Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
Click here for the English version

Medicine

Perinatal kuzu modeli oksijensiz: Yenidoğan Resusitasyon için bir Model

Published: August 15, 2018 doi: 10.3791/57553
* These authors contributed equally

Summary

Fetal kuzu invaziv araçları yakından yeni doğmuş bebek taklit eden bir modeldir transitioning dolaşım doğru fizyolojik ölçümler sağlar.

Abstract

Doğum boğulma her yıl yaklaşık bir milyon ölüm için dünya çapında hesapları ve erken neonatal morbidite ve mortalite birincil nedenlerinden biridir. Öngörülemeyen ihtiyacınız için kapsamlı resüsitasyon randomize klinik çalışmalar sayesinde seyrek ve sık sık yürütülmesi konusunda zorluklar verilen mevcut neonatal resüsitasyon kurallar birçok açıdan tartışmalı kalır. Gerçekten fizyolojik değişiklikleri yansıtacak şekilde başarısız manken modelleri veya bu onların akciğer sıvı temizlendiğini ve bu fetal geçiş için yenidoğan dolaşımını tamamlamış piglet modellerin çoğu çalışmalar neonatal resüsitasyon kaynaklanıyor. Mevcut iletişim kuralı perinatal mahallelerini fetal kuzu modeli oluşturma konusunda ayrıntılı adım adım açıklamasını sağlar. Önerilen model transitioning dolaşım ve hangi insan yenidoğan dır takip taklit eder ve, bu nedenle, yeni doğan Fizyoloji eğitim için mükemmel bir hayvan model sıvı dolu akciğerler vardır. Kuzu deneyler için önemli bir sınırlama daha yüksek ilişkili maliyetidir.

Introduction

Perinatal asfiksili yaklaşık 1.000 terim doğumda 4 Amerika Birleşik Devletleri'nde ortaya çıkar ve 4 milyon yenidoğan ölüm dünya çapında1,2yaklaşık % 25 sorumludur. Fetus'ın doğal gelişim çeşitli uyarlamalar Doğum sırasında ve Doğum akciğerlerde gaz değişimi organı olarak plasenta rol alırken extrauterine ortamına içi-kesintisiz geçiş için izin vermek için yer almalıdır. Herhangi bir hata yeterince geçiş doğumda daha fazla Yenidoğan Reanimasyon çabaları ödün vermez. Fetal akciğer izni eksik veya gecikmiş3,4ve bir kalıcı yüksek pulmoner vasküler direnç (PVR)5 etki en kalır havalandırma etkinliği neden koşullar olduğunda örnekleri resüsitasyon mahallelerini yeni doğan6önemli müdahale. Buna ek olarak, hemen göbek kordonu ve düşük direnç plasenta kaldırılması sıkma miyokard disfonksiyonu7,8neden olabilir kardiyak çıkış ani değişikliklere yol açabilir.

Agresif resüsitasyon (gerek göğüs sıkıştırma ve/veya yönetim epinefrin)1,9seyrek gereksinimini nedeniyle büyük randomize klinik çalışmalar mevcut desteklemek için güçlü kanıt eksikliği var Neonatal resüsitasyon programı (Konumundan) yönergeleri. Neonatal resüsitasyon birçok translasyonel araştırma çalışmaları yeterli geçiş tasvir başarısız postnatal hayvan modelleri (özellikle domuz yavruları) kullanarak yapılmaktadır fetal dolaşım ve akciğerler teslimi için yenidoğan doğal sıvı dolu Oda. Fetal dolaşım yenidoğan dolaşım için geçiş ile ilgili benzersiz zorluklar göz önüne alındığında, perinatal mahallelerini kardiyak arrest fetal kuzu modeli yeni doğan Reanimasyon Fizyoloji eğitim idealdir.

Joseph Barcroft tarafından çalışmalar fetal üzerinde kuzular, 1930'lardan, gibi erken fetal ve neonatal Fizyoloji10için temeli atıldı. 20inci yüzyılın ikinci yarısında modelleri üzerinde fetal Geoffrey Dawes yenilikçi ve titiz deneyler kuzu ve daha sonra bu Abraham Rudolph tarafından muazzam kardiyovasküler ve pulmoner Fizyoloji fetus bilgisine katkıda bulunmuştur 11 , 12. son yıllarda çalışmalar fetal/yenidoğan kuzu modellerde daha iyi havalandırma hemodinami13,14, etkisini oksijenasyonu PVR15,16, etkilerini anlamak sağlanan 7,17sıkma kablosu sırasında oluşan dolaşım değişiklikleri yanı sıra. Son olarak, son bir yıl içinde yeni doğmuş kuzu resüsitasyon18,19,20sırasında hemodinamik etkileri çalışmaya yeni bir model olarak hizmet vermiştir. Ne hakkında adım adım bir anlatı bir kuzu deneme yanı sıra cerrahi cihazların ayrıntılı bir açıklamasını yürütülmesinde ilgilenmektedir ve deneysel yöntemler sunulacaktır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Tüm iletişim kuralları tarafından kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC) State University of New York Buffalo tarafından onaylanmıştır. İnvaziv tasvir metodoloji ve non-invaziv izleme bir çizimi Şekil 1' de gösterilen.

1. hayvanlar

  1. Kullanım zaman-tarihli, Q-ateşi seronegatif, hamile koyunu (karışık-breed, Suffolk-Dorset-Katahdin doğurmak) 127 – 143 gün gebelik, fetal Kuzuların Sessizliği ile.
    Not: Koyun terim gebelik 145 gün ve 127 gebelik Kuzuların aşırı prematüre bebeklerin gibi davranır.

2. cerrahi öncesi hazırlık

  1. Ameliyat öncesi 12 h ewe gıdalardan kesintisi.
  2. İntravenöz (IV) diazepam ile ewe sakinleştirici (0.25-1.5 mg/kg) ve ketamin (4 mg/kg).
  3. Ewe Asansör sepeti için yanal recumbency deliklere.
  4. Ewe dorsal recumbency V-üst cerrahi masa üzerine taşıyın.

3. anestezi

Not: sezeryan önce ewe diazepam ve ketamin ile sedatize ve entübe isoflurane (% 1-4) sürekli inhalasyon tarafından takip. Anestezi yeterliliği ile birlikte kan oksijen seviyesini bir Nabız oksimetre ve kalp hızı ile sürekli izlenmesi kas tonu ve göz refleksler değerlendirme tarafından izlenir. Araçları sırasında Kuzuların anne anestezi etkisi altında olacak ve aynı zamanda lokal anestezik araçları sitelerine alacaksınız.

  1. Ewe 10.0 mm kelepçeli Endotrakeal Tüp (ETT) ile tüp takacağım. Peşin ses aracılığıyla ETT kordonlar 1-2 cm manşet ötesinde. ETT manşet şişirmek ve yerde güvenli ETT ewe's çene etrafında kravat.
    1. Palpebral yanıt yoktur isoflurane ayarlanır (% 2-3 genellikle yeterlidir).
    2. Yapay nefes geleneksel mekanik havalandırma (CMV) tarafından ilham oksijen (FIO2) 0,21 bir kısmını sağlar. 10-15 mL/kg hacimleri deprem sağlamak için havalandırma ayarlayın.
    3. Oksihemoglobin doygunluk ewe's dil üzerinde yerleştirilen bir Nabız oksimetre tarafından sürekli olarak izlemek.
    4. Bir capnograph ile son gelgit karbon dioksit (EtCO2) ölçmek.
    5. FIO2 ve CMV oksihemoglobin doygunluk % 90-97 ve dışarı solunan CO2 35-45 mm Hg, arasında arasında sırasıyla korumak için ayarlayın.
  2. Ewe's bacaklarda cerrahi kravat-çıkışlar ile cerrahi tablo için güvenli.
    1. Fetus basıncı azaltmak için Trendelenburg pozisyonu tersine çevirmek için cerrahi masa ayarlayın.
  3. Basıncı azaltmak ve mide içeriğini boşaltmak için bir orogastric tüp yerleştirin.
  4. Ek 10 mL/kg IV sıvı (normal salin veya Lactated Ringers çözüm) / s.
  5. Sürekli çekirdek sıcaklığı elde etmek için bir rektal sıcaklık sondası yerleştirin.

4. cerrahi

Not: Sezaryen ve fetal yordamlar akut ameliyatlar hangi are euthanized hayvanlar sodyum Fentobarbital 100 mg/kg IV yönetmek olarak kabul edilir. Are euthanized koyunların Kuzuların teslimini takip ve kuzuların are euthanized deneylerin tamamlanmasından sonra. Ötenazi asistoli tarafından onaylanır. İkili torakotomi veya kan kaybı ikincil yöntemini de istihdam edilmektedir. Bu durumda, aseptik teknik ameliyat sırasında uygulanan değil. Personel hala hayvan iletişim sırasında koruyucu kıyafetleri giymek gerekir.

  1. Ventral karın yün tıraş.
  2. Koter 15-18 cm karın bulurlar kesi linea yapmak, alba fasya ortaya çıkarmak için.
    1. Bir künt uçlu hemostat ile basınç uygulayarak karın içine küçük bir açılış oluşturun.
    2. Künt uçlu makas Karın duvarının kayma sırasında bu açılış korumak.
    3. Linea kesi tamamlamak için makas kullanın alba.
  3. Bulun ve karın üzerinden rahim içinde fetal baş exteriorize.
    1. Tek elle fetal baş tutun ve koter 10 cm kesi rahim duvarı (Lamb'in alin) yapmak için kullanın. Herhangi bir cotyledons önlemek için emin olun.
    2. Babcock forseps rahim ve plasenta katmanları birlikte dört karşı köşe kelepçe için kullanın.
    3. Lamb'in baş ile rahim ve ewe's karın dışında ortaya çıkarmak.
    4. Karın dışında cenin ameliyatı sırasında döşeme Babcock forseps bırakın.

5. fetal solunum yolu

  1. Kısmen maruz entübe 3.5-4.5 mm ile fetal kuzu kelepçeli ETT. ETT ses telleri 1 cm manşet ötesinde aracılığıyla ilerlemek.
    1. Manşet açıldığı ve ETT bir göbek bandı tüp etrafında ve sonra başının etrafında bağlama tarafından güvenli.
    2. Aşırı fetal akciğer sıvı ETT pasif tarafa başını eğerek drenaj izin vermek. Bu Doğum sırasında çıkış akciğer sıvı benzetimini yapar.
    3. Asphyxial dönemde soluyarak sırasında gaz değişimi önlemek için ETT doldurmak.

6. boyun damar araçları

  1. Yün tıraş ve subkutan bupivacaine hidroklorür (% 0,25) 1-2 mL tüm kesi siteleri sızmak.
    1. Boyun (yaklaşık 6 cm kafasına distal) her tarafında iki 3 cm cilt kesi yapmak trakea bitişik. İnsizyon enine boyun gerekir.
    2. Belgili tanımlık kesme derin doku parçaladıktan önlemek için cilt, geçici süre koter kullanarak gerçekleştirin.
  2. Eğri Kelly ya da sivrisinek forseps kullanarak fasya ayırın.
  3. Şu iç juguler ven ve şu ortak şah damarı izole etmek.
    1. Yer iki 20 cm, her iki gemi altında 0 ipek sütür.
    2. İpek dikiş arasında 1 cm (proksimal distal için) bir alan sağlar.
    3. Geminin, yüzeysel, kan akışını kısıtlamak ve bir 1-2 mm enine kesim Iris cerrahi makas kullanarak damar hale getirmektir her dikiş yavaşça kaldır.
  4. Karotid arter için sağ karotis arter caudally aort kan basıncının izlenmesi ve kan örnekleme için doğru bir ön kızarmış kateter (15-17 G) koyun.
    1. Proksimal kravat arter tamamen ligate için kullanın.
    2. Adımları yineleyin 6.3.2 - 6.3.3.
    3. Önceden kızarmış karotid arter kateter takın ve distal ipek dikiş arter ve sonda 3 knot ile bağlamak için kullanın.
  5. Kullanım juguler ven, adımları yineleyin 6.3.2–6.3.3, bir önceden kızarmış kateter (14-16 G) eklemek için benzer bir teknik, 7 – 10 cm caudally (doğru sağ atrium) göğüs giriş içinde dinlenmek için ilerlemek. Bu venöz basınç ölçümleri yanı sıra sıvı ve ilaç yönetimi için kullanılır.
    1. Kateter heparinized serum fizyolojik ile açıklık için kontrol ve dikiş kravat tamamlayın etrafında gemi ve sonda (ile proksimal dikişi sadece) 2-3 knot kullanarak.
    2. İkinci kateteri (14-16 G) eklemek rostrally kan beyin dolaşımdan toplamak için yaklaşık 5 cm. Aynı kesim her iki kateter yerleştirme için kullanın.
    3. Gibi distal dikiş ve kateter ilgilidir 6.5.1 adımları yineleyin ve sonra ipek dikiş onları büküm önlemek için yerinde güvenliğini sağlamak için karşıt kateter hatları etrafında kravat.
  6. Bir T-şekil (1-2 cm) sol tarafında daha önce yapılan kesi genişletir.
    1. Açılan eğri hemostats kullanarak sol karotis arter yükseltmek.
    2. Kan akımını ölçmek için geminin etrafında bir 2 mm perivasküler akışı-sonda yer.
    3. Sonda pozisyonda stabilize etmek için 1 cm esnek polimer kol ile akış probe kapsar.
    4. Akış-sonda kablo hattı ile gemi paralel kablo bırakmak belgili tanımlık T şeklinde kesme yerleştirin.
    5. Cilt kesi kapatın. Kablonun çevresinde ve kablonun çekti eğer akışını kısıtlama önlemek için bir döngü etrafında kravat.

7. büyük gemi araçları

  1. Göğüs ortaya çıkarmak için fetal kuzu ayıklamak ve ısı kaybını önlemek için polietilen şal ile maruz kalan deri kapağı.
  2. Kuzu sağ yanal recumbency yerleştirin.
  3. Boynuna cerrahi sitesi ortaya çıkarmak için sol forelimb getirin.
  4. Bupivacaine hidroklorür (% 0,25) 3 mL 4th interkostal boşluk sızmak ve koter kullanarak 6 cm cilt kesi yapmak.
    1. Dikkatle ile künt Kıvrımlı pensler, Daire 3rd kaburga altında interkostal kas pierce ve interkostal boşluk arasında ortaya çıkıyor. Akciğer veya kalp zarar değil emin olun.
    2. 0 ipek önceden kesilmiş bir parçası için kelepçe açın ve kaburga sarmak için getirin.
    3. Adımları 7.4.1–7.4.2 sütür 4th altında kaburga güvenliğini sağlamak için yineleyin.
    4. Her göğüs çevresinde bağları kelepçe. Yavaşça yukarı çekin ve göğsün 4th interkostal alan altındaki pamuk uçlu aplikatör yerleştirin.
    5. Aplikatör çubuk son açılış 6-8 cm. akciğer değil sağlamak için 1 cm interkostal boşluk açmak için koter kullanarak kaburga bağları yakalanmış iken göğüs içeriği korumak için kullanın.
    6. Kaburga ayırıcı göğüs-açılış içine yerleştirin. Göğüs açma sol üst lob akciğer, ana pulmoner arter (PA) ve ductus arteriosus ortaya çıkaracaktır.
  5. 2 x 2 inç gauzes akciğer örtmek ve yavaşça maruz kalan herhangi bir doku cerrahi alan uzak itmek için kullanın.
    1. Küçük bir el ile Retraktörü görüş alanı (gerekirse) geliştirmek için kullanın.
    2. Yer bir göbek bandı (1/4 inç genişliği, 6 inç uzunluk) önceden amnion büyük damarlarının çevresinde batırılmış. Göbek bandı iliklerine kadar sürtünme (ve yaralanma) gemi duvarları azalır.
  6. Forseps kullanarak, kalp zarını kaldırın ve ana pulmoner Vagus sinir kesmemeye dikkat çekici arter, kes. Sağ atrium Vagus sinir boyunca kalp zarını yanal bir kesim ile müdahale tutmak için sopa bir aplikatör kullanın.
  7. İkizler forseps kullanarak, forseps yavaş duktal/PA çentik "sarmak" ve sol PA diğer tarafında ortaya sol PA arkasında ve çevresinde hareket Birçok hassas dokuları bu alanı altında çalıştırmak ve yalnızca hiçbir direniş ise devam edin.
    1. Forseps ucu görülmektedir, önceden ıslatılmış göbek bandı bir ucunu kapmak için yalnızca yeterince açık. Sadece 1 pozisyon yerinde tıkladım ile kelepçe. Bu doku çevreleyen forseps de yakalanmak ki mümkündür ve sıkıca klempe o doku gemi yaralanma sonucu göbek bandı ile yakalanmak eğer.
    2. Yavaşça forseps kaseti pozisyon içine çekmek için dışarı geri. Bu akış sonda bir alan açmak için hizmet vermektedir ve akış sondaları (Şekil 2) ekleme yönlendirmeye yardımcı olur. Çentik korumak ister herhangi bir damar bölümüdür bu en kırılgan doku parçası olarak şart.
  8. Bir 4-6 mm perivasküler akışı-sonda yavaşça göbek bandı kaldırma ve çevresinde kurulan açılış boyunca gemi sonda (L Anten Ayağı) metal bölümünü rehberlik yanına koyun.
    1. Teyp sonda yerde gemi koltuk yardımcı olmak ve belgili tanımlık L-böylece izin sürgülü kapatılması sağlanacak destek sonu görselleştirmek için arkasına doğru yönlendirin.
    2. Gemi > %75 ölçümleri sıkı uygun ve doğru akışını sağlamak için sonda büyüklükte olduğundan emin olun.
    3. Dikkatle sonda yakın göbek teyp sonu kesin ve gemiden bandı çıkarın için diğer ucunu yavaşça çekin. Teyp-ölçümleri ile çalışmasına engel değilse kaldırıldı.
    4. Ultrason jeli uygulayın ve sinyal şiddeti ve kalitesini artırmak için sonda ve kablo pozisyonunu ayarlayýn.
  9. 6-8 mm perivasküler akışı-sonda ductus arteriosus çevresinde yerleşim ile ilgilidir olarak 7,6-7.7.4 adımları yineleyin.
  10. Herhangi bir koruyucu 2 x 2 gazlı bez göğüs kaldırmak ve yeniden konumlandırmak akciğer sağlar.
  11. Her metal destek akciğer korumak için akış inceleyebilirsek çevresinde yeni bir 2 x 2 gazlı bez koyun.
  12. Konik bir iğne ve 2.0 sentetik fırça kılı dikiş kullanarak katmanları göğsünden kapatın. Dış deri için akış sondaları kablolar ile beraber bir döngü bir kesme iğne ve 2.0 ipek dikiş kullanarak güvenli.

8. non-invaziv ölçüm

  1. EKG yol doğru koltuk altı, sol koltuk altı ve şu kasık alan (üç kanallı EKG) ekleyin. Öncesi ve sonrası duktal arteryel oksihemoglobin Doygunluk (SpO2) doğru forelimb ve her iki hindlimb üzerine sırasıyla yerleştirilmiş bir Nabız oksimetre ile izlenir. Yakın kızılötesi spektroskop (NIRS) monitör dikiş ve opak bir sos ile alın üzerinde güvenli.

9. veri toplama

  1. Toplamak ve veri toplama yazılımı kullanarak verileri kaydetmek. Şekil 1 gösterir invaziv ve non-invaziv parametreler de dahil olmak üzere: atardamar ve Merkezi venöz kan basıncı, sol ortak karotis, sol pulmoner ve duktal arteryel kan akımı, EKG, SpO2, NIRS, ETCO2.
    Not: Yazılım ve donanım kurulum veri toplama için değişebilir ve bu makalenin kapsamı dışındadır.

10. Deneysel protokol

  1. Doldurmak ve göbek bağını kes ve kuzu anne karından bir radyant ısıtıcı için hareket.
  2. Asphyxial döneminde, epinefrin yönetim için bir umbilikal venöz kateter takın (0,01-0,03 mg/kg IV, Konumundan öneriler /).
  3. Sonrası duktal arteryel kan gazı toplamak için bir umbilikal arter kateter takın.
  4. Algılanan karotid akış ve basınç yokluğu tanımlanabilir yaklaşan kalp kası yetmezliği için kuzu izlemek.
  5. Yeterli personel kullanılabilir olduğundan emin olun ve her kişi için aşağıdaki görevleri adamak: (1) havalandırma ve hava yolu yönetmek, (2) göğüs sıkıştırma gerçekleştirmek, (3) ilaç yönetmek, (4) çizmek kan örnekleri, (5) kod yol.
  6. Resüsitasyon pozitif basınç havalandırma (PPV) sağlayarak bir T-parça resuscitator 35/5 cm H2O. Initiate deneysel resüsitasyon Protokolü 20 dk çekimde baskısı, başlayın.
  7. Sonra 30 s havalandırma, başparmak ve bir elin parmaklarını göğüs karşı taraflarda yerleştirerek kalp masajına başlayın.
    1. Parmak ve başparmak bir derinlik yaklaşık 1/3 için birlikte sıkarak göğüs sıkıştırma sağlar.
  8. Epinefrin 3 dk aralıklarla yönetmek.
  9. Canlandırma çabaları spontan dolaşıma dönene dek devam etmek veya en çok 20 min.
  10. Spontan dolaşım, sürekli serum (5 cc/kg/saat) ve fentanil dönüşü, (0.5-2.0 mcg/kg/saat; titre etkisi), daha önce kurulan şah venöz kateter verilir. 20 dk resüsitasyon süre sonrasında, hayvan euthanized. Kuzular ROSC 20 min tarafından elde yapmak, ötenazi ile devam edin.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Araçları fetal Kuzuların, ardından hemodinamik değişkenler kaydedilen (Şekil 3 ve Şekil 4), daha sonra analiz ve (Şekil 5) yorumlanır. Sık kan örnekleri toplanır ve Şekil 6 pH ve PaCO2 veri birinden deneyler göstermektedir. Bazen, kateterler veya akış sondaları düzgün çalışmayabilir veya yerinden ve veri, bu nedenle, değil toplanan ve Şekil 7' de gösterildiği gibi analiz için kullanılan.

Figure 1
Resim 1 : İnvaziv ve non-invaziv araçları bir kuzu modeli. İllüstrasyon heykelde invaziv araçları (örnekleme kan ve izleme basınç arteryel ve venöz kateter sokmak için hem yerleşimler için kan akışı ölçüm probu gemi akışı) ve non-invaziv ekipman (pulse oksimetre, yerleştirme ECG, yakın kızılötesi spektroskopi, capnography olur). Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 2
Resim 2 : Büyük gemi yalıtım. Bağ dokusu yumuşak ayrılığı akışı probları kan akımı her araç (B) içinde ultrason ölçümleri için sonraki yerleşim ile ıslak göbek bandı gemiler(a)yer alan oluşturur. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 3
Şekil 3 : Satın alma yazılımı anlık görüntü hemodinami başarıyla resüsite perinatal mahallelerini kuzu yakalayan. Ao basın: sağ karotis kan basıncı; CA akışı: sol karotis kan akımı; LPA akışı: pulmoner arter kan akımı için yorum yaptı. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 4
Şekil 4 : Satın alma yazılımı anlık görüntü görüntü görüntüsünü anlatan invaziv ve non-invaziv fizyolojik ölçümleri. Ao: karotis kan basıncı değil; CVP: Merkezi venöz basıncı; CaF: karotis kan akımı yaptı; Koroner: Sol koroner kan akımı azalan; PaF: sol pulmoner arter kan akım; DuF: ductus arteriosus akış kan; EtCO2: son tidal CO2; Kurşun 2: EKG 2 kayıt kurşun. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 5
Şekil 5 : Hemodinami başarıyla resüsite perinatal mahallelerini kuzu. Kan basıncı, sol karotis kan akımı ve sol pulmoner kan akımı değişiklikleri sıkıştırma aşamasında, göğüs sıkıştırma(a)ve (B) geri tepme aşamasında gösterilir. Pulmoner yaptı ve karotis kan akımını ikincil ekseni üzerinde çizilen. CC: göğüs sıkıştırma; EPI: adrenalin; PA: pulmoner arter; ROSC: spontan dolaşıma dönün. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 6
Şekil 6 : Kan gaz analiz sırasında bir deneysel çalışma. Kesikli çizgi zaman kendiliğinden dolaşım oranını temsil eder. PaCO2 ikincil ekseni üzerinde çizilir. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Figure 7
Şekil 7 : Düzgün çalışmayan akışı sonda gösteren edinme yazılım resim. Karotid kan akışı (yeşil izleme) kayıt yeterli kan basıncı (kırmızı izleme) ve sol pulmoner arter kan akımı (mor izleme) rağmen kaybolur. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Kuzu modeli için insan yenidoğan boyutunda karşılaştırılabilir ve invaziv hemodinamik değişkenler ölçmek kolay araçları sağlar. Fetal/yenidoğan kuzu model zengin transitioning dolaşım yanı sıra yeni doğmuş pulmoner ve kardiyovasküler Fizyoloji anlamak için katkıda bulunan bir çok değerli araştırma aracı olmuştur. Erken Doğum en iyi havalandırma stratejileri kuzular13,14,21, duktal bir kalıcı pulmoner hipertansiyonda pulmoner hemodinami birkaç deneysel kuzu modelleri incelemek için yılda kurulmuştur tüp ligasyonu modeli22,23,24, pulmoner vasküler reaktivite mekonyum aspirasyon modeli25,26,27, hem de fetal cerrahi modelleri myelomeningocele28,29, konjenital diyafragmatik fıtık30,31ve konjenital kalp defect32,33, tüm önemli bir etkisi oldu üzerinde klinik yönetim.

Fetal araçları sırasında bakım aşırı stres kuzu üzerinde neden olabilir ve kuzu için anestezi teslim etkileyebilecek bu göbek kordonu üzerinde herhangi bir baskı önlemek için alınması gerekir. Akış sonda ve kateterler yanlışlıkla çekiş kateterler girdiyseniz damarları yaralanmalara karşı korumak için kuzu cilde dikkatlice sütüre gerek. Fetal kalp cerrahi araçları titizlikle gerçekleştirilen sürece komplikasyonlar (kan kaybı ölümden) yıkıcı için riski teşkil etmektedir. Torakotomi eksik bir mühür göğüs sıkıştırma verimliliği etkileyebilir çünkü tamamen katmanlarda sütüre gerekiyor. Entübasyon Kuzuların akciğer sıvı pasif tarafa fetal baş eğerek drene. Ortalama 15-20 mL/kg akciğer sıvı pasif drene olabilir. Fetal kuzu, geri kalan akciğer sıvı sonra insan yenidoğanlarda tahmini akciğer sıvı yaklasik. ETT boğulma önce gaz değişimi sırasında soluk soluğa önlemek için sıkma kablosu tarafından tıkandı gerekiyor. Kardiyak arrest bir 5 dk süre spontan dolaşımı, aksi takdirde, dönüşü olarak aşağıdaki pulselessness hızla pozitif basınç havalandırma takip oluşur görülmektedir. Fetal temel arteryel gazlar önemli asidoz göstermek değil nedeniyle, hemen önce deneyler fetal araçları üzerinde kuzu önemli stres neden görünmüyor. Gebelik genellikle önce deneyler ultrason onay tarafından belirlenir, ancak aynı zamanda ewe dikkatli muayene deneyimli ellerde tarafından tespit edilebilir. Birden çok rehinenin çeşitli hastalıkları olması durumunda her kuzu ardışık olarak işaretlenir. Kuzu deneyler önemli bir dikkate önemli ölçüde daha yüksek maliyetidir.

Yakın zamana kadar kuzu modeli yenidoğan Resusitasyon eğitim için kullanılmamış. Geçerli Konumundan öneriler Doğum odasında yeni doğan fizyolojisi yeterince tasvir değil öncelikle ekstrapole yetişkin edebiyat veya manken34,35 ve Doğum sonrası hayvan modelleri36 olduğundan, Bu makalede açıklanan protokol perinatal mahallelerini kuzu modeli yeterince extrauterine ortamına geçiş başarısız yenidoğan Reanimasyon çabaları artırmak için sağlayabilir umut verici katkıları gösterir. Şekil 5 kan basıncı gösterir ve başarıyla resüsite yeni doğmuş bir kuzu akar. Kan basıncı ve akar (ile ductus arteriosus akışı bu modelde ölçmek için avantaj) deneylerde farklı sıkıştırma havalandırma oranları ve/veya vazoaktif ilaçlar kan dolaşımı geçiş ile bir modeli değerlendirmek karşılaştırarak sağlar Yenidoğan hemodinami daha iyi anlaşılmasını resüsitasyon sırasında. Bu model üzerinde deneyler en iyi göğüs sıkıştırma oranı anlayış artıracak, zamanlama ve, dozaj ilaçlar, adresinin yanı sıra neonatal resüsitasyon sırasında ilham oksijen etkisini birçok diğer hipotezler uygulanmıştır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarlar hiçbir bildirmek için çıkar çatışması var.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Babcock forceps Miltex 16-44
Blood pressure transducer Becton Dickinson P23XL-1 Used with saline filled diaphragm domes
Blunt tipped scissors Miltex 98SCS50-56
Capnograph Philips 7900 Used with Neonatal Flow Sensors
Cautery pencil Valley Lab 287879
Cautery unit Valley Lab SSE2K
Curved Forceps Everost 711714
Data acquisition software Biopac Systems Inc. ACK100W
EKG Biopac Systems Inc. ECG100C
Endotracheal tube -cuffed Rusch 111780035
Flow modulator Transonic Systems Inc.  T403
Flow-probe Transonic Systems Inc.  MC4PSS-LS-WC100-CM4B-GA
Gastric tube Jorgensen Labs Inc. J0106LE To decompress and drain ewe stomach
Hair clipper Andis Company 65340  # 40 Clipper Blade
Infant radiant warmer GE healthcare 7810
Intravenous catheters Becton Dickinson 381234
Iris surgical scissors Patterson 510585
Kelly Foreceps Patterson 510535
Mosquito Forceps RICA Surgical Products INC 1-74
Near-infrared spectroscopy Nonin Medical Inc.  X-100M Sensmart Equanox & PureSAT
RSO2 Sensor Nonin Medical Inc.  8004CB-NA Neonatal 
Scalpel handle and blade Everost 707203
Sutures -silk 2-0 Covidien SS-695 Used for tying catheters to vessels
Sutures -vicryl  2-0 Ethicon J269H Used for closing thoracotomy 
T-piece resuscitator Neo-Tee MCM1050812
Umbilical ties Jorgensen Labs Inc. J0025UA
Weitlander Retractor Miltex 11-625

