Photomotor Response Assay: En metode til at måle adfærdsmæssige reaktion Larve Zebrafish til en pludselig ændring i belysning tilstand

- Til at begynde med overføre 10 zebrafiskembryoner ved hjælp af en overførselspipette til et bægerglas fyldt med 20 milliliter vand. Nu skal du dyrke embryonerne ved 28 grader Celsius under den passende lyse mørke cyklus, der kræves til et eksperiment.

Fyld nu helt hver brønd med vand. Placer brøndpladen i det adfærdsmæssige optagelseskammer og spor larvebevægelse ved hjælp af videosporingssoftware. Larverne udviser øget bevægelse i mørke og nedsat bevægelse i lyset, når de udsættes for en unormal lys og mørk cyklus på grund af øgede stressniveauer. Beregning af forskellen mellem den gennemsnitlige tilbagelagte afstand i sidste minut af en indledende periode og det første minut af den følgende periode fortæller os fiskens fotomotoriske reaktion.

I denne protokol vil vi undersøge fotomotorisk respons i zebrafisk og fathead minnow larver udsat for koffein. For det første skal du placere brøndpladen, der indeholder den eksperimentelle fisk i det adfærdsmæssige optagelseskammer. Derefter skal du åbne den tidligere udviklede sporingsprotokol. I videosporingsfremviseren skal du sikre dig, at alle larverne er synlige, at kun en larve er til stede i hver brønd, og at brøndene er på linje med de definerede observationsområder.

Klik derefter på Eksperimentér og udfør. Angiv dataenes navn og gemme placering, og klik på ikonet Flere livebilleder for at fremhæve alle de foruddefinerede visningsområder.