Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Domuz uzun süreli Kardiyovasküler Egzersiz Testi için Kateter Cerrahi Yerleştirme

Published: February 9, 2016 doi: 10.3791/53772
* These authors contributed equally

Abstract

Bu protokol, kronik enstrüman domuz ve bir motorlu koşu bandı üzerinde domuz egzersiz prosedüre cerrahi prosedür açıklanmaktadır. kardiyopulmoner fonksiyon genellikle anestezi gerektiren, invaziv ölçülür erken kardiyopulmoner fonksiyon bozukluğu, özellikle hayvan modellerinde, teşhis edilmesi zordur. Birçok anestezik ajanlar Kardiyodepresif olduğundan, kardiyovasküler fonksiyonu ince değişiklikler maskeli olabilir. ölçümler anestezi ve akut cerrahi travmanın etkileri olmaksızın sakin bir dinlenme koşulları altında elde edilebilir ve böylece zıt durumda, kronik cihazlar, uyanık halde kardiyopulmoner fonksiyonunun ölçülmesini sağlar. hayvanlar düzgün eğitimli zaman Dahası, ölçümler de derecelendirilmiş koşu bandı egzersiz sırasında elde edilebilir.

Akış sondaları Coron ölçümü için inen koroner arter kalp debisi ölçümü ve sol ön etrafında aort veya pulmoner arter etrafına yerleştirilirli kan akışı. Sıvı dolu kateterler basıncı ölçümü ve kan örneklemesi için aort, pulmoner arter, sol atrium, sol ventrikül ve sağ ventrikül implante edilir. Buna ek olarak, bir 20 G kateter koroner venöz kan örnekleme izin vermek için ön interventriküler damar konumlandırılır.

iyileşme bir hafta sonra, 3 dakika süren her aşaması ile, beş kademeli egzersiz protokolüne domuz kateterler basınç ve debi metre bağlandığında, bir motorlu koşu bandı üzerinde yerleştirilir ve domuz tabi tutulur. Hemodinamik sinyalleri sürekli olarak kaydedilir ve kan örnekleri her egzersiz aşamasının son 30 saniye boyunca alınır.

Kronik instrumented hayvanları okuyan büyük avantajı dinlenme değil, aynı zamanda egzersiz gibi fiziksel stres sırasında değil, sadece kardiyopulmoner fonksiyonun seri değerlendirmesini izin vermesidir. Ayrıca, kardiyopulmoner fonksiyon hastalığı geliştirme a sırasında sürekli olarak değerlendirilebilirND, kronik tedavi sırasında, bu şekilde istatistiksel gücünü artırmak ve dolayısıyla çalışma için gerekli hayvan sayısını sınırlar.

Introduction

Yeterli kardiyopulmoner fonksiyon özellikle de egzersiz 1 sırasında olduğu gibi artan metabolik talep koşulları sırasında, oksijen ve besin ile vücut tedarik esastır. Egzersize kardiyopulmoner tepki kalp fonksiyonu, yani uyarlamalar bir dizi ile karakterizedir., Egzersiz kasları besleyen vasküler yataklarda kalp atım hızı, kontraktilite ve atım hacminde ve mikrovasküler fonksiyon, yani, vazodilatasyon bir artış yanı sıra pulmoner gibi gastrointestinal sistem tedariki vasküler yatak yanı sıra inaktif kasları 1 damar ve vazokonstriksiyon. Bozulmuş egzersiz kapasitesi kardiyopulmoner disfonksiyonun erken özelliğidir ve kardiyopulmoner egzersiz testleri bozulmuş egzersiz kapasitesi 2 olan hastalarda kardiyak disfonksiyon, vasküler disfonksiyon ve / veya pulmoner disfonksiyon arasındaki tanımlamak için etkili bir yöntem olarak kullanılmaktadır. Erken kardiyopulmoner disfonksiyon D,kardiyopulmoner fonksiyon genellikle anestezi gerektiren, invaziv ölçülür olarak ifficult birçok anestezik ajanlar Kardiyodepresif özellikleri 3 haiz olan, özellikle hayvan modellerinde, teşhis etmek.

Kronik enstrümantasyon uyanık halde kardiyopulmoner fonksiyon ölçümü için izin verir, ve hayvanlar tamamen laboratuvar koşulları ölçümlere göre ayarlanmıştır zaman anestezi ve akut cerrahi travmanın etkileri olmadan sessiz istirahat koşullarında elde edilebilir. Hayvanlar eğitilmiş Dahası, ölçümler de kademeli koşu bandı egzersizi 4,5 sırasında elde edilebilir. Daha spesifik olarak, sol ve koroner sistemik ve pulmoner mikrosirkülasyondaki vazomotor sesi düzenlenmesi tespit edilebilir ise sağ ventrikül fonksiyonu, değerlendirilmesi ve miyokard perfüzyon ile ilgili olabilir. sıvı dolu kateter kullanımı reklamı empoze olmadan basınç ölçümünü yanı sıra alarak kan örneklerini veriyorHayvanlar üzerinde neksel stresi. Kronik olarak hayvanlar üzerinde çalışılarak bir diğer avantajı, kardiyopulmoner egzersiz testi, bu şekilde istatistiksel gücünü artırmak ve dolayısıyla çalışma için gerekli hayvan sayısını sınırlama hastalık gelişimi esnasında veya kronik tedavi sırasında ya kendi kontrolü olarak bir hayvan kullanımına izin tekrarlanabilir olmasıdır .

Domuz Kardiyopulmoner anatomisi, insanlarda bu benzer ve diyabet 6, miyokard enfarktüsü 7, pulmoner hipertansiyon 8,9 ve ilerleme hızı kaynaklı kalp yetmezliği 10,11 olarak kardiyopulmoner hastalığın çeşitli biçimlerini oluşturmak mümkündür. Ayrıca, domuz boyutu sadece kan gazlan analiz etmek için değil, aynı zamanda nörohumoral ölçümler yapmak için ve / veya hastalığın biyolojik aramak için, kronik aletleri ve yeterli miktarda tekrarlanan kan örnekleme sağlar.

Bu protokol, kronikleştiriyor için kullanılan cerrahi tarifly enstrüman domuz yanı sıra motorlu koşu bandı üzerinde domuz egzersiz için protokol.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Hayvan denekleri Prosedürleri Erasmus Tıp Merkezi Rotterdam Hayvan Bakım Komitesi (NL) tarafından onaylanmıştır. 6 ve 80 kg arasında ağırlıklar ile domuz başarıyla bu protokolü kullanarak Enstrümante edilmiştir.

İnsan Taşıma için Hayvanların 1. Adaptasyon

  1. tesis geldikten sonra, yalnız hayvanların ev ama birbirleri ile etkileşim sağlayacak.
  2. en az günde bir kez bir hafta boyunca hayvan ele alarak, deneysel laboratuvara hayvan tesis insan taşıma ve ulaşım domuz Accustomize.
  3. Ameliyat öncesi üç kez en az koşu bandının üzerinde onları egzersiz yaparak bir motorlu koşu bandı üzerinde egzersiz deneyler için uygun hayvanlar eğitin.
  4. Hayvanlar kusma ve mide sıvılarının böylece potansiyel aspirasyon, mide bulantısı önlemek için O / N ameliyattan önce aç olmalıdır.

Cerrahi 2. Hazırlık

  1. yatıştırma
    1. 10 ml'lik bir şırınga içinde sedasyon için ilaç hazırlayın. Premedikasyon tiletamine / zolazepam (5 mg / kg), ksilazin (2.25 mg / kg) ve atropin (1 mg) oluşur.
    2. domuz uyutmak için bir 19 G 1.5 '' iğne ile trapezius kasında ilaç intramüsküler enjekte edilir.
    3. Yaklaşık 10 dakika bekleyin ve sedasyon uygun ve istikrarlı bir seviyede onaylamak için kas gevşemesi ve bilinç olmadığını kontrol edin.
    4. anestezi ve / veya sıvıların sonraki intravenöz uygulama için bir kulak vende 20 G periferik güvenlik kateter yerleştirin.
  2. Entübasyon ve Havalandırma
    1. yatar pozisyonda bir tablo ve / veya arabası hayvan yerleştirin.
    2. oral dağıtıcı ile hayvanın ağzını aç.
    3. çeneleri veya entübasyon engel refleksleri, yutma varlığı yetersiz gevşemesi durumunda, kulak ven kateter yoluyla damardan tiyopental (10 mg / kg) yönetmek. Seçenek olarak ise, pik maskelenebilirizofluran ile sedasyon ikna etmek.
    4. laryngoscopist doğrudan larinksi görüntülemek için izin vermek için bir ışık ve bir Miller bıçak ile geleneksel laringoskop kullanın. laringospazm varsa, spazm azaltmak ve entübasyon sağlamak için kordonlar ve larinks% 2 lidokain uygulayın.
    5. tüp üst solunum yolu anatomisine daha iyi uyum sağlamak ve ağız yoluyla ve trakea içine ses tellerinin arasındaki tüp geçmek endotrakeal tüpe bir Entübasyon stile yerleştirin.
    6. Solunum gazlarının sızmasını önlemek için, ve mide sıvısının olası aspirasyon hava yolları korumak için, bir yerde güvenli hale getirmek için bir 10 ml şırınga ile balon şişirin.
    7. Bir nefes filtre (ısı ve nem eşanjörü) ve mekanik ventilatöre tüp bağlayın.
    8. Cerrahi masaya onun sağ tarafta hayvan yerleştirin.
    9. , Ç: oksijen ve azot ile (2 hacim / hacim 1) oluşan bir karışım ile hayvan havalandırın, 100-120 mmHg pO2 seviyelerini elde etmek içing aşağıdaki ventilatör ayarları: Basınç kontrol modu: pozitif ekspirasyon sonu basınç (PEEP) 4 cmH2O; tepe inspiratuar basıncı 16-18 cmH2O; hayvanın büyüklüğüne bağlı olarak frekans solunum bu ~ 10 ml / kg bir gelgit hacmi ile sonuçlanabilir kapnografiye olan havalandırma izlemelidir (20 kg hayvan için, artan vücut ağırlığı ile sıklığını azaltabilir).
    10. rektal termometre kullanarak sıcaklığını izlemek ve 37 arasında sıcaklık korumak - bir ısı lambası veya ısı paspas kullanarak 39 ºC. Ayrıca, elektrokardiyografi ile kalp atışlarının izlenmesi.
  3. Anestezi
    1. Neden ve kulak damarı kateterinin ile fentanil (10 ug / kg / saat) damardan tatbikat alternatif olarak solunum gazı-karışıma izofluran (h / h) ya da% 2.0 ilave edilerek anestezi tercihen korur.
    2. Ameliyat başlamadan önce bir arka bacak ayak tutam ağrı refleksleri test ederek anestezi yeterli derinliğini kontrol edin. Gerektiğinde, eklemekEk anestezi ya da birkaç dakika bekleyin. ameliyat boyunca düzenli olarak ağrı refleksleri kontrol edin.
  4. Sıvılar ve Antibiyotikler
    1. damar içine, kulak damarı kateterinin ile amoksisilin (25 mg / kg) birinci doz yönetmek.
    2. Ameliyat sırasında 10 glikoz (% 500 mi) yavaş yavaş infüzyon sağlamak için kulak damarı kateterinin yapılacak bir bağlantı sistemi.
  5. Cerrahi Site Sterilizasyon
    1. Tıraş ve tüm yol sol koltuk altına vertebral kolon yaklaşık 25 cm genişliğinde bir alan üzerinde hayvanın cilt temizlemek.
    2. yaklaşık olarak 5 dakika boyunca povidon-iyot fırçalama (75 mg / ml) ile nemli cilt sürtünür.
    3. povidon-iyot losyon (100 mg / ml) ile cilt sterilize önce, ıslak steril kompres ile deriden povidon-iyot sabun çıkarın.
    4. cerrahi bölgenin bakteriyel transferi ve sonraki kirlenmeyi azaltmak için steril cerrahi örtüler ile hayvan örtün.

