Summary
En två-stegs metod för att fastställa kronisk njursjukdom (CKD) i Lewis råtta genom kirurgiskt avlägsnande 5/6th av njurmassa beskrivs. Kombination av kirurgiskt ingrepp, leder NOS-hämning och en hög salt diet till en modell som liknar mänsklig CKD, möjliggör studier av kausala mekanismer och utveckling av nya terapeutiska ingrepp.
Abstract
Kronisk njursjukdom (CKD) är ett globalt problem. Avtagande CKD progression är ett stort hälsoproblem prioritet. Eftersom CKD kännetecknas av komplicerade derangements av homeostas, integrativa djurmodeller är nödvändigt att studera utvecklingen och utvecklingen av CKD. För att studera utvecklingen av kronisk njursjukdom och nya terapeutiska ingrepp i CKD, använder vi den 5/6th modellen nefrektomi ablation, en välkänd experimentell modell av progressiv njursjukdom, liknar flera aspekter av människans CKD. Den bruttominskning njurmassa orsakar progressiv glomerulär och tubulo-interstitiell skada, förlust av kvarleva nefroner och utveckling av systemisk och glomerulär hypertoni. Det är också förknippat med progressiv intrarenala kapillär förlust, inflammation och glomeruloskleros. Riskfaktorer för CKD undantagslöst påverkar endotelfunktion. För att efterlikna detta kombinerar vi avlägsnande av 5/6th av njurmassa med kväveoxid (NO) utarmning och en hög salt diet. Efter ankomst och acklimatisering, djur återceive en NO-syntas-inhibitor (NG-nitro-L-arginin) (L-NNA) kompletterat till dricksvatten (20 mg / l) under en period av 4 veckor, följt av högersidig uninephrectomy. En vecka senare, är en delsumma nefrektomi (SNX) utförs på vänster sida. Efter SNX, djuren fick återhämta sig under två dagar följt av LNNA i dricksvatten (20 mg / L) för en period av ytterligare fyra veckor. En hög salt diet (6%), kompletterat i marken chow (se figur tidslinje 1), fortsätter genom hela experimentet. Progression av njursvikt följs över tid genom att mäta plasma urea, systoliskt blodtryck och proteinuri. Med sex veckor efter SNX har njursvikt utvecklas. Njurfunktionen mäts med hjälp av "gold standard" inulin och para-amino hippurinsyra (PAH) clearance teknik. Denna modell av CKD kännetecknas av en minskning av glomerulär filtrationshastighet (GFR) och effektivt renalt plasmaflöde (ERPF), hypertension (systoliskt blodtryck> 150 mmHg), proteinuri (> 50 mg/24 tim) Och mild uremi (> 10 mM). Histologiska funktioner inkluderar tubulo-interstitiell skada reflekteras av inflammation, tubulär atrofi och fibros och fokal glomeruloskleros leder till massiv minskning av friska glomeruli inom kvarlevabefolkning (<10%). Uppföljning till 12 veckor efter SNX visar ytterligare progression av CKD.
Introduction
På grund av sin progressiva karaktär, efterföljande slutstadiet njursjukdom, och tillhörande kardiovaskulär morbiditet och mortalitet, är CKD ett växande folkhälsoproblem 1. Avtagande CKD progression är därför ett stort hälsoproblem prioritet. Eftersom CKD kännetecknas av komplicerade derangements av homeostas, integrativa djurmodeller är nödvändigt att studera utvecklingen och utvecklingen av CKD. Njuren består av ett brett spektrum av olika celltyper som interagerar med varandra. Denna komplexitet kan inte efterliknas in vitro.
Att studera nya terapeutiska ingripanden i CKD, använder vi den 5/6th modellen nefrektomi ablation, en välkänd experimentell modell av progressiv njursjukdom, liknar flera aspekter av människans CKD 2,3. Den bruttominskning njurmassa orsakar progressiv glomerulär och tubulo-interstitiell skada, förlust av kvarleva nefroner och utveckling av systemisk och glomerulär hypertoni. Det är förenat med Progressive intrarenala kapillär förlust 4, inflammation och glomeruloskleros. Riskfaktorer för CKD undantagslöst påverkar endotelfunktion 5. Vi använde en råtta stam (Lewis) som är relativt resistent mot utveckling av kronisk njursjukdom och därför har vi kombinerat avlägsnande av 5/6th av njurmassa med kväveoxid (NO) utarmning 6, 7, 8 och en hög salt diet 9. Efter ankomst och acklimatisering, djuren får en NO-syntas-inhibitor (L-NNA) kompletterat till dricksvatten (20 mg / l) under en period av 4 veckor, följt av högersidig uninephrectomy (UNX) med fortsatt L-NNA efter två dagar . En vecka senare, är delsumma nefrektomi (SNX), dvs avlägsnande av 2/3rds av njurmassa utförs på vänster sida. Efter SNX, djuren fick återhämta sig under 2 dagar följt igen genom 20 mg / L LNNA i dricksvatten under en period av 4 veckor. En hög salt diet (6%), kompletterat i marken chow (se figur tidslinje 1), fortsätter genom hela experimentet. Than anledning att utföra UNX på höger sida och SNX på vänster sida är att de njurkärl är längre på vänster sida vilket gör det lättare att komma åt njuren utan att sträcka fartygen för mycket när njuren exponeras utanför kroppen . I litteraturen används modeller beskrivits, i vilken polerna hos den vänstra njuren avlägsnas först, följt av UNX av den högra njuren en vecka senare 10,11,12. I våra händer denna modell visade en mycket snabbare utveckling av njursvikt, men också en mycket större variation i förlust av njurfunktion. Progression av njursvikt följs över tid genom att mäta plasma urea, systoliskt blodtryck och proteinuri. Med sex veckor efter SNX har njursvikt utvecklats, som kännetecknas av markant minskning av glomerulär filtrationshastighet (69%) och effektivt renalt plasmaflöde (62%) 13 hypertension (systoliskt blodtryck> 150 mmHg), proteinuri (> 50 mg/24 hr) och mild uremi (> 10 mM). Histologiska funktioner inkluderar tubulO-interstitiell skada reflekteras av inflammation, tubulär atrofi och fibros och fokal glomeruloskleros leder till massiv minskning av friska glomeruli inom kvarlevabefolkning (<10%). Uppföljning till 12 veckor efter SNX visar ytterligare progression av CKD, ger ett gyllene tillfälle för utvärdering av terapeutiska ingrepp.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Alla experiment utförs i enlighet med de djurexperimentella etiska riktlinjer i Utrecht försöksdjuret kommitté. Protokollet utförs under ledning och godkännande av författarens institutionens djurens skötsel och användning kommittén.
CKD induceras i manliga inavlade Lewis-råttor (Charles River, Sulzfeld, Tyskland) vid en ålder av 8 veckor. Råttor är inrymda under standardbetingelser i en ljus-, temperatur-och fuktighet-kontrollerad miljö.
Ett. Kirurgi Framställning
- Sterilisera kirurgiska instrument:
- 1 elev vävnad pincett 1-2 tänder 12 cm
- 1 elev standard mönster pincett
- 2 Semken pincett
- En Mayo sax
- En elev iris sax
- En Olsen-Hegar nålhållaren med sax
- Filt
- Kontrollera inventarielista:
- Operationsbord med uppvärmning pad och lampa
- O
- Vävnader
- Shaver
- Scales
- Steril set
- Steril gasbinda 5x5 och 10x10
- 70% alkohol
- 0,9% NaCl-lösning
- 1 ml spruta
- Nålar (25G)
- Gel kuddar: spongostan
- Vicryl 4,0 och 5,0
- Buprenorfin 0,03 mg / kg (1:10 utspätt i fysiologisk salt)
- Ren bur för råttor efter operationen
2. Höger sida Uninephrectomy
- Desinficera bordet med 70% alkohol.
- Placera råttan i induktion box och inducera anestesi med 4% isofluran och 1 liter flöde av O 2. Anm: Beroende på råtta användes stammen, är pre-och perioperativ analgesi förskrivs, detta måste diskuteras med den lokala veterinären.
- Överför råtta till bord och plats näsa i konen. Råttan och noskonen är placerade på en värmedyna för att bibehålla råttans kroppstemperatur. Råttan is ventilerades med en blandning av 2% isofluran och 1 liter O 2.
- Raka flanken hos råttan och desinficera med alkohol. Tvätta och desinficera händerna och bära sterila kirurghandskar. Ha en head cap och en mask. Gör en 1 - 1.5 cm snitt parallellt med revbenen med anatomiska pincett och trubbig sax. Exponera njuren genom dissektion av ryggmusklerna.
- Den nedre pol njuren är synlig, försiktigt använd små trubbig pincett för att gripa perirenalt fettvävnad. YTTRE njuren genom att försiktigt dra i perirenalt fett med pincett. Var noga med att inte störa binjuren under denna procedur. Den binjuren kan lätt tas bort genom att placera en tång på den mediala stället i fettvävnad och försiktigt förflyttas uppåt mellan binjuren och njuren såsom visas i fig. 2.
- Placera njure försiktigt på gasväv och tydligt av omgivande fett och bindväv. Identifiera renal artär och ven och placera en ligatur (5,0vicryl) med en enda knut runt kärlen, men inte binda upp knuten.
- Flytta lös knut försiktigt längs kärlen mot aorta med ca 0,5 cm, för att skapa utrymme mellan njuren och knut. Detta görs för att förhindra att ligaturen glider av efter kapning.
- Knyt knut med två dubbla knutar. Om perfusionen stoppas, kommer färgen på njuren ändras omedelbart till brunt. Klipp inte ändarna av ligatur.
- Skär njurkärl nära njuren och ta bort njuren. Dra försiktigt i de långa ändarna av ligatur att kontrollera blödning i njurkärl. Den ligatur bör stanna på plats på fartyget. Skär långa ändar ligatur. Observera, kommer kvarlevan njurkärl dras tillbaka in i bukhålan omedelbart.
- Blot utskurna njure torka och väga den.
- Stäng skelettmuskulaturen snitt med rinnande suturer med Vicryl 5.0. Injicera 0,10 ml (0,03 mg / kg) buprenorfin im i bakbenet. Stänghud med Vicryl 4.0 med intrakutana suturer. Detta hindrar råttorna från att öppna såret. Obs: På grund av andningsdepression hos Lewis-råttor, vi bara ge postoperativ smärtlindring strax innan du stänger av isofluran.
- Hus råttan i en ren ensam bur med enkel tillgång till mat och vatten. Placera buren hälften på uppvärmningen pad O / N och kontrollera råtta noggrant nästa dag. När såret är stängd och råttan är aktiv, vilket är normalt mellan 6 och 12 timmar efter kirurgi, kan råttan placeras tillbaka i grupp bostäder.
Tre. Vänster sida Delsumma Nefrektomi
- Sju dagar senare, är samma förberedelser gjorts till vänster som höger sida som på 2,1-2,5. Före operation, är mängden av renal vävnad som måste tas bort motsvarande cirka 2/3rds av vikten av den högra njuren beräknas. Förbered små bitar av gel skum (Spongostan, Johnson & Johnson, New Jersey) före operation. Placera vassa saxar runt den övre polen av den vänstra njuren och resekera den övre polen i ett slag (för sax läge, se figur 3). Täck omedelbart med en bit gel skum och utövar milt tryck med steril gasbinda.
- Upprepa med den nedre polen i njuren som i 3.3.
- Lyft njure för att förhindra koagulering på huden. Behåll milt tryck på båda kuddar gel skum med steril gasbinda tills blödningen stannar. När blödningarna kvarstår lägga till ytterligare en skum pad.
- Placera kvarleva njure med tillhörande kuddar gel skum inne i buken. Stäng muskler och hud och följ 2,9-2,12.
4. Sham Kirurgi
- Skenopererade kontroller genomgå samma förfarande i syfte att exponera njurarna. Istället för extirpating njuren eller skära polerna en vecka senare, är båda njurarna decapsulated på en veckas intervall, noga med att inte störa binjurarna. Sårtillslutning och postoperativ vård är identical till 2.11 och 2.12.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Efter delsumma nefrektomi används ungefär 1/6th av total njurmassa kvar. Figur 4 visar vikten av den avlägsnade delen av den högra njuren med medelvärde och standardavvikelse i två tidigare experiment. Man bör hålla i minnet att i veckan efter UNX sker hypertrofi av vänster njure, vilket indikerar att den vikt som måste avlägsnas beräknas baserat på vikten av den högra njuren alltid resulterar i mindre än 5/6th borttagning. Men eftersom det inte är möjligt att fastställa vikten av den vänstra njuren under operation, vilket är det mest exakta sättet att ta bort ungefär 5/6th av den ursprungliga njurmassa.
Med tiden, råttor med CKD utvecklar högt blodtryck, uremi, anemi, proteinuri och en signifikant minskning av GFR och ERPF. Efter 6 veckor, har etablerat CKD utvecklats, en lämplig tid-punkt att testa räddnings insatser. Över tid är stark progression av hypertoni och proteinuri observerades samtidigt hematokritoch njurfunktion (GFR och ERPF) visar mild försämring (Figur 5). Andra symtom som vi inte fokuserar på i våra experiment inkluderar derangements i kalcium-fosfat och lipid metabolism, och många andra. Beroende på den stam av råttor, kan utvecklingen av CKD variera markant 14, 15, 2. Vi har lagt den höga salt kost och en NO-blockerare för att inducera hypertoni och endoteldysfunktion.
Progression av njursvikt spåras av uppsamling av urin (för mätning av mängden protein och kreatinin), blod (plasma urea och kreatinin) och systoliskt blodtryck. Vi inser att utvecklingen av högt blodtryck kan följas mer exakt när man använder telemetri istället för svans manschetten pletysmografi. Kreatininclearance kan beräknas men tenderar att underskatta nedgång i GFR på grund av omfattande tubulär kreatinin utsöndring hos råttor 16, vilket understryker vikten av guldmyntfoten för att bestämma njurfunktionen genom inulin och PAH clearance 17, 18, 19. Koeners et al. beskrivs hela förfarandet 20. Inulin och PAH-clearance är beräknade från deras koncentration i urinprovet (U), urin flödeshastigheten (V), och vars plasmakoncentration (P). Vi visade tidigare en markant minskning av GFR och ERPF i denna modell med klassiska clearance teknik, medan det var mindre tydligt från förändringar i plasma kreatinin, urea i plasma, eller kreatininclearance 13.
Figur 1. Tidslinje för L-NNA, hög salt diet, UNX och SNX. Longitudinella mått för att bestämma njurfunktionen och uppsägning tid-punkten indikeras. När längre uppföljning behövs efter SNX, kan 6% NaCl dieten fortsätta över tiden.
98fig2.jpg "/>
Figur 2. Binjuren dissekering. För att ta bort binjuren utan att störa den, placera pincett i fettet mellan njuren och binjuren och flytta från uppåt fartyget pol till toppen som visar den röda linjen. Figur anpassad från den 20: e amerikanska upplagan av Grays Anatomy av människokroppen, 1918.
Figur 3. Delsumma nefrektomi. Röda linjer visar skäreggar. Figur anpassad från den 20: e amerikanska upplagan av Grays Anatomy av människokroppen, 1918.
Figur 4. Andel bort renal vävnad efter delsumma nefrektomi i två olika experiment. Exp 1, n = 16, exp 2, n = 23.
Figur 5. Utveckling av njursvikt i CKD råttor avslutades 6 veckor efter SNX (sdashed linjer n = 5) jämfört med friska kontroller (pdashed linjer n = 5) och CKD råttor upp 12 veckor efter SNX (£ n = 8) jämfört med friska kontroller (• n = 8). CKD-råttor erhöll L-NNA till vecka 4 och hög saltdiet från vecka 1 tills terminering (ej visad i grafer). SNX inducerar hypertension (mätt med tailcuff pletysmografi) (A), uremi (B), anemi (C) och proteinuri (D) och markant minskning av GFR (E) och ERPF (F) 13. * Indikerad p <0,05 vs friska kontroller för varje tidpunkt testas genom tvåvägs ANOVA med Bonferroni efter provet för graferna A, B och D. Grafer C, E och F testas med ett tvåsidigtt-test för 6 och 12 veckor tidpunkt. Klicka här för att visa en större bild .
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Kirurgiskt avlägsnande av 5/6th av njurmassa i Lewis råtta, kombinerat med en hög salt diet och tillfälliga NOS hämning leder till en modell av CKD som liknar människans CKD och tillåter studier av kausala mekanismer och effekten av terapeutiska ingrepp i CKD.
Den 5/6th nefrektomi modellen är en välkänd och utförligt beskrivna modellen för CKD. Däremot helt enkelt avlägsna 5/6th av njurmassa inte leda till omedelbar njursvikt i alla råttstammar. Vi använder Lewis-råttor för att studera effekterna av cellbaserade terapier i CKD som tillgången på GFP + Lewisråttor 21 medger cell-spårning av administrerade donatorceller i mottagaren (nonGFP +) råtta. Den Lewis-råtta är relativt resistent mot utveckling av njurskada och utveckling av CKD är långsam jämfört med andra stammar 22, 15. Därför har vi kombinerat avlägsnande av 5/6th av njurmassa med någon avskrivning och en hög salt diet eftersom detta påminner flera aspekter av mänsklig CKDgillar högt saltintag och endoteldysfunktion. Läsaren bör ha i åtanke att det är nödvändigt för att kombinera 5/6th nefrektomi med hög salt diet och / eller någon avskrivning beror på den stam av råttor som användes för experimenten.
Vi spelade 5/6th nefrektomi i ett förfarande i två steg istället för ett förfarande i ett steg, eftersom detta anses vara mindre betungande för djuret, är förknippad med mindre kirurgi-släkt dödlighet och föredras av vår djurexperimentella utskott. Vi föredrog flank snitt istället laparatomy att nå njurarna som laparotomi är associerad med en högre risk för sårinfektion, uppluckring av stygn, subkutan diskbråck och sammanväxningar till tarmen jämfört med flank snitt. Dessutom, om den experimentella designen innebär en intervention med laparotomi - vilket är fallet i våra experimentella studier för administration av benmärgsceller i njurartären av kvarlevan njur-utför laparotomies för SNX är inte preferable som upprepade laparotomies bör undvikas.
Efter kirurgiskt avlägsnande av 5/6th av renal massa, kan flera kritiska problem uppstår. Under UNX det kan vara svårt att stabilisera njuren eftersom det omgivande fettet lossnar lätt. Två metoder kan användas för att få njuren exponeras. 1) Använd mindre pincett för att få grepp om de njurkärl genom att försiktigt flytta ner från den nedre polen av njuren mot kärlsystemet och dra försiktigt tills du kan stabilisera njuren. 2) Använd trubbig pincett för att försiktigt dra njuren ur buken. När njuren exponeras, kan gasväv användas för att stoppa den blödning som kan uppstå under denna procedur. För att förhindra blödning, börja dra fettet vid den nedre polen hos njuren, där fettet är starkt knutna till njuren.
Det är viktigt att skapa utrymme mellan knut runt renal kärl och njure för att förhindra blödning efter avlägsnande av njuren som knuten kan glida avde njurkärl grund av den inkommande blodflödet, snabbt fylla buken med blod. En gasbinda kan användas för att avlägsna blodet och trycket bör tillämpas för att stoppa blödning. Använd pincett för att gripa renal och placera en ny ligatur. När njurkärl inte kan spåras tillbaka, upprätthålla trycket tills blödningen stoppas. Tillsätt 1 ml fysiologisk salt för att förhindra uttorkning på grund av blödning i bukhålan och vänta ca 5 minuter innan du stänger muskel-och hudlagret. Övervaka råtta extra noga under de följande dagarna. När ligatur är fortfarande på plats efter avlägsnande av njuren men njurkärl blöder, kan de långa ändar ligatur användas för att knyta av fartygen.
När efter dissekering av polerna, trots hålla trycket på kuddar gel skum om blödningen kvarstår, är det sannolikt på grund av skada på en stor njurartärstenos eller njurbäckenet. Denna blödning kan stoppas genom att placera nya kuddar gel skum på såret, noga med att inte röraskum pad under lyfta kvarleva eftersom de större fartygen är nära hilum, och väntar på en längre period.
Blod kan spåras i urinen tills 2 dagar efter kirurgi. När njurbäckenet är skadad eller en stor renal kärl kvarstår att blöda, kommer det att finnas en ihållande spår av hematuri. Råttor med ihärdig hematuri efter operationen måste avlivas eftersom det inte är möjligt att stoppa blödningen. Om hematuri observeras vid en senare tidpunkt, efter kirurgi, vilket kan förekomma upp till två veckor efter operationen, bör råttan även avlivas sedan blod har levrat inne i njurbäckenet och kommer så småningom täppa till urinledaren och urinblåsa, vilket leder till obstruktion.
När snabbare utveckling av njursvikt krävs, kan protokollet vändas, dvs först ta bort polerna följt av uninephrectomy en vecka senare. Detta omvända modell har använts i andra råttstammar, se exempelvis Liu et al.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har ingenting att lämna ut.
Acknowledgments
Vi tackar Krista den Ouden för hennes utmärkta tekniskt bistånd. Denna teknik stöds ekonomiskt av den holländska Kidney Foundation, bevilja C06.2174. MCV stöds av Nederländernas organisation för vetenskaplig forskning (NWO) Vidi-bidrag 016.096.359.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Reagent | |||
| L-NNA | Sigma-aldrich | N5501 | |
| Spongostan dental: gel foam pads 1x1x1 cm | Johnson&Johnson | Ms0005 | |
| Ethicon Vicryl FS-2S naald 4/0 V392H p/36 | Ethicon | V303H | |
| Ethicon Vicryl RB-1+ naald 5/0 V303H p/36 | Ethicon | V392H | |
| Buprenorphine (0.3 mg/ml) | Via local pharmacist ordered by Reckitt Benckiser pharmaceuticals | unknown | |
| Equipment | |||
| Student Tissue Forceps - 1x2 Teeth 12 cm | Fine Science Tools (FST) | 91121-12 | |
| Student Standard Pattern Forceps | FST | 91100-12 | |
| Mayo Scissors | FST | 14010-15 | |
| 2X Semken Forceps | FST | 11008-13 | |
| Student Iris Scissors | FST | 91460-11 | |
| Olsen-Hegar Needle Holder | FST | 12002-14 | |
|
|||
References
- AS, G. o, Chertow, G. M., Fan, D., McCulloch, C. E., Hsu, C. Y. Chronic kidney disease and the risks of death, cardiovascular events, and hospitalization. N. Engl. J. Med. 351 (13), 1296-1305 (2004).
- Fleck, C., Appenroth, D., et al. Suitability of 5/6 nephrectomy (5/6NX) for the induction of interstitial renal fibrosis in rats--influence of sex, strain, and surgical procedure. Exp. Toxicol. Pathol. 57 (3), 195-205 (2006).
- Griffin, K. A., Picken, M. M., Churchill, M., Churchill, P., Bidani, A. K. Functional and structural correlates of glomerulosclerosis after renal mass reduction in the rat. J. Am. Soc. Nephrol. 11 (3), 497-506 (2000).
- Kang, D. H., Kanellis, J., et al. Role of the microvascular endothelium in progressive renal disease. J. Am. Soc. Nephrol. 13 (3), 806-816 (2002).
- Baylis, C. Nitric oxide synthase derangements and hypertension in kidney disease. Curr. Opin. Nephrol. Hypertens. 21 (1), 1-6 (2012).
- Bongartz, L. G., Braam, B., et al. Transient nitric oxide reduction induces permanent cardiac systolic dysfunction and worsens kidney damage in rats with chronic kidney disease. Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 298 (3), 815-823 (2010).
- Fujihara, C. K., De N, G., Zatz, R. Chronic nitric oxide synthase inhibition aggravates glomerular injury in rats with subtotal nephrectomy. J. Am. Soc. Nephrol. 5 (7), 1498-1507 (1995).
- Fujihara, C. K., Sena, C. R., Malheiros, D. M., Mattar, A. L., Zatz, R. Short-term nitric oxide inhibition induces progressive nephropathy after regression of initial renal injury. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 290 (3), F632-F640 (2006).
- Dikow, R., Kihm, L. P., et al. Increased infarct size in uremic rats: reduced ischemia tolerance? J. Am. Soc. Nephrol. 15 (6), 1530-1536 (2004).
- Elrashidy, R. A., Asker, M. E., Mohamed, H. E. Pioglitazone attenuates cardiac fibrosis and hypertrophy in a rat model of diabetic nephropathy. J. Cardiovasc. Pharmacol. Ther. 17 (3), 324-333 (2012).
- Haylor, J., Schroeder, J., et al. Skin gadolinium following use of MR contrast agents in a rat model of nephrogenic systemic fibrosis. Radiology. 263 (1), 107-116 (2012).
- Moriguchi, Y., Yogo, K., et al. Left ventricular hypertrophy is associated with inflammation in sodium loaded subtotal nephrectomized rats. Biomed. Res. 32 (2), 83-90 (2011).
- van Koppen, A., Joles, J. A., et al. Healthy bone marrow cells reduce progression of kidney failure better than CKD bone marrow cells in rats with established chronic kidney disease. Cell Transplant. , (2012).
- Baylis, C., Corman, B. The aging kidney: insights from experimental studies. J. Am. Soc. Nephrol. 9 (4), 699-709 (1998).
- Szabo, A. J., Muller, V., Chen, G. F., Samsell, L. J., Erdely, A., Baylis, C. Nephron number determines susceptibility to renal mass reduction-induced CKD in Lewis and Fisher 344 rats: implications for development of experimentally induced chronic allograft nephropathy. Nephrol. Dial Transplant. 23 (8), 2492-2495 (2008).
- Darling, I. M., Morris, M. E. Evaluation of "true" creatinine clearance in rats reveals extensive renal secretion. Pharm. Res. 8 (10), 1318-1322 (1991).
- Levey, A. S. Measurement of renal function in chronic renal disease. Kidney Int. 38 (1), 167-184 (1990).
- Myers, G. L., Miller, W. G., et al. Recommendations for improving serum creatinine measurement: a report from the Laboratory Working Group of the National Kidney Disease Education Program. Clin. Chem. 52 (1), 5-18 (2006).
- Hostetter, T. H., Meyer, T. W. The development of clearance methods for measurement of glomerular filtration and tubular reabsorption. Am. J. Physiol. Renal Physiol. 287 (5), F868-F870 (2004).
- Koeners, M. P., Racasan, S., Koomans, H. A., Joles, J. A., Braam, B. Nitric oxide, superoxide and renal blood flow autoregulation in SHR after perinatal L-arginine and antioxidants. Acta. Physiol. (Oxf). 190 (4), 329-338 (2007).
- van den Brandt, J., Wang, D., Kwon, S. H., Heinkelein, M., Reichardt, H. M. Lentivirally generated eGFP-transgenic rats allow efficient cell tracking in vivo. Genesis. 39 (2), 94-99 (2004).
- Kreutz, R., Kovacevic, L., Schulz, A., Rothermund, L., Ketteler, M., Paul, M. Effect of high NaCl diet on spontaneous hypertension in a genetic rat model with reduced nephron number. J. Hypertens. 18 (6), 777-782 (2000).
- Liu, Z. C., Chow, K. M., Chang, T. M. Evaluation of two protocols of uremic rat model: partial nephrectomy and. 25 (6), 935-943 (2003).
- Griffin, K. A., Picken, M., Bidani, A. K. Method of renal mass reduction is a critical modulator of subsequent hypertension and glomerular injury. J. Am. Soc. Nephrol. 4 (12), 2023-2031 (1994).
- Meyer, F., Ioshii, S. O., et al.
