Waiting
Login processing...

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

Periferik Kan Lökositlerini Ölçmek için Bakım Noktası Test Analizörünün Değerlendirilmesi

Published: March 22, 2022 doi: 10.3791/63364
Automatic Translation
*1, *1, 1, 2, 1, 1, 1
1National Center for Respiratory Medicine, National Clinical Research Center for Respiratory Disease, State Key Laboratory of Respiratory Disease, Guangzhou Institute of Respiratory Health, First Affiliated Hospital of Guangzhou Medical University, 2Laboratory Department, Fifth affiliated (Zhuhai) Hospital of Zunyi Medical University
* These authors contributed equally

Summary

Burada POCT kart tabanlı lökosit analizörü kullanarak periferik kan lökositlerini ölçmek için bir protokol sunulmaktadır. Aynı kan örnekleri, sonuçların tutarlılığını ve doğruluğunu değerlendirmek için iki otomatik hematoloji analizörü tarafından test edildi. Sonuçlar, değerlendirilen analizörün referans sistemi ile iyi bir korelasyona sahip olduğunu göstermiştir.

Abstract

Beyaz kan hücresi (WBC) vücuttaki inflamasyonun önemli bir göstergesidir ve bakteriyel ve viral enfeksiyonlar arasında ayrım yapmaya yardımcı olabilir. Şu anda, Çin'deki birincil tıbbi kurumların çoğu, kan testi teknolojisinin benimsenme yüzdesinin zayıf bir yüzdesine sahiptir ve birinci basamak sağlık merkezlerinde yüksek fiyat-performans oranına ve kolay kullanıma sahip bir hematoloji tespit sistemine acilen ihtiyaç duyulmaktadır. Bu yazıda, tam kanda nötrofiller, lenfositler ve ara grup hücreler (eozinofiller, bazofiller ve monositler dahil) gibi WBC indekslerini tespit etmek için kullanılan bir bakım noktası testi (POCT) kart tabanlı lökosit analizörünün (değerlendirilmiş sistem) prensibi ve çalışma prosedürleri tanıtılmaktadır. Değerlendirilen sistemden elde edilen sonuçlar, iki ticari otomatik hematoloji analizöründen (referans sistem) elde edilen sonuçlarla karşılaştırılmıştır. Değerlendirilen sistem ile ticari referans sistemleri arasındaki korelasyon ve tutarlılık analiz edilmiştir. Sonuçlar, değerlendirilen ve referans sistemler tarafından tespit edilen WBC sayısı ve granülosit sayısının güçlü bir pozitif korelasyon gösterdiğini (sırasıyla r s = 0.972 ve 0.973), lenfosit sayısının ise nispeten düşük bir korelasyon gösterdiğini göstermiştir (rs = 0.851). Bir Bland-Altman grafiği, değerlendirilen sistem tarafından tespit edilen değerler ile referans sistemleri arasındaki en büyük farkın, iki sistemin iyi bir anlaşma içinde olduğunu gösteren% 95 anlaşma sınırları (LoA) içinde olduğunu göstermiştir. Sonuç olarak, değerlendirilen sistem mükemmel bir korelasyona, sağlam tutarlılığa ve yaygın olarak kullanılan otomatik hematoloji analizörlerinin sonuçlarıyla güvenilir bir karşılaştırmaya sahiptir. Özellikle COVID-19 normalleştirilmiş önleme ve kontrol döneminde, tam otomatik beş kategorili hematoloji analizörünün kullanılamadığı birincil tıbbi kurumlarda WBC tespiti için idealdir.

Introduction

Beyaz kan hücresi (WBC) sayısı veya diferansiyel, bakteriyel enfeksiyonu viral enfeksiyondan ayırt edebilen vücudun iltihabını yansıtmak için önemli bir göstergedir. WBC analizi, takip tanı ve tedavisine rehberlik etmek için de yararlıdır1. Şu anda, beş sınıflandırmalı tam otomatik hematoloji analizörü, büyük ve orta ölçekli tıbbi birimlerde yaygın olarak kullanılmaktadır, çünkü otomatiktir, yüksek verimliliğe sahiptir, doğru ve güvenilir sonuçlar verir ve laboratuvar teknisyenlerinin iş yoğunluğunu etkili bir şekilde azaltır. Klinik muayenede önemli rol oynar 2,3. Bununla birlikte, toplum sağlığı merkezleri ve özel klinikler gibi çoğu birincil tıbbi kurum, hematoloji analizörünün düşük bir benimseme oranına sahiptir. Çin'de klinik laboratuvar inşası üzerine ülke çapında yapılan çok merkezli bir araştırmaya göre, birincil tıbbi kurumların laboratuvar inşaatı, laboratuvarların küçük boyutu, yetersiz yetenek iletimi ve bilim ve teknolojinin kırsal kesime yayılması ile kanıtlandığı gibi yetersizdir4.

Aralık 2019'dan itibaren COVID-19 tüm dünyaya yayılmaya başladı ve küresel bir salgına dönüştü. 'Salgın sonrası dönemde', salgın durumlarının normalleştirilmiş önleme ve kontrol önlemlerini uygulamak için bir dizi ulusal politika önerilmiştir. Birinci basamak sağlık kuruluşlarının laboratuvarı, tabandan tanı ve tedavi ile hastalıkların önlenmesi ve kontrolünde önemli bir rol oynamaktadır. Salgın durumlarında ilk savunma ve kontrol hattıdır ve COVID-19'un önlenmesi ve kontrolü için kritiköneme sahiptir 5. Bazı çalışmalar, periferik kan lenfositlerinin ve nötrofillerin saptanmasının COVID-19 hasta taramasına, teşhisine ve tedavisine katkıda bulunacağını ve nötrofil/lenfosit oranının şiddetli ve kritik COVID-19'un klinik erken uyarı göstergeleri olarak da kullanılabileceğini göstermiştir 6,7. Ayrıca, lökosit tespiti hızlı bir rapor sunma avantajına sahiptir. Birincil tıp ve sağlık kurumları, şüpheli enfeksiyonları zamanında tespit etmeye ve taramaya yardımcı olmak için lökosit tespitini kapsamlı bir şekilde gerçekleştirebilir.

POCT kart tabanlı lökosit analizörü (değerlendirilen sistem; bakınız Malzeme Tablosu), altın standart "Coulter prensibine" dayanan üç sınıflandırmalı bir kan hücresi analizörüdür. Değerlendirilen sistem, bir WBC histogramının ve WBC sayısı, granülosit sayısı (Gran#), granülosit yüzdesi (Gran%), lenfosit sayısı (Lym #), lenfosit yüzdesi (Lym%), ara hücre sayısı (Mid#) ve ara hücrelerin yüzdesi (Mid%) dahil olmak üzere yedi kan parametresinin kantitatif analiz sonuçlarını sağlar. Kart tabanlı yenilikçi teknolojiyi benimseyen bu ürün, tek kişilik algılama kitinin bulunması, sıvı atıklarının olmaması, 30 saniyede hızlı algılama, rutin bakımdan arındırılmış olması ve kullanıcı dostu çalışma gibi avantajlara sahiptir. Bu nedenle, özellikle birincil tıbbi kurumlar için çok uygundur. Bu çalışma, POCT kart tabanlı lökosit analizörünün klinik tespit performansını, iki büyük ölçekli kamu hastanesinin laboratuvarlarından alınan iki tam otomatik ticari hematoloji analizörü (referans sistemi 1 ve referans sistem 2; bakınız Malzeme Tablosu) ile karşılaştırarak değerlendirmeyi amaçlamaktadır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

Bu çalışma ve insan kan örneklerinin kullanımı, Guangzhou Tıp Üniversitesi İlk Bağlı Hastanesi Etik Komitesi tarafından onaylanmıştır (GYYY-2016-73). Tüm katılımcılar yazılı onaylarını bağımsız olarak veya ebeveynleri aracılığıyla (çocuklar söz konusu olduğunda) vermişlerdir.

1. Çalışma grubunun temel bilgileri

NOT: Guangzhou Tıp Üniversitesi Birinci Bağlı Hastanesini (Hastane 1) ve Zunyi Tıp Üniversitesi Beşinci Bağlı (Zhuhai) Hastanesini (Hastane 2) ziyaret eden hastalardan venöz kan toplandı. Hastane 1'de kan rutini muayenesi için kullanılan alet Referans sistemi 1 iken, Hastane 2 Referans sistemi 2'dir.

  1. Ocak 2021'de Hastane 1 (532) ve Hastane 2'yi (534) ziyaret eden ve kan rutini muayeneleri yapılan hastalardan toplam 1066 kan örneği toplandı.
    NOT: Hastalar rastgele seçilmiş, birden fazla bölümden gelmiş ve çeşitli hastalıklardan muzdariptir.
  2. Eksik tıbbi kayıtları olan hastaları ve işbirliği yapmayan veya bilgilendirilmiş onam vermeyi reddedenleri hariç tutun. Kan örnekleri hemoliz, chyle kanı veya bulanıklık sergileyen veya kanın hacim olarak yetersiz olduğu veya 24 saatten fazla saklandığı hastaları hariç tutun.

2. Çalışma akışı ve ilgi ölçümleri

NOT: Değerlendirilen sistem, WBC'yi ve üç sınıflandırma parametresini belirlemek için 5 μL kan örneğine ihtiyaç duyar. Kan toplandıktan sonra kan rutin muayenesi için değerlendirilen sistem ve referans sistemi kullanıldı.

  1. WBC'yi ve sırasıyla referans sistemini ve değerlendirilen sistemi kullanarak 532 ve 534 kan örneklerinin üç sınıflandırma parametresini tespit edin.
    1. Yüksek eğitimli bir teknisyenin, referans sistemi ile klinik testi tamamladıktan sonra seçilen kan örneklerini rastgele yeniden numaralandırmasına izin verin. Ardından, değerlendirilen sistemi kullanarak WBC ve sınıflandırma parametrelerinin tespiti için numuneleri başka bir yüksek eğitimli teknisyene teslim edin.
  2. İki sistemin sonuçlarını ortaya çıkarın.
  3. Üçüncü bir teknisyenden, yalnızca hem değerlendirilen hem de referans sistemleri tarafından paylaşılan beş göstergeyi (WBC sayısı, Gran#, Gran%, Lym #, Lym%) analiz etmesini isteyin.

3. Değerlendirilen sistemi kullanma prosedürü

NOT: Değerlendirilen sistem, algılama elemanında WBC'yi saymak için elektriksel empedans prensibini (Coulter prensibi) kullanır. Test protokolü altı bölüme ayrılmıştır: analizörü başlatmak, test hazırlamak, kan toplamak, reaktif karıştırmak, numune analizi yapmak ve analizörü kapatmak.

  1. Çözümleyiciyi başlatın
    1. Analizörün arkasındaki [O/I] güç düğmesini [I] konumuna getirin. Analizörün gösterge ışığının açık olup olmadığını kontrol edin.
    2. Oturum açma iletişim kutusuna doğru kullanıcı adını ve şifreyi girin ve Oturum Aç'a tıklayın. Sistemin kendi kendini denetleme ve başlatma işlemini otomatik olarak gerçekleştirdiğinden ve ardından Örnek Analizi giriş sayfasını görüntülediğinden emin olun.
  2. Sınava hazırlık
    NOT: Tam bir kan örneği testi dört sarf malzemesi gerektirir: kan neşteri, hemolitik reaktif, içinde kılcal tüp bulunan kantitatif pipet ve kan hücresi algılama modülü (Şekil 1).
    1. Sonraki Örnek'e tıklayın, cinsiyeti, adı ve diğer klinik bilgileri (gerektiği gibi) doğru girin ve uygun bir referans grubu seçin. Bilgileri kaydetmek için Tamam'a tıklayın.
      NOT: Farklı yaş gruplarının kendi referans aralıkları vardır, bu nedenle doğru referans grubunu seçmek daha uygun bir alarm istemi alabilir. Yenidoğan: 1-28 günlük; Çocuklar: 29 günden 14 yaşına kadar; Yetişkin Erkek / Kadın / Genel: 15 yaşından büyük veya ona eşit.
    2. Kan hücresi algılama modülünün ince filmini yırtın, Giriş / Çıkış deposu düğmesine basın ve kan hücresi algılama modülünü makine deposuna, deliği dışa bakacak şekilde doğru şekilde yerleştirin.
    3. Hemolitik reaktif sızdırmazlık filmini kantitatif bir pipetin ucuyla delin.
  3. Kan alımı
    1. Kılcal kan toplama: Sol yüzük parmağını alkole batırılmış pamuklu çubukla bir şekilde ve bir kez dezenfekte edin. Alkol doğal olarak kuruduktan sonra, sol yüzük parmağının derisini delmek için bir kan neşteri kullanın.
      1. İlk damla kanı nazikçe sıkın ve pamuklu çubukla silin. Tam bir "su damlası" oluşturacak kadar kan sıkın ve kantitatif pipet içindeki kılcal tüpü kullanarak kan örneğinin 5 μL'sini toplayın.
    2. Venöz kan toplama: Kantitatif pipet içindeki kılcal tüpü kullanarak önceden elde edilmiş venöz kan örneğinin 5 μL'sini toplayın. Bu çalışmadaki tüm testlerde, EDTA-K2 antikoagülanı içeren bir vakum kabı kullanılarak her hastadan (5 mL) toplanan venöz kan kullanılmıştır. Tüm testleri 30 dakika ila 24 saat içinde tamamlayın.
  4. Reaktif karıştırma
    1. Kantitatif pipeti hemolitik reaktife (2,5 mL) yerleştirin ve kan örneğini kılcal tüpten serbest bırakmak için sıkıca bastırın.
    2. Kanı kılcal tüp ve hemolitik reaktifte, kılcal tüpte belirgin kırmızı kan kalmayana kadar sabit bir hızda 15-20 kez baş aşağı çevirerek karıştırın. Bu çalışmada, kan örneği hemolitik reaktif ile 1:500 oranında karıştırılmıştır.
  5. Numune analizi
    1. Kapağı açın ve çözeltiyi kan hücresi algılama modülüne sıkın.
    2. Depoya Giriş/Çıkış düğmesine basın. Kan hücresi algılama modülü depoya girdikten sonra, Sayma düğmesine basın.
      NOT: Yanıp sönen yeşil gösterge ışığı, analizörün saymakta olduğunu gösterir. Kan hücresi tespit modülü, sayımdan sonra depodan otomatik olarak çıkacaktır ve uygun şekilde çıkarılmalı ve atılmalıdır. Her test sadece 30 saniye sürer.
    3. Analizör arayüzünde, kan hücresi algılama modülünün çıkarıldığını onaylamak için OK düğmesine iki kez tıklayın.
    4. Çözümleyici arayüzünde, test sonuçlarını yazdırmak için Yazdır düğmesine tıklayın.
  6. Çözümleyiciyi kapatın
    1. Çözümleyici arayüzünde, kapatma düğmesine tıklayın ve arayüzde açılan iletişim kutusunda Evet'i seçin. Sistemin kapatma sırasını yürütmeye başlayıp başlamadığını kontrol edin.
    2. Kapatma sırası tamamlandıktan sonra anabilgisayarın arkasındaki [O/I] anahtarını [O] olarak ayarlayın.

4. İstatistiksel analiz

  1. Genelleştirilmiş aşırı öğrencileştirilmiş sapma (ESD) yöntemini kullanarak aykırı değerleri tespit edin ve Amerikan Klinik Laboratuvar Standardizasyonu Derneği (CLSI) EP9-A3 belge8'in gereksinimlerine göre takip istatistiksel analizi için bu aykırı değerleri ortadan kaldırın.
  2. Normalde dağıtılan sürekli veriler için ortalamalar ve standart sapmalar (SD'ler) gibi açıklayıcı parametreleri hesaplayın; normal olarak dağıtılmamış veriler için medyanlar ve% 25-75% çeyrekler arası aralıklar; ve kategorik veriler için frekanslar ve yüzdeler.
  3. Kategorik değişkenler arasındaki ilişki derecesini belirlemek için Pearson χ2 testini veya Fisher'ın kesin testini kullanın. Gruplar arasındaki sayısal verileri karşılaştırmak için Çift-Örneklem T-testi veya Mann-Whitney U testini kullanın.
  4. İki sistemin tespit edilen sonuçlarının dağılımını ve doğrusal ilişkisini dağılım grafikleri ile gösterin. Kantitatif değişkenler arasındaki ilişki derecesine erişmek için Spearman'ın parametrik olmayan korelasyon testini uygulayın. İki sistem tarafından tespit edilen nicel değerler arasındaki anlaşmayı doğrulamak için Bland-Altman grafiklerini ve sınıf içi korelasyon katsayısını (ICC) kullanın.
  5. Verileri tercih ettiğiniz istatistiksel yazılımla analiz edin. 0.05 < P-değeri istatistiksel olarak anlamlı kabul edilir.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Örnek verilerSample data
Hastane 1 (n = 532) ve Hastane 2 (n = 534) dahil olmak üzere iki araştırma merkezine toplam 1066 hasta kaydedildi. Hasta özellikleri Tablo 1'de gösterilmiştir. Erkeklerin oranı %49,9, ortanca yaş 52 (32, 66) yıldır. Çalışmaya alınan hastalar yatan hastalar (%51.1), ayaktan hastalar (%39.0) ve fizik muayene hastalarından (%8.4) oluşuyordu. Test edilen örnekler dahiliye bölümlerini (%30.6), cerrahi bölümleri (%19.1), kadın hastalıkları ve doğum bölümlerini (%9.0), pediatri bölümlerini (%3.9) vb. ziyaret eden hastalardan alınmıştır.

Anormal sonuçları algılama (aykırı değerler)
Referans sistem sonuçları yatay eksen ve değerlendirilen sistem sonuçları dikey eksen olarak alınarak, 1066 numuneden oluşan beş lökosit indeksinin dağılım grafiği elde edilmiştir (sonuçlar gösterilmemiştir). Şüpheli anormal noktalar, beş lökosit indeksinin dağılım grafiğinde belirgindir. ESD yönteminin sonuçlarına göre, 1066 örneklem arasında, WBC sayısında 16 aykırı değer, Gran#'da 27 aykırı değer, Gran% 'de 8 aykırı değer, Lym # 'da 15 aykırı değer ve% Lym'de 9 aykırı değer vardı. Veriler, toplamda% 5'ten daha azını oluşturan aykırı değerleri ortadan kaldırdıktan sonra analiz edildi.

Değerlendirilen sistem ve referans sistemlerde korelasyon analizi
Şekil 2, test sonuçlarının dağılım grafiğini ve Spearman korelasyon analizini göstermektedir. Sonuçlar, WBC sayısının, Gran#, Gran%, Lym# ve Lym%'nin iki sistem arasında iyi bir doğrusallığa ve korelasyona sahip olduğunu göstermektedir; doğrusal katsayı R2 0.7759 ile 0.9676 arasındadır ve rspearman korelasyon katsayısı 0.851 ile 0.973 arasındadır (tüm P-değerleri 0.001'<). WBC ve Gran# iki sistem arasındaki en güçlü korelasyonu sergiler (sırasıyla R 2 = 0.9608 ve 0.9676; sırasıyla r spearman = 0.972 ve 0.973), Lym # ise sistemler arasındaki en zayıf korelasyonu sergiler (R2 = 0.7759; r spearman = 0.851). Bununla birlikte, ara hücrelerin (Orta # / % ) korelasyonunu ve tutarlılığını değerlendiremedik, çünkü referans sisteminde daha küçük bölümlere (yani eozinofiller, bazofiller ve monositler) ayrılmışlardır.

Tutarlılık Analizi
Tutarlılık analizini görselleştirmek için bir Bland-Altman grafiği elde edildi ve ±2 SD, anlaşma sınırları (LoA) olarak işaretlendi. Sonuçlar Şekil 3'te gösterilmiştir. WBC için, değerlendirilen ve referans sistemler arasındaki farkın ortalama değeri 0,9 x 10 9/L'dir ve farkın %95 güven aralığı (CI) -0,7 x 10 9 ~ 2,5 × 109/L'dir.%95 CI içinde %94,48 (992/1050) örnek vardır, bu da değerlendirilen sistem tarafından tespit edilen WBC sonuçlarının referans sistemle iyi bir uyum içinde olduğu anlamına gelir. Gran# ve Gran% için, değerlendirilen ve referans sistemler arasındaki farkın ortalama değeri sırasıyla 0.8 x 10 9 / L ve% 2.0 iken, farkın% 95'i CI'si sırasıyla 0.7 x 10 9 ~ 2.2 x 109 / L ve -7.7% ~% 11.7'dir. %95 CI içinde sırasıyla %94.23 (979/1039) ve %94.99 (1005/1058) örnek bulunmaktadır. Lym# ve Lym% için,% 95 CI içinde% 93.82 (986/1051) ve% 93.76 (991/1057) örnekleri vardır ve ortalama fark değeri sırasıyla% 0.33 x 109 / L ve% 1.8'dir. Lökosit indekslerindeki farklılıkların ortalama değerlerinin hepsinin 0'ın üzerinde olması, değerlendirilen sistemin test sonuçlarının referans sisteminkinden biraz daha yüksek olduğunu gösterir.

Farklı hasta gruplarında korelasyon analizi
Farklı yaş ve cinsiyetteki hastalardan ve farklı bölümlerden alınan örnekler için WBC sayım sonuçları karşılaştırıldı ve korelasyonlar açısından analiz edildi. Sonuçlar, değerlendirilen sistemin WBC seviyesinin referans sistemden daha yüksek olduğunu göstermiştir. Erkek ve kadın hastalar arasında tutarlılık ve korelasyon açısından anlamlı bir fark yoktur (ICC: 0.97'ye karşı 0.98; rspearman: 0.98'e karşı 0.97). Tutarlılık ve korelasyon, Tablo 2'de gösterildiği gibi, yatan hastalar için ayakta tedavi görenlerden daha iyidir (ICC: 0.98'e karşı 0.96; rspearman: 0.98'e karşı 0.96).

Figure 1
Şekil 1: Değerlendirilen sistemin ve destekleyici reaktiflerinin ve sarf malzemelerinin temsili fotoğrafları. (A) Analizör, kandaki lökositleri üç sınıflandırma ile tespit etmek için Coulter prensibini kullanır. Küçük boyutu (242 mm x 397 mm x 321 mm) taşımayı kolaylaştırır. (B) Sınırlı destekleyici reaktifler ve sarf malzemeleri, oda sıcaklığında saklanabilen ve kullanılabilen tek kişilik bir algılama kiti olarak bir giysi içinde birleştirilir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 2
Şekil 2: Değerlendirilen sistem ve referans sistem tarafından tespit edilen beş lökosit indeksinin dağılım grafikleri. R2 = doğrusallık katsayısı, rs = Spearman korelasyon katsayısı (%95 CI) ve n = örneklem büyüklüğü. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 3
Şekil 3: Değerlendirilen sistem ve referans sistemi tarafından tespit edilen beş lökosit indeksinin Bland-Altman grafiği. Y ekseni, değerlendirilen ve referans sistemler arasındaki ölçülen değerlerin farkını gösterirken, X ekseni, değerlendirilen ve referans sistemler tarafından ölçülen lökosit indekslerinin ortalama değerini gösterir. Sürekli siyah çizgi, tüm numune havuzu için ortalama fark değerini temsil eder ve kesikli siyah çizgiler anlaşmanın %95 üst ve alt sınırlarını temsil eder (ortalama anlaşma sınırları ± 1,96 SD). ES i, değerlendirilen sistem tarafından ölçülen değerleri ve RSi, referans sistemi tarafından ölçülen değerleri ifade eder. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Tablo 1: Çalışma popülasyonunun genel verileri. n = örneklem büyüklüğü, IQR = çeyrekler arası aralık. P değeri, Hastane 1 ve Hastane 2'den alınan örnek verilerin karşılaştırılmasına karşılık gelir. Gruplar halinde kategorik değişkenler arasındaki farkları karşılaştırmak için ki-kare testi (χ2) kullanıldı (teorik frekans 5'ten az olduğunda, kalibre etmek için Fisher kesin olasılık yöntemi kullanıldı) ve gruplar arasındaki sayısal verileri karşılaştırmak için t-testi veya Mann-Whitney U testi kullanıldı. Bu tabloyu indirmek için lütfen tıklayınız.

Tablo 2: Farklı hasta gruplarında değerlendirilen sistem ve referans sistem tarafından saptanan WBC sonuçlarının korelasyon analizi. n = örneklem büyüklüğü; IQR = çeyrekler arası aralık; ve ICC = sınıf içi korelasyon katsayısı (0,75 > bir değer iyi güvenilirliği gösterir). rs = Spearman'ın korelasyon katsayısı; 0.90-1.00, 0.70-0.90, 0.50-0.70, 0.30-0.50 ve 0-0.30r'ler sırasıyla çok yüksek, yüksek, orta, düşük ve ihmal edilebilir pozitif korelasyonu gösterir. Bu tabloyu indirmek için lütfen tıklayınız.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Modern laboratuvar tıbbının ilerlemesiyle birlikte, aynı klinik belirteci tanımlamak için aynı veya farklı laboratuvarlarda kullanılan birkaç tespit teknolojisini görmek artık tipiktir. Sonuç olarak, kliniklerin test sonuçlarının doğru yorumlarını ve kararlarını vermelerine yardımcı olmak için test sonuçlarının tutarlılığına daha fazla önem verilmelidir. Araştırmaya göre, üçüncü basamak hastanelerdeki ve bağımsız laboratuvarlardaki laboratuvar ekipmanlarının toplam değeri, birincil hastanelerde ve diğer sağlık kurumlarında bulunanlardan önemli ölçüde daha yüksektir4. Bu tür ekipmanlar çoklu madde algılama, yüksek doğruluk, stabilite ve büyük algılama akısı avantajlarına sahip olsa da, pahalı, büyük ve ağır, karmaşık çalışma, birçok reaktif için bir gereklilik ve profesyonel kalite operatörleri için yüksek talep gibi dezavantajları vardır. Algılama alet ve ekipmanlarının geliştirilmesi otomasyon, zeka, standardizasyon, kişiselleştirme ve küçük taşınabilirlik yönünde sürekli gelişmektedir9. POCT test ekipmanlarının yüksek zamanlama, hafif ve taşıması kolay olmasının yanı sıra bakım gerektirmeme gibi avantajları, büyük kan analizörlerinin eksikliklerini telafi eder ve birincil sağlık kurumları tarafından daha kolay kabul edilir10. Aynı numune ve maddelerin test sonuçlarının farklı test cihazları ile karşılaştırılabilirliğinin gerçekleştirilmesi, laboratuvar kalite yönetiminin temel içeriğidir11. Bununla birlikte, az sayıda çalışma, POCT hematoloji analizörü ile benzer klinik ürünler arasındaki korelasyonu ve tutarlılığı değerlendirmektedir.

Bu çalışmadaki hastalar, Çin'in Guangzhou (Hastane 1) ve Zhuhai (Hastane 2) şehrindeki iki merkezden rastgele işe alındı. İki merkez arasında cinsiyet oranlarında anlamlı bir fark yoktu. Kayıtlı hastalar arasında fizik muayene için hastaneleri ziyaret edenler ve iç hastalıkları, cerrahi, doğum ve jinekoloji, pediatrik, yoğun bakım bölümleri vb. Hastane 1'deki hastaların ortanca yaşı, Hastane 2'dekinden anlamlı olarak yüksektir (58 (37, 68) ve 46 (31, 63); P < 0.001). Hastane 1, solunum yolu hastalıkları için ulusal bir anahtar uzmanlık hastanesidir ve çoğu hasta, yaşlıları etkileme olasılığı daha yüksek olan solunum yolu hastalıklarından muzdariptir12. Yaşlanma ile ilgili bilimsel çalışma, Hastane 1'de 65 yaşın üzerindeki kişilerin oranının Hastane 2'dekinden daha yüksek olduğunu bulmuştur (% 6.67'ye karşı% 5.01)13.

Granülosit sayısında% 2,5'i oluşturan bazı aykırı değerler vardır, ancak tüm öğelerin aykırı değerleri% 5'ten azdır, bu da kabul edilebilir aralıktadır. Değerlendirilen sistemin ve referans sisteminin test sonuçlarının doğrusal katsayısı R2, 0.75'ten büyüktür, bu da iki sistemin doğrusal regresyon çizgilerinin iyi doğrusal uyum iyiliğine sahip olduğunu, beyaz kan hücresi sayısının ve nötrofil sayısının daha iyi doğrusal uyum iyiliğine sahip olduğunu gösterir. En güçlü korelasyon, iki sistem tarafından tespit edilen lökosit ve granülosit sayısı (sırasıyla r s = 0.972 ve 0.973), bunu granülosit yüzdesi ve lenfosit yüzdesi (sırasıyla r s = 0.939 ve 0.932) ile lenfosit sayısı (rs = 0.851) izledi. Bildirilen bir çalışmaya benzer şekilde, POCT serisi ekipmanın beyaz kan hücresi sayımı üzerindeki etkisi, sınıflandırılmış indekslerin sonuçlarından daha iyidir14. Ek olarak, iki sistemin test verileri arasındaki farkın Bland-Altman grafiği, test noktalarının çoğunun% 95 tutarlılık sınırı içinde olduğunu ve değerlendirme sisteminin ve referans sisteminin test sonuçlarının iyi bir uyum içinde olduğunu göstermektedir. Sonuçlar, lenfositlerin tutarlılık analizinin WBC ve granülositlerinkinden biraz daha düşük olduğunu göstermesine rağmen, lenfositlerin korelasyon katsayısı hala 0.85'in üzerindedir, bu da lenfositleri tespit ederken iki sistemin de iyi bir tutarlılığa sahip olduğu anlamına gelir. Öte yandan, Bland-Altman grafiği, değerlendirilen sistemin test sonuçlarının referans sisteminin test değerlerinden biraz daha yüksek olduğunu göstermektedir. Bunun, değerlendirilen sistemdeki sistematik hatalardan kaynaklanabileceği ve bunun da genel sonucu yüksek kıldığı düşünülmektedir. İlk olarak, test başlamadan önce analizörün doğru yerleştirilip yerleştirilmediğini dikkatlice kontrol etmelisiniz; Örneğin, cihazın çevresindeki alan duvardan veya engellerden belirli bir mesafede (≥ 20 cm) tutulmalı ve aletin yerleştirildiği alan iyi havalandırılmalıdır. İkincisi, Ar-Ge ekibi sistematik hatayı düzeltmek için sistemin iç parametrelerini de ayarlayabilir.

Yeni kart tabanlı POCT lökosit algılama sistemi, lökositleri ve hacim dağılımlarını tespit etmek için elektriksel empedans prensibini kullanır15,16. Kan hücreleri ve elektrolit çözeltileri arasındaki elektriksel iletkenlik farkından yararlanarak, farklı hacim boyutlarına sahip kan hücreleri sayma deliğinden geçtiğinde, deliğin içinde ve dışında akım veya voltajda değişikliklere neden olarak bir darbe voltajı oluşturabilir. Bu nabız voltajı, kan hücrelerinin sayısıyla karşılaştırılabilir ve hacim boyutuna karşılık gelir, böylece dolaylı olarak kan hücresi gruplarını ayırt eder ve bunları ayrı ayrı sayar. Değerlendirilen analizörü kullanarak lökosit tespitinde birkaç kritik adıma dikkat edilmelidir, bu da test sonuçlarının doğruluğu ile yakından ilgilidir. İlk olarak, kan toplarken, ilk damla kan, test sonuçlarını etkileyebilecek fazla doku sıvısı içerebileceğinden, steril bir kuru çubukla silinmelidir. İkincisi, ikinci damla kanı kılcal bir tüp ile topladıktan sonra, toplanan kan örneği hacminin tam olarak 5 μ olmasını sağlamak için tüpün dışına bağlı kan L.In ayrıca kan örnekleri ve hemolitik reaktifler tamamen karıştırılmalıdır. Aynı zamanda, tüm çözeltilerin kan hücresi algılama modülüne tamamen sıkıştırıldığından emin olun.

Düşük maliyetli, basit kullanım, hızlı olma ve günlük bakımdan uzak olma gibi olağanüstü avantajları nedeniyle, bu POCT sistemi, mevcut klinik uygulamaya önemli bir ek olan poliklinik merkezlerinde veya birincil tıbbi birimlerde kullanım için çok uygundur4. Bu sistemin uygulanması, Çin'in gelişmekte olan tüm bölgelerindeki tüm birincil sağlık kurumlarında kan rutin muayenesini kapsayabilir ve başta bulaşıcı hastalıklar ve kan hastalıkları olmak üzere hastalıkların erken taranmasında önemli klinik öneme sahiptir17,18. Bununla birlikte, önemli bir sınırlama, lökositlerin sadece üç kategoriye ayrılabilmesidir (nötrofiller, lenfositler, ara hücreler). Gelecekte, doğru tanı amacına ulaşmak için sistemin sınıflandırma yeteneği daha da geliştirilmelidir.

Sonuç olarak, yeni bir lökosit analiz ekipmanı olarak POCT lökosit analizörü, taşınabilir, düşük maliyetli, kolay kullanımlı, hızlı ve doğru algılama avantajlarına sahiptir; kliniklerde yaygın olarak kullanılan otomatik hematoloji analizörü ile iyi korelasyon, güçlü tutarlılık ve güvenilir karşılaştırma sergiler ve bu nedenle birincil tıbbi birimlerde kullanım için uygundur.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyleri yoktur.

Acknowledgments

Bu çalışma Çin'in Guangdong Eyaleti Tıbbi Bilimsel Araştırma Vakfı tarafından desteklenmiştir (A2019224). Finansman grupları, çalışma tasarımı, veri analizi, makale hazırlama ve yayınlama kararı konusunda anlaştılar. Bu çalışma için başka bir fon alınmamıştır.

Materials

Name Company Catalog Number Comments
Blood cell detection module Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) consumables for evaluated system
Blood lancet Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) consumables for evaluated system
Hemolytic reagent Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) consumables for evaluated system
IBM SPSS Statistics 25 International Business Machines Corp., Armonk, NY Software for data analysis
MedCalc 11.4.2.0 2021 MedCalc Software Ltd Software for data analysis
Microsoft Excel 2019 Microsoft Software for data analysis
Point-of-care testing (POCT) card-based leukocyte analyzer Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) CX-2000 Evaluated system
Quantitative pipette with capillary tube inside Chuanghuai Medical Technology Co., Ltd.(Shenzhen, China) consumables for evaluated system
Siemens fully automatic hematology analyzer and its related reagents and consumables Siemens Healthcare Diagnostics Inc. ADVIA 2120i Reference system 2
UniCel DxH 800 Coulter Cellular Analysis System and its related reagents and consumables Beckman Coulter, Inc. DxH 800 Reference system 1

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Agbaria, A. H., et al. Diagnosis of inaccessible infections using infrared microscopy of white blood cells and machine learning algorithms. The Analyst. 145 (21), 6955-6967 (2020).
  2. Mlinaric, A., et al. Autovalidation and automation of the postanalytical phase of routine hematology and coagulation analyses in a university hospital laboratory. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 56 (3), 454-462 (2018).
  3. Genzen, J. R., et al. Challenges and opportunities in implementing total laboratory automation. Clinical Chemistry. 64 (2), 259-264 (2018).
  4. Kang, F., Li, W., Wang, W., Chen, B., Wang, Z. A nationwide multicenter study on clinical laboratory construction in China. Chinese Journal of Hospital Administration. 35 (10), 867-871 (2019).
  5. Rawaf, S., et al. Lessons on the COVID-19 pandemic, for and by primary care professionals worldwide. The European Journal of General Practice. 26 (1), 129-133 (2020).
  6. Balla, M., et al. COVID-19, Modern pandemic: a systematic review from front-line health care providers' perspective. Journal of Clinical Medicine Research. 12 (4), 215-229 (2020).
  7. Cheng, B., et al. Predictors of progression from moderate to severe coronavirus disease 2019: a retrospective cohort. Clinical Microbiology and Infection. 26 (10), 1400-1405 (2020).
  8. Budd, J. Measurement procedure comparison and bias estimation using patient samples; approved guideline-third edition. Clinical and Laboratory Standards Institute. 33 (11), (2013).
  9. Wang, Y. Development trend of testing instruments in grass-roots hospitals. Medical Equipment. 24 (03), 26-27 (2011).
  10. Miesler, T., Wimschneider, C., Brem, A., Meinel, L. Frugal innovation for point-of-care diagnostics controlling outbreaks and epidemics. ACS Biomaterials Science & Engineering. 6 (5), 2709-2725 (2020).
  11. Vesper, H. W., Myers, G. L., Miller, W. G. Current practices and challenges in the standardization and harmonization of clinical laboratory tests. The American Journal of Clinical Nutrition. 104, Suppl 3 907-912 (2016).
  12. Vaz Fragoso, C. A. Epidemiology of lung disease in older persons. Linics in Geriatric Medicine. 33 (4), 491-501 (2017).
  13. Qian, C., Xie, T. Regional differences and demographic reasons of population aging in Guangdong Province. Scientific Research on Aging. 5 (01), 46-56 (2017).
  14. de Graaf, A. J., Hiemstra, S. W., Kemna, E. W. M., Krabbe, J. G. Evaluation of a POCT device for C-reactive protein, hematocrit and leukocyte differential. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 55 (11), 251-253 (2017).
  15. Chabot-Richards, D. S., George, T. I. White blood cell counts: reference methodology. Clinics in Laboratory Medicine. 35 (1), 11-24 (2015).
  16. Green, R., Wachsmann-Hogiu, S. Development, history, and future of automated cell counters. Clinics in Laboratory Medicine. 35 (1), 1-10 (2015).
  17. Henry, B. M., de Oliveira, M. H. S., Benoit, S., Plebani, M., Lippi, G. Hematologic, biochemical and immune biomarker abnormalities associated with severe illness and mortality in coronavirus disease 2019 (COVID-19): a meta-analysis. Clinical Chemistry and Laboratory Medicine. 58 (7), 1021-1028 (2020).
  18. Flanagan, B., Keber, B., Mumford, J., Lam, L. Hematologic conditions: leukocytosis and leukemia. FP Essentials. 485, 17-23 (2019).

Tags

Tıp Sayı 181 POCT periferik kan lökositleri metodolojik karşılaştırma tutarlılık değerlendirmesi yardımcı tanı
Periferik Kan Lökositlerini Ölçmek için Bakım Noktası Test Analizörünün Değerlendirilmesi
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Zhu, H., Huang, Z., Huang, H., Wang, … More

Zhu, H., Huang, Z., Huang, H., Wang, C., Wu, L., Lin, R., Sun, B. Evaluation of a Point-of-Care Testing Analyzer for Measuring Peripheral Blood Leukocytes. J. Vis. Exp. (181), e63364, doi:10.3791/63364 (2022).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter