقبة الحالة العقلية للفئران لتجنب ضعف التنفس. منع السمط ، ولكن الحفاظ على الفئران دافئة ، وتجنب كدمات من مخالب والذيل.
4. تقييم مؤشر التهاب المفاصل (الذكاء الاصطناعي)
- تقييم درجة الذكاء الاصطناعي ثلاث مرات: قبل النمذجة ، وبعد النمذجة ، وبعد العلاج. معايير التقييم هي كما يلي: 0 ، لا احمرار أو تورم. 1 ، احمرار طفيف أو تورم في عدد قليل من أصابع القدم ؛ 2 ، احمرار وتورم في معظم المفاصل أصابع القدم وأصابع القدم. 3 ، احمرار خطير وتورم في القدمين وتحت مفصل الكاحل ؛ و 4 ، احمرار وتورم في القدمين ومفصل الكاحل23.
- احسب الدرجات الذكاء الاصطناعي لجميع الكفوف الأربعة ، بحد أقصى 16.
5. اختبار الروتارود
ملاحظة: يستخدم اختبار الروتارود لتقييم التنسيق الحركي والتوازن عن طريق تسجيل الوقت الذي تقضيه الفئران على الأسطوانة الدوارة. تألفت هذه التجربة من ثلاث تجارب تفصل بينها فواصل زمنية مدتها 20 دقيقة. تم تسجيل بيانات الاختبار الرسمية من التجربة الثالثة ، حيث كان أول اختبارين بمثابة تمارين تدريبية.
- ضع الفئران على براميل دوارة تدور تحت تسارع مستمر من 4 إلى 40 دورة في الدقيقة على 300 ثانية24.
- قم بقياس وقت الكمون (الوقت حتى يسقط الماوس من القضيب). توفير حشوة لمنع الإصابة عند سقوطها.
6. اختبار المجال المفتوح (OFT)
ملاحظة: يستخدم OFT لتقييم حالة الحركة اللاإرادية ، بهدف تحديد السلوك المرضي. تم وضع أربع ساحات مربعة مفتوحة المجال (50 سم × 50 سم × 40 سم) معا لتشكيل الجهاز. تم تقسيم الجزء السفلي من الصندوق إلى تسعة مربعات متساوية.
- التحكم في ضوضاء خلفية المختبر إلى أقل من 65 ديسيبل.
- امسح الجهاز بالكامل بنسبة 75٪ من الإيثانول قبل كل تجربة.
- ضع جميع الفئران في غرفة الاختبار قبل 1 ساعة من الاختبار للسماح لها بالتكيف مع بيئتها.
- ضع الفئران في ساحات الحقول المفتوحة المربعة واسمح لها بالاستكشاف لمدة 10 دقائق.
- سجل المسافة الإجمالية وسرعة الحركة لمدة 10 دقائق.
7. القتل الرحيم وجمع العينات
- ضع الماوس في صندوق تحريض التخدير وقم بتخديره بمزيج من 2-3٪ إيزوفلوران وأكسجين بمعدل تدفق 2 لتر / دقيقة. بمجرد دخول الماوس في حالة تخدير عميق يؤكدها عدم وجود منعكس دواسة ، قم بنقله إلى طاولة العمليات لتخدير الصيانة.
- الاستيلاء على الماوس وإصلاحه باليد غير المهيمنة.
- اضغطي برفق على منطقة العين لجعل مقل العيون مزدحمة وبارزة.
- استخدم المقص لتقليم شعيرات الماوس لمنع انحلال الدم الناجم عن الشعر.
- تأكد من عمق التخدير عن طريق التحقق من عدم وجود منعكس دواسة استجابة لقرصة إصبع القدم. استخدم الملقط للإمساك بمقلة العين وإزالتها بسرعة ، مما يسمح للدم بالتدفق إلى أنبوب طرد مركزي دقيق من مقبس العين.
ملاحظة: يمكن أيضا استخدام طرق بديلة لجمع الدم ، مثل ثقب القلب. - عندما يتباطأ معدل تنقيط الدم ، اضغط برفق على منطقة قلب الفأر لتسريع ضخ الدم والحصول على المزيد من الدم. ثم القتل الرحيم للفأر باستخدام خلع عنق الرحم.
- امسك الساق فوق مفصل الكاحل مباشرة باستخدام ملقط في اليد غير المهيمنة. ثم ، قم بقص الساق فوق مفصل الكاحل مباشرة باستخدام المقص.
8. التحليل النسيجي
- اغمر عينات الكاحل في 4٪ بارافورمالدهيد لأكثر من 24 ساعة. إزالة الكلسify في 10 ٪ EDTA (درجة الحموضة = 7.4) لمدة 1 شهر.
- نقع العينات في 4 ٪ بارافورمالدهيد لمدة 2 ساعة.
