Summary
Biz artrit ağrı uyarılmış bir ölçüsü geliştirdik ve kimyasal olarak indüklenen artrit farklı fare modellerinde spontan acı ölçmek için standart bir yöntem ile birleştiğinde. Bu hassas ve eklem ağrısı farklı türleri için tekrarlanabilir önlemlerdir.
Abstract
Ağrı artrit engeli ana nedenidir. Şu anda yeterli artrit ağrı tedavisi için bir karşılanmamış ihtiyaç var. Önceden klinik ağrı mekanizmaları eğitim için ve artrit tedavi etkinliğinin değerlendirilmesi için gerekli ve faydalı modeller. Ağrı artrit hayvan modellerinde ölçme meydan okuyor. Üç model fare artrit uyarılmış ve spontan acı ölçmek için yöntemler geliştirdik. Biz acı bir diz firma palpasyonla için tabi farelerin uyarılmış ağrı yanıt-e doğru quantitate. Biz de ağırlık oranı tarafından kendiliğinden ağrı değerlendirmek ve süreyi her 4 onların bacaklarda üzerinde bir diz artrit ağrı indüksiyon sonra yerleştirilir. Bu fare modellerinde eklem ağrısı uyarılmış ağrı yanıt önemli bir artış ve ağırlık taşıyan bir değişiklik üretir. Fareler quadrupeds olduğundan, ön ayakları veya bazı kombinasyon kontralateral uzuv için acı bacak boşaltma. Bu yöntemler basit, en az ekipman gerektiren ve tekrarlanabilir ve ağrı algılamak için duyarlıdır. Bunlar hastalık değiştirme artrit tedavileri ve analjezikler farelerde çalışmak için yararlıdır.
Introduction
Ağrı artrit1,2Engellilik ana nedenidir. Şu anda kullanılabilir analjezikler çoğu kez etkisiz, zehirli ve potansiyel olarak ülke çapında narkotik sorunu3' e katkıda bulunmak. Ameliyat her zaman birden çok komorbiditeler olabilir özellikle Yaşlılarda, son aşama artrit için bir seçenek değildir. İntra artiküler steroid ve viscosupplementation erken hastalığında etkili ama genellikle geç sahne hastalığı4kendi etkinliğini kaybetmek. Etkili ilaçlar ile mevcut tedaviler ele alınamaz artrit ağrı için büyük bir karşılanmamış ihtiyaç vardır.
Önceden klinik modelleri sınırlayıcı toksisitesine oluşabileceğini ve ağrı tedavilerin etki mekanizmaları anlama açısından kullanışlıdır, ancak ağrı ölçüm hayvanlarda5meydan okuyor. Ağrı önlemler doğrudan ve spontan olabilir (statik veya dinamik ağırlık taşıyan, duruş, yürüyüş analizi, kendiliğinden hareket ve mekanik veya termal duyarlılık ayak) veya dolaylı/uyarılmış (hind uzuv para çekme testi, diz sıkıştırma kuvvet veya beyin görüntüleme) 6. monoarthritis hafif türlü, yürüyüş analizi büyük küçük harf duyarlı olduğunu ve tutarlılık7yoksun. Statik ağırlık taşıyan sıçan hindlimbs acı ölçmek için yararlıdır ama fareler zor olabilir. Mekanik hassasiyet ölçümleri von Frey testi gibi dolaylı olarak Sensitizasyonu ayak ped diz artrit, ortamda tespit ama doğrudan diz ağrısı ölçüyor musunuz ve gerçekleştirmek için hantal. Pam. (basınç uygulama ölçüm) cihazla ölçülen diz sıkıştırma güç-ebilmek var olmak kullanılmış içinde fareler, ama büyük aygıt mutlaka ağrı8yansıtmamaktadır olumsuz davranışlar üretmeden farelerde kullanmak zor.
Hassas ve tekrarlanabilir ağrı şiddeti ve intra artiküler terapiler9, analjezik etkileri ölçmek için üç farklı model fare artrit ölçüm spontan ve uyarılmış acı için yöntemler geliştirdik 10. biz de ağrının insanlarda mümkün olmazdı ağrı ve ekran araştırma uyuşturucu histolojik diğer işaretleri ile ilişkili. Daha etkili kombinasyon tedavileri belirlemek için alçakgönüllülükle etkili ağrı kesici synergism değerlendirebilir. Uyarılmış ve spontan ağrı için kanıtlanmış yöntemleri kullanarak, bir tür acı davranış ama diğer ve daha yakından ayna ağrı ölçüm insanlar11yansıtılır ağrı tanımlamak başarısız bir tuzak kaçının. İki yöntemleri için ağrı değerlendirme sınırlayarak, biz ağrı davranışını etkiler ve laboratuvar verimliliğini en üst düzeye çıkarmak hayvanlar üzerinde stres en aza indirmek.
Protocol
Tüm hayvan yordamlar ve protokolleri Minneapolis gazileri işleri sağlık sistemi (VAHCS) kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi tarafından onaylanmış ve 'Kılavuzu"the Care and use of Laboratory Animals'standartlarla uyumlu (Ulusal Akademik basın, ABD) 12.
1. seçimi hayvanlar
Not: C57Bl6 fareler tüm üç artrit modeller için kullanılır.
- Ya erkek ya da dişi fareler kullanın, ancak yanıt artrit ağrı olarak toplumsal cinsiyet ve test edilen modeli patogenezinde bağlı olarak değişebilir.
- Cinsel olgunluğa ulaşmış, artık hızla büyüyen ve ağrı ölçümleri yıkmak spontan artrit geliştirdik için eski değildir fareler seçin.
Not: On iki hafta olduğu açıklanan modelleri ama bu ağrı ölçümü için ideal bir yaş çalışma tasarım üzerinde bağlıdır. Artrit inisiyasyon yaşta modeli geliştirmek için gereken süreyi süresi bağlıdır. Akut inflamatuar artrit (alprazolzm modeli) geliştirmek için 3 h gerektirir, bu nedenle 12 hafta-in yaş indüksiyon anda hayvanlardır. Kronik inflamatuar artrit (CFA modeli) geliştirmek için 3 hafta gerektirir, bu nedenle 9 haftalık indüksiyon anda hayvanlardır. Kronik dejeneratif artrit (collagenase modeli) geliştirmek için 4 hafta gerektirir, bu nedenle zaman indüksiyon 8 hafta hayvanlardır. Daha kronik manken dejeneratif artrit, artrit 6 hafta-in yaş inducing tarafından kullanılabilir. Bu 6 hafta-in eklem hasarı gelişimini sağlar. Ancak, kronik dejeneratif artrit farelerde önemli uyarılmış ağrı üretmez. - Hayvanlar bir ulusal ticari damızlık kaynaktan elde edilir.
- Ev hayvanlar gruplar halinde ad libitum kemirgen diyet ve su ile standart polikarbonat kafeslerde 8 hayvanlar.
- 72 ° C ± 1 ° C, çevre koşullarına ve % 33 ± %1 nem 12 h açık/koyu çevrimleri ile koruyun.
2. eklem içi enjeksiyonlar diz içine
- Polietilen boru ile içeriden yapılmış bir kılıf ile 0,5 inç iğne uzunluğu kapsayan 30 G 2.5 mm steril oluşturmak 0,38 mm ve dış çapı sadece 2.5 mm iğne çıkıntılı, bırakarak 1,09 mm çapı. Bu iğne çok fazla ekleme ve eklem özafagusu çıkarken engeller.
- Enjekte, herhangi bir ticari olarak mevcut elektrik sakal düzeltici kullanarak tıraş için tek bir diz seçin ve providone-iyot Maki ile sterilize.
- Fare ile % 3 isoflurane % 100 O2 1 L/dk 3 dk ± 1 dk. koru anestezi işlemi sırasında bir nosecone kullanarak için anestezi. Anestezi derinliği ayak çimdik tarafından onaylayın. Solunum durumunu izlemek ve yeterli solunum korumak için anestezi pozlandırmayı en aza indirmek için dikkat ediniz.
- Orta hat üzerinden sadece fare tam anestezi sonra steril kılıflı iğne kullanarak patella alt kenarına aşağı patellar tendon, eklem girin. Bu ön orta hat yaklaşım ortak girmek ve faiz madde enjekte doğruluğu en üst düzeye çıkarır.
- Aynı yaklaşım artrit-inducing maddeler ve analjezik maddeler enjekte için kullanın. Sham denetimleri yukarıda ama olmadan herhangi bir madde enjekte iğne olarak ekleyerek üretilmektedir.
3. üretim artrit
- Hayvan olduğu gibi yukarıda adım 2.3 anestezi.
- Alprazolzm, tam Freund'ın adjuvan ve tip IV Collagenase uygun miktarda (aşağıya bakın) tartmak ve laminar akış başlıklı kısırlık ve güvenliği normal salin ile uygun konsantrasyonu sulandırmak.
- % 2.5 alprazolzm akut inflamatuar artrit üretmek için Hamilton şırınga kullanarak yukarıda diz içine % 0,9 steril serum fizyolojik içinde seyreltilmiş 10 µl enjekte. Artrit 3 h sonra enjeksiyon doruklarına.
- 30 µL (30 µg), tam Freund'ın adjuvan (kronik inflamatuar artrit üretmek için CFA) diz içine enjekte. 1 hafta sonra 3 enjeksiyon takip haftalıkken doruklarına bir kronik faz, zirveleri ilk bir akut enflamatuar faz vardır.
- 10 µL kronik dejeneratif artrit üretmek için 10 IU tip IV Collagenase içeren enjekte. Artrit ağrı doruklarına 4 hafta sonra enjeksiyon.
4. uyarılmış eklem ağrısı ölçümü
- Her zaman ilk13ağrılı diz çapraz-over ağrı yanıt (vuruş) en aza indirmek için normal karşılaştırıcı diz inceleyin.
- 700 gf/cm2 tutarlı ve sert baskı uygulamak için sınav tren 10 PSI Palpometer düzeyi 4; = Bu düzeyde bir basınç uygulandığında cihazın 4 beeps yayarlar. Bu çok fazla baskı sürekli olarak büyük ağrı yanıt--dan normal bir ortak daha ortak bir kireçlenme temin.
Not: Cihazın basıncı uygun düzeyde uygulandığı zaman 4 beeps temin için fabrikada kalibre edilmiş. Cihazın sadece eğitim için kullanın; hayvanlar üzerinde kullanmayın ama hayvanlar incelerken, çok fazla eğitim yoluyla öğrendim baskı uygula. - Fare ile işaret parmağı ve başparmak boyun scruff tutarak ve kuyruk dizginlemek içinth 4 ve 5inci parmak kullanarak rahat hareket önlemek için yeterince sıkı tut. Fare ayrık, kısa hareketleri bir çaba ile ve uyardığında yapmak mümkün olmalı ama özgürce veya sürekli olarak hareket etmek mümkün olmamalıdır.
- Tekrarlanan Firma (Palpometer seviye 4) palpations aynı anda her diz yaklaşık süre fare frenleyici bir dakikalığına saniyede bir kez serbest el parmağı ve başparmak ile ortak satırında lateral ve medial kenarlarına yönetmek. Palpometer fare sınav için kullanmayın; Bu sadece eğitim için kullanılır.
- Hayvan vocalizes ve ilk sayısı bu bir dakikalık zaman dilimi içinde kaçmak için savaşır kez sayısını ikinci bir gözlemci var. Uyarılmış ağrı skor, kavgalar ve vocalizations toplamıdır.
- Her zaman bize çalışma boyunca aynı sınav ve sınav ve gözlemci olarak deneysel durumu kör onaylayın.
5. spontan eklem ağrısı ölçümü.
Not: Gelişmiş dinamik ağırlık taşıyan (IRA) aygıt hayvan her bacak üzerinde geçirdiği toplam zamanın yüzde ve her zor durumda kaynaklı toplam ağırlığının yüzde hesaplar.
- Plastik kabı 2 litre su ile doldurun. Köpük yastık ve ekipman ile birlikte bir laboratuvar ölçekte dolu kabı ile birlikte gelen ve kombine ağırlık kayıt Orta yoğunluk Sunta yerleştirin.
- Ira programı açın ve fareler sensör tipi seçin.
- Her deneme önce sistemi kalibre:
- Tam kalibrasyon kalibrasyon Menüler altında seçin. Dara değeri ve Köpük yastık, Orta yoğunluk sunta, plastik kabı ve su kalibrasyon ağırlıkağırlık olarak 0,00 girin, ardından İleri' yi seçin.
- Dara sensör üzerinde bir şey yerleştirmeden önce seçin. Önizleme kazançseçmeden önce sağlanan Köpük yastık, Orta yoğunluk Sunta ve plastik kabı 2 litre su, o sırada dolu ile sensör pad kapsar. Kalibrasyon ağırlığı sensör üzerinde olduğunda Önizleme kazanç seçin.
- Bireysel sensörler ve kalibrasyon gösterge değerinin 95 olduğunda eşit olarak dağıtılır kalibrasyon ağırlığı ayarlayın, tanım eldeseçin. Bu işlem bireysel sensörler için normalleştirilmiş ortalama üretir ve bireysel sensörler bütünlüğünü doğrular. Son olarak, İleri' yi seçin.
- Kalibrasyon kalibrasyon klasörüne kaydedin.
- Yeni öğesini seçin ve sağlanan Proje adı ve test edilmesi ilk fare hayvan adı girin.
- Göz seçin ve proje için oluşturulan kalibrasyon dosyasını açın. İleri' yi seçin, video yakalama etkinleştir seçilir ve Tamam' ý seçin emin olun.
- Hayvan tartmak, yakalamaseçin ve yazılımda ağırlığı kaydetmek. Tamam' ı seçin.
- Çünkü bu cihaz kendiliğinden davranış önlemler fareler için önce veri toplama odası alışmana değil.
- Fare odasında bir test 5 dk boyunca yerleştirin. Hayvan odasında başlatmakseçin. Yazılım bu dönemde hayvanın etkinliklerini kaydetmek, video yakalama ve sensör verileriyle eşitlemek ve otomatik olarak bu video analyzable ve analyzable olmayan kesimleri içine bölme.
Not: en az bir istikrarlı bölge algıladığında yazılımın kesimleri analyzable dikkate alır. Bir bitişik sensör ≥1 g ve ne zaman bir bölge Ağırlık dağılımı 0,38 daha stabil tespit en az bir görüntü algılayıcı üzerinde ≥2 g sensörleri tespit istikrarlı bir bölgesi oluşturulur s. - Daha önce ilk analizi bir dizi kolay puanlama ve bağımsız ayarı pawsseçin.
Not: Kolay puanlama bu kesimin ilk kararlı bölgenin doğrulama üzerinde yineleme doğrulama nerede istikrarlı bölge değişmez parçalarından dayalı sağlar. Bağımsız pençeleri ayarlama gözlemci ulaşabilen tek tek her pençe tanımlaması izin klavye kısayolları sağlar. Sağ arka olarak minimal ölçütlere uyan, ön, sol arka, sağ ön plana forepaws, diğer vücut parçası yaptı veya segment başına video ve ölçekli harita üzerine imleci tutarak klavye kısayollarını kullanarak bölge görmezden gözlemci atar bölgeler aktive sensörler. - Seçin >> ilk analyzable segmente taşımak için. İstikrarlı bir bölge değil tespit doğru pençe sonra imleci o bölge üzerinde tutun ve kısayol tuşuna basın (sağ arka, s; sol arka, bir; sağ ön, w; sol ön plana, q; her iki forepaws e; diğer bölümü gövdesi, z, bölge, xgörmezden) bu doğru vücut parçası ile karşılık gelir.
Not: En az 1,5 dk analyzable zaman analiz eşikleri karşılamak için gereklidir. Analiz kesimleri eklenir ve otomatik olarak yazılım tarafından çıktı paw(s) başına ortalama olarak. - Ira yazılım sonra harcanan yüzdesi analiz ve vücut ağırlığı (g) her dört kol seçenekleri üzerinde yerleştirilen yüzdesini otomatik olarak hesaplar. Bu değerler, eğer sadece ilk beş Özet satırlarını ihraç edilebilir sonuçlar, ihracat, sor soruyu soran seçilmesi için Evet ve çıkış konumunu seçerek yeni bir elektronik tabloya dışa aktarın.
- Çalışma sonunda Torakotomi tarafından takip CO2 Solunduğunda hayvanlara ötenazi.
- Her ek hayvan aynı grupta, seçme Yeni ve özgün bir hayvan adı girin ama proje adını değiştirmeyin. İleri' yi seçin, video yakalama etkinleştir seçilir ve Tamam' ý seçin emin olun. İlk hayvan gelince 5.5-5.12 adımları izleyin.
Representative Results
Akut ve kronik inflamatuar ve kronik dejeneratif eklem ağrısı ağrı değerlendirme yukarıda belirtilen iletişim kuralı kullanılarak önce C57BL/6J erkek ve dişi farelerin sol diz içine IA enjeksiyonla üretildi. Eklem ağrısı olarak uyarılmış ağrı puanları (EPS) ve spontan ağrı davranışları ölçülen ile ölçülen (IRA) taşıyan bir gelişmiş dinamik ağırlık aygıt. Bu rapor amacı gereği, öğrencinin t testleri kullanarak bireysel karşılaştırmalar yapılmıştır. Analjezik dozlarda nerede karşılaştırıldığında deneyler için ANOVA daha uygun istatistiksel karşılaştırma olabilir.
EPS (sayımı kavgalar artı vocalizations toplamı) üç tür eklem ağrısı (şekil 1) ile arttı. Ira önlemler yüzde ağırlığı saf fareler için karşılaştırıldığında sol arka bacak üzerinde taşıyan akut ve kronik inflamatuar eklem ağrıları içinde düşürüldü. Kadın ama değil erkek ile kronik dejeneratif IRA önlemler (Şekil 2A) gösterdi ağrı (COL) benzer düşüşler ortak. Erkek akut inflamatuar eklem ağrısı ile ön ayakları daha naif hayvanlar daha fazla ağırlık aktarılır. Ağırlık ön ayakları üzerinde taşıyan dişi farelerde saf için karşılaştırıldığında ama değil erkeklerde kronik dejeneratif eklem ağrısı (COL) (Şekil 2B) arttı. Ira önlemler ile akut ve kronik inflamatuar eklem ağrısı, ama bu saf farelerde kıyasla yüzde zaman azalmıştır etkilenen sol arka bacak üzerinde istatistiksel olarak anlamlı değildi. Bu hayvanların sol arka bacak sağ arka bacak üzerinde önemli ölçüde daha az zaman harcadın. Kadın ve erkeklerde kronik dejeneratif eklem ağrısı ile içinde saf için karşılaştırıldığında sol arka bacaklarda üzerinde harcanan süre hiçbir fark vardı. Kadın ile kronik dejeneratif eklem ağrısı nonarthritic doğru hind naif (şekil 3A) göre bacak üzerinde daha fazla zaman harcadı. Fare ile akut inflamatuvar ortak acı ve kadın ile kronik dejeneratif eklem ağrıları önemli ölçüde daha naif hayvanlar (şekil 3B) ön ayakları üzerinde daha fazla zaman harcadı.
Resim 1 . (Mavi sütun) sol ve sağ (kırmızı sütun) arka bacaklarda ağrı puanları uyarılmış. Sağ arka bacaklarda iç kontrol devam eder ve herhangi bir IA enjeksiyonları tabi değil. Ölçümler aşağıdaki koşullarda alınmıştır: uninjected saf (erkek ve dişi), akut inflamatuar alprazolzm kaynaklı artrit (CAR), kronik inflamatuar komple Freund's adjuvan kaynaklı artrit (CFA) ve kronik noninflammatory Artrit (COL - erkek ve kadın) collagenase kaynaklı. Saf hayvanlarda sol arka diz EPS değil erkeklerde sağdan istatistiksel olarak farklı ve sadece kadın en az farklı (**P = 0,038) büyük olasılıkla bazı nedeniyle ağrı yanıt olarak incelendiğinde diz arttı crossover ağrı nedeniyle ikinci (solda) yanıt. Tüm artritik gruplar halinde artritik sol diz EPS nonarthritic kontralateral sağ diz önemli ölçüde daha fazla. Sol diz artrit grupların naif hayvanlar için EPS karşılaştırırken, tüm artrit grupları artritik sol diz saf sol diz göre önemli ölçüde daha fazla EPS puanları vardı. Bu erkek ve kadın doğruydu. P < 0,05 erkek saf için karşılaştırıldığında, #P < 0,05 için kadın saf karşılaştırıldığında. Tüm hata çubukları SEM bütün rakamlar vardır. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Resim 2 : Spontan ağrı davranış ölçülen üzerinde bacaklarda kaynaklı yüzde vücut ağırlığı ile. (A)spontan ağrı davranış Toplam yüzde vücut ağırlığı (mavi sütun) sol ve sağ (kırmızı sütun) arka bacaklarda tarafından ölçülür. Her iki erkek ve dişi saf hayvanlarda yüzde ağırlığı sol ve sağ arka bacaklarda kaynaklı arasında anlamlı bir fark vardı. Eklem ağrısı erkek fare araba ve CFA ile indüklenen ve kadın indüklenen COL eklem ağrısı ile saf için karşılaştırıldığında sol arka bacak üzerinde önemli ölçüde daha az ağırlık taşıyordu. P < 0,05 erkek saf için karşılaştırıldığında, #P < 0,05 için kadın saf karşılaştırıldığında. (B) spontan ağrı davranış Toplam yüzde vücut ağırlığı tarafından ölçülen ön ayakları üzerinde yerleştirilir. Araba bağlı akut eklem ağrısı ile kadın ve erkek indüklenen COL kronik eklem ağrısı ile içinde ön ayakları üzerinde kaynaklı ağırlık miktarında önemli bir artış oldu. Bu CFA ile erkeklerde görülen değildi veya COL indüklenen eklem ağrısı. Saf kadın eğilimi ön ayakları naïve erkeklerden daha fazla ağırlık ayı (P = 0.02). Ek ağırlık kuyruk veya kıç gibi diğer vücut parçaları tarafından karşılanacaktır. Bunlar genellikle çok az ve önemli ölçüde ağrı yanıt anlamak için katkı değil ve bu nedenle görüntülenmez. P < 0,05 erkek saf için karşılaştırıldığında, #P < 0,05 kadın saf ve erkek 4 hafta COL forelimb Aðýrlýk göre. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Şekil 3: spontan ağrı davranış yüzde zamanla ölçülen bacaklarda üzerinde harcanan. (A)spontan ağrı davranış üstünde belgili tanımlık sol (mavi sütun) ve sağ (kırmızı sütun) arka bacaklarda harcanan toplam yüzde süre tarafından ölçülen. Erkek ve dişi saf fareler bacak üzerinde harcanan süre ile ilgili olarak sağ ve sol arka bacaklarda arasında anlamlı bir fark vardı. Erkek fare araba ve CFA ile indüklenen artrit daha az zaman Aðýrlýk kireçlenme ile geçirmek için sol arka bacak saf, ama bu karşılaştırıldığında istatistiksel olarak anlamlı değildi ve olasılığı nedeniyle artan değişkenlik bu farelerde bu ölçüde ortaya çıktı. Sağdan sola doğru hind bacak sol daha daha fazla toplam süre Aðýrlýk harcanan karşılaştırarak bu hayvanların önemli bir fark vardı. Kadın indüklenen COL artrit ile sağ arka bacak Aðýrlýk saf dişilerde zamanının daha büyük bölümünü oldu. P < 0,05 sağda solda, #P < 0,05 kadın saf ve erkek 4 hafta COL zamanında göre karşılaştırma ön ayakları üzerinde geçirdi. (B) spontan ağrı davranış zaman toplam miktarına göre ölçülen ön ayakları üzerinde geçirdi. Araba indüklenen artrit ile kadın ve erkek indüklenen COL artrit ile naif hayvanlar daha anlamlı olarak daha fazla zaman Aðýrlýk ön bacaklarda üzerinde fareyi geçirdi. Kadın saf fareler erkek saf hayvanların daha ön ayakları üzerinde daha fazla zaman harcadı. P < 0,05 erkek saf için karşılaştırıldığında, #P < 0,05 için kadın saf karşılaştırıldığında. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Discussion
Eklem ağrısı inflamatuar artrit ve dejeneratif eklem hastalığı Preklinik modellerin ölçülmesi yeni tedaviler için artrit ağrı ve eklem fonksiyonu9,10geri yükleme için değerlendirmek için giderek daha değerli bir araçtır. Ağrı davranışları ile kronik dejeneratif eklem hastalığı farelerde ölçme meydan okuyor. Quadrupeds, onlar üç diğer uzuvları veya kuyruk için acı verici bir uzuv hafifletebilecek. Azalmış bir uzuv işlevinde belli ki iki ayaklı insanlarda olduğu gibi olarak görüntülenmeyebilir. Hayvanlar av, fare ağrı davranışları en aza indirmek için bir hayatta kalma yarar var.
Bu raporu farklı patolojik mekanizmaları eklem ağrısı farelerde basit ve nispeten ucuz yöntemlerle ölçülebilir gösterir. İnflamatuar eklem ağrısı ağırlık zaman ve dağıtım taşıyan büyük değişikliklere neden olur ve bu nedenle analjezi tespiti için daha duyarlı bir model olabilir. Ancak, diğer modelleri eklem ağrısı, ağrı başlatma ve bakım mekanizmaları olasılığı olduğundan yeni potansiyel analjezikler değerlendirirken önemli olacaktır farklı farklı patoloji ile. Kadın ve erkek arasında ve artrit ağrı farklı modeller arasında farklılıklar yükü hafifletme şekillerindeki bulduk.
Bunda de zorlanma olması olarak fareler14,15,16ağrı davranış farklılıkları cinsiyet tanımak önemlidir. Bu da ağrı eşikleri ayrı zorlanma farklılıklar vardır bilinen. C57/Bl6 fareler, önemli ölçüde daha spontane ağrı davranışlar (artan ağırlığı ve ön ayakları zamanında) (Şekil 2 ve şekil 3) Kronik dejeneratif eklem ağrısı ile erkek fareler daha kadın göstermiştir bulduk. Biz bizim sonuçları üzerinde herhangi bir etkisi vardı, ama diğerleri bu estrus faz C57/Bl6 fareler17gözlenen cinsiyet farklılıkları açıklama yapmayan tespit var olup olmadığını söyleyemem bu yüzden estrus aşama bu dişi fareler için belirleriz değil.
Uyarılmış ağrı davranış eklem ağrısı test her türlü duyarlı ve iyi tekrarlanabilirlik vardır. Bu sınav tutarlı, standart palpasyonla basınç teslim ve ağrı ve analjezi algılamak için acı davranış çeşitli sağlar tutarlı kısıtlama yöntemleri kullanmak için eğitim çok önemlidir. Her zaman önce bir crossover etkisi nedeniyle normal diz ağrısı yanıtta en aza indirmek ve ağrı yanıt normal ve ağrılı diz arasındaki farkı en üst düzeye çıkarmak için normal diz incelemek önemlidir. EPS kadar yapmak ağrı yanıtları kaydetmesini ikinci bir gözlemci kullanarak sınav tutarlı palpasyonda odaklanır ve vocalizations ve kavgalar sürekli talebiyle gerekli olmasıdır. Kısıtlama yöntemi özellikle hayvan acı için yeterince tepki verebilir ama çok kolay ağrı yanıt sulandırmak için tepki vermez emin olmak için uygulama gerekli olabilir. Bir avantaj EPS ölçü insan hastalarda eklem hassasiyet ölçme için benzer olmasıdır.
Biz hissediyorum doğrudan ağrı fareler diz eklemleri geliyor ölçmek bu yöntemler için varolan yöntemleri üstün bulunmaktadır, monoarthritis ağrı farklı modellerinde kullanılabilir, her iki spontan ve uyarılmış ağrı yanıt-e doğru eklemek ve nispeten ucuz ama güvenilir ve tekrarlanabilir. Tedaviler daha etkili bir şekilde artrit tedavisi için geliştirilen, bu yöntemler tedaviler için artrit, acı, en devre dışı bırakılması sonucunu aslında etkili olup olmadığını teyit için yararlı olacaktır.
Bizim yöntemleri bazı kısıtlamalar bulunmaktadır. Öncelikle, EPS ölçü birimi tek bir araştırmacı ve gözlemci gereksinimini ve çok tutarlı tekniği için ihtiyaç ile sınırlıdır. Uyarılmış ağrı ölçümleri daha otomatiktir ve arası gözlemci farklılıklar gibi değil tabidir. EPS ölçü daha fazla ayrıntılandırma vocalizations palpasyonla vocalizations saymak için bir ultrasonik yarasa dedektörü kullanma gibi yanıt olarak sayma için otomatik yöntemleri içerebilir. Bu yöntem yaygın olarak uygulanabilecek önce duyarlılık ve özgüllük doğrulamak için geçerli bizim yöntem için Karşılaştırılacak gerekir.
Özetle, farelerde eklem ağrısı miktarının için iki farklı ağrı davranış tedbirler açıklanmaktadır. Bir deneme modeli seçmeden önce cinsiyet ve gerilim farkları dikkate alınmalıdır. Önlemler uyarılmış acı dikkatli eğitim ve tutarlı uygulama tarafından sınav gerektirir. Her iki spontan ve uyarılmış ağrı davranış ağrı şiddeti ve fonksiyonel sınırlama değerlendirmek için tavsiye edilir ve tamamen yeni potansiyel ilaçlar etkilerini değerlendirmek için kullanılması.
Disclosures
Yazarlar ifşa gerek yok.
Acknowledgments
Bölümü gazileri işleri MERIT Ödülü 2 tarafından finanse edilen I01 RX000379-05.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Advanced Dynamic Weightbearing Device | Bioseb In Vivo Research Instruments, Vitrolles, France | Model: BIO-DWB-M - For mice | |
| C57/Bl6 mice (male and female) | Jackson Labs, Bar Harbor ME | Stock No: 000664 | Black 6 | |
| Carrageenan | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | 22049-5G-F | |
| Complete Freund's Adjuvant | Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA | F5881 | |
| Palpometer | Palpometer Systems, Inc. Victoria, B.C | Not available - no longer in business | |
| Type IV Collagenase | Worthington Biomedical Corp, Lakeville, NJ | LS004210 |
References
- Neggi, T. The epidemiology and impact of pain in osteoarthritis. Osteoarthritis and Cartilage. 21, 1145-1153 (2013).
- Center for Disease Control and Prevention. Prevalence of doctor-diagnosed arthritis and arthritis-attributable activity limitation - United States, 2007-2009. Morbidity and Mortality Weekly Report. 59, 1261-1265 (2010).
- Kaye, A., et al. Prescription Opioid Abuse in Chronic Pain: An Updated Review of Opioid Abuse Predictors and Strategies to Curb Opioid Abuse: Part 1. Pain Physician. 20, 93-109 (2017).
- Maheu, E., et al. Why we should definitely include intra-articular hyaluronic acid as a therapeutic option in the management of knee osteoarthritis: Results of an extensive critical literature review. Seminars in Arthritis and Rheumatism. , (2018).
- Malfait, A. -M. Why we should study pain in animal models of rheumatic diseases. Clinical and Experimental Rheumatology. 35, 37-39 (2017).
- Piel, M. J., Kroin, J. S., van Wijnen, A. J., Kc, R., Im, H. -J.
- Dorman, C. W., Krug, H. E., Frizelle, S. P., Funkenbusch, S., Mahowald, M. L. A comparison of DigiGait™ and TreadScan™ imaging systems: assessment of pain using gait analysis in murine monoarthritis. Journal of Pain Research. 7, 25-35 (2013).
- Barton, N., et al. Pressure application measurement (PAM): A novel behavioural technique for measuring hypersensitivity in a rat model of joint pain. Journal of Neuroscience Methods. 163, 67-75 (2007).
- Bert, J., et al. The Effect of Treatment with Resiniferatoxin and Capsaicin on Dynamic Weight Bearing Measures and Evoked Pain Responses in a Chronic Inflammatory Arthritis Murine Model. Internal Medicine Review. 2016 (6), 89 (2016).
- Abdullah, M., et al. The effect of intra-articular vanilloid receptor agonists on pain behavior measures in a murine model of acute monoarthritis. Journal of Pain Research. 9, 563-570 (2016).
- Anke, T. T., Kuner, R. Studying ongoing and spontaneous pain in rodents - challenges and opportunities. European Journal of Neuroscience. 39, 1881-1890 (2014).
- National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals. , National Academies Press. (2011).
- Kuner, R.
- Banik, R., Woo, Y., Park, S., Brennan, T. Strain and Sex Influence on Pain Sensitivity after Plantar Incision in the Mouse. Anesthesiology. 105, 1246-1252 (2006).
- Mogil, J. S., Chesler, E., Wilson, S. G., Juraska, J. M., Sternberg, W. F. Sex differences in thermal nociception and morphine antinociception in rodents depend on genotype. Neuroscience & Biobehavioral Reviews. 24, 375-389 (2000).
- Mogil, J., et al. Heritability of nociception I: Responses of 11 inbred mouse strains on 12 measures of nociception. Pain Physician. 80, 67-82 (1999).
- Meziane, H., Ouagazzal, A. -M., Aubert, L., Wietrzych, M., Krezel, W. Estrous cycle effects on behavior of C57BL/6J and BALB/cByJ female mice: implications for phenotyping strategies. Genes, Brain, and Behavior. 6, 192-200 (2007).