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Wyckoff, M. H., Berg, R. A. Optimizing chest compressions during delivery-room resuscitation. Semin Fetal Neonatal Med. 13 (6), 410-415 (2008).
  2. Black, R. E., et al. Global, regional, and national causes of child mortality in 2008: a systematic analysis. Lancet. 375 (9730), 1969-1987 (2010).
  3. Guglani, L., Lakshminrusimha, S., Ryan, R. M. Transient tachypnea of the newborn. Pediatr Rev. 29 (11), e59-e65 (2008).
  4. Brown, M. J., Olver, R. E., Ramsden, C. A., Strang, L. B., Walters, D. V. Effects of adrenaline and of spontaneous labour on the secretion and absorption of lung liquid in the fetal lamb. J Physiol. 344, 137-152 (1983).
  5. Lakshminrusimha, S., Saugstad, O. D. The fetal circulation, pathophysiology of hypoxemic respiratory failure and pulmonary hypertension in neonates, and the role of oxygen therapy. J Perinatol. 36 Suppl 2, S3-S11 (2016).
  6. Wyckoff, M. H., et al. Part 13: Neonatal Resuscitation: 2015 American Heart Association Guidelines Update for Cardiopulmonary Resuscitation and Emergency Cardiovascular Care. Circulation. 132 (18 suppl 2), S543-S560 (2015).
  7. Bhatt, S., et al. Delaying cord clamping until ventilation onset improves cardiovascular function at birth in preterm lambs. J Physiol. 591 (Pt 8), 2113-2126 (2013).
  8. Katheria, A. C., Brown, M. K., Rich, W., Arnell, K. Providing a Placental Transfusion in Newborns Who Need Resuscitation). Front Pediatr. 5 (1), (2017).
  9. Kapadia, V. S., Wyckoff, M. H. Drugs during delivery room resuscitation--what, when and why? Semin Fetal Neonatal Med. 18 (6), 357-361 (2013).
  10. Barcroft, J. Researches on Pre-natal Life. 1, Blackwell Scientific Publications. 292 (1946).
  11. Dawes, G. S. Foetal and Neonatal Physiosolgy. A Comparative Study of the Changes at Birth. , Yeark Book Medical Publishers. (1968).
  12. Rudolph, A. Congenital Diseases of the Heart: Clinical-Physiological Considerations. , Wiley-Blackwell. 1-24 (2009).
  13. Sobotka, K. S., et al. An initial sustained inflation improves the respiratory and cardiovascular transition at birth in preterm lambs. Pediatr Res. 70 (1), 56-60 (2011).
  14. Polglase, G. R., et al. Positive end-expiratory pressure differentially alters pulmonary hemodynamics and oxygenation in ventilated, very premature lambs. J Appl Physiol (1985). 99 (4), 1453-1461 (2005).
  15. Lakshminrusimha, S., et al. Oxygen concentration and pulmonary hemodynamics in newborn lambs with pulmonary hypertension. Pediatr Res. 66 (5), 539-544 (2009).
  16. Lakshminrusimha, S., et al. Pulmonary hemodynamics in neonatal lambs resuscitated with 21%, 50% and 100% oxygen. Pediatr Res. 62 (3), 313-318 (2007).
  17. Hooper, S. B., et al. Cardiovascular transition at birth: a physiological sequence. Pediatr Res. 77 (5), 608-614 (2015).
  18. Vali, P., et al. Evaluation of Timing and Route of Epinephrine in a Neonatal Model of Asphyxial Arrest. J Am Heart Assoc. 6 (2), (2017).
  19. Vali, P., et al. Continuous Chest Compressions During Sustained Inflations in a Perinatal Asphyxial Cardiac Arrest Lamb Model. Pediatr Crit Care Med. , (2017).
  20. Vali, P., et al. Hemodynamics and gas exchange during chest compressions in neonatal resuscitation. PLoS One. 12 (4), e0176478 (2017).
  21. Tana, M., et al. Determination of Lung Volume and Hemodynamic Changes During High-Frequency Ventilation Recruitment in Preterm Neonates With Respiratory Distress Syndrome. Crit Care Med. 43 (8), 1685-1691 (2015).
  22. Morin, F. C. Ligating the ductus arteriosus before birth causes persistent pulmonary hypertension in the newborn lamb. Pediatr Res. 25 (3), 245-250 (1989).
  23. Morin, F. C., Egan, E. A. Pulmonary hemodynamics in fetal lambs during development at normal and increased oxygen tension. J Appl Physiol (1985). 73 (1), 213-218 (1992).
  24. Morin, F. C., Egan, E. A., Ferguson, W., Lundgren, C. E. Development of pulmonary vascular response to oxygen. Am J Physiol. 254 (3 Pt 2), H542-H546 (1988).
  25. Rawat, M., et al. Neonatal resuscitation adhering to oxygen saturation guidelines in asphyxiated lambs with meconium aspiration. Pediatr Res. , (2015).
  26. Chandrasekharan, P. K., et al. Continuous End-Tidal Carbon Dioxide Monitoring during Resuscitation of Asphyxiated Term Lambs. Neonatology. 109 (4), 265-273 (2016).
  27. Lakshminrusimha, S., et al. Tracheal suctioning improves gas exchange but not hemodynamics in asphyxiated lambs with meconium aspiration. Pediatr Res. 77 (2), 347-355 (2015).
  28. Meuli, M., et al. In utero surgery rescues neurological function at birth in sheep with spina bifida. Nat Med. 1 (4), 342-347 (1995).
  29. Meuli, M., et al. Creation of myelomeningocele in utero: a model of functional damage from spinal cord exposure in fetal sheep. J Pediatr Surg. 30 (7), 1028-1032 (1995).
  30. Adzick, N. S., et al. Correction of congenital diaphragmatic hernia in utero. IV. An early gestational fetal lamb model for pulmonary vascular morphometric analysis. J Pediatr Surg. 20 (6), 673-680 (1985).
  31. Harrison, M. R., Bressack, M. A., Churg, A. M., de Lorimier, A. A. Correction of congenital diaphragmatic hernia in utero. II. Simulated correction permits fetal lung growth with survival at birth. Surgery. 88 (2), 260-268 (1980).
  32. Turley, K., et al. Intrauterine cardiothoracic surgery: the fetal lamb model. Ann Thorac Surg. 34 (4), 422-426 (1982).
  33. Reddy, V. M., et al. In utero placement of aortopulmonary shunts. A model of postnatal pulmonary hypertension with increased pulmonary blood flow in lambs. Circulation. 92 (3), 606-613 (1995).
  34. Hemway, R. J., Christman, C., Perlman, J. The 3:1 is superior to a 15:2 ratio in a newborn manikin model in terms of quality of chest compressions and number of ventilations. Arch Dis Child Fetal Neonatal Ed. 98 (1), F42-F45 (2013).
  35. Solevåg, A. L., Schmölzer, G. M. Optimal Chest Compression Rate and Compression to Ventilation Ratio in Delivery Room Resuscitation: Evidence from Newborn Piglets and Neonatal Manikins. Frontiers in Pediatrics. 5 (3), (2017).
  36. Solevåg, A. L., et al. Chest compressions in newborn animal models: A review. Resuscitation. 96, 151-155 (2015).

Tags

Tıp sayı 138 kuzu modeli yeni doğan boğulma araçları fizyoloji canlandırma hemodinami translasyonel araştırma
Perinatal kuzu modeli oksijensiz: Yenidoğan Resusitasyon için bir Model
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Vali, P., Gugino, S., Koenigsknecht, More

Vali, P., Gugino, S., Koenigsknecht, C., Helman, J., Chandrasekharan, P., Rawat, M., Lakshminrusimha, S., Nair, J. The Perinatal Asphyxiated Lamb Model: A Model for Newborn Resuscitation. J. Vis. Exp. (138), e57553, doi:10.3791/57553 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter