Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

מדידת Tameness פעילים וסבילים בנפרד בעכברים

Published: August 10, 2018 doi: 10.3791/58048
Automatic Translation
1,2, 1,2, 1, 1, 3, 1,2
1Mouse Genomics Resource Laboratory, National Institute of Genetics, 2Department of Genetics, SOKENDAI (The Graduate University for Advanced Studies), 3Research Center for Global Agromedicine, Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine

Summary

Tameness בבעלי חיים כולל הפחתה של תגובות הימנעות בני אדם (tameness פסיבי) ועלייה גישות פעיל לבני (tameness פעיל). כאן, אנו מתארים פרוטוקולים מפורט עבור שלוש בדיקות התנהגותית (tameness פעיל tameness פסיבי, השהייה בבנמצא בדיקות) למדוד בנפרד את tameness פעיל וסביל של עכברים.

Abstract

ביות בעלי חיים כגון כלבים, עכברי מעבדה מציגים רמה גבוהה של tameness, אשר חשוב לבני אדם להתמודד עם אותם בקלות. Tameness יש שני מרכיבים התנהגותיים: חוסר הרצון להימנע בני אדם (tameness פסיבי) ומוטיבציה לבני הגישה (tameness פעיל). כדי לכמת את רכיבים אלה בעכברים, פיתחנו בעבר בדיקות התנהגותית tameness פעיל, סביל tameness, ואת הנכונות כדי להישאר על יד אנושית, זה נועד להסתיים בתוך 3 דקות. הנתונים שהתקבלו שימשו לגידול סלקטיבית, עם מספר גדול של עכברים ניתח לכל דור. הבדיקה tameness פעיל מודד את תנועת העכבר לכיוון יד אנושית ולאיש הקשר שהיא עוסקת. הבדיקה tameness פסיבי מודד את משך הזמן עכבר סובלנית ואנושית. במבחן השהייה בבנמצא, עכבר מושם על יד אנושית ונגע לאט בעזרת האגודל של היד; משך הזמן שנותר החיה מצד נמדד. כאן, אנו מתארים את המבחן המנגנון הקמה להסביר את ההליכים ולדון את ניתוח הנתונים המתאים. לבסוף, נסביר כיצד לפרש את התוצאות.

Introduction

ברירה מלאכותית במהלך ביות השתנה המאפיינים של חיות מבויתות כדי להפוך אותם טוב יותר הותאם לחיים עם בני אדם1,2,3. "Tameness" היא תכונה נפוצה ההתנהגות שנצפתה חיות מבויתות. המחקרים של ברירה מלאכותית עבור tameness בבעלי חיים חושפים כיצד פנוטיפים שלהם השתנו במהלך ביות. במחקר מפורסם, שועלים היה bred סלקטיבי עבור tameness, קבוצה של שועלים אשר הציגו רמה גבוהה של tameness היה הוקמה2. השועלים הראה גם שינויים אחרים פנוטיפ מעורבים מורפולוגיה, רבייה, צבע הפרווה, תכונות פיזיולוגיות. סלקטיבי רבייה עבור tameness בעכברים, חיית מעבדה פופולריות, יכול לעזור לחשוף את המנגנון שבבסיס השינוי מגוון פנוטיפים במהלך ביות.

Tameness יש שני מרכיבים התנהגותיים: גישות פעיל (active tameness) ובני לירידה ההימנעות של בני אדם (tameness פסיבי)4. במחקר הקודם, הקמנו שלוש בדיקות התנהגותית כדי לאפיין את רמות tameness בעכברים: tameness פעיל tameness פסיבי, השהייה בבנמצא בדיקות5. המבחן הראשון נועד לכמת tameness פעיל של עכבר על ידי מדידת ההשהיה של גישה זו ספונטנית כלפי אדם ואת הזמן שהוא בילה במגע יד אדם. המבחן השני נועד לכמת tameness פסיבית על ידי מדידת כמה זמן עכבר נסבל להיות נגע על ידי יד אדם. הבדיקה השהייה בבנמצא נועד לכמת הימנעות התנהגותית של להיות ליטף בעדינות על ידי יד אדם. הערכות שלושה אלה דורשים רק מכשירים בשדה פתוח, מצלמה דיגיטלית, זוג מספריים גדולים. הם יכולים להסתיים ברצף בתוך 3 דקות, הפעלת כמות גדולה של נתונים שנאספו ליום.

במחקר הקודם, אנו מאופיין, בהשוואה tameness התנהגויות באמצעות סדרה של העכבר המפגרים זנים: 10 זני בר אחד יפני מהודר נגזר העכבר זן, מעבדה שישה זנים5. רוב מבויתים זנים הראו tameness פסיבי גבוה משמעותית מאשר זני בר, אבל tameness הפעיל לא להיות שונה בין שתי הקבוצות. מתוצאות אלה, הגענו למסקנה כי העכברים מבויתים כי הם המייסדים של זנים מעבדה נבחרו בעיקר שלהם tameness פסיבי, אך לא tameness פעיל, בהיסטוריה הרבייה שלהם.

לאחר מכן ערכנו מלאכותית עם שמונה זנים פראי העכבר כדי ליצור אוכלוסייה הטרוגנית מבחינה גנטית6. בחרנו הבהמה, ציונים גבוהים במבחן tameness פעיל, בהצלחה עלה שלהם tameness פעיל ב. ובתורם, לעומת קבוצת ביקורת. התוצאה ציינו כי הבדיקות למדוד באופן מהימן את tameness בעכברים.

כאן, אנו מתארים שיטה מקיפה למדידת מדדים התנהגותיים באמצעות שלוש הבדיקות התנהגותית. ראשית, נסביר את מכשיר הכרחי הקמה. בשלב הבא, אנחנו פירוט התהליך צעד אחר צעד עבור הפעלת הניסויים, איסוף נתונים באמצעות וידאו, וניתוח אמר נתונים באמצעות freeware שפיתחנו. לבסוף, אנו מראים תוצאות נציג השוואה בין הבריכה באופן סלקטיבי הוליד עכברים עם קבוצת ביקורת.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

כל הניסויים בוצעו בהתאם להנחיות עבור ניסויים בבעלי חיים מן המכון הלאומי של גנטיקה (כוש) ולאחר כל ההליכים אושרו על ידי ועדת כוש חיה טיפול ושימוש (אישור מס ' 26-9).

1. בעלי חיים

  1. ברירה מלאכותית
    1. ליצור בר-derived הטרוגנית מניות (שדואג לסביבה)6 עכברים על ידי חציית זנים המפגרים 8 (MSM, HMI, BLG2, PGN2, KJR, CHD, NJL, ו- BFM/2) תוך הימנעות כל הרבעה (הזדווגות בין אחים או בני דודים)7. ההתנהגות של ברירה מלאכותית, החל הדור השלישי (G3), על-ידי בחירת עכברים המציגים יותר "פנה זמן" (הקבוצה שנבחרה, 16 משפחות של ההזדווגות זוגות) על פי tameness הפעיל הבדיקה (ראה שלב 3.1).
    2. צור פקד שלא נבחרו קבוצה (גם 16 משפחות של ההזדווגות זוגות) דרך אקראי הזדווגות של G3 ואילך. עבור ניסוי נציג, השתמש עכברים המתקבל שנבחר (S1), שלא נבחרו (C1) קבוצות של עכברים שדואג לסביבה כדי להציג את התבנית של tameness גם פעיל וגם סביל באמצעות שלוש בדיקות tameness (ראה שלב 3.1-3.3). לשימוש הניסויים, עכברים G15 10 לכל קבוצה (S1 ו- C1).
  2. נציג נושא בעלי חיים
    1. לגמול עכברים כל מהוריהם רוב בגיל 3 שבועות, לאחסן אותם בקבוצות מאותו מין עם הארנבונים מאותה, באמצעות כלובים פלסטיק בגודל סטנדרטי המכיל שבבי עץ, עד הבחינה. לשמור על כל בעלי החיים במתקן בעלי חיים כוש תחת מחזור/כהה 12/12 h (אורות על השעות 06:00 עד 18:00), טמפרטורת חום קבועה (23 ± 2 ° C).
    2. להבטיח כי מזון ומים זמינים ad libitum. מבחן העכברים-גיל במהלך תקופת אור כדי לנתח את יחסי הגומלין עם בני אדם במהלך החלק של היום כאשר בני אדם פעילים בדרך כלל 6 שבועות.
  3. פרוטוקול טיפול
    1. השתמש פינצטה גדולה מכוסה צינורות סיליקון להעברת העכברים לכלובים החדשים על ידי לאסוף אותם בעדינות על ידי הזנבות שלהם. השתמש את הפינצטה להפריד אותם מההורים שלהם על הגמילה ולהעבירם במהלך הניסויים. אף אחד העכברים צריכים לקבל טיפול לפני הבדיקות tameness.
    2. להעביר את העכברים חדר ניסיוני לפני הבדיקות tameness.
    3. לשמור על העכברים זכר מופרדים אחד מהשני לאחר הבדיקה, כדי למנוע תוקפנות בין-גברית בעכברים שדואג לסביבה.

2. ציוד

  1. השתמש בשדה פתוח מכשירים (400 x 400 x 400 מ מ, אפרפר של פלסטיק ומתכת).
  2. יאיר במגרש הפתוח באמצעות אור קליפ עם נייטרלי לבן נורת (100 lux) קבוע בגובה של 450 מ מ מעל המגרש (איור 1).
  3. לתעד את כל התנהגויות באמצעות מצלמה דיגיטלית קומפקטית זמינים מסחרית קבוע ב 850 מ מ מעל המגרש להשתמש בחצובה (איור 1).
  4. ללבוש כפפות בד תחת כפפות לטקס כדי להגן על הידיים מפני הכשת ב במהלך הבחינה tameness פסיבי (תגובה נדירה).
  5. למדוד את תקופת הבדיקה באמצעות סטופר.

3. בדיקות

הערה: תחילה שתי הבדיקות (tameness פעיל, סביל tameness) נערכו על 1 דקות ולאחר הבדיקה השהייה בעל-יד נערך עבור פחות מ- 1 דקות. כל שלוש בדיקות נערכו המנגנון בשדה פתוח והקליט באמצעות מצלמה דיגיטלית. הליך חיטוי Iodophore צריכה להתבצע על כל apparats לפני כל לימודי התנהגות.

  1. נהלי בדיקה tameness פעיל
    1. הפעל את המצלמה הדיגיטלית ולאחר להתחיל בהקלטה.
    2. לאסוף עכבר בעדינות בזנב באמצעות זוג של פינצטה גדולה (ראה שלב 1.3.1) והעבר אותו מן הכלוב הביתה למרכז של המנגנון בשדה פתוח.
    3. הפעילי את שעון העצר.
    4. הניחו את יד שמאל על הפינה השמאלית התחתונה של המנגנון.
    5. לשמור על כף היד פונה כלפי מעלה, להעביר את האצבעות לאט ובזהירות על מנת להבטיח כי העכבר מתחבר היד אדם. הזמן הממוצע כדי להעביר כל 4 אצבעות האצבע הקטנה האצבע המורה צריך להיות 0.5 כ s, עם מעגל תנועה חוזרת ונשנית ללא הרף.
    6. הזיזו את היד לכיוון העכבר באיטיות, במהירות ממוצעת כ-13 ס מ/s, ועוצרים 10 ס מ מן הצד של הגוף של העכבר.
    7. לשמור על המרחק אותו אם העכבר מנסה לעבור משם. אם העכבר מתקרב, להשאיר את. היד באותה תנוחה, להמשיך להעביר את האצבעות מעט. אם העכבר מנסה לטפס הזרוע, להחזיר אותה לשדה באמצעות יד חופשית.
    8. לסיים את הבדיקה לאחר 1 דקות, למשוך את היד, והמשך הבדיקה tameness פסיבי.
  2. נהלי מבחן tameness פסיבי
    1. בצע את הצעדים אותם לגבי הבדיקה tameness פעיל, אבל במקום לעצור 10 ס מ מהגוף של העכבר, לאט לגעת בעכבר עם קצות האצבעות.
    2. להשאיר את האצבעות באותו מיקום, יצירת קשר עם העכבר, עד העכבר זז משם. כאשר העכבר מנסה לנתק מגע, עקוב אחריו, נע מהירות ממוצעת של 23 ס"מ/s, ולא לשחזר שם את המגע.
    3. מסכמים את הבדיקה לאחר מינימלית 1 מחדש העצר מיד להתחיל. את הבדיקה השהייה בעל-יד.
  3. נהלי השהייה בבנמצא מבחן
    1. להרים את העכבר בזנב באמצעות זוג של פינצטה גדולה ומניחים אותו בעדינות בכף יד שמאל. להשאיר את. היד קרוב הרצפה של המנגנון בשדה פתוח.
    2. העבר העכבר מהירות ממוצעת של 0.5 s/קו באמצעות האגודל השמאלי עד שיעזוב את היד בעדינות.
    3. חזור על שלבים 3.3.1 - 3.3.2 3 x.
    4. אחרי המשפט השלישי, להפסיק את ההקלטה; עכשיו הם הגיעו למסקנה כל הבדיקות tameness.
  4. פוסט בצרות
    1. שוקל את העכבר, לספור את כמות צואה ושתן השאיר בשטח הפתוח.
    2. סמן העכבר בנפרד באמצעות ניקוב האוזן.
    3. נגב את הכפפות המנגנון של הנסיין באמצעות מגבת נייר ספוגה sanitizer Iodophor 0.2%.
    4. לנקות את המנגנון עם מגבת נייר יבש.

4. התנהגות ניתוחים

הערה: הקלטות וידאו זכו משתמש בגירסה tanaMove 0.01 (Windows 7), אירוע צריבת תוכנה עבור ניתוחים התנהגותית (איור 2). התוכנה זמינה בחופשיות (משלימה חומרים 1) , מהאתר שלנו (http://www.mgrl-lab.jp/MGRL_software.html). אדם אשר היה עיוור לתנאי מבחן הבקיע שכל הקטעים. משך הזמן של כל מדדי התנהגות נמדדה במרווחים של 0.1-s. במהלך מניה, המתבונן הקשת על האות המתאימה בלוח המקשים (ראה שלב 4.1) על וציין התנהגות נתונה.

  1. הקצאה של מפתחות עבור ניתוח וידאו
    1. להקצות מקשים עבור כל אינדקס התנהגות. באמצעות מקשי המתאימה עבור כל אינדקס התנהגותית חיוני כדי לסכם את הנתונים באופן אוטומטי בשלב 4.3.
      הערה: ההקצאות השתמשו במחקר זה מוצגות באיור3.
  2. ניתוח וידאו
    1. לנתח כל ההקלטה x 3 עבור מדדים התנהגותיים שונים (איור 3B). טיפוח עצמי התנהגות היה ללא ציון. ודא כי הרמקול המובנה של המחשב פעילה כדי לשמוע את הצליל שעון עצר את הוידאו.
    2. השקת tanaMove.
    3. גרור ושחרר את קובץ הווידאו כדי להיות מנותח לתוך החלון של tanaMove. לאשר טעינת הקובץ הנתיב והשם של CSV outputted קובץ בתיבה קובץ הנתונים [. csv] הוא הנכון.
    4. לחץ על לחצן מוכן . פעולה זו מפעילה חלון חדש כדי להזין את המפתחות שהוקצו.
    5. לחץ על לחצן ההפעלה כדי להפעיל את קובץ הווידאו. לחץ על לחצן ' עצור ' כדי להשהות את קובץ הווידאו.
    6. הקש על מקש A כאשר העכבר נצפית "לכיוון" או מתקרב היד, כולל עומד לרחרח. הקש על מקש R כאשר העכבר נצפית "locomoting" ללא כותרת לכיוון היד במהלך הבחינה tameness פעיל.
    7. הקש על מקש W לפחות 0.3 s (לפחות שלוש מרווחי בחלון) כאשר שמע את הצליל טיימר 60 s.
    8. ליזום הניתוח של הבדיקה tameness פסיבי אחרי יד שמאל מזין את הוידאו. הקש על מקש A כאשר העכבר נצפית לכיוון או מתקרב את היד ואת המפתח R כאשר העכבר נצפית הנסיעה וללא לכיוון היד במהלך הבחינה tameness פסיבי.
    9. הקש על מקש W לפחות 0.3 s (לפחות שלוש מרווחי בחלון) כאשר שמע את הצליל טיימר 60 s.
    10. הקש על מקש T כאשר העכבר נצפית "להישאר" מצד במבחן השהייה בעל-יד.
    11. לאחר הבדיקה השהייה בעל-יד, לחץ על לחצן להפסיק לעצור את התצפית וידאו.
    12. לחץ על לחצן הקודם , הקלד שם קובץ חדש עבור הפלט CSV נתונים.
    13. לחץ על לחצן מוכן להפעיל את חלון חדש כדי להזין את המפתחות שהוקצו.
    14. לחץ על לחצן לשחק מחדש את קטעי וידאו וליזום התצפית של הבדיקה tameness פעיל.
    15. הקש על מקש T כאשר העכבר נצפית "פנייה" האדם, אשר כוללת כל התנהגות מרצון ליצור קשר. עם אנשי קשר לא מקרית, כגון הנחיתה על כף היד לאחר קפיצה, במהלך tameness הפעיל הבדיקה.
    16. הקש על מקש W לפחות 0.3 s (לפחות שלוש מרווחי בחלון) כאשר שמע את הצליל טיימר 60 s.
    17. הקש על מקש T כאשר העכבר מאפשר הנסיין לגעת בגוף שלה במהלך הבחינה tameness פסיבי.
    18. הקש על מקש W לפחות 0.3 s (לפחות שלוש מרווחי בחלון) כאשר שמע את הצליל טיימר 60 s.
    19. לחץ על הלחצן עצור כדי לעצור את הוידאו.
    20. לחץ על לחצן הקודם , הקלד שם קובץ חדש עבור הפלט CSV נתונים.
    21. לחץ על לחצן מוכן להפעיל את חלון חדש כדי להזין את המפתחות שהוקצו.
    22. לחץ על לחצן לשחק מחדש את קטעי וידאו וליזום התצפית של הבדיקה tameness פעיל.
    23. הקש על מקש J כאשר העכבר נצפית "קופץ" במהלך הבחינה tameness פעיל.
    24. הקש על מקש W לפחות 0.3 s (לפחות שלוש מרווחי בחלון) כאשר שמע את הצליל טיימר 60 s. לאחר מכן התחל את ההתבוננות הבדיקה tameness פסיבי.
    25. הקש על מקש J כאשר העכבר נצפית "קופץ" במהלך הבחינה tameness פסיבי.
    26. לחץ על לחצן עצור כדי לעצור את התצפית וידאו כאשר שמע את הצליל טיימר 60 s.
    27. לחץ על לחצן הקודם , הקלד שם קובץ חדש עבור הפלט CSV נתונים.
  3. לסכם את הנתונים
    1. לשמור את כל הנתונים הגולמיים הקבצים (CSV) באותה תיקיה עם הקובץ xlsm 2 משלים (2 חומרים משלים).
    2. פתח את הקובץ 2 משלים xlsm ולחץ על לחצן סיכום .
    3. לשמור את התוצאות כקובץ נפרד ולהשתמש בו לצורך ניתוח נוסף של ההתנהגות tameness.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

ערכנו בעבר מלאכותית עבור tameness פעיל בעכברים miceandsuccessfully המיוצר שהראו רמה גבוהה של tameness פעיל6. תוצאות נציג tameness בדיקות עבור הקבוצות שנבחרו, שלא נבחרו עכברים-הדורה 15 (G15) מוצגים באיור4. עכברים מהקבוצה הנבחרת ציונים גבוהים יותר במבחן tameness פעיל, מפגין משמעותית משך זמן ארוך יותר של מגע עם היד האנושית מאשר עכברים שליטה. משך הקשר זה היה אינדקס המשמש מלאכותית. שתי הקבוצות לא נבדלים באופן משמעותי כותרת, גפיים או קפיצה המשך (4A איור, טבלה 1), אבל העכברים שנבחר ציונים גבוהים יותר במבחן tameness פסיבי, לנקוט מגע אנושי עבור תקופות זמן ארוכות יותר באופן משמעותי מאשר עכברים שליטה. בנוסף, העכברים הנבחרת הציג ומכניקה נמוך באופן משמעותי וקפיצה משך (4B איור, טבלה 1). לבסוף, העכברים שנבחר נשארו על יד אנושית משמעותית יותר מאשר עכברים שליטה במהלך השהייה בעל-היד-המבחן (4C איור, טבלה 1). יחד, תוצאות אלו הוכיח כי העכברים באופן סלקטיבי שחונך היו מאלף מאשר עכברים שליטה.

Figure 1
איור 1: מכשיר הבדיקה Tameness. לוחות אלה מראים את המנגנון מזוויות שונות (ימינה ושמאלה). הסידור כללה שדה פתוח, חצובה, אור קליפ, מצלמה דיגיטלית, סטופר, של ניקוב האוזן, פינצטה גדולה, ו גביע פלסטיק המכיל sanitizer Iodophor 0.2%. האור קליפ היה מופעל במהלך הבדיקה. גובה החצובה היה מותאם כך מצלמה דיגיטלית יכול ללכוד את החלל כולו בתוך המנגנון. מדידת עובי ניקוב וגוף האוזן נערכו מיד לאחר הבדיקה. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 2
איור 2: מדידה של מדדים התנהגותיים דרך הניקוד וידאו- מדדים התנהגותיים בבדיקות tameness זכו באמצעות tanaMove את התוכנה. איור זה מציג עדיין נורה מתוך הקלטת וידאו, 17.7 s כבר לאחר בדיקה tameness פעיל. העכבר הוא בקשר עם הנסיין, כך הצופה הקליט את המפתח T, כפי שמוצג בחלון העריכה של tanaMove. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 3
איור 3: ניתוח של נתוני וידאו באמצעות tanaMove. (א) כל אינדקס התנהגותית שובץ מפתח אחד על המקלדת. (B) tameness פעילים וסבילים בדיקות בוצעו ברצף במשך 1 דקה לכל ואחריו הבחינה השהייה בעל-יד. המדדים תצפיות נמדדו לפי סדר כרונולוגי, 1 עד 3. אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

Figure 4
איור 4: נציג תוצאות הבדיקות tameness. עבור הניסוי נציג, השתמשנו עכברים המתקבל שנבחר (S1), שלא נבחרו קבוצות (C1), שדואג לסביבה להראות את התבנית של tameness גם פעיל וגם סביל באמצעות הבדיקות tameness שלוש. על הניסויים, שימשו 10 עכברים G15 לכל קבוצה (S1 ו- C1). (א) אלה לוחות הצג את התוצאות של הבדיקה tameness פעיל. ארבעה מדדים התנהגותיים הושוו בין הנבחר לשלוט קבוצות: כותרת, גפיים, קשר, ו לקפוץ. (B) בלוחות אלה מציגים את התוצאות של הבדיקה tameness פסיבי. ארבעה מדדים התנהגותיים הושוו בין הנבחר לשלוט קבוצות: כותרת, גפיים, קבלת, ו לקפוץ. (ג) לוח זה מראה את התוצאה של הבדיקה השהייה בעל-יד. אינדקס אחד נערכה השוואה בין קבוצות בחירה ושליטה: נשאר על היד. כל הערכים הם ממוצעים של שלושה ניסויים. קווי שגיאה מציינים ב- SEM אנא לחץ כאן כדי להציג גירסה גדולה יותר של הדמות הזאת.

מבחן מאולף התנהגות מדד קבוצה מבחן שפירו-וילק מבחן מאן-ויטני U
מבחן מאולף פעיל כותרת שליטה 0.3991 0.5922
נבחרת 0.4907
ומכניקה שליטה 0.3832 0.0853
נבחרת 0.3599
פנייה שליטה < 0.0001 0.0049
נבחרת 0.1336
קפיצות שליטה < 0.0001 0.2105
נבחרת ―
מבחן מאולף פסיבי כותרת שליטה 0.0408 0.0600
נבחרת 0.7725
ומכניקה שליטה 0.1470 0.0373
נבחרת 0.4356
קבלת שליטה 0.5834 0.0023
נבחרת 0.7742
קפיצות שליטה 0.0048 0.0108
נבחרת ―
להישאר על ידו בדיקת נשאר שליטה 0.6683 0.0003
נבחרת 0.1897

טבלה 1: תוצאות של ניתוח סטטיסטי השוואת מדדים התנהגותיים בין הנבחר לשלוט קבוצות. P-ערכים מ שפירא-וילק ובדיקות מאן-ויטני U-מוצגים. בהתחשב בכך כמה מדדים התנהגותיים היו בלתי-רגילה הפצות, השתמשנו מאן-ויטני U-הבדיקה לבחון את ההבדלים בין הנבחר ולשלוט קבוצות. מקף (-) אומר כי הסטטיסטיקה יכול אינן מחושבות כי כל האנשים הציג תוצאות אפס.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

התוצאות נציג לכסות תשעה מדדים התנהגותיים מן tameness פעיל, סביל tameness, השהייה בבנמצא בדיקות. השוואה של התוצאות בין שנבחר קבוצות שליטה חשף הבדלים ברורים ב- tameness. תוצאות אלו מראות כי שלושת המבחנים תקפים למדידת tameness בעכברים.

רמות tameness בבעלי חיים יכול להיות קשה לכמת מדעית. פותחו מספר שיטות להערכת tameness צבי, עכברים, חולדות8,9,10. עם זאת, שיטות אלה לא לכמת tameness פעילים וסבילים בנפרד. במחקר הקודם, פיתחנו שלוש בדיקות tameness לכמת tameness עכברים5. באמצעות עשרות מן הבחינה tameness פעיל, ערכנו ניסויים מלאכותית ולאלף בהצלחה הוליד עכברים שהיו פעיל6. בנוסף להיותו יותר מוכן להתקרב ולגעת בני אדם במהלך הבדיקה tameness פעיל, באופן סלקטיבי הוליד עכברים גם נסבל מגע אנושי כבר במהלך הבדיקה tameness פסיבי, אף-על-פי תוצאות המבחן לא שימשו כבסיס לבחירה. תוצאות אלה הציע כי שתי הבדיקות אינן עצמאית לחלוטין ולשתף חפיפה.

על מנת למדוד במדויק את tameness מולדת של עכברים לבני אדם, זה קריטי כדי למנוע טיפול העכברים עד הבדיקות tameness. כדי למנוע מגע ישיר בין בני אדם ועכברים, השתמשנו פינצטה גדולה מכוסה צינורות סיליקון כדי לאסוף את העכברים מאת הזנבות שלהם ומעבירים אותם אל הכלובים חדש5. מכסה סיליקון אבובים הופך את ההעברה פחות כואב העכברים.

לא קיימנו tameness בדיקות במהלך שלב האפל של כל תקופת 24 שעות ביממה. עם זאת, זה יכול להיות מעניין לבחון אם השלבים כהה להשפיע על tameness. המנגנון בשדה פתוח מוכרת הפחד, הלחץ תגובות בעכברים, ומסיבה זו משמש לעתים קרובות כדי למדוד רגשנות, מידה מסוימת של tameness עשוי הושמטו במהלך הבדיקה לפי תגובת מחריד/מתח העכברים. אמנם הצלחנו להקים קבוצות של עכברים זה הציגו רמה גבוהה של tameness פעיל לבני בתנאים מבחן נתון, מחקרים עתידיים יש לנסות להפחית את הפחד, להדגיש כי עכברים להרגיש במהלך הבדיקה, למשל על-ידי עריכת הבדיקות במהלך שלב כהה או על-ידי הרגלה העכברים המנגנון לפני הבדיקות.

בנוסף, ביצוע הבדיקה tameness עם נסיינית סומא מעמדם של החיות מבחן (שנבחר או שלא נבחרו) יכול לעשות המבחן יותר אמין8.

ראוי לציין, ניתן להחיל את שלוש בדיקות מעבדה והן העכבר פראי זנים5. כי הבדיקות יכול לחול על זני בר, הצלחנו להקים אוכלוסיה העכבר מפגין גבוהה tameness הפעיל באמצעות מלאי הטרוגנית מבחינה גנטית מוצאו מן העכבר פראי שמונה זנים6.

תוצאות הבדיקה tameness היו לכמת באמצעות הניקוד וידאו. כדי להבטיח עקביות, אדם אחד ניתח כל הנתונים וידאו עבור הניסויים מלאכותית במחקר הנוכחי. עם זאת, שיטה זו מחייבת את הצופה להיות מומחה מי יכול לייצר תוצאות לשחזור ואמין, אז כדאי לשים לב לאמן כראוי scorers וידאו. עבודה בעתיד על tameness בעכברים יכול באופן פוטנציאלי את היתרון של ניתוח אוטומטי תוכנה שמחליפה משקיפים אנושי, גישה אשר שימש במחקר הקודם של התנהגות חברתית11.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

המחברים אין לחשוף.

Acknowledgments

עבודה זו נתמכה על ידי Grants-in-Aid עבור מחקר מדעי (KAKENHI) כדלקמן: 15H 05724, 16H 01491, ו- 15H 04289.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
open-field apparatus O’Hara & Co. Ltd. OF-3102 400×400×400 mm, grayish polyvinylchloride
compact digital camera Ricoh Company, Ltd. CX-5 production in the company is over
latex pure gloves AS ONE BioLab, IKG-8002
stopwatch SEIKO SSBJ018
Iodophor sanitizer Ecolab G.K. (CLEA Japan) CL-4123 Mikro Klene

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Albert, F. W., et al. Phenotypic differences in behavior, physiology and neurochemistry between rats selected for tameness and for defensive aggression towards humans. Hormones and Behavior. 53 (3), 413-421 (2008).
  2. Belyaev, D. K. Destabilizing selection as a factor in domestication. Journal of Heredity. 70 (5), 301-308 (1978).
  3. Trut, L. Early canid domestication: the farm-fox experiment. American Scientist. 87 (2), 160-169 (1999).
  4. Price, E. O. Animal Domestication and Behavior. , CABI Publishing. New York, NY. (2002).
  5. Goto, T., Tanave, A., Moriwaki, K., Shiroishi, T., Koide, T. Selection for reluctance to avoid humans during the domestication of mice. Genes, Brain and Behavior. 12 (8), 760-770 (2013).
  6. Matsumoto, Y., et al. Selective breeding and selection mapping using a novel wild-derived heterogeneous stock of mice revealed two closely linked loci for tameness. Scientific Reports. 7, 4607 (2017).
  7. Koide, T., Goto, T., Takano-Shimizu, T. Genomic mixing to elucidate the genetic system of complex traits. Experimental Animals. 61 (5), 503-509 (2012).
  8. Albert, F. W., et al. Genetic architecture of tameness in a rat model of animal domestication. Genetics. 182 (2), 541-554 (2009).
  9. Cottle, C. A., Price, E. O. Effects of the nonagouti pelage-color allele on the behavior of captive wild Norway rats (Rattus norvegicus). Journal of Comparative Psychology. 101 (4), 390-394 (1987).
  10. Hayssen, V. Effects of the nonagouti coat-color allele on behavior of deer mice (Peromyscus maniculatus): a comparison with Norway rats (Rattus norvegicus). Journal of Comparative Psychology. 111 (4), 419-423 (1997).
  11. Arakawa, T., et al. A male-specific QTL for social interaction behavior in mice mapped with automated pattern detection by a hidden Markov model incorporated into newly developed freeware. Journal of Neuroscience Methods. 234, 127-134 (2014).

Tags

התנהגות גיליון 138 Tameness ביות עכבר ברירה מלאכותית מבחן התנהגות טיפול
מדידת Tameness פעילים וסבילים בנפרד בעכברים
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Nagayama, H., Matsumoto, Y., Tanave, … More

Nagayama, H., Matsumoto, Y., Tanave, A., Nihei, M., Goto, T., Koide, T. Measuring Active and Passive Tameness Separately in Mice. J. Vis. Exp. (138), e58048, doi:10.3791/58048 (2018).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter