Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

نموذج القوارض من Nonarteritic الإقفارية العصبي البصري الأمامي (rNAION)

Published: November 20, 2016 doi: 10.3791/54504

Introduction

الأمامي Nonarteritic الاعتلال العصبي البصري نقص تروية (NAION) هي آفة الدماغية المحورية في الجزء الأمامي من العصب البصري (ON) 1. NAION هو السبب الأكثر شيوعا لالمفاجئة البصرية العصبية ذات الصلة فقدان البصر عند الأشخاص فوق سن ال 50 (2). ويعتقد أن الآلية أن تكون متلازمة المقصورة التي تنتج في ذمة intraneural، ويسبب ضغط من الشعيرات الدموية توريد المحاور داخل العصب البصري 3.

منذ ON هو في الواقع الجهاز العصبي (CNS) الجهاز المركزي، وNAION القوارض (rNAION) نموذج يمكن استخدامها لدراسة آليات والردود على معزولة الجهاز العصبي المركزي السكتات الدماغية المادة البيضاء. وبالتالي قد يكون النموذج rNAION مفيدة في تشريح العديد من المشاكل المرتبطة الأضرار المتعلقة السكتة الدماغية إلى المادة البيضاء. ويمكن استخدامه لتقييم الاستراتيجيات وكلاء اعصاب مختلفة في السكتة الدماغية المادة البيضاء.

واحدة من السمات الأكثر جاذبية من هذا النموذج هو أنهغير مؤلم، الإجراء غير الجراحي. قوة الليزر يمكن تعديلها لتنتج درجة مختلفة من الأضرار الدماغية. ميزة أخرى هي أنه يعتمد على الليزر التي يسببها الفائق الراديكاليين إلى إتلاف البطانة الشعرية، مما ينتج عنه ضعف الشعيرات الدموية التدريجي. هذا هو الخلل والتقدمية وذمة التي يعتقد أن تكون متشابهة بشكل ملحوظ إلى الآلية التي تسبب NAION. وقد أظهرت الأبحاث أنه لا يسبب تخثر الشعرية المباشر، ولكنها تعمل من خلال اثنين على الأقل من الآليات: الفائق الناجم عن وفاة وتجريد بعض من شعري الخلايا البطانية وNFkB (العامل النووي كابا ضوء سلسلة محسن من خلايا B تفعيلها ) المرتبطة بتنظيم التهابات حتى في ما تبقى البطانة، مع زيادة نقل السوائل عبر أغشية الخلايا في الخلالي 5. إغلاق الشعيرات الدموية العصب البصري وضغط الناجم عن الخلالي نتيجة تراكم السوائل في العصب البصري نقص تروية رأس العصب. ويظهر صورة تخطيطية فيالرقم 2، ويمكن استخدام هذا النموذج rNAION في كل من الجرذان والفئران الأنواع 6،7، ويمكن أن تختلف في مستوى حدتها، من آفة خفيفة إلى التدمير الكامل، ولكن غير مؤلم من العصب البصري والشبكية، مثل كما انسداد الشريان الشبكي المركزي (CRAO).

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

وقد وافق هذا البروتوكول من قبل جامعة ميريلاند المؤسسي رعاية الحيوان واللجنة الاستخدام (IACUC، بالتيمور، MD، الولايات المتحدة الأمريكية)

1. التجريبية مجموعة المتابعة

  1. جعل العرف تصميم العدسات اللاصقة من الواضح الصف البصرية دائرية 7 ملم في القطر زجاجي، وسمك 3 مم. قطع عدسات دائرية مع الصحافة الحفر. استخدام مثقاب القياسية لجعل منحنى الداخلي، وأخيرا تلميع منحنيات الخارجي والداخلي باستخدام ملمع العدسات اللاصقة من حصى متناهية الصغر (1000/3000).
  2. إعداد 2.5 ملي روز البنغال (RB) في الرقم الهيدروجيني 7.4 الفوسفات المالحة العازلة (PBS) مقدما، تصفية تعقيم مع فلتر حقنة 0.45 ميكرون وتخزين 1 aliquots مل في -20 درجة مئوية في وعاء للضوء ضيق لمدة تصل إلى 6 أشهر.
    ملاحظة: استخدام الحيوانات الذكور الأباعد البيضاء، مثل سبراغ داولي يقلل من سلالة الخلافات استجابة التابعة، تمكن سهولة زيادة الحث ويقلل من التقلبات التي يمكن أن تحدث مع cycli شبقنانوغرام الإناث.
  3. إعداد تردد تضاعف النيوديميوم الإيتريوم العقيق الألومنيوم (FD-YAG) ليزر طب العيون، والذي يولد ضوء الليزر 532 نانومتر. جبل ليزر على هاج-شترايت المصباح الشقي العيون باستخدام معيار محول الليزر في طب العيون. هذا الجهاز متوفر تجاريا يمكن تصور في وقت واحد من العين والليزر تطبيق بقعة الحيوان. لديه الليزر الطبي أيضا شعاع تهدف للتركيز السليم وحدانية التركيز باستخدام نفس حجم البقعة كما الحث الليزر. المعلمات قوة الليزر هي كما يلي:
    1. لالفئران rNAION الاستقراء: استخدام 500 ميكرون بقعة حجم / 50 ميغاواط قوة الليزر / 1000 مدة ميللي ثانية / 1000 فاصل مللي ثانية.
    2. فأرة الحاسوب rNAION الاستقراء: تغيير حجم البقعة إلى 300 ميكرون لالقرص البصري أصغر وترك غيرها من المعالم نفس الإعداد الفئران.
    3. بشكل روتيني استخدام السلطة متر ليزر لضمان انتاج الطاقة الليزر.

2. إجراء التجريبية

  1. بدوره على قوة الليزروإعداد المعلمة الليزر المناسبة. تدفئة الليزر لمدة خمس دقائق على الأقل قبل الاستخدام.
  2. وزن الحيوان لتحديد الجرعة المناسبة لالكيتامين / زيلازين وصبغ RB. تخدير الحيوان عن طريق الحقن داخل الصفاق من 1 مل / كغم من خليط من 80 ملغ / مل الكيتامين و 4 ملغ / مل زيلازين.
  3. ترك الحيوان في قفص ساخنة حتى تخدير كامل. تحقق من وجود أي استجابة للمؤثرات مكره (الذيل أو قرصة اصبع القدم). تحقق الحيوانات لعمق التخدير كل 10 دقيقة.
  4. تمدد التلاميذ الحيوان مع 1٪ تروبيكاميد وتخدير سطح العين مع 0.5٪ بروباراكايين. في حالة استخدام الحيوانات الصباغية، مثل لونج ايفانز، فإن 2.5٪ قطرات العين neosynephrine زيادة تلميذ تمدد.
  5. استخدام مقص لقطع شعيرات على مقربة من كمامة على الجانب ليكون ذلك حافزا لتجنب عرقلة الرأي.
  6. وضعت قطرة من 1٪ ميثيل أو غيرها من انخفاض اقتران العيون إلى داخل العدسات اللاصقة حسب الطلب، ومن ثم تطبيق عدسة على رانه فأر العين.
  7. وضع الحيوان على منصة تعديلها لارتفاع المصباح الشقي. تعيين رأس الحيوان في زاوية 45 درجة بحيث العين عمودي على المصباح الشقي وشعاع الليزر.
  8. تصور العين من خلال المصباح الشقي العيون. تأكد من أن شعاع تهدف هو الحجم المناسب وكذلك ركزت وتركز مباشرة على العصب البصري تصور. تصوير قاع الشبكية باستخدام كاميرا رقمية مع ASA العالي (1200 - 2000) سرعة شنت على واحدة من القطع عين المصباح الشقي مع محول حسب الطلب.
    ملاحظة: القدرة على رؤية الأوعية المشيمية تكشف الشفافية في شبكية العين. هذا هو علامة هامة من أجل أن تكون قادرة على الكشف في وقت لاحق نقص التروية في شبكية العين، والتي يمكن أن يتغلب على تفسير في حال حدوثه. rNAION هو نقص التروية العصب البصري، مما يؤدي إلى فقدان RGC معزولة، بينما نتائج نقص تروية الشبكية في تلف شبكية العين التي تؤثر على كافة الخلايا في طبقات الشبكية الداخلية.
  9. اختياريا، المزيد من الصور على شبكية العين والعصب البصري باستخدام المجال البصري الطيفي تماسك التصوير المقطعي (SD-8 أكتوبر) لتقييم العين الناجم عن الامم المتحدة. مسح أون الوجه (الشكل 3B)، وكذلك 7 مسح مستعرضة من خلال شبكية العين (الشكل 3C). يستخدم SD-أكتوبر التصوير نفس العدسات اللاصقة المستخدمة لتحريض الليزر.
  10. حقن 1 مل / م ع كغم عن طريق الوريد من خلال الوريد الذيل، والانتظار لمدة 30 ثانية، ثم تفعيل قوة الليزر. هذا التأخير الوقت تمكن RB لتوزيع بالتساوي في جميع أنحاء الدورة الدموية. نحن نستخدم نبضة ليزر 50 ميغاواط في واحدة ثانية / نبض. يمكن طاقات أكبر (≥ 60 ميغاواط) تلف شبكية العين أو يسبب نقص التروية الأوعية الدموية في شبكية العين.
    تحذير: تأكد من كل شخص لديه زوج من النظارات تصفية سلامة الليزر الطول الموجي حجب المناسبة لمنع ضوء الليزر طائشة تدخل العين المحقق.
    ملاحظة: يجب أن أعطت إدارة الليزر بسرعة بعد حقن الرابع RB منذ يتم القضاء على الصبغة بسرعة من التداول. ويعد تحريض الليزر، وأكثر شدة نقص تروية العصب البصري. عموما، يتم إعطاء الحيوانات 7-12 البقول ثانية في تعاقب سريع. الاتصال من ضوء الليزر مع الصبغة تعميم يعطي السفن العصب البصري توهج الذهبي الجميل الذي يمكن أن ينظر إليه من خلال المصباح الشقي (الشكل 4B). هذا يثبت تم حقن الصبغة النظامية وتوزيعها في مجرى الدم. إذا كان توهج خافت هو، أو لا شيء على الإطلاق (الشكل 4A)، لم يكن حقن صبغة عن طريق الوريد. في هذه الحالة، لا تعطي الحقنة الثانية على الفور، لأن الحيوان سوف تحتاج لاستعادة لمدة يومين على الأقل قبل إعادة حقن.
  11. مباشرة بعد الاستقراء، وإزالة العدسات اللاصقة. تغطية كلا العينين مع المضادات الحيوية العيون الثلاثي (Neosporin / بوليميكسين / باسيتراسين) مرهم مع ديكساميثازون، ووضع الحيوان على وسادة الاحترار 37 درجة مئوية في قفص يضم واحد تحت المراقبة الدقيقة حتى الشفاء التام.
    1. تنظيف العدسات اللاصقة مع المقطر ثالعاطر وجففي بقطعة قماش التنظيف غير جلخ لاستخدامها في المستقبل.
    2. بعد يومين من تحريض تقييم وذمة العصب البصري من قبل كل من قاع التصوير الفوتوغرافي اللون وSD-أكتوبر تحليل 8.
      ملاحظة: المقارنة بين درجة وذمة العصب البصري يعطي تقديرا لخطورة نقص تروية العصب البصري. في يومين، وعدم وضوح هامش قرص العصب البصري، والأوردة الشبكية المتوسعة قليلا، مقارنة مع العين (الناجم عن الامم المتحدة) المقابل. أداء تخطيط كهربية الشبكية (أرج) وفلاش البصرية أثار المحتملة (VEP 11) في اثنين وأربعة أسابيع الرد على الاستقراء لتحليل الكهربية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

العدسات اللاصقة تمكين التصور الشبكية المركزي (الشكل 1). بقعة الليزر التنسيق تضيء القرص البصري في الجزء الخلفي من شبكية العين (الشكل 2). يظهر العادية شبكية العين الناجم عن الامم المتحدة وتصويرها بواسطة المصباح الشقي الحيوي المجهر (الشكل 3A) وSD-أكتوبر (الشكل 3B و 3C). خلال الاستقراء ليزر، وعندما لا صبغ موجودا في الدورة الدموية، ضوء الليزر لا يؤدي في وعاء ومضان القرص (الشكل 4A). RB الوريد وإضاءة ضوء الليزر على نتائج القرص البصري في مضان اللون الذهبي على العصب البصري (الشكل 4B). بعد يومين من تحريض rNAION، وتورم العصب البصري (الشكل 5A). جهه أون ومستعرضة SD-أكتوبر تكشف عن القرص تورم (الشكل 5B) والتوسع في العصب البصري (الشكل 5C).

ر "FO: المحافظة على together.within الصفحات =" 1 "> شكل 1
الشكل 1. تخطيطي لالجرذ مستوية مقعرة العدسات اللاصقة. ويتكون العرف العدسات اللاصقة من 3 زجاجي مم (تصميم أظهرت)، مع القطر الخارجي 7 ملم، القطر الداخلي 5 مم. تم تصميم هذه العدسة لتتناسب خلال قرنية العين الفئران، وتمكين التصور المباشر لشبكية العين. الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل 2
الرقم 2. تخطيطي rNAION النموذجي. المقطع العرضي الطولي من خلال الجزء الخلفي من العين. وتتركز بقعة الليزر على القرص البصري (الأسهم الخضراء). الخلية الخضراء ومحور عصبي تمثل الشبكية العصبية الخلايا العقدية. مباشرة بعد الوريد ADMI RBnistration، وRB يجري تداولها من خلال الأوعية الدموية في الجزء الخلفي من العين والعصب البصري. يتم استخدام شعاع الليزر لإلقاء الضوء على القرص ل7-12 ثانية اعتمادا على شدة الدماغية المرجوة. الليزر ينشط RB ضوئية لتوليد الفائق الراديكاليين، والذي يسبب إغلاق الشعرية في الأمامية في الرأس (نقص التروية محور عصبي، نرى على الجانب الأيسر من العصبية كما فقدان خطوط حمراء صغيرة) في حين أن يجنب السفن داخل الشبكية أكبر الخارجة من الرأس على في العين. نقص التروية التنسيق ينتج ضعف المحاور محلي (فصل الخط الأخضر). يرجى النقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (3)
الشكل 3. الأساس عادي الشبكية (RET) والعصب البصري (ON) تحليل باستخدام الألوان التصوير وSD-أكتوبر A. صورة لسبراغ داولي الفئران قاع الشبكية العادي عن طريق المصباح الشقي تصوير قاع العين. الأوعية الشبكية الخروج من القرص البصري لتزويد الطبقات الداخلية للشبكية العين. القرص له حدود واضحة والمحمر المحيطة هوى (دافق المشيمية). الأوعية الشبكية هي رقيقة وتوزع بالتساوي. على هامش قرص العصب البصري عادة ترسيم جيدا قبل rNAION الاستقراء. B. صورة لقاع العادي عن طريق أون وجه SD-أكتوبر التصوير. يتم إنشاء الفردية صور مقطعية للشبكية يظهر في لوحة C من داخل المربع الأخضر. ويظهر الاتجاه المسح الضوئي مع السهم الأخضر. القسم جيم احدة SD-أكتوبر عبر فحص شبكية العين العادية والقرص البصري تظهر طبقات الشبكية. في الشبكية طبقة الألياف العصبية (RNFL، السهم الأبيض الصغير) لديه نظرة رمادي، ولكن أخف من طبقة الأساسية الخارجي النووية (ONL، السهم الأبيض الصغير). وRNFL غير مستو على العصب البصري. ظل العصب البصري هو الضيق (تشير د من قبل اثنين من السهام). ON: العصب البصري. RNFL: العقدة الشبكية طبقة الألياف خلية / العصبية. ONL: طبقة النووية الخارجي. شريط مقياس: 200 ميكرون الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الشكل (4)
الشكل 4. rNAION التعريفي المظهر. أ 532 نانومتر / 500 ميكرون بقعة إضاءة ليزر للقرص العصب البصري والشبكية دون حقن RB النظامية. القرص العصب البصري والشبكية مظلمة. ب. 532 نانومتر ليزر إضاءة 30 ثانية بعد حقن RB النظامية. يظهر على توهج الذهبي داخل الأوعية الناشئة من القرص في موقع بقعة الليزر، مشيرا إلى RB النظامية في مجرى الدم تنيره ضوء الليزر الأخضر.ز "الهدف =" _ فارغة "> الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

الرقم 5
الرقم 5. الشبكية والبصرية تحليل العصب بعد 2 أيام معارض rNAION التعريفي. A. اللون قاع الصورة على تورم وشحوب القرص البصري، وفقدان تدفق المشيمية المحيطة بها. وعادة ما يتم توسيع الأوردة والمنحني، وأحيانا مع محاصر (تدفق توقف) الأوردة. يظهر B. أون وجه SD-أكتوبر الصورة بعد تحريض وذمة القرص وتمدد وريدي. يتم إنشاء المقطع العرضي الأفراد من داخل المربع الأخضر. ويظهر الاتجاه المسح الضوئي مع السهم الأخضر. ويبين القسم جيم الصليب على ذمة القرص، كما يتضح من زيادة سمك RNFL وانخفاض كثافة اللون الرمادي (الأبيض أكثر، بما يتفق مع المحتوى العالي من الماء). قطر على داخل شبكية العين (المشار إليها بين ازالسهام ACK يتم زيادة). الرجاء انقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

في حين أن هناك عددا من النماذج لتلف العصب البصري (البصري سحق العصبية 12، البصري transection العصب 13، وPION 14)، ونموذج rNAION هو إنساني، قابلة للتكيف مع كل من الجرذان والفئران. أنه أكثر شبها للحالة السريرية البشرية من NAION. وتشمل هذه الحالة الأمامي التدريجي ذمة العصب البصري، وهو متلازمة حجرة العصب البصري الأمامي، نقص التروية محور عصبي بؤري والأضرار محور عصبي عصبون الشبكية معزولة وفقدان أكثر من دوام لفترة طويلة. يقدم التقرير الحالي الخطوات المناسبة لrNAION التعريفي، ويناقش المشاكل المحتملة خلال الاستقراء، ووصف آخر في وقت مبكر تحريض التحليلات التي يمكن استخدامها لتقييم جودة الآفة التي يسببها قبل إدراج البيانات. الاستفادة من نموذج rNAION هي أنه مع الممارسة، مستويات ثابتة نسبيا من الضرر الذي يمكن أن يتحقق. عادة 10-11 النتائج التعرض ثانية في 40 - 65٪ خسارة RGC. نسبة النجاح يمكن أن تختلف من فرد إلى آخر، ديمعلقة على الخبرة والمهارة، ولكن محقق ذوي الخبرة يمكن أن يحقق ما يقرب من نسبة الحث 100٪.

بالإضافة إلى سهولة الاستقراء، وبالطبع شدة ووقت الآفة يمكن رصدها بسهولة. والجزء الأول مهم من مراقبة الجودة في نموذج rNAION، التي يمكن أن تضيف إلى نموذج المزايا، غير مطلع تحليل تحريض بعد. نقيم عادة الحيوانات بعد يومين من تحريض، عندما وذمة العصب البصري هي القصوى. يتميز rNAION وذمة العصب البصري الذي يحل على مدى خمسة أيام (تقريبا 5 مرات أسرع من تلك التي تحدث في البشر)، تليها شحوب العصب البصري والمعزولة فقدان الخلايا العقدية للشبكية. يمكن للمرء أن تحديد نقص التروية في شبكية العين (تمييزا لها عن نقص تروية العصب البصري) من خلال فقدان الشفافية الشبكية وتبييض للشبكية. ويؤكد نقص التروية في شبكية العين وظيفيا من فقدان إشارة الشبكية الداخلية مع تخطيط كهربية الشبكية (أرج). إذا كان هناك خسائر واسعة النطاق من الشفافية الشبكية والأبيضنينغ من شبكية العين، فإنه يشير إلى نقص التروية في شبكية العين منتشر، وهو ما يتسق مع المركزي انسداد الوريد الشبكي، وليس rNAION وحدها. إذا كانت نتائج التوجيهي في نقص تروية الشبكية الشديد في عدد الحيوانات (التي تتميز قطاعات أو الكلي تبييض الشبكية)، المعلمات الاستقراء يمكن أن تخفض من جانب واحد أو ثانيتين وقت التعرض. بهذه الطريقة يمكن للمرء أن تحسين كل من درجة تلف العصب البصري، والحصول على اتساق الاستقراء في الحيوانات. الحيوانات مع خسائر كبيرة في إشارة أرج ينبغي التخلص من الدراسة. ويمكن التأكد من فقدان معزولة من وظيفة العصب البصري التي كتبها flash البصرية قياس المحتملين أثار (VEP).

وهناك عدد من المتغيرات التي سيتم وضعها في الاعتبار عند استخدام نموذج rNAION. يمكن للحيوانات الفردية تختلف في شدة العامة للآفة، لذلك يحتاج لاستخدامها في المقايسات اعصاب أن الحيوانات متعددة، وينبغي إجراء تحليل القدرة على تحديد الحد الأدنى لعدد من الحيوانات اللازمة لتحقيق ستانتائج صحيحة tistically، لا سيما عندما ينظر إلى تأثير وقائي أكثر تواضعا أو توقع. لقد وجدنا أن 10-15 حيوانات مطلوبة لتحديد 25٪ RGC تأثير وقائي في الفئران، و15-20 الحيوانات عندما تستخدم الفئران. منذ صبغ RB المستخدمة في الاستقراء هو القضاء بسرعة، مرة واحدة يتم حقن الحيوان، وتقلب ويمكن أيضا أن يكون معتمدا على سرعة الوقت اللازم لأداء الاستقراء. الاختلافات الطفيفة على التركيز على القرص البصري، والاختلافات في زاوية إضاءة ليزر، واختلاف في سرعة الاستقراء يمكن أن تؤثر أيضا على النتيجة. وينبغي اختيار فرد واحد مخصص لأداء هذه التقنية في كل مختبر، للحد من زيادة التقلبات. ما يقرب من 10 - وقد يحتاج الأمر إلى القضاء بعد المبكر تقييم ما بعد تحريض بسبب شدة التحريض (المركزي أو فرع الوريد الشبكي انسداد) 15٪ من الحيوانات التي يسببها. لا يناقش هذا التقرير لا تعد ولا تحصى المتغيرات الجوهرية الأخرى التي قد تؤثر على النتائج، مثل من الفروق بين الجنسين،إيقاع الساعة البيولوجية، والعمر أو سلالة الخلافات. يجب أن يكون راضيا عن هذه الأسئلة من قبل المحقق الفردية. هناك إعدادات المعلمة المعدلة التي تم الإبلاغ عنها مؤخرا، مثل قوة الليزر 80 ميغاواط 15. هذه التعديلات تستخدم العدسات اللاصقة مختلفة أو الطول الموجي ليزر ولكن أسفرت عن نتائج مماثلة.

ومن المهم أن ندرك أنه على الرغم من التشابه بين rNAION لجوانب كثيرة من NAION السريري، rNAION هو نموذج، وليس النموذج هو نسخة مكررة مثالي من الأمراض التي تصيب البشر، لأن العوامل المسببة الفعلية في NAION غير معروفة، والأوعية الدموية والتهابات السيطرة الفسيولوجية للشبكية العين القوارض والعصب البصري تختلف في نواح كثيرة من الرئيسيات البشرية وغير البشرية. النتائج التي تم إنشاؤها بواسطة نموذج لا بد من تفسيرها في ضوء هذه الاختلافات. بغض النظر عن ذلك، فإن نموذج rNAION هو وسيلة قيمة للتشريح بسرعة العديد من الآليات الفيزيولوجية المرضية المحتملة مسؤولة عن فقدان والنهج البصريةلالعصبية في نظام الثدييات الحية.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

الكتاب ليس لديهم ما يكشف.

Acknowledgments

نشكر العديد من الطلاب والزملاء الذين عملوا على هذا النموذج لتحسين فعاليته، وفهم آلياته. شكر خاص من المقرر أن من الدكتور. ماري جونسون (جامعة ميريلاند بالتيمور)، Nitza غولدنبرغ كوهين (مستشفى شنايدرمان أطفال، بيتح تكفا، إسرائيل)، تشارلز تشانغ (كلية اينشتاين الطبية، برونكس، نيويورك)، وفاليري TOUITOU (الدينية Hopital Salpetrie، باريس، فرنسا). وقد تم تمويل هذه الدراسة في جزء من RO1 EY015304 إلى SLB.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
50 mW 532 nm laser Iridex Standard Ophthalmic Laser
0 - 100 mW 532 nm laser Laserglow technologies Substitute for iridex
Laser slit lamp adapter Iridex SMA coupled adapter for laser output
Coherent Fieldmate laser meter with thermopile sensor Coherent others also appropriate
Ophthalmic Examing Slit lamp biomicroscope Various Haag-Streit is the best; cheaper versions available on ebay
Rose Bengal Sigma 330000-1G Photoinducing agent
Fundus Contact lens or glass cover slip custom/Cantor and Nissel (UK) Custom designed planoconvex plastic lens for eye exam and induction
Tropicamide 1%
Tamiya polishing compound Tamiya, INC 87068 polishing contact lens
2.5% Hypromellose (Goniovisc)/1% Methycellulose HUB Pharmaceuticals contact lens coupling agent
2.5% Neosynephrine Ophthalmic drops Alcon labs pupil dilating agent
Tropicamide 1% Alcon labs pupil dilating agent
0.5% Proparacaine Alcon labs topical Anesthetic
30 G fused needle insulin syringe Various Various for intravenous injection of rose bengal
Ophthamic Antibiotic ointment with dexamethasone added (Triple antibiotic ointment) Various Various Apply after induciton to minimize corneal scarring
Heidelberg Corporation Spectral domain-Optical Coherence Tomograph Heidelberg Corporation For Optical coherence measurements baseline and post-induction; not essential for induction

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Banik, R. Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy: An Update on Demographics, Clinical Presentation, Pathophysiology, Animal Models, Prognosis, and Treatment. J. Clin. Experimental Ophthalmol. 10, 1-5 (2013).
  2. IONDT study group. Characteristics of patients with nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy eligible for the Ischemic Optic Neuropathy Decompression Trial. Arch Ophthalmol. 114, 1366-1374 (1996).
  3. Tesser, R. A., Niendorf, E. R., Levin, L. A. The morphology of an infarct in nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy. Ophthalmology. 110, 2031-2035 (2003).
  4. Bernstein, S. L., Johnson, M. A., Miller, N. R. Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) and its experimental models. Prog Retin Eye Res. 30, 167-187 (2011).
  5. Nicholson, J. D., et al. PGJ2 Provides Prolonged CNS Stroke Protection by Reducing White Matter Edema. PLoS One. 7 (12), (2012).
  6. Goldenberg-Cohen, N., et al. Oligodendrocyte Dysfunction Following Induction of Experimental Anterior Optic Nerve Ischemia. Invest Ophthalmol Vis Sci. 46, 2716-2725 (2005).
  7. Bernstein, S. L., Guo, Y., Kelman, S. E., Flower, R. W., Johnson, M. A. Functional and cellular responses in a novel rodent model of anterior ischemic optic neuropathy. Invest Ophthalmol Vis Sci. 44, 4153-4162 (2003).
  8. Berger, A., et al. Spectral-Domain Optical Coherence Tomography of the Rodent Eye: Highlighting Layers of the Outer Retina Using Signal Averaging and Comparison with Histology. PLoS One. 9 (5), (2014).
  9. Huang, T. L., et al. Protective effects of systemic treatment with methylprednisolone in a rodent model of non-arteritic anterior ischemic optic neuropathy (rNAION). Exp Eye Res. 131, 69-76 (2015).
  10. Mantopoulos, D., et al. An Experimental Model of Optic Nerve Head Injury. Invest Ophthalmol Vis Sci. 57, 6222 (2014).
  11. You, Y., et al. Visual Evoked Potential Recording in a Rat Model of Experimental Optic Nerve Demyelination. J. Vis. Exp. (101), e52934 (2015).
  12. Templeton, J. P., Geisert, E. E. A practical approach to optic nerve crush in the mouse. Mol Vis. 18, 2147-2152 (2012).
  13. Magharious, M. M., D'Onofrio, P. M., Koeberle, P. D. Optic Nerve Transection: A Model of Adult Neuron Apoptosis in the Central Nervous System. J Vis Exp. (51), e2241 (2011).
  14. Wang, Y., et al. A Novel Rodent Model of Posterior Ischemic Optic Neuropathy. JAMA Ophthalmol. 131 (2), 194-204 (2013).
  15. Huang, T. L., Chang, C. H., Chang, S. W., Lin, K. H., Tsai, R. K. Efficacy of Intravitreal Injections of Antivascular Endothelial Growth Factor Agents in a Rat Model of Anterior Ischemic Optic Neuropathy. IOVS. 56, 2290-2296 (2015).

Tags

الطب، العدد 117، العصب البصري، نقص التروية، المادة البيضاء، الجهاز العصبي المركزي، والسكتة الدماغية، nonarteritic الأمامي الاعتلال العصبي البصري نقص تروية، القوارض، والليزر
نموذج القوارض من Nonarteritic الإقفارية العصبي البصري الأمامي (rNAION)
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Guo, Y., Mehrabian, Z., Bernstein,More

Guo, Y., Mehrabian, Z., Bernstein, S. L. The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION). J. Vis. Exp. (117), e54504, doi:10.3791/54504 (2016).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter