Summary
Här presenterar vi framgångsrika underhålls- och giftextraktionsprotokoll för storskalig Tityus serrulatus Lutz och Mello, 1922 (brasiliansk gul skorpion) uppfödning, i syfte att tillhandahålla gift för efterföljande produktion av skorpionmotgift för att möta efterfrågan från det brasilianska hälsosystemet.
Abstract
Skorpionförgiftning är ett folkhälsoproblem i flera tropiska och subtropiska länder. Tityus serrulatus Lutz och Mello, 1922 (brasiliansk gul skorpion) är ansvariga för cirka 150 000 förgiftningsfall per år i Brasilien, varav 10 % kräver motgiftsbehandling för att vända livshotande gifteffekter. Därför hålls tusentals T. serrulatus-individer under kontrollerade fångenskapsförhållanden för giftextraktion, som sedan används i produktionen av det nationella utbudet av skorpionmotgift. Instituto Butantan är det största laboratoriet för tillverkning av motgift i Brasilien och tillhandahåller cirka 70 000 flaskor med skorpionmotgift till det brasilianska sjukvårdssystemet. Således är djurhållningsprotokollen och metoderna för extraktion av gift nyckelpunkter för framgången med storskalig, standardiserad giftproduktion. Syftet med denna artikel är att beskriva fångenskapsprotokollen för T. serrulatus uppfödning, som omfattar uppfödningsrutinen och giftextraktionsprocedurerna, enligt god tillverkningssed och säkerställande av djurens välbefinnande. Dessa metoder gör det möjligt att hålla upp till 20 000 djur i fångenskap, med en rutin på 3 000 till 5 000 skorpioner som mjölkas varje månad i enlighet med efterfrågan på motgiftstillverkning, vilket ger i genomsnitt 90 % positiv extraktion.
Introduction
Skorpioner är leddjur som tillhör klassen Arachnida, ordningen Scorpiones, som omfattar cirka 2 621 arter 1,2. Dessa djur har ett brett geografiskt utbredningsområde och finns på alla kontinenter utom Antarktis1. Förgiftning orsakad av skorpioner leder till att tusentals människor blir sjukliga eller dör varje år världenöver. År 2019 uppskattades det att det inträffade mer än 1,2 miljoner olyckor och 3 500 årliga dödsfall orsakade av dessa djur. I Brasilien har antalet fall ökat exponentiellt och uppgår till mer än 100 000 fall per år sedan 2017 4,5,6. Den okontrollerade urbanisering som observerats i Brasilien under de senaste decennierna, utan adekvat avloppsrening och regelbunden insamling och bortskaffande av sopor, i samband med miljöförstöring och klimatförändringar, har skapat förutsättningar för spridning av invasiva skorpioner, såsom T. serrulatus, vilket ökar kontakten med människor och därmed resulterar i skadliga olyckor 4,7,8. Det finns cirka 178 skorpionarter i Brasilien, men stick av medicinsk betydelse orsakas av släktet Tityus, med fyra arter (T. serrulatus, T. bahiensis, T. stigmurus och T. obscurus) som är av medicinsk betydelse, med Tityus serrulatus som ansvarig för de allvarligaste fallen och dödsfallen 7,9.
Instituto Butantan är det största laboratoriet för tillverkning av motgift i Brasilien och tillhandahåller cirka 70 000 flaskor med skorpionmotgift till det brasilianska sjukvårdssystemet. Kortfattat inkluderar de steg som är involverade i tillverkning av motgift inokulering av gifthärledda antigener i hästar, insamling och rening av plasma med rika antikroppar, vilket resulterar i 5 ml injektionsflaskor med skorpionmotgift. Varje injektionsflaska kan neutralisera minst 1 mg skorpiongift per ml motgift. Arthropods Bioterium är en integrerad del av industricentret, som ansvarar för att leverera källmaterialet för skorpionmotgiftet.
Arthropods Bioterium vid Instituto Butantan hette ursprungligen Laboratory of Arthropods och grundades 1967. Det var dock först 1995 som laboratoriet flyttade till en exklusiv anläggning för giftiga leddjur10,11. På den tiden hölls skorpionerna i ett rum på 12m2 utan kontrollerad temperatur och fördelade på cirka 13 inhägnader, var och en med högst 300 djur10. På grund av den ökande efterfrågan på gift under åren och det därav följande behovet av att öka antalet djur, tillsammans med förbättringar i giftextraktionsprocessen, skedde en stor förändring 2016. Laboratoriet integrerades i det industriella centret Instituto Butantan och döptes om till Arthropods Bioterium. År 2016 flyttade Bioterium dessutom till en ny specialbyggd anläggning. Det nya skorpionrummet täcker en yta på 24m2 och innehåller cirka 48 polypropenhöljen, som var och en rymmer upp till 300 djur, som visas i figur 1. Detta resulterar i att totalt 10 000 till 20 000 individer hålls under kontrollerade förhållanden i fångenskap, med variationer över året. Skorpionerna hanteras noggrant under strikta djurhållningsprotokoll för att säkerställa deras välbefinnande samtidigt som de uppfyller de höga produktionskraven och följer god praxis och etiska standarder för djurvård. För giftextraktion designades och konstruerades ett särskilt rum som innehöll två luftflödesskåp som visas i figur 2A. Dessa skåp fungerar som säkerhetsåtgärder för att förhindra tekniker från att andas in giftpartiklar under extraktionsproceduren. Personlig skyddsutrustning (PPE) är obligatorisk för teknikerna, inklusive syntetiska förkläden och FFP2-masker, för att undvika kontaminering och garantera deras säkerhet.
Figur 1: Översiktsbild av skorpionens rum i Arthropods Bioterium. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 2: Arbetsområde . (A) Översiktsbild av giftextraktionsrummet i Arthropods Bioterium. (B) Arbetsyta för luftflödesskåp. Allt material och all utrustning är förberedd och anordnad ovanpå luftflödesskåpets arbetsyta. Den svarta pilen indikerar elektrostimulatoranordningen och den röda pilen indikerar pincetten. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Cirka 90 % av T. serrulatus-skorpionerna i Arthropods Bioterium härstammar från olika platser och samlas in av kommunala hälsoagenter som en del av ett övervaknings- och kontrollprogram för dessa djur. Skorpionerna fångas i stadsområden och skickas sedan till Instituto Butantan som en del av ett samarbetsprogram. T. serrulatus skorpioner är partenogenetiska, vilket innebär att födseln sker som en följd av utvecklingen av avkomma från obefruktade ägg, utan närvaro av en individ av motsatt kön12. På grund av denna typ av reproduktion föds vissa djur i fångenskap i vår anläggning och hålls tills de når vuxenfasen, enligt ett liknande uppfödningsprotokoll som beskrivs nedan. När de når vuxenstadiet läggs de till i giftextraktionsrutinen. Vid ankomsten genomgår skorpionerna en första screening, och de som är vid god hälsa hålls i kollektiva inhägnader med högst 350 individer, uppdelade efter deras ursprung. För varje djurutrymme fylls ett kontrollformulär i dagligen med uppgifter om datum för utfodring och vilken typ av byte som erbjuds (syrsa eller kackerlacka), vattenförsörjning, rengöringsförfaranden, antalet döda djur och antalet kvarvarande levande djur i djurutrymmet.
I en förutbestämd agenda utsätts djuren för elektrisk stimulering, och det resulterande giftet från hundratals individer frystorkas sedan, vilket resulterar i partier av frystorkat gift. Det standardiserade giftet som erhålls från denna process är avsett för hästimmunisering som en del av tillverkningsprocessen, samt för att tillhandahålla referensmaterial för kvalitetskontroll av den aktiva substansen och slutprodukten.
Det finns mycket få anläggningar i världen som kan hålla ett så stort antal skorpioner och utföra volymen av giftextraktioner i enlighet med god tillverkningssed och etisk användning av djuren, som man gjorde i Arthropods Bioterium i Instituto Butantan. Därför är vårt mål att beskriva de underhållsprotokoll för skorpioner och giftextraktionsprocedurer som används i T. serrulatus uppfödning, som framgångsrikt ger den nödvändiga mängden gift för produktion av skorpionmotgift.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Protocol
Protokoll som omfattar ryggradslösa djur är undantagna från godkännande från Instituto Butantans kommitté för användning och skötsel av djur. Underhållet av skorpioner som beskrivs här följer dock etiska parametrar, och djurens välbefinnande respekteras i enlighet med artens behov.
1. Boende
- Håll skorpionerna i gemensamma behållare av polypropen som inhägnader (höjd 35 cm, bredd 35,5 cm, längd 72 cm) som rymmer högst 350 djur.
- Rummet där djurutrymmena är inhysta ska hållas under en kontrollerad temperatur på 24 °C (±0,5 °C) under en ljuscykel på 10 timmar med tända lampor och 14 timmar med släckta lampor.
- Klä golvet i djurutrymmet (botten) i varje behållare med kraftpapper som är fäst med maskeringstejp i kanterna på alla sidor så att djuren inte kan komma in under pappret (figur 3A).
- Använd fyra kartongbrickor (äggbrickor) som vertikala substrat, staplade på ena sidan av behållaren, med ett styvt kartongark placerat mellan varje bricka (Figur 3B,C).
- Placera en grund bricka av polypropen (vattenbricka) på motsatt sida av höljet, som innehåller blötlagd bomull som vattenkälla för djuren (figur 3B).
- Förvara behållarna utan lock för att öka luftflödet. Placera en remsa på cirka 10 cm självhäftande plasttejp på ovansidan av djurutrymmets inre yta och i de övre hörnen för att göra väggarna tillräckligt släta för att förhindra att djuren rymmer från behållaren (Figur 3A).
Figur 3: Förberedelse av hölje och hölje . (A) Pilar visar kraftpappret på botten, fäst med maskeringstejp på kanterna. Prickade linjer indikerar den självhäftande plasttejpen som placeras på toppen av höljets inre yta. (B) Vertikalt substrat (äggbrickor staplade på ena sidan av behållaren) och ett grunt polypropentråg (vattenbricka) placerat på motsatt sida. (C) Vertikal substratdetalj: äggbrickor med ett styvt pappark mellan två brickor. D) Pappskivor och äggbrickor placerade i lager som simulerar den naturliga, mörka och fuktiga livsmiljön för T. serrulatus . E) Djur som hålls i substratet. Klicka här för att se en större version av denna figur.
2. Hygienrutin
OBS: Hygienrutinen är uppdelad i två underhållsprocedurer: fullständigt och partiellt underhåll. Den första utförs 2 dagar efter utfodring av djuren eller när inhägnaden väljs ut för giftextraktion. Partiellt underhåll utförs när djuren inte utfodras.
- Komplett underhåll
- Förbered ett rent hölje med nytt substrat (äggbrickor, kartong och kraftpapper) och ett rent vattentråg, enligt beskrivningen i avsnitt 1.
- Använd en lång pincett och ta bort vattenbrickan från höljet. Om det finns några skorpioner på vattenbrickan, ta bort dem och placera dem i det rena höljet.
- Upprepa samma procedur som beskrivs i steg 2.1.2 med alla äggbrickor och kartongark, ta bort alla skorpioner och placera dem i det rena höljet.
- Efter att brickorna har tagits bort, ta bort alla skorpioner som finns kvar på golvet i höljet och placera dem i det rena höljet. Var noga med att ta hänsyn till eventuella slaktkroppar och kassera dem på rätt sätt. Samla alla kvarvarande levande byten (insekter) och ta bort dem från inhägnaden.
- Ta bort alla engångssubstrat från höljet (äggbrickor, kartongark och kraftpapper) och kassera dem ordentligt. Skicka de återanvändbara föremålen (vattenbricka och polypropenbehållare) för sanering.
OBS: Saneringen av de återanvändbara föremålen utförs med 0.5 % hypoklorit i kombination med ett neutralt rengöringsmedel. Det är obligatoriskt att materialen sköljs noggrant och rikligt med rinnande vatten efter användning av sanitetsprodukter eller lösningar.
- Partiellt underhåll
OBS: Partiellt underhåll består av att inspektera alla substrat (äggbrickor och kraftpapper) i syfte att ta bort döda skorpionkadaver och annat oönskat skräp, men utan att kassera substraten eller ändra höljet.- Utför inspektionen med en lång pincett för att försiktigt lyfta varje äggbricka och ta bort avfallet.
- Om det behövs, byt ut en eller flera äggbrickor mot en ren.
- Byt ut vattenbrickan helt mot en ren med en lång pincett. Överför eventuella skorpioner på vattenbrickan till äggbrickan i en annan del av höljet.
3. Utfodring
- Mata djuren var 15:e dag enligt giftextraktionsschemat. Mata djur som ska mjölkas 7 dagar före och 7 dagar efter giftextraktionen.
- För utfodring, leverera kackerlackor (Phoetalia pallida) och syrsor (Gryllus sp.) växelvis.
- Beräkna mängden mat enligt djurens energiintag; Erbjud 1 byte för varje 3 eller 5 skorpioner i inhägnaden.
- Räkna det beräknade antalet bytesdjur och placera dem levande i inhägnaden, låt dem stå i 2 dagar före det fullständiga underhållet (avsnitt 2.1).
- När du erbjuder kackerlackor, applicera ett kalciumkarbonat med alkohollösning runt toppen av inhägnaden. Lösningen gör att kackerlackorna glider och inte kan klättra på sidans yta av höljet, vilket hindrar insekterna från att fly.
4. Extraktion av gift
OBS: Djuren som används i giftextraktionsrutinen är vuxna eller förvuxna. På grund av svårigheten att fastställa den fullständiga könsmognaden hos den brasilianska gula skorpionen (vuxenfasen) bestämdes det att djur med en total kroppslängd på 5 till 7 cm är lämpliga för ingreppet.
- Mjölka varje djur var 2-3:e månad.
- På dagen för giftextraktionen räknar du alla levande djur i djurutrymmet och överför dem till en glasbehållare med hjälp av en lång pincett (figur 4).
- Förbered och ordna allt material och utrustning som ska användas ovanpå luftflödesskåpets arbetsyta. Anslut elektrostimulatorns nätsladd till uttaget och slå på elektrostimulatorn och luftflödesskåpet (Figur 2B).
- Använd följande parameterinställningar för elektrostimulatorn: potential (skillnad i potentialen mellan elektroderna): 540 mV, stress (varaktighet för den elektriska pulsen): 2 ms, verkan (intermittens för att dämpa den använda styrkan, vilket skulle minska uppvärmningen av den organiska vävnaden från telson): 70 %, cykel (justera den cykliska upprepningen): 1 s, och intensitet (elektrisk ström som cirkulerar genom djurets muskel): 0,75 mA.
- Håll fast varje djur manuellt på ett sätt så att stjärtfenan står stilla, följ stegen:
- Håll djurets metassoma med en rak pincett (Figur 5A).
- Immobilisera stjärtfenan med en böjd pincett (Figur 5B).
- Håll fast telsonen med handen (Figur 5C,D).
- Efter fasthållning, placera telsonen i direkt kontakt med elektrostimulatorledaren, utan att behöva använda en ledande lösning. Den elektriska stöten orsakar en ofrivillig muskelsammandragning av giftkörteln och därmed utstötning av giftet.
- Samla upp giftdropparna direkt i ett mikrorör av plast som placeras nära elektrostimulatorns ledare (Figur 6).
- Släpp sedan tillbaka djuret i glasbehållaren genom att följa stegen:
- Överför djurets stjärtfena från handen till den böjda pincetten.
- Placera djuret försiktigt på botten av glasbehållaren.
- Utför steg 4.4-4.7 med varje djur i glasbehållaren.
- När alla djur i glasbehållaren har mjölkats sätter du tillbaka dem i djurutrymmet.
- Förvara det uppsamlade giftet vid -20 °C fram till frystorkningsprocessen.
Figur 4: Skorpioner i glasbehållaren. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 5: Fasthållningsprocedur för giftextraktion. (A) Metassoma fasthållen med rak pincett (svart pil). (B) Telson immobiliserad med böjd pincett (svart pil). C) Överföring av den fastspända stjärtfenan från tången till handen. (D) Telson fasthållen med handen. Det rekommenderas att djuren hanteras med bara händer eftersom skorpionerna kan ta tag i materialet med sina klor när de använder handskar, vilket gör det svårt att släppa dem i slutet av ingreppet och avsevärt ökar risken för olyckor. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 6: Extraktion av gift. Ett mikrorör av plast (vit pil) placerad nära elektrostimulatorn (gul pil). Giftdropparna samlas upp direkt i röret som hålls i rumstemperatur under ingreppet. Klicka här för att se en större version av denna figur.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Representative Results
Trettio standardrutiner (SOP) utvecklades för varje procedur, vilket säkerställde repeterbarheten av procedurerna bland tekniker och överensstämmelse med kvalitetsparametrar. Den genomsnittliga dödligheten efter extraktionsproceduren är cirka 12 %, vilket kan anses vara lågt med tanke på elektrostimuleringsrutinen och fångenskapsmiljön, där stressfaktorerna framgångsrikt reduceras genom att tillämpa procedurerna.
För att hålla djuren friska placeras en bricka täckt med bomull och vatten i ena änden av lådan, medan kartongark och äggbrickor placeras i lager på motsatt sida, vilket simulerar den naturliga mörka och fuktiga livsmiljön för T. serrulatus (Figur 3D,E). Det beskrivna substratet har visat sig vara effektivt för att hålla ett stort antal djur i ett trångt utrymme, vilket ger tillräckligt med skydd och utrymme och därmed säkerställer deras välbefinnande.
Årligen överstiger produktionen av T. serrulatus gift mängden 80 gram flytande gift, vilket motsvarar mer än 13 gram frystorkat gift. Vi har samlat in produktionsindikatorer, såsom det genomsnittliga giftet som mjölkas per djur, antalet djur och mängden gift som erhålls per månad, vilket visas jämförelsevis i tabell 1, figur 7, figur 8 och figur 9. De tre diagrammen visar en positiv trendlinje, vilket indikerar en positiv Pearsons korrelationskoefficient (respektive R= 0,68; R= 0,84; och R= 0,74). Cirka 3 000 till 5 000 skorpioner mjölkas varje månad i enlighet med efterfrågan på tillverkning av motgift, med i genomsnitt 90 % positiva extraktioner. De flesta av djuren utsätts för mer än fem giftextraktionsprocedurer under sin produktiva livstid i anläggningen, vilket återspeglar djurens livslängd, den låga sjukligheten eller giftkörtelskadorna och den låga dödligheten. Det är viktigt att konstatera att det finns en minskning av mängden gift som erhålls från skorpioner som har extraherats fler gånger, men de är fortfarande produktiva.
Figur 7: Jämförelse av frystorkat gift som extraherats per djur per månad (2012-2022). Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 8: Jämförelse av frystorkat gift som extraherats per månad (2012-2022) Klicka här för att se en större version av denna figur.
Figur 9: Jämförelse av antalet skorpioner som utvinns per månad (2012-2022). Klicka här för att se en större version av denna figur.
| ÅR | Frystorkat gift Extraheras per djur/månad (mg) | Antal djur som extraherats/månad (x1.000) | Månatlig mängd frystorkat gift (g) |
| 2012 | 0,025 ± 0,04 | 1,0 ± 0,3 | 0,26 ± 0,08 |
| 2013 | 0,026 ± 0,04 | 0,9 ± 0,2 | 0,24 ± 0,08 |
| 2014 | 0,029 ± 0,04 | 1,3 ± 0,2 | 0,39 ± 0,1 |
| 2015 | 0,026 ± 0,1 | 1,1 ± 0,4 | 0,38 ± 0,12 |
| 2016 | 0,027 ± 0,02 | 1,5 ± 0,6 | 0,4 ± 0,14 |
| 2017 | 0,027 ± 0,04 | 2,1 ± 0,4 | 0,6 ± 0,16 |
| 2018 | 0,026 ± 0,04 | 3,3 ± 0,8 | 0,9 ± 0,24 |
| 2019 | 0,026 ± 0,01 | 5,8 ± 1,4 | 1,5 ± 0,4 |
| 2020 | 0,03 ± 0,04 | 2.3 ± 1.5 | 0,76 ± 0,3 |
| 2021 | 0,03 ± 0,04 | 3.3 ± 1.1 | 1,07 ± 0,4 |
| 2022 | 0,03 ± 0,04 | 3.6 ± 1.4 | 1,1 ± 0,5 |
Tabell 1: Jämförelse av produktionsindikatorer (2012–2022).
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Discussion
Tillämpningen av de beskrivna metoderna gör det möjligt för oss att hålla ett stort antal T. serrulatus-individer och ger oss konsekvent förutsägbarhet av antalet skorpioner som behövs för den årliga giftproduktionen. På så sätt kan vi tillhandahålla tillräckligt med partier av gift i förväg för att leverera tillverkningsprocessen mot motgift. Samtidigt är utvecklingen av förutbestämda scheman för underhåll, utfodring och giftextraktion en viktig del av aktiviteterna och hjälper till att följa de beskrivna protokollen. Därför är det obligatoriskt att upprätta en rutin för att upprätthålla kontinuerlig produktion.
Såvitt författarna känner till finns det inga vetenskapligt beskrivna protokoll för uppfödning av skorpioner i fångenskap i syfte att producera gift. Således syftar utvecklingen och tillämpningen av de beskrivna metoderna till att presentera ett effektivt och framgångsrikt protokoll för att uppnå förhöjda produktionssiffror, som presenteras i denna artikel. Protokollet för giftextraktion som presenteras här skiljer sig från andra tidigare beskrivna metoder eftersom det utvecklades med målet att förenkla proceduren i största möjliga utsträckning, på grund av behovet av att få tag på stora volymer gift. Således gör den presenterade metoden det möjligt att extrahera ett stort antal djur under en kort period, vilket resulterar i en betydande volym gift som är nödvändig för produktion av motgift. Det är viktigt att betona att de tekniker som är involverade i hanteringen av djuren under giftextraktionsproceduren är rigoröst utbildade.
Grafiken illustrerar de data som presenteras i tabell 1 och visar att det från 2012 till 2022 skedde en linjär tillväxt i de presenterade markörerna på grund av det starka sambandet mellan året och det frystorkade giftet som extraheras per djur, frystorkat gift som extraheras per månad respektive skorpioner som extraheras per månad. Det frystorkade giftet som extraherades per djur visade en liten ökning under åren, men mängden gift per månad och antalet skorpioner som extraherades ökade markant från 2016 och framåt, vilket återspeglar de fysiska förbättringarna i anläggningen och utvecklingen och tillämpningen av standardrutinerna. Båda produktionsmarkörerna minskade under 2020 på grund av covid-pandemin, men ökade igen året därpå.
Ett annat viktigt mål som uppnåddes med hjälp av den beskrivna metoden var djurens välbefinnande. Protokollen utvecklades med hänsyn till T. serrulatus biologi, artens behov i fångenskap och i en giftproduktionsrutin, som skiljer sig från dess behov när den lever fritt 5,12. De positiva resultaten av metodiken, förutom framgången med att upprätthålla ett standardiserat sätt för ett stort antal djur samtidigt som skorpionernas välfärd respekteras och efterfrågan på giftproduktion tillgodoses, visas i djurens långa livslängd, av vilka många går igenom mer än fem giftextraktionsprocedurer under sitt produktiva liv under de beskrivna fångenskapsförhållandena.
Oavsett vilka protokoll som ska användas är kontinuerlig utbildning av de tekniker som är involverade i skorpionens uppfödning eller giftutvinning extremt viktigt för att minska stressen som djuren utsätts för på grund av fångenskapsrutinen och därmed förbättra produktionsparametrarna. Ständig träning är också viktigt för att minska den potentiella risken för olyckor som involverar personalen under manipulationen av skorpionerna.
De här beskrivna djurhållningsprotokollen utvecklades i enlighet med nödvändigheten av att hålla ett stort antal T. serrulatus-individer på ett begränsat utrymme, och för det var artens biologi och fysiologi av stor betydelse. Förutom särdragen hos den art som hålls, kan samma protokoll replikeras för flera andra skorpionsläkten och arter, med mindre justeringar. De material som används är lättillgängliga och billiga, vilket gör underhållet lönsamt vid storskalig djurhållning som det presenteras. När det gäller protokollen för extraktion av gift var den elektrostimulator som användes speciellt utformad och kan replikeras av andra laboratorier för tillverkning av motgift.
Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.
Disclosures
Författarna har inga intressekonflikter att redovisa.
Acknowledgments
Ingen
Materials
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
| Carboard sheet | NA | NA | |
| Egg tray | NA | NA | cardboard 36 places egg trays |
| Electro stimulator device | Instituto Butantan | ART-FV-01 | Internally designed for the venom extraction |
| Kraft paper | NA | NA | regular kraft paper |
| Making tape | NA | NA | White masking tape (24 mm x 50 m) |
| Polyproplene container | NA | NA | 70 L Polypropylene box (H – 35 cm, W – 35.5 cm, L - 72 cm) |
| Polyproplene tray | NA | NA | Polypropylene tray (H – 3.0 cm, W – 18.5 cm, L - 30 cm) |
| Self-adhesive plastic | NA | NA |
References
- Polis, G. A. The biology of scorpions. , Stanford University Press. (1990).
- Lacerda, A. B., et al. Scorpion envenomation in the state of São Paulo, Brazil: Spatiotemporal analysis of a growing public health concern. PLoS One. 17 (4), 0266138 (2022).
- Reckziegel, G. C., Pinto, V. L. Scorpionism in Brazil in the years 2000 to 2012. Journal of Venomous Animals and Toxins Including Tropical Diseases. 20, 46 (2014).
- Guerra-Duarte, C., et al. Scorpion envenomation in Brazil: Current scenario and perspectives for containing an increasing health problem. PLoS Neglected Tropical Diseases. 17 (2), 0011069 (2023).
- Pimenta, R. J. G., et al. Selected to survive and kill: Tityus serrulatus, the Brazilian yellow scorpion. PLoS One. 14 (4), e0214075 (2019).
- Lacerda, A. B., et al. Detection of areas vulnerable to scorpionism and its association with environmental factors in São Paulo, Brazil. Acta Tropica. 230, 106390 (2022).
- Torrez, P. P. Q., Dourado, F. S., Bertani, R., Cupo, P., França, F. O. deS. Scorpionism in Brazil: exponential growth of accidents and deaths from scorpion stings. Journal of the Brazilian Society of Tropical Medicine. 52, 20180350 (2019).
- Amado, T. F., et al. Vulnerable areas to accidents with scorpions in Brazil. Tropical Medicine & International Health. 26 (5), 13561 (2021).
- Brasil, Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. Manual de diagnóstico e tratamento de acidentes por animais peçonhentos. , Ministérioda da Saúde, Fundação Nacional de Saúde. Brasília. (2001).
- Candido, D. M., Lucas, S. Maintenance of scorpions of the genus Tityus Koch (Scorpiones, Buthidae) for venom obtention at Instituto Butantan, São Paulo, Brazil. Journal of Venomous Animals and Toxins including Tropical Diseases. 10 (1), 000100007 (2004).
- Lucas, S. O. Laboratório de Artrópodes do Instituto Butantan e os aracnídeos peçonhentos. História Ciências Saúde Manguinhos. 10 (3), 000300011 (2003).
- Braga-Pereira, G. F., Santos, A. J. Asexual reproduction in a sexual population of the Brazilian yellow scorpion (Tityus serrulatus, Buthidae) as evidence of facultative parthenogenesis. The Journal of Arachnology. 49 (2), (2021).