    3. Cerrahi

    1. Açılış Toraks (Torakotomi)
      1. Aşağı sol koltuk altına skapula sol alt açı 1 cm kaudal (Şekil 1) başlayarak, deride bir kesi yapmak. aşırı kanama önlemek için ciltteki kan damarları dağlamak için diatermi kullanın.
      2. diathermy kesme yöntem kullanılarak, serratus kas ve pektoralis majör kası kesti. Ayrıca aşırı kanama önlemek için kas tabakasında kan damarlarını dağlamak için diatermi kullanın.
      3. dikkatli bir sivrisinek kelepçe ile dördüncü sol interkostal alanı interkostal kas bölmek için künt diseksiyon kullanın. Şimdi visseral ve parietal plevra ile kaplı sol akciğerde kıyı yüzey maruz olmalıdır.
      4. plevra boşluğuna girmek için, dikkatlice plevra iki katmanı delmek ve onları açık gözyaşı.
      5. yaranın kenarlarını ve kaburga ayırmak için göğüs retraktörü kullanın ve zorla dokuları sürücüdışında plevra boşluğunun iyi pozlama elde etmek için.
      6. kaudal yönde sol akciğer uzaklaştırdığına ve ıslak bir gazlı bez ile yerde saklayın. Şimdi kalp ve büyük damarlar açıkça maruz olmalıdır.
    2. Kateter ve Akış Sondalar Yerleştirme (Şekil 1)
      1. ~ Inen torasik aortun çevreleyen bağ dokusunun 2 cm 2 kaldırmak için künt diseksiyon kullanın.
      2. olmayan bir emilebilir USP3-0 örgülü ipek sütür (Ø0.2 mm) aort duvarında, üç dikiş oluşan bir çanta-string sütür gerçekleştirin.
      3. purse-string sütür ortasında bir paslanmaz çelik 16 G iğne ile aort damar duvarına nüfuz.
      4. , Aort içine (halka kadar) sıvı dolu kateter ucu takın sıkıca birbirine purse-string sütür çekin ve sütür iki dizeleri kravat.
      5. t halka yukarıda ve tekrar sütür kateter etrafında 3 kez rüzgar, yerinde kateter tutmak içinsütür iki dizeyi yani. Dahası ekleme yerden yaklaşık 1 cm kafatası yeni bir dikiş ile kateteri sabitleyin.
      6. Ameliyat sırasında ortalama arter basıncını izlemek için, bilgisayara bağlı olan kalibre basınç dönüştürücü, sıvı dolu kateter bağlayın. doğrulamak veya doğru havalandırma ayarları ayarlamak için bir kan gazı edinin.
      7. bir çapraz kesim ile perikard açın. sağlam perikard üzerinde çalışan frenik sinir tutmak için dikkatli olun.
      8. pulmoner arter tespit ve Farabeuf retraktörü ile kaudal yöne doğru hafifçe çekin. Şimdi çıkan aort ve arkus aorta maruz olmalıdır. pulmoner arter geri çekilmeden ise ortalama arter basıncı izleyin.
      9. çıkan aort ve Metzenbaum makas kullanarak pulmoner arter arasında bağ dokusunda küçük bir kesim (~ 1 cm) yapmak, büyük bir kavisli ile çıkan aort veya pulmoner arter ya incelemek mümkünsivrisinek kelepçe akış probu yerleştirmek için.
      10. geminin etrafında akış prob lastik bant yerleştirin. kolay bu, lastik bandın bir ucundan bir dikiş yerleştirmek yapmak için, geminin etrafında bu sütür yerleştirin ve lastik bant gemi çevreleyen kadar çekin.
      11. lastik bant akış probu ölçüm cihazı sabitleyin. bilgisayara akış probu bağlayın ve akış probu doğru yerleştirme onaylamak için bilgisayarda kardiyak output sinyalini kontrol edin.
      12. Aort sıvı dolu kateter (- 3.2.5 3.2.2) için tarif edildiği gibi aynı şekilde pulmoner arter sıvı dolu kateterler, sağ ventrikül, sol ventrikül ve sol atrium yerleştirin. yapılarda bir purse-string sütür yapmadan önce bağ dokusu kaldırmak için gerekli olmadığını unutmayın.
      13. Metzenbaum makasla kesilmiş - (3 mm 2) Açığa ve ilk forseps ile doku kaldırma ve küçük yaparak koroner arter sol ön inen proksimal kısmının dissekeDikkatle bir pamuklu çubuk ile uzak arter doku alay izledi. altında küçük bir düz açılı sivrisinek kelepçe geçirilerek koroner arterin tam diseksiyon emin olun.
      14. koroner venöz kateter bağlı bir sütür, anterior interventriküler koroner damara bir dikiş paralel yapın.
      15. Koroner venöz kateter 20 G iğne ile koroner damar delinme ve intravenöz kateter kanül yerleştirin.
      16. İğneyi çıkarın ve zaten yapılan dikiş (3.2.14) ile kateter sabitleyin. Dahası, ilk ponksiyon yerden yaklaşık 1cm yeni bir dikiş ile kateteri sabitleyin.
      17. inen koroner arter önce disseke sol ön etrafında koroner akım probu yerleştirin. arter dar ve zor görünür olduğunda, geminin daha iyi bir pozlama elde etmek geminin dinlenmek için lidokain% 10 sprey kullanın. conf için bilgisayarda koroner akım sinyali kontrolIRM akış prob doğru yerleştirmenin (Şekil 2).
    3. tünel açma
      1. Tünel ayrı ayrı kas altında soldan üçüncü interkostal uzayda ve büyük kavisli sivrisinek kelepçe kullanarak kaburga üzerinde akış sondaları.
      2. Tünel üçüncü ya da interkostal kas delerek beşinci sol interkostal ya içinden sıvı dolu kateterler. sıvı dolu kateter kapalı Kelepçe ve delici alanı en aza indirmek ve tünel boyunca sıvı dolu kateter sızmasını önlemek için üç yollu stopcock çıkarın.
      3. interkostal kas üzerinde bir kese dize sütür vasıtasıyla emilmeyen USP2-0 örgülü ipek (Ø0.3 mm) akış sondaları ve sıvı dolu kateterler Fix. Bu dikiş de yeniden instating negatif intratorasik basınç sonra hava sızıntısını önlemek için hizmet vermektedir.
      4. Vertebral kolon yaklaşık 2 cm uğursuz ve paralel deride üç insizyon, yaklaşık 3 cm olunuzunluğu birbirinden ayrı 3 cm.
      5. arkasındaki kesiler rostralinde kesi sitesinden sol latissimus dorsi kasında altında bir trokar delmek. Tünel bu trokar içinde arka akış sondaları ve sıvı kateterler.
      6. sıvı dolu kateterler üzerinde stopcocks yerleştirin ve kelepçeyi çıkarın. 1,000 IU / ml heparin ile sıvı dolu kateter pıhtıları ve hava kabarcıkları ve doldurmak için kan alınır. Koroner venöz kateterler 5,000 IU / ml heparin ile doldurulmalıdır.
    4. Toraks kapanış
      1. İlk kesi bir yaklaşık 1,5 cm uzunluğunda, 8 cm kaudal ve paralel bir kesi yapmak.
      2. subkutan büyük kavisli sivrisinek kelepçesi ile bu kesi altıncı interkostal kas yoluyla plevra boşluğunda drenaj Kurşun. Kalan sıvıyı çıkarmak ve toraks kapanması sırasında plevral boşlukta negatif basınç yeniden emme cihazına drenaj bağlayın.
      3. Rahatlatmak ve şişirmekBir inspirasyon sonu beklemeye akciğer. görsel izleme akciğere yeterli doldurulmasını sağlamak.
      4. Birlikte emilmeyen USP6 örgülü polyester (Ø0.8 mm) iki ayrı sitelerde dördüncü interkostal alanı kaburga çekerek toraks kapatın.
      5. Çalışan bir dikiş ve emilmeyen USP2-0 örgülü ipek kullanılarak çalışan subkütiküler dikiş ile cilt ile serratus kas ve pektoralis majör kas kapatın (Ø0.3 mm)
      6. kateter arasındaki emilmeyen USP2-0 örgülü polyester (Ø0.3 mm) sırt tarafında kesiler dikilmelidir. İlk deriden bir düğüm ile sütür 1 cm kateter sonra, kesi yakın sabitleşmek için cildinize doğrudan bir düğüm atın. Akış prob için, akış probu tel dikiş (Şekil 1) kesilmesini önlemek için emilebilir USP2-0 örgülü poliglaktin (Ø0.3 mm) dikiş kullanır.
      7. kranial tarafındaki basınç uygularken dikkatli tahliye kaldırmakkesi plevral boşlukta negatif basınç korumak için. emilmeyen USP2-0 örgülü polyester (Ø0.3 mm) kullanılarak bir kese dize sütür ile kesi kapatın ve vazelin ile yara mühür.

    Şekil 1

    Cerrahi Şekil 1. Genel Sol üst paneli:. Traş ve bleu satırlar arasındaki yatıyor sterilize edilmelidir hayvan, steril bir alan. insizyon bölgesi kırmızı noktalı çizgi olarak tasvir edilir. Alt Sol panel: kateterler ve akış sondaları Resim: sıvı dolu kateter (A), lastik bant (B) dahil olmak üzere aort / pulmoner akım probu, 20 G iğne (C) ve koroner akım probu (D) de dahil olmak üzere koroner venöz kateter. Sağ üst panel: kateterler ve akış sondaları yerleştirme şematik bakış. MAP, ortalama arter basıncı; Kor venöz, koroner venöz kateter; LAP, atriyal basınç sol; LVPsol ventrikül basıncı; RVP, sağ ventrikül basıncı; PAP, pulmoner arter basıncı; CO, kardiyak output; CBF, koroner kan akışı. Alt sağ panel: a. Dikişin ve bir düğüm dikiş boyunca yaklaşık 1 cm mesafe ile güvence altına geri çıkarken tünelli kateterler bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.

    1. cerrahi anestezi ve iyileşme sona ermesi
      1. Tüm kesi siteleri kapalı iken anestezi durdurun.
      2. gracilis kasında (0.015 mg / kg) im buprenorfin verilerek analjezi sağlamak.
      3. Hayvan bağımsız nefes zaman havalandırma durdurun ve ventilatörden trakeal tüp ayırın. Hayvan yeterince nefes alıp almadığını düzenli olarak kontrol edin.
      4. yara sıvısını absorbe etmek için kateter dışsallaştırdığını siteler arasında gazlı bez yerleştirin.
      5. se dış korumak içinkateterlerin gments, hayvana bir elastik yelek vermek ve suni koyun iki adet arasında kateterler paket.
      6. trakeal tüpün balonu söndürün ve hayvan yutma refleksini kavuşur zaman ekstübe.
      7. Bir Fentanil yavaş salınımlı yama vasıtasıyla uzun vadeli analjezi sağlamak (20 kg domuz için 12 ug / saat; vücut ağırlığı göre gücünü ayarlamak). analjezi yeterli teslim edilmesini sağlamak için (örneğin alt karın gibi) derinin ince bir parçası yama yerleştirin.
      8. Ev, tüm post-operatif dönem için ayrı ayrı hayvan. hayvan sıcak tutmak için ameliyat sonrası ilk hafta için bir ısıtma lambası sağlamak.
      9. Hayvan bağımsız içmiyor ise yeterli sıvı iv sağlayın.
      10. kan pıhtısı oluşumunu önlemek için - (5000 IU / ml 1000) sonra ilk tuzlu su ile dolum ve nihayet heparinli serum fizyolojik ile, pıhtıları uzaklaştırmak için kan çekerek, günlük sıvı dolu kateterler yıkayın. Herhangi bir hava kabar demlenmeye vermemeye özenles kateterleri kızarma sırasında.
      11. ameliyat sonrası enfeksiyonları önlemek için ameliyat sonrası iv günde 6 gün boyunca amoksisilin (25 mg / kg) yönetmek.
      12. Hayvan koşu bandı deneyleri başlamadan önce bir hafta boyunca kurtarmak için izin verin.

    4. Koşu Bandı Deneyi (Şekil 2)

    1. (3.5.10) tarif edildiği gibi sıvı dolu kateterler yıkayın ve basınç dönüştürücüler için kızarmış kateterler takın. Sıcaklık düzeltilmiş kan gazı değerlerini elde edebilmek için rektal sıcaklığını ölçün.
    2. hava kabarcıkları nedeniyle sinyallerin sönümleme önlemek için tuzlu su ile basınç dönüştürücüler yıkayın. sırt tarafında elastik yelek basınç dönüştürücüler takın.
    3. amplifikatör basınç dönüştürücüler ve akış sondaları bağlayın. bilgisayar programında ölçme başlayın ve 0 mmHg havaya açık olma ile basınç dönüştürücüler ve akış sondaları kalibre (ve hayvana kapalı) ve bir manometre kullanarak 100 mmHg.
    4. (Şekil 2) için sinyallerini kontrol edin.
    5. Gerekirse, karışık venöz ve arteriyel kan örnekleme için sıvı kateterler ya bir uzantısı hattı bağlayın.
    6. Hayvan koşu bandı üzerinde sessizce duran yanı sıra yalan olduğunda hemodinamiği ölçün. Ortalama kan basıncı 10 sn'lik bir zaman dilimi boyunca ölçülür.
    7. İlk olarak saf 1 ml kan heparinize 1 ml şırınga kullanılarak elde edilebilir, böylece bir 10 ml şırınga ile kan 5 ml geri çekerek arteriyel ve karışık venöz kan örnekleri elde edilir. Koroner venöz kan örnekleri için, 2 ml şırınga saf kan elde etmek yerine, 1 ml, 10 ml şırınga ve geri çekilme yeterlidir kullanılır.
    8. belirlemek için bir kan gazı analizörü ile kan örnekleri işlemeden önce buz üzerinde mühürlü 1 ml şırınga tutunhayvanın metabolik ve ventilasyon durumu.
    9. koşu bandı üzerinde beş aşamalı egzersiz protokolüne domuz Konu, hız başına 3 dakika, 1-5 km / sa (~ maksimal kalp hızının% 85). dinlenme pozisyonunda olduğu gibi her hızına hız başına 2 dakika - 1.5 sonra hemodinami ve kan gazları elde edin.
    10. egzersiz protokolü sonrasında stopcocks kapatın ve sürüklenme 0 mmHg kalibrasyonu oluşup oluşmadığını kontrol edin bu kalibrasyon bir yere not edin. sıvı dolu kateter basınç dönüştürücüler çıkarın ve akış sondaları ayırın.
    11. (- 5000 IU / ml 1000) tuzlu ve heparin ile sıvı dolu kateterler yıkayın. Yapay koyun derisi iki adet arasında elastik yelek altına koyarak kateterleri ve akış sondaları koruyun. Hayvan şimdi kafesine iade edilebilir.

    şekil 2
    Şekil 2. Koşu Bandı Deneyi. Sol bölmedels: koşu bandı üzerinde domuz Enstrümanlı. Sıvı doldurulmuş kateter domuz arkasına yerleştirilmiş basınç dönüştürücüler, bağlanır. Sağ üst panel: koşu bandı, amplifikatör ve kayıt bilgisayara dahil toplam deneysel set-up, genel bakış. Alt sağ panel: kaydedilen hemodinamik veriler, tipik bir örneği. Baştan aşağı; Aort basıncı (AoP, mavi) ve sol ventrikül basıncı (LVP, kırmızı); Sol atriyal basınç (LAP, mavi) ve sol ventrikül basıncı (kırmızı); pulmoner arter basıncı (PAB, mavi) ve sağ ventrikül basıncı (RVP, kırmızı); Aort akım / kardiyak output (AoF, mavi); koroner kan akımı (CBF kırmızı). Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

5 km / saat egzersiz kadar prensip olarak birlikte per min 137 ± 7-256 ± 8 atım kalp hızında artış gerçekleştirildi 8.5 ± 0.7 L / dk 4.3 ± 0.3 den kalp debisi iki katına sonuçlandı 36 ± 3 ml (Şekil 3) 32 ± 2 ila inme hacminde küçük bir artış. Sol ventriküler basınç birinci türevinin maksimum bir artışla kanıtlandığı gibi inme hacmindeki artış, sol ventrikül büzülebilirliğinde bir artış ile kolaylaştırıldı dP / dtmax birlikte, sol karıncığın gevşeme bir artış oranı ve sol artışla atriyal basınç, sol ventrikül dolum basıncı olan (Şekil 3). Birlikte (9.2 ± 0.4 g / dl 8.5 ± 0.4 dan itibaren) hemoglobin konsantrasyonunda bir artış ile kardiyak output artış ve 71 ± 1% 45 ± 1 vücut oksijen çıkarma bir artış tr izinvücudun oksijen tüketimi ipling (Şekil 3). Sistemik damar iletkenlik artışı ve neredeyse tamamen kardiyak output artışını ağırladı sistemik vasküler dirençte azalma, kanıtladığı gibi bu aort basıncı (Şekil 3) Sadece hafif bir artış demek yani sistemik vazodilatasyon, meydana geldi. pulmoner vasküler iletkenlikteki 33 ±% 8 bir artışla kanıtlandığı gibi egzersiz da pulmoner dolaşımdaki mütevazı vazodilatasyona neden olmuştur. Bununla birlikte, bir araya (3 ± 1-10 ± 1 mmHg) sol atriyal basınç artışı ile kardiyak çıkışı 101 ± 8% artışı, (pulmoner arter basıncında bir artışa ve böylece, sağ ventrikül art yükündeki artış ile sonuçlanmıştır Şekil 3).

arter basıncında hafif bir artış ile birlikte, kalp hızındaki artış, ventrikül oksijen cons bir artış ile sonuçlanmıştırumption, esas olarak, hemoglobin konsantrasyonundaki artış ile kombinasyon halinde (738 ± 68 umol / dk 310 ± 37'den) miyokardiyal oksijen teslimat bir artış ile sonuçlanmıştır, koroner kan akışında bir artış ile bir araya edilir. miyokard oksijen talebindeki artış miyokard oksijen ekstraksiyonu gibi, miyokard oksijen kaynağı artış ile orantılı olduğunu (en 79,8 ± 1,9% kalan 81.6 ± 1.9 maksimal egzersiz sırasında%) esasen değişmeden koroner venöz oksijen satürasyonu ve koroner sonuçlanan sabit tutulmuştur venöz oksijen gerilimi (Şekil 3).

Şekil 3,
Şekil 3. Tipik hemodinamik Tepki Egzersiz. Vücut oksijen tüketimi (BVO2) egzersiz yoğunluğu (paneli AL x-eksenleri) için bir indeks olarak kullanılmıştır. kalp atım hızı (HR, panel A), atım hacmi (SV, panel B), max tepkilerdir gösterilmiştirImum ve kontraktilite ve gevşeme oranı endeksleri olarak sol ventrikül basıncı (dP / dtmakt, panel C ve dP / dtmin, panel D resp) ilk türevi en az, kardiyak output (CO, panel E), (MAP ortalama arter basıncı , panel F), sistemik vasküler iletkenlik (SVC, panel G), sistemik vasküler rezistans (SVR, panel H), pulmoner arter basıncı (PAB, panel J), sol atriyal basınç (LAP, panel I), pulmoner vasküler iletkenliği (PVC panel K). Toplam pulmoner direnç (sağ ventrikül afterload için TPR endeksi Paneli L, egzersiz sırasında artan). arter basıncında hafif bir artış ile birlikte, kalp hızındaki artış, esas olarak, koroner kan akışında bir artış oldu ventrikül oksijen tüketiminde bir artışa (panel X-ekseni MP) ile sonuçlanmıştır (CBF, panel M) miyokard oksijen ekstraksiyon (MEO2, panel N), koroner venöz oksijen doygunluğu (CVSO2, panel O) ve koroner venöz oksijen gerginlik gibi (cvPO2, panel P) minimal etkilenmiştir.Tüm veriler ortalama (SEM) standart hata gibi ortalama sunulmuştur. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Bu çalışmada domuz kronik enstrümantasyon nedeniyle ameliyat yanı sıra hemodinamiğini ölçüm yaparken bir motorlu koşu bandı üzerinde aletli domuz egzersiz ve arteriyel, venöz karışık ve koroner venöz kandaki oksijen miktarının ölçümü için kan örneklerini almak için protokol tanımlamaktadır.

Protokol çerçevesinde kritik adımlar
entübasyon işlemi sırasında zaten başlangıç ​​protokolü içinde birkaç kritik adımlar vardır. Tiyopental (2.1.5), bu nedenle uygulama üzerine hızlı entübasyon gerektiren bir solunum depresif bir ajandır. Ayrıca, dikkatli işlem sırasında ventilatör ayarlarını izlemek için önemlidir. göğüs boşluğu (aşama 3.1.4) açıldığında Böylece, bu negatif intratorasik bir basınç kaybına yol açar. Bu kaybını telafi etmek için ve alveol çöküşü önlemek için, havalandırma pozitif ekspirasyon sonu basınç (PEEP) gerektirir. Ayrıca, ventilatör ayarları (tepe inspiratuar basınURE) ~ 10 ml / kg'lık bir tidal hacmi sağlamak için ayarlanabilir olmalıdır. Ayrıca sol akciğer itti zaman (3.1.6.) Tidal hacim sol akciğer sadece bir kısmı havalandırılmış olduğundan azalma ihtimali olduğunu unutmayın. Ventilatör ayarları kan gazları dayalı ayarlanabilir olmalıdır.

sıvı dolu kateter ile hemodinamik ölçümler açısından bir diğer önemli not basınç sensörü ve kardiyovasküler sistem içine sıvı dolu kateter yerleştirme yeri arasında bir hidrostatik basınç farkı olmasıdır. Elastik yeleği (4.2) ve kateter yerleştirme noktasında basınç dönüştürücü basınç seviyesi arasındaki yükseklik farkı, ameliyat sırasında ve hayvan kurban tahmin edilir ve önce ve sonra işlem iki enterpolasyon ile için düzeltilmesi gerekmektedir veri.

Bu tekniği kullanarak ameliyat sırasında veya tekrarlanan sırasında ya bu kan kaybı olduğunda bir başka önemli nokta dikkateKan örnekleme domuz, nispeten büyük ve dolayısıyla büyük bir kan hacmi (65 ml / kg) sahip olmasına rağmen, en aza indirilmelidir. Ameliyat sırasında, kateter yerleştirilmesi sırasında kan kaybı sadece delik yara sıkıştırma uygulayarak minimize edilebilir. Hayvan deneyleri kurallarına göre, dolaşan kan hacminin% 10'a varan minimal yan etkileri ile normal, sağlıklı hayvanlardan tek vesileyle alınabilir, ancak kan 15 bu miktarı doldurmak için yaklaşık 14 gün bir hayvanı alacak. Bu kana önemli miktarda kaybolduğunda cerrahi Kurtarma uzun süreli olduğu anlamına gelir.

Egzersiz deneyler sırasında tekrarlanan kan örnekleme sırasında 1.0 bir hayvanın kan hacminin% veya en fazla 0.6 ml / kg, her 24 saat 15 çıkarılabilir. Bu aynı zamanda, yürüyüş değirmeni egzersizi sırasında örneklenir kan miktarı, iyi planlanmış olması gerektiği anlamına gelir ve bu, ini çıkarılmasından sonradeğişmez kan, satır temizlemek için geri kalan kan ile temas ucuna yakın kateter lümeni içinde mevcut olan TIAL pıhtıları geri hayvanlara verilmelidir.

Değişiklikler ve Sorun Giderme
Implante sıvı dolu kateterler nedeniyle kan pıhtısı oluşumu arızalı önlemek için günlük yıkanmalıdır. sıvı dolu kateterlere kan pıhtısı miktarına bağlı olarak, her bir hat içinde heparin miktarı 5000 lU / ml ila 1.000 IU / arasında değişebilir. heparin miktarı, anti-koagülan heparin varlığı nedeniyle insizyon yaraları kanamayı önlemek için ameliyattan sonraki ilk hafta içinde en az tutulmalıdır.

Ancak günlük temizlendi bile, bazı sıvı dolu kateterler tıkanmış alacak. Bu durumda, minimal ve / veya pulsatil emme uygulayarak daha küçük 2 ml şırınga ile kan çekilmesi deneyin. Kateter un olacak önce birkaç dakika sürebilirtıkanmış. Bu işe yaramazsa ne zaman, dikkatli bir şekilde kateterin içerisine tuzlu su küçük bir miktar yıkayın ve derhal kan çekilme deneyin. infüzyon kateteri sitesinde bağlı uzak organlarda, dolaşım ve emboli içine trombüs bir sürümde neden olabilir unutmayın. Dikkatli yıkama çalışmadığı zaman, hala bir hemodinamik sinyal olup olmadığını kontrol etmek için bir basınç transdüktörüne tıkanmış hattı bağlayın. hiçbir sinyal yoksa, sıvı dolu çizgi birkaç knot tarafından mühürlü ve kesilmiş olmalıdır.

Yorumlama ve Sınırlamalar
Yukarıda da belirtildiği gibi tüm hususlar dikkate alındığında, hemodinamik ölçümler ve kan örneklerinin kombinasyonu, tek başına koşu bandı hızı 7,12 den egzersiz yoğunluğu için daha iyi tedbirler tüm vücut ve miyokard oksijen tüketimi açısından egzersiz yanıt yorumlanması için izin verir -14.

Vücut, Exer artan metabolik ihtiyaçlarını karşılamak üzereEgzersiz lokal perfüzyonun kalp fonksiyonunda değişiklik gibi değişiklikler gerektirir. Doku perfüzyon küçük arter ve doku temin vasküler yatağın arteriollerin çapında değişiklikler tarafından düzenlenir. Nörohumoral sistemleri, endotel ve yerel metabolitleri türeyen sayısız vazoaktif faktörler, vasküler tonus belirlemek ve yeterli doku perfüzyonunun 1,5,12,16 sağlamak için etkileşim. sistemik ve pulmoner vasküler direnç veya tersi, damar iletkenlik değişiklikler, kan basıncı ve akış sinyalleri hesaplanır ve sistemik ve pulmoner vasküler yapılarda vazomotor sesi değişiklikler açısından yorumlanabilir. Sezgisel, vasküler rezistans genellikle damar tonusu değişiklikleri değerlendirmek için kullanılır. iletkenlik ve direnç matematiksel ilgili olmasına rağmen, ancak araştırma grubunda, biz iletkenliği basınç akış normalize olması ve akış bölünmesiyle direnç eşit basınç ile, iletkenlik kullanımını savunan. Her ne kadar iletkenlik ve resdamar tonusu 4 düzenlenmesi için çeşitli vazoaktif sistemlerin katkılarını araştırmak için, farmakolojik müdahalelerle egzersiz birleştirirken biri sadece tek bir uyarıcı etkisini (yani egzersiz) 7,17 inceler eğer istance değiştirilebilir, iki parametre yorumlanması farklı olabilir , 5,7,14,18.

Egzersiz sırasında, sistemik dolaşıma düşük akış ve yüksek akış ve düşük direnç, (yüksek iletkenlik) ile bir sistem içine yüksek direnç (yani, düşük iletkenlik) ile karakterize edilir istirahatte bir sistemden dönüşür. Bu nedenle, farmakolojik vazodilatasyon egzersiz karşı dinlenme sırasında iletkenlik ve direnç için farklı sonuçları vardır. iletkenlik artışı sadece küçük ise istirahatte farmakolojik vazodilatör tarafından üretilen direnç azalması büyüktür. Buna karşılık, egzersiz sırasında vazodilatasyon aynı derecede o iletkenlik büyük bir artış çevirir, amadirenç küçük bir azalma nLy. iletkenlik kullanıldığında Böylece, daha büyük bir vazodilatasyon direnç vazodilatasyon bakarken istirahatte büyük olması görünürken, egzersiz sırasında ortaya görünmektedir. direnç veya iletkenlik kullanırken verilerin yorumlanması dolayısıyla farklıdır. Direniş ve iletkenlik arasındaki seçim oldukça keyfi gibi görünse de, fizikte birincil değişikliğe uğrayarak değişken bir tepki 7,17,18 için endeksin pay olarak belirlenmiştir. aort kan basıncı kalp debisi artar ise oldukça sabit kalır egzersiz beri belirgin, en uygun parametre yerine direniş yerine, sistemik damar iletkenlik (kardiyak output / aort kan basıncı) olarak görünecektir egzersiz sistemik vasküler cevabı açıklamak için. Ayrıca, sistemik dolaşıma esas paralel olarak perfüze organlarda çeşitli vasküler yatak bir topluluğundan oluşmaktadır. paralel dirençler toplayın beri ileri geri hareket etmeparalel iletkenler doğrusal bir şekilde toplayın ise mekanik, optik, belirli bir bölgesel vasküler yatağın oluşan herhangi bir değişiklik, toplam sistemik vasküler iletkenlik özdeş (kesin) değişim çevirir. Bu husus egzersiz sistemik damar tepkileri tanımlamak için damar iletkenlik kullanımına daha fazla destek ve farmakolojik müdahaleleri verir.

Egzersiz pulmoner arter basıncı 7,17 yanı sıra kardiyak output artar üretilen çünkü akciğer yatakta egzersiz damar tepkileri tanımlamak için direnç veya iletkenlik biri için seçim, daha az belirgin olduğu görülmektedir. Örneğin, ET-reseptör blokajının 7 tarafından üretilen vazodilatasyon derecesi ile karşılaştırıldığında direnç ya da iletkenlik biri için bir seçim PVR ve PVC nispeten küçük bir egzersiz kaynaklı değişiklikleri göz önüne alındığında, aynı zamanda daha az kritiktir. Bunun bir sonucu olarak, direnç veya iletkenlik birinin kullanımı için o vasküler etkiler karakterize etmek içinPulmoner dolaşımda fa farmakolojik vazodilatör benzer sonuçlara verecektir.

Koroner dolaşımdaki, verilerin yorumlanması bile koroner direnç damar sesi değişiklikler değil sadece endojen vazoaktif maddeler sonuçların farmakolojik antagonistlerinin sistemik uygulama olarak daha karmaşık, ama çoğu zaman da sistemik hemodinamik değişkenler 7,14,17 yılında belirgin değişiklikler meydana, 19. Bunlar değişmiş hemodinamik kardiyak çalışmayı etkileyen ve böylece kalbin daha doğrusu koroner damar tonusu üzerinde müdahale direkt etkisi daha otoregülasyonun, metabolik gereksinimleri değişikliklerden kaynaklanan koroner kan akımında değişikliklere neden olur. Örneğin, endojen vazokonstriktör sisteminin blok sistemik vazodilasyonu bir sonucu olarak, ortalama aort basıncı azaltır ve mikrovasküler tonda otoregülatör ayarlamaları ortaya çıkarmaktadır. Ayrıca, baroreseptörrefleks aktivasyon kalp hızı a artırmak için hareketnd miyokard kontraktilite. kalp atış hızı ve / veya kan basıncında Bu değişiklikler daha sonra miyokardiyal oksijen kaynağı ve dolayısıyla koroner kan akışında bir düzeltme gerektiren, miyokardiyal metabolizmasında değişikliklere neden olur.

Bu yaklaşım, koroner direnç damar sesi düzenlenmesi değerlendirilmesini sağlar gibi dikkate miyokard oksijen tüketiminde böyle ilaca bağlı değişiklikler etkilerini almak, araştırmacılar, koroner venöz oksijen düzeyleri ve miyokard oksijen tüketimi (MVO 2) 4,5 arasındaki ilişkiyi incelemek bağımsız miyokard oksijen talebindeki değişikliklere. Damar genişletici İdaresi MVO 2 belirli bir düzeyde miyokard oksijen sunumunu artıracak. Oksijen sunumu bu artış oksijen tüketiminde bir değişiklik olmadan oluştuğunda, miyokard oksijen çıkarma dolayısıyla koroner venöz oksijen içeriği ve dolayısıyla MVO 2 arasındaki ilişkinin bir yukarı kayması artışlara yol azalacak 4,5 araştırmak için hem miyokard oksijen ihtiyacını yanı sıra miyokard oksijen kaynağı ölçmek için zorunludur.

Zarafeti ve kullanışlılığı rağmen, bazı araştırmacılar bu yaklaşımın 20 sınırlamaları işaret etmiştir. Böylece, koroner venöz PO 2 veya koroner venöz SO 2 karşı MVO 2 komplo bu değişkenler aslında MVO 2 hesaplamak için denklemin parçası olduğundan uygunsuz olduğu düşünülebilir. Sonuç olarak, MVO 2 koroner venöz PO 2 veya SO 2 bağımsız bir değişken değildir. Alternatif olarak, araştırmacılar miyokard işin başka bir dizini kullanarak düşünmelisiniz, kalp hızı ve sol ventrikül sistolik basıncın ürünü olan hız-basınç ürünü (CHP). Ancak, CHP ve MVO 2 neredeyse doğrusal ilişkili olarak, sdışses 2 için CHP'yi ubstituting hemen hemen aynı sonuçlar 14 verimleri ve MVO 2 ve koroner venöz oksijen düzeyleri arasındaki ilişki koroner vazomotor sesi değişiklikleri okuyan hassas bir şekilde kabul edilir.

Mevcut Yöntemlerine Göre Önemi
Yaygın damar tonusu düzenlenmesinde değişiklikleri değerlendirmek için kullanılan diğer bir yöntem, bir basınç veya tel myograph 6,14,21 İzole koroner ve pulmoner küçük arterlerin veya arteriolleri kullanılmasıdır. myograph çalışmaları avantajı kaplar çevreleyen doku bağımsız olan ve potansiyel olarak sirküle etkenlerden etkisi karıştırıcı olduğu incelenen edilebilmesidir. Bu in vitro teknikler, bu nedenle in vivo ölçümler tamamlayıcısıdır. Bununla birlikte, in vivo ve in vitro teknikleri bazen karşı sonuç verir. Örneğin, güçlü bir damar daraltan endotelin yanıt sağlam koroner circulatio indirgendi n miyokard enfarktüsü sonrasında, ancak sağlıklı kontrol domuz kıyasla miyokard enfarktüsü olan domuz izole koroner küçük arterlerde artar edildi. 21, in vivo ve in vitro arasında verilerde bu fark prostanoidlerin tarafından endotelin vazokonstriktör etkisi artan bir bastırma nedeniyle in vivo 21.

gelecek Uygulamaları
hem sağ hem sol ventrikül disfonksiyonu koroner mikrovasküler fonksiyonu değişiklikleri önerilen rolü göz önüne alındığında, kardiyovasküler hastalık ilgili modellerinde bu değişikliklerin değerlendirilmesi gereklidir. Kronik instrumented hayvanların kullanımı mikrovasküler (DYS) fonksiyonu ile hastalığın şiddeti korelasyonu sağlar. mikrovasküler disfonksiyon gibi egzersiz sırasında olduğu gibi, kardiyovasküler stres altında açığa çıkabilir Dahası, hem koroner ve pulmoner mikrovasküler fonksiyon, bazal istirahat koşullarında normal görünebilir.

t "> diyabet 6, miyokardiyal enfarktüs 22 pulmoner hipertansiyon 8,9 ve pacing kaynaklı kalp yetmezliği gibi kardiyopulmoner hastalığın farklı domuz modeller, 10 mevcuttur ve kronik enstrümantasyon ile birleştirilebilir. olası bir dezavantajı, ticari olarak elde domuz olduğu vb Yorkshire, ırkı, büyük beyaz olarak ırkları, yetişkinler için domuz çok büyük olan ve bu nedenle kullanımı zor olabilir, kullanılır. bu nedenle, çoğunlukla kullanılan jüvenil domuz. Bununla birlikte, genç domuzlara hızla büyümeye, konumlandırma ve akış prob fonksiyonu ve basınç kateterleri ve sıvı doldurulmuş kateter açıklık yaklaşık 10 hafta ve tek tek hayvanlar içindeki seri ölçüm süresini sınırlayarak, zarar görür olabilir. alternatif bir, yetişkin ağırlığı olan Yucatan veya Göttingen domuz, erişkin minyatür domuz kullanımı, 40 - 60 kg 23.

Kronik aletli anima sonucunda, kullanımls dolayısıyla istatistiksel gücünü artırmak ve çalışma için gerekli hayvan sayısını sınırlayarak ya hastalık veya tedavi değerlendirilmesi gelişimi sırasında kardiyopulmoner fonksiyonun seri değerlendirmesini sağlar.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.

Acknowledgments

Bu çalışma (DJ Duncker için) Hollanda Kalp Vakfı hibe 2000T038 (D. Merkus kadar) hibe 2000T042 tarafından desteklenen, Avrupa Komisyonu FP7-Sağlık-2010 hibe MEDYA-261409, Hollanda Kardiyovasküler Araştırma Girişimi (DJ Duncker D. Merkus için): Hollandalı Kalp Vakfı, Üniversitesi Tıp Merkezleri Hollanda Federasyonu, Sağlık Araştırma ve Geliştirme ve Kraliyet Bilimler Akademisi Hollanda Hollanda Örgütü   CVON- ARENA KVON 2011-11, (D. Merkus için) KVON-Phaedra CVON2012-08 ve KVON-RECONNECT KVON 2014-11 (DJ Duncker için), Sophia Vakfı (DJ Duncker D. Merkus için) (D. de için Wijs-Meijler, D. Merkus ve IKM Reiss).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
3-way stopcocks B. Braun 16496
Perfusor lines PVC (DEHP-free) 150 cm/2.6 ml  B. Braun 8722960 Used for fluid filled catheters
“python “ silicontubing Rubber BV 1757 ID 1 mm, OD 2 mm Used for fluid filled catheters
Sodium Chloride 0.9% Baxter TKF7124
Glucose 10% Baxter WE0163
Suction device
Slim-Line electrosurgical pencil with 2 buttons ERBE ELEKTROMEDIZIN GMBH 20190-066
Servo Ventilator SV900C  Siemens-Elema AB 
Laryngoscoop Vererinary Technics Int. 11.02.47
Sterile surgical gloves
tie-on surgical mask 3M 1818FS
surgical hat Klinidrape 621301
Procedure pack Molnlycke Health Care 97027809 Surgical drape, gauze pads, syringes, beaker etc
Droptears Alcon 288-28282-01
Betadine scrub 75 mg/ml Povidone-iodine Meda Pharma BV RVG08939
Betadine solution 100 mg/ml Povidone-iodine Meda Pharma BV RVG01331
Cuffed Endotracheal tube Emdamed size depends on animal size
Breathing filter Hyrdo therm 3HME Intersurgical 1560000
Laryngoscope Handle+ Miller blade size 4 Kawe Germany
Manual resuscitator- Combibag Weinmann 6515-12-313-5596
Perivascular flow probe 3PS Transonic For coronary artery; Size 2.5 - 4 mm depending on animal size
Confidence flow probe Transonic For aorta/pulmonary artery, 16 - 20 mm; size depends on animal size
Venflon-Venisystem 20 G x 32 mm BD 393224 For coronary venous catheter
Blunt Needle 18 G For coronary venous catheter
Tygon Tubing Rubber BV 2802 ID 0.8 mm (1/32’’), OD 2.4 mm (3/32’’) For coronary venous catheter
Suction Handle 17 cm 6 6/8 " Coupland 18/8 martinit with tube connector KLS Martin Group 18-575-24
Scalple blade 
Scalpel Handle 13.5 cm 5 3/8 " Stainless Steel solid KLS Martin Group 10-100-04
Vascular Forceps 20.2 cm 8 " De Bakey Stainless Stee KLS Martin Group 24-388-20 ± 14 cm
Dressing Forceps 17 cm 6 6/8 " Cushing Stainless Steel KLS Martin Group 12-189-17 ± 18 cm
halsted-musquito straight 12.5 cm - 5" Rudolf Medical RU-3100-13 ± 12 cm
halsted-musquito curved 12.5 cm - 5" Rudolf Medical RU-3101-12 ± 12 cm
Dissecting and Ligature Forceps 13 cm 5 1/8 " Gemini Stainless Steel KLS Martin Group 13-451-13 ± 12 cm
Dissecting and Ligature Forceps 18.5 cm 7 2/8 " Schnidt Stainless Steel KLS Martin Group 13-363-18
Rib Retractor Finochietto, Baby Aluminium - KLS Martin Group 24-162-01
suture forceps Mayo-Hegar 3 mm 18 cm - 7" Rudolf Medical RU-6050-18
Metchenbaum blunt curved 14.5 cm - 5(3/4)" Rudolf Medical RU-1311-14M
Retrector farabeuf 12 cm - 4 (3/4)" Rudolf Medical RU-4497-12
Towel forceps schrädel curved 9cm - 3,5" Rudolf Medical RU-3550-09
surgical scissors blunt 13 cm - 5" Rudolf Medical RU-1001-13
Gauzes Cutisoft 10 x 10 cm 4-ply BSN Medical 45846-00
Gauzes Cutisoft 5 x 5 cm 4-ply BSN Medical 45844-00
Flowmeter -CM2 / SF2 - 2gas (O2 and Air) UNO BV 180000008
Tec 7 Vaporizer Datex-Ohmeda
Acederm wound spay Ecuphar NV
Vaseline Album Bufa 165313
silkam 3-0 Natural silk, non-absorbable B. Braun F 1134043 sutures for placement of catheters
silkam 2-0 Natural silk, non-absorbable B. Braun F 1134051 sutures for muscular approximation
dagrofil 3-0 Polyester, non-absorbable B. Braun C 0842478 sutures for fluid fille catheters after tunneling
Vicryl rapide 3-0, 1 x 45 cm FS2, V2930G Daxtrio medische producten 15560 sutures for electrical catheters after tunneling
Vitafil 6 USP SMI 6080 Ties
Syringes 10 ml and 2.5 ml
Heparin LEO (heparin sodium)  LEO Pharma A/S
Zoletil Virbac tiletamine / zolazepam
Sedazine AST farma 108855 xylazine
Temgesic RB Pharmaceuticals 5429 buprenorphine
Tensogrip BSN Medical 71522-00 elastic vest

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Laughlin, M. H., et al. Peripheral circulation. Compr Physiol. 2, 321-447 (2012).
  2. Datta, D., Normandin, E., ZuWallack, R. Cardiopulmonary exercise testing in the assessment of exertional dyspnea. Ann Thorac Med. 10, 77-86 (2015).
  3. Vatner, S. F., Braunwald, E. Cardiovascular control mechanisms in the conscious state. N Engl J Med. 293, 970-976 (1975).
  4. Duncker, D. J., Bache, R. J. Regulation of coronary blood flow during exercise. Physiol Rev. 88, 1009-1086 (2008).
  5. Tune, J. D., Gorman, M. W., Feigl, E. O. Matching coronary blood flow to myocardial oxygen consumption. J Appl Physiol. 97 (1985), 404-415 (2004).
  6. van den Heuvel, M., et al. Coronary microvascular dysfunction in a porcine model of early atherosclerosis and diabetes. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 302, H85-H94 (2012).
  7. Zhou, Z., et al. Pulmonary vasoconstrictor influence of endothelin in exercising swine depends critically on phosphodiesterase 5 activity. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 306, L442-L452 (2014).
  8. Pereda, D., et al. Swine model of chronic postcapillary pulmonary hypertension with right ventricular remodeling: long-term characterization by cardiac catheterization, magnetic resonance, and pathology. J Cardiovasc Transl Res. 7, 494-506 (2014).
  9. Mercier, O., et al. Endothelin A receptor blockade improves regression of flow-induced pulmonary vasculopathy in piglets. J Thorac Cardiovasc Surg. 140, 677-683 (2010).
  10. Spinale, F. G., et al. Chronic supraventricular tachycardia causes ventricular dysfunction and subendocardial injury in swine. Am J Physiol. 259, H218-H229 (1990).
  11. Yarbrough, W. M., Spinale, F. G. Large animal models of congestive heart failure: a critical step in translating basic observations into clinical applications. J Nucl Cardiol. 10, 77-86 (2003).
  12. Duncker, D. J., Stubenitsky, R., Verdouw, P. D. Autonomic control of vasomotion in the porcine coronary circulation during treadmill exercise: evidence for feed-forward beta-adrenergic control. Circ Res. 82, 1312-1322 (1998).
  13. Stubenitsky, R., Verdouw, P. D., Duncker, D. J. Autonomic control of cardiovascular performance and whole body O2 delivery and utilization in swine during treadmill exercise. Cardiovasc Res. 39, 459-474 (1998).
  14. Zhou, Z., et al. Phosphodiesterase-5 activity exerts a coronary vasoconstrictor influence in awake swine that is mediated in part via an increase in endothelin production. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 306, H918-H927 (2014).
  15. Gross, D. R. Animal Models in Cardiovascular Research. , 3, Springer. (2009).
  16. Merkus, D., Duncker, D. J. Perspectives: Coronary microvascular dysfunction in post-infarct remodelled myocardium. Eur Heart J Suppl. 16, A74-A79 (2014).
  17. de Beer, V. J., de Graaff, H. J., Hoekstra, M., Duncker, D. J., Merkus, D. Integrated control of pulmonary vascular tone by endothelin and angiotensin II in exercising swine depends on gender. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 298, H1976-H1985 (2010).
  18. Lautt, W. W. Resistance or conductance for expression of arterial vascular tone. Microvasc Res. 37, 230-236 (1989).
  19. Merkus, D., et al. Phosphodiesterase 5 inhibition-induced coronary vasodilation is reduced after myocardial infarction. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 304, H1370-H1381 (2013).
  20. Heusch, G. The paradox of alpha-adrenergic coronary vasoconstriction revisited. J Mol Cell Card. 51, 16-23 (2011).
  21. Merkus, D., Houweling, B., van den Meiracker, A. H., Boomsma, F., Duncker, D. J. Contribution of endothelin to coronary vasomotor tone is abolished after myocardial infarction. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 288, H871-H880 (2005).
  22. Haitsma, D. B., et al. Minimal impairment of myocardial blood flow responses to exercise in the remodeled left ventricle early after myocardial infarction, despite significant hemodynamic and neurohumoral alterations. Cardiovasc Res. 52, 417-428 (2001).
  23. Bender, S. B., van Houwelingen, M. J., Merkus, D., Duncker, D. J., Laughlin, M. H. Quantitative analysis of exercise-induced enhancement of early- and late-systolic retrograde coronary blood flow. J Appl Physiol. 108 (3), 507-514 (2010).

Tags

Tıp Sayı 108 Kronik enstrümantasyon Kardiyak fonksiyon Koroner mikrosirkülasyon Pulmoner mikrosirkülasyon miyokard oksijen dengesi endotel fonksiyonu
Domuz uzun süreli Kardiyovasküler Egzersiz Testi için Kateter Cerrahi Yerleştirme
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

De Wijs-Meijler, D. P. M., Stam, K., More

De Wijs-Meijler, D. P. M., Stam, K., van Duin, R. W. B., Verzijl, A., Reiss, I. K., Duncker, D. J., Merkus, D. Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine. J. Vis. Exp. (108), e53772, doi:10.3791/53772 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter