Summary
Pelvik organ prolapsusu dünya çapında milyonlarca kadını etkilemektedir ve yine de bazı yaygın cerrahi müdahalelerin başarısızlık oranları% 40'a kadar çıkmaktadır. Bu durumu araştırmak için standart hayvan modellerinin eksikliği ilerlemeyi engellemektedir. Aşağıdaki protokolü uterosakral ligament süspansiyonu ve in vivo gerilme testi için bir model olarak öneriyoruz.
Abstract
Pelvik organ prolapsusu (POP), bir kadının yaşam kalitesini önemli ölçüde etkileme potansiyeline sahip yaygın bir pelvik taban bozukluğudur (PFD). Kadınların yaklaşık% 10-20'si Amerika Birleşik Devletleri'nde prolapsusu tedavi etmek için pelvik taban onarım ameliyatı geçirmektedir. PFD vakaları, yalnızca Amerika Birleşik Devletleri'nde toplam 26,3 milyar dolarlık yıllık maliyetle sonuçlanmaktadır. Bu çok faktörlü durumun yaşam kalitesi üzerinde olumsuz bir etkisi vardır ve yine de tedavi seçenekleri yakın geçmişte sadece azalmıştır. Yaygın bir cerrahi seçenek, tipik olarak vajinal tonozun pelvisteki uterosakral ligamente yapıştırılmasıyla gerçekleştirilen uterosakral ligament süspansiyonudur (USLS). Bu onarım, ağ büyütme ile karşılaştırıldığında daha düşük bir komplikasyon insidansına sahiptir, ancak% 40'a varan nispeten yüksek bir başarısızlık oranı için dikkat çekicidir. Pelvik taban disfonksiyonunu incelemek için standart hayvan modellerinin eksikliği göz önüne alındığında, uygun maliyetli ve erişilebilir hayvan modelleri geliştirmeye odaklanarak bu alanda inovasyon için acil bir klinik ihtiyaç vardır. Bu yazıda, USLS'nin tam histerektomiyi ve ardından kalan vajinal tonozun uterosakral ligamente sabitlenmesini içeren bir sıçan modeli tanımlanmıştır. Bu modelin amacı, modeli daha sonra bağ bağlantısının mekanik bütünlüğünü geliştiren onarıcı stratejileri araştırmak için kullanabilmek için kadınlar üzerinde uygulanan prosedürü taklit etmektir. Önemli olarak, cerrahi müdahaleyi takiben seçilen zaman noktalarında arayüz bütünlüğünü karakterize etmek için bir in situ çekme testi prosedürünün geliştirilmesini de açıklıyoruz. Genel olarak, bu model USLS yoluyla POP onarımı için tedavi seçeneklerini araştıran gelecekteki çalışmalar için yararlı bir araç olacaktır.
Introduction
Pelvik organ prolapsusu (POP), dünya çapında milyonlarca kadını etkileyen, özellikle1 yaşla birlikte bir kadının yaşamının birçok yönünü önemli ölçüde etkileme potansiyeline sahip yaygın bir pelvik taban bozukluğudur. Özellikle, Amerika Birleşik Devletleri'ndeki kadınların yaklaşık% 13'ü prolapsus veya idrar kaçırma 2 için ameliyatolacaktır. Hamilelik ve doğumdan sonra en sık görülen bir durum olan prolapsus, pelvik organların, ağırlıklı olarak vajinanın ve / veya uterusun çeşitli bölümlerinin, periton boşluğundaki normal konumlarının ötesine inmesi ile karakterizedir. Bu, vajinal şişkinlik veya basınç, bağırsak, mesane ve cinsel işlev bozukluğunun rahatsız edici semptomlarına ve genel olarak yaşam kalitesinin düşmesine neden olur. POP için diğer risk faktörleri obezite, tütün kullanımı, kronik öksürük ve kabızlık3'ü içerir.
Sağlıklı kadınlarda pelvik taban organları levator ani kasları, uterosakral ligamentler (USL'ler), kardinal bağlar, pelvik yanak duvarına bağ dokusu ataşmanları ve perineal cismin distal yapıları tarafından desteklenir 4,5. USL'ler hem uterus hem de apikal vajina için en önemli apikal destekleyici yapılar arasındadır ve bu nedenle sıklıkla POP'un cerrahi olarak düzeltilmesinde kullanılmaktadır (Şekil 1). USL'den yapısal destek, sakral bölgedeki yoğun kollajenöz bağ dokusundan kaynaklanır ve bu da yakından paketlenmiş düz kaslara dönüşür. Bu kompozisyonel gradyan nedeniyle, USL, pelvik organlara sağlam destek sağlamak için uterus ve vajinal kas sistemi ile iç içe geçer 6,7. Uterosakral ligament süspansiyonunda (USLS), USL'ler histerektomi sonrası vajinal tonoza sabitlenir ve vajina ve çevresindeki yapılar abdominal kompartmandaki anatomik konumlarına geri yüklenir. Bununla birlikte, transvajinal veya laparoskopik yoldan bağımsız olarak, USLS prosedürü bazı çalışmalarda% 40'a varan nispeten yüksek bir başarısızlık oranı ile uğraşmaktadır 8,9. USL'ler gibi apikal kompartman prolapsusu için onarımdan 5 yıl sonra rahatsız edici vajinal şişkinlik semptomlarının nüks oranı, çok merkezli randomize kontrollü büyük bir çalışmada yaklaşık% 40 idi9. Aynı çalışmada, 5 yılda tekrarlayan prolapsus için yeniden tedavi yaklaşık% 10 idi. Bu yüksek başarısızlık oranının mekanizması araştırılmamıştır, ancak vajina ve çevresindeki yapıların anatomik pozisyonlarına geri getirilmesi, düz kas bölgesi yerine USL10,11'in yoğun kollajenöz bölgesine dikiş yerleştirilmesini gerektirir. Bu nedenle, yüksek başarısızlık oranı, doğal servikal-USL bağlantısında görülen tam entegrasyona kıyasla, cerrahi olarak oluşturulmuş vajina-USL arayüzünün mekanik ve kompozisyonel uyumsuzluğundan kaynaklanabilir.
Bu bozuklukların tedavisinin ekonomik etkisi de dikkat çekicidir, ABD'de ayaktan bakım için yılda yaklaşık 300 milyon dolar harcanmaktadır12 ve cerrahi prosedürler için doğrudan maliyetlere yılda 1 milyar dolardan fazla harcanmaktadır13. Bu durumların tedavisine adanmış geniş ekonomik kaynaklara rağmen, birçok prolapsus ameliyatından kaynaklanan komplikasyonlar cesaret kırıcı olmaya devam etmektedir. Örneğin, sakrokolpopeksi gibi polipropilen ağ bazlı apikal prolapsus onarımları, doğal doku onarımlarına kıyasla daha yüksek başarı oranları sunar14, ancak ağa maruz kalma veya erozyon gibi potansiyel komplikasyonlar pahasına. FDA, yalnızca 2008 ve 2010 yılları arasında mesh komplikasyonlarıyla ilgili yaklaşık 3.000 şikayet aldı. Bu, FDA'nın Nisan 2019'da POP için transvajinal olarak yerleştirilmiş tüm örgü ürünlerinin üretimini ve satışını durdurma emriyle sonuçlandı15. Bu nedenle, polipropilen dışındaki materyallere ve bunları test etmek için modellere güçlü bir klinik ihtiyaç vardır, bu da doğal doku prolapsusu onarımlarını artırabilir ve tek başına dikiş ile geleneksel tekniklere kıyasla başarı oranlarını artırabilir.
FDA'nın 2019'daki duyurusundan bu yana, çoğu pelvik cerrah, prolapsus onarımları için transvajinal olarak yerleştirilmiş ağ kullanmayı bıraktı ve araştırmacıları, mezenkimal stromal hücreler (MSC'ler) gibi doğal doku onarımlarını 16,17,18 artırmak için yeni doku mühendisliği yaklaşımları aramaya teşvik etti9,20 . Odak noktasındaki bu değişimle birlikte, yeni malzemelerin geliştirilmesine yardımcı olabilecek hayvan modellerinin iyileştirilmesine acil bir ihtiyaç vardır; Bu süreçteki zorluk, klinik alaka düzeyini maliyetle dengelemektir. Bu amaçla, pelvik organ prolapsusunu inceleyen temel bilim ve klinik araştırmacılar, sıçanlar, fareler, tavşanlar, koyunlar, domuzlar ve insan olmayan primatlar19 dahil olmak üzere şimdiye kadar çeşitli hayvan modellerinden yararlanmışlardır. Optimal bir hayvan modeli belirleme süreci zordur, çünkü insanlar iki ayaklıdır, kuyrukları yoktur ve diğer memeli türlerine kıyasla travmatik bir doğum sürecine sahiptirler20. Domuz21, robotik sakrokolpopeksi simüle etmek için kullanılırken, koyunlar vajinal prolapsus onarımlarını simüle etmek için kullanılmıştır22. Bu hayvan modelleri, klinik olarak alakalı olsa da, maliyet ve bakım ile fizibilite bakımından sınırlıdır. İnsan olmayan primatlar prolapsusun patogenezini incelemek için kullanılmıştır; Özellikle sincap maymunları, insanlar dışında kendiliğinden prolapsus geliştirebilen tek türlerden biridir ve bu da onları en alakalı hayvan modellerinden biri haline getirir20. İnsan olmayan primatlar, sakrokolpopeksi23 ve uterus nakli24 gibi jinekolojik cerrahi prosedürleri incelemek için de kullanılmıştır. Koyun ve domuz meslektaşlarına benzer şekilde, insan olmayan primatların bir hayvan prolapsusu modeli olarak birincil sınırlaması, bakım, bakım ve yatılı maliyettir19.
Kemirgen pelvisi, insanlara kıyasla çok daha küçük bir baş-doğum kanalı boyut oranı ile yatay olarak yönlendirilmiş olmasına rağmen, sıçanlar, insan USL25'e kıyasla benzer USL anatomisine, hücreselliğe, histolojik mimariye ve matris kompozisyonuna sahip olduklarından, USLS cerrahisinin küçük hayvan çalışmaları için uygundur. Ayrıca, bakım ve biniş açısından faydalıdırlar. Bu yararlı özelliklere rağmen, USLS onarımının bir sıçan modelinin yayınlanmış bir raporu yoktur. Bu nedenle, amaç multipar Lewis sıçanında histerektomi ve USLS için bir protokol tanımlamaktır. Bu protokol, bu erişilebilir hayvan modelini kullanarak POP'un patofizyolojisini ve cerrahi bileşenlerini incelemeyi amaçlayan araştırmacılar için faydalı olacaktır.
Resim 1: Pelvik organ prolapsusu . (A) Periton boşluğundaki organların normal oryantasyonu ve (B) prolapsus meydana geldiğinde dramatik organ düşüşü. Histerektomiyi takiben, (C) uterosakral ligament süspansiyonu vajinayı ve çevresindeki yapıları uygun anatomik pozisyonlarına geri yükler. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Protocol
Tüm Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) yönergelerine uyun ve başlamadan önce tüm hayvan prosedürleri için onay alın. Aseptik cerrahi tekniği için gereklilikler Kılavuz26 ve Hayvan Refahı Yönetmeliği27'den bulunabilir. Çalışma, Virginia Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi protokol numarası 4332-11-20 tarafından onaylanmıştır. Çok parpar (iki çöp) dişi yetiştiriciler edinin. Sıçanlar, Amerikan Laboratuvar Hayvanları Bakımı Akreditasyon Birliği tarafından akredite edilmiş bir vivaryumda çiftleştirilmeli ve yiyecek ve su ad libitum ile sağlanmalıdır. Bu çalışmadaki hayvanlar, Charles Nehri'nden elde edilen Lewis sıçanlarıydı ve iki çöp gereksinimini karşılamak için 4 ila 6 aylıktı. Hayvanlar 12 saatlik bir açık-karanlık döngüsünde tutuldu.
1. Uterosakral ligament süspansiyonu kullanılarak pelvik organ prolapsusu onarımı
- Canlı hayvan cerrahisi için ekipman ve cerrahi alan hazırlığı
- Cerrahi alanı, steril su geçirmez bir ped ile birlikte devridaim yapan sıcak su ısıtma pedleri kullanılarak cerrahi tahtanın 37 ° C'ye ısıtılması için hazırlayın. Ağartıcı içermeyen bir yüzey dezenfektanı ve ardından %70 etanol mendil kullanarak cerrahi tahtanın ve cerrahi alanın sterilitesini sağlayın.
- Cerrahi aletler, cerrahi süngerler (gazlı bez), pamuklu çubuklar ve tek kullanımlık bir örtü dahil olmak üzere tüm otoklav güvenli malzemelerini sterilize etmek için otoklav ısı sterilizasyonunu kullanın. Steril paketlenmiş cerrahi eldivenler edinin.
- Steril paketlenmiş neşter bıçağı ve dikişlerle birlikte elektrikli makaslar, oftalmik merhem, etanol mendilleri, pamuklu çubuklar ve iyot çözeltisi elde edin ve çalışma tezgahına yerleştirin.
- Canlı hayvan cerrahisi için hayvan hazırlığı
- Hayvanı% 2 izofluran ile donatılmış bir anestezi odasına dikkatlice yerleştirin ve uygun anestezi düzlemine ulaşıldıktan sonra hayvanı tartın. Uygun anestezi, hayvan bir ayak parmağı sıkışmasına yanıt vermediğinde doğrulanır.
- Hayvanı, %2 izofluran ile beslenen anestezi konisinde burun güvenli bir şekilde yüzüstü pozisyonda ameliyat tahtasına yerleştirin. Hayvanların gözlerinin her birine oftalmik merhem uygulayın.
- Opioid analjezik ve NSAID analjezik subkutan olarak uygulayın (Malzeme Tablosu).
- Hayvanı Şekil 2'de gösterildiği gibi sırtüstü pozisyona yerleştirin ve karın kürkünü ksifoid işlemden üretral deliğe (8 cm x 4 cm) kadar tıraş edin. Kesi bölgesini hazırlamak için karnı üç yük iyot ve alkol ile sterilize edin.
NOT: Tıraş kanamaya neden oluyorsa, cildi iyot ve alkol hazırlama pedi ile hazırlamadan önce basınçla hemostaz yapın. İyotu ciltte 30 saniye boyunca koruyun. - Cerrahi asistan yoksa, steril pamuklu çubuklar, örtüler, süngerler (gazlı bez), cerrahi bıçak, dikişler ve cerrahi işaretleyici (isteğe bağlı) dahil olmak üzere steril malzemeleri ve aletleri steril bir alet tepsisine koyun. Bir cerrahi asistan varsa, bu adım atlanabilir ve asistan adım 1.3.1'i izleyerek steril aletleri sağlayabilir.
- Histerektomi ve uterosakral ligament süspansiyonu (USLS)
- Cerrahi bir önlük, baş örtüsü, maske ve steril eldiven giyin. Hayvanı steril bir alanla örtün, sadece karnı açıkta bırakın.
- Bir neşter bıçağı kullanarak ksifoid işlemin hemen altından alt meme başı çizgisine kadar linea alba aşağı doğru 7 cm'lik bir kesi yapın. Kesi üretral delikten ~0.5-1.0 cm rostral olarak bitmelidir. Ardından, altındaki kas tabakasından bir kesi yapın. Kanamayı önlemek için karın duvarı kan damarından kaçının.
- Karın retraktörünü monte edin ve karın boşluğunu inceleyin (Şekil 3A). İris forseps kullanarak, sol uterus boynuzunu yavaşça bulun. Rahim bağırsağın derinliklerindedir, bu genellikle periton boşluğuna girdikten sonra ilk karşılaşılan yapıdır. Öncelikle yumurtalık (Şekil 3B) ve ilişkili yumurtalık yağ yastığını tanımlamak faydalıdır.
- Sol uterus boynuzunu bir kavrayıcı veya sivrisinek kelepçesi ile hafifçe yükseltin ve bir sivrisinek kelepçesi kullanarak boynuzu yumurtalık ve yumurta kanalının altına bağlayarak histerektomiye başlayın. Yumurtalıklar hassas yapılardır ve manipülasyonla kolayca hasar görür veya devaskülarize edilir. Rahim boynuzlarını yükseltirken dikkatli olun; Bunu başarmak için boynuzu yumurtalıktan güvenli bir mesafeden tutun.
- Mikro makas kullanarak uterus boynuzundan bitişik vaskülatür, bağ dokusu ve yağları sıkıştırarak ve keserek histerektomiye devam edin. Kanamayı azaltmak için çıkarmadan önce bağ dokusunu kelepçeleyin. Kelepçeleri uterus arayüzüne mümkün olduğunca yakın, uteroservikal bileşkeye (boynuz bifurkasyonu olarak da adlandırılır) kadar yerleştirin.
- Sivrisinek forseps kullanarak bifurkasyon noktasına yakın uterus boynuzu boyunca kelepçeleme (Şekil 4A-C). Kanamayı önlemek için ipsilateral boynuzu sadece sefaladı kelepçeye boşaltın. Bu, utero-servikal bileşke (servikse sadece rostral) ve utero-tubal ligasyon noktası arasında bulunur. Histerektomi sonrası vajinal tonoz kalacaktır (Şekil 4D).
NOT: Sıçan damarlarının küçük kalibresi nedeniyle, uterus kütüklerinin geçici bir kelepçe ile bağlanması bu ameliyat için yeterliydi. Bununla birlikte, bu teknik, pediküllerin elektrokoter veya dikiş ligasyonu ile kapatılmasıyla gerektiği gibi değiştirilebilir. - Total histerektomi yapmak için sağ uterus boynuzunda 1.3.3-1.3.6 adımlarını tekrarlayın.
- Alt pelvisi açığa çıkarmak için abdominal retraktörü ayarlayın. Açıkta kalan vajinal tonozu ve pelvik tabanı, vajina ve servikse bağlı olarak görülebilen ligamental ve bağ dokularını destekleyin inceleyin. Mümkünse, üreteri iki taraflı olarak tanımlayın, bu da yumurtalıklar için sadece medialdir.
- Uterus boynuzlarının (vajinal tonoz) kalan kütüklerinin hemen altında servikse bağlı olarak bulunabilen Şekil 5A'da gösterilen uterosakral ligamentleri28,29 tanımlayın. Ligament, sakruma doğru sefalad-medial bir yönelimde izlenir.
- Küçük, konik bir iğne üzerinde 3-0 polidiaksanon sütür kullanarak, sol uterosakral ligamentten bir dikiş yerleştirin. Dikişi ligamentin üzerine, sakruma yakın bir yere yerleştirin.
- Uterosakral ligamenti yakaladığından emin olmak için dikiş üzerine çekin - USL yapısı, sakruma bağlandığı rektumun arkasına dalış yapan orijin ile servikse girer. Yine, uterosakral dikişe dahil edilmediğinden veya bükülmediğinden emin olmak için üreteri tanımlayın.
- Daha sonra, sol polidiaksanon dikişini, vajinal manşetin hem ön hem de arka yönlerini içerecek şekilde dikkatli bir şekilde vajinal tonozun sol yönünden geçirin (Şekil 5B). Sağ taraftaki USLS yordamını tamamlamak için adımları yineleyin. İstenirse birden fazla dikiş iki taraflı olarak yerleştirilebilir.
- Uterosakral dikişler iki taraflı olarak yerleştirildikten sonra, Şekil 5C'de gösterildiği gibi, vajinal tonoz sakruma doğru sefalad yükseltilecek şekilde kare bir düğüm kullanarak sütürü güvenli bir şekilde bağlayın; Bu, uterosakral ligament süspansiyonunu tamamlar.
- Cerrahi yaranın kapatılması
- Karın içeriğini periton boşluğu içindeki anatomik pozisyonlarına geri yerleştirin. Karın duvarının derin katmanlarını (periton, fasya, kas) 4-0 ila 6-0 poliglactin 910 veya polidiaksanon sütürün sürekli dikiş paterni ile kapatın.
- Cildi 4-0 ila 6-0 polidiaksanon veya poliglactin 910'un çalışan bir subkütiküler (veya kesilmiş) dikişi ile kapatın. Cerrahi alan enfeksiyonu profilaksisi için gerektiğinde deri altından antibiyotik uygulayın.
- Hayvan sternal yatmayı sürdürmek için yeterli bilinci yeniden kazanana kadar ameliyat sonrası izleme yapın. Tamamen iyileşene kadar hayvanı sosyal konutlara iade etmeyin.
Şekil 2: Canlı ameliyat için hayvan hazırlığı. Kesi bölgesini çevreleyen bölgeden kürkün çıkarılması, uygun aseptik teknik için gereklidir. (A) ve (B) panellerinde gösterilen alan kılavuzdur. Araştırmacılar, steril aletlerin ameliyat sırasında saçla temas etmeyeceği kadar saçı çıkarmalıdır. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 3: Yumurtalıkların korunması. Rahim boynuzları tipik olarak (A)'da gösterildiği gibi karın ilk açıldığında görünmez. Bir boynuz yerleştirildikten ve (B) boynuza bağlandıkları yumurtalık ve yumurta kanalını bulmak için takip edildikten sonra, boynuzun üstü kelepçelenebilir ve boynuz histerektomiye başlamak için ayrılabilir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 4: Rahim boynuzlarının çıkarılması. Sıçanda histerektomi (A) uteroservikal bileşkede kenetlenmiş her iki uterus boynuzunu (B) ve (C) eksize edilmesini içerir. Her boynuzdan vajinal tonoz, onları birbirine bağlayan (D) servikal / uterus kütüğü (ok) ile kalır. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 5: Uterosakral ligament süspansiyonu. (A) Uterosakral ligamentlerin oluşturulan vajinal tonoz yapılarına göre oryantasyonu. Uterosakral ligament süspansiyonu (USLS) onarımı için sütürler yerleştirilirken, (B) sütürler uterosakral ligamenti yakalar ve daha sonra vajinal manşetin hem ön hem de arka yönlerinden geçer. (C) Uterosakral ligamente sabitlenen vajinal tonoz şimdi sakruma doğru sefalad yükseltilmiştir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
2. Tek eksenli çekme testi
NOT: Kullanılan test sistemi ve yazılımı, üreticinin kalibrasyon ve test yönergelerine uygun olarak çalıştırılmıştır. Tüm testler 22 °C'de gerçekleşti.
- Numune hazırlama
- IACUC onaylı bir farmakolojik prosedür kullanarak sıçanı ötenazi yapın. İkincil fiziksel yöntemle ölümü sağlayın. Burada CO2 inhalasyonu ve ardından kardiyak ponksiyon kullanıldı. Çekme mekanik testine hazırlık olarak vajinal tonozu açığa çıkarın. Bu çalışmada, doğal uterosakral ligamentler (kontrol) ve ayrıca yukarıda tarif edildiği gibi uterosakral ligament süspansiyonu (POP) geçirmiş hayvanlar üzerinde çekme testi yapın.
- Ameliyattan 24 hafta sonra ligamentleri yerinde test edin. Dikişlerin tamamen yeniden emilimine izin vermek için en az 8 haftalık bir terminal zaman noktası önerilmektedir.
- İnsancıl ötenaziyi takiben, karnı açığa çıkarmak için linea alba'dan aşağı doğru bir kesi yapın.
- Vajinal tonoz görünene kadar yağ dokusunu diseke etmeye başlayın. Sağlam USL'ler açıkça görülebilene kadar (kontrol hayvanları, Şekil 6A) veya uterosakral ligament ile vajinal tonoz arasındaki kavşak görülebilene kadar (POP hayvanları, Şekil 6C) abdominal yağ yastıkçıklarını diseke etmeye devam edin. Yağ dokusunu çıkarmak için bağlantıyı çekmemeye dikkat edin, bunun yerine numuneler arasındaki tutarlılığı korumak için mikro makasla dikkatli kesimler kullanın.
- Esnek bir cetvel kullanarak, uterosakral yerleştirme (rektumun arkasında) ile vajinal tonoz arasındaki mesafeyi ölçün. Bu değer dokunun orijinal uzunluğudur.
NOT: Kontrol USL'leri için dokunun orijinal uzunluğu, ölçer uzunluğu 13,4 ± 0,5 mm ölçülürken, USL'lerin onarımı için ölçer uzunluğu 12,8 ± 0,4 mm olarak ölçülmüştür. - Sağlam USL'nin (kontrol, Şekil 6B) veya USLS bileşkesinin (POP, Şekil 6D) arkasındaki iplik göbek bandı, doku göbek bandı üzerinde ortalanacak şekilde. Dijital kumpasları kullanarak göbek bandı ile kesiştiği dokunun yüksekliğini ve genişliğini ölçün. Bu değerler kesit alanını hesaplamak için kullanılacaktır.
- Taban adaptörü aracılığıyla büyük bir sıkıştırma plakası (Malzeme Tablosu) takın ve hayvanı, numune kavrama tutucusunun altında ortalanacak şekilde yerleştirin.
- Çekme testi
- Çekme testi rejimini yazılıma programlayın: ön yükleme, ön koşul, arızaya çekme. Bu, önceki pelvik taban29 ve üreme dokusu30 mekanik test protokollerini takip eder.
- Çekme testine hazırlanmak için cihazı kurun. Mevcut etüt için, Şekil 7'de gösterildiği gibi bir sıkıştırma plakası takmak için 10 N yük hücresi, 3B baskılı bir kavrama yeri ve bir taban adaptörü kullanın.
NOT: Hayvanın tam boyutunu destekleyebilecek herhangi bir taban kurulumu kabul edilebilir. Göbek bandını güvenli bir şekilde tutabilen herhangi bir kavrama kullanın. Bu testte önceki çalışmalardan özel bir 3D baskılı tutucu ve kavrama31,32 kullanılmıştır. STL dosyaları ek dosyalar olarak eklenmiştir.- Hayvanı, numune kavramanın altında ortalanacak şekilde konumlandırın (Şekil 8A). Hayvanı plakaya sabitleyerek örneği çevreleyen pelvik bölgeyi hareketsiz hale getirin (Şekil 8B).
- Yük hücresini, göbek bandının kuyrukları tutuşa kolayca ulaşacak şekilde indirin. Göbek bandını kavramada sabitleyin ve numune manipülasyonunu önlemek için bandı gevşek bırakın.
- Yazılım arabiriminde ön koşullandırma testini açın ve testi örnek adıyla etiketleyin. Ön koşullandırma yönteminin ön yükleme adımını içerdiğinden emin olun.
- Numuneyi 0,015 N'de önceden yükleyecek olan ön koşullandırma testini başlatmak için tıklayın. Ön yük kuvveti stabil hale geldiğinde, test numuneyi 30 s boyunca 0,1 mm/s uzama hızında ön koşullandıracaktır. Dokunun 1 dakika dinlenmesine izin verin. Beklerken, pull-to-fail test rejimini yükleyin.
NOT: Ön yük kuvveti, cihaz sınırlamalarına ve test koşullarına bağlı olarak değişebilir. Bildirilen ön yükün 0,015 N ila 0,1 N 29,33,34,35,36 arasında değiştiği önceki çalışmalara bakın. - Başarısızlığa uğramak üzere programlanmış test rejimini açın. Testi örnek adıyla etiketleyin ve bir sonraki pencereye geçmek için Tamam'a tıklayın. Numunenin ölçer uzunluğunu girin ve ardından test sayfasına geçmek için İleri'ye tıklayın.
- Tümünü dengeleyin ve Başlat'a tıklayın. Testin, doku başarısızlığa uğrayana kadar 0,1 mm/sn uzama hızında çalışmasına izin verin. Test, yük yer değiştirme verileri üretecektir.
- Çekme testi için gerilme, gerinim ve modülün hesaplanması
- Yük yer değiştirme verilerini, kesit alanını ve numunedeki ölçer uzunluğunu kullanarak, daha önce37,38,39,40,41 olarak bildirilen gerilimi (MPa) ve gerinimi (%) hesaplayın. Aşağıda gösterilen Denklem 1 ve Denklem 2'yi kullanın. Test sırasında bandın gerilmesinin de bu hesaplamalarda hesaba katılması gerektiğini unutmayın.
Denklem 1
Denklem 2- Yük-yer değiştirme eğrisinden (Şekil 9A,D), sertliği (doğrusal eğim, N/mm) ve nihai yükü hesaplayın. Gerilim gerinim eğrisinden, teğet modülünü (doğrusal eğim, MPa) ve nihai gerilimi hesaplayın. Gerinim eğrisinin doğrusal bölgesi Şekil 9B,E'de belirtilmiştir ve bu bölgeden hesaplanan teğet modülü her iki deney grubu için Şekil 9C,F'de gösterilmiştir.
NOT: Hem sertlik hem de teğet modülü için, doğrusal regresyon37,41 için R2 değerini en üst düzeye çıkaran bir nokta penceresi seçerek doğrusal kısmı tanımlayın.
- Yük-yer değiştirme eğrisinden (Şekil 9A,D), sertliği (doğrusal eğim, N/mm) ve nihai yükü hesaplayın. Gerilim gerinim eğrisinden, teğet modülünü (doğrusal eğim, MPa) ve nihai gerilimi hesaplayın. Gerinim eğrisinin doğrusal bölgesi Şekil 9B,E'de belirtilmiştir ve bu bölgeden hesaplanan teğet modülü her iki deney grubu için Şekil 9C,F'de gösterilmiştir.
- Yük yer değiştirme verilerini, kesit alanını ve numunedeki ölçer uzunluğunu kullanarak, daha önce37,38,39,40,41 olarak bildirilen gerilimi (MPa) ve gerinimi (%) hesaplayın. Aşağıda gösterilen Denklem 1 ve Denklem 2'yi kullanın. Test sırasında bandın gerilmesinin de bu hesaplamalarda hesaba katılması gerektiğini unutmayın.
Denklem 1
Denklem 2
Şekil 6: Tek eksenli çekme testi için numune hazırlama. (A) Maruz kalan kontrol USL'leri (B) göbek bandı dokunun arkasına geçirilmeden önce. (C) Dikişlerin tamamen çözülmesinden sonra USL-vajinal tonoz kavşağı, (B) çekme testinin hazırlanmasında dokunun arkasına geçirilmiş göbek bandı. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 7: Mekanik test sistemi. (A) Tutuşu iyileştirmek için dokulu bir şeritle tamamlanan (B) 3D baskılı tutucu ve (C) 3D baskılı numune tutacağı ile birlikte kullanılan çekme testi modundaki test sistemi. Panelde gösterilen parçaların konfigürasyonu (D). Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 8: Çekme testinin kurulumu . (A) Numune, kavrama yerinin ve tutucunun altında ortalanmıştır. (B) Numuneyi çevreleyen hayvan ve doku, çekme testinin başlamasından önce sabit tutulur. İç kısımdaki görüntüde gösterildiği gibi, ilgili dokuyu izole etmek için çevreleyen dokunun sabitlenmesi esastır. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Şekil 9: Çekme testi veri çıktısı ve analizi örneği. (A) Bir kontrol numunesi için yük-yer değiştirme eğrisi ve ardından (B) gerilim gerinim analizi ve (C) MPa'daki teğet modülünü gösteren çizgi eğrisi uyum denkleminin eğimi. (D-F), USLS örneği için aynı işlemi gösterir. Bu şeklin daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayın.
Representative Results
Cerrahi fizibilite ve uterosakral sütür yerleştirilmesi
Hayvanların hiçbirinde histerektomi veya uterosakral ligament süspansiyonuna bağlı intraoperatif komplikasyon görülmedi. Rahim boynuzlarının çıkarılması sırasında, bitişik vaskülatürün çıkarılmadan önce kelepçelenmesi koşuluyla minimal kanama vardı. Sınırlı kanama, sütür yerleştirilmesi için uterosakral ligamentlerin iyi görüntülenmesine izin verdi ve intraoperatif bağırsak, rektum, üreteral veya mesane hasarını önledi. Dikişlerin yerleştirilmesini takiben, yeni oluşan USL-vajinal tonoz bileşkesi, Şekil 5C'de gösterildiği gibi servikal/uterin güdüğün hareketini engelledi. Ameliyat sonrası ilk üç gün boyunca, hayvanlar günlük olarak kontrol edildi ve daha sonra deneyin sonuna kadar iki haftada bir kontrol edildi. Ameliyat sırasında uygulanan uzatılmış salınımlı opioid ve NSAID analjezikleri ile ek analjeziklerin gereksiz olduğu tespit edildi. 16 hayvan ameliyatı ile ilgili deneyimlerimize dayanarak (hem kontrol hem de USLS grupları için n = 8), ameliyattan sonraki ilk haftada, ameliyat günü ağırlığından% 5.7 ± ortalama% 1.4'lük bir kayıpla ağırlıkta bir düşüş beklenmelidir. Beklendiği gibi, sıçanlar sonraki 23 hafta boyunca yavaşça kilo aldılar ve deney boyunca% 15.1 ± 4.5% ortalama kilo alımı oldu.
USLS onarımının mekanik testi
USLS onarımının işlevselliğini göstermek için, tek eksenli çekme testi yapıldı. Hayvanın ameliyat sonrası seçilen zaman noktasında ötenazisinden sonra, bu çalışmada 24 hafta, cerrahi alan, Şekil 6A'da gösterildiği gibi USL-vajinal tonoz bileşkesini görselleştirmek için dikkatlice diseke edilmelidir. Sıçan USL'lerini diğer destekleyici yapılar ve pelvik organlarla birlikte test etmek için diğer metodolojilerle karşılaştırıldığında29,42, burada açıklanan yöntem, sıçan USL'sini izole bir şekilde test eden ilk yöntemdir. Bu çalışmada kullanılan göbek bandı, esnekliği için stratejik olarak seçilmiştir, çünkü bant uyumu, çekme testi hazırlığı sırasında dokunun minimum bozulmasına izin vermiştir. Bu nedenle, yük yer değiştirme verileri, göbek bandının katkıda bulunduğu az miktarda gerilmeyi hesaba katacak şekilde ayarlanmalıdır. Şekil 9, tipik bir gerilme-gerinim grafiğinin bir örneğini sağlayan Şekil 9A ile çekme testi yoluyla elde edilen verilere bir örnek sunmaktadır. Stres-gerinim verilerinin raporlanması tavsiye edilir, çünkü bu bilgiler normalleştirilmiştir ve numunelerin büyüklüğünden bağımsızdır34 ve çalışmalar arasında daha iyi karşılaştırılabilir. Sağlam uterosakral ligament için, nihai yük (2.9 ± 0.5 N) ve sertlik (0.4 ± 0.1 N/mm) gibi yapısal özelliklerin yanı sıra nihai gerilme (2.1 ± 0.4 MPa), nihai gerinim (1.6 ± 0.5) ve teğet modülü (4.0 ± 1.1 MPa) gibi normalleştirilmiş malzeme özelliklerini rapor ediyoruz. Moalli ve ark. tarafından sıçan üreme organları ve tüm destekleyici doku bağlantıları üzerinde yapılan tek eksenli testlerde, izole USL29'dan daha yüksek başarısızlık (13.2 ± 1.1 N) ve sertlikte (2.9 ± 0.9 N / mm) nihai bir yük bildirmişlerdir. Moalli ve ark. ve diğer literatür34,35 tarafından yapılan çalışma, burada sunulan verilerde gösterildiği gibi test edilen örnekler arasındaki yüksek değişkenlikten bahsetmektedir. Uterosakral ligament süspansiyon onarımı için, tüm yapısal malzeme özelliklerinin (sertlik, 0.33 ± 0.13 N / mm; nihai yük, 2.6 ± 1.3 N) ve normalleştirilmiş malzeme özelliklerinin (nihai gerilme, 1.8 ± 0.7 MPa; nihai gerinim 1.3 ± 0.3; teğet modül, 3.0 ± 0.9 MPa) doğal USL'ninkinden daha düşük olduğunu bulduk.
Discussion
Protokol çeşitli avantajlar için dikkate değerdir. Bildiğimiz kadarıyla, sıçan modelinde USLS'nin ilk yayınlanmış açıklamasıdır ve gelecekteki araştırmacılara bu prosedürü araştırma ortamında gerçekleştirmek için tekrarlanabilir adımlar sağlayacaktır. İkincisi, USL'nin doğal ve cerrahi arayüzünün çekme testi için yeni bir protokol ekliyoruz. Çekme testi protokolü, USLS gibi doğal doku onarımlarını arttırmak için yeni doku mühendisliği yaklaşımlarını araştıran benzer çalışmalarda kullanılabilir. Ayrıca, sıçan modelinin kendisi, daha büyük hayvan modellerine kıyasla kullanım / biniş kolaylığı, kısa ömür ve maliyet verimliliği nedeniyle pelvik taban bozukluklarının incelenmesi için yararlıdır. Protokolün sınırlamaları, USLS'nin ana komplikasyonlarından biri olan üreteral bükülmenin değerlendirilememesini içerir. Buna rağmen, bu çalışmada varsayılan üreter yaralanması vakası yoktu. Diğer bir husus, pelvisin yatay oryantasyonunun, küçük fetal baş-doğum kanal oranının ve sıçan modelinde spontan prolapsus eksikliğinin, sonuçların insanlara uygulanabilirliğini sınırlamasıdır. Bununla birlikte, multipar sıçanların kullanımı bu çalışmanın bir gücüdür, çünkü bu, POP3'ün gelişiminde önde gelen risk faktörünü oluşturmaktadır.
Lewis sıçanında histerektomi ve USLS için başarılı bir protokolün oluşturulması, USL'nin mekanik davranışını test etmedeki değişkenliği en aza indirirken, POP'un cerrahi bileşenlerini araştıran gelecekteki araştırmacılar için yararlı bir araç olacaktır. Cerrahi hayvan modelleri, araştırmacıların insanlarda ilk çalışmanın etik riskini azaltırken, parite, vücut kütlesi, hastalık ve beslenme34'ü kontrol eden klinik olarak ilgili deneyler tasarlamalarına izin vermeleri bakımından faydalıdır. Ayrıca, POP için standartlaştırılmış modeller, araştırmacıların insan dokusu toplamanın sınırlamalarını atlamalarına izin verir. Özellikle bu protokolde açıklanan çekme testi yöntemleri, çalışmalar arasında tutarlılık sağlayacaktır. Önceki kemirgen modelleri, serviks, vajina ve çoklu pelvik destek ligamentlerini içeren tüm pelvik bölgenin mekanik özelliklerini test etti29,42. Burada açıklanan yöntemler, USL'nin doğal spinal ve servikal ekleri koruyacak şekilde ölçülmesine izin verir. Çekme testi yöntemlerinin USL'yi tek başına değerlendirmediği, bunun yerine USL'yi sakrum ve servikse yerleştirilmesiyle birlikte değerlendirdiği belirtilmelidir. Bu, ligamentin maruz kaldığı olağan in situ kuvvetleri yansıttığı için çalışmanın bir gücüdür. İzole ligamentin mekanik davranışının, doğal ataşmanları olmadan ex vivo olarak test edilmesi durumunda farklı olacağını kabul ediyoruz. Bu özellikle doğrudur, çünkü sıçan yapıları küçüktür ve ex vivo test için uygun bir numune toplamanın fizibilitesini sınırlar. USL'ler in situ olarak çok yönlü yükleme deneyimi yaşarlar, bu nedenle testin tek eksenli doğası bir sınırlamadır, ancak bu yöntemi kullanmak, sıçan USL mekaniğinin önceki çalışmaları arasında anlamlı karşılaştırmalara izin verir29,42. Şu anda yaygın olarak kabul gören standart bir mekanik test protokolü bulunmamakla birlikte, bu model alandaki gelecekteki doku mühendisliği çalışmaları için yararlı bir araç olacaktır.
Bu protokolde açıklanan birkaç adım, hayvanların sağlığı ve refahının yanı sıra USLS ameliyatının tekrarlanabilirliği ve müteakip gerilme testleri için kritik öneme sahiptir. İlk olarak, hem analjezik hem de tek başına analjezik olarak tanımlanan anti-inflamatuar ilaçların ağrı yönetimi için yetersiz olduğu tespit edilmiştir. Profilaktik antibiyotik, cerrahi alan enfeksiyonu riskini azaltır ve insan cerrahisinde bakım standardıdır. USLS cerrahi prosedürü ile ilgili olarak, yumurtalıklara zarar vermekten kaçınmak ve kan kaybını en aza indirmek başarılı bir ameliyat için esastır. Adım 1.3.3 ve 1.3.4, uterus boynuzunun üst kısmını bitişik yumurtalıktan ayırmayı tanımlar; Yumurtalık çevresindeki hassas damarların bozulmasını önlemek için uterus boynuzunun yan tarafında bu diseksiyonun sürdürülmesine özen gösterilmelidir, bu da aşırı kanamaya neden olabilir. Not olarak, diğer araştırmacılar yumurtalık fonksiyonunun uterus boynuzlarının çıkarılmasından sonra korunduğunu göstermiştir43. Ayrıca, yumurtalıklar bozulur veya çıkarılırsa, genel kollajen fibril mimarisi bozulacak ve dokularının mekanik özelliklerini değiştirecektir44,45. Rahim boynuzu yumurtalıktan güvenli bir şekilde ayrıldıktan sonra, uterus boynuzunun çevredeki yağ yastıklarından ve vaskülatürden izole edilmesine izin veren net bir diseksiyon düzlemi vardır. Açık diseksiyon düzlemine rağmen, uterus boynuzu boyunca pediküller, mikro makasla transeksiyondan önce bir kelepçe ile sabitlenmelidir. İnsanlardaki cerrahi uygulamanın aksine, histerektomi pediküllerinin dikiş ligasyonunun gereksiz olduğunu bulduk, çünkü transeksiyondan önce pedikülün sıkıştırılması yeterli hemostaz sağlar. Protokolün 1.3.6 adımı, kan kaybını en aza indirmek için bu dikkatli süreci açıklar. Histerektomi yapılırken, 1.3.6 ve 1.3.8 adımlarında belirtildiği gibi üreterleri tanımlamak için büyük özen gösterilmelidir. Üreterin anatomik yakınlığını anlamak çok önemlidir, çünkü insanlarda USL'lerle ilişkili en yaygın komplikasyonlardan biri üreter yaralanmasıdır46.
Sonuç olarak, bir sıçan modelinde histerektomi, uterosakral ligament süspansiyonu ve USL'nin çekme testi için yeni bir protokol sunuyoruz. Bulgularımızın, bu prosedürlerin açık, tekrarlanabilir bir tanımını sağlayarak gelecekteki temel bilim araştırmacılarına yardımcı olacağını ve böylece pelvik organ prolapsusu araştırmalarının ilerlemesine izin vereceğini tahmin ediyoruz.
Disclosures
Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.
Acknowledgments
Prof. Silvia Blemker'e Instron'unu kullandığı için ve Prof. George Christ'a cerrahi alanının yanı sıra 3D baskılı tutucu ve tutacağı kullandığı için teşekkür ederiz. Bu çalışma UVA-Coulter Translasyonel Araştırma Ortaklığı ve DoD (W81XWH-19-1-0157) tarafından desteklenmiştir.
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Alcohol prep pad | BD | 326895 | |
| Artificial Tear Ointment | American Health Service Sales Corp | PH-PARALUBE-O | |
| Bluehill software | Instron | Bluehill 3 | |
| Cavicide 1 disinfectant | Fisher Scientific | 22 998 800 | |
| Compression platean | Instron | 2501-163 | |
| Cotton swabs | Puritan Medical | 806-WC | |
| Gauze Sponge, 8-Ply | VWR | 95038-728 | |
| Mosquito Forceps | Medline Industries | MMDS1222115 | |
| Needle Holder | Medline Industries | DYND04045 | |
| Operating Scissors, 5½", Sharp | American Health Service Sales Corp | 4-222 | |
| Opioid Analgesic (Buprenorphine XR) | Fidelis Animal Health | Ethiqa XR | 0.65 mg/kg SC Q72 |
| NSAID Analgesic (Meloxicam SR) | Wildlife Pharmaceuticals, LLC | Meloxicam SR | 1 mg/kg SC q72 |
| PDS II, 3-0 Polydioxanone Suture, SH-1 | Ethicon | Z316H | |
| PDS II, 5-0 P olydioxanone Suture, RB-1 | Ethicon | Z303H | |
| Retractor | Medline Industries | MDS1862107 | |
| Scalpel Blade Stainless Surgical #10 | Miltex | 4-310 | |
| Scalpel Handle | Medline Industries | MDS15210 | |
| Scissor, Micro, Curved, 4.5" | Westcott | MDS0910311 | |
| Single Column Universal Testing System | Instron | 5943 S3873 | 1 kN force capacity, 10 N load cell |
| Sterile Natural Rubber Latex Gloves | Accutech | 91225075 | |
| Suture,Vicryl,6-0,P-3 | Ethicon | J492G | |
| Tape,Umbilical,Cotton,1/8X18" | Ethicon | U10T | |
| Tension and Compression Load Cell | Instron | 2530-10N | 10N load cell (1 kgf, 2 lbf) |
| Veterinary surgical adhesive (skin glue) | Covetrus | 31477 |
References
- Olsen, A. L., et al. Epidemiology of surgically managed pelvic organ prolapse and urinary incontinence. Obstetrics and Gynecology. 89 (4), 501-506 (1997).
- Wu, J. M., et al. Lifetime risk of stress urinary incontinence or pelvic organ prolapse surgery. Obstetrics and Gynecology. 123 (6), 1201-1206 (2014).
- Kenton, K., Mueller, E. R. The global burden of female pelvic floor disorders. BJU International. 98, 1-7 (2006).
- Herschorn, S. Female pelvic floor anatomy The pelvic floor, supporting structures, and pelvic organs. Reviews in Urology. 6, 2-10 (2004).
- Jelovsek, J. E., Maher, C., Barber, M. D.
- Campbell, R. M. The anatomy and histology of the sacrouterine ligaments. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 59 (1), 1-12 (1950).
- Reisenauer, C., et al. The role of smooth muscle in the pathogenesis of pelvic organ prolapse - An immunohistochemical and morphometric analysis of the cervical third of the uterosacral ligament. International Urogynecology Journal and Pelvic Floor Dysfunction. 19 (3), 383-389 (2008).
- Lavelle, R. S., Christie, A. L., Alhalabi, F., Zimmern, P. E. Risk of prolapse recurrence after native tissue anterior vaginal suspension procedure with intermediate to long-term followup. Journal of Urology. 195 (4), 1014-1020 (2016).
- Jelovsek, J. E., et al. Effect of uterosacral ligament suspension vs sacrospinous ligament fixation with or without perioperative behavioral therapy for pelvic organ vaginal prolapse on surgical outcomes and prolapse symptoms at 5 years in the OPTIMAL randomized clinical trial. JAMA - Journal of the American Medical Association. 319 (15), 1554-1565 (2018).
- Bradley, M. S., et al. Vaginal uterosacral ligament suspension: A retrospective cohort of absorbable and permanent suture groups. Female Pelvic Medicine & Reconstructive Surgery. 24 (3), 207-212 (2018).
- Cola, A., et al. Native-tissue prolapse repair: Efficacy and adverse effects of uterosacral ligaments suspension at 10-year follow up. International Journal of Gynecology and Obstetrics. , (2022).
- Sung, V. W., Washington, B., Raker, C. A. Costs of ambulatory care related to female pelvic floor disorders in the United States. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 202 (5), 1-4 (2010).
- Subak, L. L., et al. Cost of pelvic organ prolapse surgery in the United States. Obstetrics and Gynecology. 98 (4), 646-651 (2001).
- Siddiqui, N. Y., et al. Mesh sacrocolpopexy compared with native tissue vaginal repair: A systematic review and meta-analysis. Obstetrics & Gynecology. 125 (1), 44-55 (2015).
- FDA takes action to protect women's health, orders manufacturers of surgical mesh intended for transvaginal repair of pelvic organ prolapse to stop selling all devices. FDA News Release. , Available from: https://www.fda.gov/news-events/press-announcements/fda-takes-action-protect-womens-health-orders-manufacturers-surgical-mesh-intended-transvaginal (2019).
- Brincat, C. A. Pelvic organ prolapse reconsidering treatment, innovation, and failure. JAMA - Journal of the American Medical Association. 322 (11), 1047-1048 (2019).
- Cundiff, G. W. Surgical innovation and the US Food and Drug Administration. Female Pelvic Medicine & Reconstructive Surgery. 25 (4), 263-264 (2019).
- Luchristt, D., Weidner, A. C., Siddiqui, N. Y. Urinary basement membrane graft-augmented sacrospinous ligament suspension: a description of technique and short-term outcomes. International Urogynecology Journal. 33 (5), 1347-1350 (2022).
- Couri, B. M., et al. Animal models of female pelvic organ prolapse: Lessons learned. Expert Review of Obstetrics and Gynecology. 7 (3), 249-260 (2012).
- Mori da Cunha, M. G. M. C., et al. Animal models for pelvic organ prolapse: systematic review. International Urogynecology Journal. 32 (6), 1331-1344 (2021).
- Kasabwala, K., Goueli, R., Culligan, P. J. A live porcine model for robotic sacrocolpopexy training. International Urogynecology Journal. 30 (8), 1371-1375 (2019).
- Mansoor, A., et al. Development of an ovine model for training in vaginal surgery for pelvic organ prolapse. International Urogynecology Journal. 28 (10), 1595-1597 (2017).
- Liang, R., et al. Impact of prolapse meshes on the metabolism of vaginal extracellular matrix in rhesus macaque. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 212 (2), 1-7 (2015).
- Johannesson, L., et al. Preclinical report on allogeneic uterus transplantation in non-human primates. Human Reproduction. 28 (1), 189-198 (2013).
- Iwanaga, R., et al. Comparative histology of mouse, rat, and human pelvic ligaments. International Urogynecology Journal. 27 (11), 1697-1704 (2016).
- National Research Council. Guide for the Care and Use of Laboratory Animals: Eighth Edition. , National Academies Press. (2011).
- Federal Animal Welfare Regulations. National Archives. , Available from: https://www.ecfr.gov/current/title-9/chapter-l/subchapter-A/part-2/subpart-C/section-2.31 (2022).
- Ma, Y., et al. Knockdown of Hoxa11 in vivo in the uterosacral ligament and uterus of mice results in altered collagen and matrix metalloproteinase activity. Biology of Reproduction. 86 (4), 100 (2012).
- Moalli, P. A., et al. A rat model to study the structural properties of the vagina and its supportive tissues. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 192 (1), 80-88 (2005).
- Yoshida, K., et al. Mechanics of cervical remodelling: Insights from rodent models of pregnancy. Interface Focus. 9 (5), 20190026 (2019).
- Christ, G. J., Sharma, P., Hess, W., Bour, R. Modular biofabrication platform for diverse tissue engineering applications and related method thereof. , (2020).
- Smith, K., Christ, G. J. Incorporation of in vitro double seeding for enhanced development of tissue engineered skeletal muscle implants. , University of Virginia. (2019).
- Becker, W. R., De Vita, R. Biaxial mechanical properties of swine uterosacral and cardinal ligaments. Biomechanics and Modeling in Mechanobiology. 14 (3), 549-560 (2015).
- Donaldson, K., Huntington, A., De Vita, R. Mechanics of uterosacral ligaments: Current knowledge, existing gaps, and future directions. Annals of Biomedical Engineering. 49 (8), 1788-1804 (2021).
- Baah-Dwomoh, A., McGuire, J., Tan, T., De Vita, R. Mechanical properties of female reproductive organs and supporting connective tissues: A review of the current state of knowledge. Applied Mechanics Reviews. 68 (6), 1-12 (2016).
- Tan, T., Cholewa, N. M., Case, S. W., De Vita, R. Micro-structural and biaxial creep properties of the swine uterosacral-cardinal ligament complex. Annals of Biomedical Engineering. 44 (11), 3225-3237 (2016).
- Kurtaliaj, I., Golman, M., Abraham, A. C., Thomopoulos, S.
- Griffin, M., et al. Biomechanical characterization of human soft tissues using indentation and tensile testing. Journal of Visualized Experiments. (118), e54872 (2016).
- Feola, A., et al. Parity negatively impacts vaginal mechanical properties and collagen structure in rhesus macaques. American Journal of Obstetrics and Gynecology. 203 (6), 1-8 (2010).
- Tan, T., et al. Histo-mechanical properties of the swine cardinal and uterosacral ligaments. Journal of the Mechanical Behavior of Biomedical Materials. 42, 129-137 (2015).
- Abramowitch, S. D., Feola, A., Jallah, Z., Moalli, P. A. Tissue mechanics, animal models, and pelvic organ prolapse: A review. European Journal of Obstetrics and Gynecology and Reproductive Biology. 144, Suppl 1 146-158 (2009).
- Lowder, J. L., et al. Adaptations of the rat vagina in pregnancy to accommodate delivery. Obstetrics and Gynecology. 109 (1), 128-135 (2007).
- Koebele, S. V., et al. Hysterectomy uniquely impacts spatial memory in a rat model: A role for the nonpregnant uterus in cognitive processes. Endocrinology. 160 (1), 1-19 (2019).
- Kafantari, H., et al. Structural alterations in rat skin and bone collagen fibrils induced by ovariectomy. Bone. 26 (4), 349-353 (2000).
- Daghma, D. E. S., et al. Computational segmentation of collagen fibers in bone matrix indicates bone quality in ovariectomized rat spine. Journal of Bone and Mineral Metabolism. 36 (3), 297-306 (2018).
- Manodoro, S., Frigerio, M., Milani, R., Spelzini, F. Tips and tricks for uterosacral ligament suspension: how to avoid ureteral injury. International Urogynecology Journal. 29 (1), 161-163 (2018).
