Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Behavior
Click here for the English version

Behavior

نموذج الم المزمن بعد الاسكيميه لمتلازمة الم الاقليميه المعقدة من النوع الأول في الفئران

Published: January 21, 2020 doi: 10.3791/60562
Automatic Translation
*1, *1, 1, 1, 2, 1, 1, 1
1Department of Neurobiology and Acupuncture Research, The Third Clinical Medical College, Zhejiang Chinese Medical University, Key Laboratory of Acupuncture and Neurology of Zhejiang Province, 2Academy of Chinese Medical Sciences, Zhejiang Chinese Medical University
* These authors contributed equally

Summary

المنصوص عليها هنا هو البروتوكول الذي تفاصيل الخطوات اللازمة لإنشاء نموذج الحيوانية من الم المزمن بعد الاسكيميه (CPIP). هذا هو نموذج المعترف بها جيدا محاكاة البشرية الاقليميه المعقدة متلازمة الم من النوع الأول. كما يتم تقييم الhypersensibiltés الميكانيكية والحرارية ، فضلا عن السلوكيات النوسيفينسيفيه المستحثة كابسايسين التي لوحظت في نموذج الفئران CPIP.

Abstract

متلازمة الم الاقليميه المعقدة من النوع الأول (CRPS-I) هو مرض عصبي يسبب الما شديدا بين المرضي ويبقي حاله طبية لم تحل. ومع ذلك ، لم يتم الكشف عن أليات الاساسيه ل CRPS-I. ومن المعروف ان نقص التروية/ضخ هو واحد من العوامل الرئيسية التي تسبب CRPS-I. بواسطة نقص التروية لفترات طويلة وضخ من الطرف الخلفي ، تم تاسيس الفئران المزمنة ما بعد الاسكيميه الم (CPIP) نموذج لتقليد CRPS-I. وقد أصبح نموذج CPIP نموذجا الحيوانية المعترف بها جيدا لدراسة أليات CRPS-I. يصف هذا البروتوكول الإجراءات التفصيلية التي ينطوي عليها إنشاء نموذج الفئران من CPIP ، بما في ذلك التخدير ، يليه نقص ترويه/ضخ الطرف الخلفي. ويتم تقييم خصائص نموذج CPIP الفئران أيضا عن طريق قياس الhypersensibiltés الميكانيكية والحرارية للطرف الخلفي ، فضلا عن الاستجابات النوسيفينسيفيه للحقن الحاد كابسايسين. الفئران نموذج CPIP يسلك العديد من المظاهر مثل CRPS-I-مثل ، بما في ذلك وذمه الأطراف الخلفية وفرط الدم في المرحلة المبكرة بعد التاسيس ، والhypersensibiltés الحرارية والميكانيكية المستمرة ، وزيادة الاستجابات النوسيفينسيفيه للحقن كابسايسين الحاد. هذه الخصائص تجعل من نموذج الحيوانية مناسبه لمزيد من التحقيق في أليات المعنية في CRPS-I.

Introduction

متلازمة الم الاقليميه المعقدة (crps) reprents المعقدة واعراض الم المزمن الناجمة عن الكسور, الصدمة, الجراحة, نقص التروية أو أصابه العصب1,2,3. ويصنف CRPS إلى فئتين فرعيتين: CRPS من النوع الأول والنوع الثاني (CRPS-I و CRPS-II)4. وكشفت الدراسات الوبائية ان انتشار CRPS كان حوالي 1:20005. CRPS-I ، الذي يظهر اي ضرر العصب واضحة ، يمكن ان يؤدي إلى الم المزمن ويؤثر بشكل كبير علي نوعيه حياه المرضي. العلاجات المتاحة الحالية تظهر اثار علاجيه غير كافيه. ولذلك ، لا يزال CRPS-I لا تزال مشكله سريريه هامه وصعبه التي تحتاج إلى معالجه.

إنشاء نموذج الحيوانية قبل السريرية محاكاة CRPS-I أمر حاسم لاستكشاف أليات الكامنة وراء CRPS-I. من أجل معالجه هذه المسالة ، Coderre وآخرون تصميم نموذج الفئران من خلال تطبيق نقص التروية لفترات طويلة وضخ إلى الطرف الخلفي لتلخيص CRPS-I6. ومن المعروف ان نقص التروية/ضخ الاصابه هو من بين واحده من الأسباب الرئيسية لل CRPS-I7. الفئران نموذج CPIP يسلك العديد من الاعراض مثل CRPS-I-مثل ، والتي تشمل الأطراف الخلفية وذمه وفرط الدم في مرحله مبكرة بعد إنشاء نموذج ، تليها مع الhypersensibiltés الحرارية والميكانيكية المستمرة6. مع المعونة من هذا النموذج, ويقترح ان الحساسية المركزية الم, الطرفية TRPA1 قناه التنشيط والأكسجين التفاعلية توليد أنواع, الخ. المساهمة في crps-I8,9,10. انشانا مؤخرا بنجاح نموذج الفئران CPIP وأداء الجيش الملكي النيبالي-التسلسل من العقدة الجذر الظهرية (DRGs) ان العصبي المتضررة مخلب الخلفية11. اكتشفنا بعض أليات المحتملة التي من المحتمل ان تشارك في التوسط لhypersensibiltés الم من CRPS-I11. كما حددنا مستقبلات عابره المحتملة vanilloid 1 (TRPV1) قناه في الخلايا العصبية DRG كمساهم مهم في الhypersensibiltés الميكانيكية والحرارية من CRPS-I12.

في هذه الدراسة ، وصفنا الإجراءات التفصيلية التي ينطوي عليها إنشاء نموذج الفئران من CPIP. كما قمنا بتقييم نموذج CPIP الفئران من خلال قياس الhypersensibiltés الميكانيكية والحرارية ، فضلا عن استجابتها للتحدي كابسايسين الحاد. نقترح ان نموذج CPIP الفئران يمكن ان يكون نموذجا الحيوانية يمكن الاعتماد عليها لمزيد من التحقيق في أليات المعنية في CRPS-I.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

تمت الموافقة علي بروتوكولات الحيوانية من قبل لجنه الأخلاق الحيوانية في جامعه تشجيانغ الصينية الطبية.

1-الحيوانية

  1. الحصول علي الذكور Sprague-Dawley (SD) الفئران (280-320 ز ، 8-10 أسابيع من العمر) من مركز الحيوانية مختبر شانغهاي. منزل الماشية في تشجيانغ الصينية الطبية مختبر الجامعة مركز الحيوانية. لاحظ ان ظروف التكاثر يجب ان تشمل 12 ساعة/2 ساعة ضوء/الظلام والحفاظ علي درجه الحرارة ثابته عند 24 درجه مئوية. توفير المياه والغذاء حسب الإعلان. لاحظ ان ما مجموعه 48 الفئران المستخدمة في هذه الدراسة. ملاحظه واحده ، في هذا النموذج ، ونحن بحاجه إلى مراقبه الاستجابة الم خلال العملية برمتها. إذا تم تطبيق دواء الم ، فاننا لا نستطيع بنجاح إنشاء نموذج الم. بعد التجارب ، يتم التضحية الفئران.

2. مؤسسه نموذج CPIP

  1. تخدير جميع الفئران (بما في ذلك الشام ومجموعات نموذج CPIP) مع فينوباربيتال الصوديوم (50 ملغ/كغ ، حقن داخل الصفاق [i.p.]). الحفاظ علي التخدير مع ما يصل إلى 20 مغ/كغ/ح فينوباربيتال [i.p.] ، إذا لزم الأمر. التحقق من ردود الفعل من كل الحيوانية عن طريق معسر لها مخلب الخلفية أو طرف الذيل باستخدام ملقط. تاكد من ان الفئران لا تستجيب قبل إنشاء نموذج. ضع مرهم الطبيب البيطري علي العينين لتجنب الجفاف اثناء العملية. ضع الفئران التخدير علي لوحه ساخنه الحفاظ علي 37 درجه مئوية للاجراء التالي.
  2. نقص التروية وضخ المخلب الخلفي
    1. تليين مخلب اليمين الخلفية والكاحل مع الجلسرين مره واحده يتم تخدير الفئران.
    2. الشريحة نيتريل 70 ديوميتر الدوران O-الدائري مع 7/32 "(5.5 مم) القطر الداخلي في الجانب الأكبر من أنبوب ابندورف 1.5 mL (مع قطع المفاجئة كاب قبل الاستخدام). بعناية ادراج مخلب الخلفية في أنبوب ابندورف جوفاء حتى تصل إلى القاع.
    3. الشريحة تدريجيا O-الدائري من الأنبوب إلى الطرف الأيمن الخلفية بالقرب من مفصل الكاحل ومكان ل 3 ح. تطبيق نفس العلاج علي مجموعه صوريه من الفئران ، الا ان كسر O-الدائري ، الذي قطع وينبغي عدم التسبب في نقص التروية ، ينبغي وضعها حول الكاحل.
    4. اقطع الحلقة الدائرية 3 ساعات بعد الخطوة الاسكيميه. بعناية مشاهده الفئران حتى يتعافى ما يكفي من الوعي للحفاظ علي الركود القصيه. لاحظ ان الفئران التي تلقت التخدير لا ينبغي ان توضع مره أخرى إلى الشركة من الفئران الأخرى حتى تعافي تماما.

3-الاختبارات السلوكية نوسيفينسيفي

  1. وضع الفئران في غرفه شفافة زجاجي الذي يجلس علي أرضيه شبكه. Habituate الفئران ل 0.5 h قبل اي اختبار السلوكية.
  2. الدينامنيا الميكانيكية
    1. استخدام خيوط فون فراي (0.4 ، 0.6 ، 1.0 ، 2.0 ، 4.0 ، 6.0 ، 8.0 ، 15.0 ، 26.0 ز خيوط) للاختبار. تبدا الاختبار من خيوط الأوسط (4.0 g). عموديا تطبيق خيوط إلى سطح الأخمص الأوسط من مخلب الخلفية. تطبيق قليلا قوه مناسبه لثني خيوط لمده تصل إلى 5 ليالي. ويعتبر تراجع مفاجئ من مخلب الخلفية ردا علي المحفزات سلوك نوسيفينسيفي. اجراء اختبار الوديونيا الميكانيكية في الأيام-3 ،-2 ،-1 ، وكل يوم حتى اليوم 13.
    2. تطبيق أسلوب الاختبار الأعلى لأسفل لاختبار العتبة. تطبيق طريقه ديكسون لحساب 50 ٪ عتبه الانسحاب مخلب (pwt)13،14،15.
  3. هايبرالجيسيا الحرارية
    1. استخدام Hargreaves ' طريقه لفحص hyperalgesia الحرارية. تهدف مباشره شعاع الضوء المنبعث من لمبة (50 W) إلى مخلب الخلفية لقياس الكمون الانسحاب مخلب (PWL). تعيين 20 ق كعتبه وقف لتجنب الاصابه المفرطة من التدفئة.
    2. كرر كل اختبار 3x في 5 فترات دقيقه لكل مخلب الخلفية. تاخذ متوسط هذه الاختبارات الثلاثة كما PWL من كل الفئران16. اجراء اختبار هايبرالجيسيا الحرارية في الأيام-3 ،-2 ،-1 ، وكل يوم حتى اليوم 13.
  4. [كبستسن]-يسبب نوسيفينسيفي حاده تصرف
    1. اعداد كبخاخات حل الأسهم (200 mM) باستخدام ثنائي ميثيل سلفوكسيد (dmso) ومزيد من تمييع إلى 1:1000 في الفوسفات معقمه-مخزنه المالحة (التلفزيونية الخاصة) لحقن مخلب الخلفية. ال [دسو] نهائيه تركيز في [ببس] 0.1% (عربه يحتوي 0.1% [دسو] في [ببس] فقط). حقن كابسايسين أو السيارة في مخلب الخلفية (حقن داخل الأخمص) في حجم 50 μL باستخدام ابره 30 G تعلق علي 1 مل حقنه.
    2. تسجيل السلوك نوسيفينسيفي (اي, لعق, العض, أو تراني انتفض مخلب حقن) باستخدام كاميرا فيديو لمده 10 دقيقه مباشره بعد الحقن والكمية بعد ذلك كما سبق وصفها17,18,19.
  5. هند مخلب التقييم وذمه: تقييم وذمه مخلب الخلفية من خلال قياس الزيادة في قطر مخلب. قياس مع الفرجار الرقمية وحساب الفرق بين القيمة القاعدية وقيمه الاختبار التي لوحظت في نقاط زمنيه مختلفه. تقييم التغيرات في سمك مخلب في 15 دقيقه ، 24 ساعة ، 48 h ، و 72 h بعد إنشاء نموذج.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

بعد وضع الحلقة الدائرية علي الكاحل ، أظهرت البشرة الخلفية الجلدية المزرقة زرقه ، مؤشرا علي نقص الأكسجين في الانسجه (الشكل 1ا). بعد قطع O-الدائري ، بدا مخلب الخلفية بالشكل الخارجي لملء مع الدم واظهر تورم قوي ، والتي أظهرت علامة مكثفه من فرط الكالسيوم (الشكل 1ا). مخلب تورم تدريجيا تضاءلت وعاد إلى 48 h العادية بعد اجراء التروية/ضخ (ثنائي الاتجاه ANOVA مع Sidak اختبار بعد المخصصة, الشكل 1B). كل هذه العلامات تتسق مع الدراسات السابقة6,12.

ثم تم قياس الوديونيا الميكانيكية باستخدام اختبار الشعر فون فراي. عرضت مخلب الخلفية الزائفة من مجموعه CPIP الميكانيكية البديهية 1 يوم بعد إنشاء نموذج مقارنه بمجموعه الشام. واستمرت الوديونيا الميكانيكية لمخلب الخلفية الجانبية حتى 13 يوما من الإطار الزمني للملاحظة (ANOVA ثنائي الاتجاه مع اختبار Sidak بعد المخصص ، الشكل 1ج). مخلب الخلفية المعاكس من مجموعه cpip أيضا عرض هايبرالجيسيا الميكانيكية مماثله لمخلب الخلفية الجانبية ، والتي تدوم لمده 13 يوما (في اتجاهين ANOVA مع sidak اختبار بعد المخصصة ، الشكل 1د).

ثم تم قياس هايبرالجيسيا الحرارية باستخدام اختبار hargreaves '. عرضت الكفوف الخلفية الثنائية من الفئران CPIP انخفاضا كبيرا الكمون الانسحاب ردا علي المحفزات الحرارية الضارة ، وهو علامة علي hyperalgesia الحرارية ، بالمقارنة مع الفئران مجموعه الشام (ANOVA في اتجاهين مع Sidak اختبار آخر المخصصة ، الشكل 1E ، F). وتتسق هذه الملاحظة مع الدراسات السابقة11و12. واستمرت هايبرالجيسيا الحرارية من مخلب الخلفية الجانبية حتى نهاية الإطار الزمني للملاحظة ، في حين ان هايبرالجيسيا الحرارية من مخلب الخلفية المعاكس استمرت لمده 7 أيام (ANOVA ثنائيه الاتجاه مع sidak اختبار بعد المخصصة ، الشكل 1E ، F). النتائج المذكورة أعلاه تشير إلى ان الفئران cpip تطوير قويه ومستمرة hypersensibiltés الميكانيكية والحرارية ، وفقا للملاحظات السابقة11،12.

أظهرت المرضي CRPS استجابه واضحة زيادة للألم المستحث كابسايسين في المناطق المتضررة20. ثم تم فحص ما إذا كان نموذج الفئران CPIP يمكن تلخيص هذه الظاهرة. وقد لوحظ السلوك نوسيفينسيفي في الفئران cpip ردا علي كابسايسين داخل الأخمص (TRPV1 ناهض) حقن في مخلب الخلفية مماثل. أولا ، تم اختبار الاستجابات النوسيفينسيفيه للفئران عندما تم حقن سيارة. وأظهرت مجموعه الشام استجابه نوسيفينسيفيه طفيفه لحقن المركبات ، في حين أظهرت مجموعه CPIP استجابه اعلي بكثير مقارنه بمجموعه الشام (ANOVA في اتجاه واحد مع Sidak اختبار ما بعد الخاص ، الشكل 2). وعلاوة علي ذلك ، أسفر حقن الكابسايين عن استجابه نوسيفينسيفي قويه في مجموعه الشام (الشكل 2). والاهم من ذلك ان الفئران CPIP أظهرت استجابات اعلي بكثير للحقن كابسايسين من مجموعه الشام (الشكل 2). وتشير هذه البيانات إلى ان الفئران CPIP أظهرت الاستجابات النوسيفينسيفيه المعززة ل capsaicin, ظاهره محاكاة المرضي البشر مع CRPS-I.

Figure 1
الشكل 1: اظهر نموذج الفئران CPIP الم الحراري والميكانيكي hypersensibiltés في الأطراف الخلفية الثنائية. (ا) الصور النمطية الماخوذه خلال نقاط زمنيه مختلفه (خلال نقص التروية ، 10 دقائق بعد الضخ ، و 7 أيام في وقت لاحق). (ب) قياسات سماكه الخلفية لكل من cpip ومجموعات الشام. (C, D) 50% مخلب سحب عتبه (50 ٪ pwt ، مؤشر hyperalgesia الميكانيكية) من الأضلاع (C) والمقابل (د) الكفوف الخلفية من الفئران. (هاء ، واو) مخلب الكمون الانسحاب (PWL ، مؤشر hyperalgesia الحرارية) من الأضلاع (E) والمقابل (F) الكفوف الخلفية من الفئران (ن = 8 الفئران لكل مجموعه ، * * ص < 0.01). يتم التعبير عن النتائج كمتوسط ± SEM (ثنائي الاتجاه ANOVA تليها Sidak اختبار الخاصة بعد). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Figure 2
الشكل 2: عرضت فئران CPIP سلوكيات أكثر نوسيفينسيفيا مقارنه بالفئران الصورية ردا علي حقن الكابسايسين داخل الأخمص الخلفية الاماميه. الوقت المتراكم الفئران قضي لعق ، العض ، أو تراني انتفض الكفوف الخلفية تم حسابه علي مدي 10 دقيقه بعد السيارة (0.1 ٪ dmso في برنامج تلفزيوني ، في داخل الأخمص) أو كابسايسين (10 نانومول في حجم 50 μl ، داخل الأخمص) حقن (ن = 8 الفئران لكل مجموعه ، * * p < 0.01). يتم التعبير عن النتائج كمتوسط ± SEM (الاتجاه الواحد ANOVA تليها Sidak اختبار الخاصة بعد). يرجى النقر هنا لعرض نسخه أكبر من هذا الرقم.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

يصف هذا البروتوكول الطرق المفصلة لإنشاء نموذج CPIP للفئران عن طريق تطبيق نقص التروية/الضخ علي الأطراف الخلفية للفئران. وهو ينطوي علي تقييم مظهر الأطراف الخلفية ، وذمه ، hypersensibiltés الميكانيكية/الحرارية ، والسلوكيات النوسيفينسيفيه الحاده ردا علي حقن كابسايسين.

نقص ترويه الأطراف/الضخ هو عامل مشترك المساهمة في CRPS-I في المرضي البشريين12. يصف هذا البروتوكول كيفيه تاسيس نموذج CPIP الفئران ، وهو نموذج الحيوانية شائعه الاستخدام لتلخيص CRPS الإنسان-I6. وقد تسبب نقص التروية في الطرف الخلفي للفئران مع تطبيق الحلقة الضيقة علي الكاحل لمده 3 ساعات تحت التخدير. تم أزاله الطوق ، وحدث ضخ. بعد إنشاء نموذج ، وضعت الفئران نموذج CPIP في وقت مبكر فرط بوتاسيوم الدم وذمه في الطرف الخلفي. يعرض النموذج أيضا سلوكيات الم العصبي ، بما في ذلك الhypersensibiltés الميكانيكية/الحرارية المستمرة. هذه الاعراض كلها تحاكي الخصائص النموذجية للإنسان CRPS-I 21.

المرضي CRPS تظهر ردودا متزايدة واضحة علي الم الناجم كابسايسين في الأطراف المتضررة20. ومع ذلك ، لا يزال من غير الواضح ما إذا كانت الحيوانية نموذج CPIP تظهر استجابات مماثله. وهكذا ، في هذه الدراسة ، تم فحص السلوكيات النوسيفينسيفيه للفئران CPIP ردا علي حقن كابسايسين داخل الأخمص الخلفية مخلب. وقد وجد ان الفئران نموذج CPIP أظهرت الاستجابات نوسيفينسيفي اعلي بكثير للحقن كابسايسين مقارنه مع الفئران الصورية. علي حد علمنا ، وهذا هو التقرير الأول من هذه الظاهرة في الفئران نموذج CPIP.

في دراسة سابقه ، وأظهرت TRPV1 قناه التعبير ليكون اوبريجولاتيد في الانسجه مخلب الخلفية الهند والخلايا العصبية drg التي inعصبيه مخلب الخلفية12. وعلاوة علي ذلك ، تم العثور علي ان يتم تنشيط خلايا العمود الفقري الشوكي في الفئران نموذج cpip ، مما ادي إلى التوعية بالم المركزي وتسهيل ادراك الم وانتقال9،12. ولذلك ، قد تكون مشتركه التحسس الم الطرفية والمركزية علي حد سواء في السلوكيات نوسيفينسيفي زيادة ردا علي حقن كابسايسين في نموذج الفئران CPIP. الدراسات المستقبلية مطلوبه لاختبار ما إذا كان حقن كابسايسين ينتج عنه استجابات محسنه في الكفوف الخلفية المعاكسة لفئران نموذج CPIP ، كذلك. في الاختبارات التي أجريت هنا ، لم نلاحظ أوتوتومي في الفئران نموذج CPIP. وهذا يتناقض مع الفئران التي خضعت لأوتوتومي الوركي ، الذي يطور عاده بالاضافه إلى الم المزمن hypersensibiltés22،23. الاضافه إلى ذلك ، لم يتم الإبلاغ عن اي استجابه الم المشار اليها في المرضي CRPS-I أو الحيوانية وضع CPIP.

واحده من الخطوات الحاسمة في النموذج هو الحفاظ علي التخدير في جميع انحاء الاجراء. في هذه الدراسة ، تم الشروع في التخدير عن طريق حقن داخل الصفاق من فينوباربيتال الصوديوم (50 ملغم/كغ). وكثيرا ما تستخدم هذه الجرعة في العديد من الدراسات التي تنطوي علي التخدير الفئران, بما في ذلك الدراسات مع cpip الفئران نموذج إنشاء9,12,24. إلى جانب ذلك ، يجب الحفاظ علي التخدير عن طريق 20 ملغ/كغ/ساعة (i.p.) فينوباربيتال الصوديوم عند الضرورة لضمان تنفيذ ناجح للاجراء12،24.

في نموذج CPIP الاوليه التي وضعتها Coderre وآخرون., وقد انزلق في الواقع الدائري قباله من الخارج من 3 سم3 حقنه (قطع في نصف) عندما وضعت مخلب الخلفية في برميل من حقنه بقدر الإمكان25. هنا ، في دراستنا ، قمنا باجراء تعديلات طفيفه علي هذه الطريقة. استخدمنا أنبوب ابندورف 1.5 mL (مع الاداه الاضافيه كاب قطع مسبقا) بدلا من حقنه ، لان هذه المواد كانت أكثر سهوله وتناسب تماما مع قطر مخلب الفئران الخلفية. ال [أو-رينغ] يستطيع كنت بسهوله وضعت علي الكاحل جزء من الجرذان في هذا يعدل طريقه دون إصابات ان يسمح لنموذج أقامه.

في الوقت الحاضر ، تم تاسيس نموذج الفئران CPIP حصرا في الفئران الذكور استنادا إلى الدراسات السابقة ، بما في ذلك دراستنا الحالية25. ومع ذلك ، تجدر الاشاره إلى ان حالات الاصابه بالمرض هي أكثر شيوعا في الإناث من المرضي الذكور وفقا للتحليل الوبائي26،27. ويدعم ذلك أيضا النتائج التي خلصت إلى ان الإناث أظهرت المزيد من الاستجابات للألم من الذكور عندما أنشئت الشركة28. ولذلك ، سيكون من الضروري وضع نموذج CPIP في كل من الذكور والإناث الحيوانية في المستقبل. سيكون هذا مهما لدراسة الاهميه الانتقالية لهذا النموذج.

وفي الختام ، وصفت هنا أساليب لإنشاء نموذج CPIP الفئران. هذا النموذج الفئران CPIP يلخص العديد من الشخصيات السريرية من CRPS الإنسان-I ، وخصائصه قد تجعل من نموذج الحيوانية مناسبه لدراسة CRPS-I.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

ولا يعلن أصحاب البلاغ عن اي تضارب في المصالح في هذا العمل.

Acknowledgments

تم رعاية هذا المشروع من قبل المؤسسة الوطنية للعلوم الطبيعية في الصين (81873365 و 81603676) ، وصناديق العلوم الطبيعية الاقليميه تشجيانغ للعلماء الشباب المتميزين (LR17H270001) وصناديق البحوث من جامعه تشجيانغ الصينية الطبية ( Q2019J01, 2018ZY37, 2018ZY37).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1.5 ml Eppendorf tube Eppendorf 22431021
DMSO Sigma-Aldrich D1435
Capsaicin APEXBIO A3278
Digital caliper Meinaite NA
O-ring O-Rings West Nitrile 70 Durometer 7/32 in.
internal diameter
Plantar Test Apparatus UGO Basile, Italy 37370
von Frey filaments UGO Basile, Italy NC12775

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Goh, E. L., Chidambaram, S., Ma, D. Complex regional pain syndrome: a recent update. Burns, Trauma. 5 (1), 2 (2017).
  2. Birklein, F., Ajit, S. K., Goebel, A., Rsgm, P., Sommer, C. Complex regional pain syndrome - phenotypic characteristics and potential biomarkers. Nature Reviews Neurology. 14 (5), (2018).
  3. Shim, H., Rose, J., Halle, S., Shekane, P. Complex regional pain syndrome: a narrative review for the practising clinician. British Journal of Anaesthesia. , (2019).
  4. Urits, I., Shen, A. H., Jones, M. R., Viswanath, O., Kaye, A. D. Complex Regional Pain Syndrome, Current Concepts and Treatment Options. Current Pain, Headache Reports. 22 (2), 10 (2018).
  5. Helyes, Z., et al. Transfer of complex regional pain syndrome to mice via human autoantibodies is mediated by interleukin-1-induced mechanisms. Proceedings of National Academy Sciences of the United States of America. 116 (26), 13067-13076 (2019).
  6. Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-Type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat. Pain. 112 (1), 94-105 (2004).
  7. Coderre, T. J., Bennett, G. J. A hypothesis for the cause of complex regional pain syndrome-type I (reflex sympathetic dystrophy): pain due to deep-tissue microvascular pathology. Pain Medicine. 11 (8), 1224-1238 (2010).
  8. Klafke, J. Z., et al. Acute and chronic nociceptive phases observed in a rat hind paw ischemia/reperfusion model depend on different mechanisms. Pflugers Archiv European Journal of Physiology. 468 (2), 229-241 (2015).
  9. Tang, Y., et al. Interaction between astrocytic colony stimulating factor and its receptor on microglia mediates central sensitization and behavioral hypersensitivity in chronic post ischemic pain model. Brain Behavioral Immunology. 68, 248-260 (2018).
  10. Kim, J. H., Kim, Y. C., Nahm, F. S., Lee, P. B. The Therapeutic Effect of Vitamin C in an Animal Model of Complex Regional Pain Syndrome Produced by Prolonged Hindpaw Ischemia-Reperfusion in Rats. International Journal of Medical Sciences. 14 (1), 97-101 (2017).
  11. Yin, C., et al. Transcriptome profiling of dorsal root ganglia in a rat model of complex regional pain syndrome type-I reveals potential mechanisms involved in pain. Journal of Pain Research. 12, 1201-1216 (2019).
  12. Hu, Q., et al. TRPV1 Channel Contributes to the Behavioral Hypersensitivity in a Rat Model of Complex Regional Pain Syndrome Type 1. Frontiers in Pharmacology. 10, 453 (2019).
  13. Dixon, W. J. Efficient analysis of experimental observations. Annual Review of Pharmacology and Toxicology. 20, 441-462 (1980).
  14. Chai, W., et al. Electroacupuncture Alleviates Pain Responses and Inflammation in a Rat Model of Acute Gout Arthritis. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2018, 2598975 (2018).
  15. Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw. Journal of Neuroscience Methods. 53 (1), 55-63 (1994).
  16. Fang, J. Q., et al. Parameter-specific analgesic effects of electroacupuncture mediated by degree of regulation TRPV1 and P2X3 in inflammatory pain in rats. Life Sciences. 200, 69-80 (2018).
  17. Tai, Y., et al. Involvement of Transient Receptor Potential Cation Channel Member A1 activation in the irritation and pain response elicited by skin-lightening reagent hydroquinone. Scientific Reports. 7 (1), 7532 (2017).
  18. Liu, B., et al. TRPM8 is the principal mediator of menthol-induced analgesia of acute and inflammatory pain. Pain. 154 (10), 2169-2177 (2013).
  19. Liu, B., et al. Oxidized Phospholipid OxPAPC Activates TRPA1 and Contributes to Chronic Inflammatory Pain in Mice. PLoS One. 11 (11), 0165200 (2016).
  20. Terkelsen, A. J., Gierthmuhlen, J., Finnerup, N. B., Hojlund, A. P., Jensen, T. S. Bilateral hypersensitivity to capsaicin, thermal, and mechanical stimuli in unilateral complex regional pain syndrome. Anesthesiology. 120 (5), 1225-1236 (2014).
  21. Drummond, P. D., Morellini, N., Finch, P. M., Birklein, F., Knudsen, L. F. Complex regional pain syndrome: intradermal injection of phenylephrine evokes pain and hyperalgesia in a subgroup of patients with upregulated alpha1-adrenoceptors on dermal nerves. Pain. 159 (11), 2296-2305 (2018).
  22. Minert, A., Gabay, E., Dominguez, C., Wiesenfeld-Hallin, Z., Devor, M. Spontaneous pain following spinal nerve injury in mice. Experimental Neurology. 206 (2), 220-230 (2007).
  23. Kingery, W. S., et al. Capsaicin sensitive afferents mediate the development of heat hyperalgesia and hindpaw edema after sciatic section in rats. Neuroscience Letters. 318 (1), 39-43 (2002).
  24. Xu, J., et al. Activation of cannabinoid receptor 2 attenuates mechanical allodynia and neuroinflammatory responses in a chronic post-ischemic pain model of complex regional pain syndrome type I in rats. European Journal of Neuroscience. 44 (12), 3046-3055 (2016).
  25. Coderre, T. J., Xanthos, D. N., Francis, L., Bennett, G. J. Chronic post-ischemia pain (CPIP): a novel animal model of complex regional pain syndrome-type I (CRPS-I; reflex sympathetic dystrophy) produced by prolonged hindpaw ischemia and reperfusion in the rat. Pain. 112 (1-2), 94-105 (2004).
  26. Weissmann, R., Uziel, Y. Pediatric complex regional pain syndrome: a review. Pediatric Rheumatology Online Journal. 14 (1), 29 (2016).
  27. Kim, H., Lee, C. H., Kim, S. H., Kim, Y. D. Epidemiology of complex regional pain syndrome in Korea: An electronic population health data study. PLoS One. 13 (6), 0198147 (2018).
  28. Tang, C., et al. Sex differences in complex regional pain syndrome type I (CRPS-I) in mice. Journal of Pain Research. 10, 1811-1819 (2017).

Tags

السلوك ، المشكلة 155 ، الم ، متلازمة الم الاقليميه المعقدة من النوع الأول ، الوديونيا ، فرط الجينات ، المستقبلات العابرة المحتملة vanilloid 1 ، الم المزمن بعد الاسكيميه
نموذج الم المزمن بعد الاسكيميه لمتلازمة الم الاقليميه المعقدة من النوع الأول في الفئران
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Hu, Q., Zheng, X., Chen, R., Liu,… More

Hu, Q., Zheng, X., Chen, R., Liu, B., Tai, Y., Shao, X., Fang, J., Liu, B. Chronic Post-Ischemia Pain Model for Complex Regional Pain Syndrome Type-I in Rats. J. Vis. Exp. (155), e60562, doi:10.3791/60562 (2020).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter