Summary
Этот документ описывает, как Элвакс 40W может быть использован в качестве метода медленным высвобождением для доставки лекарственных средств к взрослой крысы сетчатки. Протокол для подготовки, погрузки и доставки препарата-смолы комплекс для глаз описывается.
Abstract
Заболевания сетчатки трудно лечить, как сетчатка лежит глубоко в глаза. Инвазивные методы доставки лекарств часто необходимы для лечения этих заболеваний. Хронические заболевания сетчатки, такие как отек сетчатки или неоваскуляризации, как правило, требуют несколько внутриглазных инъекций для эффективного лечения этого заболевания. Тем не менее, риски, связанные с этими инъекциями увеличить при повторном доставки препарата. Поэтому должны быть созданы для того, чтобы свести к минимуму риски, связанные с обратной закачки альтернативные способы доставки. Несколько других исследований были разработаны методы доставки лекарств в течение длительного времени, за счет материалов, способных к высвобождению химических веществ медленно в глаз. В этом исследовании, мы выделяем использование Elvax 40 Вт, сополимера смолы, чтобы выступать в качестве транспортного средства для доставки лекарств к взрослой сетчатке крыс. Смола выполнена с грузом препарата. Препарат смолы комплекс затем имплантируют в полость стекловидного тела, где оно будет постепенно высвобождать лекарственное средство в течение Tiмне. Этот метод был протестирован с использованием 2-амино-4-phosphonobutyrate (APB), глютамата аналог что блоки светового отклика сетчатки. Было показано, что APB медленно высвобождается из смолы, и смог заблокировать сетчатки ответ, 7 дней после имплантации. Это указывает на то, что с медленным высвобождением для доставки лекарственных средств с помощью этой сополимерной смолы является эффективным для лечения сетчатки и могут быть использованы терапевтически при дальнейших испытаний.
Introduction
Лечение хронических заболеваний, таких как диабет и высокое кровяное давление создает много проблем, так как эти заболевания обычно требуют лечения в течение длительных периодов времени, часто на всю жизнь. Это призвал к разработке систем доставки лекарств с медленным высвобождением, которые уменьшают необходимость частой дозировки. Эффективность этих методов медленных высвобождением была продемонстрирована путем разработки насосов инсулина, чтобы уменьшить количество инъекций инсулина, необходимых для лечения диабета. Хронические заболевания глаз, особенно те, которые затрагивают его внутренние слои, требуют частого администрирование наркотиков через инвазивных процедур. Одним из таких хроническое заболевание влияет на человеческий глаз является возрастная дегенерация желтого пятна (AMD). Это влияет на центральную сетчатку, которая представляет собой слой нервной ткани, расположенной в задней части глаза, ответственной за инициирование зрение. AMD является ведущей причиной слепоты в западном мире 1. Особой проблемой с лечением повторнокишечные заболевания является то, что препарат требуется для достижения этой глубокий слой в глаза, что часто требует инвазивных методов доставки. Наркотики, как правило, вводят в стекловидное камеры и сетчатки с помощью интравитреальных инъекции. Тем не менее, с каждой инъекции существует риск постинъекционных осложнений, в том числе эндофтальмитов, отслоение сетчатки, катаракта и кровоизлияния стекловидного 2. Этот риск умножается на каждой повторной инъекцией препарата.
Снижение потребности для многократных инъекций будет основным преимуществом в лечении ВМД. Для лечения влажной формы ВМД, где новый рост судно является отличительной чертой, создана лечебная стратегия направлена на эндотелиальные факторы роста (VEGF), используя ингибиторы VEGF 3. В настоящее время они поставляются через неоднократные интравитреальных инъекций. Точно так же в лечении отека макулы, частым осложнением диабетической ретинопатии, кортикостероиды поставляются через повторных инъекций Понятие системы доставки медленного высвобождения лекарственного средства впервые был описан с использованием силиконовой резины транспортное средство для доставки небольших молекул в тканях животных 5. С тех пор, другие методы медленным высвобождением были разработаны, чтобы доставить более крупные молекулы, некоторые из которых были протестированы в глаза. Носители частиц, таких как биоразлагаемых микросфер поли-лактид-со-гликолида (PLGA) наночастиц и фосфолипидные везикулы (липосомы) могут быть полезны в качестве средств доставки 6,7. PLGA наночастиц и липосомы были сравнены в среде в пробирке на их способность доставки противораковых агентов через склеру в течение долгого времени 7. Оба транспортных средства были эффективны в медленно выпуская препараты. Тем не менее, исследование было проведено только в среде в пробирке. Bochot и соавт. (2002) 8 испытанияэффективность липосом для доставки молекул к сетчатке в естественных условиях. Они показали, что липосомы успешно доставить небольших олигонуклеотидов с кролика сетчатки. Авторы предположили, что липосомы могут быть полезны в лечении заболеваний сетчатки 8. Однако природа этих пузырьков плавать в стекловидное тело означает, что они, скорее всего, размытие или ухудшить зрение 9. Окабе и соавт. (2003) 10 использовании не биоразлагаемые полимерные диски, состоящие из 33% этилена и винилацетата, чтобы применить бета-methasone у кроликов. Они имплантировали дисков в кармане склеры и показали эффективное высвобождение лекарственного средства в стекловидном теле и сетчатке на срок до одного месяца 10. Тем не менее, в данном конкретном протоколе, имплантат был относительно большим и жестким, и требует более сложной хирургической процедуры с большой разрез склеры и наложении швов. В более раннем исследовании исследовали Текстильнаяе ответ на различных полимерных транспортных средств путем имплантации их в роговицу глаза кролика, и обнаружили, что этилен-винилацетата промывают в спирте не вызывают воспаление или раздражение. Эти комплексы были показаны поддержания поставок крупных соединений в тканях животных в течение длительных периодов времени, некоторые превышения до 100 дней в зависимости от препарата 11. Один такой тип сополимерной смолы была разработана в промышленности в форме ElvaX 40 Вт (40% по весу этилен-винил ацетата содержанием сомономера с 'W' амидной добавки, чтобы улучшить обработку гранул). Этот сополимер представляет собой инертное вещество, которое является стабильным при комнатной, так и температуры тела. Это не было показано, что причиной аллергии или токсичность в биологической ткани. Эта смола эффективно доставлен большое разнообразие препаратов в различных экспериментальных моделях, которые исследуют функции различных систем, таких как молочной системы протоков 12, первичной слуховой коры 13,14 </ SUP>, и лягушка визуальная система 15. Эта смола также используется в глаза, чтобы доставлять лекарства к разработке черепаху 16,17, куриный эмбрион 18,19, и взрослых хорек сетчатки 20. В крыс центральной нервной системы, смола использовалась только в головном мозге 21-23, но его использование в глаза крысы не была документально. Преимущества использования этой сополимерной смолы для доставки лекарства медленно к сетчатке по сравнению с другими методами, в том, что он является устойчивым соединением, которое не вызывает воспаление или раздражение в глазу. В отличие от носителей частиц, препарат-полимер комплекс не будет ухудшать зрение после имплантации, как это обычно остается на месте доставки вместо плавающих в стекловидное тело. Это потребовало бы только простой процесс имплантации в полость стекловидного тела, близкой к лимба глаза, и не потребует наложения швов после имплантации. В последнее время наблюдается появление в нескольких новых систем доставки, таких какинкапсулированные клеточной технологии (ЭСТ) 24,25, гидрогели 26 и микрофильмы 27. Тем не менее, метод, использованный в данном исследовании для подготовки и доставки наркотиков смолы комплекс является одновременно легко следовать, и недорого, тем самым быть более выгодным для использования в основной исследовательской среды. Проблема с использованием этого комплекса, чтобы доставить долгосрочные медикаментозного лечения является определение оптимальной концентрации препарата, который будет максимизировать терапевтический эффект имеют меньше интравитреальных инъекции. Эта статья призвана продемонстрировать использование наркотиков смолы комплекса для долгосрочного лечения взрослой крысы сетчатки. Эффективность этого способа доставки проверяется с помощью глутамата аналоговый 2-амино-4-phosphonobutyrate (APB) в качестве лекарственного средства. APB блокирует свет реагирования из биполярных клеток НА имитируя глутамат, эндогенный медиатор в сетчатки 28. Когда APB конкурирует с глутаматом для его рецептором, блокирует Бордовыйт ответ. АПБ был использован в физиологических исследований, чтобы контролировать функции сетчатки и измерить его воздействие с помощью электрофизиологических методов, таких как электроретинографии (ЭРГ). В предыдущих исследованиях, APB был использован для проведения краткосрочных 29 и долгосрочного лечения развивающейся сетчатке; последний участвует давая одну дозу через внутриглазного инъекции в день в течение 30 дней 30. То же самое количество APB (0,092 мг в стерильном физиологическом растворе, при концентрации 50 мкМ) использовали для всех инъекций как это было предложено в предыдущей работе 28,29,31. Мы выбрали APB, чтобы проверить препарат-смола комплекс как с медленным высвобождением средства для доставки лекарственных средств в глаз. Методы, описанные в данном исследовании похожи на описанных выше методов, связанных с разработкой препарата смолы сложного 16,32; Однако мы также подробно его использование именно в взрослой крысы глаза. После хирургической имплантации АПБ-загруженной смолы в глаз, ЭРГ была выполнена, чтобы установить отменяет ли АПБ в Retinal реакция света, и поэтому ли APB успешно выпущен в стекловидное тело и сетчатку.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Все эксперименты, проведенные были в соответствии с Положением ARVO для использовании животных в офтальмологической и Vision Research, и с одобрения университета комитета Аквиле животных этике и комитета Австралийского национального университета экспериментов на животных по этике. Взрослые крысы (P100-200) были использованы в данном исследовании.
