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Neuroscience

तंत्रिका स्थानांतरण सर्जरी को पार करने के लिए प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से प्रत्यक्ष एनास्टोमोसिस का एक माउस मॉडल

Published: October 19, 2021 doi: 10.3791/63051
Automatic Translation
*1,2, *1, *1, 1, 1, 1, 1, 1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5
1Department of Hand Surgery, Huashan Hospital, Fudan University, 2Department of Hand and Upper Extremity Surgery, Jing‘an District Central Hospital, Fudan University, 3The National Clinical Research Center for Aging and Medicine, Fudan University, 4Institutes of Brain Science, Fudan University, 5State Key Laboratory of Medical Neurobiology, Collaborative Innovation Center of Brain Science, Fudan University
* These authors contributed equally

Summary

हमने चूहों में प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से द्विपक्षीय ब्रेकियल प्लेक्सस नसों के प्रत्यक्ष एनास्टोमोसिस के प्रोटोकॉल को स्थापित करने के लिए नैदानिक सर्जरी का अनुकरण किया, जो केंद्रीय और परिधीय तंत्रिका तंत्र की चोटों के बाद तंत्रिका हस्तांतरण को पार करने पर पुनर्वास के अंतर्निहित तंत्रिका तंत्र के अध्ययन में योगदान देता है।

Abstract

क्रॉसिंग तंत्रिका स्थानांतरण सर्जरी ब्रेकियल प्लेक्सस एवल्शन चोटों वाले रोगियों में घायल ऊपरी छोरों की मरम्मत के लिए एक शक्तिशाली दृष्टिकोण रहा है। हाल ही में, इस सर्जरी को मस्तिष्क की चोट के नैदानिक उपचार में रचनात्मक रूप से लागू किया गया था और लकवाग्रस्त हाथ के पर्याप्त पुनर्वास को प्राप्त किया गया था। सर्जरी के बाद इस कार्यात्मक वसूली से पता चलता है कि परिधीय सेंसरिमोटर हस्तक्षेप मस्तिष्क क्षति के बाद समारोह के नुकसान की भरपाई के लिए गहन न्यूरोप्लास्टी को प्रेरित करता है; हालांकि, अंतर्निहित तंत्रिका तंत्र को खराब समझा जाता है। इसलिए, एक आकस्मिक नैदानिक पशु मॉडल की आवश्यकता है। यहां, हमने चूहों में प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से द्विपक्षीय ब्रेकियल प्लेक्सस नसों के प्रत्यक्ष एनास्टोमोसिस के प्रोटोकॉल को स्थापित करने के लिए नैदानिक सर्जरी का अनुकरण किया। न्यूरोनाटोमिकल, इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल और व्यवहार संबंधी प्रयोगों ने यह पहचानने में मदद की कि इन चूहों की स्थानांतरित नसों ने बिगड़ा हुआ फोरलिंब को सफलतापूर्वक बहाल किया और मस्तिष्क की चोट के बाद मोटर रिकवरी में तेजी लाने में योगदान दिया। इसलिए, माउस मॉडल ने केंद्रीय और परिधीय तंत्रिका तंत्र की चोटों के बाद तंत्रिका हस्तांतरण को पार करने पर पुनर्वास के अंतर्निहित तंत्रिका तंत्र का खुलासा किया।

Introduction

ब्रेकियल प्लेक्सस (बीपी) में विभिन्न रीढ़ की हड्डी के खंडों (सी 5-टी 1) के साथ पांच तंत्रिकाएं होती हैं जो हाथ, हाथ और उंगलियों में सनसनी और आंदोलन के लिए जिम्मेदार होती हैं। रीढ़ की हड्डी से इन पांच बीपी नसों के बाहर निकलने के बाद, वे तीन तंत्रिका चड्डी बनाने के लिए विलीन हो जाते हैं: बेहतर (सी 5 और सी 6 के विलय से गठित), औसत दर्जे का (सी 7 से), और अवर (सी 8 और टी 1 की शाखाएं)। गंभीर चोटें, विशेष रूप से यातायात दुर्घटनाओं के कारण, अक्सर बीपी तंत्रिका जड़ों के उच्छेदन का कारण बनती हैं, और इस तरह की शिथिलताका रोगियों पर विनाशकारी प्रभाव पड़ता है। एक शक्तिशाली नैदानिक दृष्टिकोण के रूप में, बीपी 2,3 के स्वस्थ पक्ष में घायल तंत्रिका सिरों को फिर से जोड़कर बीपी को उच्छेदन की चोटों की मरम्मत के लिए तंत्रिका हस्तांतरण सर्जरी को पार करना किया गया है। इस सर्जरी के परिणामस्वरूप घायल हाथों के कार्यात्मक सुधार और रोगियों में दोनों गोलार्द्धों में सेंसरिमोटर कॉर्टेक्स का प्रत्यक्ष पुनर्गठनहोता है। पशु अध्ययन से पता चला है कि तंत्रिका हस्तांतरण5 को पार करने के बाद कॉर्टिकल सर्किट में कठोर पुनर्गठन प्रेरित किया गया था। क्योंकि परिधीय सेंसरिमोटर संशोधन परिपक्व मस्तिष्क की निष्क्रिय प्लास्टिसिटी को पुन: सक्रिय कर सकता है, तंत्रिका स्थानांतरण सर्जरी को पार करना भी मस्तिष्क की चोटों की मरम्मत में काफी क्षमता प्रदर्शित करता है6.

हाल ही में, हमने केंद्रीय तंत्रिका तंत्र के साथ समस्याओं के लिए एक नई परिधीय तंत्रिका परिवर्तन रणनीति के रूप में तंत्रिका हस्तांतरण को पार करने के रचनात्मक उपयोग की संभावना की पुष्टि की। क्रॉसिंग नर्व ट्रांसफर सर्जरी का एक प्रकार, कॉन्ट्रालेटरल ग्रीवा सातवें तंत्रिका स्थानांतरण (CC7), मस्तिष्क की चोटके बाद रोगी में लकवाग्रस्त पक्ष में गैर-लकवाग्रस्त पक्ष से C7 तंत्रिका को स्थानांतरित करके लकवाग्रस्त हाथ की महत्वपूर्ण कार्यात्मक वसूली प्राप्त करने के लिए लागू किया गया था। इस सर्जिकल ऑपरेशन की एक अनूठी विशेषता यह है कि लकवाग्रस्त ऊपरी छोर के संवेदी और मोटर संकेतों ने "बाएं-दाएं क्रॉसओवर" विस्थापित तंत्रिका के माध्यम से कॉन्ट्रालेशनल गोलार्ध को सूचित किया। विशेष रूप से, CC7 सर्जरी के कारण कार्यात्मक वसूली C7 तंत्रिका द्वारा ही8 द्वारा संक्रमित कार्य तक सीमित नहीं है। इसके अलावा, CC7 सर्जरी का उपयोग न केवल मस्तिष्क पक्षाघात वाले बच्चों के इलाज के लिए किया जा सकता है, बल्कि मध्यम आयु वर्ग और बुजुर्ग स्ट्रोक रोगियों में पुनर्वास प्राप्त करने के लिए भी किया जा सकता है। इसलिए, यह मानने के पर्याप्त कारण हैं कि तंत्रिका हस्तांतरण को पार करने से परिधीय सेंसरिमोटर प्रणाली को संशोधित करके मस्तिष्क क्षति से मोटर वसूली में तेजी लाने के लिए न्यूरोप्लास्टी को उत्तेजित किया जा सकता है।

हालांकि तंत्रिका स्थानांतरण सर्जरी को पार करने से ब्रेकियल प्लेक्सस चोटों (बीपीआई) और मस्तिष्क की चोटों दोनों के नैदानिक उपचार में पर्याप्त पुनर्वास प्राप्त हुआ है, लेकिन इस सर्जरी में अंतर्निहित तंत्रिका तंत्र खराब समझ में आते हैं। नैदानिक विशेषताओं वाले उपयुक्त पशु मॉडल की कमी ने आंतरिक तंत्र के अध्ययन को प्रतिबंधित कर दिया है। परंपरागत रूप से, क्लिनिक में, घाव के विपरीत सी 7 तंत्रिका जड़ को एक तंत्रिका ग्राफ्ट (जैसे, उलनार तंत्रिका, सुरल तंत्रिका, या सैफेनस तंत्रिका) के माध्यम से घायल पक्ष में स्थानांतरित किया जाता है और प्रभावित ब्रेकियल प्लेक्सस (जैसे, माध्यिका तंत्रिका, सी 7 जड़, या निचले ट्रंक) 2,3,9 से जुड़ा होता है। इस सर्जरी के एक अपेक्षाकृत नए संशोधन में अप्रभावित C7 रूट को बिना किसी अंतराल के प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से सीधे प्रभावित C7 तंत्रिका में स्थानांतरित किया जाता है, जो एक इष्टतम समाधान7 का सुझाव देता है। वर्तमान में, चूहों सेल-प्रकार विशिष्टता और आनुवंशिक तनाव विविधता में एक लाभ प्रदर्शित करते हैं और न्यूरोफिज़ियोलॉजिकल तंत्र का अध्ययन करने के लिए अधिक उपयुक्त हैं। इसलिए, नैदानिक सर्जरी चूहों में prespinal मार्ग के माध्यम से द्विपक्षीय C7 तंत्रिका जड़ों के प्रत्यक्ष anastomosis के लिए एक प्रोटोकॉल स्थापित करने के लिए अनुकरण किया गया था और तंत्रिका हस्तांतरण पार करने पर अंतर्निहित तंत्रिका तंत्र के अध्ययन में योगदान दिया.

Protocol

सभी पशु प्रयोगों को फुडन विश्वविद्यालय की प्रायोगिक पशु समिति की संस्थागत देखभाल और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान के दिशानिर्देशों के अनुरूप चीनी विज्ञान अकादमी द्वारा अनुमोदित किया गया था। आठ सप्ताह के वयस्क पुरुष C57BL/6N चूहों का उपयोग किया गया था।

1. प्रीऑपरेटिव सेटअप

  1. ऑटोक्लेव्ड निष्फल शल्य चिकित्सा उपकरणों, उपकरणों, एनाल्जेसिक दवाओं और संवेदनाहारी दवा का एक उपयुक्त स्टॉक सुनिश्चित करें।
  2. ऑपरेटिंग टेबल पर पर्याप्त कार्य स्थान सुनिश्चित करें।
  3. माउस के लिए बिस्तर के रूप में डायपर से ढके अनुकूलित सर्जिकल फोम बोर्ड का उपयोग करके ऑपरेटिंग टेबल तैयार करें। बाँझ धुंध के साथ कवर मेडिकल टेप के साथ फोम बोर्ड के लिए एक वार्मिंग पैड को ठीक करें।
  4. संवहनी संदंश का उपयोग कर एक एक्यूपंक्चर सुई झुकने से retractors बनाएँ, यह आधा में तह, और फिर एक हुक में मुड़ा एक्यूपंक्चर सुई की नोक झुकने. एक्यूपंक्चर सुई के अंत में एक रबर पट्टी को ठीक करें, और फोम बोर्ड के लिए रबर पट्टी के अंत को ठीक करने के लिए एक अंगूठे का उपयोग करें।
  5. स्टीरियोमाइक्रोस्कोप को कैलिब्रेट करें; एक पर्याप्त फोकस दूरी के साथ एक स्टीरियोमाइक्रोस्कोप चुनें। निष्फल एल्यूमीनियम पन्नी के साथ ज़ूम/फ़ोकस बटन को कवर करें ताकि सर्जन ऑपरेशन के दौरान उन्हें समायोजित कर सके। निष्फल एल्यूमीनियम पन्नी को ज़ूम/फ़ोकस बटन पर रखा गया था जिससे सर्जन बाँझ दस्ताने के साथ इसका उपयोग कर सके।

2. माउस संज्ञाहरण और तैयारी

  1. माउस वजन और शरीर के वजन (isoflurane 3%) के अनुरूप anesthetize. सुनिश्चित करें कि माउस प्रतिक्रिया नहीं करता है जब संज्ञाहरण की गहराई की पुष्टि करने के लिए उसके पंजे के इंटरडिजिटल रिक्त स्थान को पिन किया जाता है। संज्ञाहरण की पर्याप्त गहराई प्रक्रिया (1% isoflurane) भर में बनाए रखा जाना चाहिए.
  2. सर्जरी के दौरान कॉर्निया की जलन या सूखने से रोकने के लिए आंखों पर द्विपक्षीय रूप से नेत्र मरहम लगाएं।
  3. एक स्वचालित क्लिपर के साथ गर्दन और छाती पर फर शेविंग द्वारा शल्य साइट तैयार करें। ढीले बालों को हटा दें और साफ करें।
  4. बाँझ धुंध के साथ कवर वार्मिंग पैड पर एक लापरवाह स्थिति में माउस रखें. पूरे ऑपरेशन के दौरान 37 डिग्री सेल्सियस पर माउस का तापमान बनाए रखें। चिकित्सा टेप के साथ माउस को ठीक करें ताकि forelimbs क्षैतिज रूप से अपहरण कर लें और हिंद अंगों और पूंछ को आगे बढ़ने से रोकें। उचित उद्घाटन के साथ एक निष्फल डिस्पोजेबल सर्जिकल ड्रेप चूहों पर रखा गया था।

3. ऑपरेटिव प्रक्रिया

  1. ट्रामाडोल को पूर्व-खाली एनाल्जेसिया (20 मिलीग्राम / किग्रा, आईपी) के रूप में इंजेक्ट करें। हंसली के बेहतर किनारे पर अनुप्रस्थ चीरा को चिह्नित करें। सर्जिकल साइट कीटाणुरहित करने के लिए आयोडोफोर कीटाणुशोधन समाधान और इथेनॉल के वैकल्पिक स्क्रब के तीन चक्रों का उपयोग करें। सर्जरी से पहले एक पैर की अंगुली चुटकी के साथ संज्ञाहरण की गहराई की पुष्टि करें।
  2. एक खुर्दबीन के तहत काम करना, एक बाँझ स्केलपेल का उपयोग कर निशान के साथ एक 4 मिमी अनुप्रस्थ चीरा बनाते हैं. आवश्यकतानुसार प्रक्रिया के दौरान चीरा बढ़ाएं।
  3. चमड़े के नीचे के प्रावरणी के माध्यम से कुंद रूप से विच्छेदन करें और सबमांडिबुलर ग्रंथि की अवर सीमा की पहचान करें। सुप्राक्लेविकुलर फोसा और उरोस्थि को उजागर करने के लिए सबमांडिबुलर ग्रंथि को ऊपर की ओर खींचें।
    नोट: इस क्षेत्र में छोटे कैलिबर रक्त वाहिकाएं हो सकती हैं। रक्तस्राव को रोकने के लिए इलेक्ट्रोकॉटरी का उपयोग किया जा सकता है।
  4. मध्य रेखा के साथ सिर से पूंछ तक उरोस्थि को चीरकर आंशिक मध्य स्टर्नोटॉमी चीरा (~ 4 मिमी) बनाएं। स्टर्नोटॉमी के दौरान फुफ्फुस का सावरण, हृदय और रक्त वाहिकाओं की रक्षा करें।
  5. स्टर्नोहाइड मांसपेशी की पहचान करें। एक्यूपंक्चर सुइयों से बने दो छोटे अनुकूलित रिट्रैक्टर के साथ उरोस्थि को धीरे से खींचें और श्वासनली और अन्नप्रणाली के ऊपर स्टर्नोहाइड मांसपेशी की पहचान करें। मन्या धमनी, आंतरिक जुगुलर नस, फ्रेनिक तंत्रिका, वेगस तंत्रिका, श्वासनली, और घेघा बेनकाब करने के लिए इस मांसपेशी को वापस लेना.
    नोट: खुले न्यूमोथोरैक्स से बचने के लिए उरोस्थि को धीरे से वापस लें। मनुष्यों के विपरीत, माउस का अन्नप्रणाली श्वासनली के पीछे नहीं है, लेकिन बाईं ओर श्वासनली से सटे हुए है।
  6. बाएं ब्रैकियल प्लेक्सस की पहचान करें। बाएं आंतरिक जुगुलर नस के पार्श्व किनारे पर, ब्रेकियल प्लेक्सस को बेनकाब करने के लिए प्रावरणी और वसा ऊतक को बाहर की ओर खींचें। C5 और C6 नसों से बने बेहतर ट्रंक की तलाश करें, जिसकी तीन शाखाएँ हैं। C7 तंत्रिका से बना मध्य ट्रंक और C8 और T1 नसों से बना अवर ट्रंक की पहचान करें, ऊपरी ट्रंक के साथ माउस की पूंछ तक।
    नोट: ब्रेकियल प्लेक्सस की सतह पर अनुदैर्ध्य रक्त वाहिकाएं हैं। रक्तस्राव को रोकने के लिए इलेक्ट्रोकॉटरी का प्रयोग करें। बाएं ब्रेकियल प्लेक्सस को अलग करते समय, एक चिलस फिस्टुला से बचने के लिए काइलस नहर की रक्षा करें।
  7. बाईं C7 तंत्रिका फसल. हंसली के नीचे डिवीजन-टू-कॉर्ड स्तर पर मध्य ट्रंक (सी 7 तंत्रिका) के पूर्वकाल विभाजन और पीछे के विभाजन को विच्छेदित करें और तंत्रिका ट्रंक में स्थानीय जलसेक द्वारा 2% लिडोकेन के 0.1 एमएल के साथ सी 7 तंत्रिका को अवरुद्ध करें। पार्श्व कॉर्ड और पीछे की कॉर्ड के साथ अपने विलय बिंदुओं पर वन्नास स्प्रिंग कैंची द्वारा सी 7 तंत्रिका को फिर से काटना। C7 तंत्रिका ट्रिम इतना है कि प्रत्येक विभाजन की लंबाई समान है.
    नोट: C7 तंत्रिका के पूर्वकाल और पीछे के विभाजन और ऊपरी और निचले चड्डी के पूर्वकाल और पीछे के विभाजन संगम से पहले लंबी दूरी तक चलते हैं, इसलिए C7 तंत्रिका को लकीर से पहले पर्याप्त रूप से मुक्त किया जाना चाहिए। वास्तव में, सी 7 तंत्रिका हमेशा दो डिवीजनों में विभाजित नहीं होती है; कभी-कभी, इसे तीन डिवीजनों में विभाजित किया जाता है या दुर्लभ मामलों में चार में भी विभाजित किया जाता है।
  8. बायाँ C6 लामिना ventralyss निकालें। ध्यान से फ्रेनिक तंत्रिका की रक्षा करें और C7 तंत्रिका जड़ को बेनकाब करने के लिए C6 खंड के स्तर पर पूर्वकाल स्केलीन मांसपेशी को गंभीर करें। C7 तंत्रिका की छोटी शाखाओं को काटें जो माइक्रोफोर्सेप्स के साथ पैरास्पाइनल मांसपेशी को संक्रमित करती हैं। C7 तंत्रिका को धीरे से बाहर निकालें और C6 लैमिना वेंट्रालिस को ध्यान से एक्साइज करें।
    नोट: बाएं कैरोटिड धमनी के औसत दर्जे का पक्ष और घुटकी के पार्श्व पक्ष के बीच एक बोनी प्रमुखता है। यह बोनी प्रमुखता 6वें ग्रीवा कशेरुकाओं की लैमिना वेंट्रालिस है। C6 लैमिना वेंट्रालिस के पार्श्व किनारे की अनुदैर्ध्य मांसपेशी पूर्वकाल स्केलीन मांसपेशी है, और फ्रेनिक तंत्रिका पूर्वकाल स्केलीन मांसपेशी की सतह पर चलती है।
  9. सही C7 तंत्रिका फसल. बाईं ओर के समान दाईं ओर पूर्वकाल स्केलीन मांसपेशी को गंभीर करें, और इंटरवर्टेब्रल फोरामेन के करीब दाएं सी 7 तंत्रिका जड़ को पार करें। अपने विभाजन स्तर से सही C7 तंत्रिका काटना.
    नोट: तंत्रिका के नीचे रक्त वाहिकाओं को नुकसान से बचाने के लिए सही C7 तंत्रिका को सावधानी से काटें।
  10. बाएं C7 तंत्रिका को स्थानांतरित करें।
    1. कशेरुक निकायों के बगल में पेशी longus कोलाई आंशिक रूप से दोनों पक्षों पर निकालें. स्पष्ट रूप से अलग करें और श्वासनली-अन्नप्रणाली और कशेरुक शरीर के बीच की जगह का विस्तार करें।
    2. प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से कशेरुक शरीर के दाईं ओर से बाईं ओर आधा गुना 5-0 नायलॉन टांके भेजें।
    3. एक जलसेक ट्यूब के साथ बाएं C7 तंत्रिका को हिच करें और तंत्रिका को प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से दाईं ओर निर्देशित करें।
    4. श्वासनली और अन्नप्रणाली धीरे वापस लेने और 12-0 नायलॉन टांके का उपयोग कर तनाव के बिना सही C7 तंत्रिका के लिए बाएं C7 तंत्रिका के पूर्वकाल और पीछे विभाजन coapt. नसों को दृढ़ता से सहलाने के लिए 4-5 टांके के साथ नसों के चारों ओर एपिन्यूरियम को सीवन करें।
      नोट: उचित मोटाई की प्लास्टिक जलसेक ट्यूब चुनना महत्वपूर्ण है। एक ट्यूब की बहुत पतली तंत्रिका को नुकसान पहुंचा सकती है, और एक ट्यूब की बहुत मोटी श्वासनली और अन्नप्रणाली को नुकसान पहुंचा सकती है। इसके अलावा, श्वासनली-अन्नप्रणाली और कशेरुक शरीर के बीच का स्थान एक "वी" के आकार का स्थान है, और मांसपेशियों के लॉन्गस कोली के हिस्से को काटने से स्थानांतरण मार्ग छोटा हो सकता है।

4. घाव बंद करना

  1. बाँझ सामान्य खारा के साथ घाव की सिंचाई करें और इसे बाँझ धुंध के साथ सूखें।
  2. उरोस्थि को सीवन करें और 5-0 मोनोफिलामेंट टांके का उपयोग करके त्वचा को बंद करें।

5. पश्चात की देखभाल

  1. माउस संज्ञाहरण से जाग के लिए प्रतीक्षा करें. बिस्तर सामग्री के बिना एक साफ पिंजरे के लिए माउस स्थानांतरण लेकिन एक वार्मिंग कंबल के साथ गर्म. माउस का निरीक्षण जब तक यह चल है. ट्रामाडोल (20mg/kg, i.p.) को पोस्टऑपरेटिव एनाल्जेसिया के रूप में उपयोग करें।
  2. एक वसूली पिंजरे में चूहों प्लेस और वसूली तक यह निगरानी. ऑपरेशन के बाद चूहों के पानी और आहार को बहाल करें। हर दिन हानि या संक्रमण के संकेतों के लिए चूहों की निगरानी करें, जिसमें कुपोषण, कूबड़ वाली मुद्रा और झालरदार फर शामिल हैं। सर्जरी के दो सप्ताह बाद, सिवनी हटाने होना चाहिए।
    नोट: लगातार तीन दिनों के लिए हर दिन घाव की सतह पर एरिथ्रोमाइसिन मरहम लागू करें।
  3. यदि कोई जटिलताओं, जैसे घाव शोफ मनाया जाता है, तो इसे तुरंत हल किया जाना चाहिए।

6. व्यवहार विश्लेषण

नोट: सभी व्यवहार परीक्षण और विश्लेषण प्रयोगात्मक समूहों के लिए अंधा पर्यवेक्षक द्वारा किया गया था।

  1. सिलेंडर परीक्षण
    नोट: सिलेंडर परीक्षण सर्जरी21 के बाद 4 और 8 सप्ताह में एक सिलेंडर के भीतर सहज ऊर्ध्वाधर अन्वेषण के दौरान forelimbs के उपयोग का मूल्यांकन करता है।
    1. एक ऊंचा फ्रेम पर एक पारदर्शी सिलेंडर (व्यास 9 सेमी, ऊंचाई 15 सेमी) में चूहों रखें.
    2. अवलोकन और रिकॉर्डिंग की सुविधा के लिए, सिलेंडर के नीचे 45° के कोण पर एक दर्पण को ठीक करें।
    3. 10 मिनट के लिए दर्पण की मदद से मनाया प्रत्येक माउस के रिकॉर्ड सहज पालन.
      1. मैन्युअल रूप से उस समय की लंबाई निर्धारित करें जिसके लिए (i) दायां पंजा, (ii) बायां पंजा, या (iii) दोनों पंजे कांच की दीवारों से संपर्क करते हैं। प्रत्येक सत्र के दौरान 20 आंदोलनों की कुल गणना. विश्लेषण से परीक्षण के दौरान सक्रिय नहीं हैं कि चूहों को बाहर करें.
    4. परीक्षण प्रदर्शन को इस प्रकार स्कोर करें:
      Equation 1
  2. ग्रिड-वॉक टेस्ट
    नोट: ग्रिड-वॉक टेस्ट सर्जरी के बाद 4 और 8 सप्ताह में सहज अन्वेषण के दौरान ग्रिड के पायदान पर फोरपॉ के सटीक प्लेसमेंट का आकलन करता है। 22.
    1. चूहों को 25 मिमी वर्ग छेद के साथ एक तार ग्रिड (20 सेमी x 24 सेमी) पर रखें और उन्हें वीडियो कैमरे के साथ अपने प्रदर्शन की रिकॉर्डिंग करते समय 10 मिनट के लिए स्वतंत्र रूप से पता लगाने की अनुमति दें।
    2. निम्नलिखित में से किसी एक के मामले में एक पैर पर्ची स्कोर करें:
      1. ऐसे उदाहरणों की तलाश करें जब पंजा पूरी तरह से एक डंडा को याद करता है (जिस स्थिति में अंग पायदान के बीच गिर जाता है और जानवर संतुलन खो देता है)।
      2. ऐसे उदाहरणों की तलाश करें जब पंजा सही ढंग से एक पायदान पर रखा गया हो लेकिन शरीर के वजन को वहन करते समय फिसल जाए।
    3. परीक्षा परिणाम को दाहिने अग्रभाग / कुल पैर पर्ची के पैर पर्ची के रूप में व्यक्त करें। हालांकि न तो सिलेंडर परीक्षण और न ही ग्रिड-वॉक टेस्ट के लिए प्रशिक्षण की आवश्यकता होती है, सर्जरी से पहले एक बार प्रत्येक जानवर का परीक्षण करके आधारभूत स्कोर प्राप्त करें।

Representative Results

एकतरफा मस्तिष्क की चोट अक्सर वयस्कों10,11 में प्रतिपूरक तंत्रिका प्लास्टिसिटी की सीमाओं के कारण contralateral अंग की स्थायी शिथिलता का कारण बनता है. पहले, हमने बताया कि CC7 सर्जरी का उपयोग मस्तिष्क की चोट7 के बाद वयस्क रोगियों में हेमिप्लेजिक ऊपरी अंगों के इलाज के लिए किया जा सकता है। प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से प्रत्यक्ष एनास्टोमोसिस द्विपक्षीय सी 7 नसों के लिए प्रोटोकॉल की प्रभावशीलता का मूल्यांकन करने के लिए, हमने एकतरफा दर्दनाक मस्तिष्क की चोट (टीबीआई) के बाद चूहों में क्रॉसिंग तंत्रिका स्थानांतरण सर्जरी की। चित्रा 1 टीबीआई प्रक्रियाओं का वर्णन करता है और क्षति सीमा और प्रभाव की पुष्टि करता है। सबसे पहले, एक इलेक्ट्रिक कॉर्टिकल संलयन प्रभावक (ईसीसीआई) का उपयोग बाएं गोलार्ध के मस्तिष्क प्रांतस्था को नुकसान पहुंचाने के लिए किया गया था (पूर्वकाल = +1.0 मिमी से -2.0 मिमी, औसत दर्जे का = 0.5 मिमी से 3.5 मिमी) वयस्क चूहों में एकतरफा मस्तिष्क की चोट के परिणामस्वरूप। 2 सप्ताह के बाद, शारीरिक संरचनाओं ने पुष्टि की कि इस टीबीआई प्रोटोकॉल ने सेंसरिमोटर कॉर्टेक्स को लगभग नष्ट कर दिया, जो आंदोलनों को शुरू करने के लिए एक महत्वपूर्ण स्थान है। एकतरफा टीबीआई वाले इन चूहों ने दाहिने अग्रभाग के महत्वपूर्ण मोटर दोषों का प्रदर्शन किया।

चित्रा 2 CC7 प्रक्रियाओं का वर्णन करता है। CC7 सर्जरी के पथ आरेख से पता चला कि पथ A, प्रीस्पाइनल मार्ग का प्रतिनिधित्व करता है, दूसरों की तुलना में सबसे छोटा दृष्टिकोण था। पथ A की लंबाई बाईं ओर (गैर-लकवाग्रस्त पक्ष) पर काटे गए C7 तंत्रिका की लंबाई से भी कम है। इस खोज ने तंत्रिका हस्तांतरण सर्जरी को पूरा करने के लिए प्रीस्पाइनल मार्ग की पसंद के लिए शारीरिक आधार प्रदान किया। CC7 सर्जरी टीबीआई के दो सप्ताह बाद प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से सीधे एनास्टोमोसिस में की गई थी। गैर-लकवाग्रस्त पक्ष पर गर्भाशय ग्रीवा 7 (सी 7) तंत्रिका को अपने मूल मस्तिष्क कनेक्शन बनाने के बजाय सीधे लकवाग्रस्त पक्ष में स्थानांतरित कर दिया गया था। चित्रा 3 इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी के परिणामों को दिखाता है जिससे पता चला कि स्थानांतरित सी 7 तंत्रिका सफलतापूर्वक पुनर्जीवित हो गई थी। स्थानांतरित C7 तंत्रिका की माइलिन म्यान मोटाई धीरे-धीरे बढ़ी, 4 सप्ताह के बाद CC7 सर्जरी से शुरू हुई, और CC7 सर्जरी के 8 सप्ताह बाद नियंत्रण समूह में लगभग तुलनीय थी। चित्रा 4 इलेक्ट्रोमोग्राफिक रिकॉर्डिंग का उपयोग करके स्थानांतरित सी 7 तंत्रिका की मांसपेशियों के पुनर्वितरण की पहचान करता है। इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी परिणामों के साथ समझौते में, 4 सप्ताह के बाद प्रभावित अग्रभाग की कई मांसपेशियों में सी 7 तंत्रिका एनास्टोमोसिस स्थिर रूप से प्रेरित एक्शन पोटेंशिअल के समीपस्थ अंत को विद्युत रूप से उत्तेजित करना। चित्रा 5 से पता चलता है कि स्थानांतरित सी 7 तंत्रिका में वेंट्रल हॉर्न से मोटर फाइबर और रीढ़ की हड्डी सी 7 खंड के पृष्ठीय रूट गैन्ग्लिया से संवेदी फाइबर स्वस्थ पक्ष पर हैजा विष सबयूनिट बी (सीटीबी) प्रतिगामी लेबलिंग के माध्यम से होते हैं।

चित्रा 6 से पता चलता है कि माउस मॉडल ने एकतरफा टीबीआई के बाद महत्वपूर्ण मोटर रिकवरी का प्रदर्शन किया, जो नैदानिक अध्ययनों के परिणामों के अनुरूप था। TBI के बाद घायल मोटर फ़ंक्शन की वसूली पर CC7 सर्जरी के प्रभाव को सत्यापित करने के लिए, एक TBI + Sham समूह और एक नियंत्रण + शाम समूह स्थापित किए गए थे। TBI + शाम समूह और TBI + CC7 समूह के चूहों को TBI चोट के लिए एक ही प्रक्रिया एक साथ प्राप्त हुई, जबकि नियंत्रण + शाम समूह के चूहों को केवल शम सर्जरी मिली। जबकि TBI + CC7 समूह के चूहों को तंत्रिका स्थानांतरण सर्जरी मिली, TBI + शम समूह और नियंत्रण + शाम समूह में चूहों ने द्विपक्षीय ग्रीवा 7 (C7) तंत्रिका लकीर प्राप्त की। सिलेंडर परीक्षणों में, TBI + CC7 समूह ने CC7 सर्जरी (p < 0.01) के बाद 4 और 8 सप्ताह दोनों में TBI समूह की तुलना में बिगड़ा हुआ फोरलिंब की काफी अधिक उपयोग दर दिखाई। ग्रिड-वॉकिंग परीक्षणों में, TBI + CC7 समूह ने CC7 सर्जरी के बाद 4 सप्ताह में TBI समूह की तुलना में कम त्रुटि दर दिखाई। इसके अलावा, TBI + CC7 समूह की त्रुटि दर TBI समूह की तुलना में 8 सप्ताह के बाद CC7 सर्जरी (p < 0.05) की तुलना में काफी कम थी। इन व्यवहार परिणामों से पता चला कि CC7 सर्जरी TBI चूहों में प्रभावित अंग के मोटर फ़ंक्शन में सुधार कर सकती है। साथ में, इन परिणामों से पता चलता है कि प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से CC7 सर्जरी द्वारा पुनर्निर्मित स्थानांतरित C7 तंत्रिका को सफलतापूर्वक पुनर्जीवित किया गया था और एकतरफा TBI के साथ वयस्क चूहों में मोटर बहाली में योगदान करते हुए, बिगड़ा हुआ फोरलिंब को फिर से बनाया गया था।

Figure 1
चित्रा 1: एकतरफा दर्दनाक मस्तिष्क की चोट की विशेषता। (ए) ईसीसीआई में माउस की स्थिति दिखा योजनाबद्ध। (बी) ईसीसीआई के पैरामीटर और क्षति सीमा। (सी) प्रतिनिधि कोरोनल सेक्शन घाव वाले प्रांतस्था (टीबीआई के 2 सप्ताह बाद, स्केल बार = 500 माइक्रोन) दिखा रहा है। संक्षिप्त: eCCI = इलेक्ट्रिक कॉर्टिकल कॉन्ट्यूशन इम्पैक्टर। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 2
चित्रा 2: सर्जिकल प्राथमिक आरेख। (ए) योजनाबद्ध आरेख टीबीआई चूहों में contralateral सी 7 तंत्रिका हस्तांतरण प्रदर्शन के लिए प्रयोगात्मक डिजाइन दिखा रहा है. लाल वृत्त आघात की स्थिति को दर्शाता है। धराशायी आयत के भीतर लाल डबल स्लैश sutured तंत्रिका से पता चलता है. (बी) एक क्रॉस-सेक्शन चूहों में contralateral C7 तंत्रिका हस्तांतरण के तीन वैकल्पिक मार्गों से पता चलता है. पथ ए, नीली रेखा स्थानांतरित तंत्रिका के प्रीस्पाइनल मार्ग को दर्शाती है; पथ बी, हरी रेखा, स्थानांतरित तंत्रिका के प्रीट्रेचियल मार्ग को दर्शाती है; पथ सी, लाल रेखा, स्थानांतरित तंत्रिका के चमड़े के नीचे की सुरंग को दर्शाती है। (सी) ग्राफ मार्गों की लंबाई और (बी) में काटा सी 7 तंत्रिका से पता चलता है. पथ ए की लंबाई (3.3 ± 0.10 मिमी) कटाई सी 7 तंत्रिका (4.05 ± 0.11 मिमी; * पी < 0.05, एक तरफा एनोवा, एन = प्रत्येक समूह में 20) की लंबाई से काफी कम थी। पथ C की लंबाई (14.15 ± 0.20 मिमी) काटे गए C7 तंत्रिका (*** p < 0.001, एक-तरफ़ा ANOVA, n = प्रत्येक समूह में 20) की तुलना में काफी अधिक थी। पथ बी की लंबाई 4.2 ± 0.08 मिमी (एन = 20) थी। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 3
चित्रा 3: तंत्रिका के क्रॉस-सेक्शन का इलेक्ट्रॉन माइक्रोस्कोपी विश्लेषण। (ए, बी) नियंत्रण चूहों में तंत्रिका की छवियां। स्केल बार = 5 माइक्रोन (ए) और 1 माइक्रोन (बी)। (सी, डी) सर्जरी के एक महीने बाद पुनर्जीवित तंत्रिका की छवियां। स्केल बार = 5 माइक्रोन (सी) और 1 माइक्रोन (डी)। (ई, एफ) सर्जरी के पांच महीने बाद एक बिंदु पर पुनर्जीवित तंत्रिका की छवियां। स्केल बार = 5 माइक्रोन (ई) और 1 माइक्रोन (एफ)। (जी, एच) सर्जरी के बाद दो महीने में पुनर्जीवित तंत्रिका की छवि। स्केल बार = 5 माइक्रोन (जी) और 1 माइक्रोन (एच)। ए, सी, ई, और जी, 2,000x का आवर्धन; बी, डी, एफ, और एच, 15,000x का आवर्धन। (I) जी-अनुपात (माइलिन म्यान के बाहरी व्यास के आंतरिक अनुपात) 4 सप्ताह के नमूनों की तुलना में नियंत्रण समूह के नमूनों में कम है और सर्जरी के बाद 6-8 सप्ताह में नमूनों के बराबर है (***: पी < 0.001; टी-परीक्षण के साथ विभिन्न समूह अक्षतंतु पर तुलना; एन = प्रत्येक समूह में 3 चूहे)। संक्षिप्ताक्षर: CC7 = contralateral ग्रीवा सातवें तंत्रिका स्थानांतरण; CC7-XW = एक्स सप्ताह के बाद सर्जरी. कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 4
चित्रा 4: कॉन्ट्रालेटरल सी 7 तंत्रिका हस्तांतरण के बाद इलेक्ट्रोमोग्राफी विश्लेषण तंत्रिका पुनर्जनन की दर को इंगित करता है। (ए) योजनाबद्ध आरेख इलेक्ट्रॉनिक हस्तांतरण उत्तेजना और विवो इलेक्ट्रोमोग्राफी रिकॉर्डिंग में दिखा रहा है। उत्तेजना तीव्रता परीक्षण (2 एमए) भर में ही था. उत्तेजना साइट एनास्टोमोसिस के लिए सी 7 तंत्रिका समीपस्थ है। (बी, सी) सर्जरी के बाद दो सप्ताह (बी) और चार सप्ताह (सी) में पेक्टोरलिस मेजर में दर्ज की गई एक्शन पोटेंशिअल दिखाने वाली तस्वीरें। (डी, ई) ईएमजी एक्सटेंसर डिजिटोरम 4 सप्ताह (डी) और 8 सप्ताह (ई) सर्जरी के बाद दर्ज किया गया था। (एफ) तीन सप्ताह में, सीमैप ट्राइसेप्स ब्राची में उभरे। (जी) चार और आठ सप्ताह में, ट्राइसेप्स ब्राची के सीमैप में वृद्धि हुई। (एच) पेक्टोरलिस प्रमुख का औसत आयाम ~ 0.25 एमवी ± 4 सप्ताह में 0.16 एमवी बनाम 0.45 एमवी ± 0.03 एमवी 8 सप्ताह में पहुंच गया, जो दो समय बिंदुओं (*** पी < 0.001, टी-परीक्षण, एन = 6 प्रत्येक समूह में) के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर दिखा रहा है। (I) ट्राइसेप्स ब्राची का औसत आयाम ~ 0.15 एमवी ± 4 सप्ताह में 0.01 एमवी बनाम 0.46 एमवी ± 0.02 एमवी 8 सप्ताह में पहुंच गया, जो दो समय बिंदुओं के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर दिखा रहा है (***: पी < 0.001, टी-टेस्ट, एन = 6 प्रत्येक समूह में)। (जे) एक्सटेंसर डिजिटोरम का औसत आयाम ~ 0.11 एमवी ± 4 सप्ताह में 0.01 एमवी बनाम 0.29 एमवी ± 0.02 एमवी 8 सप्ताह में पहुंच गया, जो दो समय बिंदुओं के बीच एक महत्वपूर्ण अंतर दिखा रहा है (***: पी < 0.001, टी-टेस्ट, एन = 6 प्रत्येक समूह में)। संक्षिप्ताक्षर: ईएमजी = इलेक्ट्रोमोग्राफी; सीएमएपी = यौगिक मांसपेशी क्रिया क्षमता। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 5
चित्रा 5: स्थानांतरित सी 7 तंत्रिका के मोटर और संवेदी न्यूरॉन्स के सीटीबी प्रतिगामी लेबलिंग। (ए-सी) सीटीबी को सी 7 सर्जरी के बाद 4 सप्ताह में सी 7 तंत्रिका एनास्टोमोसिस के बाहर के छोर पर इंजेक्ट किया गया था। (क) संवेदी न्यूरॉन्स DRG के लिए लेबल किया गया. (बी, सी) स्थानांतरित C7 तंत्रिका के मोटर न्यूरॉन्स को रीढ़ की हड्डी के पूर्वकाल सींग के लिए लेबल किया गया था। आवर्धन, 20x। स्केल बार = 200 माइक्रोन (ए, बी); 100 माइक्रोन (सी)। संक्षिप्ताक्षर: CTB = हैजा विष सबयूनिट B; DRG = पृष्ठीय जड़ नाड़ीग्रन्थि; DAPI = 4′, 6-डायमिडिनो-2-फेनिलिंडोल। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Figure 6
चित्रा 6: सीसी 7 सर्जरी के बाद व्यवहार में परिवर्तन। (ए) छवियों चूहों के सिलेंडर परीक्षण दिखा. (बी) सारांश ग्राफ टीबीआई चूहों (एन = 6 चूहों) पर सर्जरी के बाद 4 सप्ताह और 8 सप्ताह में सीसी 7 हस्तांतरण के प्रभाव को दर्शाता है। पी = 0.001; अयुग्मित टी-परीक्षण। बिगड़ा हुआ फोरलिंब का औसत उपयोग 54.17% था ± नियंत्रण + शाम समूह में 3.01% बनाम टीबीआई + शम समूह में 22.5% ± 2.14%; CC35.83 सर्जरी के बाद 4 सप्ताह में TBI + CC7 समूह में 2.39% ± 7%, एक महत्वपूर्ण अंतर का संकेत देता है (एक तरह से एनोवा; पी < 0.05, एन = 6 प्रत्येक समूह में)। CC7 हस्तांतरण के 8 सप्ताह बाद, उपयोग क्रमशः नियंत्रण + शाम समूह, TBI + शाम समूह और TBI + CC7 समूहों में क्रमशः 3.80%, 24.17% ± 3.80%, और 40.00% ± 1.83% ± 53.3% था, एक महत्वपूर्ण अंतर (*p < 0.05, एक तरह से एनोवा, n = 6 प्रत्येक समूह में)। (सी) छवियां ग्रिड वॉक टेस्ट प्रदर्शित करती हैं। (डी) ग्राफ से पता चलता है कि टीबीआई + शाम समूह में बिगड़ा हुआ फोरलिंब की औसत त्रुटि दर 85.41% ± 1.59% (एन = 6) टीबीआई + सीसी 7 समूह 80.17% ± 2.19% (एन = 6) के बराबर थी, और दोनों नियंत्रण + शाम समूह (50.99% ± 11.69%) से अधिक थे। सर्जरी के 8 सप्ताह बाद, टीबीआई + सीसी 7 समूह में त्रुटि दर 76.87 ± 1.07% (एन = 6) थी, जो टीबीआई + शम समूह (83.06% ± 1.41%; पी < 0.05, प्रत्येक समूह में एक तरफा एनोवा, एन = 6)। संक्षिप्ताक्षर: CC7 = contralateral ग्रीवा सातवें तंत्रिका स्थानांतरण; TBI = दर्दनाक मस्तिष्क की चोट। कृपया इस चित्र का एक बड़ा संस्करण देखने के लिए यहाँ क्लिक करें.

Discussion

क्लिनिक में, क्रॉसिंग नर्व ट्रांसफर सर्जरी का उपयोग ब्रेकियल प्लेक्सस एवल्शन चोट वाले रोगियों के इलाज के लिए किया गया है और मस्तिष्क क्षति के बाद, जैसे स्ट्रोक और टीबीआई 7,9,12। विशेष रूप से, मस्तिष्क क्षति एक गंभीर न्यूरोलॉजिकल स्थिति है जो मिर्गी, सेरेब्रल हर्निया और संक्रमण13 सहित कई जटिलताओं को जन्म दे सकती है। एकतरफा मस्तिष्क की चोट वाले सभी रोगी CC7 सर्जरी के लिए उपयुक्त नहीं हैं। सामान्य तौर पर, CC7 सर्जरी केंद्रीय गोलार्ध के रोगियों में पुरानी अवस्था (चोट के बाद 6 महीने) में की गई है ताकि जितना संभव हो सके मस्तिष्क शोफ के प्रभाव से बचा जा सके। मस्तिष्क की चोटों के बाद संज्ञानात्मक हानि और क्वाड्रिप्लेजिया वाले मरीजों को CC7 सर्जरी के इलाज से बाहर रखा गया है।

अधिकांश अध्ययनों ने एक चमड़े के नीचे के दृष्टिकोण और सुरल या उलनार तंत्रिका ग्राफ्ट एनास्टोमोसिस का उपयोग करके विपरीत सी 7 तंत्रिका जड़14,15 को स्थानांतरित करने की सूचना दी है। हालांकि, इस तरह के तरीकों से तंत्रिका पुनर्जनन छह महीने की आवश्यकता है, जो मोटर वसूली प्रक्रिया में बाधा डाल सकते हैं और यहां तक कि संभावित रूप से मस्तिष्क प्लास्टिसिटी14 को प्रभावित कर सकते हैं. पिछले अध्ययनों में, चूहों में contralateral C7 स्थानांतरण किया गया था, और द्विपक्षीय C7 तंत्रिका interpositional autografted sural तंत्रिका के 4 किस्में के माध्यम से इस्तेमाल किया गया था. हालांकि, चूहों में प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से सी 7 तंत्रिका स्थानांतरण की कोई रिपोर्ट नहीं मिली है। हमने चूहों में संशोधित प्रीस्पाइनल मार्ग की CC7 सर्जरी की और C7 तंत्रिका स्थानांतरण के बाद कार्यात्मक वसूली के वेग को सत्यापित किया। इस अध्ययन में, प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से कॉन्ट्रालेटरल सी 7 तंत्रिका स्थानांतरण ने सर्जरी के एक महीने बाद लकवाग्रस्त अंग समारोह में सुधार किया, जो तंत्रिका ग्राफ्टेड पशु मॉडल के कम वसूली समय को दर्शाता है। इसलिए, यह मॉडल नैदानिक स्थितियों का सटीक अनुकरण कर सकता है और आगे के प्रयोगों की नींव रख सकता है।

तंत्रिका जड़ को कैसे विच्छेदन करें और जोखिम को कम करें सी 7 हस्तांतरण के लिए आवश्यक मुद्दे हैं। मनुष्यों के विपरीत, माउस के ब्रेकियल प्लेक्सस हंसली 5,16 के नीचे छाती में स्थित है। इसलिए, C7 तंत्रिका और रीढ़17 की जड़ के अवलोकन के लिए अनुमति देने के लिए पहुंच रणनीति को बदलना पड़ा। स्टर्नोटॉमी एक सुरक्षित और प्रभावी ऑपरेटिव दृष्टिकोण है और आमतौर पर कार्डियोथोरेसिक सर्जरी18,19 में माउस प्रयोगों में लागू होता है। C6 लैमिना वेंट्राली भी नसों को स्थानांतरित करने में एक बाधा है। इस प्रकार, स्टर्नोटॉमी सर्जरी C7 तंत्रिका जड़ को विच्छेदन करने और स्थानांतरण दूरी को कम करने के लिए C6 लामिना वेंट्राली को अलग करने के लिए की गई थी।

यद्यपि प्रीस्पाइनल मार्ग तंत्रिका हस्तांतरण सर्जरी के प्रत्यक्ष एनास्टोमोसिस की सफलता दर में काफी वृद्धि कर सकता है, लेकिन सभी चूहों को सीधे एनास्टोमोस्ड नहीं किया जा सकता है। यह मुख्य रूप से इन चूहों में शारीरिक अंतर के कारण है। मध्य ट्रंक (C7 तंत्रिका) ऊपरी या निचले ट्रंक के साथ इंटरवर्टेब्रल फोरामेन के बहुत करीब एक स्थान पर विलीन हो जाता है। इस प्रकार, कटाई के लिए उपलब्ध सी 7 नसों की लंबाई अपर्याप्त है। वर्तमान में, एकमात्र दृष्टिकोण तंत्रिका प्रत्यारोपण या चूहों का प्रतिस्थापन है। यह मॉडल आमतौर पर 8 सप्ताह के चूहों (20-25 ग्राम) में नियोजित होता है, क्योंकि चूहे परिपक्व होते हैं और सी 7 तंत्रिकाएं पर्याप्त आकार की होती हैं। यद्यपि यह सर्जिकल प्रोटोकॉल युवा चूहों पर भी लागू होता है, ऑपरेशन की कठिनाई युवा चूहों में काफी बढ़ जाएगी।

TBI + CC7 समूह में चूहों के फोरलिंब मोटर फ़ंक्शन को एक महीने और दो महीने में काफी बढ़ा दिया गया था, यह सुझाव देते हुए कि स्थानांतरित C7 तंत्रिका ने बिगड़ा हुआ फोरलिंब की वसूली में योगदान दिया। कार्यात्मक तंत्रिका वसूली के लिए remyelination महत्वपूर्ण है। पिछले एक अध्ययन से पता चला है कि घायल नसों के माइलिन म्यान एक महीने के बाद पुनर्जीवित होते हैं, इन परिणामोंके अनुरूप 20. यहां, स्थानांतरित तंत्रिका धीरे-धीरे परिपक्व हो गई, जो व्यवहार परीक्षण के अनुरूप थी। तंत्रिका हस्तांतरण के बाद कार्यात्मक वसूली की दर का परीक्षण करने के लिए इलेक्ट्रोमोग्राफी का उपयोग किया गया था। परिणामों ने प्रदर्शित किया कि स्थानांतरित तंत्रिका ने ऑपरेशन के 4 सप्ताह बाद प्रभावित मांसपेशियों को संक्रमित किया। विशेष रूप से, यह अध्ययन तंत्रिका स्थानांतरण सर्जरी को पार करने के बाद प्रत्यक्ष एनास्टोमोसिस के साथ पुनर्वितरण के समय बिंदु को निर्धारित करने वाला पहला है।

सारांश में, हमने चूहों में प्रीस्पाइनल मार्ग के माध्यम से द्विपक्षीय ब्रेकियल प्लेक्सस नसों के प्रत्यक्ष एनास्टोमोसिस के लिए एक प्रोटोकॉल स्थापित करने के लिए नैदानिक सर्जरी का अनुकरण किया और विस्थापित तंत्रिका के कार्य की पुष्टि की। माउस मॉडल ने केंद्रीय और परिधीय तंत्रिका तंत्र की चोटों के बाद तंत्रिका हस्तांतरण को पार करने पर पुनर्वास के अंतर्निहित तंत्रिका तंत्र की व्याख्या में योगदान दिया।

Disclosures

लेखकों के पास घोषित करने के लिए हितों का कोई टकराव नहीं है।

Acknowledgments

इस काम को चीन के राष्ट्रीय प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (82071406, 81902296 और 81873766) द्वारा समर्थित किया गया था।

Materials

Name Company Catalog Number Comments
1 mL syringe KDL K-20200808
12-0 nylon sutures Chenghe 20082
5-0 silk braided MERSILK,ETHICON QK312
75% ethanol GENERAL-REAGENT P1762077
Acupuncture needle Chengzhen 190420 Use for making retractors
Automatic clipper Codos CHC-332
C57BL/6N mice SLAC laboratory (Shanghai) C57BL/6Slac
Electrocautery Gutta Cutter SD-GG01
Erythromycin ointment Baiyunshan H1007
Iodophor disinfection solution Lionser 20190220
Medical tape Transpore,3M 1527C-0
Micro needle holder Chenghe X006-202003
Micro-forceps Chenghe B001-201908
Micro-scissors 66VT 1911-2S276
Operating microscope OLYMPUS SZX7
Ophthalmic scissor Chenghe X041D1251
Pentobarbital sodium Sigma 20170608
Plastic infusion tube KDL C-20191225
Sterile normal saline KL L121021109
Vascular forceps Jinzhong J31020
Warming pad RWD 69027

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References

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Gao, Z., Lei, G., Pang, Z., Chen,… More

Gao, Z., Lei, G., Pang, Z., Chen, Y., Zhu, S., Huang, K., Lin, W., Shen, Y., Xu, W. A Mouse Model of Direct Anastomosis via the Prespinal Route for Crossing Nerve Transfer Surgery. J. Vis. Exp. (176), e63051, doi:10.3791/63051 (2021).

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