Summary
कृन्तकों में गर्भाशय ग्रीवा रीढ़ की हड्डी में चोट के बाद forelimb समारोह के मूल्यांकन के लिए तीन नए व्यवहार परीक्षण (forelimb कदम प्रत्यावर्तन, postural अस्थिरता परीक्षण, पास्ता से निपटने परीक्षण) में वर्णित हैं.
Abstract
ग्रीवा रीढ़ की हड्डी की चोट (CSCI) हानि या ऊपरी अंग और हाथ समारोह के नुकसान सहित विनाशकारी न्यूरोलॉजिकल घाटा, पैदा कर सकता है. मनुष्य में रीढ़ की हड्डी की चोट का बहुमत ग्रीवा के स्तर पर होते हैं. इसलिए, गर्भाशय ग्रीवा चोट मॉडल विकसित करने और प्रासंगिक और संवेदनशील व्यवहार परीक्षण के विकास के लिए काफी महत्व की है. यहाँ हम चूहों में गर्भाशय ग्रीवा रीढ़ की हड्डी में चोट होने के बाद एक नव विकसित forelimb कदम प्रत्यावर्तन परीक्षण के उपयोग का वर्णन. एक postural अस्थिरता परीक्षण (गड्ढे), और एक पास्ता से निपटने टेस्ट: इसके अलावा, हम रीढ़ की हड्डी में चोट के बाद इस्तेमाल नहीं किया गया है कि दो व्यवहार परीक्षण का वर्णन है. सभी तीन व्यवहार परीक्षण चोट करने के लिए अत्यधिक संवेदनशील होते हैं और आसानी से उपयोग कर रहे हैं. इसलिए, हम इन व्यवहार परीक्षण CSCI के बाद चिकित्सीय रणनीतियों की जांच में सहायक हो सकता है कि लग रहा है.
Introduction
ग्रीवा रीढ़ की हड्डी की चोट (CSCI) सभी Scis के बारे में 62% (का प्रतिनिधित्व रोगियों में एससीआई का सबसे प्रचलित रूप है http://www.spinalcord.uab.edu ). ग्रीवा रीढ़ की हड्डी के घायल होने ऊपरी extremities के साथ ही सांस लेने में दोष में परिणाम कर सकते हैं. CSCI के साथ रोगियों में एक ताजा अध्ययन के हाथ और / या हाथ के आंशिक या पूर्ण समारोह एक प्रमुख प्राथमिकता है 1 माना जाता है कि पता चलता है. इसलिए, CSCI मॉडल और आसान है, संवेदनशील और उपयोग करने के लिए विश्वसनीय हैं कि एसोसिएटेड व्यवहार assays के विकास के एक महत्वपूर्ण लक्ष्य है. कृन्तकों 1-17 में CSCI बाद forelimb समारोह का आकलन करने के लिए कई उपयोगी व्यवहार परीक्षण, हालांकि, इन परीक्षणों के कई का उपयोग करने के लिए मुश्किल कर रहे हैं और विशेष उपकरणों की आवश्यकता नहीं हैं. एक लंबे समय की आवश्यकता है जो पास्ता से निपटने परीक्षण अन्य समूहों 18,19 द्वारा विकसित किया गया है, लेकिन इन परीक्षणों जानवरों विशिष्ट पास्ता खाने पिंजरों में फिल्माया जाएगा कि आवश्यकताहम प्रस्ताव विधि 'जानवरों के घर पिंजरे में प्रदर्शन किया जा सकता है, जबकि अवधि प्रशिक्षण. पहले वर्णित पास्ता परीक्षण यहाँ वर्णित परीक्षण के विपरीत, महत्वपूर्ण विश्लेषण समय और अक्सर महंगी सॉफ्टवेयर की आवश्यकता होती है. हमारे विधि के लक्ष्य को विकसित करने और उपयोग, उपयोग करने के लिए आसान विश्वसनीय हैं कि व्यवहार परीक्षण, और महंगे उपकरण की आवश्यकता नहीं है के लिए है. विशेष रूप से, यहां वर्णित forelimb कदम प्रत्यावर्तन परीक्षण एक पुरानी उपचार प्रशासित है पहले समकक्ष उपचार समूह बनाने के लिए एक साधन उपलब्ध कराने, शोधकर्ताओं जल्दी चोट के बाद घाव मात्रा का अनुमान लगाने के लिए अनुमति देता है. (1) forelimb कदम प्रत्यावर्तन, (2) postural अस्थिरता, और (3) पास्ता हैंडलिंग: इस अध्ययन में, हम विस्तार में तीन उपन्यास व्यवहार परीक्षण का वर्णन है.
उपयोग करने के लिए सही व्यवहार परीक्षण निर्धारित करने के लिए मुश्किल हो सकता है. दरअसल, हम कोई भी व्यवहार परीक्षण पर्याप्त रूप से forelimbs के कामकाज का आकलन कर सकता है. इसलिए, हम गधे को कुछ व्यवहार परीक्षण का एक संयोजन का उपयोग कर सुझावएससीआई के बाद ईएसएस forelimb समारोह. स्पष्ट तौर पर बोल, एक एक खुले क्षेत्र हरकत प्रकार कार्य जानवरों सामान्य हरकत दौरान उनके forelimb के उपयोग पर मूल्यांकन कर रहे हैं जहां (जैसे forelimb हरकत पैमाने, सिलेंडर), और जानवरों के लिए एक विशेष कार्य को करने के लिए कहा जाता है जहां किसी कार्य विशेष परीक्षा, का उपयोग करना चाहिए उनके forelimb के उपयोग (जैसे, पास्ता खाने, postural अस्थिरता, पकड़ शक्ति, आदि) को शामिल. विस्तार में यहाँ वर्णित व्यवहार परीक्षण ~ एक सप्ताह के बाद घाव (forelimb कदम प्रत्यावर्तन, postural अस्थिरता, पास्ता हैंडलिंग), contralesional forelimb (forelimb कदम प्रत्यावर्तन, postural अस्थिरता पर एक एकतरफा घाव के प्रभाव पर घाव की गंभीरता का निर्धारण करने के लिए उपयोगी होते हैं ) और forelimbs के ठीक मोटर आंदोलन (पास्ता हैंडलिंग). गंभीरता और प्रयोग घाव के प्रभाव को जानने का भी उचित व्यवहार परीक्षण निर्देशित कर सकते हैं. कलाई की ठीक मोटर आंदोलनों एक परीक्षण का उपयोग कर, घाव के बाद संभव नहीं हैं कि उपायों और quantifएँ forelimb पंजे का प्रयोग अनुचित है. उदाहरण के लिए, पहले से वर्णित पास्ता से निपटने के परीक्षण के कई अंकों की व्यक्तिगत आंदोलनों पर गहराई में अधिक लग रही है, लेकिन, हम हमारे चोट की गंभीरता और स्थान के साथ पाया, यह अप्रासंगिक था और बजाय अंग के समग्र प्लेसमेंट में अंतर देखा.
शोधकर्ताओं ने कई व्यवहार परीक्षण का संचालन और परिणामों के आधार पर प्रदर्शन के लिए उनमें से एक नमूने का उपयोग करने के लिए परीक्षा हो सकती है, हालांकि, यह प्रयोग किया जा रहा प्रत्येक प्रयोगात्मक मॉडल के लिए एक पायलट अध्ययन घाव के लिए उचित व्यवहार परीक्षण निर्धारित करने के लिए किया जाता है की सिफारिश की है. इसलिए, यह उपयोगकर्ता कार्यरत होना व्यवहार परीक्षण पर निर्णय लेने से पहले एक विशेष घाव प्रकार का घाटा और सीमा के प्रकार के कम से कम कुछ पूर्व ज्ञान होना चाहिए कि नोट करना महत्वपूर्ण है. व्यवहार प्रदर्शन के आधार पर घाव की गंभीरता का आकलन भी उपचार समूहों के इलाज से पहले घाव गंभीरता का एक समान वितरण के साथ बनाया जा करने की अनुमति देता हैजाहिर दिलाई है.
Protocol
सभी पशु प्रक्रियाओं के ऑस्टिन में टेक्सास विश्वविद्यालय में आंतरिक IACUC साथ और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (एनआईएच) के दिशा निर्देशों के तहत अनुमोदित प्रोटोकॉल के अनुसार किया गया.
इस अध्ययन में प्रयुक्त जानवर एक अनंत क्षितिज impactor, या एक C3/C4 पार्श्व hemisection मॉडल और इन तरीकों के अन्य मॉडलों से 18 अधिक मोटे तौर पर लागू किया जा सकता का उपयोग कर एक C3/C4 पार्श्व कुचलन चोट थी. अध्ययन की अवधि के लिए हम शोधकर्ताओं से पहले चोट करने के लिए 2 सप्ताह के लिए पशुओं का परीक्षण अनुशंसा करते हैं कि 3 दिनों चोट के बाद और नियमित रूप से (जैसे साप्ताहिक). विशेष रूप से तीन दिनों के बाद सर्जरी में, पोस्ट सर्जिकल जानवरों पर व्यवहार परीक्षण करते समय, देखभाल जानवरों सर्जरी से पर्याप्त बरामद और व्यवहार परीक्षण प्रक्रियाओं जानवरों के लिए अतिरिक्त दर्द या तनाव का कारण नहीं है कि है कि लिया जाना चाहिए.