- ثم ، نقع العينات في تدرج زيادة تركيزات الإيثانول (70 ٪ ، 80 ٪ ، 90 ٪ ، 100 ٪ ، 100 ٪ ، 100 ٪). نقع كل تركيز الإيثانول لمدة 1 ساعة.
- نقع العينات في الزيلين لمدة 3 ساعات.
- اغمر عينات الكاحل في البارافين لمدة 7 ساعات. توضع مكعبات البارافين جانبا في ثلاجة على حرارة 4 درجة مئوية.
- قم بتقطيع كتل البارافين إلى سمك 6 ميكرومتر باستخدام آلة تقطيع البارافين شبه الأوتوماتيكية.
- انقع الشرائح لمدة 4 × 5 دقائق في الزيلين لإكمال إزالة الشمع.
- انقع الشرائح في تدرج من تركيزات الإيثانول المتناقصة (100٪ ، 100٪ ، 95٪ ، 75٪) لمدة 2 دقيقة لكل منها. نقع في الماء المقطر لمدة 2 دقيقة.
- تلطيخ الشرائح بالهيماتوكسيلين لمدة 10 دقائق واشطفها بالماء المقطر لمدة 5 ثوان.
- نقع الشرائح لمدة 30 ثانية في سائل التمايز وشطف بالماء المقطر لمدة 5 ثوان.
- تلطيخ شرائح مع eosin لمدة 1 دقيقة وشطف بالماء المقطر لمدة 3 دقائق.
- نقع الشرائح في تدرج من تركيزات الإيثانول المتزايدة (80 ٪ ، 95 ٪ ، 100 ٪ ، 100 ٪) لمدة 1 دقيقة لكل منهما. ينقع في الزيلين لمدة 3 × 3 دقائق ويغلق الشرائح25.
9. مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA)
- قم بقياس تركيزات IL-17 و TNF-α في البلازما باستخدام المجموعات المعنية وفقا لتعليمات الشركات المصنعة.
10. التحليل الإحصائي
- التعبير عن البيانات كمتوسط ± خطأ معياري للمتوسط (SEM).
- تحديد الأهمية من خلال تحليل التباين أحادي الاتجاه (ANOVA) أو المقاييس المتكررة ثنائية الاتجاه ANOVA ، تليها اختبارات Bonferroni أو Tamhane T2 اللاحقة.
- ضع في اعتبارك أن P < 0.05 ذات دلالة إحصائية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
طورت الفئران النموذجية التي يسببها PG أعراض التهاب المفاصل المحيطي ، والتي تتميز باحمرار وتورم الأطراف وأصابع القدم ، وطورت تدريجيا التهاب المفاصل المحوري في وقت مبكر من الأسبوع 14 ، وهو مشابه جدا لمظهر AS. لذلك ، اعتبر نموذج الماوس AS ناجحا إذا كان مؤشر التهاب المفاصل (الذكاء الاصطناعي) أكثر من 3 نقاط في 14 أسبوعا بعد الحقنالأخير 22. عندما بدت أقدام الفئران منتفخة ، تم إجراء علاج الكى Du مرة واحدة في الأسبوع لما مجموعه 3x. بعد العلاج ، تم القتل الرحيم للفئران عن طريق خلع عنق الرحم تحت التخدير العميق isoflurane ، وتم جمع دمائهم ، وتم استئصال الكاحلين.
آثار الكى المضاعف على الترميز الحركي والحركة اللاإرادية
تم اعتماد AS المستحث ب PG البقري كنموذج لمراقبة تأثير الكى Du عند خط الطول Du على التنسيق الحركي. في البداية ، تم استخدام درجة تورم المفصل لتقييم ما إذا كان النموذج ناجحا ، وتم تقييم التنسيق الحركي والحركة اللاإرادية باستخدام اختبار الروتارود و OFT.
حدد تقييم الذكاء الاصطناعي شدة التهاب المفاصل المحيطي. بعد النمذجة ، كشفت ANOVA ذات المقاييس المتكررة ثنائية الاتجاه أن درجات تورم المفاصل في النموذج ومجموعات الكى Du زادت بشكل ملحوظ مقارنة بتلك الموجودة في المجموعة الضابطة قبل الكى Du (P < 0.01; الشكل 6 أ). أدى علاج الكى Du إلى انخفاض درجات تورم المفاصل مقارنة بتلك الخاصة بالمجموعة النموذجية بعد Du-mokibustion (P < 0.05; الشكل 6 أ).
تم استخدام اختبار الروتارود لتقييم التنسيق الحركي والتوازن. كشفت المقاييس المتكررة ثنائية الاتجاه ANOVA عن اختلافات كبيرة بمرور الوقت (F = 13.928 ، P = 0.000 < 0.05) وتأثيرات التفاعل للوقت والمجموعة (F = 12.583 ، P = 0.000 < 0.05). بعد النمذجة ، لم يكن وقت الكمون للمجموعة الضابطة مختلفا عن ذلك قبل النمذجة. ومع ذلك ، بعد النمذجة ، انخفضت أوقات الكمون لمجموعات النموذج ومجموعات الكى Du بشكل ملحوظ مقارنة بتلك الموجودة في المجموعة الضابطة (P < 0.01; الشكل 6B)، ولم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية بين المجموعة النموذجية ومجموعة الكى Du (P > 0.05; الشكل 6 ب). بعد العلاج ، زاد وقت الكمون لمجموعة Du-moxibustion بشكل كبير مقارنة بوقت المجموعة النموذجية (P < 0.05 ؛ الشكل 6 ب). أشارت هذه النتائج إلى أن الكى Du كان فعالا في تحسين التنسيق الحركي في الفئران AS.
تم إجراء OFT للكشف عن الحركة اللاإرادية. تم جمع المعلمات وتحليلها تلقائيا باستخدام البرنامج (الشكل 6C-E) ؛ لوحظت المسافة الإجمالية ومتوسط السرعة بشكل رئيسي في هذه الدراسة. لم يكن هناك فرق كبير في المسافة الكلية ومتوسط السرعة بين المجموعات قبل النمذجة (P > 0.05; الشكل 6 ج ، د). بعد النمذجة ، انخفضت المسافة الإجمالية ومتوسط السرعة بشكل ملحوظ مقارنة بمجموعة التحكم (P < 0.05 ؛ الشكل 6 ج ، د). بعد المعالجة ، زادت المسافة الإجمالية ومتوسط السرعة لمجموعة الكى Du بشكل كبير مقارنة بالمجموعة النموذجية (P < 0.05 ؛ الشكل 6 ج ، د). أشارت هذه النتائج إلى أن الكى Du كان فعالا في تحسين الحركة اللاإرادية في الفئران AS.
آثار الكى Du على أمراض مفصل الكاحل
تم استخدام تلطيخ HE لمراقبة التغيرات المرضية في مفصل الكاحل. في المجموعة الضابطة ، لم يكن هناك أي ضرر لهيكل الغشاء الزليلي ، ولا ازدحام في الغشاء الزليلي ، ولا تسلل واضح للخلايا الالتهابية ونخرها. ومع ذلك ، في المجموعة النموذجية ، لوحظ تضخم الغشاء الزليلي والتسلل في تجويف المفصل ، بالإضافة إلى تسلل الخلايا الالتهابية وذمة الأنسجة. إلى جانب التقييم الذكاء الاصطناعي ، ثبت أن نموذج AS قد تم إنشاؤه بنجاح. بالمقارنة مع المجموعة النموذجية ، كان الغشاء الزليلي للفئران في مجموعة الكى Du أكثر سلامة ، وتم تقليل الوذمة الخلالية ، وكان الغضروف المفصلي سليما نسبيا (الشكل 7).
آثار الكى Du على مستويات IL-17 و TNF-α في البلازما
تم إجراء ELISA لقياس IL-17 و TNF-α في البلازما. وزادت مستويات IL-17 وTNF-α في البلازما للمجموعة النموذجية زيادة كبيرة مقارنة بمستويات المجموعة الضابطة (P < 0.01; الشكل 6F ، G). انخفض الكى Du مستويات IL-17 و TNF-α في البلازما (P < 0.05; الشكل 6F ، G).
الشكل 1: المواد الخام اللازمة ل Du-mokibustion. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
الشكل 2: صنع مخروط موكسا. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
الشكل 3: تحضير ماء الزنجبيل وصنع عمود زنجبيل شبه منحرف. الرجاء الضغط هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الشكل.
الشكل 4: موقع GV14 و GV2 في الماوس. (أ) GV14 الموجود في العملية تحت الشائكة للفقرة العنقية السابعة ؛ GV2 تقع في القناة العجزية. (ب) رسم تخطيطي ل Du الكى على الماوس. (ج) المنطقة المحفزة من الكى Du. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 5: إجراء تشغيل الكى Du في الماوس. (أ) حلق الشعر وتشويه عصير الزنجبيل على الفأر في وضعية الانبطاح. (ب، ج) يرش مسحوق الطب الصيني التقليدي بالتساوي. (د) غطي المسحوق بورق التوت. (ه) ثبت عمود الزنجبيل على ورق التوت بإحكام. (و) ضع مخروط موكسا على عمود الزنجبيل. ثم قم بإضاءته. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 6: تأثيرات الكى المتضائل على التنسيق الحركي والحركة اللاإرادية ومستويات IL-17 و TNF-α. أ: درجات تورم المفصل في الفئران. (ب) زمن الكمون في اختبار الروتارد. (جيم - ه) المسافة الإجمالية ومتوسط السرعة ومخطط المسار ل OFT. (F) مستويات IL-17 في البلازما. (ز) مستويات عامل نخر الورم - α في البلازما. يتم التعبير عن القيم كمتوسط ± SEM (n = 6). ##P < 0.01 ، # P < 0.05 مقابل المجموعة الضابطة ؛ $$P < 0.01 ، $ P < 0.05 مقابل مجموعة الطرازات. الاختصارات: IL = إنترلوكين. TNF = عامل نخر الورم. OFT = اختبار المجال المفتوح. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
الشكل 7: تلطيخ مفصل الكاحل. (أ) كان تجويف المفصل أملسا دون ارتشاح التهابي في المجموعة الضابطة. (ب) في المجموعة النموذجية، لوحظ تضخم الغشاء الزليلي وارتشاح في تجويف المفصل. (ج) في مجموعة الكى المزدوج، كان تجويف مفصل الفئران أملسا وخففت الوذمة. قضبان المقياس = 200 ميكرومتر. اختصار: HE = الهيماتوكسيلين-يوزين. يرجى النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
يتجلى AS سريريا كألم تورم في الظهر وأسفل الظهر والمفاصل ، وقد يحدث تشوه في العمود الفقري وصلابة المفاصل في الحالات الشديدة26. يمكن أن يؤدي التشخيص والعلاج المبكر إلى تحسين نوعية الحياة وتقليل معدلات الإعاقة وتحسين توقعات المرضى الذين يعانون من AS. وفقا للطب الصيني التقليدي (TCM) ، يعتقد أن AS ناتج عن نقص يانغ في الكلى وخط الطول دو ، بالإضافة إلى تراكم الشر البارد داخليا. يرى الطب الصيني التقليدي أن الكى ، بناء على مفهوم خطوط الطول ، يمكن أن يولد Qi الذي يسخن سطح الجسم. ثم ينتقل Qi هذا لأسفل على طول خطوط الطول ونقاط الإبر. في The Inner Canon of Huangdi (تحفة TCM كلاسيكية ومهمة للغاية) ، تم تسجيل أن "خط الطول Du المريضة يعالج". نظرا لأن AS يقع في خط الطول Du ، يتم استخدام تحفيز خط الطول Du كنقطة علاجية. يعتبر خط الطول Du هو محيط قنوات Yang حيث يصل Yang Qi إلى ذروته. الكى على خط الطول دو يمكن أن يكمل يانغ تشي ، وتنشيط تأثير خط الطول دو ، وضبط تأثير الاحترار من الكلى يانغ ، وهذا هو ، تعزيز وظيفة تنظيم المناعة في الطب الغربي.
من منظور الطب الغربي ، يلعب الحبل الشوكي دورا مهما في نقل المعلومات العصبية. Du الكى ، الذي يعمل على مدخل وخروج جذور الأعصاب الشوكية ، يمكن أن يؤثر على وظيفة الجهاز العصبي وآليته التنظيمية من خلال تنظيم الناقلات العصبية. في تسعينيات القرن العشرين ، ثبت أن الكى Du زاد من محتوى الإندورفين β في منطقة ما تحت المهاد من الفئران ، وبالتالي كان له تأثير مسكن مركزي7. بالإضافة إلى ذلك ، يعد التهاب المفاصل أحد المضاعفات الشائعة ل AS ، ويتميز بالألم المستمر وتصلب العضلات ، مما قد يؤثر على حركة المفاصل والجسم عندما تكون شديدة. كطريقة علاج الطب الصيني التقليدي التي تم التحقق من صحتها سريريا ، يمكن أن يخفف الكى Du بشكل فعال من الالتهاب ، ويعزز إصلاح الأنسجة ، ويحسن التهاب المفاصل في علاج AS.
على وجه التحديد ، تنعكس آثار الوخز بالإبر والكي بشكل رئيسي في الجوانب التالية. أولا ، أنها تعزز الدورة الدموية وامتصاص الالتهاب. يحفز الكى المثاني الدورة الدموية والتمثيل الغذائي في الأنسجة المحيطة بالعمود الفقري من خلال تأثير الاحترار ويعزز امتصاص الالتهاب وإصلاح الأنسجة ، وبالتالي يقلل من درجة الالتهاب والألم الناتج عن التهاب التعلق بالأوتار. ثانيا ، أنها تحسن توتر العضلات والأربطة. يمكن أن يؤدي تأثير التحفيز ل Du-mokibustion إلى تحسين توتر العضلات حول العمود الفقري ، وإرخاء الأنسجة الرخوة المتصلبة ، وتعزيز نشاط مفاصل العمود الفقري ، وتقليل الألم والتصلب الناجم عن توتر العضلات وتمدد الأربطة. باختصار ، يمكن ل Du-moxibustion ، كعلاج مساعد ، أن ينظم بشكل شامل أنشطة الجهاز العصبي والمناعي والدورة الدموية في الجسم من خلال العمل على منطقة العمود الفقري ، مما يجعل الجسم أكثر توازنا ككل.
الالتهاب هو المظهر الرئيسي ل AS27. TNF-α هو السيتوكين متعدد التأثيرات وعامل التهابي ينتج تحت تحفيز الضامة أحادية النواة28. يمكن تثبيط نشاط ALP وتخليق الكولاجين بواسطة TNF-α ، مما يؤدي إلى فقدان العظام وتدمير الغضروف29. في السنوات الأخيرة ، وجدت الدراسات أن IL-17 يلعب دورا مهما في التسبب في AS، والذي تم إثباته بالكامل في مراجعة30. يمكن أن يعمل IL-17 مباشرة على بانيات العظم ، ويعزز التعبير عن عامل النسخ النووي κB (NF-κB) ليجند منشط المستقبلات (RANKL) ، ويعزز التوليد القوي لبانيات العظم. في الوقت نفسه ، يؤثر IL-17 أيضا على الخلايا الجذعية الوسيطة (MSCs) ، مما يؤدي إلى انتشارها وتعزيز تمايزها إلى بانيات العظم31. وجد Kenna32 et al. أن مستوى IL-17 في الدم المحيطي لمرضى AS زاد بمقدار الضعف تقريبا مقارنة بالضوابط الصحية. تشير الدراسة إلى أن مضادات IL-17 قد تكون خيارا جديدا لمرضى AS الذين لا يستجيبون بشكل جيد لمضادات TNF-α33. أظهرت دراسة سريرية أن نظام الجرعات من مضادات IL-17 كان متفوقا على الدواء الوهمي لتحسين علامات وأعراض التهاب المفاصل الفقاري المحوري الشعاعي لدى المرضى34. أظهرت نتائج هذه الدراسة أن مستويات البلازما من TNF-α و IL-17 في المجموعة النموذجية كانت أعلى بكثير من تلك الموجودة في المجموعة الضابطة ، وانخفضت مستويات البلازما من TNF-α و IL-17 بشكل ملحوظ بعد علاج الكى Du.
يستخدم علاج الكى Du بمهارة التقنيات المتوافقة للطب الصيني التقليدي لدمج خطوط الطول ونقاط الوخز والأدوية العشبية الصينية والكي. تضمنت المواد الخام للعلاج بالكي Du بشكل أساسي المخمل moxa والزنجبيل ومسحوق الطب الصيني التقليدي. من منظور الطب الصيني التقليدي ، فإن moxa velvet ، وهو منتج معالج من mugwort ، له وظيفة تنشيط الضمانات ، وتبديد البرد ، وتخفيف الألم. يلعب الزنجبيل دورا في تخفيف الأعراض الخارجية وتبديد البرد. تظهر الأبحاث الحديثة أيضا أن الزنجبيل له خصائص مضادة للالتهابات ومسكنات35. يساعد مسح الجلد بعصير الزنجبيل قبل العلاج على فتح المسام وتعزيز التغلغل عبر الجلد36 ، بالإضافة إلى مساعدة مسحوق الطب الصيني التقليدي على الالتصاق بالجلد. يتم تثبيت عمود الزنجبيل شبه المنحرف بإحكام على الظهر لتوفير قاعدة صلبة لمخروط moxa. بعد حرق مخروط moxa ، تعمل تأثيرات القوة النارية والزنجبيل ومسحوق TCM معا على خط الطول Du. في ضوء التسبب في نقص يانغ في هذا المرض ، يعمل الكى الثنائي مباشرة على موقع المرض ، مما يؤدي إلى ارتفاع درجة حرارة خطوط الطول ، وتفريق البرد ، واستكمال يانغ تشي والجوهر ، وتعزيز الدورة الدموية ، وتحقيق التوازن بين يين ويانغ لعلاج جذر المرض.
عند إجراء Du-mokibustion ، يجب مراعاة العديد من التفاصيل. أولا ، تم إصلاح موقع تشغيل Du-moxibustion ، من نقطة Dazhui (GV14) إلى نقطة Yaoshu (GV2) (تشريحيا من العملية الشائكة السابعة للعمودالفقري العنقي إلى فقرة الذيل ، بما في ذلك العمود الفقري بأكمله) ، وهو ما يتوافق مع موقع حدوث AS (الشكل 4). ثانيا ، الرطوبة وسمك الزنجبيل مهمان. يجب عصر عصير الزنجبيل الزائد بعد معالجة الزنجبيل في طين الزنجبيل بحيث لا يكون لطين الزنجبيل شعور حبيبي ويكون سمكه مناسبا ليتم تحويله إلى عمود الزنجبيل شبه المنحرف. الرطوبة العالية والرطوبة في طين الزنجبيل يمكن أن تعيق بسهولة تغلغل حريق الكى وتقلل من كمية تحفيز الكى. إذا كانت المادة الخام للزنجبيل جافة جدا وكانت الجزيئات كبيرة جدا ، فمن الصعب صنع عمود الزنجبيل شبه المنحرف ، مما يؤدي إلى تغلغل سريع للحرارة وحرق الجلد. ثالثا ، ينبغي النظر في حجم وصلابة مخروط moxa. مخاريط Moxa المستخدمة في الكى في الفئران طولها ~ 4 سم وقطرها 0.5 سم ويجب أن تكون ضيقة في وقت التحضير. اختبار الضيق هو عندما لا يتفكك المخروط حتى بعد سقوطه على السطح. إذا لم يكن مخروط moxa مضغوطا بدرجة كافية ، فسيؤدي ذلك إلى تقليل كمية مخمل moxa ، ووقت احتراق أقصر ، وتقليل القوة النارية. رابعا ، عند إشعال مخروط moxa ، يجب إضاءة رأس مخروط moxa ووسطه وذيله بالبخور الناعم لجعل مخروط moxa يحترق ببطء لتحقيق التأثير المغذي للمد والجزر. خامسا ، المسك عنصر مهم في مسحوق الكى الطبي. في اليوم الثاني بعد الكى ، يجب أن يكون هناك بثور واضحة وضوح الشمس مثل اللآلئ الصغيرة على خط الطول Du.
أكد عدد كبير من الدراسات السريرية الفعالية المحددة ل Du-mokibustion في علاج AS4،5،6. ومع ذلك ، فإن البحث عن آلية عملها في التجارب على يتقدم ببطء. من خلال البحث والابتكار ، قادتنا سنوات من الخبرة في تشغيل Du-moxibustion إلى التحقيق في استخدامه في تجارب الفئران. تصف هذه الورقة بالتفصيل إجراءات التشغيل والاحتياطات الخاصة بالكي المثاني في علاج AS في فئران التجارب. بالإضافة إلى ذلك ، لوحظ تأثير الكى على التنسيق الحركي ومستويات البلازما من TNF-α و IL-17 في الفئران AS. قدمت هذه الدراسة الأساس التجريبي الأساسي لدراسة آلية الكى في علاج AS. لا تزال هناك بعض القيود على هذه الدراسة. على سبيل المثال ، في الدراسات المستقبلية ، سنولي اهتماما لتقييم المعلمات المختلفة مثل الكى الوهمي والجرعة والنطاق ووقت العلاج للحصول على مخططات الجمع الأكثر فعالية. في الدراسات اللاحقة ، يمكن استخدام طرق التصوير لتقييم نتائج العلاج بطريقة أكثر سهولة.
إن احتمال تطبيق علاج الكى Du واعد. يلعب خط الطول Du ، المعروف باسم سفينة الحاكم ، دورا حاسما في تنظيم تدفق Qi والدم في جميع أنحاء الجسم. يتضمن الكى ، وهو علاج صيني تقليدي ، حرق عشبة المريمية على نقاط وخز محددة لتحفيز خطوط الطول وتعزيز آلية الشفاء الذاتي للجسم. بالمقارنة مع الوخز بالإبر ، فإن Du-mokibustion هو مزيج من التقنيات المختلفة التي تعمل على سطح الجسم ، والتي تتميز بخصائص الراحة ومجموعة قوية وواسعة من الإجراءات. علاوة على ذلك ، يركز علاج الكى Du على منطقة الظهر والعمود الفقري ، مستهدفا مسار خط الطول Du. يمكن أن يعزز جهاز المناعة في الجسم ، ويحسن الدورة الدموية ، ويخفف من مختلف الحالات الجسدية والعقلية. أثبت العلاج فعاليته في علاج أمراض مثل الاضطرابات العضلية الهيكلية والحالات العصبية واضطرابات أمراض النساء وقضايا الصحة العقلية. مع التقدم في البحث والتكنولوجيا ، من المتوقع أن يتوسع تطبيق علاج الكى Du أكثر. قد تستكشف الدراسات المستقبلية إمكاناتها في مجالات مثل إدارة الألم ، والحد من التوتر ، واضطرابات الجهاز الهضمي ، وأمراض الجهاز التنفسي. يمكن أن يؤدي الجمع بين المعرفة التقليدية والفهم العلمي الحديث إلى دمج أفضل للعلاج بالكي Du في ممارسات الرعاية الصحية السائدة. في الختام ، يحمل علاج الكى Du وعدا كبيرا في تطبيقه ودمجه في مختلف مجالات الرعاية الصحية. مزيد من البحوث والتجارب السريرية والتعاون بين ممارسي الطب الصيني التقليدي والمتخصصين في الرعاية الصحية الحديثة ضرورية لإطلاق إمكاناتها الكاملة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
ليس لدى المؤلفين أي تضارب في المصالح للإعلان عنه.
Acknowledgments
تم دعم هذا العمل من قبل البرنامج العام للمؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (رقم 82174491) ومشروع الميراث الأكاديمي لمدرسة تشيلو للطب الصيني التقليدي (No. لو ويهان [2020]132). شكرا لمركز المختبر بجامعة شاندونغ للطب الصيني التقليدي لتزويدنا بالظروف التجريبية.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| 10% EDTA | Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| alcohol pads | HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China | ||
| anesthesia machine | Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK | ||
| centrifuge tubes | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| complete Frech's adjuvant (CFA) | aladdin,Shanghai, China | F393378 | |
| cotton ball | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cotton gauze | Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China | ||
| cutting board | self-preparation | ||
| decorin from bovine articular cartilage | Sigma-Aldrich, MO, USA | D8428 | |
| depilatory cream | Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China | ||
| electronic scale | Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| Eppendorf tube | Axygen, Corning, NewYork, UAS | ||
| eye lubricant | Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China | ||
| ginger | self-preparation | ||
| GraphPad Prism 7 software | GraphPad Software,Boston, USA | ||
| hair clipper | Super human Group CO LTD, Jinhua, China | ||
| heating pads | Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China | ||
| incomplete Freund’s adjuvant (IFA) | aladdin,Shanghai, China | F393371 | |
| injection syringe | Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China | ||
| isoflurane | Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China | R510-22-10 | |
| joss stick | Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China | ||
| juicer | Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China | ||
| knife | self-preparation | ||
| lighter | Zhejiang tiger-lighter Co. LTD | ||
| mortar | Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China | ||
| Mouse IL-17 ELISA Kit | absin, Shanghai, China | abs520009-96T | |
| Mouse TNF-α ELISA Kit | Wuhan Sanying, Wuhan, China | KE10002 | |
| mulberry paper | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China | ||
| OFT | Xinruan,Shanghai, China | XR-XZ301 | |
| paper cup | self-preparation | ||
| pipettes | OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK | ||
| refined moxa velvet | self-preparation | ||
| rotarod | Xinruan,Shanghai, China | XR-6C | |
| scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder | Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD | ||
| scissors | Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China | ||
| semi-automatic paraffin sectioning machine | Leica Camera AG, Watznach, Germany | ||
| SPSS 25.0 software | International Business Machines Corporation, NewYork, UAS | ||
| TCM powder | self-preparation | ||
| tips | Biosharp, Labgic, Beijing, China | ||
| writing brush | Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China |
References
- Sieper, J., Poddubnyy, D.
- Lee, W., Reveille, J. D., Weisman, M. H. Women with ankylosing spondylitis: a review. Arthritis Rheum. 59 (3), 449-454 (2008).
- Sari, İ, Öztürk, M. A., Akkoç, N.
- Zhang, L., et al. Governor vessel moxibustion: Ancient Chinese medical technology with new vitality. Chin J Integr Med. 23 (5), 396-400 (2017).
- Hu, J., et al. Moxibustion for the treatment of ankylosing spondylitis: a systematic review and meta-analysis. Ann Palliat Med. 9 (3), 709-720 (2020).
- Liu, Y., Wang, P., Sun, Y. Y., Qu, J., Li, M. Efficacy of thunder-fire moxibustion in treating ankylosing spondylitis of kidney deficiency and governor meridian cold and its influence on TNF-α and RANKL: study protocol for a prospective, nonblinded, single-center, randomized controlled trial. Trials. 23 (1), 344 (2022).
- Chong, G. Q., Ma, Y., Sun, H. S., Zhang, T., Peng, W. Study on clinical and analgesic mechanism of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. J Clin Acupunct Moxib. (06), 48-49 (1999).
- Liu, W. Q., Lu, X. H. Clinical observation of Melilotus extract tablets combined with Dujiu for treating ankylosing spondylitis. Pharm Res. 35 (03), 182-184 (2016).
- Zhang, Y. L., Lin, J. H., Zhou, Y. Y., Zhao, G. Q., He, Y. T. Clinical observation of Bushen Qiangdu Zhilou decoction combined Du-moxibustion in treating ankylosing spondylitis. Chin J Exp Tradit Med Formulae. 21 (10), 190-194 (2015).
- Guo, L. J., et al. Clinical effect of moxibustion at governor vessel combined with Bushen Quhan Huashi prescription for ankylosing spondylitis and its effect on levels of CTX-I and DKK1 in serum. New Chin Med. 53 (10), 117-121 (2021).
- Deng, Y. X. Governor moxibustion treatment of ankylosing spondylitis the adjustment of the T-cell subsets observed. J Practical Tradi Chin Inter Med. 26 (18), 77-78 (2012).
- Wang, Y. Q. Mechanism of exercise combined with moxibustion in the treatment of osteoporosis in castrated rats. Chin J Gerontol. 37 (04), 839-840 (2017).
- Ren, J. Y., Li, F., Yan, J., Wan, C., Cai, L. Clinical study of Du-moxibustion combined with needling Huatuo Jiaji acupoint in the treatment of AS of kidney-Yang deficiency. J Clin Acupunct Moxib. 35 (06), 41-44 (2019).
- Xu, X., et al. Metabolomic analysis of biochemical changes in the tissue and urine of proteoglycan-induced spondylitis in mice after treatment with moxibustion. Integr Med Res. 10 (1), 100428 (2021).
- Xu, X., et al. Moxibustion attenuates inflammation and alleviates axial spondyloarthritis in mice: Possible role of APOE in the inhibition of the Wnt pathway. J Tradit Complement Med. 12 (5), 518-528 (2022).
- Li, X., et al. Inflammation intensity-dependent expression of osteoinductive wnt proteins is critical for ectopic new bone formation in ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 70, 1056-1070 (2018).
- Cui, H., et al. CXCL12/CXCR4-Rac1-mediated migration of osteogenic precursor cells contributes to pathological new bone formation in ankylosing spondylitis. Sci Adv. 8 (14), eabl8054 (2022).
- Braem, K., Lories, R. J. Insights into the pathophysiology of ankylosing spondylitis: contributions from animal models. Joint Bone Spine. 79 (3), 243-248 (2012).
- Mikecz, K., Glant, T. T., Poole, A. R. Immunity to cartilage proteoglycans in BALB/c mice with progressive polyarthritis and ankylosing spondylitis induced by injection of human cartilage proteoglycan. Arthritis Rheum. 30, 306-318 (1987).
- Li, Z., et al. Tenascin-C-mediated suppression of extracellular matrix adhesion force promotes entheseal new bone formation through activation of Hippo signalling in ankylosing spondylitis. Ann Rheum Dis. 80 (7), 891-902 (2021).
- Glant, T. T., Cs-Szabo´, G., Nagase, H., Jacobs, J. J., Mikecz, K. Progressive polyarthritis induced in BALB/c mice by aggrecan from human osteoarthritis cartilage. Arthritis Rheum. 41, 1007-1018 (1998).
- Hu, B., Li, Y., Tan, J. Research progress of moxibustion in the treatment of ankylosing spondylitis. Rheum & Arthritis. 11 (05), 77-80 (2022).
- Yang, Y., Dong, Q., Li, R. Matrine induces the apoptosis of fibroblast-like synoviocytes derived from rats with collagen-induced arthritis by suppressing the activation of the JAK/STAT signaling pathway. Int J Mol Med. 39 (2), 307-316 (2017).
- Shiotsuki, H., et al. A rotarod test for evaluation of motor skill learning. J Neurosci Methods. 189 (2), 180-185 (2010).
- Liu, P., et al. A mouse model of ankle-subtalar joint complex instability induced post-traumatic osteoarthritis. J Orthop Surg Res. 16 (1), 541 (2021).
- Taurog, J. D., Chhabra, A., Colbert, R. A. Ankylosing spondylitis and axial spondyloarthritis. N. Engl. J. Med. 374, 2563-2574 (2016).
- Schett, G., et al. Enthesitis: From pathophysiology to treatment. Nat. Rev. Rheumatol. 13, 731-741 (2017).
- Duan, W. X., et al. Effect of different concentrations of Moxa-smoke on lung function and TNF-α and IL-1 β levels in serum and lung tissues in normal rats. Zhen Ci Yan Jiu [Acupuncture Research]. 43 (2), 98-103 (2018).
- Callhoff, J., Sieper, J., Weiß, A., Zink, A., Listing, J. Efficacy of TNFα blockers in patients with ankylosing spondylitis and non-radiographic axial spondyloarthritis: a meta-analysis. Ann Rheum Dis. 74 (6), 1241-1248 (2015).
- Schinocca, C., et al. Role of the IL-23/IL-17 pathway in rheumatic diseases: an overview. Front Immunol. 12, 637829 (2021).
- Gravallese, E. M., Schett, G. Effects of the IL-23-IL-17 pathway on bone in spondyloarthritis. Nat Rev Rheumatol. 14 (11), 631-640 (2018).
- Kenna, T. J., et al. Enrichment of circulating interleukin-17-secreting interleukin-23 receptor-positive γ/δ T cells in patients with active ankylosing spondylitis. Arthritis Rheum. 64 (5), 1420-1429 (2012).
- Poddubnyy, D., Sieper, J. Treatment of axial spondyloarthritis: what does the future hold. Curr Rheumatol Rep. 22 (9), 47 (2020).
- van der, H. D., et al. COAST-V study group. Ixekizumab, an interleukin-17A antagonist in the treatment of ankylosing spondylitis or radiographic axial spondyloarthritis in patients previously untreated with biological disease-modifying anti-rheumatic drugs (COAST-V): 16 week results of a phase 3 randomised, double-blind, active-controlled and placebo-controlled. Lancet. 392 (10163), 2441-2451 (2018).
- Fu, Y. S., et al. Pharmacological properties and underlying mechanisms of curcumin and prospects in medicinal potential. Biomed Pharmacother. 141, 111888 (2021).
- Hassan, A. S., Hofni, A., Abourehab, M. A. S., Abdel-Rahman, I. A. M. Ginger extract-loaded transethosomes for effective transdermal permeation and anti-inflammation in rat model. Int J Nanomedicine. 18, 1259-1280 (2023).
