Summary
Vi introducerer en slange tilgang til manchetten teknik til mus cervikal heterotopisk hjertetransplantation til at hjælpe evert fartøjet over manchetten. Vi fandt, at samarbejdet mellem to erfarne kirurger markant forkorter operationstiden.
Abstract
Murine hjertetransplantation er blevet udført i mere end 40 år. Med fremskridt inden for mikrokirurgi, visse nye teknikker er blevet brugt til at forbedre kirurgisk effektivitet. I vores laboratorium har vi optimeret manchetteknikken med to store trin. Først brugte vi den indre rør teknik til at indsætte en midlertidig slange i den eksterne halspulsåre og halspulsåren blodkar til at lette eversion af fartøjet over manchetten. For det andet udførte vi komplet heterotopisk hjertetransplantation gennem samarbejde med to erfarne kirurger. Disse ændringer reducerede effektivt driftstiden til 25 minutter med en succesrate på 95 %. I denne rapport beskriver vi disse procedurer i detaljer og leverer en supplerende video. Vi mener, at denne betænkning om den forbedrede manchetteknik vil give praktisk vejledning til murine heterotopisk hjertetransplantation og vil forbedre nytten af denne musemodel til grundforskning.
Introduction
Etableringen af mus heterotopisk hjertetransplantation gennem end-to-end anastomose i maven i 1973 var en vigtig milepæl i grundlæggende transplantation immunologi forskning1. Denne model gav et vigtigt og gyldigt værktøj til at analysere mekanismerne i iskæmi reperfusion skade2,immunologisk afvisning, og tolerance3,4. Men, den komplekse og tidskrævende karakter af operationen samt potentialet for infektioner kan resultere i alvorlige perioperative abdominale sammenvoksninger og inflammatoriske reaktioner, resulterer i en lav effektivitet for heterotopisk hjertetransplantation model.
Den cervikale heterotopiske hjertetransplantationsteknik blev første gang beskrevet af Chen i 19915. I denne model, modtagerens eksterne halspulsåren er anastomosed til lungepulsåren af transplantatet og halspulsåren er anastomosed til den opstigende aorta. De vigtigste fordele ved denne metode er bekvemmeligheden ved overvågning og reduktion af traumer til modtageren. I samme år, Beskrev Matsuura en forbedret teknik, hvor slutningen af den eksterne halspulsåren og halspulsåren blev everted over en Teflon manchet og fast med en circumferential silke ligatur6. Nogle forskere også fast manchetten til højre lungearterie i donorhjertet, før du indsætter manchetten i den eksterne halspulsåre af modtageren7. Hidtil har manchetten teknik været udbredt i forskellige vaskulære pedicle transplantation modeller, herunder dem for lunge8,lever9, og nyre10 transplantation.
Til dato er der flere vanskeligheder forbundet med manchet teknik. For eksempel er kardemædepulsåren svært at evert over manchetten på grund af den ekstra elasticitet, hvilket resulterer i vævet flipping baglæns. Derfor kan yderligere praksis og en mikrokirurgisk dilator være nødvendig for at fuldføre dette trin. Desuden kan præparationen af livmoderhalsen tage op til 25 minutter.
For at løse disse problemer introducerer vi slangeteknikken, som er baseret på manchetten og omfatter fastgørelse af manchetten på den udvendige halspulsåre og halspulsåre ved hjælp af et slange til at hjælpe med eversionen af karvæggen. Hertil kommer, med simpel træning, er modtageren forberedelse reduceret til 15,5 minutter. Denne teknik reducerer kompleksiteten af operationen og kræver ikke yderligere praksis eller brug af en vaskulær dilator. Det kan anvendes i alle transplantation immunforskning, især for at kontrollere tredjeparts immun tolerance, hvor modtageren modtager to hjerte allografts, en i maven og den anden i nakken11. Vi anbefaler også samarbejde mellem to dygtige kirurger for at etablere denne model, hvor den ene kirurg forbereder recipientdyret, og den anden høster og implanterer donorhjertet. Et sådant samarbejde kan forkorte driftstiden til 25 minutter. Ved hjælp af denne optimerede procedure har vi etableret syngeneic, allogene12,,13,,14,,15,,16,,17,,18,,19, og xenogeneic mus hjerte transplantation modeller20.
Begrundelsen for udviklingen af slangen teknik var at reducere driftstiden for etablering af en mus hjertetransplantation model med en høj succesrate. Optimering af den cervikale hjertetransplantation model letter erhvervelsen af høje succesrater i en kort periode af kirurgi tid i forhold til den traditionelle sutur og manchet teknik21. Desuden kan samarbejdsmodellen yderligere reducere donorhjertets varme iskæmiske tid sammenlignet med operationer, der udføres med en enkelt operatør.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Dyr (BALB/c, C57BL/6, handyr, 8-12 uger) anbringes i et bestemt patogenfrit anlæg på Xiamen University Laboratory Animal Center. C57BL/6 anvendes som modtager, og BALB/c anvendes som donor. Alle procedurer udføres i henhold til Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) retningslinjer.
BEMÆRK: Et sæt mikrokirurgiske instrumenter, herunder en mikrosaks, mikronøre pincet, mikrobuede pincet og mikronåleholdere, er nødvendige for driften (Tabel og materialer, Figur 1B, C, D, E). Et par engangs-bulldog klemmer (Figur 1F) er nødvendig. To manchetter til den eksterne halspulsåre og halspulsåren fremstilles ved at skære de tilpassede polyamidrør med en nr. Diameteren af vene- og arteriemanchetten er henholdsvis 0,9 mm og 0,55 mm. Desuden er diameteren af det indre rør for den tilsvarende venemanchetten 0,6 mm, og disse af slangen til den tilsvarende arteriemanchet er 0,28 mm (Figur 1G).
1. Forberedelse af modtager
- Anesthetize modtagermusen med pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Brug atraumatiske mekaniske klippere til at fjerne håret på højre laterale livmoderhalskræft region.
- Brug en steril bomuld spids applikator til at tørre det kirurgiske område med jod antiseptisk efterfulgt af 70% ethanol.
- Placer musen i liggende position på operationsplatformen. Dæk musen med steril gaze.
- Brug en oftalmisk saks til at lave et tværgående snit fra den nederste tredjedel hals midterudline til højre skulder-kravebenet fælles.
- Isoler den højre udvendige halspulsåre med mikro buede pincet til at udsætte nok længde, afbrød grenene via elektrokoagulation, og ligate beholderen i den distale ende ved hjælp af en 6-0 silke sutur.
- Clamp den eksterne halspulsåre proksimalt ved hjælp af en bulldog klemme og derefter transect venen proksimalt til ligaturen ved hjælp af en mikro saks.
- Beholderen lumen vaskes med 100 U/ml 0-4 °C hepariniseret saltvand for at fjerne eventuelt restblod.
- Træk den eksterne halspulsåre gennem venemanchetten ved hjælp af mikro lige pincet; stik venen ind i lumen som en stent, og stil karvæggen hen over manchetten med mikronært pincet (Figur 2A).
- Fastgør den everted fartøj endotel i den proksimale ende af manchetten ved hjælp af en circumferential 8-0 silkes sutur (Figur 2B).
- Brug mikro lige pincet til at trække veneindrør fra venebeholderen.
- Udfør stump dissektion med mikro buede pincet til at isolere den højre carotis arterie støder op til den indre kant af sternocleidomastoid.
- Clamp højre carotis arterie proksimalt ved hjælp af en bulldog klemme, ligate kartugning arterie distalt ved hjælp af en 6-0 silke sutur, og bruge en mikro saks til at transect kardepulsåren proksimalt til ligaturen.
- Carotispulsen vaskes med 100 U/ml 0-4 °C hepariniseret saltvand for at fjerne eventuelt restblod.
- Carotispulsåren passerer gennem arteriemanchetten og indsætte arteriens indre rør i arteriekarret ved hjælp af mikro lige pincet (Figur 2C).
- Evert fartøjet over manchetten ved hjælp af mikro lige pincet; fastgør den everted fartøj endotel ved hjælp af en circumferential 8-0 silkes sutur (Figur 2D).
- Træk arteries indre rør ud af arteriebeholderen med mikro lige pincet.
BEMÆRK: Bevar modtagerens submandibulære kirtel.
2. Forberedelse af donorer
- Æser donormusen med pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Brug atraumatiske mekaniske klippere til at fjerne håret i maveregionen.
- Placer musen i liggende position på operationsplatformen. Dæk musen med steril gaze.
- Brug en steril bomuld spids applikator til at tørre det kirurgiske område med jod antiseptisk efterfulgt af 70% ethanol.
- Lav en abdominal midterlinjen snit med en oftalmisk saks og udsætte bughulen.
- Brug mikro buede pincet til at eksponere ringere vena cava, og derefter intravenøst injicere 200 μL af 100 U/ml 0-4 °C hepariniseret saltvand pr 20 g kropsvægt gennem ringere vena cava.
- Udfør thoracotomy med oftalmologiske saks, afbrød ribbenene gennem den bilaterale midaxillary linje indsnit, flip den forreste brystvæg udad for at afsløre brysthulen.
- Punktafgifter thymus med mikro buede pincet.
- Aortaen udsættes, og derefter gennemgå 200 μL på 100 U/ml 0-4 °C hepariniseret saltvand til koronararterien gennem aortabuen.
BEMÆRK: Undgå at perfundere gasbobler ind i donorhjertet. - Brug en mikrosaks til at transectere den stigende aorta i begyndelsen af aortabuen.
- Transect lungepulsåren i begyndelsen af de to hovedgrene med en mikro saks.
- Ligate den overlegne vena cava og ringere vena cava proximally ved hjælp af en 6-0 silke sutur og bruge en mikro saks til at transect vene distally til ligatur.
- Ligatere lungevenerne sammen, omkreds, ved hjælp af en enkelt 6-0 silke sutur, og afbrød venegrene distalt til ligaturen ved hjælp af en mikro saks.
- Fjern hjertetransplantation fra det omgivende bløde væv; den bevares i 0-4 °C hepariniseret saltvand.
3. Hjerteimplantation
- Placer donorhjertet på hovedet i modtagerens højre halsregion.
- Input lungepulsåren af donorhjertet til en 6-0 silkes løkke med mikro lige pincet.
- Wrap fartøjet lumen omkring vene manchet, og derefter stramme 6-0 silke sutur sløjfer omkring manchetten til band fartøjet fælles.
- Udfør anastomose af transplantatets aorta og arteriemanchetten ved at følge de trin, der er beskrevet i trin 3.2.
- Slip den fastspændte halspulsåre efterfulgt af den fastspændte halspulsåre. Hold karleddets samling uskadt, og sørg for, at blodgennemstrømningen er uhindret.
BEMÆRK: Sinusrytmen, der vender tilbage til mere end 200 gange inden for 1 minut, betragtes som normal. - Fugt donorhjertet med varmt (37 °C) saltvand, og undersøg, om transplantatet bløder. Indstil den pulserende hjertetransplantation i det subkutane rum, og syr derefter snittet.
4. Postoperativ pleje og graft vurdering
- Registrer tiden til normal sinusrytme og bevarelse af normal sinusrytme i mindst 5 minutter efter skrapefrigivelse for at overvåge den postoperative graftfunktion.
- Placer modtageren alene på et varmt tæppe, indtil modtageren vågner op fra anæstesi. Buprenorphin analgesi, 0,05 mg/kg, s.c, ved afslutningen af operationen og hver 12 timer i 72 timer efter operationen.
- Registrer modtagerens vægt- og postoperative gendannelsesstatus dagligt. I tilfælde af >15% vægttab i forhold til den på kirurgi dato, hemiplegic lammelse, eller infektion, aflive modtageren via terminal isofluran inhalation21.
- Monitorer graftoverlevelse ved palpering dagligt. Operationen anses for at være en succes, hvis murine allograft overlever i >72 timer. Graftfunktionen klassificeres som tidligere rapporteret22: Skala 3 - kraftigt pulserende og hyppighed; Skala 2 - mindre pulserende; Skala 1- fibrillering og overhængende afvisning; eller Skala - 0, tab af hjerteslag og fuldstændig afvisning.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Kirurgisk operationStid
Efter træning, en dygtig kirurg kan med held udføre operationen inden for 35 minutter ved hjælp af slangen teknik, hvor ca 15,5 minutter er nødvendige for modtageren forberedelse, 10,9 minutter er nødvendige for donor forberedelse, og 4,4 minutter er nødvendige for donor hjerte anastomoses. Den kolde og varme iskæmitid (fra donorforberedelse til hjerteimplantation) reduceres til 15,3 minutter sammenlignet med betjeningen ved hjælp af manchetteknikken uden slangeteknik og suturteknik (Tabel 1)21.
Vi har udviklet en samarbejdsmodel, der skal forbedre effektiviteten af operationen yderligere. Som vist i det skematiske (Figur 3) begynder en kirurg først at udføre recipientpræparatet efterfulgt af en anden kirurgs indledning af donorpræparatet efter 4-5 minutter. Efter 15-16 minutter, den første kirurg skulle have afsluttet modtageren præparatet, på hvilket tidspunkt den anden kirurg er færdig med at høste donor hjerte, bør begynde anastomosing donor hjerte i modtageren. Denne samarbejdsmodel kræver, at hver kirurg kun uddannes i en enkelt del af manchetteknikken og yderligere forkorter den samlede driftstid til ca. 25 minutter. En analyse af >600 heterotopiske murine transplantationer udført gennem samarbejde mellem to kirurger i løbet af de seneste to år på Organ Transplantation Institute of Xiamen University viser en succesrate for hjertetransplantation ved hjælp af denne teknik på op til 95%.
Overlevelse af Major Histocompatibility Kompleks Hjerte uoverensstemmende og Matchede Cardiac Grafts
Major Histocompatibility Complex (MHC), der er udpeget som "H-2", er blevet brugt til at bestemme genetiske forskelle og ligheder. MHC-antigener, der ikke er noget som svar på, kan udløse graftafstødning ved at interagere direkte med recipient-T-cellerne eller indirekte som donor MHC-afledte peptider udtrykt på modtager MHC-molekyler23. Et fuldt MHC-uoverensstemmende BALB/c (H-2d)allografthjerte kan afvises med en median overlevelsestid på 7,5 dage efter transplantation til C57BL/6 (H-2b) modtagermus (Figur 4A). I vores undersøgelser overlevede syngeneic hjertetransplantationer mere end 100 dage, undtagen i et sjældent tilfælde på grund af et 15% vægttab i forhold til normal vægt før operationen.
Hjerte allografts kan høstes til histopatologisk undersøgelse på tidspunktet for afvisningen. Figur 4B viser udseendet af markante cellemedierede afstødningskarakteristika, såsom inflammatorisk celleinfiltration, vævsødem og mikrovaskulær okklusion. Syngeneic grafts er nær normal uden tegn på myocyt nekrose eller inflammatorisk celle infiltration.
Effekt af inner tube på vaskulær endotel
For at vurdere skaderne på det vaskulære endotel efter indsættelse af slangen i lumen, 100 dage efter syngeneic hjertetransplantation, den vaskulære endotel af anastomose site kan indsamles og farves ved immunofluorescerende. I denne analyse blev der ikke observeret nogen tydelig indsnævring af vaskulær væg, trombose eller fortykkelse af intimaen (figur 4C). Elektronmikroskopisk billeddannelse viste, at et glat endotel og en regelmæssig dannelse i længderetningen, hvor endotelcellerne er anbragt pænt og tæt, uden tydelige sedimenter på overfladen (Figur 4D).
Figur 1: Et sæt sterile kirurgiske instrumenter:
(A) Fine pincet og oftalmologiske saks; ( B) Mikro buede pincet; cC) lige tang til mikro- og mikrotring d) indehavere af mikronåle (E) Mikrosaks; (F) Bulldog klemmer; (G) En arterie slange (rød prikket pil) og manchet (rød massiv pil), sammen med en vene slange (sort prikket pil) og manchet (sort solid pil). Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 2: Forberedelse af modtageren.
(A) Stik veneindrørdet ind i det udvendige halspulsårebeholder. (B) Evert venebeholderen over manchetten og fastgør det ved hjælp af en omkreds 8-0 silkes sutur cC) Indskærrerørets arterie i arteriekarrets lumen. (D) Evert venebeholderen over manchetten og fastgør det ved hjælp af en omkreds 8-0 silkes sutur. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 3: Operationstid for hvert trin i heterotopisk murinetransplantation. Klik her for at se en større version af dette tal.
Figur 4: (A) Overlevelsestid for hjertetransplantater. Kaplan-Meier-plot, der viser overlevelsen af hjerte-allografts (BALB/c) og syngeneic grafts (C57BL/6) fra donormus, der er transplanteret til C57BL/6-recipientmus (n=12 mus/gruppe); (B) Mikroskopisk undersøgelse af C57BL/6 (venstre) Isograft og Wild Type BALB/c Allograft (til højre) på dag 7 efter transplantation (målestok, 50 um; forstørrelse ×400); (C) Immunofluorescens (Skala barer, 50 μm; forstørrelse × 400) (D) Elektron mikroskopi Scanning af vaskulær endotel i transplantat (venstre) og Naive (højre) Modtager. Klik her for at se en større version af dette tal.
| Anastomoseteknik | Forberedelsestid for modtager | Donor forberedelsestid | Tidspunkt for hjerteimplantation | Kold og varm iskæmi tid | Samlet operationstid | |
| kr. Livmoderhalskræft heterotopisk | Sutur | N | N | N | < 45 min. | N |
| kr. Livmoderhalskræft heterotopisk | Manchet | 45 min. | 15 min. | 10 min. | N | N |
| kr. Cervikal heterotopisk | Manchet | 15 min. | 20 min. | 15 min. | 25-40 min. | < 60 min. |
| kr. Abdomen heterotopisk | Sutur | N | N | N | N | 35 min. |
| kr. Livmoderhalskræft heterotopisk | Manchet | N | 20 min. | N | 30 min. | 35 min. |
| kr. Livmoderhalskræft heterotopisk | Manchet | N | 20 min. | 20 min. | < 35 min. | N |
| kr. Abdomen heterotopisk | Sutur | 60-70 min. | 6-7 min. | N | N | 75 min. |
| kr. Livmoderhalskræft heterotopisk | Manchet | N | N | 7 min. | 20 min. | 45 min. |
| kr. Abdomen heterotopisk | Sutur | N | 10-15 min. | N | N | 45-60 min. |
| kr. Livmoderhalskræft heterotopisk | Manchet | 25 min. | 20 min. | 15 min. | 20 min. | 60 ± 8 min. |
| kr. Livmoderhalskræft heterotopisk | Manchet | 31,9 min. | 21.1 min. | 5,1 min. | 28,5 min. | 57,8±3,9 min. |
| kr. Livmoderhalskræft heterotopisk | Sutur | 25,2 min. | 20,5 min. | 30,8 min. | 51,3 min. | 83,9±2,9 min. |
| Livmoderhalskræft heterotopisk i vores protokol | Manchet | 15,5 min. | 10,9 min. | 4,4 min. | 15,3 min. | 35 min. |
| (Enkelt operation) | ||||||
| 23 min. | ||||||
| (Samarbejde) |
Tabel 1: Sammenligning af tid af forskellige faser i forskellige Mus Hjerte transplantation teknikker.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Mus hjertetransplantationer modeller er vigtige værktøjer til transplantation immunologi forskning, som værktøjer og materialer til evaluering af immunmekanismer af denne model og et stort antal gen-modificerede mus er tilgængelige. Mikrokirurgiske tekniske udfordringer, såsom både sutur og eversion, har imidlertid begrænset dens udbredte anvendelse. I denne undersøgelse har vi undersøgt visse centrale tekniske udfordringer ved murine hjertetransplantation og har opnået gode resultater. Et kritisk trin i protokollen indsættelsen af et slange i lumen som en stent til evert karvæggen over manchetten. Dette optimeringstrin løser den tekniske udfordring med at eige arteriefartøjet på grund af behovet for en omfattende strækning. Personer uden mikrokirurgiske færdigheder kan begynde at udføre teknikken efter to måneders træning, hvilket også vil støtte i den brede anvendelse af denne model.
Det er vores erfaring, at et passende indre rør vil forbedre transplantationsresultaterne. Den udvendige diameter af det indre rør skal være lidt mindre end den indvendige diameter af modtageren blodkar. Desuden bør stumpe polypropylenrør eller cylindre med en glat overflade anvendes som de midlertidige indre kerner for at undgå at beskadige det vaskulære endotel. I vores hænder, ingen trombose opstod i 5% af modeller, der mislykkedes, selv om trombe er en vigtig faktor for fiasko efter anastomose ved hjælp af sutur teknik. Ved hjælp af disse modne modeller, har vores laboratorier offentliggjort flere grundlæggende forskning artikler, der er blevet anerkendt af peer reviewers14,15,,16,17,18,19.
Operationer udført inden for 35 minutter var ikke signifikant anderledes i forhold til den traditionelle manchet teknik, men den kolde og varme iskæmi tid var betydeligt lavere end andre teknikker (Tabel 1). Brug af samarbejdsmodellen reducerer yderligere den gennemsnitlige driftstid til 23-25 minutter, hvilket afspejles i anæstesitiden for modtagermusen og i donorhjerteimplantationstiden. En anden fordel ved manchetten teknik, at det begrænser den varme iskæmisk tid (Tabel 1). Da der ikke bruges ispose til at beskytte hjertetransplantatet mod musemodtagerens varme kropstemperatur, svarer den varme iskæmisk tid til anastomosetiden. Den optimerede manchetteknik indebærer forberedelse af begge manchetter på modtageren for at forenkle anastomoseproceduren og forkorter derfor anastomosetiden. Derfor begrænser manchetteknikken den varme iskæmisk tid til kun 4,4 minutter i gennemsnit.
Der er dog visse vigtige trin at bemærke med den nye teknik diskuteret. Sørg for at bevare den submandibulære kirtel af modtageren musen i livmoderhalskræft heterotopisk hjertetransplantation30, som submandibular kirtel kan bruges til at fastsætte hjertet transplantat og undgå vridning af fartøjerne. Undgå at beskadige vagus nerve ved at isolere den eksterne halspulsåren og halspulsåren, som skade kan føre til hals hemiplegi i modtageren. Presset fra bulldog klemmerne skal holdes på 20-25 gram for at undgå klipskade eller fartøjslækage. Beholdernes lumen og manchetterne vaskes med 0-4 °C hepariniseret saltvand for at fjerne eventuelle resterende blod- og gasbobler. dette forhindrer emboli i transplantater efter reperfusion. Brug en 1 ml sprøjte til perfusing donor med 0-4 °C hepariniseret saltvand og øge hastigheden til 50 μL per sekund for at opretholde et passende tryk. Under anastomose må circumferential 8-0 ikke band suturer (bruges til at fastsætte everted vaskulære endotel til manchetter) i lumen af transplantatet arterier.
Selv om der er begrænsninger i samarbejdsmodellen, som omfatter behovet for mikrokirurgiske teknikker, tilgængeligheden af to samtidige mikroskoper og det dobbelte af antallet af faglærte kirurger, har det ikke desto mindre vist sig at være en vellykket tilgang til vaskulær organtransplantation. Dens bredere anvendelse kan yderligere bidrage til at udvikle nye immunsuppressive protokoller og undersøgelse af mekanismerne for akut og kronisk afvisning i transplantationsområdet.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Forfatterne har intet at afsløre.
Acknowledgments
Dette arbejde blev støttet af Fujian Provincial Health Education Joint Research Project (WKJ2016-2-20), National Natural Science Foundation of China (81771271 og 81800664), Det Nationale Centrale F&U-program i Kina (2018YFA0108304) og Uddannelses- og Forskningsprojektet for unge og midaldrende lærere i Fujianprovinsen (JAT170714), Natural Science Foundation i Hunan-provinsen i Kina (2019JJ50842) og Huxiang Young Talents of Hunan Province (2019RS2013).
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Artery cuff | Self-made | Polyamide tube. diameter: 0.55 mm,length: 1.0 mm | |
| Artery inner tube | Self-made | Polyamide tube. Diameter: 0.28mm | |
| Micro curved forceps | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | WA3050 | 1/8 arc, 0.3-mm tip without a hook |
| Micro needle holders | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | WA2050 | 0.2-mm tip |
| Micro scissors | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | WA1050 | Straight, blade length: 10 mm |
| Micro straight forceps | Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory | WA3060 | 0.15-mm tip without a hook |
| Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps | Scanlan International Inc | 1001-531 | Clamping pressure 20–25 grams |
| Vein cuff | Self-made | Polyamide tube. diameter: 0.9 mm,length: 1.2 mm | |
| Vein inner tube | Self-made | Polyamide tube. Diameter: 0.6 mm |
References
- Corry, R. J., Winn, H. J., Russell, P. S. Heart transplantation in congenic strains of mice. Transplantation Proceedings. 5 (1), 733-735 (1973).
- Que, W., et al. Prolonged cold ischemia time in mouse heart transplantation using supercooling preservation. Transplantation. , (2019).
- Wang, C. Y., et al. Suppression of murine cardiac allograft arteriopathy by long-term blockade of CD40-CD154 interactions. Circulation. 105 (13), 1609-1614 (2002).
- Hasegawa, T., Visovatti, S. H., Hyman, M. C., Hayasaki, T., Pinsky, D. J. Heterotopic vascularized murine cardiac transplantation to study graft arteriopathy. Nature Protocols. 2 (3), 471-480 (2007).
- Chen, Z. H. A technique of cervical heterotopic heart transplantation in mice. Transplantation. 52 (6), 1099-1101 (1991).
- Matsuura, A., Abe, T., Yasuura, K. Simplified mouse cervical heart transplantation using a cuff technique. Transplantation. 51 (4), 896-898 (1991).
- Wang, Q., Liu, Y., Li, X. K. Simplified technique for heterotopic vascularized cervical heart transplantation in mice. Microsurgery. 25 (1), 76-79 (2005).
- Li, W., et al. Surgical technique for lung retransplantation in the mouse. Journal of Thoracic Disease. 5 (3), 321-325 (2013).
- Kamada, N., Calne, R. Y. A surgical experience with five hundred thirty liver transplants in the rat. Surgery. 93 (1), Pt 1 64-69 (1983).
- Chen, H., Zhang, Y., Zheng, D., Praseedom, R. K., Dong, J. Orthotopic kidney transplantation in mice: technique using cuff for renal vein anastomosis. PLoS One. 8 (10), 77278 (2013).
- Miller, M. L., et al. Spontaneous restoration of transplantation tolerance after acute rejection. Nature Communications. 6, 7566 (2015).
- Lin, Y., et al. Overexpression of Jagged-1 combined with blockade of CD40 pathway prolongs allograft survival. Immunology and Cell Biology. 93 (2), 213-217 (2015).
- Xie, B., et al. Combined costimulation blockade inhibits accelerated rejection mediated by alloantigen-primed memory T cells in mice. Immunological Investigations. 38 (7), 639-651 (2009).
- Shao, W., et al. Combination of monoclonal antibodies with DST inhibits accelerated rejection mediated by memory T cells to induce long-lived heart allograft acceptance in mice. Immunology Letters. 138 (2), 122-128 (2011).
- Dai, H., et al. Blockade of CD27/CD70 pathway to reduce the generation of memory T cells and markedly prolong the survival of heart allografts in presensitized mice. Transplant Immunology. 24 (4), 195-202 (2011).
- Yan, G., et al. Inhibition of accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonged allograft survival by arsenic trioxide. Immunological Investigations. 42 (5), 438-454 (2013).
- Yan, G., et al. Inhibiting accelerated rejection mediated by alloreactive CD4(+) memory T cells and prolonging allograft survival by 1alpha,25-dihydroxyvitamin D(3) in nude mice. Immunology Letters. 149 (1-2), 54-61 (2013).
- Lin, Y., et al. Arsenic trioxide is a novel agent for combination therapy to prolong heart allograft survival in allo-primed T cells transferred mice. Transplant Immunology. 25 (4), 194-201 (2011).
- Shao, W., et al. CD44/CD70 blockade and anti-CD154/LFA-1 treatment synergistically suppress accelerated rejection and prolong cardiac allograft survival in mice. Scandinavian Journal of Immunology. 74 (5), 430-437 (2011).
- Li, Y., et al. A highly reproducible cervical cuff technique for rat-to-mouse heterotopic heart xenotransplantation. Xenotransplantation. , (2017).
- Oberhuber, R., et al. Murine cervical heart transplantation model using a modified cuff technique. Journal of Visualized Experiments. (92), e50753 (2014).
- Blanchard, J. M., Pollak, R. Techniques for perfusion and storage of heterotopic heart transplants in mice. Microsurgery. 6 (3), 169-174 (1985).
- Felix, N. J., et al. H2-DMalpha(-/-) mice show the importance of major histocompatibility complex-bound peptide in cardiac allograft rejection. Journal of Experimental Medicine. 192 (1), 31-40 (2000).
- Tomita, Y., et al. Improved technique of heterotopic cervical heart transplantation in mice. Transplantation. 64 (11), 1598-1601 (1997).
- Niimi, M. The technique for heterotopic cardiac transplantation in mice: experience of 3000 operations by one surgeon. Journal of Heart and Lung Transplantation. 20 (10), 1123-1128 (2001).
- Wang, K., Zhang, N., Li, H. Improved technique of mouse heterotopic heart graft retransplantation. Microsurgery. 26 (3), 200-202 (2006).
- Plenter, R. J., Grazia, T. J. Murine heterotopic heart transplant technique. Journal of Visualized Experiments. (89), (2014).
- Ratschiller, T., et al. Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice. Journal of Visualized Experiments. (102), e52907 (2015).
- Zhou, Y., Gu, X., Xiang, J., Qian, S., Chen, Z. A comparative study on suture versus cuff anastomosis in mouse cervical cardiac transplant. Experimental and Clinical Transplantation. 8 (3), 245-249 (2010).
- Fukunaga, N., Bissoondath, V., Rao, V. Submandibular Gland-preserving Technique for Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice. Transplantation. 102 (11), 464-465 (2018).
