Abstract
biópsia muscular percutânea usando o conchotome Weil-Blakesley está bem estabelecida tanto na prática clínica e na pesquisa. É uma técnica segura, eficaz e bem tolerada. O conchotome Weil-Blakesley tem uma ponta cortante afiada com um 4 - ampla oco 6 mm. Ele é inserido através de um 5 - incisão na pele mm 10 e pode ser manobrado para a penetração nos tecidos controlada. A ponta é aberto e fechado no interior do tecido e, em seguida, rodado de 90 ° -180 para cortar o músculo. A quantidade de músculo obtido na sequência repetida de amostragem pode variar entre 20 mg e 290 mg que podem ser processados para ambos os estudos moleculares e histologia. A ferida precisa de ser mantida a actividade física vigorosa seco e mantidos a um mínimo de cerca de 72 horas, embora os níveis normais de actividade pode reiniciar imediatamente após o procedimento. Este procedimento é seguro e eficaz quando muita atenção é dada à seleção de temas, assepsia completa e cuidados pós-procedimento. Ambos direita e à esquerda vlateral Astus são adequados para dependentes de preferência participante biópsia.
Introduction
Obtenção de músculo esquelético para o diagnóstico de uma miopatia e outras doenças degenerativas neuromusculares se baseia em métodos seguros e eficazes, que sejam aceitáveis e não neutralizante aos pacientes 1. Historicamente, os métodos de obtenção de tecido muscular para análise incluiu biópsias abertas realizada sob anestesia geral ou a partir post mortem. Estas técnicas permitiram a visualização direta do músculo e permitiu um pedaço maior de músculo a ser feita a biópsia. Dadas as potenciais desvantagens destas técnicas têm para o paciente em termos de internação e de recuperação, métodos "semi-abertas" percutâneas biópsia muscular foram introduzidas como alternativas. Esta técnica foi realizada pela primeira vez por Duchenne (1806-1875), que usou uma agulha auto-construído com um trocarte e foi capaz de obter uma amostra de músculo de um sujeito vivo sem anestesia geral 2. Desde então, várias formas de agulhas de biopsia foram usadas 3,4,5. No entanto, a biopsia needle desenvolvido por Bergstrom em 1962 tem sido o mais utilizado na prática clínica; tanto em crianças e adultos, assim como na pesquisa 6,7,8,9,10. Possui um trocar afiada, uma cânula de corte e uma haste de empurrar para expulsar a biópsia pós tecido. Rendimentos musculares obtidos com este procedimento foram relatados para variar de 25 -293 mg após amostragem repetida 11,9.
Henriksson introduziu o conchotome Weil-Blakesley em 1979 como um método alternativo biópsia muscular semi-aberto (Figura 1) 12. O instrumento é uma estrutura única, ao contrário do construto Bergstrom e está concebido como um fórceps com uma ponta cortante afiada. O tamanho da ponta pode variar de 4 mm a 6 mm de largura. Quando as duas extremidades da ponta cortante se opõem, um oco que é formado assegura a captura do músculo. O conchotome é inserido através de uma 5 - mm incisão na pele 10 e evita a necessidade de um trocarte para penetrar o músculo e a fáscia sobrejacente como um scalpeL pode ser utilizado para fazer uma faixa para baixo para o músculo.
Este método permite a penetração do tecido controlada com um elevado grau de manobrabilidade 13,14. É especialmente útil para sites onde a pressão indevida poderia danificar estruturas neurovasculares ou subjacentes ósseas por exemplo., No local do tibial anterior 15,14. rendimentos musculares usando o conchotome pode ser variável e em nossa prática 20 - 200 mg de músculo foi obtido após amostragem repetida. Uma vantagem potencial da conchotome sobre a agulha Bergstrom, para além do elevado grau de maneabilidade que oferece, é que a ponta cortante não necessita de ser afiada ou substituído tão frequentemente como o trocarte da Bergstrom construir 16.
O objectivo global da biópsia muscular usando o conchotome Weil Blakesley é obter quantidades suficientes de tecido muscular para permitir histoquímica e análise molecular, tanto para diagnóstico e pesquiestudo ch. É um procedimento simples e seguro que pode ser aprendida facilmente. Com esta técnica, músculo adequado para biópsia inclui bíceps, tríceps, deltóide, gastrocnêmio, tibial anterior, sóleo e os sacrospinals 17,15,7,18,14. A parte mais externa do vasto lateral é o local mais comum usado para a biópsia, pois evita as principais estruturas neurovasculares na coxa. É identificado cerca de dois terços para baixo uma linha imaginária que une a espinha ilíaca ântero-superior e da patela. Dados morfologia do músculo, por exemplo área myofibre, proporções myofibre, a densidade capilar derivado do vasto lateral de amostragem estão amplamente disponíveis na literatura permitindo a comparação entre os estudos 11,19.
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Protocol
declaração de ética: Uma descrição do procedimento de biópsia muscular seguimos dentro da nossa instituição segue agora. O procedimento de biópsia muscular é utilizada no Estudo sarcopenia Hertfordshire que tenha sido aprovada pelo número Comité de Investigação Hertfordshire 07 / Q0204 / 68. Todos os participantes assinaram termo de consentimento 20.
NOTA: Um único operador pode realizar o procedimento, auxiliado por um assistente que pode envolver o participante na conversa, a fim de reduzir a ansiedade e garantir que eles são confortáveis em todos os momentos. O quarto procedimento deve ser equipado com uma pia, um sofá ajustável em altura, superfícies limpas e um carrinho de procedimento.
1. Prepare o Participante (Figura 2)
- Peça ao participante para colocar confortavelmente, supina em um sofá. Expor a coxa preferido do vinco na virilha. Espalhe uma folha absorvente descartável sob a coxa exposta. Certifique-se de que a perna permanece reto e relaxado durante todo o procedimento, masa coxa é tenso momentaneamente para delinear o vasto lateral.
- Marcar o local procedimento de cerca de dois terços para baixo uma linha imaginária a partir da espinha ilíaca ântero-superior à patela.
2. Prepare a pele (Figura 2)
- Raspar a pele para aproximadamente 4 cm de diâmetro em torno do local da biópsia proposto com uma lâmina de barbear estéril e limpar a pele com um algodão embebido em álcool.
NOTA: Isso é para evitar qualquer aprisionamento de cabelo subseqüentes na ferida durante o processo de cicatrização. Este passo é opcional de acordo com a preferência do operador. - Infiltrar na pele e fáscia sobreposta com anestesia local. Use uma agulha 25 G para levantar uma bolha subcutânea de lidocaína a 2%, em seguida, se infiltrar mais profundamente no tecido subcutâneo com uma agulha 23 G. Destinam-se a penetrar, pelo menos, metade de uma polegada, dependendo do conteúdo do tecido subcutâneo no local da biópsia. Esta profundidade deve ser suficiente para assegurar as FAS sobrejacentesCIA é anestesiado. Permitir 2-5 min para que o anestésico para a ação. Confirmar anestesia sondando a pele suavemente com a ponta da lâmina agulha ou bisturi.
3. Preparar um campo estéril (Figura 2)
- Lavar as mãos com sabão e manter as mãos limpas até que um avental estéril é usado. Cobrir as mãos com luvas estéreis antes de criar um campo estéril no carrinho de procedimento.
- Esterilizar o local da biópsia com solução de álcool / clorexidina isopropílico 2% ou um desinfectante da pele de iodo base. Aplique uma cortina estéril com uma abertura adesiva para expor o local da biópsia, mas também para manter um campo esterilizado.
4. Execute o procedimento (Figura 2)
- Com um bisturi tamanho 11, fazer uma 5 - incisão 10 mm sobre a pele e para baixo e através da faseia sobrejacente. Insira a ponta cortante fechada do conchotome através da incisão em um ângulo reto ao eixo longo do fêmur, a uma meia profundidade média de uma polegada. Se necessário, usara mão livre para segurar e suportar o coxa em torno do local da biópsia, enquanto a ponta do conchotome é aberto e fechado dentro do músculo.
- Rodar o conchotome através de 90 - 180 ° para cortar o músculo. Retirar o conchotome e abra a ponta em gaze estéril umedecido por soro fisiológico estéril. Repetir o procedimento dentro do local da ferida única, se necessário, para se obter o tecido muscular suficiente. Transferir a gaze para um recipiente colocado em gelo. Transferir o recipiente para a preparação de um laboratório para processar o músculo de acordo com o protocolo institucional local.
5. Pós Processo (Figura 2)
- Aplicar pressão direta sobre a ferida para até 5 min. Fechar a ferida com Steri-tiras, colocando-os em paralelo para a ferida, em oposição a ângulos rectos para evitar potencialmente removendo o tecido da cicatriz e reabertura da ferida se os Steri-tiras são removidos inadvertidamente. Coloque um penso absorvente estéril sobre os Steri-tiras e amarre uma de duas camadascurativo para a compressão e prenda com fita adesiva.
- Explicar o método curativo para o participante como eles terão de realizar uma troca de curativo 3 - 4 dias após o procedimento. Certifique-se que o participante remove a ligadura de compressão antes de ir para a cama mais tarde naquela noite.
6. Pós Biópsia Advice
- Informará o participante que é comum a experiência de alguns rigidez coxa que pode ser aliviada por exercícios leves (por exemplo., Caminhar). Use analgesia simples, como paracetamol. Avisar o participante sobre dormência transitória ao redor do local da biópsia que pode persistir por até duas semanas, bem como a complicação potencial de infecção da ferida.
7. Instruções para o procedimento Mensagem Assunto
- Peça ao participante para evitar a atividade vigorosa durante 72 horas (como escalada, corrida, levantamento de peso). Peça ao participante para evitar imersão em água por 48-72 horas. No entanto, instruir o PARTICIPANt para envolver película aderente ou similar em torno do local da biópsia quando um chuveiro para manter o curativo seco.
- Peça o participante para mudar o penso ao fim de 3 - 4 dias, e remover as tiras steri-depois de uma semana.
NOTA: O participante deve ser dado instruções escritas para cuidados pós-biópsia, curativos peças e detalhes de contato de emergência da equipe responsável por realizar o procedimento.
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Representative Results
O procedimento descrito acima é seguro e aceitável em ambos os ambientes clínicos e de pesquisa. Quando a biópsia é realizada como parte do processo de diagnóstico, o músculo deve ser escolhido de acordo com os sintomas e sinais de fraqueza muscular do paciente. O local da biópsia deve ser livre de lesões anteriores, contraturas ou instrumentação 21,1. Na pesquisa, condições padronizadas, tais como jejum ou exclusão de pacientes com diabetes podem ser necessários 19. Anticoagulantes como a warfarina precisa ser parado e o tempo de coagulação verificados antes do procedimento. Aspirina simples a uma dose de 75 mg pode ser continuado como a nossa experiência sugere que não aumenta significativamente o risco de excesso de sangramento 22. Além disso, deve ser dada aos participantes que tomam medicamentos que prejudicam a cicatrização de feridas. Essencialmente, os riscos de parar a medicação deve ser pesado contra os benefícios do procedimento em cadacaso. Durante a seleção dos participantes, um histórico detalhado de potenciais alergias aos anestésicos locais, iodo / clorexidina e curativos devem ser obtidos e as alternativas utilizadas conforme a necessidade. Os participantes devem ser alertados sobre a ocorrência rara, mas potencial de reações alérgicas que podem se manifestar como aumento da vermelhidão da pele, edema local ou formação de bolhas. Nestas circunstâncias, a remoção do penso (s) e o tratamento com anti-histaminas / esteróides pode ser necessária.
O procedimento leva cerca de 15 - 20 min. É essencial que prestar muita atenção à assepsia, a fim de minimizar o risco de infecção da ferida. Durante os participantes do procedimento podem sentir algum desconforto. Ocorrência de qualquer dor aguda pode exigir ainda mais a infiltração de anestésico local. Após o procedimento, a rigidez da coxa é comumente experiente e podem ser aliviados por exercícios leves (por exemplo., Caminhar). No Hertfordshire sarcopeniaEstudo (HSS), os escores de dor medidos com a escala de dor visual analógica (VAS) (escala de 0 mm - "sem dor 'a 100 mm -" dor tão ruim quanto pode ser ") eram tipicamente baixa, com uma média de 7 mm durante o procedimento e 4 mm um dia após o procedimento sugerindo que os sujeitos no presente estudo descobriu o procedimento minimamente dolorosa 22 (Tabela Materiais) .A taxa de complicações da ferida relatados na literatura varia de 1% a 3% e, principalmente, incluem hematoma ferida formação 13,9,14. Um estudo descreveu uma grave um hematoma sub-fascial e uma subsequente trombose venosa profunda 13. No HSS a taxa de complicação da ferida (descrito como um nódulo duro sob a cicatriz por 3 semanas) foi de 1% 22. Os participantes podem sentir dormência em torno do pequeno local da incisão dada a necessidade de incisão através da pele e tecido subcutâneo. Em nossa experiência esta dormência foi transitória e foi totalmente resolvida dentro de um ou dois wee ks.
No que diz respeito aos resultados histológicos representativos, nós previamente estudada a associação entre influências de desenvolvimento e morfologia muscular 19. Neste estudo significa Tipo I myofibre área (SD) em 48 menor peso ao nascer (≤3.18 kg) homens era 4903 mm 2 (1,354 mm 2) e 4644 mm 2 (1,022 mm 2) em 47 maior peso (kg) ≥3.63 homens, enquanto que a área média myofibre tipo II era 4,046 uM 2 (1,166? M 2) e 3859 uM 2 (1,127? M 2) em homens mais baixos e maior peso ao nascer, respectivamente.
Figura 1. Imagem de Weil-Blakesley Conchotome. O conchotome Weil-Blakesley com uma ponta cortante 6 mm é utilizado neste estudo.5 / 53075fig1large.jpg "target =" _ blank "> Clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 2. Técnica biópsia muscular Usando o Weil-Blakesley Conchotome. (A) A perna foi exposto a partir do vinco na virilha. A área de biópsia mais vasto lateral foi raspada do cabelo, marcado, infiltrada com lidocaína e limpo com anti-séptico. A área da biópsia foi isolado. A pele e sobrepostas fáscia foram então perfurado com um bisturi tamanho 11. (B) O conchotome foi inserido na faixa feita por o bisturi e rodado de 90 ° para excisar o músculo. CD. A 5 -. Ferida 10 mm foi fechada com Steri-tiras e vestido (Anteriormente publicado 22) Por favor clique aqui para ver um larversão ger desta figura.
Figura 3. Aplicação Steri-strip. As tiras steri- são aplicadas paralelamente ao pequena incisão. Este método está relacionado com uma boa taxa de cura; normalmente dentro de uma semana. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
Figura 4. biópsias musculares do vasto lateral. Por favor clique aqui para ver uma versão maior desta figura.
| Mediana (intervalo interquartil [IQR]) | |
| Durante o procedimento | 7 (1-34) |
| procedimento de pós Um dia | 4 (0-16) |
| Sete dias após o procedimento | 1 (0-4) |
| Atividade diária recomeçada | N (%) |
| Depois de um dia | 60 (65%) |
| Depois de dois dias | 26 (28%) |
| Mais do que dois dias | 7 (7%) |
Tabela 1. Dor Escala Analógica Visual (VAS) Pontuação e retomada da atividade em 93 Participantes da Pesquisa após Conchotome biópsia muscular no Estudo sarcopenia Hertfordshire. A escala de dor variou de 0 mm - "sem dor" paraum máximo de 100 mm - "dor tão ruim quanto pode ser". A maioria dos participantes retomaram a atividade de um procedimento diária habitual dia de pós.
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Discussion
Para garantir a segurança dos participantes e realizar a biópsia muscular de forma eficiente, é fundamental prestar atenção aos passos críticos no âmbito do protocolo.
Os participantes devem ser selecionados depois de considerar cuidadosamente os critérios de exclusão para evitar complicações, como sangramento e cicatrização de feridas pobre. assepsia rígida ao longo do processo é essencial. Aplicação da técnica correcta vai assegurar o conforto participante, minimizar o trauma indesejável para os tecidos do participante e permitir um rendimento suficiente amostra para análise. Ocasionalmente, pode ser difícil obter uma amostra muscular, especialmente se o participante tem de tecido adiposo subcutâneo excessiva. sangramento excessivo pode ocorrer mesmo depois de uma cuidadosa selecção dos participantes, caso em que a decisão de prosseguir com procedimento deve ser feito. Pressão directa ao local da ferida por até 5 min pode ser necessário estimular a hemostasia e minimizar hematomas. Outro método para minimizar a hemorragia é ausar lidocaína com epinefrina que irá causar uma vasoconstrição local. No entanto, a epinefrina pode interferir com análises e cautela subsequentes deve ser utilizado. É a preferência do autor não usar adrenalina durante este procedimento.
Várias análises podem ser realizadas em tecido muscular dado os avanços na microscopia, de análise de imagem, e métodos de análise histoquímica moleculares. Estes incluem avaliar a morfologia muscular, por exemplo., A composição de fibra, área da secção transversal de fibra, a vascularização, a actividade contráctil de fibra única, a análise de ARN, proteínas, bem como a actividade da enzima 23,24,25,19,26,27. Embora utilizado rotineiramente utilizados no processo de diagnóstico clínico de miopatia, biópsia do músculo é cada vez mais realizado em investigação. Por exemplo, temos mostrado previamente que as influências de desenvolvimento sobre a morfologia do músculo pode explicar a associação entre baixo peso ao nascer e sarcopenia 19. limitações potenciais desta técnica, simiLar para outras técnicas semi-aberto, incluem ser limitado a um local onde a morfologia ou seja, tipo de fibra muscular pode não ser representativa de todo o grupo muscular.
biópsia muscular com o conchotome Weil Blakesley é um procedimento viável e aceitável. Este procedimento fornece um método alternativo para a Bergstrom e outros métodos de biópsia de agulha. É fácil de dominar e dá um bom rendimento de amostra para análise. A taxa de complicações é baixo e desconforto reduzido ao mínimo quando o procedimento é realizado usando uma técnica padronizada, conforme descrito acima, condições assépticas estritas cuidados e aconselhamento abrangente sobre os cuidados pós biópsia é dado.
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Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Weil-Blakesley conchotome | Gebrüder Zepf Medizintechnik, Dürbheim, Germany | None | 6 mm biting tip |
| 5 ml 2% lidocaine | Generic use | None | One 5 ml vial should suffice for adequate anaesthesia |
| Alcohol swab | Generic use | None | |
| 5 ml syringe | Generic use | None | |
| 25 G and 23 G sterile needles | Generic use | None | |
| Sterile scalpel size 11 | Generic use | None | |
| Sterile gauze squares | Generic use | None | |
| Sodium chloride 0.9% 10 ml | Fannin | 1122/002/001 | |
| Steri-Drape™ Small Drape with Adhesive Aperture | 3M | 1020 | |
| ChloraPrep 2% w/v /70% v/v cutaneous solution | CareFusion | 270400 | Two |
| Steri-Strip™ 1/4 inch x 3 inch Reinforced Adhesive Skin Closures | 3M | R1541 | |
| PRIMAPORE sterile dressing 15 cm x 8 cm | Smith & Nephew |
66000318 | |
| Cotton crepe bandage Hospicrepe 233 7,5 cm x 4,5 m | Hartmann | 915562 | |
| Flexible cohesive bandage Co-Plus LF | BSN medical | 2904565 | |
| Disposable absorbent sheet | Generic use | None | |
| Micropore or transpore tape | Generic use | None | |
| Sterile gown with sterile paper towels | Generic use | None | |
| Sterile gloves | Generic use | None |
References
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