Summary
تامينيس في الحيوانات تشمل تخفيض عدد الردود الأبطال على البشر (تامينيس السلبي) وزيادة في النهج النشط للبشر (تامينيس النشطة). هنا، يمكننا وصف بروتوكولات مفصلة لثلاثة اختبارات سلوكية (تامينيس النشطة وتامينيس السلبي، واختبارات إقامتهم في اليد) لقياس تامينيس الإيجابي والسلبي للفئران بشكل منفصل.
Abstract
الحيوانات المستأنسة مثل الكلاب والفئران المختبرية إظهار مستوى عال من تامينيس، هو أمر هام بالنسبة للبشر للتعامل معهم بسهولة. تامينيس من مكونين السلوكية: رغبة في تجنب البشر (تامينيس السلبي) وحافز لنهج البشر (تامينيس النشطة). للتحديد الكمي لهذه المكونات في الفئران، ونحن سبق أن وضعت الاختبارات السلوكية النشطة تامينيس، تامينيس السلبي، والرغبة في البقاء على يد الإنسان، صممت كل مجموعة لتكتمل في غضون 3 دقائق. واستخدمت البيانات التي تم الحصول عليها للانتقاء الوراثي، مع عدد كبير من الفئران بتحليل كل جيل. يقيس اختبار تامينيس النشطة حركة الماوس نحو يد الإنسان والاتصال وهو يشرك في. يقيس اختبار تامينيس السلبي مدة الزمن أن تتسامح ماوس اللمسة الإنسانية. في الاختبار، والبقاء على يد ماوس يوضع على يد الإنسان ولمست ببطء باستخدام الإبهام من تلك اليد؛ يتم قياس مدة بقاء الحيوان من ناحية. هنا، يمكننا وصف الاختبار الإعداد والجهاز، وشرح الإجراءات، ومناقشة تحليل البيانات المناسبة. وأخيراً، نحن تشرح كيفية تفسير النتائج.
Introduction
تربية انتقائية خلال تدجين تغيرت خصائص الحيوانات المستأنسة لجعلها أفضل تكيف للعيش مع أناس1،،من23. "تامينيس" سمة سلوكية شيوعاً في الحيوانات المستأنسة. وتكشف الدراسات المتعلقة بالانتقاء الوراثي تامينيس في الحيوانات كيف تغيرت بهم تعمل أثناء تدجين. وفي دراسة مشهورة، الثعالب كانت تربيتها بشكل انتقائي تامينيس ومجموعة من الثعالب التي أظهرت مستوى عاليا من تامينيس المنشأة2. وأظهرت الثعالب أيضا تغييرات النمط الظاهري أخرى تشمل الصفات الفسيولوجية ولون معطف، مورفولوجيا والاستنساخ. انتقائية تربية تامينيس في الفئران، الحيوانات مختبرية شعبية، يمكن أن يساعد الكشف عن الآلية الكامنة وراء التغيير في مجموعة متنوعة من تعمل من خلال تدجين.
تامينيس من مكونين السلوكية: النهج النشط للبشر (تامينيس النشطة) وتخفيض في التجنب البشر (تامينيس السلبي)4. وفي دراسة سابقة، أنشأنا ثلاثة اختبارات سلوكية تميز مستويات تامينيس في الفئران: تامينيس النشطة وتامينيس السلبي، وإقامتهم في اليد5اختبارات. صمم أول اختبار لقياس تامينيس النشطة بالماوس عن طريق قياس زمن الوصول لنهجها عفوية تجاه إنسان والوقت الذي يقضيه أنه على اتصال مع يد الإنسان. الاختبار الثاني صمم لقياس تامينيس السلبي بقياس كم ماوس التسامح التي لمست يد الإنسان. اختبار الإقامة في اليد المقصود بالتحديد الكمي لتجنب السلوكية التي حدها أقل ما يقال من يد الإنسان. وتتطلب هذه التقييمات الثلاثة فقط إلى جهاز فتح الحقل، كاميرا رقمية، وزوج كبير من ملاقط. أنها يمكن أن تكتمل التتابع داخل 3 دقيقة، تمكن كمية كبيرة من البيانات التي يتم جمعها في اليوم الواحد.
في الدراسة السابقة، ووصف ومقارنة السلوكيات تامينيس باستخدام سلسلة من السلالات الفطرية الماوس: 10 السلالات البرية، واحد ياباني يتوهم المستمدة من الماوس سلالة، ومختبر ستة سلالات5. تدجين معظم سلالات أظهرت تامينيس سلبي أعلى بكثير من السلالات البرية، ولكن لم تختلف تامينيس النشطة بين المجموعتين. من هذه النتائج، خلصنا إلى أن الفئران المستأنسة التي هم مؤسسو سلالات المختبر اختير أساسا لما تامينيس السلبي، ولكن ليس تامينيس النشطة، في تاريخهم تربية.
وقد أجرينا التالية الوراثي مع ثماني سلالات الفأرة البرية لتوليد السكانية غير متجانسة وراثيا6. لقد اخترنا زيادة الحيوانات التي سجل ارتفاع على اختبار تامينيس النشطة ونجحت بهم تامينيس النشطة في الأجيال المتعاقبة، مقارنة مع مجموعة تحكم. وأشارت هذه النتيجة إلى أن الاختبارات قياس موثوق تامينيس في الفئران.
هنا، نحن تصف الأسلوب الشامل لقياس المؤشرات السلوكية عن طريق الاختبارات السلوكية الثلاث. أولاً، نحن شرح الإنشاء والأجهزة اللازمة. بعد ذلك، نحن بالتفصيل الإجراء خطوة بخطوة لتشغيل التجارب، وقال أن جمع البيانات عن طريق الفيديو، وتحليل البيانات باستخدام مجانية أن وضعنا. وأخيراً، نحن إظهار نتائج الممثل مقارنة مجموعة الفئران بشكل انتقائي ولدت مع مجموعة مراقبة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
جميع التجارب التي أجريت وفقا للمبادئ التوجيهية للتجارب على الحيوانات من "المعهد الوطني لعلم الوراثة" (NIG)، وجميع الإجراءات وقد أقرتها "اللجنة رجال" للعناية بالحيوان واستخدام (الموافقة رقم 26-9).
1-الحيوانات
-
الوراثي
- إنشاء المستمدة من البرية غير متجانسة الأسهم (مخدم ويندوز المنزلي)6 الفئران بعبور 8 سلالات الفطرية (MSM، HMI، BLG2، PGN2، كير، أمراض الشرايين التاجية، ونيل وحركة أحرار البحرين/2) مع تجنب الاستيلاد (التزاوج بين الأخوة والأخوات أو أبناء عمومه) أي7. السلوك الوراثي، ابتداء من الجيل الثالث (G3)، عن طريق تحديد الفئران التي تعرض أطول "الاتصال وقت" (مجموعة مختارة، وأسر 16 من التزاوج أزواج) اختبار وفقا تامينيس النشطة (راجع الخطوة 3.1).
- إنشاء عنصر تحكم غير المحددة المجموعة (16 أيضا أسر التزاوج أزواج) عبر عشوائية التزاوج من G3 فصاعدا. لتجربة ممثل، استخدام الفئران التي تم الحصول عليها من (S1) المحددة وغير المحددة (C1) مجموعات من الفئران مخدم ويندوز المنزلي لإظهار نمط تامينيس الإيجابي والسلبي على حد سواء باستخدام ثلاثة اختبارات تامينيس (راجع الخطوة 3، 3، 1-3). للتجارب، استخدم الفئران مجموعة ال 15 10 كل مجموعة (S1 و C1).
-
الممثل موضوع الحيوانات
- فطم جميع الفئران من آبائهم في 3 أسابيع عمر والبيت عليها في مجموعات من نفس الجنس مع ليتيرماتيس، استخدام الحجم القياسي الأقفاص البلاستيكية التي تحتوي على رقائق الخشب، حتى الاختبار. الحفاظ على جميع الحيوانات في منشأة حيوان رجال تحت دائرة ضوء/الظلام ح 12/12 (أضواء على من 06:00 إلى 18:00) ودرجة حرارة ثابتة (23 ± 2 درجة مئوية).
- ضمان الغذاء والمياه المتاحة libitum الإعلانية. اختبار الفئران في 6 أسابيع عمر خلال فترة الضوء لتحليل تفاعلاتها مع البشر خلال الجزء من اليوم عند البشر تنشط عادة.
-
التعامل مع بروتوكول
- استخدام ملاقط كبيرة مغطاة بأنابيب السيليكون لنقل الفئران إلى أقفاص جديدة عن طريق التقاط لهم بلطف بذيولها. استخدام الملقط فصلها عن آبائهم في الفطام ونقلها خلال التجارب. يجب أن تتلقى أي من الفئران المعالجة قبل الاختبارات تامينيس.
- نقل الفئران إلى غرفة تجريبية قبل الاختبارات تامينيس.
- الحفاظ على الفئران الذكور مفصولة عن بعضها البعض بعد الاختبار، وتجنب العدوان بين الذكور في الفئران مخدم ويندوز المنزلي.
2-المعدات
- استخدام جهاز فتح حقل (400 × 400 × 400 مم، رمادي البلاستيكي).
- تضيء الحقل مفتوحة باستخدام ضوء مقطع مع لمبة بيضاء محايدة (100 لوكس) ثابت على ارتفاع 450 مم أعلى الحقل المفتوح (الشكل 1).
- تسجيل كافة السلوكيات باستخدام كاميرا رقمية مدمجة متاحة تجارياً ثابتة في 850 ملم فوق الحقل مفتوحة باستخدام ترايبود (الشكل 1).
- ارتداء قفازات من القماش تحت قفازات مطاط لحماية اليدين من الملدوغ في أثناء اختبار تامينيس السلبي (رد فعل نادر).
- قياس فترة الاختبار باستخدام ساعة توقيت.
3-الاختبارات
ملاحظة: أجريت الاختبارات الأولى والثانية (تامينيس النشطة والسلبية تامينيس) لكل 1 دقيقة، وأجرى اختبار الإقامة في اليد لأقل من 1 دقيقة. وأجريت في حقل فتح الجهاز كافة الاختبارات الثلاثة وتسجيلها باستخدام كاميرا رقمية. ينبغي القيام بإجراءات التطهير إيودوفوري على جميع أباراتس قبل أي دراسات السلوك.
-
إجراءات اختبار تامينيس النشطة
- قم بتشغيل الكاميرا الرقمية وبدء التسجيل.
- التقاط ماوس برفق من ذيله باستخدام زوج من ملاقط كبيرة (راجع الخطوة 1.3.1) ونقل من قفص المنزل إلى مركز جهاز فتح الحقل.
- بدء تشغيل ساعة الإيقاف.
- وضع يده اليسرى في الزاوية اليسرى السفلي من الجهاز.
- الاحتفاظ بألم مواجهة وتحريك الأصابع ببطء واطراد لضمان أن الماوس يربط يده إلى إنسان. ينبغي أن يكون متوسط الوقت لنقل كل أربعة أصابع من الإصبع الصغير إلى السبابة حوالي 0.5 s، مع دورة حركة متكررة بشكل مستمر.
- تحريك اليد اتجاه الماوس ببطء، بسرعة متوسط حوالي 13 سم/s، وقف في 10 سم من جانب الهيئة للماوس.
- الحفاظ على المسافة نفسها إذا كان الماوس يحاول الابتعاد. إذا كان الماوس النهج، تبقى اليد في نفس الموقف ومواصلة التحرك الأصابع قليلاً. إذا كان الماوس يحاول الصعود الذراع، العودة إلى الحقل باستخدام اليد الحرة.
- اختتام الاختبار بعد 1 دقيقة، والانسحاب من ناحية، والشروع في اختبار تامينيس السلبي.
-
إجراءات اختبار تامينيس السلبي
- اتبع نفس الخطوات أما الاختبار تامينيس النشطة، ولكن بدلاً من إيقاف تشغيل 10 سم بعيداً عن جسم الماوس، ببطء اتصال الماوس مع أطراف الأصابع.
- اترك الأصابع في نفس الموضع، الاتصال الماوس، حتى يتحرك الماوس بعيداً. عندما يحاول الماوس لقطع الاتصال، اتبع ذلك، تتحرك بسرعة متوسط من حوالي 23 سم/s، والشروع من جديد اللمس.
- اختتام الاختبار بعد دقيقة 1 تشغيل ساعة الإيقاف فورا لبدء الاختبار إقامتهم في اليد.
-
إجراءات اختبار الإقامة في اليد
- رفع الماوس من ذيله باستخدام زوج من ملاقط كبيرة ووضعه برفق على النخلة اليسرى. إبقاء اليد قريبة من الكلمة في حقل فتح الجهاز.
- السكتة الدماغية الماوس برفق بسرعة متوسط 0.5 s/السكتة الدماغية استخدام الإبهام الأيسر حتى يترك اليد.
- كرر الخطوات 3.3.1-3.3.2 3 x.
- بعد المحاكمة الثالثة، تتوقف التسجيل بالفيديو؛ وتبرم الآن جميع تامينيس الاختبارات.
-
إجراءات ما بعد التجريبية
- وزن الماوس وحساب العدد من البراز والبول يترك المجال مفتوحاً.
- وضع علامة الماوس على حدة عبر لكمه إذن.
- يمسح الجهاز والمجرب القفازات مع منشفة ورقية مبللة منظف إيودوفور 0.2%.
- قم بتنظيف الجهاز مع منشفة ورقية جافة.
4-السلوكية التحليلات
ملاحظة: تم سجل تسجيلات الفيديو باستخدام الإصدار تاناموفي 0.01 (ويندوز 7)، برامج تسجيل الحدث للتحليلات السلوكية (الشكل 2). البرنامج متاحة بحرية (1 مواد تكميلية) ومن موقعنا على شبكة الإنترنت (http://www.mgrl-lab.jp/MGRL_software.html). وسجل فرد الذي كان أعمى لشروط الاختبار جميع لقطات. وتم قياس مدة كل المؤشرات السلوكية في زيادات 0.1-s. أثناء التسجيل، المراقب ضغط الحرف المناسب على لوحة المفاتيح (راجع الخطوة 4.1) عند مشيراً إلى سلوك معين.
-
تعيين مفاتيح لتحليل أشرطة الفيديو
- تعيين مفاتيح لكل مؤشر السلوك. استخدام المفاتيح المناسبة لكل مؤشر السلوكية أمر حاسم لتلخيص البيانات تلقائياً في الخطوة 4، 3.
ملاحظة: تظهر المهام المستخدمة في هذه الدراسة في الشكل 3.
- تعيين مفاتيح لكل مؤشر السلوك. استخدام المفاتيح المناسبة لكل مؤشر السلوكية أمر حاسم لتلخيص البيانات تلقائياً في الخطوة 4، 3.
-
تحليل أشرطة الفيديو
- تحليل كل فيديو تسجيل x 3 لمؤشرات سلوكية مختلفة (الشكل 3B). لا كان سجل الاستمالة السلوك الذاتي. تأكد من تشغيل سماعة مدمجة للكمبيوتر بغية الاستماع إلى صوت جهاز ضبط الوقت في شريط الفيديو.
- إطلاق تاناموفي.
- سحب وإسقاط ملف الفيديو ليتم تحليلها في إطار تاناموفي. تأكد من أن يتم تحميل الملف وأن المسار واسم CSV أنتج الملف في المربع ملف البيانات [.csv] بشكل صحيح.
- انقر زر جاهزة . يقوم هذا بتنشيط نافذة جديدة لإدخال المفاتيح المعينة.
- انقر فوق الزر " تشغيل " لبدء تشغيل ملف الفيديو. انقر فوق الزر إيقاف لإيقاف ملف الفيديو.
- اضغط على مفتاح A عندما يلاحظ الماوس "عنوان" تجاه أو تقترب من الناحية، بما في ذلك الدائمة لشم. اضغط المفتاح R عندما يلاحظ الماوس "لوكوموتينج" دون عنوان تجاه اليد أثناء اختبار تامينيس النشطة.
- اضغط على مفتاح W لعلى الأقل 0.3 s (على الأقل ثلاث فترات في الإطار) عندما تسمع صوت جهاز ضبط الوقت في 60 s.
- الشروع في تحليل الاختبار تامينيس السلبي بعد اليد اليسرى يدخل الفيديو. اضغط على مفتاح A عندما يلاحظ الماوس متجهة نحو أو تقترب باليد والمفتاح R عندما يلاحظ الماوس السفر بدون عنوان تجاه اليد أثناء اختبار تامينيس السلبي.
- اضغط على مفتاح W لعلى الأقل 0.3 s (على الأقل ثلاث فترات في الإطار) عندما تسمع صوت جهاز ضبط الوقت في 60 s.
- اضغط المفتاح T عندما يلاحظ الماوس "البقاء" من ناحية في اختبار الإقامة في اليد.
- بعد اختبار الإقامة في اليد، انقر فوق الزر إيقاف لإيقاف مراقبة الفيديو.
- انقر فوق الزر مرة أخرى ، واكتب اسم ملف جديد لإخراج بيانات CSV.
- انقر زر جاهزة لتنشيط نافذة جديدة لإدخال المفاتيح المعينة.
- انقر فوق الزر " تشغيل " لإعادة تشغيل لقطات الفيديو وبدء مراقبة الاختبار تامينيس النشطة.
- اضغط المفتاح T عندما يلاحظ الماوس "الاتصال" بالإنسان، الذي يشمل كل سلوك الاتصال الطوعية ولكن عرضي غير جهات الاتصال، مثل الهبوط على كف بعد القفز، تامينيس النشطة أثناء اختبار.
- اضغط على مفتاح W لعلى الأقل 0.3 s (على الأقل ثلاث فترات في الإطار) عندما تسمع صوت جهاز ضبط الوقت في 60 s.
- اضغط المفتاح T عندما يسمح الماوس المجرب للمس الجسم أثناء اختبار تامينيس السلبي.
- اضغط على مفتاح W لعلى الأقل 0.3 s (على الأقل ثلاث فترات في الإطار) عندما تسمع صوت جهاز ضبط الوقت في 60 s.
- انقر فوق الزر إيقاف لإيقاف الفيديو.
- انقر فوق الزر مرة أخرى ، واكتب اسم ملف جديد لإخراج بيانات CSV.
- انقر زر جاهزة لتنشيط نافذة جديدة لإدخال المفاتيح المعينة.
- انقر فوق الزر " تشغيل " لإعادة تشغيل لقطات الفيديو وبدء مراقبة الاختبار تامينيس النشطة.
- اضغط على مفتاح ي عندما يلاحظ الماوس "القفز" أثناء اختبار تامينيس النشطة.
- اضغط على مفتاح W لعلى الأقل 0.3 s (على الأقل ثلاث فترات في الإطار) عندما تسمع صوت جهاز ضبط الوقت في 60 s. ثم بدء تشغيل مراقبة الاختبار تامينيس السلبي.
- اضغط على مفتاح ي عندما يلاحظ الماوس "القفز" أثناء اختبار تامينيس السلبي.
- انقر فوق الزر إيقاف لإيقاف مراقبة الفيديو عندما يتم سماع صوت جهاز ضبط الوقت في 60 ثانية.
- انقر فوق الزر مرة أخرى ، واكتب اسم ملف جديد لإخراج بيانات CSV.
-
تلخيص البيانات
- حفظ كافة ملفات البيانات الخام (CSV) في نفس المجلد مع ملف xlsm 2. التكميلية (2 مواد تكميلية).
- فتح ملف xlsm 2. تكميلية ، وانقر فوق الزر تلخيص .
- حفظ النتائج كملف منفصل واستخدامه لمزيد من التحليل للسلوك تامينيس.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
وقد أجرينا سابقا الوراثي تامينيس النشطة في ميسيندسوكسيسفولي التي تنتجها الفئران التي أظهرت مستوى عاليا من نشاط تامينيس6. نتائج تمثيلية تامينيس اختبارات للفئات المحددة وغير المحددة للفئران في جيلال 15 (G15) وترد في الشكل 4. الفئران من المجموعة المحددة سجل أعلى على اختبار تامينيس النشطة، نستعرض مدة أطول بشكل ملحوظ من الاتصال مع يد الإنسان عما الفئران التحكم. وكانت مدة هذا الاتصال هو مؤشر يستخدم لتربية انتقائية. الفريقين لم تختلف كثيرا في العنوان أو الحركة أو القفز المدة (الشكل 4A، الجدول 1)، ولكن الفئران المحدد سجل أعلى في الاختبار تامينيس السلبي، والتغاضي عن الاتصال البشري لفترات أطول بكثير من الوقت وقد فعلت الفئران من عنصر التحكم. وبالإضافة إلى ذلك، أظهرت الفئران المحدد تحرك أقصر بكثير والقفز المدة (الشكل 4 باء، الجدول 1). وأخيراً، بقيت الفئران المحدد على يد الإنسان أطول كثيرا من الفئران السيطرة عليه في البقاء-على-من ناحية-الاختبار (الشكل 4، الجدول 1). معا، أثبتت هذه النتائج أن الفئران بشكل انتقائي ولدت قد تأمر من الفئران التحكم.
رقم 1: جهاز اختبار تامينيس. وتظهر هذه اللوحات الجهاز من زوايا مختلفة (اليمين واليسار). وتألفت الإنشاء حقل مفتوح، ترايبود، على ضوء قصاصة، كاميرا رقمية، ساعة توقيت، لكمه إذن، ملاقط كبيرة وكوب بلاستيك تحتوي على منظف إيودوفور 0.2%. وكان تشغيل ضوء مقطع أثناء الاختبار. تم تعديل ارتفاع ترايبود حيث أن الكاميرا الرقمية يمكن أن القبض على كامل المساحة داخل الجهاز. وأجريت قياسات الوزن الجسم واللكم الإذن فورا بعد انتهاء الاختبار. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
رقم 2: قياس المؤشرات السلوكية من خلال تسجيل الفيديو- كانت سجلت المؤشرات السلوكية في الاختبارات تامينيس استخدام تاناموفي البرمجيات. يظهر هذا الرقم ما زال الرصاص من تسجيل فيديو، 17.7 s بعد بدء اختبار تامينيس النشطة. الفأر على اتصال المجرب، حيث سجلت المراقب المفتاح T، كما هو موضح في نافذة التحرير من تاناموفي. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
رقم 3: تحليل لبيانات الفيديو باستخدام تاناموفي- (أ) كل فهرس السلوكية تم تعيينه إلى مفتاح واحد على لوحة المفاتيح. وأجريت الاختبارات (ب) تامينيس الإيجابي والسلبي في الخلافة لمدة 1 دقيقة وتليها اختبار الإقامة في اليد. وقيست بمؤشرات المراقبة حسب الترتيب الزمني، 1 إلى 3. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
الشكل 4: الممثل نتائج الاختبارات تامينيس. للتجربة التمثيلية، استخدمنا الفئران التي تم الحصول عليها من (S1) المحددة وغير المحددة (C1) مجموعات مخدم ويندوز المنزلي، لإظهار نمط تامينيس الإيجابي والسلبي على حد سواء باستخدام ثلاثة اختبارات تامينيس. واستخدمت لهذه التجارب، 10 G15 الفئران كل مجموعة (S1 و C1). (أ) هذه اللوحات إظهار نتائج الاختبار تامينيس النشطة. مقارنة المؤشرات السلوكية الأربعة بين المحدد والتحكم في مجموعات: العنوان، والحركة، والاتصال، والقفز. (ب) هذه اللوحات إظهار نتائج الاختبار تامينيس السلبي. مقارنة المؤشرات السلوكية الأربعة بين المحدد والتحكم في مجموعات: العنوان، الحركة، وقبول، والقفز. (ج) هذا الفريق يوضح نتيجة اختبار الإقامة في اليد. مؤشر واحد هو المقارنة بين مجموعات الاختيار والتحكم: البقاء في يده. وتكون كافة القيم المتوسطات لثلاث محاكمات. أشرطة الخطأ تشير إلى sem. الرجاء انقر هنا لمشاهدة نسخة أكبر من هذا الرقم-
| اختبار ترويض | مؤشر السلوك | المجموعة | اختبار شابيرو-ويلك | اختبار مان-ويتني U |
| اختبار ترويض النشطة | العنوان | عنصر التحكم | 0.3991 | 0.5922 |
| تحديد | 0.4907 | |||
| الحركة | عنصر التحكم | 0.3832 | 0.0853 | |
| تحديد | 0.3599 | |||
| الاتصال | عنصر التحكم | < 0.0001 | 0.0049 | |
| تحديد | 0.1336 | |||
| القفز | عنصر التحكم | < 0.0001 | 0.2105 | |
| تحديد | ― | |||
| اختبار ترويض السلبي | العنوان | عنصر التحكم | 0.0408 | 0.0600 |
| تحديد | 0.7725 | |||
| الحركة | عنصر التحكم | 0.1470 | 0.0373 | |
| تحديد | 0.4356 | |||
| قبول | عنصر التحكم | 0.5834 | 0.0023 | |
| تحديد | 0.7742 | |||
| القفز | عنصر التحكم | 0.0048 | 0.0108 | |
| تحديد | ― | |||
| البقاء من ناحية الاختبار | البقاء | عنصر التحكم | 0.6683 | 0.0003 |
| تحديد | 0.1897 |
الجدول 1: نتائج التحليل الإحصائي مقارنة المؤشرات السلوكية بين المحدد والتحكم في مجموعات- فيتم عرض القيم من شابيرو-ويلك ومان-ويتني U-الاختبارات. وبالنظر إلى أن بعض المؤشرات السلوكية قد التوزيعات غير الاعتيادية، استخدمنا يو-اختبار مان-ويتني لدراسة الفروق بين المحدد والتحكم في مجموعات. واصلة (-) تعني أنه لا يمكن حساب الإحصاءات نظراً لأن جميع الأفراد معارضها صفر عشرات.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
نتائج تمثيلية تغطي تسعة مؤشرات سلوكية من تامينيس النشطة وتامينيس السلبي، واختبارات إقامتهم في اليد. مقارنة النتائج بين المحدد ومجموعات المراقبة تكشف عن فروق واضحة في تامينيس. تظهر هذه النتائج أن التجارب الثلاث صالحة لقياس تامينيس في الفئران.
يمكن أن تكون مستويات تامينيس في الحيوانات يصعب تحديدها كمياً تجريبيا. وقد وضعت عدة طرق لتقييم تامينيس في الغزلان والفئران والجرذان8،،من910. ومع ذلك، هذه الأساليب ليس كمياً تامينيس الإيجابي والسلبي بشكل منفصل. في دراسة سابقة، قمنا بتطوير ثلاث تجارب تامينيس كمياً تامينيس في الفئران5. استخدام عشرات من الاختبار تامينيس النشطة، أجرينا تجارب الوراثي وترويض بنجاح ولدت الفئران التي كانت بنشاط6. بالإضافة إلى كونه أكثر استعدادا للاقتراب واللمس البشر خلال اختبار تامينيس النشطة، بشكل انتقائي ولدت الفئران أيضا التسامح الاتصال البشري أطول أثناء اختبار تامينيس السلبي، حتى ولو لم تستخدم نتائج هذا الاختبار كأساس للاختيار. واقترحت هذه النتائج ليست مستقلة تماما الاختبارين ومشاركة بعض التداخل.
من أجل قياس دقة تامينيس الفطرية من الفئران إلى البشر، من المهم لتجنب التعامل مع الفئران حتى الاختبارات تامينيس. تجنب الاتصال المباشر بين البشر والفئران، استخدمنا ملاقط كبيرة مغطاة بأنابيب السيليكون لالتقاط الفئران بذيولها ونقلها إلى أقفاص جديدة5. غطاء سيليكون أنابيب يجعل النقل أقل إيلاما للفئران.
ونحن لم تجر اختبارات تامينيس أثناء مرحلة مظلمة من كل فترة 24-ح. ومع ذلك، قد يكون من المثير للاهتمام لاختبار ما إذا كانت تؤثر على مراحل الفاتحة والداكنة تامينيس. وكما هو معروف جهاز فتح المجال للحث على الخوف والإجهاد الاستجابات في الفئران، ولهذا السبب كثيرا ما يستخدم لقياس الانفعالية، درجة معينة من تامينيس قد تم قمعها أثناء الاختبار باستجابات الإجهاد/خوفاً من الفئران. على الرغم من أن كنا قادرين على إنشاء مجموعات من الفئران التي أظهرت مستوى عاليا من تامينيس النشطة للبشر ظروف اختبار معين، الدراسات المستقبلية ينبغي أن تسعى إلى الحد من الخوف، ونؤكد أن يشعر الفئران أثناء الاختبار، على سبيل المثال عن طريق إجراء الاختبارات أثناء مرحلة مظلمة أو بالتعود الفئران للجهاز قبل الاختبارات.
وبالإضافة إلى ذلك، إجراء الاختبار تامينيس مع مجرب الأعمى لحالة اختبار الحيوانات (المحددة أو غير المحددة) يمكن أن تجعل الاختبار أكثر موثوقية8.
جدير بالذكر أن قد يتم تطبيق الاختبارات الثلاثة للمختبرات والفأرة البرية سلالات5. لأنه يمكن تطبيق الاختبارات على السلالات البرية، كنا قادرين على وضع سكان ماوس العارضة عالية تامينيس النشطة باستخدام أسهم غير متجانسة وراثيا وينحدر من سلالات الفأرة البرية ثمانية6.
تم قياس كمية تامينيس نتائج الاختبار من خلال تسجيل الفيديو. ولضمان الاتساق، حلل شخص واحد جميع بيانات الفيديو لتجارب الوراثي في هذه الدراسة. ومع ذلك، يتطلب هذا الأسلوب المراقب أن يكون أحد خبراء الذين يمكن أن تسفر عن نتائج موثوقة واستنساخه، حيث ينبغي الحرص على تدريب الهدافين الفيديو بشكل صحيح. العمل المقبل بشأن تامينيس في الفئران يمكن أن يحتمل أن تكون الاستفادة من برامج التحليل التلقائي الذي يحل محل المراقبين البشرية، نهج الذي تم استخدامه في دراسة سابقة للسلوك الاجتماعي11.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
الكتاب ليس لها علاقة بالكشف عن.
Acknowledgments
هذا العمل كان يدعمها الإقراض للبحوث العلمية (كاكينهي) على النحو التالي: 15 ح 05724، ح 16 01491، و 15 ح 04289.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| open-field apparatus | O’Hara & Co. Ltd. | OF-3102 | 400×400×400 mm, grayish polyvinylchloride |
| compact digital camera | Ricoh Company, Ltd. | CX-5 | production in the company is over |
| latex pure gloves | AS ONE | BioLab, IKG-8002 | |
| stopwatch | SEIKO | SSBJ018 | |
| Iodophor sanitizer | Ecolab G.K. (CLEA Japan) | CL-4123 | Mikro Klene |
References
- Albert, F. W., et al. Phenotypic differences in behavior, physiology and neurochemistry between rats selected for tameness and for defensive aggression towards humans. Hormones and Behavior. 53 (3), 413-421 (2008).
- Belyaev, D. K. Destabilizing selection as a factor in domestication. Journal of Heredity. 70 (5), 301-308 (1978).
- Trut, L. Early canid domestication: the farm-fox experiment. American Scientist. 87 (2), 160-169 (1999).
- Price, E. O. Animal Domestication and Behavior. , CABI Publishing. New York, NY. (2002).
- Goto, T., Tanave, A., Moriwaki, K., Shiroishi, T., Koide, T. Selection for reluctance to avoid humans during the domestication of mice. Genes, Brain and Behavior. 12 (8), 760-770 (2013).
- Matsumoto, Y., et al. Selective breeding and selection mapping using a novel wild-derived heterogeneous stock of mice revealed two closely linked loci for tameness. Scientific Reports. 7, 4607 (2017).
- Koide, T., Goto, T., Takano-Shimizu, T. Genomic mixing to elucidate the genetic system of complex traits. Experimental Animals. 61 (5), 503-509 (2012).
- Albert, F. W., et al. Genetic architecture of tameness in a rat model of animal domestication. Genetics. 182 (2), 541-554 (2009).
- Cottle, C. A., Price, E. O. Effects of the nonagouti pelage-color allele on the behavior of captive wild Norway rats (Rattus norvegicus). Journal of Comparative Psychology. 101 (4), 390-394 (1987).
- Hayssen, V. Effects of the nonagouti coat-color allele on behavior of deer mice (Peromyscus maniculatus): a comparison with Norway rats (Rattus norvegicus). Journal of Comparative Psychology. 111 (4), 419-423 (1997).
- Arakawa, T., et al. A male-specific QTL for social interaction behavior in mice mapped with automated pattern detection by a hidden Markov model incorporated into newly developed freeware. Journal of Neuroscience Methods. 234, 127-134 (2014).