1 Подготовка сополимер полимерных гранул
- Поместите 20 Elvax 40W гранул в небольшой стеклянный стакан в вытяжном шкафу.
- Заполните стакан с 100% этанола обеспечения, чтобы охватить все гранулы.
- Стакан накрывают парафильмом, и выдержите гранул в 100% этаноле при комнатной температуре в течение 7-10 дней. ПРИМЕЧАНИЕ: С этого шага вперед, не использовать металлические или пластиковые обрабатывать или хранить смолы.
2 Подготовьте лекарственный раствор для Загрузка
- Растворите препаратом выбора в 0,1% диметилсульфоксиде (ДМСО). Сделать лекарственного раствора до 40 мкл в объеме.Загрузить смолы с в три раза концентрации препарата, которые будут в виде разовой дозы.
3 Подготовка и Загрузите наркотиков смолы комплекс
- Перенесите 20 вымытые гранулы в другую небольшой стеклянный стакан. Растворите гранулы в 4 мл дихлорметана в течение примерно 45 мин. Стакан накрывают парафильмом в то время как гранулы растворения.
- Готовят раствор Fast Green FCF путем растворения его в 0,1% ДМСО до концентрации 0,001 мг / мл.
- Возьмите одну пипетку, и составить 40 мкл лекарственного раствора, полученного ранее. Загрузите другой пипетки с 40 мкл Fast Green решения.
- Добавьте два решения одновременно в стакан. Смесь быстро с помощью стеклянной мешалки до тех пор, зеленый краситель не будет равномерно распределен по всей смеси.
- Оперативно передавать стакан на сухом льду в течение 10 мин к быстро заморозить смолы.
- Настраивать "испарительного камеру" для испарения растворителя. Заполнитебольше контейнер до одной трети с сульфатом кальция галькой. Создание хорошо в гальке, и осторожно поместите стакан в колодец, чтобы галька доходить до половины стакана, чтобы стабилизировать стакан в камере.
- Покройте больший внешний контейнер с парафильмом.
- Перенести испарительного камеру в морозильнике. Хранить при -20 ° С в течение 2-3 недель.
4 Подготовьте наркотиков смолы комплекс для хирургической имплантации
- Снимите испарительного камеру из морозильника. Трансфер блок твердого наркотиков смолы в стеклянную посуду держат на льду.
- С помощью микроскопа или лупы, вырезать кусок примерно 0,05 мм в диаметре и 0,1 мм в длину от блока, используя Trephine или Punch Tool.
- Оберните оставшуюся часть блока в сублимационной-стойкого материала (например, алюминиевой фольги) и держать при температуре от -20 ° С до использования.
5 хирургическим Implant наркотиков смолы комплекс в глазу крысы
ПРИМЕЧАНИЕ: лидокаина гидрохлорид минimizes местный дискомфорт.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Полное поле электроретинография (ЭРГ) был использован для определения эффекта APB на сетчатке. Для получения дополнительной информации о том, как была выполнена ERG, обратитесь к следующим исследований 33,34. Вкратце, после анестезии животного, золотой электрод помещали на роговице глаза, и электрод был размещен в передней волосистой части головы между глазами, чтобы записать электрическую активность сетчатки. Стимулы были получены с помощью электронного вспышку и интенсивность колебалась от 10 до 10 6 фотоизомеризации, который представляет количество светочувствительных молекул активированных за стержня. В этих экспериментах, ERG записи были приняты на 1 и 7 дней после процедуры. Правый глаз каждого животного была имплантирована с лекарственной смолы комплекса, в то время как малый левый глаз был использован в качестве не обработанного внутреннего контроля.
На рисунке 1 показаны изменения в амплитуде би-волны с увеличением фотоизомеризации на стержне(Φ). В контрольной глаза, амплитуда би-волны возрастает с увеличением интенсивности вспышки. В рисунке 1а, сетчатки записи ответов даны через 1 день после имплантации. Имплантированы глаз показал аналогичный образец амплитуды к контрольной глаза. Разница Амплитуда между двумя глазами стал значительно отличается в 10 6 φ (р <0,0001). Это означает, что на этом раннем этапе, препарат-смола комплекс не не влияют на сетчатки ответ до достижения более высокую интенсивность вспышки. Рисунок 1B демонстрирует изменения в ответ ERG на 7 дней после имплантации. Б-волна отменены на всех уровнях интенсивности вспышки в имплантированного глаза, когда по сравнению с контрольной глаза, которая имеет амплитуды, сравнимые с дня записи 1. Это существенно отличается от всех амплитуд имплантированного глаза на 1 день (р <0,0001). Это показывает, что сетчатки ответ был упразднен (одной недели) после implantatiна препарата смолы комплекса в глаз.
Рисунок 1 Амплитуда би-волны на 1 день и 1 неделю после имплантации наркотиков смолы комплекса. Для обеих панелей, контроль глаз показан в оранжевых (квадраты), в то время как имплантированы глаз показан зеленым цветом ( кружки). Символ * представляет значение в этой точке между двумя глазами, где р <0,0001. Для всех групп, N = 5 (А) Амплитуда волны B-1 день после имплантации препарата смолы комплекса в глаз. Амплитуда би-волны в зависимости от интенсивности вспышки (фотоизомеризации за стержня φ) является показателем сетчатки ответ. Там нет существенной разницы в амплитуде B-волн между глазами на всех интенсивностей флэш исключением 10 6 φ, где имплантировали глазимеет более низкую амплитуду. (B) Амплитуда б-волна 1 недели (7 дней) после имплантации. Амплитуды, записанные с обоих глаз значительно отличаются на всех интенсивности вспышки. В имплантированного сетчатки, амплитуда б-волны не было измерить при любых интенсивностях стимула.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Эта статья продемонстрировала использование наркотиков смолы комплекса на поставку медленным высвобождением лекарств в сетчатке. Мы стремились представить метод, который является относительно недорогой и легко наносится в небольшом животной модели.
Учитывая, что функция APB, чтобы действовать в качестве аналога глутамата, он будет блокировать ответ в сетчатке глаза. Результаты показывают, что АПБ причиной закупорки сетчатки ответ на одну неделю после имплантации. Это указывает на то, что был успешно АПБ выпущен в стекловидном теле и сетчатке, и что его действие было ограничено глаза, что препарат-полимер комплекс был имплантирован в. Полный эффект препарата стало очевидно, через неделю после имплантации (Рисунок 1В). 1А показывает, что на 1 день после имплантации, значительное сокращение би-волны присутствовал только при интенсивности 10 6 φ в имплантированного глаза. Это может означать, что на этой ранней момент времени, толькоконус путь, который отвечает на более высокие интенсивности света, был затронут. Чтобы определить продолжительность времени, что смола может доставить APB к сетчатке, далее моменты времени должны быть исследованы. Предполагается, что записи в дальнейших временных точках в пределах диапазона 0-7 дня должны быть приняты, например, в 3 и 5 дней после имплантации, чтобы точно определить, когда сетчатки ответ полностью отменена. Кроме того, запись должна быть приняты за 7 дней, чтобы определить, как долго АПБ высвобождается в течение. Это было бы очевидно, как сетчатки ответ будет по-прежнему отменены, если APB постоянно освобождения медленно в стекловидное тело.
В этом исследовании препарат-полимер комплекс был признан безопасным для доставки на сетчатке. АПБ растворяли в 0,1% ДМСО. При концентрациях, равных или выше, чем 0,6%, ДМСО может привести к токсичности сетчатки. Тем не менее, 0,1% ДМСО было обнаружено, что безопасное транспортное средство для доставки соединений ккрыса глаз 35, и эту концентрацию использовали во всех экспериментах в этом исследовании. Имплантаты были вставлены transclerally в полость стекловидного тела в зубчатой. Имплантаты наблюдались оставаться на зубчатой в криосрезов в глазе крысы, которую собирают после были сделаны записи ERG. Такое расположение имплантата гарантирует, что препарат-полимер комплекс не вызывает ухудшение зрения. Этот способ, включающий препарат-смола комплекс был протестирован с другими соединениями (публикация в процессе подготовки), и было обнаружено, что ни один структурные или функциональные повреждение глаз не наблюдалось до двух месяцев после имплантации. В общей сложности 60 животных были имплантированы, и в 90% случаев положение имплантата оставались неизменными.
Несколько модификации могут быть сделаны в технике, если это необходимо. В этих экспериментах, в три раза концентрация разовой дозы APB был загружен в смолой (50 мкм х 3 = 150 мкМ), и этот ShoÜLD использоваться в качестве ориентира для приготовления раствора наркотиков для загрузки. Тем не менее, эффективная концентрация препарата в смоле является переменной величиной, и должны быть проверены и изменены соответствующим образом. В моменты времени, когда анализ проводится также могут быть модифицированы, чтобы определить, как долго смола является эффективным при высвобождать лекарство. В этих экспериментах было показано, что стабильная эффективная доза препарата поступает через лекарственной смолы комплекса, по крайней мере, одной недели, поэтому рекомендуется, что анализ ткани выполняется по крайней мере, через одну неделю после имплантации. Во время загрузки препарат шага, малахитовый зеленый был использован для того, чтобы смесь была гомогенизируют. Другие биологически безопасных цвета красители могут быть использованы в качестве альтернативы малахитовый зеленый, чтобы визуализировать однородность препарата в смоле. Ограничение этого метода является то, что малахитовый зеленый краситель является единственной мерой равномерного перемешивания. Эта техника также может быть проверена с помощью альтернативных моделей животных и наркотики, лишь незначительные объявлениеизменения уровня громкости в метод. Если большее количество препарата должно быть доставлено, больший размер имплантата может быть необходимым. В случае успеха в этих моделях, этот сополимер может быть рассмотрен в качестве терапевтического варианта для доставки лекарств медленно сетчатки, чтобы иметь постоянную силу с течением времени.
Есть несколько важных шагов в протоколе, где должны приниматься дополнительная забота. Пластиковые и металлические инструменты не должны использоваться на протяжении всего синтеза и обработки смолы. Это предотвращает загрязнение полимера, как дихлорметан может растворить пластмассу и вызвать коррозию металла. Правильное сухость блока наркотиков смолы должны быть достигнуты, прежде чем использовать его для хирургической имплантации. Убедитесь, что химический стакан, содержащий лекарственное средство и полимер полностью подвержены сульфата кальция для того, чтобы испарить растворитель. Кроме того, лиофилизатор может быть использован, чтобы заморозить сухой лекарственной смолы. Блок препарат-полимер готов к использованию, когда растворитель полностью выпаривали, атолько твердый голубовато блок остается в химическом стакане. При резке кусок от блока для имплантации, каждый кусок должен быть подготовлен только непосредственно перед операцией, как кусочки очень малы и их трудно хранить. Трепан или удар инструмент должен быть использован, чтобы вырезать куски одинакового размера, гарантируя, что каждая часть содержит приблизительно одинаковое количество препарата. Наконец, при вставке часть в рану пункции сделанному G иглы 25, используют мелкие, заостренные пинцет, чтобы тщательно вести кусок в рану. Операционный микроскоп или высокой лупа питания следует использовать в качестве наглядного пособия.
Только гидрофильные лекарственные средства и соединения были протестированы с помощью этого метода. Препарат-смолы комплексы не показаны любое нежелательное осаждение или образование побочных продуктов, когда препарат смешивают с полимером и дихлорметана. Предполагается, что с каждым новым препарата, концентрации, период полураспада эффекта, и любых возможных реакций с смоляной смеси должныбыть проверены пользователем, чтобы определить, является ли метод подходит.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Авторы не имеют ничего раскрытия.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Elvax 40W Pellets | Du Pont, DE, USA | ||
| Dimethyl sulfoxide (DMSO) | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | ||
| 2-amino-4-phosphonobutyric acid (APB) | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | A1910 | |
| Dichloromethane | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | 34856 | |
| Fast Green FCF | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | ||
| Drierite, calcium sulfate | Sigma-Aldrich Co. LLC., MO, USA | 238910 | |
| Ketamine, Ilium Ketamil | Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Xylazine, Ilium Xylazil-20 | Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Atropine sulphate, Minims eye drops | Bausch & Lomb Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Tetracaine hydrochloride, Minims eye drops | Bausch & Lomb Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Chloramphenicol, Chlorsig ointment | Aspen Pharma Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Pentobarbital, Lethabarb | Virbac Australia Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Lidocaine hydrochloride, Ilium Lignocaine-20 | Troy Laboratories Pty. Ltd., NSW, Australia | ||
| Uni-Core Punch Tool | World Precision Instruments Inc., FL, USA | ||
| Curved Forceps | World Precision Instruments Inc., FL, USA | ||
| Operating Microscope, Zeiss OPMI 99 | Zeiss, West Germany | ||
| 25 G Insulin needle | Terumo Corp., Tokyo, Japan | ||
| Dumont tweezers | World Precision Instruments Inc., FL, USA |
References
- Access Economics, The global economic cost of visual impairment. AMD Alliance International. , 26-27 (2010).
- Jager, R., Aiello, L., Patel, S., Cunningham, E. Risks of intravitreous injection: A comprehensive review. Retina. 24 (5), 676-698 (2004).
- Rosenfeld, P. J., et al. Ranibizumab for neovascular age-related macular degeneration. New England Journal of Medicine. 355 (14), 1419-1431 (2006).
- Cunningham, M. A., Edelman, J. L., Kaushal, S. Intravitreal steroids for macular edema: The past, the present, and the future. Survey of Ophthalmology. 53 (2), 139-149 (2008).
- Folkman, J., Long, D. M. The use of silicone rubber as a carrier for prolonged drug therapy. Journal of Surgical Research. 4 (3), 139-142 (1964).
- Herrero-Vanrell, R., Refojo, M. F. Biodegradable microspheres for vitreoretinal drug delivery. Advanced Drug Delivery Reviews. 52 (1), 5-16 (2001).
- Kim, E., et al. Human scleral diffusion of anticancer drugs from solution and nanoparticle formulation. Pharmaceutical Research. 26 (5), 1155-1161 (2009).
- Bochot, A., et al. Intravitreal delivery of oligonucleotides by sterically stabilized liposomes. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 43 (1), 253-259 (2002).
- Bochot, A., Fattal, E. Liposomes for intravitreal drug delivery: A state of the art. Journal of Controlled Release. 161 (2), 628-634 (2012).
- Okabe, K., Kimura, H., Okabe, J., Kato, A., Kunou, N., Ogura, Y. Intraocular tissue distribution of betamethasone after intrascleral administration using a non-biodegradable sustained drug delivery device. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 44 (6), 2702-2707 (2003).
- Langer, R., Folkman, J. Polymers for the sustained release of proteins and other macromolecules. Nature. 263 (5580), 797-800 (1976).
- Silberstein, G. B., Daniel, C. W. Elvax 40P implants: Sustained, local release of bioactive molecules influencing mammary ductal development. Developmental Biology. 93 (1), 272-278 (1982).
- Smith, A. L., et al. An investigation of the role of auditory cortex in sound localization using muscimol-releasing Elvax. European Journal of Neuroscience. 19 (11), 3059-3072 (2004).
- Anomal, R., De Villers-Sidani, E., Merzenich, M. M., Panizzutti, R. Manipulation of BDNF signaling modifies the experience-dependent plasticity induced by pure tone exposure during the critical period in the primary auditory cortex. PloS one. 8 (5), e64208 (2013).
- Tu, S., Butt, C. M., Pauly, J. R., Debski, E. A. Activity-dependent regulation of substance P expression and topographic map maintenance by a cholinergic pathway. The Journal of Neuroscience. 20 (14), 5346-5357 (2000).
- Sernagor, E., Grzywacz, N. M. Influence of spontaneous activity and visual experience on developing retinal receptive fields. Current Biology. 6 (11), 1503-1508 (1996).
- Leitch, E., Coaker, J., Young, C., Mehta, V., Sernagor, E. GABA type-A activity controls its own developmental polarity switch in the maturing retina. The Journal of Neuroscience. 25 (19), 4801-4805 (2005).
- Park, C. M., Hollenberg, M. J. Basic fibroblast growth factor induces retinal regeneration in vivo. Developmental Biology. 134 (1), 201-205 (1989).
- Whitsel, A. I., Johnson, C. B., Forehand, C. J. An in ovo chicken model to study the systemic and localized teratogenic effects of valproic acid. Teratology. 66 (4), 153-163 (2002).
- Prusky, G. T., Ramoa, A. S. Novel method of chronically blocking retinal activity. Journal of Neuroscience Methods. 87 (1), 105-110 (1999).
- Colonnese, M. T., Constantine-Paton, M. Chronic NMDA receptor blockade from birth increases the sprouting capacity of ipsilateral retinocollicular axons without disrupting their early segregation. The Journal of Neuroscience. 21 (5), 1557-1568 (2001).
- Oliveira-Silva, P., et al. Matrix metalloproteinase-9 is involved in the development and plasticity of retinotectal projections in rats. Neuroimmunomodulation. 14 (3-4), 144-149 (2007).
- Trindade, P., et al. Evidence for a role of calcineurin in the development of retinocollicular fine topography. Neuroscience Letters. 487 (1), 47-52 (2011).
- Kauper, K., et al. Two-year intraocular delivery of ciliary neurotrophic factor by encapsulated cell technology implants in patients with chronic retinal degenerative diseases. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 53 (12), 7484-7491 (2012).
- Birch, D. G., Weleber, R. G., Duncan, J. L., Jaffe, G. J., Tao, W. Randomized of ciliary neurotrophic factor delivered by encapsulated cell intraocular implants for retinitis pigmentosa. American Journal of Ophthalmology. 156 (2), 283-292 (2013).
- Rauck, B. M., et al. Biocompatible reverse thermal gel sustains the release of intravitreal bevacizumab in vivo. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 55 (1), 469-476 (2014).
- Liu, Y. C., Peng, Y., Lwin, N. C., Venkatraman, S. S., Wong, T. T., Mehta, J. S. A biodegradable, sustained-released, prednisolone acetate microfilm drug delivery system effectively prolongs corneal allograft survival in the rat keratoplasty model. PloS one. 8 (8), e70419 (2013).
- Slaughter, M. M., Miller, R. F. 2-amino-4-phosphonobutyric acid: a new pharmacological tool for retina research. Science. 211 (4478), 182-185 (1981).
- Bodnarenko, S., Jeyarasasingam, G., Chalupa, L. Development and regulation of dendritic stratification in retinal ganglion cells by glutamate-mediated afferent activity. The Journal of Neuroscience. 15 (11), 7037-7045 (1995).
- Deplano, S., Gargini, C., Maccarone, R., Chalupa, L. M., Bisti, S. Long-term treatment of the developing retina with the metabotropic glutamate agonist APB induces long-term changes in the stratification of retinal ganglion cell dendrites. Dev Neurosci. 26 (5-6), 396-405 (2004).
- Horton, J., Sherk, H. Receptive field properties in the cat's lateral geniculate nucleus in the absence of on-center retinal input. The Journal of Neuroscience. 4 (2), 374-380 (1984).
- Smith, A. L., Cordery, P. M., Thompson, I. D. Manufacture and release characteristics of Elvax polymers containing glutamate receptor antagonists. Journal of Neuroscience Methods. 60 (1), 211-217 (1995).
- Gargini, C., Bisti, S., Demontis, G. C., Valter, K., Stone, J., Cervetto, L. Electroretinogram changes associated with retinal upregulation of trophic factors: observations following optic nerve section. Neuroscience. 126 (3), 775-783 (2004).
- Maccarone, R., Di Marco, S., Bisti, S. Saffron supplement maintains morphology and function after exposure to damaging light in mammalian retina. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 49 (3), 1254-1261 (2008).
- Tsai, T., Bui, B., Vingrys, A. Dimethyl sulphoxide dose-response on rat retinal function. Documenta Ophthalmologica. 119 (3), 199-207 (2009).
