Summary
여기 우리 레이저 도플러 관류 (LDPI) 이미징의 조합을 제시 하 고 소개 하는 척수에 대 한 표준화 된 절차 뿐만 아니라 국부 적으로 혈액 흐름과 산소 포화 (2등), 코드 레이저 도플러 관류 모니터링 (LDPM) 척추를 측정 하 쥐에 외상입니다.
Abstract
레이저 도플러 flowmetry (LDF)를 측정 하는 척수의 microcirculatory 변경 시키는 혈액 흐름 (BF) 측정에 대 한 비 침 투 적인 방법입니다. 이 문서에서는, 우리의 목표 척수 부상 후 BF의 변화를 분석 하 레이저 도플러 영상 및 모니터링을 사용 했다. 레이저 도플러 이미지 스캐너와 프로브/모니터 각 판독을 고용 되 고. LDPI 데이터 부상 사이트 관류에 대 한 개요를 준 하 고 다른 위치 사이에서 BF의 비교 분석에 대 한 접근 했다 BF의 로컬 배포를 제공 합니다. 강렬 하지 시간 동안 검색 영역 측정, 결합 된 프로브 전체 척수 관류와 산소 공급을 보여주는 척수의 BF 및 산소 포화를 동시에 측정 하 사용 되었다. 자체 LDF 신호 감도 운동, 및 생물 학적 0 상대 플럭스, 같은 몇 가지 제한이 있다. 그러나, 기술은 그것의 간단한 설치와 BF의 빠른 측정 실험과 임상 연구에 적용 되었습니다.
Introduction
척수의 조직 매우 vascularized 이며 매우 민감한 척수 상해 (SCI)에 의해 유도 된 저 산소 증. 우리의 이전 연구 보여주었다 척수의 혈 뇌 진 탕 부상1,2모터 기능의 적자에 관련이 있을 수 있습니다 후 크게 감소 했다. 최근 연구 결과 SCI에 따라 혈관의 무결성은 잘 상관 감각 모터 기능3의 개선 나타났습니다. 그것은 향상 된 vascularity 백색 질, 향상 된 기능4직접 이끌어 구출 수 있습니다 보고 되었습니다. 따라서, 포스트 상해 척수 관류의 유지 보수는 생존 능력 및 기능 유지에 대 한 기본 중요성의 것 처럼 보였다.
SCI 후 관류에 다양 한 치료의 효과 과학5,,67의 실험 모델에서 다양 한 기법을 사용 하 여 수많은 수사에 의해 검사 되어 있다. 레이저 도플러, 잘 설립 된 기술로, 의심할 여 지 없이 여러 인간과 동물 연구8,9,,1011에 관류 측정 하는 유용한 방법. 기술은 조명 빛에 붉은 혈액 세포를 이동 하 여 유도 된 도플러 이동12 측정 기반으로 합니다. 1980 년대 초반에 기술 상용화 이후 큰 진전이 했다 레이저 기술, 광섬유 및 관류 측정을 위한 신호 처리에서 레이저 도플러 기기13을 신뢰할 수 있는 기술에 LDF를 만든.
현재 연구에서 두 방법 모두 레이저 도플러 측정의 진 탕 쥐의 척수에 혈액의 흐름 (BF) 평가에 적용 했다. 기술과 그것의 간단한 설치의 비 침 투 적인 특성상 우리의 프로토콜은 척수의 BF 측정에 대 한 민감한, 신속 하 고 안정적인 방법을 제공 한다. 더 중요 한 것은,이 방법은 각 시간 지점에서 동물 희생 없이 BF 게시물 진 탕 SCI의 종 적 연구를 수 있습니다.
때문에 조직의 BF와 자극 동안 관류의 빠른 변화를 평가 하는 능력, 그것은 대뇌 BF14,15 를 평가 하 고 측정 하는 다른 조직 간16, 등이 프로토콜을 적용 하 17, 피부18,19, 그리고 창 자20. 중간 대뇌 동맥의 일시적인 폐색의 쥐 모델에서 레이저 도플러 신호는 ischemic penumbra14에서 예상 되는 수준으로 BF 속도의 적절 한 감소를 위해 사용 되었다. 중요 한 사지 허 혈 (CLI) 유도 받은 쥐에서 레이저 도플러 검사 및 CLI 절차 후 전과 치료21후 다른 기간 동안 뒷 다리 BF 관찰에 적용 되었습니다. 또한, 생체 이용률 및 일부 약물의 대사 정리 LDF16에 의해 발견 되었다 간 BF에 달려 있었다. 따라서, LDF 실험 모델 pharmacodynamic, 및 pharmacokinetic 평가에서 널리 이용 될 수 있었다.
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Protocol
실험 동물 관련 된 동물 프로토콜 여는 국립 보건원 (NIH)을 설립 하는 지침을 따 랐 고 동물 관리 및 사용 위원회의 주요한 의학 대학에 의해 승인 했다.
문화를 도입 하 고 측정 하는 레이저 도플러 장비 아래에 설명 된 사용 하 여 척수의 BF의 절차는 게시 된 연구1에서 사용 되었다.
1입니다. 수술을 위한 준비
- 염 분에 pentobarbital 나트륨 솔루션 3% (w/v)을 준비 하 고 35 mg/kg의 복용량에서 관리.
주의: pentobarbital 나트륨은 제어 물질 이다. 자세한 레코드를 보관 해야 하 고 안전 하 고 잠긴 위치에 저장 된 솔루션. - 장비를 소독 하 고 수술 영역을 준비 합니다.
- 다음 단계와 수술 장비를 청소: 75% 에탄올 청소, 다음 30 분 동안 121 ° C에 고압 다음 건조는 60 ° C 오븐에 하룻밤. 수술 지역 75% 알코올로 소독.
2입니다. 수술에 대 한 쥐의 준비
- Pentobarbital 나트륨 (35 mg/kg)의 복 주사와 쥐 anesthetize 전체 절차는 수술, 봉합, BF 측정 등 30-40 분 소요 됩니다.
- 목에 허리에서 쥐의 등 영역을 면도. 머리는 가능한 한 짧게 잘라 되어야 합니다. 일정 한 체온을 유지 하기 위해 패드를가 열 하는 40 ° C에 쥐를 놓습니다.
3. laminectomy 및 척수에 뇌 진 탕
참고: 가짜 그룹에 대해서만 laminectomy를 수행 하려면 다음과 같이 3.1에서 3.6.
- 최대 동물 등 쪽 위치. 면도 부분 75% 알코올 멸 균 면봉을 사용 하 여 다음 요오드 소독. 흉부 척추 T7 T11 포함 laminectomy 사이트를 통해 메스로 피부 절 개 (4 cm)를 확인 합니다.
- 잘라 연결 된 근육 양쪽에 T8에서 노출 하기, spinous 프로세스, 패싯 관절 T10.
- 메스를 사용 하 여 T10, T11 사이 접합 분리 절 개를 만들기 위해. 더 신중 하 게 해 부 근육 층 떨어져 뼈를 노출 하 여 접합 하 여 노출 합니다.
- 가 위를 사용 하 여 더 작은 자르는와 작은 꽃 자루는 lamina에서 안팎 근육을 취소. T10에서 척추와 T11 사이의 작은 공간 열립니다 (그림 1A). 천천히 그리고 민감하게이 간격으로 한 hemostatic 집게를 삽입 하 고 작은 꽃 자루 (그림 1B) 휴식. 집게의 곡률 코드에서 옆으로, 위치는 항상 다는 것을 확인 하십시오. 다른 측면에서 반복 합니다.
- 척수 (그림 1C) 고 신중 하 게 해제 하 고는 lamina를 끊다. 반드시 하지 어떤 무료 또는 가변 뼈 파편을 남겨두고.
- T9와 T8 하기를 더 제거 하는 과정을 반복 합니다.
- 충돌 장비 테이블에 동물을 이동 하 고 테이블에 연결 된 Adson 집게의 쌍을 사용 하 여 t 7과 T11, spinous 프로세스에 클램핑 함으로써 동물의 척추를 안정 다음 척추 (그림 1D)을 집게를 조정.
- 충돌에서 동물, 파업 막대 노출된 척수의 중심을 목표로 넣고 낮은 척수의 표면의 3-5 mm 이내에 막대.
- 충격 힘 같은 충격 매개 변수 설정 (160 KD) 및 유지 시간 (1 s)
- 소프트웨어 인터페이스에서 "실험 시작" 버튼을 클릭 하 여 SCI는 유도 다음 영향을 자동으로 시작 하는 다음 인터페이스에 "예"를 클릭 합니다. 충격, 후 소프트웨어 설정된 매개 변수 옆에 있는 영향의 실제 데이터를 표시, 그것은 설정 포인트 (그림 1E) 가까운 되도록 데이터 확인.
참고: 실험의 성공에 대 한 일반적인 표시는 충격 후 무의식적인 꼬리 스윙과 사지 운동의 짧은 기간 이었다. 사지 반사를 확인 하는 꼬리에 자극 또한 할 수 있었다. 그러나, 바소, 비 티, 그리고 Bresnahan (BBB) 운동 규모22,23 등 운동 평가 유도 상해의 효과 결정할 필요가 있다.
- 소프트웨어 인터페이스에서 "실험 시작" 버튼을 클릭 하 여 SCI는 유도 다음 영향을 자동으로 시작 하는 다음 인터페이스에 "예"를 클릭 합니다. 충격, 후 소프트웨어 설정된 매개 변수 옆에 있는 영향의 실제 데이터를 표시, 그것은 설정 포인트 (그림 1E) 가까운 되도록 데이터 확인.
4. 레이저 도플러 검사
- 이 연구에 사용 되는 레이저 도플러 스캐너의 세부 사항에 대 한 테이블의 자료 를 참조 하십시오. 노출 된 척수를 검색 하려면 검정, 비 반사 배경에 쥐 등 쪽을 놓습니다.
- 매개 변수를 검색 설정: 스캐닝 소프트웨어를 열고, "측정"를 측정 그래픽 사용자 인터페이스를 입력 하 여 스캐너 설정 인터페이스를 열 "스캐너 설정" 버튼을 클릭 클릭. 작은 지역 등이 실험을 검색 하려면 "고해상도"는 "스캔 크기 및 표시 옵션에서" 고급 검색 모드에 대 한 더 높은 해상도 (256 × 256 포인트 4 × 10 c m2를 덮고)를 선택 합니다 (그림 2A). 스캐닝 경계 (그림 2B)를 확인 하려면 "이미지 검색" 옵션을 클릭 하십시오.
- "비디오 및 거리" 옵션 라이브 비디오 이미지를 확인을 클릭 합니다. 스캐너 위치 수술 창 고 이동 센터 검색 창 (그림 2C)에 노출 된 척수 동물 배경 위에 10-13 cm.
- "먼 자동" 기능을 사용 하 여 잘 스캔 높이 조정, 스캔의 높이 모든 측정 실험 그림 2C에 걸쳐 일관성이 유지 되어야 한다.
- 한 창 nonreflective 커버를 사용 하 여 추가 백그라운드를 최소화 하 고 동물의 방향 표시에 외과 영역을 노출.
- "반복 스캔"을 클릭, 검사 (우리가 사용 8 반복 검사 경우에) 수를 설정 다음 반복 스캔 인터페이스를 열고 "확인"을 클릭 합니다. 검색을 시작 하려면 시작 버튼을 클릭 하 고 전체 과정 (그림 2D) 약 3-4 분 소요 됩니다.
5. 레이저 도플러 모니터링
- 우리는 시간이 지남에 BF 등 등등2 VP3 무딘 바늘 끝 배달 프로브 스캐너 모니터를 사용합니다. 모니터링 장비를 설정 하려면 stereotaxic 악기에 수직 레이저 도플러 프로브를 연결 합니다.
- 올려 쥐 stereotaxic 기구 등 쪽 측에, 스티로폼 노출된 척수를 필요한 경우의 작은 조각으로 동물 아래에 배치 합니다.
- 모니터 BF 척수에 프로브를 낮춥니다.
참고: 단계 5.3는 데이터 수치는 조사에 적용 하는 압력에 민감한 측정의 재현성에 대 한 중요 한, 따라서 여분의 주의 필요를 하지 오버-또는 아래-위치 조사 합니다.- 절 개를 검토 하 고 과도 한 액체 또는 혈액 메 마른 목화 패드를 사용 하 여 제거.
- 2 mm rostral 노출된 척수의 중심점에 프로브를 사용 하는 기구의 X 및 Y 축 또는 병 변 고 중앙 정 맥을 방지.
- Z 축을 사용 하 여 천천히 낮은 수준 그냥 감동 척수의 표면에 조사. 프로브는 너무 느슨한 하지에 접점의 측면에서 밝은 빛을 허용 하지만 척수의 표면을 터치 그냥 한다.
-
데이터 기록
- 데이터 수집 소프트웨어를 열고, 설치 인터페이스를 열고 "새로운 실험" 버튼을 클릭 합니다. "일반" 옵션에서 시스템 구성에 대 한 확인을 클릭 합니다 "" (그림 3A), 디스플레이 설정에서 BF에 대 한 채널을 선택 등2 와 클릭 "다음" (그림 3B).
- 파일 정보를 입력 하 고 클릭 합니다 "" (그림 3C) 입력 데이터 기록 인터페이스를 조사 (그림 3D)에서 녹화를 시작 하려면 녹색 삼각형 버튼을 클릭 합니다.
- 일단 신호 8 연속 분 안정, 레코드 데이터입니다. 다음 프로브를 들어올리고 절 개를 봉합 하 고 수술 치료로 동물을 넣어 stereotaxic 기구에서 동물을 제거 합니다.
6. 봉합 및 사후 운영 관리
- 절 개를 봉합: 절 개의 양쪽에 근육 봉합 바늘을 삽입. 조직을 함께 당기고, 그로 인하여 제거 하기의 사이트에 노출 된 척수를 덮고, 스레드를 당겨. 바늘 홀더를 사용 하 여 당겨 양식을 통해 전체 스레드 3 스퀘어 매듭 하 고 가능한 노트 주변으로 스레드를 트림.
- 절 개, 봉합으로 같은 방법으로 3-4 광장 매듭을 가진 피부를 봉합 한 다음 노트에서 스레드 약 1 cm 트림.
- 수술 사이트와 케이지 바닥 사이의 접촉을 피하고 그것의 감 금에 그것의 사이드에 쥐를 놓습니다. 감 금 소는 난방 패드에 배치 되어야 합니다.
- 때까지 아무 수술 후 출혈을 보장 하기 위해 마 취에서 깨어나서는 봉합 폐쇄 남아 있는 동물을 모니터링 합니다.
- 수술, 120 mg/kg 1 한 일 동안 벤 질 페니실린 나트륨 쥐에 피하 주사. Intraperitoneally에 1 일에 대 한 수술과 모든 6 시간 후 수술 후 즉시 Buprenorphine (0.05 mg/kg) 주사.
- 동물 충분 한 음식과 물에 대 한 액세스 권한이 있는지 확인 하려면, 확장된 spouts와 물 병에 맞게 하 고 감 금 소에는 동물에 가까운 음식을 넣어.
참고: 우리 실시 BBB 등급 규모 0, 위의 bbb 등급 점수와 함께 동물을 제외 하 동물 24 h 후 부상의 hindlimb 운동 기능 평가에 따라서 보장 동물 유도 부상으로 마비 되었다. - 수술 후 필요한 경우 부드럽게 복 부에 압력을 적용 매일 두 번, 오 줌 방광의 수동 빈 제공.
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Representative Results
LDPI 척수, 척수의 rostral 꼬리 축 선형 프로필 (그림 4)를 추출 하 여 계량 했다 BF 측정 하 사용 되었다. 그림 5A 와 그림 5B 가짜 그룹 문화 그룹의 척수의 유출 이미지를 각각 나타냅니다. 그림 5C 및 그림 5D 가짜 그룹 문화 그룹의 척수의 rostral 꼬리 축 변경 BF를 각각 나타냅니다. 그림 5A 와 그림 5B 의 비교 시연 SCI BF의 감소를 유발 진원지의 BF rostral 코드와 꼬리 코드 보다 낮은 했다.
LDPM 시간-도메인 LD 신호 그리고 그래서2 와 그림 6 그림 획득 및 LDPM 데이터의 처리. 데이터가 기록 된 후 지속적인 관심 영역 (ROI) 데이터의 8 분 스트레칭, 선정 되었다는 다음 내장 필터에 의해 필터링은 어떤 생물학적 인 신호를 최소화 하기 위해. 그 후, ROI를 통계적으로 분석 하 고 결과 원시 데이터 형식에 수출 되었다. 그림 7 BF의 주기적 변화를 기록 및 가짜 그룹 및 과학 그룹에서 시간이 지남에 등2 . 그림 7A같이 크게 감소 하는 문화 그룹의 척수 BF 가짜 그룹과 비교. 동시에, 척수의 등2 했다 현저 하 게 낮은 척수 뇌 진 탕 (그림 7B), 부상 후 BF의 변화와 일치 했다. 장애를 줄이기 위해, 측정 찍은 반복적으로 하 고 데이터 표준화 했다.
그림 1입니다. Laminectomy 및 척추 뇌 진 탕. (A) T10, T11 사이의 교차점을 분리 합니다. (B)는 작은 꽃 자루를 집게를 삽입 합니다. (C)는 lamina를 휴식 하 고 척수를 노출. (해부학의 도식 스케치) (D) 실험 테이블에 척추를 안정화 합니다. (E) 초기 영향 소프트웨어 확인 데이터를 사용 하 여. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 2입니다. 레이저 도플러 검사에 대 한 단계적으로 설치. (A) 일반 설정 검색에 대 한. (B) 설치 이미지 스캔 매개 변수에 대 한 인터페이스. (C) 설치 비디오 및 거리에 대 한 인터페이스. (D) 설치 반복 스캔에 대 한 인터페이스. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 3입니다. 레이저 도플러 모니터링에 대 한 단계적으로 설치. (A) 새로운 실험을 시작 합니다. (B) 채널 표시를 선택 합니다. (C) 주제 세부 정보를 입력 합니다. (D) 데이터 녹음을 시작 합니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 4입니다. 레이저 도플러 관류 영상의 과정. (A) 연속 8 파생 가짜 그룹에서 쥐를 스캔 하 여 검색 합니다. (B) 연속 검사의 평균 이미지. (C, D) 지역 관심 (ROI)의 척추의 중앙 축 강도 프로필을 추출 하는 적외선 이미지에 따라을 선정 되었다. 삽입 된 상자는 투자 수익의 프로 파일링 결과 보여줍니다. 색상 막대 표시 관류 단위 측정 레이저 도플러 스캐너 블루 낮은 값을 나타냅니다과 레드는 가장 높은 값을 나타냅니다. 악기의 관류, 즉 "유출" 상대 가치를 발견 했습니다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 5입니다. 척수의 BF 레이저 도플러 관류 이미지를 사용 하 여 발견 되었다. (A, B) 5mm ROI 꼬리 코드는 rostral에서 척추의 축 플럭스 지도에 그려 했다. (C, D) 척수 축을 중심으로 라인을 따라 각 ROI의 강도 프로필 정량화에 대 한 추출 했다.
그림 6입니다. 레이저 도플러 관류 모니터링 과정. (A) 시간 마커 시작점을 표시 하는 원시 데이터의 기록. (B)는 8 분 투자 수익의 선택. (C) 선택 된 데이터 했다 다음 내장 필터에 의해 필터링 됩니다. (D) ROI의 통계 분석. (E) 원시 데이터의 수출. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
그림 7입니다. 척수 관류 레이저 도플러 관류 모니터링 하 여 평가 되었다. (A) A 15의 가짜 그룹 및 과학 그룹에서 원시 혈액 흐름 출력의 예제. (B) A 15의 가짜 그룹 및 과학 그룹에서 원시 산소 포화 출력의 예제. 레이저 도플러 프로브 중앙 정 맥의 오른쪽에는 척수의 표면 바로 위에 수준에서 2 mm rostrally 중간 지점에 위치 했다. 이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.
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Discussion
이 프로토콜을 수행할 때 몇 가지 세부 정보를 발견 한다. 첫째, 신속 하 고 우아하게 동물 소개 스트레스를 최소화 하기 위해 가능한 마 취와 수술의 과정 수행 되어야 합니다. 결과에 방해를 줄이기 위해, 동물 상대적으로 평화적이 고 안정적인 상태로 유지. 둘째, 혈액 잠재적으로 읽기를 방해할 수 있기 때문에, 레이저 도플러 장비를 사용 하 여 측정 하는 동안 출혈을 더 많은 주의 지불 합니다. 마지막으로, 데이터 기록 하는 동안 동물 온도 차이 의해 발생 하는 일관 되지 않은 결과 방지 하는 온도 제어 환경에서 유지 되어야 한다.
연구자는 레이저 도플러 검사를 사용할 때 고려해 야 하는 몇 가지 중요 한 요인이 있다. 프로토콜에서 설명 했 듯이, 스캔 거리 비교 결과 대 한 실험에 걸쳐 일관성이 유지 되어야 한다. 작은 영역에 대 한 고해상도를 여러 검사와 BF의 신뢰할 수 있는 데이터를 생성 하는 것이 좋습니다. 또한, 멸 균 거 즈만 추가 배경 최소화를 노출 하는 작은 창으로 외과 영역을 취재 하는 동물의 표시 방향으로 퍼 팅 하는 것이 좋습니다.
프로브 위치 적응 및 모니터링 프로토콜 구현에 중요 한 고려 사항입니다. 프로브 측정된 표면에 수직이 고 과도 한 압력은 피해 야 한다. 이 목표를 달성 하기 쥐 척추 정리 하 고 필요한 경우 스티로폼으로 동물을 underlaying 의해 파괴 장치를 사용 하 여 프로브를 위치 해야 고 있는지 측정 좌표 대략 동일한 지역에서 가져옵니다.
우리의 이전 기사1에서 설명 했 듯이, 절대적인 흐름 및 운동 유물24감도 교정의 장애 등이 기술, 몇 가지 제한이 있습니다. 또 다른 잘 주의 한계는 생물학 제로 신호-즉, BF25,26없이 신호의 존재. 결과에 이러한 제한의 영향을 최소화 하려면 측정가지고 야 한다 반복 하 고 정규화 소요를 감소 시키는 것이 좋습니다.
방사성 스피어 기술과 도플러 초음파 기술 등 다른 기술은 BF 측정을 위해 개발 되었습니다. 그러나, 이전은 하지 실시간으로 때문에 혈액에 방사성 물질을 주입 해야 합니다 고 조직 측정27excised. 대비의 기술에 관해서는 초음파 이미징, 비-침략 적 LDF 처럼, 대비 에이전트 (microbubbles)를 정 맥 주입 해야 합니다 고 jugular 또는 대 퇴의 도관 법은 일관 된 microbubble 주입에 필요한 향상 된 28. 이러한 기술에 비해, LDF는 조직의 microcirculatory 플럭스를 비 접촉 측정.
시간 및 주파수의 다양 한 기능 LDF 신호에 의하여 이루어져 있다. 이러한 기능을 잡으려고, 웨이 블 릿 분석, 푸리에 분석의 방법은 주기적 주파수 변동29,30을 적용 되었을. 이러한 진동 심장 비트, 호흡의 영향, 혈관 평활 근의 본질적인 조직적 활동, 혈관 벽, 및 내 피 관련된 대사 활동31,32neurogenic 활동을 각 성. 임상 응용 및 기초 연구, LDF 얻을 수 없습니다만, BF의 신호 하지만 또한 microvascular BF의 평가 microvascular 손상 하 고, 더 일반적으로,의 병 인을 조사 하는 플랫폼을 제공할 수 있습니다. microvascular 질병입니다.
현재 연구에서 두 방법 모두 LDF의 척수에 BF를 평가에 적용 했다. LDPI의 데이터 제공 주변 관류에 대 한 개요를 준 하 고 다른 위치에 BF의 비교 분석을 수행 하기 위해 가능 하 게 했다 BF의 지리적 분포. 강렬 하지 시간이 지남에 검색 영역 측정, LD 모니터링에서 파생 된 데이터 제공 지역 혈액의 흐름, 스펙트럼 등 심층 분석 및 지역에서 BF의 깊은 이해를 얻기 위해 웨이 블 릿 분석의 자세한 설명 유망한 미래 연구 주제입니다.
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Disclosures
저자는 공개 없다.
Acknowledgments
저자 아무 승인 있다.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Laser Doppler Line Scanner | Moor Instruments | moorLDLS2 | |
| Laser Doppler Monitor | Moor Instruments | moorVMS-LDF | |
| Probe for Monitor | Moor Instruments | VP3 | Blunt needle end delivery probe |
| Impactor | Precision Systems and Instrumentation | IH-0400 | |
| Phenobarbital sodium | Sigma-Aldrich | P3761 | |
| Buprenorphine | Sigma-Aldrich | B-908 | |
| Syringe | Becton Dickinson Medica (s) Pte.Ltd | 300841 | |
| Surgical suture needles with thread | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co., Ltd | 18T0329 (batch number) /4-0 | |
| Scalpel | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J11030 4# | |
| Scalpel blade | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J12130 20# | |
| Ophthalmic forceps | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | JD1040 | |
| Hemostatic forceps | Operation instrument factory of Shanghai Medical Instrument Co., Ltd. | J31050 | |
| Benzyl penicillin sodium | North China Pharmaceutical Co., Ltd | F6072116 (batch number) | |
| 75% alcohol | Dezhou Anjie Gaoke disinfection products Co., Ltd | 150421R (batch number) | |
| Iodine | Shandong Lierkang Medical Technology Co., Ltd | 20170102 (batch number) | |
| Rat | Laboratory Animal Center, The Academy of Millitery Medical Sciences | Sprague-Dawly (rat strain) |
References
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