सामान्य में, हैंडलिंग और पूर्व परीक्षण के 2-3 सप्ताह पहले सर्जरी की जरूरत हो सकती. यह वे परीक्षण के साथ ही पशु परीक्षण सतह पर आसानी से चारों ओर ले जाने के लिए अनुमति दौरान नियंत्रित किया जाएगा कैसे करने के लिए एक समान तरीके से उन्हें संभाल द्वारा परीक्षण पर्यावरण के लिए जानवर आराम से हो रही शामिल है. यह आयोजित किया जा रहा करने के लिए इस्तेमाल पशु, इस से निपटने के लिए पशु acclimate करने के लिए गैर प्रत्यक्ष गतियों में परीक्षण सतह पर और निकट जानवर ले जाकर किया जा सकता है पाने के लिए भी महत्वपूर्ण है. यह शुरुआत में जानवरों को आराम और में परीक्षण सत्र के बीच में करने के लिए भी महत्वपूर्ण है. , जानवरों को आराम एक "wheelbarrow" स्थिति में, एक forelimb केवल असर रुख में एक tabletop पर पशु पकड़ और forelimbs सतह को छूने के लिए अनुमति tabletop पर धीरे पशु बाउंस करने के लिए. यह एक स्थिर सतह के लिए उन्हें नीचे भावना के लिए जानवरों सिखाता है और यह परीक्षण के शुरू होने से पहले जानवरों आराम कर रहे हैं कि यह सुनिश्चित करता है क्योंकि प्रक्रिया में एक महत्वपूर्ण और आवश्यक कदम है.
1. Forelimb कदम प्रत्यावर्तन टेस्ट
- टेस्ट सारांश: दोनों forelimbs वे उनके forelimbs का उपयोग वैकल्पिक निर्धारित करें कि क्या टेबलटॉप छूने के साथ जानवरों रखें. कदम करने के लिए प्रयास करने के लिए उन्हें मजबूर गुरुत्वाकर्षण के अपने केन्द्र स्थानांतरण, आगे चूहे ले जाएँ. इस परीक्षा में प्रत्येक जानवर के साथ चार बार दोहराया जाता है और कम से वैकल्पिक, या 75%, की तुलना में अधिक के लिए एक जानवर से पता चलता है की क्षमता है, यह एक alternator माना जाता है. गैर alternators माना जाता है कि जानवरों को बार बार एक ही forelimb के साथ कदम होगा, तो यह एक मजबूर गति काम है.
- उनके शरीर तालिका से लगभग 90 डिग्री के साथ एक "wheelbarrow" स्थिति में, एक forelimb केवल वजन असर रुख में एक tabletop पर एक पशु पकड़ो.
- जानवर आराम से प्रकट होने के बाद, टेबलटॉप की सतह के साथ ले जाने के लिए आगे जानवर धक्का.
- निर्धारित और सतह पर चल रहा है, जबकि चूहे विकल्पों forelimbs का उपयोग करें कि क्या रिकॉर्ड है.
- नोट और आंदोलन शुरू किया और ओ पशु वैकल्पिक कर सकते हैं या नहीं, कि forelimb रिकॉर्डn Forelimb कदम प्रत्यावर्तन टेस्ट स्कोर शीट (प्रदान).
- एक ओर (दाएं या बाएं हाथ) के साथ पशु पकड़े, जबकि कम से कम दो बार यह परीक्षण दोहराएँ. दूसरे हाथ में पशु पकड़े, जबकि कम से कम दो बार फिर से दोहराएँ.
- चूहों इस क्षमता दिखाई तो प्रत्यावर्तन का पैटर्न एक विलंब के बाद बनी हुई है, तो कदम प्रत्यावर्तन निर्धारित करने के लिए पहले कदम के बाद एक 5 सेकंड रुको शुरू करने से फिर से परीक्षण किया जा सकता है. स्कोर शीट में परिणाम और रिकॉर्ड ध्यान दें.
- इस परीक्षा में दैनिक इस्तेमाल किया जा सकता है, और यह जानवरों के एक दोहराया उपायों प्रयोग के लिए कम से कम साप्ताहिक परीक्षण किया जा सिफारिश की है.
नोट: यह परीक्षण पशुओं के प्रत्यावर्तन व्यवहार को प्रभावित कर सकता क्योंकि प्रयोगकर्ता के हाथ की स्थिति वैकल्पिक करने के लिए महत्वपूर्ण है. उपलब्ध कराई कदम प्रत्यावर्तन स्कोर शीट पंजा स्थिति को ध्यान दें और घुसने के दौरान उपयोग करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. हम वर्तमान में हमारे स्कोरिंग सिस्टम में उन डेटा शामिल नहीं किया है (हालांकि हम केवलसमूह वर्तमान अध्ययन में lesioned जानवरों) के लिए खेतों में प्रत्यावर्तन स्थिति, उपयोगकर्ताओं को आसानी से विशेष परियोजना के आधार पर विश्लेषण के भाग के रूप में पंजा स्थिति डेटा शामिल कर सकते हैं.
2. Postural अस्थिरता टेस्ट
- टेस्ट सारांश: इस व्यवहार परीक्षण के लिए, हालांकि, प्रत्येक forelimb व्यक्तिगत रूप से परीक्षण किया जाना चाहिए, forelimb प्रत्यावर्तन परीक्षण के लिए के रूप में एक ऐसी ही स्थिति में चूहों पकड़. टेबलटॉप, फिसल ताल्लुक़, या परीक्षण के दौरान forelimbs के खींचकर रोकने के लिए sandpaper (संख्या 220) के साथ कवर किया जाना चाहिए.
- इस परीक्षण में, यह अपने संतुलन हासिल करने forelimb की जा रही जांच के साथ एक कदम उठाने के लिए पशुओं के लिए लेता दूरी रिकॉर्ड किया जाएगा.
- एक अध्ययन समूह के भीतर पशु लगभग शरीर के वजन में एक ही वजन, आकार और उम्र के रूप में बड़े मतभेद किसी दिए गए जानवर 19 के गुरुत्वाकर्षण का केंद्र बनाए रखने के लिए आवश्यक आधारभूत दूरी में भिन्नता में परिणाम कर सकते हैं होना चाहिए. एक दिखावा समूह होना चाहिएव्यवहार में परिवर्तन उत्थान या वसूली के बजाय उम्र और वजन के कारण हैं कि सत्यापित करने के लिए गड्ढे का उपयोग करते समय शामिल थे.
- एक आरामदायक रुख में एक tabletop पर एक पशु पकड़ो और दोनों forelimbs सतह तक पहुँचने के लिए अनुमति देते हैं, जानवर आराम से उनके शरीर तालिका से लगभग 90 डिग्री के साथ एक "wheelbarrow" स्थिति में होना चाहिए. यह एक अधिक ऊर्ध्वाधर स्थिति में पशु पकड़ करने के लिए महत्वपूर्ण है कि ध्यान दें. इस एक कदम को गति प्रदान करने की जरूरत है एक और अधिक सुसंगत दूरी गुरुत्वाकर्षण का केंद्र हासिल करने के लिए अनुमति देगा.
- हल्के से जानवर के धड़ के खिलाफ एक forelimb नियंत्रित करना और ऊपर से देखा के रूप में शून्य रेखा के साथ चूहे की नाक संरेखित.
- आगे चूहे ले जाएँ. यह गुरुत्वाकर्षण आगे अपने संतुलन हासिल करने के लिए कदम करने के लिए पशु उत्तेजक के पशु के केंद्र में बदलाव होगा.
- दो बार चूहा कदम के बाद नाक की नई स्थिति रिकार्ड और दूरी एक कदम ट्रिगर करने के लिए जरूरत के रूप में इन दो चरणों के औसत का उपयोग करें.
- प्रत्येक foreli टेस्टएमबी स्वतंत्र रूप से 5x, वापस 0 स्थिति के लिए पशु को लाने और पशु अनुरूप परिणाम सुनिश्चित करने के लिए जारी रखने से पहले प्रयोगकर्ता के हाथ में आराम से किया जा रहा है कि पुष्टि करने.
- प्रदान की postural अस्थिरता टेस्ट (गड्ढे) स्कोर शीट, पर रिकॉर्ड. इस परीक्षा में दैनिक किया जा सकता है, और यह जानवरों के प्रयोग की अवधि के लिए कम से कम साप्ताहिक जांच की जाती है कि सिफारिश की है.
3. पास्ता हैंडलिंग टेस्ट
- टेस्ट सारांश: यह एक पास्ता खाने सत्र के दौरान पास्ता और पंजा पसंद का एक टुकड़ा खाने के लिए लगने वाले समय को निर्धारित करने के लिए इस परीक्षण का प्रयोग करें. इस परीक्षण में, शुष्क पास्ता की 4.0 सेमी किस्में उपयोग (पतली स्पेगेटी, व्यास ~ 1.6 मिमी). परीक्षण प्रत्येक परीक्षण सुबह लगभग एक ही समय में प्रशासित किया जाना चाहिए. इस उत्पन्न नहीं होती है लेकिन खाद्य वापसी के 4-6 घंटे के परीक्षण से पहले की सिफारिश की है, कृंतक आम तौर पर आसानी से शुष्क पास्ता खाते हैं.
- आधारभूत माप पिछले 1-2 सप्ताह का अधिग्रहण किया जाना चाहिएचोट करने के लिए. पिछले आधारभूत रिकॉर्डिंग करने के लिए, चूहों के परीक्षण के लिए उन्हें तैयार करने के लिए उनके घर पिंजरे में पास्ता का एक ही प्रकार दी जानी चाहिए. फिर, चूहों एक परीक्षण कक्ष में पास्ता खाने और पास्ता खाने के लिए समय रिकॉर्ड करने के लिए अनुमति देते हैं. पास्ता टुकड़े forelimbs का उपयोग आसानी से देखा जा सकता है जहां परीक्षण के चैम्बर के सामने के पास रखा जाना चाहिए. प्रत्येक पास्ता खाने सत्र पास्ता के कम से कम तीन टुकड़े खाने में शामिल करना चाहिए. उनके पास्ता खाने के समय कम से कम 3 दिनों के लिए संगत है अगर चूहे पास्ता खाने में कुशल माना जाता है.
- परीक्षण के चैम्बर में लगातार पास्ता खाने के लिए चूहों प्रशिक्षण के बाद, रिकॉर्डिंग कक्षों में चूहों जगह है.
- पास्ता हैंडलिंग स्कोर शीट पर देखा, पास्ता का एक टुकड़ा, इस्तेमाल किया forelimbs, और forelimbs के पदों पर खाने के लिए परीक्षण कक्ष और रिकॉर्ड समय के सामने के पास फर्श पर पास्ता टुकड़े रखें.
- इस परीक्षा में दैनिक किया जा सकता है, लेकिन टी के रूप में 'जानवरों के वजन का अवलोकन करते हुए यह साप्ताहिक यह प्रदर्शन करने की सिफारिश की हैओ पशुओं पर फ़ीड नहीं.
नोट: पास्ता हैंडलिंग स्कोर शीट पास्ता और इस अध्ययन में शामिल डेटा के लिए इसी तरह पंजा उपयोग, खाने के लिए समय रिकॉर्ड करने के लिए स्थान उपलब्ध कराता है. हम भी ऐसे पंजा स्थिति के रूप में एक पास्ता खाने सत्र के दौरान पंजा उपयोग के अतिरिक्त विवरण दर्ज करने के लिए क्षेत्रों को शामिल किया है.
Representative Results
हम जानवरों सुधार के विश्लेषण के लिए एक दोहराया उपायों प्रकार प्रयोग में प्रयोग के दौरान नियमित रूप से परीक्षण किया जा सकता है और समय के साथ सुधार का विश्लेषण करने की सलाह देते हैं.
Forelimb कदम प्रत्यावर्तन टेस्ट
इस परीक्षा में अपनी forelimbs के उपयोग के लिए वैकल्पिक एक जानवर की क्षमता निर्धारित करने के लिए बनाया गया है. Forelimb कदम प्रत्यावर्तन परीक्षण का उपयोग करना, पशुओं की केवल 50% 12-16 सप्ताह के बाद चोट (चित्रा 1 ए) में CSCI 19 के बाद उनके forelimbs का उपयोग वैकल्पिक कर रहे थे. अगला हम दूसरे चरण के लिए आगे जानवर जाने से पहले पहला कदम के बाद पशु स्थिर पकड़ कर एक देरी (5 सेकंड) की शुरुआत की. उनके अंगों का उपयोग (कुल lesioned समूह के 25%) बारी गया है कि जानवरों का केवल 50% एक 5 सेकंड देरी (चित्रा 1 बी) के बाद वैकल्पिक करने के लिए कर रहे थे. हम शरीर रचना का अध्ययन के साथ इन निष्कर्षों सहसंबद्ध और विश्लेषण alternators significa है कि पता चलाबख्शा corticospinal पथ [एफ (1,1) = 5.56, पी <0.05] और contralesional ओर 19 पृष्ठीय स्तंभ [एफ (1,1) = 19.2, पी <0.003] का ntly बड़े क्षेत्र. इन आंकड़ों forelimb कदम प्रत्यावर्तन परीक्षण घाव की गंभीरता के साथ ही घावों की unilaterality भविष्यवाणी कर सकते हैं कि संकेत मिलता है. यह परीक्षण एक दोहराया उपायों विश्लेषण के साथ विश्लेषण किया जाना चाहिए कि नाममात्र स्पष्ट डेटा में परिणाम कर सकते हैं. इस उदाहरण में, यह हम समूहों के बीच अंतर बताने के लिए एक समय बिंदु का इस्तेमाल किया, एक दोहराया उपाय नहीं था. प्रत्येक जानवर (क्रमशः गंभीर बनाम उदार,) चोटों के दो समूहों में पशुओं को अलग करने, एक "अल्टरनेटर" या एक "गैर अल्टरनेटर" के रूप में वर्गीकृत किया जाएगा.
Postural अस्थिरता टेस्ट
रीढ़ की हड्डी की एकतरफा घावों बिगड़ा और / या प्रभावित अंग है, लेकिन यह भी गैर बिगड़ा अंग को न केवल परिवर्तन का कारण बन सकता है. postural अस्थिरता परीक्षण (गड्ढे) में पहले से जानकारी थीribed और पार्किंसंस रोग 18 साल की एक कृंतक मॉडल के साथ पशुओं में और CSCI 19 की एक कृंतक मॉडल में इस्तेमाल किया. हम CSCI के बाद गड्ढे में इस्तेमाल किया और घाव की स्थिति की एक महत्वपूर्ण प्रभाव [एफ (1,1) = 8.17, पी <0.01] वहाँ था. इसके अलावा, forelimb विस्थापन (गुरुत्वाकर्षण का केंद्र हासिल करने के लिए दूरी) (नकली सर्जरी के साथ पशुओं की तुलना में घायल पशुओं की ipsilesional पक्ष (सही forelimb) में काफी बड़ा था 8.00 ± 0.10 सेमी, पी <0.0001 बनाम 6.00 ± 0.24 सेमी, चित्रा 2 ). contralesional forelimb पर विस्थापन दूरी दिखावा संचालित जानवरों (चित्रा 2 4.00 ± 0.10 CSCI के लिए सेमी, पी <0.0001 बनाम दिखावा के लिए 6.00 ± 0.25 सेमी) की तुलना में lesioned पशुओं में काफी छोटी थी. इस परिणाम contralesional forelimb भी contralesional foreli से विपरीत दिशा की वजह से घाव में परिवर्तन (postural समायोजन में यानी परिवर्तन के परिणामस्वरूप इंगित करता है कि) गुरुत्वाकर्षण का केंद्र हासिल करने के लिए एमबी. इस परीक्षण से डेटा मात्रात्मक हो जाएगा और एक प्रयोग भर समूहों में परिवर्तन की जांच करने के लिए एक दोहराया उपायों एनोवा का उपयोग कर विश्लेषण किया जाना चाहिए.
पास्ता हैंडलिंग टेस्ट
पास्ता से निपटने ड्राई पास्ता का एक टुकड़ा खाने के समय forelimbs के कुशल उपयोग के परीक्षण करने के लिए डिजाइन किया गया था. ऐसा ही एक परीक्षण एकतरफा स्ट्रोक और पार्किंसंस रोग 20,21 के पशु मॉडल में और CSCI 19 के बाद forelimbs के कुशल उपयोग में घाटे का पता लगाने के लिए पहले से इस्तेमाल किया गया है. पुरानी समय बिंदुओं पर चोट (12 सप्ताह के बाद चोट) के बाद, सभी नकली पशुओं परीक्षण अवधि के दौरान दोनों पंजे का उपयोग पास्ता खाया. Lesioned समूह में, हम पास्ता का एक टुकड़ा खाने के लिए समग्र समय नियंत्रण समूह (चित्रा 3) के समान है कि पाया. हालांकि, अधिक अल्टरनेटर (मामूली चोट, 15 के बाहर 10) (गंभीर रूप से समूह घायल गैर alternators की तुलना में उनके ipsilesional forelimb उपयोग करने में सक्षम थे; 1 7 से बाहर; 
Forelimb कदम प्रत्यावर्तन परीक्षण का उपयोग forelimb समारोह के चित्रा 1. लगातार आकलन अलग घाव गंभीरता के साथ जानवरों के दो अलग अलग समूहों का पता चला. पशु आगे दोनों पंजे का उपयोग कर कदम रख दौरान व्यवहार में एक अंतर दिखाया. दूसरों को एक पंक्ति में दो contralesional कदम (गैर alternators लेकर कदम प्रत्यावर्तन की कमी से पता चला है, जबकि, (5 10 में से lesioned चूहों alternators); निकलते जबकि lesioned जानवरों का केवल 50% पंजे alternated 5 10 में से lesioned चूहों). 5 सेकंड देरी Ste के बीच पेश किया गया था अगर अधिक पशुओं कई contralesional कदम उठाने के लिए इस प्रवृत्ति प्रदर्शितपुनश्च (10 lesioned चूहों में से 8). 
.. *; Postural अस्थिरता परीक्षण (गड्ढे) का उपयोग चित्रा 2 जीर्ण forelimb व्यवहार मूल्यांकन जैसी कि उम्मीद थी, ग्रीवा रीढ़ की हड्डी की चोट (CSCI) के साथ पशुओं में ipsilesional forelimb 8 सेमी बनाम 6 सेमी (नकली सर्जरी के साथ जानवरों से भी काफी बड़ा विस्थापन दूरी पड़ा पी <0.0001). (* पी <0.0001 4 सेमी बनाम 6 सेमी) इसके अलावा, contralesional forelimb पर विस्थापन दूरी दिखावा संचालित पशुओं की तुलना में lesioned पशुओं में काफी छोटी थी. इस lesioned पशुओं में गड्ढे दौरान contralesional अंग की बढ़ी समारोह की सलाह दे सकते. 
Discussion
ग्रीवा रीढ़ की हड्डी की चोट (CSCI) रोगियों में विनाशकारी और जीवन फेरबदल चोटों में परिणाम कर सकते हैं. तंत्रिका substrates और चिकित्सीय एजेंट के plasticity अध्ययन करने के लिए उपयोग किया जाता है कि कृन्तकों में विकसित ग्रीवा रीढ़ की हड्डी में चोट के मॉडलों के एक नंबर रहे हैं. विकासशील, संवेदनशील प्रभावी, प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्य और CSCI एक महत्वपूर्ण लक्ष्य है के बाद कार्यात्मक घाटे और वसूली का आकलन करने के लिए व्यवहार परीक्षण का उपयोग करने के लिए आसान. अंग प्रत्यावर्तन, postural अस्थिरता और पास्ता हैंडलिंग: यहाँ, हम विस्तार में तीन तरह के व्यवहार परीक्षण के उपयोग का वर्णन.
कृन्तकों में रीढ़ की हड्डी की चोट, मानव आबादी में के रूप में, एक विषम चोट है. एक बहुत ही इसी तरह की चोट के व्यवहार घाटे की एक किस्म पैदा कर सकते हैं. इसलिए, यह घायल पशुओं में घावों की गंभीरता को निर्धारित करने के लिए महत्वपूर्ण है. हम contralesional पक्ष एकतरफा चोट (hemisection या आगे के बाद क्षतिग्रस्त है अगर अंग प्रत्यावर्तन कार्य का निर्धारण करने का एक बहुत प्रभावी तरीका है कि पायाusion प्रकार ग्रीवा रीढ़ की हड्डी 19 को चोट). हमारे समूह से डेटा इस अंग प्रत्यावर्तन कार्य के उपयोग की चोट के बाद पहले सप्ताह के भीतर चोट की गंभीरता का निर्धारण कर सकते हैं कि पता चला है. इसके अलावा, अधिक गंभीर रूप से घायल जानवरों (गैर alternators) अल्टरनेटर (forelimb हरकत पैमाने का उपयोग) की तुलना में काफी अलग वसूली प्रोफाइल था. इसलिए, अंग प्रत्यावर्तन कार्य अध्ययन प्रत्येक उपचार समूह में घाव की गंभीरता का एक समान वितरण होता है यह सुनिश्चित करने के लिए पुरानी उपचार भी शामिल है, खासकर अगर alternators और गैर alternators में घायल चूहों समूहीकरण में अत्यंत उपयोगी है.
यह forelimb-प्रत्यावर्तन परीक्षण (जैसे forelimb हरकत पैमाने या सिलेंडर पंजा वरीयता परीक्षण के रूप में) 'जानवरों forelimbs के उपयोग की जांच कर सकते हैं कि अन्य कार्यों के साथ संयोजन में इस्तेमाल किया जा सिफारिश की है. इस परीक्षण का प्रबंध जबकि यह प्रयोगकर्ता परीक्षण कई बार एक ही नंबर प्रदर्शन जरूरी है किप्रत्येक हाथ के साथ (उदाहरण के लिए दो बार बाएं हाथ के साथ और दो बार का अधिकार के साथ) 'चूहों के व्यवहार पर प्रयोगकर्ता के हाथ की स्थिति के प्रभाव को कम करने के लिए. पशु प्रयोगकर्ता के हाथों में ढील दी है कि अगर इस परीक्षा में केवल प्रभावी है, सुझाव दिया निपटने के 2-3 सप्ताह के विश्राम वहन करना चाहिए. पशु आराम है एक बार इसके अलावा, प्रयोगकर्ता के भीतर पशु भिन्नता को रोकने के लिए एक wheelbarrow स्थिति में लगभग 90 डिग्री पशु धारण करना चाहिए.
जानवरों के एक पंजा के साथ व्यक्तिगत रूप से कदम करने में असमर्थ रहे हैं, लेकिन एक प्रत्यावर्तन कार्य को करने में सक्षम हैं जब forelimb-प्रत्यावर्तन परीक्षण भी पार रीढ़ की हड्डी में तंत्रिका कनेक्शन के लिए अंतर्दृष्टि प्रदान कर सकते हैं. ऐसे रीढ़ की हड्डी की लंबाई के साथ चूहों, कई मस्तिष्क क्षेत्रों के साथ ही स्थानीय केंद्रीय पैटर्न जनरेटर (CPGs) के रूप में पशुओं में सामान्य चौपाया हरकत के लिए शामिल कर रहे हैं. विशेष रूप से forelimb तालबद्ध आंदोलन के लिए, गर्भाशय ग्रीवा रीढ़ की हड्डी क्षेत्रों, C3-C6 22 महत्वपूर्ण माना जाता है. इससे पहले, हम descrilesioned पशुओं में alternators और गैर alternators बीच बिस्तर संरचनात्मक मतभेदों (C3/C4 में एक पार्श्व hemisection प्रदर्शन किया गया था) और गैर बारी जानवरों 18 में contralesional पृष्ठीय स्तंभ और corticospinal पथ को और अधिक नुकसान पाया. यह forelimb आंदोलन के लिए, तालबद्ध पैटर्न जनरेटर ग्रीवा Hemi खंड के प्रत्येक स्तर पर मौजूद है और पार की हड्डी अवरोध करनेवाला कनेक्शन प्रत्यावर्तन 23 के लिए जिम्मेदार हैं कि सोचा है. रीढ़ की हड्डी की contralesional अधिक बरकरार है, तो तालबद्ध मोटर outputs की संभावना है जबकि हमारे पिछले संरचनात्मक निष्कर्ष भी, रीढ़ की हड्डी के contralesional पक्ष को नुकसान (जैसे प्रत्यावर्तन के रूप में) तालबद्ध मोटर उत्पादन के लिए व्यवधान पैदा हो सकता है कि तात्पर्य सामान्य रूप से कार्य करते हैं. हम तार के किसी भी contralesional औसत दर्जे का उदर भागों के लिए महत्वपूर्ण नुकसान का पालन नहीं किया है और इसलिए है कि विश्लेषण प्रदर्शन नहीं किया गया था.
यहाँ वर्णित postural अस्थिरता परीक्षण एक देखें है Y उपयोगी परीक्षण यह एक एकतरफा घाव की वजह से दोनों forelimb (ipsi और contralesional) में परिवर्तन का पता लगा सकते हैं. यह इस परीक्षण पशु प्रयोगकर्ता के हाथों में ढील होने पर ही प्रशासित किया जाना चाहिए कि नोट करना महत्वपूर्ण है. हमारे अनुभव में, यह 2-3 सप्ताह के लिए जानवरों की दैनिक निपटने के ले जा सकते हैं. प्रयोगकर्ता और जानवर आराम कर रहे हैं एक बार, इस परीक्षण बहुत संवेदनशील है और प्रत्येक forelimb के लिए अत्यधिक संगत विस्थापन डेटा प्राप्त करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है. पशु तनाव में है, तो प्रयोगकर्ता धीरे पशु पकड़ कर सकते हैं और जानवर आरामदायक है और तालिका में एक सुरक्षित स्थान है समझता है कि जब तक मेज पर से दूर और नीचे उन्हें ऊपर ले जाएँ. पशु आराम है एक बार, यह अनुरूप परिणाम के लिए एक wheelbarrow स्थिति में लगभग 90 डिग्री में जानवरों धारण करने के लिए महत्वपूर्ण है. इस परीक्षा में प्रशासन के लिए आसान है और एक साधारण कार्य के साथ मुआवजा और घाटे के बारे में जानकारी उपलब्ध कराने के द्वारा अन्य व्यवहार परीक्षण परे अंतर्दृष्टि प्रदान करता है.
टी "> चूहे आसानी से कैमरे के सामने प्रशिक्षण के बाद ड्राई पास्ता खाते हैं. इसलिए, पास्ता से निपटने के लिए प्रशासन को एक अपेक्षाकृत आसान परीक्षण है. इस अध्ययन में, हम रिकॉर्डिंग थे और अंग उपयोग के लिए डेटा का उपयोग (बाएं, सही या दोनों) और समय केवल पास्ता खाने के लिए. पास्ता खाने के दौरान पंजा समायोजन सहित एक अधिक विस्तृत विश्लेषण इस तरह के एकतरफा इस्कीमिक घावों और एकतरफा striatal डोपामाइन कमी 20,21,24 के रूप में चोटों के साथ जानवरों में पहले से वर्णित किया गया है. इसलिए, यह एक और अधिक विकसित करने और उपयोग करने के लिए संभव है . इस मनमानी या एक हाथ के साथ की क्षमता प्रकट हो सकता है के रूप में पास्ता खाने परीक्षण से संवेदनशील विश्लेषण CSCI के बाद हम, स्कोरिंग चादर पर पंजा स्थिति शामिल इसके अलावा, हम प्रत्येक पंजा की चपेट टिप्पण कर रहे हैं;. कुछ जानवरों एक पक्ष की तरफ से उनके पंजा आराम जानवरों पास्ता खाने से हिचक रहे हैं पास्ता, एक सहायता के रूप में संभवतः यह उपयोग कर, बजाय खाने के दौरान पकड़ पास्ता., एक भोजन के अभाव कदम पहले परीक्षण के लिए प्रोटोकॉल के लिए पेश किया जा सकता है.Disclosures
ब्याज की कोई संघर्ष की घोषणा की.
Acknowledgments
(: शिथिलता 2011112479 अनुदान #) हम मिशन कनेक्ट, TIRR फाउंडेशन (CES और ZZK), क्रेग Neilsen फाउंडेशन (CES) और NSF ग्रेजुएट रिसर्च फेलोशिप की एक परियोजना से धन स्वीकार करना चाहते हैं.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Sand paper | 3M | 5097 | 3M Gold Fre-Cut Sandpaper was used. Any 220-grit sandpaper would work well |
| Dry Pasta | Skinner | Skinner Thin Spaghetti was used. It is available at Walmart |
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