Method Article

الأبهر خاتم الفحص

DOI:

10.3791/1564

November 24th, 2009

In This Article

Summary

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الأوعية الدموية ، يرتبط تنتشر الأوعية الدموية من الأوعية الدموية الموجودة من قبل ، مع كل من العمليات الطبيعية والمرضية. نحن هنا تدل على وجود عصابة مقايسة الأبهر الذي يسمح potentiators عائية ومثبطات المضافة مباشرة إلى حلقات الأبهر في الثقافة. تنتشر ويمكن تحديدها عن طريق التفتيش ثمرة neovessel الحلقات الأبهر على مدى فترة من 6-12 أيام.

Abstract

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الأوعية الدموية ، يرتبط تنتشر الأوعية الدموية من الأوعية الدموية الموجودة مسبقا مع كل من العمليات الطبيعية والمرضية. المقايسات الأوعية الدموية المختلفة تنطوي على دراسة الخلايا البطانية في ظروف الثقافة الفردية (1). في مقايسة حلقة الأبهر هو نموذج الأوعية الدموية التي تقوم على الثقافة الجهاز. في هذا الاختبار والأوعية عائية تنمو من شريحة من الشريان الأبهر (معدلة من (2)). باختصار ، هو استئصاله الماوس الأبهر الصدري ، تتم إزالة طبقة الدهون والبرانية ، ونحن على استعداد الحلقات ما يقرب من 1 ملم في الطول. هي جزء لا يتجزأ ثم حلقات الفردية في قبة صغيرة من مادة صلبة استخراج مصفوفة الطابق السفلي (BME) ، ويلقي داخل الآبار الفردية لوحة 48 - جيدا. يمكن أن تكون عوامل وعائية مثبطات تكوين الأوعية الدموية وأضاف مباشرة إلى الحلقات ، ويمكن استخدام مختلط يشارك في حلقات ثقافة الأبهر وأنواع الخلايا الأخرى لدراسة الآثار نظير الصماوي عائية. ومن الملاحظ تنتشر عن طريق التفتيش تحت stereomicroscope على مدى فترة من 6-12 أيام. ينصح بشدة بسبب الاختلاف الكبير الناجم عن مخالفات في قطاعات الأبهري ، والتجريب في plicates - 6. ويتم رصد جميع أنحاء Neovessel ثمرة التجربة وتصويرها باستخدام المجهر المرحلة ، ويتم جمع supernatants لقياس العوامل ذات الصلة وعائية المضادة عائية ، علامات موت الخلايا والنتريت.

Protocol

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

قبل يوم واحد من التجربة :

  1. تسمح BME (خفض عامل النمو ، Cultrex ، Trevigen) لذوبان الجليد على الجليد أو على 4 درجات مئوية ؛ إذابة الجليد مرة واحدة يبقي على منع اعادة ترسيخ.

يوم من التجربة :

  1. الفئران (6-7 أسابيع من العمر) وسيتم تخدير ونزفت بها.
  2. إزالة الأبهر الصدري في طبق بتري معقمة مليئة PBS الباردة.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

الأبهر مقايسة الدائري هو أداة مفيدة على طريقة لتقييم عائية وكذلك العوامل المضادة للعائية. السفن التي تنبثق من حلقات الأبهر تجنيد خلايا العضلات الملساء وpericytes اقترانه الأنبوب الخلية البطانية ، وهذا يعني أنها تشبه تشريحيا إلى neovessels في الجسم الحي. علاوة على ذلك ، الحلبة الأبهر مقايسة الماوس يحمل الاستفادة من مجموعة واسعة من الأدوات المتاحة لهذا المعدلة وراثيا الأنواع. ومع ذلك ، هناك مساوئ عديدة لفحص رنين الأبهر. الأولى ، ثمرة السفن في الجسم الحي من microves.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

References

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Goodwin, A. M. In vitro assays of angiogenesis for assessment of angiogenic and anti-angiogenic agents. Microvascular Research. 74, 172-183 (2007).
  2. Masson, V., Devy, L., Grignet-Debrus, C., Bernt, S., Bajou, K., Blacher, S., Roland, G., Chang, Y., Fong, T., Carmeliet, P., Foidart, J. M., Noel, A.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Aortic Ring AssayAngiogenesis ModelMouse AortaBasement Matrix ExtractVessel SproutingPhase MicroscopySterile Technique48 Well PlateAngiogenic FactorsSupernatant Collection

Related Articles