Summary
هنا نصف، خطوة بخطوة، بروتوكول مفصل لأداء تخطيط صدى القلب في نموذج الأرنب. نعرض كيفية الحصول بشكل صحيح على مختلف وجهات النظر صدى القلب وطائرات التصوير، فضلا عن وسائط التصوير المختلفة المتاحة في نظام تخطيط صدى القلب السريرية المستخدمة بشكل روتيني في المرضى البشريين والبيطريين.
Abstract
النماذج الحيوانية الكبيرة مثل الأرنب هي قيمة للبحوث ما قبل السريرية الترجمة. الأرانب لديها الفيزيولوجيا الكهربائية القلبية مماثلة بالمقارنة مع أن من البشر وتلك من النماذج الحيوانية الكبيرة الأخرى مثل الكلاب والخنازير. ومع ذلك، فإن نموذج الأرنب لديه ميزة إضافية من انخفاض تكاليف الصيانة بالمقارنة مع النماذج الحيوانية الكبيرة الأخرى. التقييم الطولي لوظيفة القلب باستخدام تخطيط صدى القلب، عند تنفيذه بشكل مناسب، هو منهجية مفيدة للتقييم قبل السريرية من العلاجات الجديدة لفشل القلب مع انخفاض جزء الإخراج (مثل تجديد القلب). ويتطلب الاستخدام الصحيح لهذه الأداة غير الغازية تنفيذ بروتوكول موحد للفحص وفقا للمبادئ التوجيهية الدولية. هنا نقوم بوصف، خطوة بخطوة، بروتوكول مفصل يشرف عليه أطباء القلب البيطريين لإجراء تخطيط صدى القلب في نموذج الأرنب، ونبين كيفية الحصول بشكل صحيح على وجهات النظر صدى القلب المختلفة وطائرات التصوير، فضلا عن طرق التصوير المختلفة المتاحة في نظام تخطيط صدى القلب السريرية المستخدمة بشكل روتيني في المرضى البشرية والبيطرية.
Introduction
التقييم الطولي لوظيفة القلب في النماذج الحيوانية الكبيرة هو منهجية بحثية قوية تستخدم عادة لتقييم آثار العلاجات الجديدة لعلاج اعتلال عضلة القلب الإقفاري وغير الإقفاري. من بين العديد من تقنيات التصوير القلبي الوعائية المتاحة للبحوث ما قبل السريرية، وقد استخدمت تخطيط صدى القلب على نطاق واسع بسبب خصائصه غير الغازية والمحمولة. في الأيدي من ذوي الخبرة، تخطيط صدى القلب هو أيضا تقنية التصوير قابل للاستنساخ جدا لدراسة تشريح القلب، فضلا عن وظيفة الانقباضي والانبساطي للقلب.
نماذج الحيوانات الكبيرة قبل السريرية مثل الخنازير والكلاب والأرانب،هي في المقام الأول للبحوث ما قبل السريرية الترجمة 1،2،3. في الواقع، فإن الفائدة المحتملة من العلاجات الجديدة مثل الطب التجديدي القلب في وضع اعتلال عضلة القلب يتطلب اختبار فرضية واسعة النطاق في نماذج ما قبل السريرية الكبيرة قبل أن يمكن النظر فيها للاستخدام البشري2،4 . بالمقارنة مع نماذج أخرى كبيرة ما قبل السريرية, نموذج الأرنب يقدم بعض المزايا, بما في ذلك انخفاض تكلفة الصيانة, وهو ما يشبه أن الفئران والفئران. ومع ذلك، على النقيض من الفئران والفئران، ونظام النقل Ca+2 والفيزيولوجيا الكهربائية القلبية متشابهة في الأرانب مثل تلك التي من البشر، وتلك من النماذج الحيوانية الكبيرة الأخرى مثل الكلاب والخنازير، وبالتالي زيادة القدرة الترجمة للأرنب نموذج1,5. ولذلك، فإن الأرنب، كنموذج تجريبي كبير قبل السريرية، لديه توازن استثنائي من التكلفة واستنساخ للبحوث الترجمة قبل السريرية.
الأرنب لديه فائدة إضافية من القدرة على التصوير صدى القلب باستخدام وحدات الموجات فوق الصوتية السريرية المستخدمة بشكل روتيني في المرضى البشرية والبيطرية، وبالتالي الاستفادة من تفوق التصوير التوافقي والدولة من بين الفن التكنولوجيا. ولهذا الغرض، يفضل محولات القطاع (المعروفة أيضاً باسم مجموعة المراحل) ذات التردد العالي نسبياً (حتى 12 ميغاهيرتز)، مثل تلك المستخدمة في أمراض القلب لحديثي الولادة/الأطفال. يسمح فحص تخطيط صدى القلب في نموذج ما قبل السريرية الأرنب التقييم الكامل للوظيفة الانقباضي والانبساطي باستخدام وجهات نظر متعددة وطرق مختلفة متاحة في وحدات تخطيط صدى القلب الحديثة (على سبيل المثال موجة دوبلر المستمرة (CWD)، نبض موجة دوبلر (PWD)، وتصوير دوبلر الأنسجة (TDI)).
تخطيط صدى القلب هو تقنية تعتمد على المشغل، وبالتالي يتطلب تدريبا مكثفا ومعرفة أساسية لهذه التقنية وفقا للمبادئ التوجيهية الدولية. ويمكن تسهيل جزء من هذا التدريب مع تصور أشرطة الفيديو التي تشرح بالتفصيل كيف يمكن الحصول على وجهات نظر صدى القلب مختلفة. إن تحقيق كفاءة عالية في التصوير القلبي، فضلا عن وضع بروتوكول موحد وتقنية صحيحة، أمران أساسيان للتقليل إلى أدنى حد من تأثير المشغل وتوليد بيانات كمية موثوقة، على النحو المطلوب في الدقة الصارمة البحث العلمي.
بعض الاعتبارات ضرورية فيما يتعلق بالنظام والإعداد المختبر المستخدمة لتصوير صدى القلب في الأرانب وغيرها من النماذج الحيوانية الكبيرة. لإجراء تقييم صدى القلب عبر الصدر القياسي لوظيفة القلب، يجب أن يتضمن نظام الموجات فوق الصوتية الطرائق التالية: الوضع ثنائي الأبعاد (وضع B أو 2D)، ووضع الحركة (وضع M)، ودوبلر اللون، وكذلك CWD، PWD وTDI. وعلاوة على ذلك، يجب أن يكون الجهاز كامل تحليل القلب وأجهزة القياس المثبتة، فضلا عن مساحة كافية على القرص الصلب الداخلي لتخزين ما يكفي من الصور الرقمية عالية الجودة الثابتة وحلقات الفيديو لتحليل حاليا. تستخدم بعض الأنظمة محولات صفيف خطية؛ ومع ذلك، للحصول على أفضل تصوير للقلب، ويفضل محولات قطاع صفيف على مراحل مع قطر رأس مسح صغير، لأن هذه تسمح بمرور أسهل من الموجات فوق الصوتية من خلال المساحات الوربية الضيقة. للأرانب، ونحن نستخدم محولات عالية التردد نسبيا (تصل إلى 12 ميغاهيرتز). موقف الحيوان للتصوير هو في غاية الأهمية للحصول على صور ذات نوعية جيدة. وهكذا، ينصح كل من اليمين واليسار مواقف الانفعال الجانبي للحصول على جميع طائرات التصوير القياسية أثناء فحص صدى القلب. لهذا، طاولة مع الشق الذي يتزامن مع منطقة القلب في الصدر من المستحسن (الشكل1A). هذا الجدول حقق يسهل الوصول مع محول إلى منطقة الصدر التي سيتم مسحها ضوئيا، وبالتالي يسمح التنقل الحر من ناحية المشغل عصا الحفاظ على أفضل موقف المسح الضوئي للالحيوان. وضع الحيوان في وضع الانعزل الجانبي يؤدي إلى سقوط القلب نحو محول وارتفاع الرئتين، فضلا عن توسيع نافذة الوصول إلى شعاع الموجات فوق الصوتية من خلال المساحات الوربية، وبالتالي تحسين التصوير العام الجودة(الشكل 1A). يجب إجراء فحص تخطيط صدى القلب بطريقة عمياء واتباع المبادئ التوجيهية للجنة تخطيط صدى القلب التابعة للكلية الأمريكية للطب الباطني والجمعية الأمريكية لتصوير صدى القلب/الأوروبية جمعية تصوير القلب والأوعية الدموية6و7و8.
ويرتبط جزء من فريقنا العلمي مع خدمة أمراض القلب في مستشفى التعليم البيطري الذي يحضر يوميا للمرضى البيطريين (مثل الكلاب والقطط)، والتي لديها التدريب ذات الصلة والاعتماد في أمراض القلب البيطرية و تخطيط صدى القلب، وطرائق التصوير المختلفة، فضلا عن خبرة واسعة في تصوير أحجام مختلفة من المرضى الحيوانية والتكوينات الصدرية مع هذه التقنية. وبالإضافة إلى ذلك، ونحن عادة استخدام تخطيط صدى القلب للتقييم الطولي لوظيفة القلب في نموذج أرنب اعتلال عضلة القلب الناجمة عن الجمرة الخبيثة9. هنا، ونحن نصف خطوة خطوة بروتوكول تخطيط صدى القلب لتقييم وظيفة القلب باستخدام وحدة الموجات فوق الصوتية السريرية في نموذج كبير ما قبل السريرية مثل الأرنب. تم تكييف هذا البروتوكول للمبادئ التوجيهية الدولية الحالية8، ويتضمن توصيات عملية على أساس تجاربنا الخاصة في البيئات السريرية والتجريبية.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
تمت الموافقة على التجارب الموضحة هنا من قبل لجنة البحوث الأخلاقية في جامعة مورسيا، إسبانيا، وأجريت وفقا للتوجيه 2010/63/EU من المفوضية الأوروبية. وقد تم تنفيذ الخطوات الموصوفة بموجب بروتوكولات التشغيل الموحدة التي كانت جزءا من خطة العمل ولم تنفذ فقط لغرض تصوير الفيديو المرفق بهذه الورقة.
1. إعداد الأرنب
- قبل الشروع، تبدأ عن طريق حقن مزيج من الكيتامين (10 ملغ / كغ) متجانسة في نفس الحقنة مع medetomidine (200 ميكروغرام / كغ) لالتخدير الحيوان، مما يقلل من الإجهاد من الإجراء للأرنب.
ملاحظة: استخدام التخدير يقلل أيضا من معدل ضربات القلب بطريقة يمكن التنبؤ بها، وبالتالي الحد من التباين بين الأفراد، ولها فائدة إضافية من تحسين جودة التصوير عموما. كما هو موضح في الفيديو، تغطية الرأس مع بطانية الجراحية للمساعدة في الحفاظ على الهدوء الحيوان أثناء حقن التخدير.- تحقق من أن الحيوان هو التخدير تماما في غضون 10-20 دقيقة، من خلال تأكيد وجود مترهل العضلات، وعدم وجود رد الفعل palpebral، والحركات الفكالسفلي واستنشاق. وجود علامتين الأخيرتين (الحركات الفكية واستنشاق)، هي بدورها العلامات الأولى لانخفاض عمق التخدير. على الرغم من أنه نادرا ما تكون هناك حاجة، ينبغي النظر في إعادة الجرعات (على سبيل المثال نصف مزيج الجرعة المخدرة الأولية)، إذا كان من المتوقع تأخير طويل من أجل إكمال الإجراء.
ملاحظة: في حين أن الحيوان سوف تغفو بسرعة في غضون أول ~ 5 دقائق بعد الحقن، فمن المستحسن للسماح لمستوى أعمق من التخدير قبل محاولة التلاعب الحيوان. هذا التأخير سوف تجنب المؤلم الأرنب، والتي من المرجح خلاف ذلك تنتج عدم انتظام دقات القلب وتؤثر سلبا على دقة التصوير واستنساخ بعض المعلمات أثناء فحص صدى القلب (على سبيل المثال تحليلات تدفق الصمام التاجي). - بمجرد أن يتم التخدير الحيوان، استخدم المقص الشعر لإزالة الشعر من جلد الصدر. تبدأ تحت خط الرقبة والاستمرار في مستوى كل من المناطق تحت الجلد الأيمن والأيسر، فضلا عن المنطقة دون xiphoid في خط الوسط (الشكل1B).
- اقطع 1-3 سم2 من الوجه الداخلي للأطراف الأمامية اليمنى، فضلا عن المناطق الميديوتيبية من كل من الأطراف الخلفية اليمنى واليسرى (الشكل1B).
- تحقق من أن الحيوان هو التخدير تماما في غضون 10-20 دقيقة، من خلال تأكيد وجود مترهل العضلات، وعدم وجود رد الفعل palpebral، والحركات الفكالسفلي واستنشاق. وجود علامتين الأخيرتين (الحركات الفكية واستنشاق)، هي بدورها العلامات الأولى لانخفاض عمق التخدير. على الرغم من أنه نادرا ما تكون هناك حاجة، ينبغي النظر في إعادة الجرعات (على سبيل المثال نصف مزيج الجرعة المخدرة الأولية)، إذا كان من المتوقع تأخير طويل من أجل إكمال الإجراء.
- بعد وضع الأرنب على بطانية حرارية أو وسادة التدفئة لتجنب انخفاض حرارة الجسم أثناء الإجراء، وتطبيق هلام إجراء مناسبة للأقطاب الكهربائية ووضع هذه في المناطق حلق من الأطراف. إصلاح الأقطاب الكهربائية مع الشريط الجراحي.
- تحقق من عرض إشارة تخطيط القلب الصحيح على شاشة النظام؛ عادة ما يكون تتبع القلب الكهربائي المتزامن 1-الرصاص كافيا لرصد إيقاع القلب بشكل متزامن خلال الدراسة صدى القلب كله (الشكل1A والشكل 1C).
ملاحظة: بالإضافة إلى معدل ضربات القلب، ومراقبة معدل التنفس وكذلك درجة الحرارة. يمكن مراقبة معدل التنفس بصريا أو من خلال حدوث الحركات الصدرية في الصورة صدى القلب، في حين ينبغي رصد درجة الحرارة عن طريق التحقيق المستقيم. وينبغي رصد هذه المعلمات في البداية، ثم كل 10 دقيقة وفي نهاية الإجراء. الأرانب لا تميل إلى القيء أثناء التخدير10,11; لذلك ، لا ينصح بصيام الأرانب بشكل روتيني قبل فحص صدى القلب.
الشكل 1 . إعداد وتحديد المواقع من الأرنب لتصوير صدى القلب. (أ) الجدول مع الشق الذي يتزامن مع منطقة القلب ليتم تصويرها. (ب) إزالة الشعر من الصدر. (C) إرفاق أقطاب تخطيط القلب لمراقبة القلب. (د) تحديد موقع المشغل أثناء تشكيل فحص تخطيط صدى القلب مسبقاً. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
2. محور طويل Parasternal (sagittal) عرض القلب
- للحصول على محور طويل (PSLAX) عرض القلب، ضع الأرنب في وضع المنقلب الجانبي الأيمن، مع الأطراف الأمامية الممدودة بعيدا ً عن الصدر، مع الشريط الجراحي (الشكل1A والشكل 1C).
- لتحقيق أفضل جودة تصوير ممكنة، من المهم الحفاظ على جلد المنطقة الصدرية مسطحة قدر الإمكان لزيادة الاختراق وتحسين جودة التصوير بشكل عام أثناء تصوير الحيوان. لهذا، عقد الصدارة بعيدا عن الصدر بيد واحدة، في حين استخدام اليد الحرة لتحديد أي طيات الجلد وجيوب، تسطيح هذه من أعلى إلى أسفل، ونقل أي الجلد للطي بعيدا عن الصدر نحو الجانب الجانبي والجزء الخلفي من الأرنب. وهذا مهم بشكل خاص للأرانب الأكبر سنا ً والأكبر حجماً التي يمكن أن تقلل بشرتها المفرطة وأنسجة الدهون تحت الجلد من جودة الصورة.
ملاحظة: يجب وضع منطقة القلب في الصدر فوق قسم القطع في الجدول. ومع ذلك، نضع في اعتبارنا أن، في هذا الموقف، والبطن لديه ميل طبيعي للتحرك نحو الشق، ويخلق ضغطا إيجابيا أن يحل محل القلب القحفي، والذي يتداخل بعد ذلك مع التصوير صدى القلب جيدة. لمنع ذلك ، من المهم أن البطن تقع تماما على الطاولة ، ولتحقيق ذلك ، فمن المفيد تحريك أعضاء البطن بلطف نحو المنطقة الكاوية من الحيوان من خلال تدليك لطيف (الشكل1A والشكل 1C).
- لتحقيق أفضل جودة تصوير ممكنة، من المهم الحفاظ على جلد المنطقة الصدرية مسطحة قدر الإمكان لزيادة الاختراق وتحسين جودة التصوير بشكل عام أثناء تصوير الحيوان. لهذا، عقد الصدارة بعيدا عن الصدر بيد واحدة، في حين استخدام اليد الحرة لتحديد أي طيات الجلد وجيوب، تسطيح هذه من أعلى إلى أسفل، ونقل أي الجلد للطي بعيدا عن الصدر نحو الجانب الجانبي والجزء الخلفي من الأرنب. وهذا مهم بشكل خاص للأرانب الأكبر سنا ً والأكبر حجماً التي يمكن أن تقلل بشرتها المفرطة وأنسجة الدهون تحت الجلد من جودة الصورة.
- للتصوير صدى القلب، عقد محول مع اليد اليمنى، في حين تستخدم اليد اليسرى لتشغيل ضوابط نظام تخطيط صدى القلب كما هو مبين في الشكل 1D.
- للحفاظ على اتصال جيد مع الجلد، وتطبيق الإيثانول غير المخفف على الجلد ومن ثم ما يكفي من هلام نقل الموجات فوق الصوتية إلى رئيس محول.
- بعد ذلك، وضع محول عن كثب إلى جلد hemithorax الحق، على مستوى الفضاء بين الوكوستال الثاني إلى الثالث وحوالي 1-3 سم بعيدا عن خط parasternal الحق، مع علامة اتجاه محول مشيرا إلى الكتف الأيمن للحيواني و بزاوية 30 درجة تقريباً بالنسبة إلى خط الوسط (الشكل2A). وينبغي أن ينتج عن ذلك صورة لـ PSLAX الصحيح للقلب (انظر النتائج التمثيلية).
- بمجرد عرض صور القلب 2D على الشاشة، والخطوة التالية هي لضبط الضوابط وحدة الموجات فوق الصوتية للحصول على الصور المثلى. أهمها:
- عناصر تحكم العمق والتكبير/التصغير: استخدم عناصر التحكم هذه لتحسين منطقة الاهتمام. يجب أن يكون عمق الصورة كافياً بحيث يمكن رؤية هياكل القلب على كل صورة. استخدم أداة التكبير/التصغير لتحسين تقييم الهياكل ذات الأهمية، مثل سلامة الصمامات والمنشورات.
- إجمالي المكاسب وتعويض الكسب الزمني (أي، إعدادات الكسب في أعماق مختلفة في الوقت الحقيقي): التحكم في المقاييس الرمادية والمكاسب يدويا ً لتقليل الضوضاء الخلفية وتعظيم تحديد هياكل القلب. هذه المعلمات مهمة بشكل خاص في الأرانب بسبب صدى الصدى الفقراء من عضلة القلب البطيني.
- النطاق الديناميكي أو الضغط الديناميكي: استخدم عنصر التحكم هذا لضبط عدد ظلال الرمادي التي يتم عرضها بواسطة الصورة. تعيين النطاق الديناميكي بحيث تجمع الدم مظلمة والأنسجة مشرقة. سيؤدي ذلك إلى تعريف أفضل للحدود الداخلية، وهو أمر مهم للحصول على وحدات تخزين البطين الأيسر.
- عرض القطاع: ابدأ الفحص بقطاع واسع (90 درجة) وبعد نظرة عامة على القلب، قم بتقليل عرض القطاع إذا كانت هناك حاجة إلى تصوير مناطق معينة بشكل أفضل. يقلل من حجم القطاع يحسن الدقة الزمنية عن طريق زيادة معدل الإطار. وهذا مهم بشكل خاص عندما يتم استخدام تخطيط صدى القلب 2D لتوجيه فحص دوبلر.
- للحفاظ على موقف محول أثناء تصوير الأرنب، والحد من التعب من المشغل، واستخدام السبابة لرسو اليد إلى الجدول أو الصدر من الحيوان، في حين أن الأصابع الأخرى عقد محول (الشكل2A).
- الحصول على طائرتي تصوير رئيسيتين للقلب في عرض PSLAX الأيمن.
- العثور على طائرة التصوير التي أقسام القلب طوليا وحيث يمكن تحديد جميع الغرف الأربع للقلب (اثنين من الأذينين والبطينين) ؛ أيضا، عندما يتم استخدام مجال واسع من وجهة النظر، يجب أن تظهر قمة القلب أيضا في العرض على الجانب الأيسر من الصورة (انظر قسم النتائج التمثيلية).
- أداء حركات خفية من محول، مثل كاسحة، هزاز والتناوب، بالنسبة إلى الفضاء الوربي، فضلا عن زاوية الجمجمة وdorsoventral من شعاع الموجات فوق الصوتية للحصول على مستوى التصوير الأخرى من عرض محور طويل parasternal ( الشكل 2ألف، باء). في مستوى التصوير الآخر، يمكن تحديد مسار تدفق البطين الأيسر (LVOT) والأبهر (انظر النتائج التمثيلية).
- اتجاه الصورة: لاحظ أن قاعدة القلب ستكون على الجانب الأيمن من صورة القطاع.
- بعد الحصول على طائرات التصوير المناسبة، استخدم B-mode لتقييم الوظيفة العامة للقلب، واستخدام دوبلر اللون لتقييم تدفق الدم عبر جميع الصمامات وكذلك سلامة الحاجز التداخلي (IVS).
ملاحظة: دوماً حفظ الصور من طرق العرض المختلفة والطائرات للتحليل دون اتصال.
الشكل 2 . كيفية الحصول على عرض PSLAX للقلب. (ألف-باء) تحديد موقع محول للحصول على طائرتين مختلفتين من عرض PSLAX للقلب (انظر الوصف في النص). الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
3. Parasternal عرض محور قصير من القلب
- مع محول في نفس الموقع في الصدر أثناء عرض PSLAX محاذاة بشكل جيد، وأداء دوران عكس اتجاه عقارب الساعة من محول من حوالي 90 درجة (الشكل3A)للحصول على محور قصير parasternal الحق (PSSAX) عرض. هذه المرة، يجب أن تكون علامة اتجاه محول مشيرا نحو الكتف الأيسر للأرنب.
ملاحظة: للمساعدة في الحفاظ على محول في نفس الموقع من الصدر أثناء تدوير محول، استخدم اليد اليسرى لإجراء دوران من الحبل من محول كما هو مبين في الشكل 3B. - في عرض المحور القصير الباراستيرنال، احصل على ثلاث طائرات تصوير عن طريق كنس المحول على طول محور القلب: البطين المتوسط، والصمام التاجي، والقاعدة العالية مع الشريان الرئوي (PA) والصمام الأبهري (AoV) في العرض.
- في مستوى التصوير البطيني المتوسط، الذي يقسم القلب على العضلات الحليمية ومستوى تيندينات الوتري (الأشكال 3C)، تصور البطين الأيمن (RV) في الجزء العلوي والبطين الأيسر (LV) في الجزء السفلي من الصورة (انظر النتائج التمثيلية).
- استخدم B-mode لتقييم الانقباض الشعاعي والمحيطي والاسترخاء في LV، والتحقق من وجود تشوهات حركة الجدار الإقليمي.
- استخدام M-الوضع وبمساعدة الكرة المسار تحريك المؤشر في الوقت الحقيقي على صورة 2D، ومن ثم وضع المؤشر في منتصف LV، بين كل من العضلات الشعرية، عمودي على IVS والجدار البطيني الأيسر الحرة (مهاجم) (الشكل 3C). بمجرد عرض الصور M-وضع على الشاشة، تخزين الصور لتحليل دون اتصال. في الأرانب ذات معدلات ضربات القلب العالية، استخدم سرعات كنس أعلى لفصل أحداث القلب بشكل أفضل أثناء دورة القلب (على سبيل المثال، 150 مم/ثانية).
- من خلال كنس محول نحو المنطقة cephalic (الشكل3D)،والحصول على صمام التاجي (MV) الطائرة. استخدم وضع B وM-mode لتقييم سلامة وحركية منشورات MV. وضع المؤشر على طول منتصف LV، عمودي على IVS (الشكل3E)،للحصول على معلومات مفصلة بشأن رحلة MV فيما يتعلق IVS.
- اكتساح محول مزيد من الجمجمة مما أدى إلى طائرة التصوير على مستوى قاعدة عالية (المعروف أيضا باسم طائرة AoV; الشكل 3F - H)،حيث يمكن تحديد AoV ومنشوراته، ومسار تدفق البطين الأيمن (RVOT)، والسلطة الفلسطينية، والأذينين الأيمن والأيسر (LA) (انظر النتائج التمثيلية).
- اتجاه الصورة: لاحظ أن السلطة الفلسطينية ستكون على الجانب الأيمن من صورة القطاع.
- لتصور السلطة الفلسطينية وإقباضها بشكل كامل، استخدم تخثر ًا أكبر، وفي بعض الأحيان، إزاحة قحفية للمحول (مساحة وتكلفة).
- استخدام B-mode لتقييم حجم وشكل هذه الهياكل (على سبيل المثال، يتم زيادة حجم الأذيني الأيسر في فشل القلب الاحتقاني)، واستخدام دوبلر اللون وPWD لتسجيل سرعة تدفق الدم (تدفق) على مستوى PV، عن طريق وضع حجم العينة أقل بقليل من افتتاح منشورات PV(الشكل 3G). وأخيرا، استخدم M-وضع ووضع المؤشر على طول AoV وLA (الشكل3H).
- استخدم عناصر التحكم والتعديلات الرئيسية التالية للحصول على صور دوبلر لتدفق الألوان الكافية:
- مع وضع قطاع الألوان في منطقة الاهتمام، والحد من زاوية بين القطاع واتجاه تدفق الدم قدر الإمكان.
- عرض قطاع الألوان: ضبط هذا إلى منطقة الصمام، من أجل زيادة معدل الإطار وتحسين معلومات تدفق اللون.
- تردد تكرار خط الأساس والنبض(PRF): ضبط خط الأساس على شريط الألوان وPRF، للسماح بعرض سرعات أعلى. يمثل الرقم الموجود في أعلى وأسفل شريط الألوان السرعة القصوى القابلة للكشف قبل حدوث الاسم المستعار للون.
ملاحظة: الاسم المستعار هو أكثر تواترا في معالجة تدفق الألوانمن دوبلر نابض طيفي، لأنه يتم تعيين جزء من البقول للحصول على الصور المقطعية عبر الضرر على معلومات دوبلر تدفق اللون. - كسب اللون: أولاً، قم بزيادة هذا إلى درجة أنه يبدأ فقط في إنشاء ضوضاء في الخلفية، ثم ينخفض إلى مستوى يحسن تصوير تدفق الألوان.
- استخدم الضوابط الرئيسية التالية للحصول على صور دوبلر الطيفية الكافية:
- موضع المؤشر: جعل هذا موازيا لاتجاه تدفق الدم. على الأقل، والحفاظ على زاوية < 30 درجة.
- موضع البوابة: إنها علامة في خط المؤشر المقابل لموقع أخذ العينات. وضعه بعد الصمامات الأبهرية والرئوية وعلى نصائح نشرة من الصمامات الأذينية البطينية.
- حجم البوابة: استخدم الحد الأدنى من الإعداد إلا للحصول على تدفقات قلس صغيرة.
- الأساس: حدد خط الأساس استنادًا إلى اتجاه تدفق الدم. ضعه في الأعلى عندما يتدفق الدم ضد المحول (مثل التدفقات الرئوية والأبهرية)، أو في الأسفل عندما يتدفق الدم نحو المحول (على سبيل المثال، تدفقات الصمامات الأذينية البطينية).
- مقياس: حدد هذا وفقا لسرعة تدفق الدم، وعادة، 25٪ أعلى من السرعة التي تم الحصول عليها.
- كسب دوبلر: استخدم هذا لتكثيف إشارات دوبلر. زيادة الكسب حتى يعرض اللون.
- تلوين إشارة دوبلر: استخدام اللون الأرجواني عندما يكون طيف دوبلر ضعيفالأنه يجعل السرعة أكثر وضوحا.
- مرشح الجدار: استخدم هذا لتقليل كمية الضوضاء منخفضة التردد التي تنتجها جدران القلب.
- سرعة الاجتياح: استخدم سرعات كنس أعلى لتسهيل قياسات الوقت.
الشكل 3 . كيفية الحصول على عرض PSSAX وطائرات التصوير المختلفة. (أ) موقف محول للحصول على وجهة نظر PSSAX على مستوى العضلات الشعرية. (B) توضيح دور اليد اليسرى للمساعدة في تدوير محول عند التبديل من PSLAX إلى عرض PSSAX. (C) موقع المؤشر من وضع M في مستوى العضلات الشعرية من عرض PSSAX. (D) موقف محول للحصول على وجهة نظر PSSAX من القلب في الطائرة صمام التاجي. (E) موقع المؤشر من وضع M في مستوى MV من طريقة العرض PSSAX. (F) موقف محول للحصول على طائرة AV في عرض PSSAX. (G) عرض توضيحي للدوبلر الملون وتحديد موضع حجم عينة الأشخاص ذوي الإعاقة لتقييم تدفق PV. (H) موقع المؤشر من وضع M في مستوى AoV من طريقة العرض PSSAX. LV = البطين الأيسر; RV = البطين الأيمن; FW = LV الجدار الحر؛ AoV = صمام الأبهر. RVOT = المسار الأيمن تدفق البطين؛ PV = الصمام الرئوي؛ السلطة الفلسطينية = الشريان الرئوي; LA = الأذين الأيسر; RA = الأذين الأيمن. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
4. أبيكالي 4 غرف عرض القلب
- للحصول على عرض 4 غرف Apical (AP4C)، ضع الأرنب في وضع المنقلب الجانبي الأيسر مع الأطراف الأمامية الممدودة بعيدا عن المنطقة الصدرية عن طريق الشريط الجراحي (الشكل 4A). الحفاظ على جلد شقة الصدر بطريقة مماثلة كما هو موضح أعلاه (الخطوة 2.1.1). يجب وضع منطقة القلب في الصدر فوق قسم القطع من الجدول. وبالمثل ، يجب أن يكون البطن مدعومًا بشكل جيد على الطاولة بعد تحريك أعضاء البطن من خلال تدليك لطيف.
- تطبيق هلام الموجات فوق الصوتية على محول، ومن ثم الوصول إلى القلب من خلال الشق في الجدول ووضعه عنكثب على جلد hemithorax الأيسر، على مستوى 4 ال-5الالفضاء الوربي مع خط midclavicular، مع محول التوجه علامة تشير نحو الجزء الخلفي من الأرنب (في اتجاه الكتف الأيسر) (الشكل4B). وبهذه الطريقة، فإن محول هو متعامد مع قمة القلب ويتم توجيه شعاع الموجات فوق الصوتية نحو قاعدة القلب.
- من هذا الموقف، إذا لزم الأمر، نقل محول إلى أعلى مساحة واحدة بين الوربية في وقت واحد حتى الفضاء بين الوكوستال ~ 4 (مناورة غالبا ما تسمى "نافذة التسوق").
- عند الوصول إلى المساحة الوربية المناسبة (والتي قد تختلف حسب حجم و/أو عمر الأرنب)، لاحظ صورة القلب من القمة إلى قاعدة القلب، شكل القلب النموذجي حيث يمكن رؤية جميع الغرف الأربع، مع اليسار واليمين البطينين في الجزء العلوي وكلا الأذينين في الجزء السفلي من الصورة (انظر الشكل 4C،D والنتائج التمثيلية).
- اتجاه الصورة: لاحظ أن LV سيكون على الجانب الأيمن من صورة القطاع.
- تجنب تقصير القمة في هذا الرأي، بحيث عرض AP4C نموذجي ة القلب يجب أن تعطي صورة شكل رصاصة من LV مع IVS في الوسط (الشكل4C،D). إذا تم تقريب القمة، من المرجح أن يتم تقصير LV; لذلك, تحرّكت ال [ردوكتر] إلى أسفل واحدة فراغ [إينتروستيل] [و/ور] ميل من ال [كمّوندّر].
- استخدم B-mode للتحقق من وجود تشوهات حركة الجدار الإقليمية ويكون لديك رؤية عالمية لوظيفة LV. استخدام دوبلر اللون لتقييم التدفق عبر الصمامات الأذينية البطينية، واستخدام PWD ووضع حجم العينة على مستوى نصائح نشرة MV للحصول على صور من الطيف تدفق MV (الشكل4C).
- استخدام وضع TDI ووضع حجم العينة في الجانبين الحاجز والجانبي للصمام التاجي الحلقي (الشكل4D).
- استخدم M-mode وضع المؤشر المتناسق مع الحلقي الجانبي MV للحصول على رحلة الانقباضي للطائرة الحلقي الحلقي التاجية (MAPSE). تخزين الصور في كل من هذه الأوضاع لتحليل حاليا من وظيفة القلب.
الشكل 4 . كيفية الحصول على وجهات نظر AP4C وAP5C من القلب. (أ) تحديد موقع الأرنب في التكعيبية الجانبية اليسرى لمشاهدة AP4C للقلب. (ب) موقف محول للحصول على وجهة نظر AP4C من القلب. (C) موقع حجم العينة في نصائح نشرة MV لتقييم تدفق MV. (D) موقع حجم العينة لتحليل TDI من سرعات عضلة القلب في الجانب الجانبي من MV الحلقي. (E) موقف محول للحصول على وجهة نظر AP5C من القلب. (F) موقع حجم العينة لتحليل PWD للتدفق عبر AoV. LV = البطين الأيسر; RV = البطين الأيمن; MV = الصمام التاجي؛ LA = الأذين الأيسر; RA = الأذين الأيمن; AoV = صمام الأبهر. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
5. Apical 5 غرف عرض القلب
- بدءا من محول في نفس الموقع كما هو الحال في عرض AP4C، وأداء لطيف إمالة caudally (الشكل4E)حتى LVOT وAoV تأتي في العرض، وهذا هو عرض 5 غرف apical (AP5C) من القلب (انظر النتائج التمثيلية).
- استخدام B-الوضع لتقييم LVOT، وحركة منشورات AoV، فضلا عن حجم تجويف LV وظيفة.
- استخدام وضع دوبلر اللون لتقييم تدفق عبر AoV، واستخدام PWD لتقييم سرعة التدفق عبر هذا الصمام عن طريق تحديد موقع حجم العينة فقط وراء AoV (الشكل4F).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
منظر محور طويل من القلب
يظهر الشكل 5A طائرة تصوير من وجهة نظر PSLAX اليمنى حيث يتم تمييز غرف القلب الأربعة بوضوح. يمكنك في هذا العرض تحديد البطين الأيمن (RV)، صمام ثلاثي الشرف (TV)، IVS، LV، FW، فضلا عن الصمام التاجي (MV). عندما تكون القمة مرئية بوضوح على الجانب الأيسر من الصورة في طريقة العرض هذه ولا يتم تقصير LV، فمن الممكن تقدير حجم LV بدقة باستخدام طريقة ثنائية السطح من الأقراص (تعديل قاعدة سيمبسون) كما هو موضح في الشكل 5B،C8 ، والتي للدقة ينبغي أن تكون جنبا إلى جنب مع قياس مماثل لحجم LV في وجهة نظر AP4C، وخاصة إذا كان نموذج الأرنب المستخدمة يعرض مع تشوهات حركة الجدار. يظهر الشكل 5D طائرة التصوير الأخرى من PSLAX الحق حيث LVOT وAorta (Ao) تأتي أيضا في العرض. ويرد أيضا في الشكل 5Dموقع وضع الفرجار لقياس دقيق للLVOT.
الشكل 5 . طائرات التصوير التي تم الحصول عليها في عرض PSLAX للقلب. (أ) طائرة تصوير تبين 4 غرف من القلب. (B) نهاية الانبساطي و (C) نهاية الصور الانقباضي ، مما يدل على طريقة سيمبسون لتحليل LV. (D ) طائرة التصوير حيث LVOT وorta تأتي في عرض في عرض PSLAX من القلب. LV = البطين الأيسر; RV = البطين الأيمن; IVS = الحاجز الفاصل يُمْكال؛ Ao = الأبهر; LVOT = المسار الخروج البطيني الأيسر; LA = الأذين الأيسر; RA = الأذين الأيمن; MV = الصمام التاجي؛ التلفزيون = صمام ثلاثي الشرف. [فو] = جدار حرّة من ال [لف]; PC = التامور. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
منظر محور قصير من القلب
في الشكل 6A، يتم عرض PSSAX الحق من القلب على مستوى العضلات الشعرية وطائرة tendineae chordae tendineae. فمن الممكن تحديد في هذا الرأي RV، IVS، LV، ومهاجم، فضلا عن العضلات الأنتيروليالية (AL) وposteromedial (PM) الشعرية (الشكل6A). في هذا الرأي، يتم استخدام أداة تتبع المنطقة لقياس المنطقة المحيطة في نهاية diastole (CAd) (الشكل6B)،وفي نهاية systole (CAs) (الشكل6C)،والذي يسمح بحساب منطقة تقصير محيطية إجمالي (CSA) باستخدام الصيغه:
CSA = CAd-CAs / CAd × 100.
يظهر مثال على تتبع وضع M في PSSAX على مستوى العضلات الحليمية في الشكل 6D، حيث يتم أيضا ً إظهار وضع الفرجار، والحافة الرائدة إلى الحافة الرائدة، للقياسات المختلفة لهياكل LV. وتوفر هذه القياسات معلومات مفيدة فيما يتعلق بحجم هياكل LV. وهكذا، فإن قياس قطر LV الانبساطي (LVDd) وقطر LV الانقباضي (LVDs) من ثلاثة نبضات قلب متتالية يسمح بحساب كسر تقصير LV (%SF)، باستخدام الصيغة:
SF٪= LVDd-LVDs/LVDd
فضلا عن وحدات التخزين الانقباضي والانبساطي LV (LVVd، LVVs)، وذلك باستخدام صيغة Teichholz:
(7 × (LVD)3) / (2.4 + LVD)
يتم حساب كسر طرد LV (LVEF (%)) فيما بعد وفقًا للصيغة LVEF=(LVVd-LVVs)/(LVVd×100).
يظهر تتبع وضع M على مستوى مستوى مستوى الطائرة MV في عرض PSSAX في الشكل 6E، حيث يظهر أيضًا موقع الفرجار لقياس الفاصل E-point إلى فصل الحاجز (EPSS) للصمام التاجي. يظهر مثال على عرض PSSAX للقلب عند مستوى مستوى AoV في الشكل 6F، حيث يتم عرض موقع الفرجار لقياس قطر الجذر الأبهري (AoD)، وكذلك البعد الأذيني الأيسر (LAD).
ويرد مثال على تحليل تدفق PV باستخدام كل من دوبلر اللون ودوبلر موجة نابضة في الشكل 6G. لاحظ التدفق الأزرق الملون من خلال PV مع دوبلر اللون، مما يشير إلى أن التدفق الذي لوحظ يتحرك بعيدا عن محول. وترد في الشكل 6Hأمثلة على كيفية تحديد فترة ما قبل الإخراج لـ PV (PEP PV)، فضلاً عن تدفق PV باستخدام تكامل وقت الصوت (VTI) .
الشكل 6 . طائرات التصوير التي تم الحصول عليها في عرض PSSAX. (أ) صورة تمثيلية لطريقة عرض PSSAX في مستوى العضلات الشعرية. (ب) نهاية الانبساطي و (ج) تتبع نهاية الانقباضي للحدود بطانة الرحم لقياس مجموع CSA. (D) M-وضع تتبع التي تم الحصول عليها في عرض PSSAX على مستوى العضلات الشعرية. (E) مثال على تتبع وضع M التي تم الحصول عليها في طريقة عرض PSSAX على مستوى MV. (F) صورة 2D ممثل من PSSAX تتنافس في الطائرة من AV. (G) لون دوبلر الموجهة PWD تتبع تدفق PV. (H) عرض توضيحي لتتبع VTI باستخدام إشارة PWD التي تم الحصول عليها من تدفق PV. LV = البطين الأيسر; RV = البطين الأيمن; IVS = الحاجز الفاصل يُمْكال؛ [فو] = جدار حرّة من ال [لف]; AL = العضلات الشعرية الانتيرولية; PM = العضلات الشعرية البُرّبة; LVDD = قطر البطين الأيسر في نهاية diastole؛ LVDs = قطر البطين الأيسر في نهاية systole؛ PC = بيريكارديوم؛ EPSS = E-نقطة إلى فصل الحاجز؛ AoD = قطر الجذر الأبهري; LAD = ترك البعد الأذيني; MV = الصمام التاجي؛ التلفزيون = صمام ثلاثي الشرف. PEP PV = فترة ما قبل الإخراج من الصمام الرئوي؛ ET PV = وقت طرد الصمام الرئوي. VTI PV = حجم الوقت لا يتجزأ من الصمام الرئوي. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
عرض من 4 غرف
يظهر مثال على تدفق MV باستخدام دوبلر اللون في طريقة عرض AP4C في الشكل 7A. لاحظ اللون الأحمر السائد لتدفق MV مما يشير إلى أن التدفق يتحرك نحو محول. وهكذا، فإن الذاكرة المفيدة لوصف وتعلم كيف يتدفق الدم عبر هياكل القلب هو اختصار بارت (الأزرق بعيدا، الأحمر نحو محول). باستخدام PWD، يمكن تقييم طيف تدفق MV كما هو موضح في الشكل 7B،حيث يتم تمييز موجات التعبئة المبكرة (E) والمتأخرة (A) أثناء البث. وترد في الشكل 7C والشكل 7D،على التوالي، أمثلة على سرعات الأنسجة عضلة القلب من الحلقي MV كما تقيمها TDI في كل من الجدران الجانبية والحاجزة. يشير إلى المكون الانقباضي من قبل موجة S، في حين أن موجات E' و A' تتوافق مع حركة عضلة القلب للصمام التاجي خلال ملء في وقت مبكر (E') وملء في وقت متأخر (A') مكونات diastole.
عرض من 5 غرف
يظهر الشكل 7E مثالاً على دوبلر اللون المتمركز في LVOT في عرض 5 غرف. لاحظ أنه، تمشيا مع mnemonic بارت المذكورة أعلاه، واللون الأزرق لوحظ يشير إلى أن تدفق الدم يتحرك بعيدا عن محول. ويبين الشكل 7F مثالاً على كيفية تحديد كمية تدفق AoV باستخدام إشارة PWD لتقييم VTI من AoV ووقت الإخراج الانقباضي (ET) وفترة ما قبل الإخراج من AoV (PEP AoV).
الشكل 7 . وجهات النظر AP4C وAP5C. (أ) مثال على دوبلر اللون في طريقة عرض AP4C. (ب) صورة تمثيلية للإشارة PWD من تدفق MV في AP4C، حيث تتوافق الموجة E مع ملء الانبساطي في وقت مبكر وA يتوافق مع عنصر الانكماش الأذيني أثناء diastole. (C-D) الصور التمثيلية لإشارات سرعة عضلة القلبالتي تم الحصول عليها من الشرائح الجانبية (C) والحاجز (D) من الحلقي MV باستخدام TDI في عرض AP4C. S يتوافق مع systole، في حين E' يتوافق مع مرحلة ملء في وقت مبكر وA ' مع مرحلة ملء في وقت متأخر خلال diastole. (E) مثال على إشارة دوبلر اللون التي تم الحصول عليها من AoV في طريقة عرض AP5C. (F) عرض توضيحي لتتبع VTI باستخدام إشارة PWD التي تم الحصول عليها من تدفق AoV. AoV = صمام الأبهري; VTI = حجم الوقت لا يتجزأ; PEP = فترة ما قبل الإخراج؛ ET = وقت الإخراج. الرجاء النقر هنا لعرض نسخة أكبر من هذا الرقم.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
لقد وصفنا بروتوكول لفحص صدى القلب من المعلمات وظيفة القلب في الأرنب،تمثل نموذج كبير ما قبل السريرية 1،2،3. يجب اعتبار منهجية الخطوة خطوة الوارد وصفها هنا التوجيه، والتي مع دراسة تكميلية للمبادئ الأساسية لتصوير صدى القلب، والمعرفة الأساسية للتصوير بالموجات فوق الصوتية، سوف تساعد الباحث على الحصول، من خلال الممارسة و التوجيه التكميلي والخبراء، والبيانات ذات نوعية جيدة في فترة قصيرة نسبيا من الزمن.
هناك العديد من الخطوات الحاسمة لزيادة قيمة واستنساخ النتائج أثناء استخدام بروتوكول تخطيط صدى القلب الموضح هنا. أولا، ضمان الجلد من الصدر هو الشعر مجانا ونظيفة. لهذا نوصي تنظيف الجلد مع الإيثانول لإزالة الزائدة من الشحوم الجلد الطبيعي قبل تطبيق هلام الموجات فوق الصوتية. بعد ذلك، في حين أنه من الممكن صورة الصدر في موقف supine، والرئتين تميل إلى تضخيم والحد من الصعب بالفعل لتصوير جدار الصدر مع صدى الفقراء، وبالتالي، موقف المندفع الأيسر أو الأيمن من الأرنب وتطبيق محول إلى الصدر من خلال الشق قطع التدريجي من جدول التصوير بنيت الغرض هو أفضل طريقة لتحسين جودة التصوير عموما. ثم، يجب على الباحث الذي يقوم بتشغيل نظام الموجات فوق الصوتية قضاء بعض الوقت في إنشاء إعدادات تصوير القلب المسبقة مع إعدادات التصوير المثلى، والتي تعتبر ضرورية لتحسين جودة التصوير بشكل عام في جميع المشاهدات، كما سيتم تقصير وقت التصوير في المستقبل جلسات التصوير. بعض من إعدادات التحكم الأكثر أهمية لإتقان هي المكاسب الإجمالية وتعويض كسب الوقت، نظرا لضعف التصوير من صدر الأرنب (انظر الخطوة 2.4.2). من المهم أيضا أن تكون منهجية وإجراء دائما فحص صدى القلب بطريقة منظمة. لهذا، فإن الدخول في عادة الحصول على جميع وجهات النظر التصوير وطائرات التصوير في نفس التسلسل تجنب فقدان المعلومات الهامة أثناء إجراء الدراسة. وعلاوة على ذلك، أثناء تحليل التصوير، من المستحسن إجراء جميع القياسات في ثلاث دورات قلبية متتالية على الأقل في الصور المكتسبة لكل طريقة. وأخيرا، فإن العمى للمراقب أثناء التصوير وكذلك أثناء التحليل دون اتصال مهم لتجنب التحيز وزيادة قيمة النتائج للطب الترجمة. مع الأخذ في الاعتبار جميع الاعتبارات المذكورة أعلاه، جنبا إلى جنبمع تطبيق مبادئ التصوير والتحليل وفقا للمبادئ التوجيهية الحالية 7،8،وسوف تضمن استنساخ البحوث باستخدام طولية تقييم وظيفة القلب عن طريق تخطيط صدى القلب في نموذج حيواني كبير مثل الأرنب.
وبالنظر إلى التباين في حجم الجسم وتكوين الدهون في مختلف الأعمار من الأرانب والإعدادات التجريبية الخاصة، وسوف تكون هناك حاجة إلى بعض الاختلافات في هذه التقنية، مثل الحركات خفية من محول (على سبيل المثال، كاسحة، والتناوب) نسبة إلى المساحة الوربية، من أجل تحقيق طائرات التصوير المطلوبة. ولذلك، يجب تفسير البروتوكول الموصوف هنا على أنه نقطة انطلاق ينبغي تكييفها مع الأهداف المحددة لبرنامج البحوث التي تنطوي على هذه التقنية.
في حين أن أنظمة تخطيط صدى القلب السريرية متاحة على نطاق واسع في معظم مراكز البحوث، هناك بعض القيود على التقنية الموصوفة هنا. في الواقع، فإن نوعية الصور التي تم الحصول عليها من دراسات صدى القلب تعتمد إلى حد كبير على تطور وتكنولوجيا جهاز الموجات فوق الصوتية، ومهارات وخبرة المشغل، وخصائص المريض الفردية. تم وصف الحد الأدنى من الخصائص التقنية التي يجب أن تلبي معدات الموجات فوق الصوتية في المقدمة. وهكذا، فإن عدم كفاية المعدات (مثل محول الصفيف الخطي) يشكل قيدا أساسيا على استخدام تقنية تخطيط صدى القلب في نموذج الأرنب. وبالإضافة إلى ذلك، تتأثر تقنية تخطيط صدى القلب ونتائجها بشدة من قبل المشغل. ولذلك، فإن المشغل الذي يفتقر إلى الخبرة الكافية والتدريب العملي يمكن أن يحد بشكل كبير من الحصول على صور موحدة ذات نوعية مناسبة. وبالمثل، يمكن للمشغلين عديمي الخبرة أيضا أن يخطئوا في الحصول على القياسات حتى لو تم تنفيذها على صور صدى القلب ذات الجودة التقنية الممتازة. وعلاوة على ذلك، وكما ذكر أعلاه، فإن بعض القيود متأصلة في نموذج الأرنب، مثل العمر، وبشكل أكثر تحديدا، من خلال حجم وتكوين الدهون في الجسم من الأرانب التي تمت دراستها عن طريق تخطيط صدى القلب. في تجربتنا، الأرانب الشابة التي يصل وزنها إلى 2.5 كجم لديها رواسب دهنية تحت الجلد وتحت الجلد وداخل الصدر. توفر هذه المرحلة الفينوتيبيك أفضل النوافذ الصوتية وتوفر صور صدى القلب الواضحة والأكثر وضوحاً وعدد قليل جداً من القطع الأثرية. مع زيادة حجم وتكوين الدهون في الجسم، تصبح جودة ودقة دراسة صدى القلب محدودة، وسوف تلعب مهارات المشغل في نهاية المطاف دورا أساسيا في تحقيق أفضل تصوير ممكن في ظل هذه الظروف.
نحن نستخدم حاليا تخطيط صدى القلب للتقييم الطولي لوظيفة القلب في نموذج أرنب اعتلال عضلة القلب الناجم عن الجمرة الخبيثة واختبار علاجات الخلايا الجذعية لهذه الحالة9،12،13. كما يمكن استخدام التقنية الموصوفة هنا في دراسات أخرى قبل السريرية التي تنطوي على نقص التروية أو أمراض القلب الفقارية.
تقنية تصوير القلب والأوعية الدموية الأخرى هي الرنين المغناطيسي القلبي (CMR)، الذي الميزة الرئيسية هي أفضل تعريف بطانة الرحم عضلة القلب، والذي يترجم إلى تقدير أكثر دقة من وحدات التخزين LV وظيفة الانقباضي14. ومع ذلك، فإن CMR محدودة بسبب تكلفتها العالية وعدم قابليتها للنقل، وبالتالي توافرها المحدود في معظم مراكز البحوث. وبالمثل، CMR لديه أداء ضعيف نسبيا لتحليل وظيفة الانبساطي، مما يجعل تخطيط صدى القلب خيارا أفضل عموما للتقييم الطولي للوظيفة الانقباضي والانبساطي للقلب15.
في تجربتنا، فإن نظام التخدير المستخدم في البروتوكول الموضح هنا آمن ويحقق نتائج قابلة للاستنساخ دون اكتئاب كبير من وظيفة عضلة القلب التي تعزى إلى التخدير9. ومع ذلك، من المهم توحيد نظام التخدير في كل مختبر لضمان النتائج القابلة للاستنساخ للإعدادات التجريبية الخاصة بك. بعد تحفيز التخدير، يمكن إكمال فحص تخطيط صدى القلب في غضون 15 دقيقة في الأيدي المتمرسة.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
وليس لدى أصحاب البلاغ ما يكشفون عنه.
Acknowledgments
وقد دعم هذا العمل جزئياً: مؤسسة سينيتشا، ورابطة العلوم والتكنولوجيا، وريجيون دي مورسيا، إسبانيا (رقم المنحة: 11935/PI/09) وجامعة ريدينغ، المملكة المتحدة (التمويل المركزي). ولم يكن للممولين أي دور في تصميم الدراسة، أو جمع البيانات وتحليلها، أو اتخاذ قرار بنشر المخطوطة أو إعدادها.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Bluesensor | Medicotest | 13BY1062 | Disposable adhesive ECG lectrodes |
| Domtor (Medetomidine) | Esteve | CN 570686.3 | Veterinary prescription is necessary |
| HD11 XE Ultrasound System | Philips | 10670267 | Echocardiography system. |
| Heating Pad | Solac | CT8632 | |
| Imalgene (Ketamine) | Merial | RN 9767 | Veterinary prescription is necessary |
| Omnifix-F 1 ml syringe | Braun | 9161406V | |
| S12-4 | Philips | B01YgG | 4-12 MHz phase array transducer |
| Ultrasound Transmision Gel (Aquasone) | Parker laboratories Inc. | N 01-08 |
References
- Pogwizd, S. M., Bers, D. M.
- Gandolfi, F., et al. Large animal models for cardiac stem cell therapies. Theriogenology. 75, 1416-1425 (2011).
- Harding, J., Roberts, R. M., Mirochnitchenko, O. Large animal models for stem cell therapy. Stem Cell Research & Therapy. 4, 23 (2013).
- Chong, J. J., Murry, C. E. Cardiac regeneration using pluripotent stem cells--progression to large animal models. Stem Cell Research. 13, 654-665 (2014).
- Del, M. F., Mynett, J. R., Sugden, P. H., Poole-Wilson, P. A., Harding, S. E. Subcellular mechanism of the species difference in the contractile response of ventricular myocytes to endothelin-1. Cardioscience. 4, 185-191 (1993).
- Sahn, D. J., DeMaria, A., Kisslo, J., Weyman, A. Recommendations regarding quantitation in M-mode echocardiography: results of a survey of echocardiographic measurements. Circulation. 58, 1072-1083 (1978).
- Thomas, W. P., et al. Recommendations for standards in transthoracic two-dimensional echocardiography in the dog and cat. Echocardiography Committee of the Specialty of Cardiology, American College of Veterinary Internal Medicine. Journal of Veterinary Internal Medicine. 7, 247-252 (1993).
- Lang, R. M., et al. Recommendations for cardiac chamber quantification by echocardiography in adults: an update from the American Society of Echocardiography and the European Association of Cardiovascular Imaging. European Heart Journal Cardiovascular Imaging. 16, 233-270 (2015).
- Talavera, J., et al. An Upgrade on the Rabbit Model of Anthracycline-Induced Cardiomyopathy: Shorter Protocol, Reduced Mortality, and Higher Incidence of Overt Dilated Cardiomyopathy. BioMed Research International. 2015, 465342 (2015).
- Borkowski, R., Karas, A. Z. Sedation and anesthesia of pet rabbits. Clinical Techniques in Small Animal Practice. 14, 44-49 (1999).
- Cantwell, S. L. Ferret, rabbit and rodent anesthesia. The Veterinary Clinics of North America. Exotic Animal Practice. 4, 169-191 (2001).
- Giraldo, A., et al. Percutaneous intramyocardial injection of amniotic membrane-derived mesenchymal stem cells improves ventricular function and survival in non-ischaemic cardiomyopathy in rabbits. European Heart Journal. 36, 149 (2015).
- Giraldo, A., et al. Allogeneic amniotic membrane-derived mesenchymal stem cell therapy is cardioprotective, restores myocardial function, and improves survival in a model of anthracycline-induced cardiomyopathy. European Journal of Heart Failure. 19, 594 (2017).
- Bellenger, N. G., et al. Comparison of left ventricular ejection fraction and volumes in heart failure by echocardiography, radionuclide ventriculography and cardiovascular magnetic resonance; are they interchangeable? European Heart Journal. 21, 1387-1396 (2000).
- Flachskampf, F. A., et al. Cardiac Imaging to Evaluate Left Ventricular Diastolic Function. Journal of the American College of Cardiology Cardiovascular Imaging. 8, 1071-1093 (2015).
