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Immunology and Infection

एंकिलोज़िंग स्पॉन्डिलाइटिस के माउस मॉडल में डु-मोक्सीबस्टन

Published: October 27, 2023 doi: 10.3791/65586
Automatic Translation
1, 1, 2, 1, 3, 1, 2, 1
1School of Acupuncture-Moxibustion and Tuina, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 2School of First Clinical Medicine, Shandong University of Traditional Chinese Medicine, 3External Treatment Center, Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine

Summary

यह पत्र प्रयोगात्मक चूहों में एंकिलोज़िंग स्पॉन्डिलाइटिस के उपचार में ड्यू-मोक्सीबस्टन के दौरान की जाने वाली ऑपरेशन प्रक्रियाओं और सावधानियों का विस्तार से वर्णन करता है।

Abstract

एंकिलोज़िंग स्पॉन्डिलाइटिस (एएस) गठिया का एक उत्तरोत्तर बिगड़ता और अक्षम करने वाला रूप है जो मुख्य रूप से अक्षीय कंकाल को प्रभावित करता है। इस बीमारी में मुख्य रूप से रीढ़ और त्रिक संयुक्त शामिल हैं। रीढ़ और त्रिक जोड़ का संलयन रोग के बाद के चरण में हो सकता है, जिसके परिणामस्वरूप रीढ़ की हड्डी में कठोरता और किफोसिस हो सकता है, साथ ही चलने में कठिनाई होती है, जो काम की गुणवत्ता और दैनिक जीवन की गतिविधियों को गंभीरता से प्रभावित करती है और रोगी, परिवार और समाज पर भारी बोझ डालती है। एएस के लिए वैकल्पिक चिकित्सा के रूप में गैर-फार्माकोथेरेपी पर ध्यान दिया गया है। मोक्सीबस्टन एक प्राचीन चिकित्सीय तकनीक है जिसका उपयोग पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) में किया जाता है। डु-मोक्सीबस्टन थेरेपी, साधारण मोक्सीबस्टन के आधार पर विकसित एक अद्वितीय और अभिनव बाहरी उपचार, एएस पर एक निश्चित चिकित्सीय प्रभाव है। डु-मोक्सीबस्टन कुशलता से टीसीएम की संगत तकनीकों को मेरिडियन, एक्यूपॉइंट्स, चीनी हर्बल दवा और मोक्सीबस्टन को एकीकृत करने के लिए जोड़ती है। यह पत्र एएस के उपचार में डु-मोक्सीबस्टन के तंत्र के अध्ययन के लिए एक प्रयोगात्मक आधार प्रदान करने के लिए प्रयोगात्मक चूहों में डु-मोक्सीबस्टन के दौरान ली जाने वाली ऑपरेशन प्रक्रियाओं और सावधानियों का विस्तार से वर्णन करता है।

Introduction

एंकिलोज़िंग स्पॉन्डिलाइटिस (एएस) गठिया का एक उत्तरोत्तर बिगड़ता और अक्षम करने वाला रूप है जो मुख्य रूप से अक्षीय कंकाल को प्रभावित करता है। नवीनतम महामारी विज्ञान सर्वेक्षण के अनुसार, दुनिया में ~ 0.01% -1.8% लोग इस स्थिति से पीड़ित हैं1, जिनमें से अधिकांश युवा पुरुष हैं (पुरुष से महिला अनुपात ~ 2-3: 1)2 है। चीनी आबादी में एएस की घटना 0.2% -0.4% है। इस बीमारी में मुख्य रूप से रीढ़ और त्रिक संयुक्त शामिल हैं। रीढ़ और त्रिक जोड़ का संलयन रोग के बाद के चरणों में हो सकता है, जिसके परिणामस्वरूप रीढ़ की हड्डी में कठोरता और किफोसिस हो सकता है, साथ ही चलने में कठिनाई होती है, जो काम की गुणवत्ता और दैनिक जीवन की गतिविधियों को गंभीरता से प्रभावित करती है और रोगी, परिवारऔर समाज पर भारी बोझ डालती है। वर्तमान में, एएस के लिए कोई निश्चित समाधान नहीं है, और प्रदान किए गए उपचार, औषधीय और गैर-औषधीय दोनों, मुख्य रूप से दर्द को कम करने, रोग की प्रगति को धीमा करने और जीवन की गुणवत्ता को बढ़ाने पर ध्यान केंद्रित करते हैं। हाल के वर्षों में, क्योंकि फार्माकोथेरेप्यूटिक विकल्पबहुत सीमित रहे हैं, गैर-फार्माकोथेरेपी पर ध्यान दिया गया है, जो एएस के लिए एक वैकल्पिक चिकित्सा बन गया है। चीन में, रोगी अक्सर पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) से युक्त बाहरी उपचार पसंद करते हैं, जिसमें उपचार के दौरान मामूली दुष्प्रभाव और बड़ी सुविधा होती है।

मोक्सीबस्टन एक प्राचीन चिकित्सीय तकनीक है जिसका उपयोग टीसीएम में किया जाता है। डु-मोक्सीबस्टन एक बाहरी उपचार तकनीक है जिसमें डु मेरिडियन के रीढ़ खंड पर "फोम के साथ औषधीय मोक्सीबस्टन" शामिल है। यह मुख्य रूप से एएस के उपचार में उपयोग किया जाता है और इसने सुरक्षा और प्रभावशीलता दिखाई है। साधारण मोक्सीबस्टन की तुलना में, डु-मोक्सीबस्टन में एक विस्तृत मोक्सीबस्टन क्षेत्र, एक बड़ा मोक्सा शंकु, मजबूत मारक क्षमता और उच्च तापमान4 की विशेषताएं हैं। एक व्यवस्थित समीक्षा और मेटा-विश्लेषण से पता चलता है कि मोक्सीबस्टन एएस5 के लिए एक प्रभावी पूरक उपचार है। एक हालिया अध्ययन ने पुष्टि की कि नैदानिक लक्षणों और एएस रोगियों के कुछ भड़काऊ कारकों को मोक्सीबस्टन6 द्वारा सुधार किया गया था। अध्ययनों से पता चला है कि डु-मोक्सीबस्टन β-एंडोर्फिन की मस्तिष्क सामग्री को बढ़ा सकता है और एक केंद्रीय एनाल्जेसिक प्रभाव7 डाल सकता है, एचएलए-बी 27 जीन8 की अभिव्यक्ति को डाउनरेगुलेट कर सकता है, और एएस की पुनरावृत्ति दर में देरी कर सकता है। डु-मोक्सीबस्टन का भड़काऊ सूचकांक ईएसआर (ईएसआर) और सी-रिएक्टिव प्रोटीन (सीआरपी), टाइप I कोलेजन (सीटीएक्स-आई) के सी-टर्मिनल पेप्टाइड और डिककोफ 1 प्रोटीन (डीकेके 1) 9,10 के स्तर को कम करके एएस की प्रगति पर एक सुधारात्मक प्रभाव पड़ता है।

एक अन्य नैदानिक अध्ययन से पता चला है कि डु-मोक्सीबस्टन आगे अव्यवस्थित टी सेल सबसेट, आईजी को समायोजित कर सकता है, और प्रतिरक्षा तंत्र11 को संतुलित करने के लिए सी 3 को पूरक कर सकता है। हड्डी चयापचय के संदर्भ में, मोक्सीबस्टन सीरम क्षारीय फॉस्फेट (एएलपी) और सीरम फास्फोरस (एस-पी) के उदय को रोक सकता है, सीरम कैल्शियम (एस-सीए), अस्थि खनिज घनत्व (बीएमडी), और हड्डीकी ताकत 12 बढ़ा सकता है। इसके अलावा, डु-मोक्सीबस्टन एएस रोगियों13 में थकान के लक्षणों को दूर करने के लिए कई बिंदुओं पर रीढ़ की हड्डी के कार्य की मरम्मत कर सकता है। कुछ जानवरों के अध्ययन ने एएस के इलाज में मोक्सीबस्टन के संभावित तंत्र का खुलासा किया है। एक अध्ययन ने संकेत दिया कि मोक्सीबस्टन ने समग्र स्वास्थ्य स्थिति में काफी सुधार किया, पंजा की मोटाई के स्तर को कम किया, और रीढ़ के लिगामेंट ऊतक नमूनों में IL-1β, PGE2, IL-6 और TNF-α के स्तर में कमी आई। मेटाबोलिक मार्ग विश्लेषण टीसीए चक्र, साथ ही लिपिड, एमिनो एसिड, आंतों वनस्पतियों, और प्यूरीन चयापचय14 की पहचान चयापचयों से जुड़े. एक अन्य अध्ययन से पता चला है कि मोक्सीबस्टन ने प्रो-इंफ्लेमेटरी साइटोकिन्स, IL-1β, TNF-α, IL-17 और IL-6 की अभिव्यक्ति को दबा दिया; RANKL, RANK, ALP और OCN के mRNA स्तरों को कम किया; और एएस चूहों15 में हिस्टोपैथोलॉजिकल सुविधाओं में सुधार।

हालांकि इन अध्ययनों से पता चलता है कि एएस के उपचार में मोक्सीबस्टन प्रभावी हो सकता है, इन निष्कर्षों की पुष्टि करने और एएस के रोगियों में मोक्सीबस्टन के लिए इष्टतम उपचार प्रोटोकॉल निर्धारित करने के लिए अधिक शोध की आवश्यकता है। हमारी टीम ने पारंपरिक चीनी मोक्सीबस्टन के मूल सिद्धांत और व्यावहारिक संचालन के आधार पर मोक्सीबस्टन थेरेपी को बनाया और संशोधित किया, जिसे 35 वर्षों से चीनी नैदानिक अभ्यास में व्यापक रूप से किया और लागू किया गया है। यद्यपि ड्यू-मोक्सीबस्टन द्वारा एएस के उपचार पर कुछ उच्च गुणवत्ता वाले अध्ययन हैं, एएस के इलाज में इसके संकेत को साक्ष्य द्वारा समर्थित किया गया है। हालांकि, ड्यू-मोक्सीबस्टन के साथ एएस के इलाज का तंत्र आगे के अध्ययन के योग्य है। एएस के उपचार में ड्यू-मोक्सीबस्टन के तंत्र का पता लगाने के लिए पशु अध्ययन एक महत्वपूर्ण तरीका है। डु-मोक्सीबस्टन का नैदानिक संचालन अपेक्षाकृत परिपक्व है लेकिन शायद ही कभी पशु प्रयोगों में तंत्र के अध्ययन में उपयोग किया जाता है। यह पत्र विस्तार से आपरेशन और सावधानियों के रूप में प्रयोगात्मक चूहों के उपचार में Du-moxibustion के दौरान लिया जाना वर्णन करता है.

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Protocol

सभी पशु प्रयोगों को पारंपरिक चीनी चिकित्सा के शेडोंग विश्वविद्यालय की प्रायोगिक पशु कल्याण नैतिकता समीक्षा समिति द्वारा अनुमोदित किया गया था। SDUTCM20230831301)।

1. पशु तैयारी

  1. प्रयोगात्मक समूहों और अग्रिम में प्रति समूह जानवरों की संख्या निर्धारित करें.
  2. नर BALb/c चूहों का चयन करें, उन्हें 22 ± 1 °C, 60 ± 5% की निरंतर आर्द्रता और 12 घंटे दैनिक चक्र प्रकाश वातावरण के निरंतर तापमान पर रखें।

2. एएस माउस मॉडल की स्थापना

नोट: एएस मॉडल उपास्थि प्रोटीओग्लाइकन (पीजी) के साथ प्रेरित किया गया था, जो एक क्लासिक मॉडलिंग विधि 16,17,18,19,20,21 है। बीएएलबी / सी तनाव चूहों को टेंडिनाइटिस और स्पॉन्डिलाइटिस को प्रेरित करने के लिए पीजी के साथ बार-बार प्रतिरक्षित किया गया था। इस प्रोटोकॉल में उपयोग की जाने वाली सामग्री, अभिकर्मकों और उपकरणों से संबंधित विवरण के लिए सामग्री की तालिका देखें।

  1. पीजी और सीएफए (या आईएफए) के 200 माइक्रोन को 1.5 एमएल अपकेंद्रित्र ट्यूब में खींचने के लिए 200 माइक्रोन पिपेट का उपयोग करें। अपकेंद्रित्र ट्यूब में तरल मिश्रण करने के लिए धीरे मिलाते हुए।
  2. homogenization के लिए ऊतक चक्की में अपकेंद्रित्र ट्यूब प्लेस और फिर 4 मिनट के लिए बर्फ पर सेते हैं. 5x दोहराएँ. ऊतक की चक्की में निम्नलिखित पैरामीटर सेट करें: 60 हर्ट्ज, 30 एस पीसने, कुल 6 चक्रों के लिए अंतराल 10 एस।
  3. 1 एमएल सिरिंज के साथ अपकेंद्रित्र ट्यूब से पायसीकृत पीजी प्रोटीन के 0.2 एमएल निकालें।
  4. पकड़ो और बाएं हाथ से माउस को ठीक करें। एक लापरवाह स्थिति में माउस रखना, सिर पेट के अंगों को नुकसान को रोकने के लिए पूंछ से कम रखने जब सिरिंज डाला जाता है.
  5. दाहिने हाथ का उपयोग करके अल्कोहल स्वैब के साथ पेट को जीवाणुरहित करें।
  6. दाहिने हाथ में सिरिंज के साथ, पेट के निचले आधे हिस्से में linea अल्बा ventralis के बाईं या दाईं ओर चमड़े के नीचे थोड़ा सुई डालें.
  7. सुई को 3-5 मिमी चमड़े के नीचे मध्य पेट की रेखा के समानांतर धकेलें और फिर सुई को त्वचा के लिए 45 डिग्री कोण पर पेट की गुहा में धकेलें।
  8. पेरिटोनियम में प्रवेश करें, सुई प्लग को वापस लें, और धीरे-धीरे पायसीकृत पीजी प्रोटीन इंजेक्ट करें।

3. डु-मोक्सीबस्टन

नोट: डु-मोक्सीबस्टन (चित्रा 1) के लिए तीन सबसे महत्वपूर्ण कच्चे माल को पहले से तैयार करें।

  1. मोक्सा शंकु तैयार करें। मखमल को हाथ में लें, दो हथेलियों के साथ विपरीत दिशाओं का सामना करना पड़ रहा है, जो मखमल को धुरी के आकार में रगड़ने के लिए एक घुमा बल लगाता है (चित्र 2)
  2. अदरक को छोटे टुकड़ों में काट लें और इसे जूसर (चित्र 3) में प्यूरी कर लें। कपास धुंध के माध्यम से अदरक प्यूरी को फ़िल्टर करें। अगले चरण की तैयारी के लिए अदरक का रस और अदरक की मिट्टी को अदरक प्यूरी से अलग करें।
  3. 10 ग्राम अदरक की मिट्टी और 20 एमएल अदरक का रस तैयार करें और बाद में उपयोग के लिए उन्हें पेपर कप में रखें।
  4. 0.1 ग्राम टीसीएम पाउडर (दालचीनी पाउडर, लौंग पाउडर, नोटोप्टेरिगियम पाउडर, एंथरिडिन पाउडर और कृत्रिम कस्तूरी का मिश्रण)22 तौलें और इसे मोर्टार में पीस लें।
  5. पशु संज्ञाहरण मशीन के संज्ञाहरण प्रेरण बॉक्स में चूहों प्लेस और उन्हें 2-3% isoflurane और 2 एल / मिनट की प्रवाह दर पर ऑक्सीजन के मिश्रण के साथ संवेदनाहारी.
  6. शुरू में एक चौंका पलटा की अनुपस्थिति को देखकर संज्ञाहरण की गहराई का आकलन करें और एक कोमल पैर की अंगुली चुटकी के जवाब में पेडल पलटा की अनुपस्थिति की जांच करके सर्जिकल संज्ञाहरण के स्तर को सत्यापित करें।
  7. माउस सर्जिकल विमान संज्ञाहरण तक पहुँच गया है के बाद, यह बॉक्स से बाहर ले और एक प्रवण स्थिति में ऑपरेटिंग टेबल पर यह ठीक. माउस के मुंह और नाक को संवेदनाहारी के आउटलेट के साथ संरेखित करें।
  8. संवेदनाहारी मशीन से जुड़े एक मुखौटा के माध्यम से संज्ञाहरण का प्रशासन करें, जिसके माध्यम से आइसोफ्लुरेन और ऑक्सीजन को गैर-रिब्रीदिंग सर्किट के माध्यम से वितरित किया जाता है। संज्ञाहरण बनाए रखें और पूरे परिचालन प्रक्रिया के दौरान माउस को 37 डिग्री सेल्सियस हीटिंग पैड पर रखें। निर्जलीकरण को रोकने के लिए आंखों पर स्नेहक लागू करें।
  9. एक्यूपॉइंट्स का पता लगाएँ और उत्तेजना क्षेत्र (चित्रा 4) की पहचान करें।
  10. माउस की पीठ पर बाल दाढ़ी जब तक माउस की पीठ पर मांस के रंग की त्वचा देखा जाता है. सुनिश्चित करें कि बालों को हटाने की चौड़ाई ~ 1.5 सेमी है और लंबाई सातवीं ग्रीवा कशेरुका से पूंछ कशेरुका(चित्रा 5ए)तक है।
  11. मुंडा क्षेत्र (चित्रा 3) के लिए एक कपास धुंध के साथ तैयार अदरक का रस लागू करें.
  12. माउस के पीछे की मध्य रेखा पर एक लेखन ब्रश के साथ समान रूप से टीसीएम पाउडर छिड़कें और शहतूत कागज (चित्रा 5 बी-डी) के साथ इसे कवर करें।
  13. अदरक की मिट्टी के साथ 6 सेमी लंबा, 1.5 सेमी चौड़ा और 3 मिमी मोटा एक ट्रेपोजॉइडल अदरक कॉलम बनाएं। शहतूत कागज (चित्रा 5E) पर अदरक स्तंभ को ठीक करें।
  14. अदरक स्तंभ (चित्रा 3) के midline ऊपर एक नाली बनाओ, और अदरक स्तंभ पर मोक्सा शंकु जगह.
  15. मोक्सा शंकु को हल्का करें, पिछले एक के जलने के बाद एक नया मोक्सा शंकु रखें। माउस को जलाने से रोकने के लिए अदरक स्तंभ की दृढ़ता की जाँच करें, तीन शंकु (चित्रा 5F) की कुल जलने.
  16. मोक्सा शंकु के जलने के बाद, अदरक और टीसीएम पाउडर को मिटा दें, और माउस के पिछले हिस्से को साफ करें। इस बिंदु पर संज्ञाहरण बंद कर दें।
  17. माउस भोजन और पानी के लिए अप्रतिबंधित उपयोग के साथ एक नए पिंजरे में चेतना हासिल करने के लिए अनुमति दें. वसूली प्रक्रिया में सहायता के लिए पिंजरे को गर्म पैड पर रखें। जानवर की निगरानी करें जब तक कि वह पर्याप्त चेतना प्राप्त न कर ले।
  18. एक बार माउस पूरी तरह से ठीक हो गया है, यह अपने नियमित रूप से आवास के लिए लौटने से पहले सही पलटा की उपस्थिति की पुष्टि.
    नोट: ऑपरेशन के दौरान, कमजोर श्वास से बचने के लिए चूहों की मानसिक स्थिति की निगरानी करना आवश्यक है। जलने से रोकें, लेकिन चूहों को गर्म रखें, और पंजे और पूंछ की चोट से बचें।

4. गठिया सूचकांक (एआई) का मूल्यांकन

  1. एआई स्कोर का तीन बार मूल्यांकन करें: मॉडलिंग से पहले, मॉडलिंग के बाद और उपचार के बाद। मूल्यांकन मानक इस प्रकार हैं: 0, कोई लालिमा या सूजन नहीं; 1, कुछ पैर की उंगलियों में मामूली लालिमा या सूजन; 2, अधिकांश पैर की अंगुली जोड़ों और पैर की उंगलियों में लालिमा और सूजन; 3, पैरों में गंभीर लालिमा और सूजन और टखने के जोड़ के नीचे; और 4, पैरों और टखने के जोड़ में लालिमा और सूजन23.
  2. 16 के अधिकतम मूल्य के साथ सभी चार पंजे के एआई स्कोर की गणना करें।

5. रोटरोड परीक्षण

नोट: रोटारोड परीक्षण का उपयोग घूर्णन ड्रम पर चूहों द्वारा खर्च किए गए समय को रिकॉर्ड करके मोटर समन्वय और संतुलन का आकलन करने के लिए किया जाता है। इस प्रयोग में 20 मिनट के अंतराल से अलग तीन परीक्षण शामिल थे। आधिकारिक परीक्षण डेटा तीसरे परीक्षण से दर्ज किए गए थे, जिसमें पहले दो प्रशिक्षण अभ्यास के रूप में सेवारत थे।

  1. घूर्णन ड्रम है कि 300 एस24 से अधिक 40 से 40 आरपीएम से निरंतर त्वरण के तहत बारी से चूहों प्लेस.
  2. विलंबता समय (माउस रॉड से गिरने तक का समय) को मापें। गिरने पर चोट को रोकने के लिए पैडिंग प्रदान करें।

6. ओपन फील्ड टेस्ट (ओएफटी)

नोट: ओएफटी का उपयोग स्वायत्त आंदोलन की स्थिति का मूल्यांकन करने के लिए किया जाता है, जिसका उद्देश्य रोग संबंधी व्यवहार की पहचान करना है। तंत्र बनाने के लिए चार वर्ग खुले मैदान के एरेनास (50 सेमी x 50 सेमी x 40 सेमी) को एक साथ रखा गया था। बॉक्स के नीचे नौ बराबर वर्गों में विभाजित किया गया था।

  1. प्रयोगशाला की पृष्ठभूमि शोर को 65 डीबी से नीचे नियंत्रित करें।
  2. प्रत्येक परीक्षण से पहले 75% इथेनॉल के साथ पूरे तंत्र पोंछें.
  3. परीक्षण कक्ष में सभी चूहों प्लेस 1 घंटे परीक्षण से पहले उन्हें अपने पर्यावरण के अनुकूल करने के लिए अनुमति देने के लिए.
  4. वर्ग खुले मैदान एरेनास में चूहों रखो और उन्हें 10 मिनट के लिए पता लगाने के लिए अनुमति देते हैं.
  5. 10 मिनट के लिए कुल दूरी और आंदोलन की गति रिकॉर्ड।

7. इच्छामृत्यु और नमूना संग्रह

  1. माउस को एनेस्थीसिया इंडक्शन बॉक्स में रखें और इसे 2-3% आइसोफ्लुरेन और ऑक्सीजन के मिश्रण के साथ 2 एल/मिनट की प्रवाह दर पर एनेस्थेटाइज करें। एक बार माउस गहरी संज्ञाहरण पेडल पलटा की कमी से पुष्टि की एक राज्य में प्रवेश करता है, रखरखाव संज्ञाहरण के लिए ऑपरेटिंग टेबल के लिए हस्तांतरण.
  2. पकड़ो और गैर प्रमुख हाथ से माउस को ठीक करो.
  3. नेत्रगोलक को भीड़भाड़ और बाहर निकलने के लिए आंखों के क्षेत्र पर हल्के से दबाएं।
  4. बाल की वजह से hemolysis को रोकने के लिए माउस की मूंछों ट्रिम करने के लिए कैंची का प्रयोग करें.
  5. एक पैर की अंगुली चुटकी के जवाब में एक पेडल पलटा की अनुपस्थिति के लिए जाँच करके संज्ञाहरण की गहराई की पुष्टि करें. नेत्रगोलक समझ और जल्दी से इसे हटाने के लिए संदंश का प्रयोग करें, आंख सॉकेट से एक microcentrifuge ट्यूब में रक्त प्रवाह करने के लिए अनुमति देता है.
    नोट: वैकल्पिक रक्त संग्रह विधियों, जैसे कार्डियक पंचर, का भी उपयोग किया जा सकता है।
  6. जब रक्त टपकने की दर धीमी हो जाती है, तो रक्त पंपिंग को तेज करने और अधिक रक्त प्राप्त करने के लिए माउस के हृदय क्षेत्र पर धीरे से दबाएं। फिर, गर्भाशय ग्रीवा अव्यवस्था का उपयोग माउस euthanize.
  7. गैर-प्रमुख हाथ में संदंश का उपयोग करके टखने के जोड़ के ठीक ऊपर पैर पकड़ें। फिर, कैंची का उपयोग करके पैर को टखने के जोड़ के ठीक ऊपर काट लें।

8. हिस्टोलॉजिकल विश्लेषण

  1. 24 घंटे से अधिक के लिए 4% पैराफॉर्मलडिहाइड में टखने के नमूनों को विसर्जित करें। 10 महीने के लिए 7.4% EDTA (pH = 1) में डिकैल्सीफाई करें।
  2. नमूनों को 2 घंटे के लिए 4% पैराफॉर्मलडिहाइड में भिगोएँ।
  3. फिर, नमूनों को इथेनॉल सांद्रता (70%, 80%, 90%, 100%, 100%, 100%) बढ़ाने के ढाल में भिगोएँ। 1 घंटे के लिए प्रत्येक इथेनॉल एकाग्रता भिगोएँ।
  4. नमूनों को 3 घंटे के लिए xylene में भिगोएँ।
  5. 7 घंटे के लिए पैराफिन में टखने के नमूनों को विसर्जित करें। एक 4 डिग्री सेल्सियस रेफ्रिजरेटर में पैराफिन ब्लॉक अलग सेट.
  6. स्लाइस पैराफिन एक अर्द्ध स्वचालित पैराफिन सेक्शनिंग मशीन का उपयोग कर 6 माइक्रोन की मोटाई के लिए ब्लॉकों.
  7. dewaxing पूरा करने के लिए xylene में 4 x 5 मिनट के लिए स्लाइस भिगोएँ.
  8. प्रत्येक 2 मिनट के लिए इथेनॉल सांद्रता (100%, 100%, 95%, 75%) कम करने की एक ढाल में स्लाइस भिगोएँ. 2 मिनट के लिए आसुत जल में भिगोएँ.
  9. 10 मिनट के लिए hematoxylin के साथ स्लाइस दाग और 5 एस के लिए आसुत जल के साथ कुल्ला.
  10. भेदभाव तरल पदार्थ में 30 एस के लिए स्लाइस भिगोएँ और 5 एस के लिए आसुत जल से कुल्ला।
  11. 1 मिनट के लिए ईोसिन के साथ स्लाइस दाग और 3 मिनट के लिए आसुत जल के साथ कुल्ला.
  12. प्रत्येक 1 मिनट के लिए इथेनॉल सांद्रता (80%, 95%, 100%, 100%) बढ़ाने की एक ढाल में स्लाइस भिगोएँ। 3 x 3 मिनट के लिए xylene में भिगोएँ और स्लाइस25 सील करें।

9. एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (एलिसा)

  1. निर्माताओं के निर्देशों के अनुसार संबंधित किट का उपयोग करके प्लाज्मा में IL-17 और TNF-α सांद्रता को मापें।

10. सांख्यिकीय विश्लेषण

  1. डेटा को माध्य ± मानक त्रुटि के रूप में व्यक्त करें (SEM)।
  2. विचरण (एनोवा) या दो-तरफा दोहराया उपायों एनोवा के एक तरफ़ा विश्लेषण के माध्यम से महत्व निर्धारित करें, इसके बाद बोनफेरोनी या तम्हाने टी 2 के पोस्ट हॉक परीक्षण किए जाते हैं।
  3. P < 0.05 को सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण मानें।

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Representative Results

पीजी-प्रेरित मॉडल चूहों ने परिधीय गठिया के लक्षण विकसित किए, जो चरम सीमाओं और पैर की उंगलियों की लालिमा और सूजन की विशेषता है, और धीरे-धीरे सप्ताह 14 के रूप में अक्षीय गठिया विकसित हुआ, जो एएस की अभिव्यक्ति के समान है। इसलिए, एएस माउस मॉडल को सफल माना जाता था यदि गठिया सूचकांक (एआई) अंतिम इंजेक्शन22 के बाद 14 सप्ताह में 3 अंक से अधिक था। जब चूहों के पंजे सूजे हुए दिखाई दिए, तो कुल 3x के लिए सप्ताह में एक बार डु-मोक्सीबस्टन उपचार किया गया। उपचार के बाद, चूहों को आइसोफ्लुरेन गहरी संज्ञाहरण के तहत गर्भाशय ग्रीवा अव्यवस्था द्वारा इच्छामृत्यु दी गई थी, उनका रक्त एकत्र किया गया था, और टखनों को उत्तेजित किया गया था।

मोटर कोडिनेशन और स्वायत्त आंदोलन पर डु-मोक्सीबस्टन के प्रभाव
बोवाइन पीजी-प्रेरित एएस को मोटर समन्वय पर डु मेरिडियन में डु-मोक्सीबस्टन के प्रभाव का निरीक्षण करने के लिए एक मॉडल के रूप में अपनाया गया था। प्रारंभ में, संयुक्त सूजन स्कोर का उपयोग यह आकलन करने के लिए किया गया था कि क्या मॉडल सफल था, और रोटरोड परीक्षण और ओएफटी का उपयोग करके मोटर समन्वय और स्वायत्त आंदोलन का मूल्यांकन किया गया था।

एआई के मूल्यांकन ने परिधीय गठिया की गंभीरता को निर्धारित किया। मॉडलिंग के बाद, दो-तरफा दोहराए गए उपायों एनोवा ने खुलासा किया कि मॉडल और डु-मोक्सीबस्टन समूहों में संयुक्त सूजन स्कोर डु-मोक्सीबस्टन (पी < 0.01; चित्रा 6 ए)। डु-मोक्सीबस्टन उपचार ने डु-मोक्सीबस्टन के बाद मॉडल समूह की तुलना में संयुक्त सूजन स्कोर में कमी की (पी < 0.05; चित्रा 6 ए)।

रोटरोड परीक्षण मोटर समन्वय और संतुलन का मूल्यांकन करने के लिए नियोजित किया गया था। दो-तरफा दोहराए गए उपायों एनोवा ने समय के साथ महत्वपूर्ण अंतर प्रकट किया (एफ = 13.928, पी = 0.000 < 0.05) और समय और समूह के इंटरैक्शन प्रभाव (एफ = 12.583, पी = 0.000 < 0.05)। मॉडलिंग के बाद, नियंत्रण समूह का विलंबता समय मॉडलिंग से पहले से अलग नहीं था। हालांकि, मॉडलिंग के बाद, मॉडल और डु-मोक्सीबस्टन समूहों के विलंबता समय में नियंत्रण समूह (पी < 0.01; चित्रा 6 बी), और मॉडल समूह और डु-मोक्सीबस्टन समूह (पी > 0.05; चित्रा 6 बी)। उपचार के बाद, मॉडल समूह की तुलना में डु-मोक्सीबस्टन समूह का विलंबता समय काफी बढ़ गया (पी < 0.05; चित्रा 6 बी)। इन परिणामों से संकेत मिलता है कि ड्यू-मोक्सीबस्टन एएस चूहों में मोटर समन्वय में सुधार करने में प्रभावी था।

स्वायत्त आंदोलन का पता लगाने के लिए ओएफटी का प्रदर्शन किया गया था। मापदंडों एकत्र और सॉफ्टवेयर (चित्रा 6C-ई) का उपयोग कर स्वचालित रूप से विश्लेषण किया गया; इस अध्ययन में कुल दूरी और औसत गति मुख्य रूप से देखी गई। मॉडलिंग से पहले समूहों के बीच कुल दूरी और औसत गति में कोई महत्वपूर्ण अंतर नहीं था (पी > 0.05; चित्रा 6 सी, डी)। मॉडलिंग के बाद, नियंत्रण समूह की तुलना में कुल दूरी और औसत गति काफी कम हो गई (पी < 0.05; चित्रा 6 सी, डी)। उपचार के बाद, मॉडल समूह (पी < 0.05; चित्रा 6 सी, डी)। इन परिणामों ने संकेत दिया कि एएस चूहों में स्वायत्त आंदोलन में सुधार करने में डु-मोक्सीबस्टन प्रभावी था।

टखने के संयुक्त विकृति विज्ञान पर डु-मोक्सीबस्टन के प्रभाव
एचई धुंधला टखने के जोड़ में रोग परिवर्तन का निरीक्षण करने के लिए इस्तेमाल किया गया था. नियंत्रण समूह में, सिनोवियम संरचना को कोई नुकसान नहीं हुआ, सिनोवियम में कोई भीड़ नहीं थी, और कोई स्पष्ट भड़काऊ कोशिका घुसपैठ और परिगलन नहीं था। हालांकि, मॉडल समूह में, सूजन सेल घुसपैठ और ऊतक एडिमा के अलावा, संयुक्त गुहा में सिनोवियम हाइपरप्लासिया और घुसपैठ देखी गई। एआई मूल्यांकन के साथ संयुक्त, यह साबित हुआ कि एएस मॉडल सफलतापूर्वक स्थापित किया गया था। मॉडल समूह की तुलना में, डु-मोक्सीबस्टन समूह में चूहों का सिनोवियम अधिक बरकरार था, अंतरालीय एडिमा कम हो गई थी, और आर्टिकुलर उपास्थि अपेक्षाकृत बरकरार थी (चित्र 7)।

प्लाज्मा आईएल -17 और टीएनएफ -α के स्तर पर डु-मोक्सीबस्टन के प्रभाव
प्लाज्मा में IL-17 और TNF-α को मापने के लिए एलिसा किया गया था। मॉडल समूह के प्लाज्मा IL-17 और TNF-α के स्तर नियंत्रण समूह (P < 0.01; चित्रा 6 एफ, जी)। डु-मोक्सीबस्टन ने प्लाज्मा आईएल -17 और टीएनएफ -α के स्तर में कमी आई (पी < 0.05; चित्रा 6 एफ, जी)।

Figure 1
चित्रा 1: ड्यू-मोक्सीबस्टन के लिए आवश्यक कच्चे माल। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्रा 2: एक मोक्सा शंकु बनाना। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्रा 3: अदरक का पानी तैयार करें और एक ट्रेपोजॉइडल अदरक कॉलम बनाएं। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 4
चित्रा 4: माउस में जीवी 14 और जीवी 2 का स्थान। (ए) जीवी 14 सातवें ग्रीवा कशेरुक की सबस्पिनस प्रक्रिया में स्थित है; GV2 अंतराल त्रिक नहर में स्थित है। (बी) माउस पर डु मोक्सीबस्टन का योजनाबद्ध आरेख। (C) Du moxibustion का उत्तेजित क्षेत्र। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 5
चित्रा 5: माउस में डु-मोक्सीबस्टन की ऑपरेशन प्रक्रिया। (ए) बालों को दाढ़ी और प्रवण स्थिति में माउस पर अदरक का रस धब्बा। (बी, सी) समान रूप से टीसीएम पाउडर छिड़कें। (D) पाउडर को शहतूत कागज से ढक दें। (E) शहतूत कागज पर अदरक के स्तंभ को मजबूती से ठीक करें। (एफ) अदरक स्तंभ पर एक मोक्सा शंकु रखो; फिर, इसे जलाएं। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 6
चित्रा 6: मोटर समन्वय, स्वायत्त आंदोलन, और आईएल -17 और टीएनएफ -α स्तरों पर डु-मोक्सीबस्टन के प्रभाव। (ए) चूहों में संयुक्त सूजन स्कोर। (बी) रोटारोड परीक्षण में विलंबता समय। (सीई) ओएफटी की कुल दूरी, औसत गति और ट्रैक आरेख। (एफ) प्लाज्मा में आईएल -17 स्तर। (जी) प्लाज्मा में टीएनएफ -α स्तर। मानों को माध्य ± SEM (n = 6) के रूप में व्यक्त किया जाता है। ##पी < 0.01, # पी < 0.05 बनाम नियंत्रण समूह; $$पी < 0.01, $ पी < 0.05 बनाम मॉडल समूह। संक्षिप्ताक्षर: IL = इंटरल्यूकिन; TNF = ट्यूमर नेक्रोसिस कारक; OFT = खुला क्षेत्र परीक्षण। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 7
चित्रा 7: टखने के जोड़ का धुंधला हो जाना। (ए) नियंत्रण समूह में भड़काऊ घुसपैठ के बिना संयुक्त गुहा चिकनी थी। (ख) मॉडल समूह में सिनोवियम हाइपरप्लासिया तथा अंतःक्रिया संयुक्त गुहा में देखी गई। (सी) डु-मोक्सीबस्टन समूह में, चूहों की संयुक्त गुहा चिकनी थी और एडिमा को कम किया गया था। स्केल बार = 200 माइक्रोन। संक्षिप्त: HE = hematoxylin-eosin। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

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Discussion

एएस चिकित्सकीय पीठ के रूप में प्रकट होता है, काठ, और जोड़ों की सूजन दर्द, और रीढ़ की हड्डी की विकृति और संयुक्त कठोरता गंभीर मामलों में हो सकताहै 26. प्रारंभिक निदान और उपचार जीवन की गुणवत्ता में सुधार कर सकते हैं, विकलांगता दर को कम कर सकते हैं और एएस के रोगियों के पूर्वानुमान में सुधार कर सकते हैं। पारंपरिक चीनी चिकित्सा (टीसीएम) के अनुसार, एएस को गुर्दे और डु मेरिडियन में यांग की कमी के साथ-साथ आंतरिक रूप से ठंड बुराई के संचय के कारण माना जाता है। टीसीएम का मानना है कि मेरिडियन की अवधारणा के आधार पर मोक्सीबस्टन, क्यूई उत्पन्न कर सकता है जो शरीर की सतह को गर्म करता है। यह क्यूई तब मेरिडियन और एक्यूपॉइंट्स के साथ नीचे की ओर यात्रा करता है। हुआंगडी के इनर कैनन (एक बहुत ही क्लासिक और महत्वपूर्ण टीसीएम मास्टरवर्क) में, यह दर्ज किया गया है कि "रोगग्रस्त डू मेरिडियन का इलाज किया जाता है। जैसा कि एएस डू मेरिडियन में स्थित है, डू मेरिडियन को उत्तेजित करना चिकित्सीय बिंदु के रूप में उपयोग किया जाता है। डु मेरिडियन को यांग चैनलों का महासागर माना जाता है जहां यांग क्यूई अपने चरम पर पहुंचता है। डु मेरिडियन पर मोक्सीबस्टन यांग क्यूई को पूरक कर सकता है, डू मेरिडियन के प्रभाव को सक्रिय कर सकता है, और किडनी यांग के वार्मिंग प्रभाव को समायोजित कर सकता है, अर्थात, पश्चिमी चिकित्सा के प्रतिरक्षा विनियमन समारोह को बढ़ा सकता है।

पश्चिमी चिकित्सा के दृष्टिकोण से, रीढ़ की हड्डी तंत्रिका संबंधी जानकारी प्रसारित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाती है। डु मोक्सीबस्टन, जो रीढ़ की हड्डी की जड़ों के प्रवेश और निकास पर कार्य करता है, न्यूरोट्रांसमीटर के नियमन के माध्यम से तंत्रिका तंत्र के कार्य और नियामक तंत्र को प्रभावित कर सकता है। 1990 के दशक में, यह प्रदर्शित किया गया था कि डु-मोक्सीबस्टन ने चूहों के हाइपोथैलेमस में β-एंडोर्फिन की सामग्री में वृद्धि की, इस प्रकार एक केंद्रीय एनाल्जेसिक प्रभाव7. इसके अलावा, एंथेसाइटिस एएस की एक सामान्य जटिलता है, जो लगातार दर्द और मांसपेशियों की कठोरता की विशेषता है, जो गंभीर होने पर संयुक्त और शरीर की गति को प्रभावित कर सकती है। एक टीसीएम उपचार पद्धति के रूप में जिसे चिकित्सकीय रूप से मान्य किया गया है, डु-मोक्सीबस्टन प्रभावी रूप से सूजन को कम कर सकता है, ऊतक की मरम्मत को बढ़ावा दे सकता है, और एएस के इलाज में एंथेसाइटिस में सुधार कर सकता है।

विशेष रूप से, एक्यूपंक्चर और मोक्सीबस्टन के प्रभाव मुख्य रूप से निम्नलिखित पहलुओं में परिलक्षित होते हैं। सबसे पहले, वे रक्त परिसंचरण और सूजन के अवशोषण को बढ़ावा देते हैं। डु-मोक्सीबस्टन वार्मिंग प्रभाव के माध्यम से रीढ़ के आसपास के ऊतकों में रक्त परिसंचरण और चयापचय को उत्तेजित करता है और सूजन और ऊतक की मरम्मत के अवशोषण को बढ़ावा देता है, जिससे कण्डरा लगाव सूजन की सूजन और दर्द की डिग्री कम हो जाती है। दूसरा, वे मांसपेशियों और लिगामेंट तनाव में सुधार करते हैं। डु-मोक्सीबस्टन का उत्तेजना प्रभाव रीढ़ के चारों ओर मांसपेशियों के तनाव में सुधार कर सकता है, कठोर नरम ऊतकों को आराम दे सकता है, रीढ़ की हड्डी के जोड़ों की गतिविधि को बढ़ावा दे सकता है, और मांसपेशियों में तनाव और लिगामेंट स्ट्रेचिंग के कारण होने वाले दर्द और कठोरता को कम कर सकता है। संक्षेप में, डु-मोक्सीबस्टन, एक सहायक चिकित्सा के रूप में, रीढ़ की हड्डी के क्षेत्र पर कार्य करके शरीर की तंत्रिका, प्रतिरक्षा और संचार प्रणालियों की गतिविधियों को व्यापक रूप से नियंत्रित कर सकता है, जिससे शरीर समग्र रूप से अधिक संतुलित हो जाता है।

सूजन एएस27 की मुख्य अभिव्यक्ति है। TNF-α एक बहु effector साइटोकिन और भड़काऊ कारक मोनोन्यूक्लियर मैक्रोफेज28 की उत्तेजना के तहत उत्पादित है. एएलपी और कोलेजन संश्लेषण की गतिविधि TNF-α द्वारा बाधित किया जा सकता है, हड्डी के नुकसान और उपास्थि विनाश29 में जिसके परिणामस्वरूप. हाल के वर्षों में, अध्ययनों में पाया गया है कि आईएल -17 एएस के रोगजनन में एक महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है, जिसे समीक्षा30 में पूरी तरह से प्रदर्शित किया गया है। IL-17 सीधे ओस्टियोब्लास्ट पर कार्य कर सकता है, परमाणु प्रतिलेखन कारक-κB (NF-κB) रिसेप्टर एक्टिवेटर लिगैंड (RANKL) की अभिव्यक्ति को बढ़ावा दे सकता है, और ओस्टियोक्लास्ट की मजबूत पीढ़ी को बढ़ावा दे सकता है। इसी समय, आईएल-17 मेसेनकाइमल स्टेम कोशिकाओं (एमएससी) को भी प्रभावित करता है, उनके प्रसार को प्रेरित करता है और ओस्टियोब्लास्ट31में उनके भेदभाव को बढ़ावा देता है। केन्ना, 32 एट अल ने पाया कि एएस रोगियों के परिधीय रक्त में आईएल -17 का स्तर स्वस्थ नियंत्रणों की तुलना में लगभग दो गुना बढ़ गया है। अध्ययन से पता चलता है कि आईएल -17 विरोधी एएस रोगियों के लिए एक नया विकल्प हो सकता है जो टीएनएफ -α विरोधी33 के लिए अच्छी तरह से प्रतिक्रिया नहीं करते हैं। एक नैदानिक अध्ययन से पता चला है कि आईएल -17 विरोधी की एक खुराक आहार रेडियोग्राफिक अक्षीय स्पोंडिलोआर्थराइटिस संकेत औररोगियों में लक्षण 34 में सुधार के लिए एक placebo से बेहतर था. इस अध्ययन के परिणामों से पता चला है कि मॉडल समूह में TNF-α और IL-17 के प्लाज्मा स्तर नियंत्रण समूह की तुलना में काफी अधिक थे, और TNF-α और IL-17 के प्लाज्मा स्तर डु-मोक्सीबस्टन उपचार के बाद काफी कम हो गए थे।

डु-मोक्सीबस्टन थेरेपी कुशलता से टीसीएम की संगत तकनीकों का उपयोग मेरिडियन, एक्यूपॉइंट्स, चीनी हर्बल दवा और मोक्सीबस्टन को एकीकृत करने के लिए करती है। डु-मोक्सीबस्टन थेरेपी के कच्चे माल में मुख्य रूप से मोक्सा मखमल, अदरक और टीसीएम पाउडर शामिल थे। टीसीएम के दृष्टिकोण से, मोक्सा मखमल, मगवॉर्ट का एक संसाधित उत्पाद, संपार्श्विक को सक्रिय करने, ठंड को दूर करने और दर्द से राहत देने का कार्य करता है। अदरक बाहरी लक्षणों से राहत और ठंड को दूर करने में भूमिका निभाता है। आधुनिक शोध से यह भी पता चलता है कि अदरक में विरोधी भड़काऊ और एनाल्जेसिक गुणहोते हैं 35. उपचार से पहले अदरक के रस के साथ त्वचा को पोंछने से छिद्रों को खोलने और ट्रांसडर्मल पारगम्यता36 को बढ़ावा देने में मदद मिलती है, इसके अलावा टीसीएम पाउडर त्वचा का पालन करने में मदद करता है। मोक्सा शंकु के लिए एक ठोस आधार प्रदान करने के लिए ट्रेपोजॉइडल अदरक स्तंभ को पीठ पर मजबूती से तय किया जाता है। मोक्सा शंकु जलने के बाद, गोलाबारी, अदरक और टीसीएम पाउडर के प्रभाव डु मेरिडियन पर एक साथ काम करते हैं। इस बीमारी में यांग की कमी के रोगजनन को देखते हुए, डु-मोक्सीबस्टन सीधे रोग की साइट पर कार्य करता है, मेरिडियन को गर्म करता है, ठंड को फैलाता है, यांग क्यूई और सार को पूरक करता है, रक्त परिसंचरण को बढ़ावा देता है, और यिन और यांग को संतुलित करता है रोग की जड़ का इलाज करने के लिए।

डु-मोक्सीबस्टन करते समय, कई विवरणों पर विचार किया जाना चाहिए। सबसे पहले, डु-मोक्सीबस्टन की ऑपरेशन साइट तय की गई है, दाझुई बिंदु (जीवी 14) से याओशू बिंदु (जीवी 2) तक (शारीरिक रूप से 7वें ग्रीवा रीढ़ की हड्डी से पूंछ कशेरुक तक, पूरे रीढ़ सहित), जो एएस (चित्रा 4) की घटना साइट के अनुरूप है। दूसरा, अदरक की आर्द्रता और मोटाई महत्वपूर्ण है। अदरक को अदरक की मिट्टी में संसाधित करने के बाद अतिरिक्त अदरक के रस को निचोड़ा जाना चाहिए ताकि अदरक की मिट्टी में कोई दानेदार भावना न हो और इसकी मोटाई ट्रेपोज़ाइडल अदरक कॉलम में बनाई जा सके। अदरक की मिट्टी में उच्च आर्द्रता और नमी आसानी से मोक्सीबस्टन आग के प्रवेश में बाधा डाल सकती है और मोक्सीबस्टन उत्तेजना की मात्रा को कम कर सकती है। यदि अदरक का कच्चा माल बहुत सूखा है और कण बहुत बड़े हैं, तो ट्रेपोज़ाइडल अदरक स्तंभ बनाना मुश्किल है, जिससे त्वचा में तेजी से गर्मी का प्रवेश और जलन होती है। तीसरा, मोक्सा शंकु के आकार और दृढ़ता पर विचार किया जाना चाहिए। चूहों में मोक्सीबस्टन के लिए उपयोग किए जाने वाले मोक्सा शंकु ~ 4 सेमी लंबे और 0.5 सेमी व्यास के होते हैं और तैयारी के समय तंग होना चाहिए। जकड़न के लिए एक परीक्षण तब होता है जब शंकु सतह पर गिराए जाने के बाद भी नहीं खुलता है। यदि मोक्सा शंकु पर्याप्त कॉम्पैक्ट नहीं है, तो इससे मोक्सा मखमल की मात्रा में कमी, जलने का समय कम और मारक क्षमता में कमी आएगी। चौथा, मोक्सा शंकु को प्रज्वलित करते समय, मोक्सा शंकु के सिर, मध्य और पूंछ को ठीक धूप से जलाया जाना चाहिए ताकि मोक्सा शंकु धीरे-धीरे जलता है ताकि ईब और प्रवाह के पौष्टिक प्रभाव को प्राप्त किया जा सके। पांचवां, मोक्सीबस्टन के औषधीय पाउडर में कस्तूरी एक महत्वपूर्ण घटक है। मोक्सीबस्टन के दूसरे दिन, ड्यू मेरिडियन पर छोटे मोती की तरह क्रिस्टल स्पष्ट फफोले होने चाहिए।

बड़ी संख्या में नैदानिक अध्ययनों ने एएस 4,5,6 के उपचार में डु-मोक्सीबस्टन की निश्चित प्रभावकारिता की पुष्टि की है। हालांकि, पशु प्रयोगों में कार्रवाई के अपने तंत्र पर अनुसंधान धीरे-धीरे आगे बढ़ता है। अनुसंधान और नवाचार के माध्यम से, डु-मोक्सीबस्टन के संचालन में वर्षों के अनुभव ने हमें चूहों के प्रयोगों में इसके उपयोग की जांच करने के लिए प्रेरित किया है। यह पत्र प्रयोगात्मक चूहों में एएस के उपचार में ड्यू-मोक्सीबस्टन की ऑपरेशन प्रक्रियाओं और सावधानियों का विस्तार से वर्णन करता है। इसके अलावा, एएस चूहों में मोटर समन्वय और टीएनएफ -α और आईएल -17 के प्लाज्मा स्तर पर मोक्सीबस्टन का प्रभाव देखा गया। इस अध्ययन ने एएस के उपचार में ड्यू-मोक्सीबस्टन के तंत्र के अध्ययन के लिए सबसे बुनियादी प्रयोगात्मक आधार प्रदान किया। इस अध्ययन की अभी भी कुछ सीमाएँ हैं। उदाहरण के लिए, भविष्य के अध्ययनों में, हम सबसे प्रभावी संयोजन योजनाओं को प्राप्त करने के लिए प्लेसबो मोक्सीबस्टन, खुराक, सीमा और उपचार के समय जैसे विभिन्न मापदंडों के मूल्यांकन पर ध्यान देंगे। बाद के अध्ययनों में, इमेजिंग विधियों का उपयोग उपचार के परिणामों का अधिक सहज तरीके से मूल्यांकन करने के लिए किया जा सकता है।

डु-मोक्सीबस्टन थेरेपी की आवेदन संभावना आशाजनक है। ड्यू मेरिडियन, जिसे गवर्नर वेसल के रूप में जाना जाता है, पूरे शरीर में क्यूई और रक्त के प्रवाह को विनियमित करने में महत्वपूर्ण भूमिका निभाता है। मोक्सीबस्टन, एक पारंपरिक चीनी चिकित्सा, में मेरिडियन को उत्तेजित करने और शरीर के स्व-उपचार तंत्र को बढ़ावा देने के लिए विशिष्ट एक्यूपॉइंट्स पर मगवॉर्ट को जलाना शामिल है। एक्यूपंक्चर की तुलना में, डु-मोक्सीबस्टन विभिन्न तकनीकों का एक संयोजन है जो शरीर की सतह पर कार्य करता है, जिसमें आराम की विशेषताएं और कार्रवाई की एक मजबूत और विस्तृत श्रृंखला होती है। इसके अलावा, डु-मोक्सीबस्टन थेरेपी पीठ और रीढ़ की हड्डी के क्षेत्र पर केंद्रित है, जो डु मेरिडियन के मार्ग को लक्षित करती है। यह शरीर की प्रतिरक्षा प्रणाली को बढ़ा सकता है, रक्त परिसंचरण में सुधार कर सकता है और विभिन्न शारीरिक और मानसिक स्थितियों को कम कर सकता है। थेरेपी ने मस्कुलोस्केलेटल विकारों, न्यूरोलॉजिकल स्थितियों, स्त्री रोग संबंधी विकारों और मानसिक स्वास्थ्य के मुद्दों जैसी बीमारियों के इलाज में अपनी प्रभावशीलता का प्रदर्शन किया है। अनुसंधान और प्रौद्योगिकी में प्रगति के साथ, डु-मोक्सीबस्टन थेरेपी के अनुप्रयोग में और विस्तार होने की उम्मीद है। भविष्य के अध्ययन दर्द प्रबंधन, तनाव में कमी, पाचन विकार और श्वसन स्थितियों जैसे क्षेत्रों में इसकी क्षमता का पता लगा सकते हैं। पारंपरिक ज्ञान और आधुनिक वैज्ञानिक समझ के संयोजन से मुख्यधारा की स्वास्थ्य देखभाल प्रथाओं में डु-मोक्सीबस्टन थेरेपी का बेहतर एकीकरण हो सकता है। अंत में, डु-मोक्सीबस्टन थेरेपी विभिन्न स्वास्थ्य देखभाल क्षेत्रों में अपने आवेदन और एकीकरण में बहुत अच्छा वादा करती है। आगे के शोध, नैदानिक परीक्षण, और पारंपरिक चीनी चिकित्सा चिकित्सकों और आधुनिक स्वास्थ्य पेशेवरों के बीच सहयोग इसकी पूरी क्षमता को अनलॉक करने के लिए आवश्यक हैं।

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Disclosures

लेखकों के पास घोषित करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है।

Acknowledgments

इस काम को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (No.82174491) के सामान्य कार्यक्रम और पारंपरिक चीनी चिकित्सा अकादमिक स्कूल विरासत परियोजना (No. लू वेहान [2020]132)। प्रयोगात्मक शर्तों के साथ हमें प्रदान करने के लिए पारंपरिक चीनी चिकित्सा के शेडोंग विश्वविद्यालय के प्रयोगशाला पशु केंद्र के लिए धन्यवाद।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
10% EDTA Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.,Shanghai, China
alcohol pads HYNAUT, Qingdao Hainuo Biological Engineering Co., LTD, Qingdao, China
anesthesia machine Medical Supplies & Services INT. LTD, Keighley, UK
centrifuge tubes Axygen, Corning, NewYork, UAS
complete Frech's adjuvant (CFA) aladdin,Shanghai, China F393378
cotton ball Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cotton gauze Henan RUIKE MEDICAL Equipment Co., Ltd.,Xinxiang, China
cutting board self-preparation
decorin from bovine articular cartilage Sigma-Aldrich, MO, USA D8428
depilatory cream Veet, Reckitt Benckiser (China) Investment Co. LTD, Shanghai, China
electronic scale Shanghai Yajin Electronic Technology Co., Ltd.,Shanghai, China
Eppendorf tube Axygen, Corning, NewYork, UAS
eye lubricant Beijing Shuangji Pharmaceutical Co., LTD., Beijing, China
ginger self-preparation
GraphPad Prism 7 software GraphPad Software,Boston, USA
hair clipper Super human Group CO LTD, Jinhua, China
heating pads Shenzhen Leshuo Tech Co., Ltd.,Shenzhen, China
incomplete Freund’s adjuvant (IFA) aladdin,Shanghai, China F393371
injection syringe Shandong Xinhua Ande Medical Supplies Co., LTD, Zibo, China
isoflurane Shenzhen Rayward Life Technology Co., LTD, Shenzhen, China R510-22-10
joss stick Shijiazhuang Lidu Fragrant Industry Co., LTD.,Shijiazhuang, China
juicer Braun (Shanghai) Co., Ltd.,Shanghai, China
knife self-preparation
lighter Zhejiang tiger-lighter Co. LTD
mortar Luoyang Yinai Ceramic Technology Co., LTD.,Luoyang, China
Mouse IL-17 ELISA Kit absin, Shanghai, China abs520009-96T
Mouse TNF-α ELISA Kit Wuhan Sanying, Wuhan, China KE10002
mulberry paper Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China
OFT Xinruan,Shanghai, China XR-XZ301
paper cup self-preparation
pipettes OXFORD BIO INSTRUMENTS INC.,Oxford, UK
refined moxa velvet self-preparation
rotarod Xinruan,Shanghai, China XR-6C
scientz-48L cryogenic high throughput tissue grinder Ningbo Xinzhi Biotechnology Co., LTD
scissors Shandong Jiaren Medical Supplies Co., Ltd., Zibo, China
semi-automatic paraffin sectioning machine Leica Camera AG, Watznach, Germany
SPSS 25.0 software International Business Machines Corporation, NewYork, UAS
TCM powder self-preparation
tips Biosharp, Labgic, Beijing, China
writing brush Yishui County Mulinsang paper Co., LTD, Linyi, China

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