Summary
गतिविधि मस्तिष्क cortical पिरामिड न्यूरॉन्स के optogenetically जबकि electroencephalogram, विद्युतपेशीलेख निगरानी कर रहे हैं, और मस्तिष्क लैक्टेट एकाग्रता जोड़ तोड़ के लिए एक प्रक्रिया में वर्णित है. प्रायोगिक रिकॉर्डिंग केबल सीमित चूहों पर प्रदर्शन कर रहे हैं, जबकि वे सहज नींद / जगा चक्र से गुजरना. Optogenetic उपकरण हमारी प्रयोगशाला में इकट्ठा किया जाता है, रिकॉर्डिंग उपकरण व्यावसायिक रूप से उपलब्ध है.
Protocol
1. पशु के सर्जिकल तैयारी
1. प्रायोगिक विषयों
JAX तनाव 7612 #) या अन्य चूहों नीले प्रकाश के प्रति संवेदनशील कटियन चैनल, मस्तिष्क cortical न्यूरॉन्स Channelrhodopsin-2, व्यक्त, B6.Cg टीजी (Thy1-COP4/eYFP) / 18Gfng जम्मू ट्रांसजेनिक लाइन 9 के चूहों का प्रयोग करें. नीले प्रकाश की B6.Cg टीजी (Thy1-COP4/eYFP) / 18Gfng जम्मू ट्रांसजेनिक लाइन के मस्तिष्क प्रांतस्था आवेदन पिरामिड Channelrhodopsin-2 व्यक्त चुम्बकत्व से वंचित करना और कार्रवाई से गुजरना क्षमता 9,10 न्यूरॉन्स का कारण बनता है. पिरामिड सेल सक्रियण के परिणाम के रूप में, स्थानीय interneurons सक्रिय कर रहे हैं, और क्षमता में परिवर्तन 10 उत्तेजना की साइट से बाहर न्यूरॉन्स के लिए प्रचारित किया है. गर्म मनका सभी गर्मी सहिष्णु प्रत्यारोपित धातु उपकरणों (cannulas पेंच, और तार) बाँझ आटोक्लेव शल्य चिकित्सा उपकरण और softpacks (शल्य चिकित्सा के क्षेत्र में काम करते हैं, धुंध पैड): लागू नियामक दिशा निर्देशों का पालन करने में बाँझ शर्तों के तहत सर्जरी प्रदर्शनतीस सेकंड के लिए, इथेनॉल में एक डुबकी 10 सेकंड के साथ गर्मी असहिष्णु implantable डिवाइस (फाइबर ऑप्टिक केबल, प्लास्टिक संबंधक) कीटाणुरहित, झटका आइटम इथेनॉल डूबा कैन्ड हवा के आवेदन से सूखी.
2. संज्ञाहरण, Stereotaxic प्लेसमेंट और खोपड़ी की निकासी
IMPAC 6 इंटीग्रेटेड मल्टी रोगी प्रणाली (डॉक्टर लैस इंक) का उपयोग करने के लिए माउस anesthetize. 5% प्रेरण लिए Isoflurane/95% ऑक्सीजन और सर्जरी के दौरान 3% रखरखाव लिए Isoflurane/97% ऑक्सीजन का उपयोग करें. एक परिसंचारी पानी कंबल 37 सी. अगर कंबल इस तापमान पर रखा जाता है यह शरीर के तापमान पर नजर रखने के लिए आवश्यक नहीं है करने के लिए सेट पर पशु रखें.
3. आरोपण के लिए खोपड़ी की तैयारी
खोपड़ी के ऊपर से सभी फर शेविंग द्वारा चीरा साइट तैयार. मुंडा क्षेत्र laterally कान से कान और आँखों से खोपड़ी के पीछे के अंत के लिए पूर्वकाल पीछे का विस्तार करना चाहिए. तीन consecutiv साथ उजागर त्वचा कीटाणुरहितBetadine के ई swabs इथेनॉल द्वारा पीछा किया. खोपड़ी के शीर्ष पर खोपड़ी के पीछे से आंखों के बीच एक औसत दर्जे का चीरा, बनाओ. हाइड्रोजन पेरोक्साइड और बाँझ खारा (0.9% NaCl) के साथ खोपड़ी साफ. एक cauterizing उपकरण के साथ खून बह रहा नियंत्रण. पता लगाएँ और stereotaxic निर्देशांक का निर्धारण करने के लिए शीर्षस्थान और लैम्ब्डा निशान. / इलेक्ट्रोड optogenetic प्रोत्साहन विन्यास है कि हम इस्तेमाल किया है के लिए Stereotaxic निर्देशांक तालिका 1 में प्रस्तुत कर रहे हैं और चित्र 1A में रेखाचित्र के रूप में दिखाया गया है.
4. खोपड़ी पर आरोपण साइटें की तैयारी
एक 0.5mm गेंद गड़गड़ाहट बिट के साथ एक उच्च गति दंत ड्रिल का उपयोग खोपड़ी में प्रत्येक आरोपण साइट की स्थापना के लिए. गड्ढा प्रत्येक पेंच प्रविष्टि की सुविधा के लिए एक 0.7 मिमी गेंद गड़गड़ाहट बिट का उपयोग करने के लिए छेद के बाहरी मार्जिन.
5. निवेशन और Cannulas हासिल, EMG ओर जाता है और ईईजी बिक्रीसूत्र
ईईजी शिकंजा (लंबाई में 0.8mm, 3 uncoated के 2 सेमी के साथ सम्मिलित करें0-गेज tinned तांबे बस सिर पेंच) और छेद में उन्हें एक slotted हाथ में ड्राइव करने के लिए पूर्व soldered तार लगभग 4-5 क्रांतियों पेचकश वांछित गहराई प्राप्त करने के. एक stereotaxic प्रवेशनी धारक और फिर उन्हें खोपड़ी और एक्रिलिक सीमेंट के साथ एंकर प्रत्यय के साथ जगह में गाइड cannulas पकड़ो. प्रत्येक गाइड प्रवेशनी सर्जरी के समय से एक डमी प्रवेशनी / ख़ंजर (एक प्लास्टिक, # C312 डीसी 1 \ हिस्सा) प्रयोग के समय (10-14 दिन) करने के लिए प्रत्यक्षता बनाए रखने के लिए शामिल करना चाहिए.
6. शल्य साइट बंद
एक बार EEGs और गाइड cannulas खोपड़ी में तैनात कर रहे हैं, बंधन उन्हें एक साथ दंत ऐक्रेलिक सीमेंट (लैंग चिकित्सकीय - सीमेंट ऑर्थो - जेट) के साथ. सीमेंट सेट के बाद, सूखे सीमेंट टीले के ऊपर प्लास्टिक संबंधक (प्रौद्योगिकी शिखर 8402 # भाग) की स्थिति. मिलाप ईईजी सुराग से प्लास्टिक संबंधक पर संपर्क करने के लिए चलाई तारों के समाप्त होता है. डिब्बे में बंद तार सीमेंट में होता है. फिर ग्रीवापश्च मांसपेशियों के माध्यम से EMG तारों को आकर्षितउन्हें एक 21ga सुई के बैरल में फिसलने से मांसपेशियों के माध्यम से छेद किया. इन तारों के चारों ओर एक डबल सर्जन सिर्फ जहाँ वे पेशी से बाहर निकलने के लिए बाहर का 5-0 नायलॉन सीवन की गाँठ बाँध. वापस एक साथ त्वचा है कि एकल बाधित सर्जन गांठ के साथ मांसपेशियों के ऊतकों का उपयोग मुकर गया था सीवन, एक पी 3 सुई और 5-0 नायलॉन सीवन काटने रिवर्स का उपयोग.
7. पोस्ट ऑपरेटिव Analgesia और रिकवरी
(0.1 मिलीग्राम / किग्रा, चमड़े के नीचे) और एक विरोधी भड़काऊ एनाल्जेसिक के रूप flunixin meglumine (0.1 मिलीग्राम / किग्रा, चमड़े के नीचे) के रूप में buprenorphine तुरंत सर्जरी के बाद, प्रशासन और दैनिक 1-2 दिनों के बाद सर्जरी पर. जानवरों के प्रयोग से पहले कम से कम सात दिनों के लिए मानक कॉलोनी आवास की स्थिति में ठीक करने के लिए अनुमति दें. मानक कॉलोनी आवास परे कोई अतिरिक्त देखभाल के साथ, cannulas के लिए कम से कम दो सप्ताह के लिए जगह में सुरक्षित stylets निबाह साथ पेटेंट रहने की उम्मीद की जा सकती है. ईईजी और EMG सेंसर भी बनाए रखने के लिए उम्मीद की जा सकती हैइस अवधि के लिए कार्यक्षमता.
2. समयबद्ध प्रकाश दालों की पीढ़ी
1. एम सी उत्तेजना यूनिट की प्रोग्रामिंग
एक डेस्कटॉप कंप्यूटर के लिए एक यूएसबी कनेक्शन के माध्यम से एम सी प्रोत्साहन इकाई (मल्टी चैनल सिस्टम) से कनेक्ट करें. स्प्रेडशीट की तरह एम सी प्रोत्साहन उपयोगकर्ता इंटरफ़ेस MC प्रेरणा इकाई कार्यक्रम का प्रयोग करें. पर अवधि के लिए वांछित (ट्रांजिस्टर - ट्रांजिस्टर तर्क) टीटीएल वोल्टेज दर्ज करें, पर और बंद अवधि के प्रोत्साहन के durations, 2 प्रति चक्र वांछित है, और पूरे प्रोत्साहन सत्र के लिए दोहराया चक्र की कुल संख्या की संख्या. आगे की जानकारी के लिए एम सी उत्तेजना तकनीकी मैनुअल देखें:
3. / फाइबर ऑप्टिक पीआर के निर्माण विधानसभाप्रमस्तिष्क प्रांतस्था प्रकाश वितरण के लिए OBEs
- आपूर्ति और उपकरणों की जरूरत पर पाए जाते हैं: http://www.thorlabs.com/Thorcat/1100/1166-D02.pdf
- काटना और फाइबर ऑप्टिक केबल का चमकाने. http://www.thorlabs.com/Thorcat/1100/1166-D02.pdf
4. कृंतक Optogenetic उत्तेजना प्रणाली की सभा
1. एम सी उत्तेजना यूनिट और लेजर के इंटरफ़ेस
एक बार एम सी प्रोत्साहन इकाई प्रोग्राम है, यह एक खड़े अकेले / सिग्नल बंद पर एक बाइनरी 5 वाल्ट के संकेत जनरेटर के रूप में चला रहे हैं. BNC connectors के साथ लेजर के टीटीएल सक्षम यूनिट बिजली के लिए एम सी प्रोत्साहन इकाई कनेक्ट.
2. लेजर फाइबर ऑप्टिक केबल के माध्यम से उत्पादन उत्पादन
मैनुअल के लिए डिजिटल और लेजर यूनिट बिजली की चर बिजली उत्पादन डायल प्रदर्शन का उपयोगly लेजर की बिजली उत्पादन को समायोजित. एक रिबन केबल के माध्यम से लेजर लेजर यूनिट बिजली कनेक्ट. महिला (सामी संबंधक) FC पुरुष एफसी संबंधक के लिए फाइबर ऑप्टिक पैच केबल (3 मीटर लंबाई, 200 सुक्ष्ममापी व्यास गिलास चालन फाइबर acrylate बहुलक cladding प्रकाश को दर्शाती में encased) पर लेजर फाइबर अनुकूलक कनेक्ट.
3. रोटरी कम्यूटेटर: पशु लेजर संदेश
ऑप्टिक रोटरी संयुक्त encasing दो collimating लेंस (उपबोली लेंस) के सिरों का विरोध करने के लिए प्रारंभिक फाइबर ऑप्टिक केबल (लंबाई में 3 मीटर) और वितरण फाइबर ऑप्टिक केबल (लंबाई में 45 सेमी) से कनेक्ट करें. फाइबर ऑप्टिक रोटरी संयुक्त एक कम्यूटेटर के रूप में कार्य करता है: के रूप में पशु अपने पिंजरे के बारे में चलता है, रोटरी संयुक्त फाइबर ऑप्टिक केबल का टूटना को रोकने rotates. कम्यूटेटर प्रत्यय प्लास्टिक केबल संबंधों एक धातु का प्रयोग स्टैंड बेलनाकार पिंजरे में जो जानवर रखे है ऊपर रखा.
4. डिलिवरी फाइबर ऑप्टिक संलग्नसिर स्थल
एक हाथ का उपयोग करने के लिए एक cupped हथेली के तहत माउस पिन माउस सीमित रखें. ओरिएंट experimenter के बीच और तर्जनी के बीच सिर. निकालें गाइड प्रवेशनी से डमी प्रवेशनी फाइबर ऑप्टिक प्रवेशनी के लिए रखा. मलबे के गाइड प्रवेशनी एक बाँझ 25ga सुई का उपयोग कर साफ़ करें. हाथ से फाइबर ऑप्टिक केबल डालें और यह एक डमी प्रवेशनी से बचाया एक लड़ी पिरोया पेंच टोपी के साथ फाइबर ऑप्टिक गाइड प्रवेशनी जकड़ना. नियंत्रण एक सीवन फ्लैट cleaved अंत से एक निश्चित दूरी पर फाइबर ऑप्टिक केबल पर बंधे गाँठ द्वारा मस्तिष्क में फाइबर ऑप्टिक केबल की प्रविष्टि की गहराई. पूरे प्रयोगात्मक उपकरण चित्रा 1 बी में दिखाया गया है.
5. ईईजी परिभाषित और Optogenetic उत्तेजना के दौरान लैक्टेट एकाग्रता की नींद के मापन
1. लैक्टेट सेंसर की Precalibration
लैक्टेट सेंसर के पूर्व अंशांकन इन विट्रो में एक साथ प्रदर्शन किया हैकिट (प्रौद्योगिकी शिखर 7000 K1-T # भाग). सेंसर फॉस्फेट में equilibrated है खारा buffered (7.4 पीएच), तो निर्माता प्रोटोकॉल प्रति stepwise फैशन में एल लैक्टेट की तीन सांद्रता उजागर करने के लिए.
2. लैक्टेट सेंसर और ईईजी केबल की प्रविष्टि
खोपड़ी घुड़सवार एक फाइबर ऑप्टिक केबल प्रविष्टि प्रक्रिया (4.4 अनुभाग) समान तरीके में लैक्टेट गाइड प्रवेशनी में पूर्व calibrated सेंसर डालें. द्विध्रुवी प्लग connectors के साथ शिखर 8400 biosensor का preamplifier लैक्टेट सेंसर कनेक्ट. 8-पिन संबंधक शल्य चिकित्सा प्रत्यारोपित headmount पर इस preamplifier संलग्न.
3. Optogenetic उत्तेजना तीव्रता की स्थापना
डेटा एकत्रित करने से पहले, लेजर तीव्रता नियंत्रण घुंडी उपयोग optogenetic उत्तेजना की तीव्रता को समायोजित करने के लिए. ईईजी प्रतिक्रिया के आयाम जानवरों भर में भिन्नता है, कारक है कि योजनाबद्ध तरीके से अध्ययन नहीं किया गया है की वजह से, एक उत्तेजना की शुरुआत में दृश्य निरीक्षण द्वारा सत्यापित होना चाहिए. अभ्यास में, 80-120 μWatts की एक तीव्रता के आम तौर पर उत्तेजना की आवृत्ति में लगभग 50% की ईईजी आयाम में वृद्धि का उत्पादन होगा. बाद अस्थायी तेजी से फूरियर विश्लेषण (5.5 अनुभाग देखें) प्रतिक्रिया की निरपेक्ष परिमाण यों के लिए आवश्यक है.
4. डेटा संग्रह
: Pinnacle 8400 प्रणाली का उपयोग कर डेटा एकत्रित http://pinnaclet.com/pal-8400.html .
5. Neuroscore साथ डाटा प्रोसेसिंग
ईईजी और EMG: Neuroscore इंटरफ़ेस (DataSciences, इंटरनेशनल के साथ डेटा का दृश्य निरीक्षण द्वारा राज्यों सो बाँटिए http://www.datasci.com/products/software/NeuroScore_CNS_Software.asp या Sirenia (इंटरफ़ेस प्रौद्योगिकी शिखर):च = "http://www.pinnaclet.com/sirenia.html" लक्ष्य = "_blank"> http://www.pinnaclet.com/sirenia.html). प्रक्रिया के मद्देनजर गैर तेजी से आँख आंदोलन नींद, या ईईजी और EMG के आधार पर तेजी से आँख आंदोलन नींद के रूप में दस सेकंड epochs में डेटा. माइक्रोसॉफ्ट एक्सेल स्प्रेडशीट के रूप में अतिरिक्त सांख्यिकीय विश्लेषण और परीक्षण के लिए डेटा सहेजें.
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Representative Results
के रूप में चित्रा 2 में दिखाया गया है, एक optogenetic उत्तेजना और लैक्टेट / ईईजी / EMG डेटा संग्रह के लिए सुसज्जित माउस सहज नींद / जगा राज्य संक्रमण लिया जबकि ईईजी EMG, और मस्तिष्क लैक्टेट एकाग्रता लगातार निगरानी की गई. लैक्टेट संवेदक पर वर्तमान कम ईईजी आयाम की अवधि के दौरान वृद्धि हुई है और उच्च ईईजी आयाम की अवधि के दौरान कमी आई है. के रूप में 3 चित्र में दिखाया गया, ईईजी के दोनों चैनलों optogenetic ललाट प्रांतस्था में दिया stimuli करने के लिए उत्तरदायी हैं.
चित्रा 1.) शल्य चिकित्सा प्रत्यारोपित ईईजी इलेक्ट्रोड, लैक्टेट सेंसर और optogenetic उत्तेजना के लिए प्रवेशनी के योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व. बी) पूरे प्रायोगिक प्रणाली के योजनाबद्ध प्रतिनिधित्व. एक, ईईजी नेतृत्व 1. दो, ईईजी नेतृत्व 2. Gnd, ईईजी जमीन पेंच. रेफरी, ईईजी संदर्भ पेंच.टी.पी. :/ / www.jove.com/files/ftp_upload/4328/4328fig1large.jpg "लक्ष्य ="> _blank "बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें.
चित्रा उदाहरण 2 डेटा संग्रह दर्शाता है कि जानवर में और बाहर नींद की transitioned जबकि रिकॉर्डिंग के लिए instrumented प्रोत्साहन / biosensor optogenetic चित्रा 1A में देखा विन्यास का उपयोग कर. Optogenetic उत्तेजना यहाँ दिखाया अंतराल के दौरान लागू नहीं किया गया. जागो (डब्ल्यू) और नींद, तेजी से आँख आंदोलन नींद (नि.) और गैर तेजी से आँख आंदोलन नींद (एन) के दो subtypes electroencephalogram (ईईजी) और विद्युतपेशीलेख (EMG) के आधार पर परिभाषित कर रहे हैं. उच्च आयाम EMG कम ईईजी आयाम के साथ जगा को परिभाषित करता है. कम आयाम EMG कम तेजी से आँख आंदोलन नींद को परिभाषित करता है ईईजी आयाम के साथ. कम आयाम EMG उच्च आयाम ईईजी गैर तेजी से आँख आंदोलन नींद को परिभाषित करता है के साथ. दुग्धवर्धककम ईईजी आयाम (यानी दोनों जगा और तेजी से आँख आंदोलन नींद के दौरान) के एक समारोह के रूप में biosensor वर्तमान उच्च ईईजी आयाम (यानी, गैर तेजी से आँख आंदोलन नींद के दौरान) के एक समारोह के रूप में उगता है और गिर जाता है.
चित्रा 3 1 (ए) या 10 हर्ट्ज हर्ट्ज (B) में optogenetic उत्तेजना के अधीन प्रोत्साहन / biosensor optogenetic चित्रा 1A में देखा विन्यास का उपयोग जानवरों से प्रतिनिधि डेटा. निशान 60 सेकंड रिकॉर्डिंग का प्रतिनिधित्व करते हैं. उत्तेजना के एक अंतराल 30 सेकंड के समय प्रत्येक कक्ष के शीर्ष पर संकेत दिया है. बड़ा आंकड़ा देखने के लिए यहां क्लिक करें .
| ललाट शीर्षस्थान उत्तेजना सापेक्ष (मिमी) | |||
| / चींटी पीost | Lat | डी / वी | |
| EEG1 | 2.2 | 1.6 | - |
| EEG2 | 2.2 | -1.6 | - |
| संदर्भ | -3.5 | -1.5 | - |
| जमीन | -3.5 | 1.5 | - |
| लैक्टेट प्रवेशनी | 1.0 | 1.6 | -0.5 |
| Optogenetic प्रवेशनी | 1.0 | -1.6 | -0.5 |
1 टेबल Stereotaxic. Surgically किया उपकरणों के निर्देशांक.
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Discussion
तरीके यहाँ प्रस्तुत है एक एक समय संभव पहले नहीं पैमाने पर glycolytic मध्यवर्ती लैक्टेट की एकाग्रता मस्तिष्क में नींद और परिवर्तन के बीच संबंध को मापने के लिए अनुमति देते हैं. पशु मद्देनजर NREMS, और REMS के बीच सहज संक्रमण से गुजरना. इसके अलावा, हम optogenetic उत्तेजनाओं को लागू करने में सक्षम हैं, जबकि जानवरों इन संक्रमण से गुजरना. डेटा तारीख कि दोनों सहज और प्रेरित लैक्टेट oxidase आधारित biosensor readout पर लहरों प्रभाव का प्रदर्शन करने के लिए एकत्र.
एक प्रयोगात्मक उपकरण और अन्य स्रोतों से सॉफ्टवेयर के साथ यहाँ वर्णित एक करने के लिए इसी तरह की प्रणाली का निर्माण कर सकता है. कृन्तकों के लिए उपयुक्त polysomnographic प्रणालियों के वैकल्पिक स्रोतों डाटा विज्ञान इंटरनेशनल 11, और 12 Embla शामिल हैं. नींद राज्य वर्गीकरण के लिए सॉफ्टवेयर 12 Somnologica से उपलब्ध है, 13 साइन और Icelus 14 सो जाओ. लैक्टेट की माप के लिए Amperometric biosensors15 Quanteon से उपलब्ध हैं. हमारे ज्ञान करने के लिए, प्रौद्योगिकी शिखर केवल प्रणाली में जो biosensors, ईईजी और EMG एक सॉफ्टवेयर इंटरफ़ेस के साथ एक साथ मापा जा सकता है प्रदान करता है.
हम दोनों लैक्टेट एकाग्रता और optogenetic उत्तेजना की साइट के लिए बाहर का ईईजी में बदलाव मापा है. ऐसे डिस्टल साइटों पर optogenetic उत्तेजना के प्रभाव की पुष्टि करता है कि optogenetically प्रेरित संभावित परिवर्तनों उत्तेजना की साइट से परे प्रचारित कर रहे हैं. इन मापदंडों को सीधे प्रकाश के संपर्क में प्रांतस्था के क्षेत्र के भीतर मापने के लिए, लेकिन उन्हें कहीं मापने का आश्वासन दिया है कि प्रतिक्रियाओं तरंग प्रसार की वजह से कर रहे हैं, के रूप में biosensor का एक artifactual प्रकाश जोखिम (के रूप में 16 प्रलेखित) के लिए प्रतिक्रिया करने का विरोध किया. Optogenetically प्रेरित 1 हर्ट्ज तरंगों नींद धीमी गति लहरों में वे subcortical पेश न्यूरॉन्स द्वारा सिंक्रनाइज़ नहीं कर रहे हैं से अलग कर रहे हैं. जैसे, वे अन्य नींद से संबंधित टकसाली अस्थायी रिश्तों में नहीं होती हैघटना जैसे spindles और 17 कश्मीर परिसरों,. चाहे optogenetic उत्तेजना प्राकृतिक धीमी गति तरंगों (में synaptic 18 शक्ति या ईईजी धीमी लहर गतिविधि में 11 homoeostatic परिवर्तन में परिवर्तन के रूप में) के अन्य प्रभावों mimics अनिश्चित है. यहाँ वर्णित विधियों भविष्य के अध्ययनों में इस सवाल का पता करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
पशु दोनों जानवर से कंप्यूटर और फाइबर ऑप्टिक केबल कि प्रमस्तिष्क प्रांतस्था में नीले प्रकाश बता देते हैं biopotentials संदेश तारों द्वारा सीमित कर रहे हैं. दोनों वायरलेस / ईईजी bioanalyte रिकॉर्डिंग (http://pinnaclet.com/biosensor-recording-sys/fixed-frequency.html) सिस्टम और वायरलेस optogenetic उत्तेजना 19 उपकरणों को सूचना दी गई है. बहरहाल, दो हमारे ज्ञान करने के लिए एक एकल कार्य प्रणाली में एकीकृत नहीं है. संयम के बावजूद एक tethering केबल के साथ जुड़े, जानवरों अक्सर अपने पिंजरों के आसपास चल देखा जाता है, और समय की राशि सो बिताया है में अध्ययन चूहों के विशिष्ट हैimilar प्रयोगात्मक स्थितियों. इस प्रणाली के साथ संगत सेंसर ग्लूकोज और ग्लूटामेट सहित अन्य bioanalytes की माप के लिए उपलब्ध हैं. प्रणाली इसलिए जो व्यवहार में, ईईजी और bioanalyte सांद्रता का विश्लेषण कर रहे हैं अन्य प्रयोगात्मक स्थितियों में उपयोगी होने की संभावना है.
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Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Acknowledgments
रक्षा विभाग (रक्षा एडवांस्ड रिसर्च प्रोजेक्ट्स एजेंसी, युवा संकाय पुरस्कार, अनुदान N66001-09-1-२,११७ संख्या) और NINDS (R15NS070734) द्वारा वित्त पोषित अनुसंधान.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| BASi Mouse Guide Cannula | Pinnacle Technology/BASi Inc | 7032 | |
| Lactate Biosensor | Pinnacle Technology | 7004 | |
| Head Mount | Pinnacle Technology | 8402 | |
| Sleep/Biosensor Recording system | Pinnacle Technology | 8400-K1-SL | 2 EEG channels, 1 EMG channel, & 1 biosensor |
| Tethered Mouse in-vitro Calibration kit | Pinnacle Technology | 7000-K1-T | |
| Fiber Optic Guide Cannula | Plastics One | C312G | 21 Gauge Guide Cannula |
| Dummy Cannula | Plastics One | C312DC | 21 Gauge Dummy |
| Diamond Fiber Scribe | Thorlabs | S90W | |
| Fiber Connector Crimp Tool | Thorlabs | CT042 | |
| Furcation Tubing | Thorlabs | FT030 | 03.0 mm |
| Thorlabs | T10S13 | Max Dia. 0.012 | |
| Furcation Tube Stripper | Thorlabs | FTS3 | |
| Bare Hard Cladding Multimode Fiber | Thorlabs | BFL37-200 | 200 μm Core, 0.37 NA |
| Wire Snips/Kevlar Shears | Thorlabs | T865 | |
| Fiber Optic Epoxy | Thorlabs | F112 | |
| Fiber Stripper Tool | Thorlabs | ||
| Glass Polishing Plate | Thorlabs | CTG913 | |
| Rubber Polishing Pad | Thorlabs | NRS913 | |
| Eye Loupe | Thorlabs | JEL10 | |
| Kim Wipes | Thorlabs | KW32 | |
| Compressed Air | Thorlabs | CA3 | |
| Polishing Puck | Thorlabs | D50-xx | |
| Fiber Inspection scope | Thorlabs | CL-200 | |
| Polishing Films | Thorlabs | LFG5P, LFG3P, LFG1P, LFG03P | |
| FC/PC connector end | Thorlabs | 30126G2-240 | 240 μm Bore, SS Ferrule |
| MC Stimulus Unit | Multi-Channel Systems | STG-4002 | |
| MC Stimulus Software | Multi-Channel Systems | MC-Stimulus V 2.1.5 | |
| Blue Laser | CrystaLaser | CL473-050-0 | |
| Laser Power supply | CrystaLaser | CL2005 | |
| Fiber Optic Rotary Joint | Doric Lenses | FRJ-v4 | |
| Table 2. Supplies and equipment. | |||
References
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